Похідні 3,4-дигідроізохіноліну або їх фармацевтично прийнятні солі, спосіб їх одержання і фармацевтична композиція з інгібуючою трансмембранний перехід кальцію в клітинах активністю

1 Производные 3,4-дигидроиэохинолина общей формулы (1) сн 3 о (I) сн 3 о о где X - группа формул О Me О ОМе С Н г — СН, (v />—ОМе М МеО ' \ С Н — С Н ( С 66 Н 5 ) 2 со со ОМе СН NH— СН—СН — О < •N—СНт| СН, —NH—-СН—СН 27369 где Me означает метил, •N \ сн 2 х ( где Xi означает моно- или дизамещенный трифторметилом ипи этоксигруппой фенил, замещенный метоксилом и фтором фенил или 2-метоксифенил, который может быть дополнительно замещен фтором, или группа формулы: токсифенил, 2,6-диметоксифенил, 3,6-диметоксифенил, тиенил, моно- или диэамещенный трифторметилом, ипи этоксигруппой фенил, ипи замещенный метоксигруппои и фтором фенил, или их фармацевтически приемлемые сопи. 2 Производные 3,4-дигидроизохинолина общей формулы (I) по п.1, ингибирующие трансмембранный переход кальция в клетках. 3. Способ получения производных 3,4-дигидроизохинолина общей формулы (I) сн 3 о •N. ч .0) О где Х 2 означает группу -СНэСНг- или -СНг-СН(СНз)-, а Хэ - 2.3.4-триметоксифенил, 2,3-диме где X - группа формул: Me О СНг~~СН \ ОМе •CH2 £ /V-OMe / ( MeO \ С Н — С Н ( С 6 6Н 55) 2 Н ) ОМе сн. •NH— C H — C H 2 — О —N—CH—CH —NH—CH~CH CH, где Me означает метил, или • \ сн 2 х, где Xi означает моно- или дизэмещенный трифгорметилом или этоксигруппой фенил, замещенный метоксилом и фтором фенил или 2-метоксифенил, который может быть дополнительно замещен фтором, или группа формулы \ . где Хг означает группу -СНгСН2- или -СНг-СН{СН3)-, а Хэ - 2,3,4-триметоксифенил, 2,3-диметоксифенил, 2,6-диметоксифенил, 3.6-диметоксифенип, тиенил, моно- или дизамещенный трифторметилом, или этоксигруппой фенил, или замещенный метоксигруппой и фтором фенил, или их солей, характеризующийся тем, что соединение общей формулы (11); 27369 CHjO C H 3 — N H — C O — C H ( C 6 H S | — CO—X где X имеет вышеуказанные значения, подвергают циклизации в присутствии агента конденсации с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой соли 4 Фармацевтическая композиция с ингибирующей трансмембранный переход кальция в клетках активностью, содержащая активное начало и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве активного начала она содержит соединение общей формулы (I): С Н 2 ОМе 2 м сн—сн сн 3 о где X - группа формул. ОМе Me С Н сн 3 о v МеО /Ь-ОМе / •N \ СНг-СН(С,Н5 ' 2 Б 1Ж ОМе сн 3 -NH—СН—СН — О NH— СН—СН где Me означает метил, или / / • N \ 2 1 где Хт означает моно- или дизамещенный трифторметилом, или этоксигруппой фенил, замещенный метоксилом и фтором фенил, или 2-метоксифенил, который может быть дополнительно замещен фтором, или группа формулы где Хг означает группу -СН2СН2- или -СН2-СН(СНэ)-, а Хз - 2,3,4-триметоксифенил, 2,3-диметоксифенил, 2,6-диметоксифенил 3,6-диметоксифенил, тиенил, моно- или дизамещенный трифторметилом, или этоксигруплой фенил, или замещенный метоксигруппои и фтором фенил, или его фармацевтически приемлемую соль в эффективном количестве 27369 Изобретение относится к новым пиридинсодержащим производным, обладающим биологической активностью, более конкретно к производным 3,4~дигидро-иэохинолина и их фармацевтически приемлемым солям, способу их получения и фармацевтической активности с ингибирующей трансмембранный переход кальция в клетках активностью Известны производные дигидроизочмнопииа, предназначенные для улучшения кровоснабжения ткани и снабжения ткани кислородом (см заявку ЕР № 37 934 А2, С 07 D 217/18, 1981 г ) Кроме того, известны дигидропиридины. в том числе и дигидроиэохинолины, которые применяют в качестве кардиозащитных средств (см. заявку ЕР №251 194,С07 217/18, 1988 г ) . Задачей изобретения является разработка новых производных дигидроизохинолинов, обладающих МеО. СНу—СН2 ^ биологической активностью, в частности ингибирующих трансмембранный переход калыдия в клетках. Данная задача решается предлагаемыми производными 3,4-дигидроиэохинолина общей формулы (I) СН 3 О СН3О О .(I) где X - группа формулы: ОМе Ъ— ОМе / CHr—CH|C 6 H, МеО ОМе —NH—CHr •NH-—CH —NH—СН—СН где Me означает метил, / / •N \ сы 2 х, где Xi означает моно- или дизамещенный трифторметилом ипи этоксигруппой фенил, замещенный метоксилом и фтором фенип или 2-метоксифенил, который может быть дополнительно замещен фтором, или группа формулы. где Х2 означает группу -СН2СН2- или -СН2-СН(СНз)-, а Х3 - 2,3,4-триметоксифенил, 2,3-диметоксифенил, 2,6-диметоксифенил, 3,6-диметоксифенил, тиенил, моно- или дизамещенный трифторметилом или этоксигруппой фенил или замещенный метокси груп пой и фтором фенил, и их фармацевтически приемлемыми солями Производные 3,4-дигидроизохинолина формупы (I) получают за счет того, что соединение общей формулы (II) сир С Н 2 — С Н — NH—СО—СН(С6Н,)—СО—X 27369 где X - имеет вышеуказанные значения, подвергают циклизации в присутствии агента конденсации с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой соли Данный способ является дополнительным объектом изобретения 8 качестве агента конденсации пригодны многочисленные кислоты Льюиса, такие, как оксихлорид фосфора, трифторид бора, тетрахлорид олова или тетрахлорид титана, сильные минеральные кислоты, такие, как серная кислота, фторсульфокислоты, фторводородная кислота или полифосфорная кислота, а также карбодиимиды, например, циклогексилкарбодиимид, и карбонилдиимидазол. Обычно их добавляют в в избытке Предпочтительно применяют оксихлорид фосфора Реакцию можно проводить как в присутствии, так и в отсутствии растворителей Пригодны все инертные растворители, необходимо только, чтобы они обладали способностью хорошо растворять реагенты и чтобы они имели достаточно высокие точки кипения Примерами являются бензол, алкилбензолы, хлорбензол, декалин, хлороформ, метиленхлорид, ацетонитрил и т п Вариантом является случай, когда агент конденсации сам является растворителем, например, оксихлорид фосфора Температура реакций не является лимитирующим параметром Взаимодействие согласно изобретению можно проводить в очень широкой области температур, предпочтительно при нагревании почти до точки кипения растворителя Предлагаемые соединения формулы (!) являются основаниями и их можно обычным образом с использованием неорганических или органических кислот, а также соле- или комплексообразователей переводить в любые физиологически переносимые аддукты (соли) Пригодными для солеобраэования кислотами являются, например, соляная, бромистоводородная, иодистоводородная, фтористоводородная, серная, фосфорная, азотная, уксусная, пропионовая, масляная, капроновая, валерьяновая, щавелевая, малоновая, янтарная, малеиновая, фумаровая, молочная, винная, лимонная, яблочная, бензойная, пара-гидроксибензойная, фталевая, коричная, салициловая, аскорбиновая кислоты, метансульфокислота и им подобные Производные 3,4-дигидроизохинолина формулы (I) представляют собой активное нача ло фармацевтической композиции с ингибирующей трансмембранный переход кальция в клетках активностью, которая является дальнейшим объектом изобретения Помимо активного начала предлагаемая фармацевтическая композиция содержит еще фармацевтически приемлемый носитель Получение предлагаемых соединений формулы (I) поясняется следующим примером Пример 1 Гидрохлорид 3,4-дигидро-1-бензил-6,7-диметокси-а-[ди-2-(2,3 4 триметоксифенил)этил]аминокарбонил-изохинолина H^cn ОСН, ОСН ОСН ОСН, неї ОСН, а) М,М-ди-[2-(2,3,4-триметоксифенил)-этип]амид 2 (3,4-диметоксифенил)-этиламинокарбонил-фенипуксусной кислоты В раствор 18,0 г (52,4 ммопь) 2-(3.4-диметоксифенил)-этиламида сложного моноэтилового эфира фенилмалоновой кислоты в 150 мп обезвоженного диметилформамида при комнатной температуре и при перемешивании вводят порциями 9,0 г (55,5 ммоль) карбонилдиимидазола Через 30 минут добавляют 18,0 г (44,3 ммоль) ди-[2-(2,3,4триметоксифенил)-этил]-амина и перемешивают в течение 30 минут После этого растворитель отгоняют в вакууме, остаток разводят в 1.5 литрах дихлорметана и после этого дважды встряхивают вместе с 250 мл воды и 200 мл 1 н соляной кислоты После сушки над сульфатом натрия органическую фазу сгущают и остаток очищают на колонке с силикагелем с применением в качестве эпюента смеси дихлорметана и метанола в соотношении 100 2, после чего кристаллизуют из смеси этилацетата и диэтилового эфира Выход 35.5 г б) 35 0 г (47,5 ммоль) амида со стадии а) и 15 мл (164 ммоль) оксихлорида фосфора в 150 мл обезвоженного ацетонитрила в течение 30 минут нагревают до кипения По окончании взаимодействия (контроль по тонкослойной хроматографии) отгоняют в вакууме растворитель и непрореагировавший оксихлорид фосфора Остаток примешивают к ледяной воде, раствором соды устанавливают щелочное значение рН и порционно экстрагируют 1 л дихлорметана Органическую фазу промывают аодой сушат над сульфатом натрия и концентрируют Остаток дважды очищают на колонке с силикагелем с применением в качестве первого элюента смеси дихлорметана и метанола в соотношении 100 2 - 100 4, а в качестве второго элюента смеси дихлорметана и этилацетата в соотношении 1 1 Из очищенного продукта (6,5 г) растворением в 50 мл этанола и добавлением спиртовой соляной кислоты получают гидрохлорид После концентрирований и сушки в высоком вакууме при 50 °С остается 11,5 г аморфного целевого продукта с т пл 56 -64°С Аналогичным образом можно попучать соединения указанные в таблице 1 27369 Таблица 1 II і Тип структуры И Соединение № Тип структуры оси Т. пл. (°С) осн 3 56-64 (HCI) н^со осн осн. Ч СН -СН.-/ V В 176-184 (HCI) 'з 166-168 н 102-104 •сч. д •NH 187 (HCI) 94 96 осн 27369 Продолжение табл. 1 Соединение № Тип структуры NH-CH Т. пл. -сн г 4 \ Ж 139-142 (HCI) н^со осн. сн 7 } I -NH-CH-CH -( 133-135 -NH-CH И 143-145 96-98 ос 2 н 5 л 118-120 н 3 со м 112-114 осн. сн. 95-99 (HCI) -NH-CH 114-116 п сн 66-73 осн 205-209 {HCI) 27369 Приведенные ниже результаты испытаний показывают биологическую активность норых соединений. Ишемическая толерантность Ишемий путем пережатия сонной артерии под эфирным наркозом в течение 10 минут. Соединения примера давали четырежды в течение 24 часов, начиная через 2 часа после освобождения артерии, при дозах 1 и 10 мг/кг. Через 72 часа после пережатая сосуда животных умерщвляли и препарировали их мозг для испытаний. Недостатком ишемического поражения или соответственно его повторения считалось повреждение клеток в области CAi-эоны аммонова рога в определенном вырезе гистологического препарата Испытание проводили на группах, в которых каждый раз было по пять животных. В группе, в которой животным совсем не давали испытуемое соединение, все животные показали четкое повреждение исследуемой САгЗоны. В противоположность этому при даче соединения примера наблюдалась четкая, зависимая от дозы защита от поражения гипоксией. При дозе 1 мг соединения на 1 кг наблюдалось повреждение CAi-зоны только у двух из пяти животных. Доза 10 мг соединения А на 1 кг дает полное отсутствие повреждения у всех пяти животных. Из этих результатов можно заключить, что соединения общей формулы (!) можно применять для лечения нейрологических нарушений, например, вызванных кровоизлиянием в мозг. Результат этого испытания показывает также, что соединения преодолевают гемато-энцефалический барьер, что является существенным признаком изобретения. . Последующие испытания на выделенных клеточных культурах показывают действие испытуемых соединений Далее, из результатов этих испытаний можно сделать вывод (также как и из результатов вышеописанных испытаний на животных), что соединения общей формулы (I) можно применять для указанного в данной заявке лечения. В выделенных клеточных культурах (например, нейтрофильных гранулоцитов, клеток HL-60, тромбоцитов и др) соединение примера могло в зависимости от дозы ингибировать спровоцированную различными агонистами (например, активирующим тромбоциты фактором (далее: "АТФ") лейкотриенами, эндотелином, пептидом, тринуклеотидом формилметионина, фенилаланина и лейцина (далее-, тринуклеотид FMLP), или изопреналином) "перегрузку кальцием" и гибель клетки (значение KTso (= концентрация торможения) находится в области 1 мкмоль). Измеряли полумаксимальную концентрацию торможений соединения примера, которую ингибируют индуцируемый тринуклеотид ом FMLP (1 наномоль) переход кальция на клетках HL-60 (10 6 клеток в суспензии}, содержащих FLUO3. Она составляет 5,4 • 106 моль. На отдельных клетках HL-60 с использованием метода "фиксации пятна" измеряли эпектрофизиологически трансмембранное поступление через "неселективный канал катионов" после стимуляции аденозинтрифосфорной кислотой. Соединение примера ингибирует это поступление (значение KTso1 7 наномоль) Эти результаты обосновыаают непосредственную точку воздействий на выделенных клетках. В живом организме применяемые в дальнейшем в испытаниях гранулоциты или соответствующие лейкоциты после поражения клеток головного мозга (например, в результате кровоизлияния в мозг) специально внедряются в зону повреждения, где они активируются процессом, вызванным кальцием, разрушаются и при этом выделяются медиаторы, поражающие ткани, в том числе также и хемотактические (например, АТФ, лейкотриены, простагландины, тринуклеотид FMLP и др ). Привлеченные хемотаксисом дополнительные лейкоциты увеличивают зону поражения Описанные выше опыты показали, что этот порочный круг можно блокировать дачей описанных выше активных веществ Нейрологическое нарушение остается таким образом ограниченным, Можно было показать, что классические антагонисты кальция (например, верапамил, нифедипин, диптиазем) не ингибируют активирование лейкоцитов. Дальнейшие испытания с соединением примера подтвердили вышеприведенное утверждение: На выделенных нейрональных клетках из коры головного мозга и из аммонова рога головного мозга эмбрионов крыс показана непосредственная нейрональная атака соединения примера. На выделенных содержащих FURA-2 клетках измерены кривые концентрация - время (переход кальция) цитоплазматического Са \ Как механическим повреждением, так и путем дачи возбуждающих аминокислот (незаменимая аминокислота, глутамат, каинат, квисквалат и NMDA) провоцировали сильный подъем цитоплазматической концентрации кальция, который во всех случаях ингибировался в зависимости от дозы (КТ5о при 3 мкмоль) соединением примера Механизм действия этого торможения исследовали как на культурах нейрональных клеток, так и на нейрофильных гранулоцитах и на HL 60клетках человека и тромбоцитах. Можно было показать, что соединение примера тормозит трансмембранный переход кальция в клетках, который стимулируется агонистами рецепторов (например, незаменимая аминокислота, тринуклеотид FMLP, лейкотриены АТФ, эндотелии и др.). Этот так называемый "опосредствованный рецептором вход Са2+" приток не ингибируется классическими антагонистами кальция. Классические антагонисты кальция не могут предотвратить активирование лейкоцитов и тромбоцитов, поскольку эти клетки не имеют зависимых от напряжения каналов для Са2+ ". Блокаду для трансмембранного притока кальция можно подтвердить электрофизиологически (метод фиксации вольтажа) на HL 60-клетках и на нейронэльных клетках. Результаты опытов представлены в табл 2 % Т = % торможения трансмембранного притока Са 2+ (нейрональные клетки). Таблица 2 Соединение № А Б %Т 88,08 64,15 27369 Продолжение табл 2 Соединение № В Г д Е Ж 3 и к л м н О п р 86,93 69,41 93,19 76,64 67,72 79,69 83,81 98,89 99,38 73,21 98,27 90,34 74,58 81,86 Предлагаемые соединения общей формулы (I) также воздействуют на воспалительные или нервные клетки. В основе патофизиологии хронической бронхиальной астмы лежат воспалительные процессы, которые вызваны активированием воспалительных клеток. Регулируемое рецепторами активирование этих клеток (например, нейтрофильные гранулоциты и тучные клетки или их постоянные клеточные линии HL 60-клеток или RBL-клеток, соответственно) ингибируются независимо от вида стимулирующего агониста (например, эндотелии, ФТР, лейкотриены или хемотактичный пептид FMLP) блокатором неселективного канала катионов (НКК). По этому каналу внеклеточный кальций попадает в клетки, что необходимо для постоянства активирования клеток, обусловленного рецептором. Если этот переход Са2* прерывается, происходит блокада активирования воспалительных клеток. Классические антагонисты кальция типа дигидропиридина или фенилалкиламина, соответственно, не тормозят ни неселективные каналы катионов, ни воспалительные процессы. Для оценки активирования клеток или, соответственно, для оценки его торможения блокером несепективных каналов катионов измеряли фторметрически кинетику цитоплазматической концентрации Са 2 + в содержащих FURA 2 клетках по методу, описанному Гринкиевичем и др., 1985. Эти процедуры указываются в рамках данной заявки как надежные методы скрининга для выявления блокаторов неселективных каналов катионов. Применяются или отдельные клетки RBL-2H3, связанные со стекловидными бляшками и стабильно передающиеся М1 -рецепторами человека (т.е. мышечным типом 1-рецептора), или применяются суспензии клеток HL 60. Вследствие переноса клетки можно стимулировать карбахолом. Последовательно открытые неселективные каналы катионов ингибируются блокаторами неселективных каналов катионов Соединения согласно изобретению испытывали в обеих клеточных системах и при этом они показали выдающуюся эффективность блокирования неселективных каналов катионов. Поскольку из-за техники измерения можно применять клеточные суспензии для тестирования соединений без собственной флюоресценции, проводили испыта ния флюоресцирующих тестируемых веществ на клетках RBL. При связанных отдельных клетках собственной флюоресценцией можно пренебречь Культивирование, дифференцирование, снабжение HL 60-клеток веществом FURA 2, а также фторметрическое измерение кальция в этих клетках осуществляют аналогично методу, описанному Питте и др Для измерения применяли спектрофториметр фирмы Перкин Элмер. Культивирование и адгезию RBL - 2НЗ-клеток осуществляли по методу Хайда и Бивена. Фторметрическое измерение кальция в цитоплазме отдельных связанных RBL- 2НЗ-клеток осуществляли по аналогии с описанным Кудо и Огура методом для нервных клеток. Применяли флюоресцентный микроскоп "Аксиоверт 35" фирмы Цейсе в сочетании с имиджинг-системой Хамаматсу. состоящей из системы обработки изображения, остаточной камеры с контролирующим узлом и усилителя изображения DVS 3000. Кинетика цитоплаэматической концентрации 2 Са * выражается в виде кривой "концентрация время" по активированию клеток, вызываемому рецептором. Площадь ниже этой кривой (ПНК) измеряется суммарно и является мерой активирования клеток. Интенсивность ингибирующего действия испытуемых блокеров неселективных каналов катионов определяется по следующему уравнению. УТ-100 0 п н к 'нг*Ю0 пнк где % Т - торможение в процентах прохода кальция через неселективные каналы катионов, что стимулируется 30 мкмоль карбахола или, соответственно, 10 нмоль FMLP на RBL- или, соответственно, HL 60-клетках и ингибируется 10 мкмоль испытуемого вещества. ПНК„нг - площадь под кривой, которая получена в присутствии стимулятора плюс 10 мкмоль ингибирующего тестируемого вещества. ПНК - площадь под кривой, полученной после добавления стимулирующего агониста (30 мкмоль карбахола на RBL-клетках или, соответственно, 10 нмоль FMLP на HL 60-клетках). Соединения, ингибирующие приток Са * при указанных условиях испытаний более, чем на 500, испытывали дальше для определения полумаксимума концентрации активного вещества. Значение соединения примера составляет 61,16%. Предлагаемые соединения можно переводить в стандартные фармацевтические препараты. Такими препаратами являются, например, таблетки, капсулы, свечи, растворы, соки, сиропы, эмульсии, аэрозоли или диспергируемые порошки. Соответствующие таблетки можно получать, например, путем смешения одного или нескольких активно действующих веществ с обычными целевыми добавками, например, с инертными разбавителями, такими, как карбонат кальция, фосфат кальция или молочный сахар, разрыхлителями, такими, как кукурузный крахмал или альгинован кислота, связующими средствами, такими, как крахмал или желатина, смазочными средствами, такими как стеарат магния или тальк, и/или средствами для достижения эффекта накопления, такими, как карбоксипопиметилен, карбоксиметилцелпюлоза, ацетат-фталат целлюлозы или поливинилацетат Таблетки могут содержать несколько слоев. 27369 Соответственно можно получать драже путем нанесения на ядра, полученные аналогично получению таблеток, оболочек, обычных для использования в качестве оболочек драже, например, коллидон или шеллак, гуммиарабик, тальк, двуокись титана или сахар Для достижения эффекта накопления или для предотвращения несовместимости ядро также может состоять из нескольких слоев Равным образом оболочка драже может состоять из нескольких слоев для достижения эффекта накопления, причем можно применять указанные выше для таблеток вспомогательные вещества Сиропы, содержащие соединения согласно данному изобретению или соответствующей комбинации активно действующих веществ, могут дополнительно содержать средства для подслащивания, такие, как сахарин, глицерин или сахар, а также вкусовые добавки, например, ароматизирующие вещества, такие, как ванилин или апельсиновый экстракт Они могут кроме того содержать суспендирующие агенты или загустители, та кие, как натрий-карбокси мети л целлюлоза, смачивающие агенты, такие, как продукты конденсации жирных спиртов с окисью этилена, или защитные вещества, такие, как пара-гидроксибензоат. Растворы для инъекций получают обычным образом, например, с добавлением консервантов, таких, как пара-гидроксибензоат, или стабилизаторов, таких, как соли щелочных металлов этилендиаминтетрауксусной кислоты, и заполняют инъекционные сосуды или ампулы Капсулы, содержащие одно или несколько активно действующих веществ, можно получать тем, что смешивать активно действующие вещества с инертными носителями, такими, как молочный сахар или сорбит, и заполнить этой смесью желатиновые капсулы Пригодные для употребления свечи можно получать, например, путем смешения с предназначенными для этого носителями, такими, как нейтральные жиры или полиэтиленгликоль или, соответственно, их производные Предлагаемые соединения можно применять энтерально, парентерально или локально, предпочтительно в количестве от 0,05 до 500 мг на одну дозу для взрослого человека Преимущественно при орапьном употреблении дают от 0,1 до 500 мг на одну дозу и при интравенозном употреблении дают от 0,05 до 150 мг на одну Дозу Предлагаемая фармацевтическая композиция иллюстрируется следующими примерами Пример 2: Таблетки Соединение No A 40,0 мг молочный сахар 100,0 мг кукурузный крахмал 50,0 мг коллоидный силикагель 2,0 мг стеарат магнип 3,0 мг. всего 200,0 мг Получение Активное вещество смешивают с частью вспомогательных веществ и гранулируют с раствором растворимого крахмала в воде После сушки гранул добавляют остаток вспомогательных веществ и смесь таблетируют Пример 3: Драже Соединение No A 20,0 мг молочный сахар 100,0 мг кукурузный крахмал 65,0 мг коллоидный силикагель 2,0 мг растворимый крахмал 5,0 мг стеарат магния 3.0 мг всего 195,5 мг Получение Активное вещество и вспомогательные вещества таблетируют, как указано в примере 1, до ядра в виде таблетки и затем дражируют обычным образом с сахаром, тальком и гуммиарабиком Пример 4: Свечи Соединение No A 50,0 мг молочный сахар 250,0 мг масса свечи " до 1,7 мг Получение Активное вещество и молочный сахар смешивают друг с другом и смесь гомогенно суспендируют в расплавленной массе суппозитория Суспензии выливают в охлажденные формы для образования свечей весом 1,7 г Пример 5' Ампулы Соединение No A ' 20,0 мг хлорид натрия 5,0 мг бидистиллированная вода до 2,0 мг Получение Активное вещество и хлорид натрия растворяют в бидистиллировэнной воде и раствором стерильно заполняют ампулы Пример 6: Ампулы Соединение No A 10,0 мг хлорид натрия 7,0 мг бидистиллированная вода до 1,0 Пример 7: Капли Соединение No A 0,70 г метиловый сложный эфир пара-гидроксибе нзойно и кислоты 0,07 г пропиловый сложный эфир пара-гидроксибензойной кислоты 0,03 г деминерализованная вода до 100,0 мл Получение Активное вещество и консерванты растворяют в деминерализованной воде, раствор фильтруют и им заполняют бутылочки по 100 мл Тираж 50 екз Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна 88000, м Ужгород, вул Ґагаріна, 101 (03122)3-72-89 (03122)2-57-03