Циклопептиди, спосіб їх одержання, фармацевтична композиція, що їх містить, спосіб її одержання, спосіб боротьби з захворюваннями, спосіб одержання іммобілізованих лігандів

1 Циклопептиды формулы Іцикло-(пАгд-пСІуnAsp-nD-nE) І, где D обозначает D-Phe, Phe, DTrp, Trp, D-Tyr, Tyr, D-roMoPhe, гомоРгіе, D-Nal, Nal, D-Phg или 4-Hal-Phe (D- или L-форма), E обозначает Val, Gly, Ala, Leu, lie или Nle, Hal обозначает F, Cl, Br, I, n - незамещенный или обозначает алкильный радикал с 1 - 18 С-атомами, бензил или аралкильный радикал с 7 - 18 С-атомами в альфа-аминофункции соответствующего аминокислотного остатка, с тем условием, что по меньшей мере один аминокислотный остаток имеет один заместитель п, а также включены оптически активные как D-, так и L-формы, а также их физиологически приемлемые соли, при условии, что циклопептид формулы I не является цикло-(АгдGly-Asp-NMe-Phe-Gly) 2 Энантиомер или диастереомер соединения формулы I согласно п 1 3 Циклопептиды формулы I по п 1 , представляющие собой (a) L4Hmo-(NMeArg-Gly-Asp-D-Phe-Val), (b) MHmo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), (c) MHmo-(Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Val), (d) MHmo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Val), (e) MHmo-(Arg-Gly-Asp-NMeDPhe-Val), (f) MHmo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeGly), а также их физиологически приемлемые соли 4 Циклопептиды формулы І по п 1 или их физиологически приемлемые соли для получения лекарственного средства 5 Циклопептиды формулы І по п 1 или их физиологически приемлемые соли для очистки интегри нов посредством аффинной хроматографии 6 Способ получения соединения формулы I по п 1 или одной из его солей, отличающийся тем, что его выделяют в свободном виде из одного из его функциональных производных обработкой сольвол изирующим или гидрогенолизирующим средством, или что пептид формулы II H-Z-OH II, где Z обозначает -nArg-nGly-nAsp-nD-nE-nGly-nAsp-nD-nE-nArg-nAsp-nD-nE-nArg-nGly-nD-nE-nArg-nGly-nAsp- или -пЕ-nArg-nGly-nAsp-nD-, или реакционноспособное производное такого пептида обрабатывают цикл изирующим средством, или тем, что циклопептид, соответствующий формуле I, но имеющий одну или несколько свободных аминогрупп, кислотных групп и/или активированные а-С-атомы, дериватизируют алкилированием, ацилированием или этерификацией, и/или что основное или кислое соединение формулы обработкой кислотой или основанием переводят в одну из его солей 7 Способ получения фармацевтических композиций, отличающийся тем, что эффективное количество соединения формулы I согласно п 1 и/или одну из его фармацевтически приемлемых солей совместно с по меньшей мере одним твердым, жидким или полужидким носителем или вспомогательным веществом переводят в подходящую дозировочную форму 8 Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении аурзи/или о^Рб-интегринов, отличающаяся тем, что в качестве активного вещества она содержит по меньшей мере одно соединение формулы I по п 1 и/или одну из его физиологически приемлемых солей в эффективном количестве 9 Способ борьбы с заболеваниями, при которых необходимо ингибирование аурз- и/или OvPsинтегринов, отличающийся тем, что используют эффективное количество соединений формулы I по п 1 или их физиологически приемлемых солей 10 Способ получения иммобилизированных лигандов для колоночной аффинной хроматогра о З 49799 фии, отличающийся тем, что на полимерных лы І по п 1 материалах иммобилизируют соединение форму Изобретение касается новых циклопептидов формулы I L(Hmo-(nArg-nGly-nAsp-nD-nE) где D обозначает D-Phe, Phe, D-Trp, Trp, D-Tyr, Туг, D-гомоРпе, roMoPhe, D-Nal, Nal, D-Phg или 4Hal-Phe(D - или L - форма), Е обозначает Val, Gly, Ala, Leu, lie или Nle, Hal обозначает F, Cl, Br, I, n незамещенный или обозначает алкильный радикал с 1 - 18 С-атомами, бензил или аралкильный радикал с 7 - 18 С-атомами в альфааминофункции соответствующего аминокислотного остатка, с тем условием, что по меньшей мере один аминокислотный остаток имеет один заместитель п, а также включены оптически активные как D -, так и L - формы, а также их физиологически приемлемые соли, при условии, что циклопептид формулы I не является L(Hmo-(Arg-Gly-AspNMe-Phe-Gly) Подобные соединения, не имеющие, однако, N-алкильных заместителей, известны, например, из ЕР 0 406 428 и FEBS Lett 291, 50-54(1991) В основе изобретения лежит задача найти новые соединения с ценными свойствами, в частности такие, которые могут быть применены для получения лекарственных средств Неожиданно было найдено, что соединения формулы I и их соли обладают очень ценными свойствами Прежде всего, они действуют как ингибиторы интегрина, причем они, в частности, тормозят взаимодействия рецепторов интегрина рз или р5 с лигандами Особую активность соединения проявляют в случае интегринов ауРз, ciyps или ацрз, но также и по отношению к рецепторам аурі, аурб и avp8 Эти действия могут быть доказаны, например, методом, описанным J W Smith et al in J Biol Chem 265, 12267 - 12271(1990) Дополнительно проявляются противовоспалительные эффекты Зависимость возникновения ангиогенеза от взаимодействия между сосудистыми интегринами и внеклеточными матричными протеинами описана R А Clark und D A Cheresh in Science 264,569 -71(1994) Возможность ингибирования взаимодействия и, тем самым, начала апотозиза(программируемой смерти клетки) ангиогенных сосудистых клеток циклическим пептидом описана Р С Brooks, A M Montgomery, М Rosenfeld, R A Reisfeld, Т- Ни, G Kher und D A Cheresh in Cell, 79,1157 - 64(1994) Соединения формулы I, блокирующие взаимодействие рецепторов интегрина с лигандами, как, например, фибриногеном у рецептора фибриногена(циклопротеин llb/llla), препятствуют в качестве СРПЬ/І Па-антагонистов распространению опухолевых клеток метастазом Это подтверждается следующими наблюдениями Соединения могут тормозить присоединение металлопротеиназ к интегринам и препятствовать настолько, что клетки могут использовать ферментативную активность протеиназы Пример этого можно усмотреть в затрудняемости присоединения ММР-2-(матриксметаллопротеиназа-2) к витронектин-рецептору ауРз ЦИКЛО-RG-Dпептидом, как описано у Р С Brooks et al in Cell 85,683-693(1996) Распространение опухолевых клеток от локальной опухоли в сосудистую систему происходит путем образования микроагрегатов(микротромбов) вследствие взаимодействия опухолевых клеток с кровяными пластинками Опухолевые клетки экранируются защитой в микроагрегате и не распознаются клетками иммунной системы Микроагрегаты могут закрепляться на стенках сосудов, благодаря чему облегчается дальнейшее проникновение опухолевых клеток в ткань Так как образованию микротромбов способствует связывание фибриногена с рецепторами фибриногена на активированных кровяных пластинках, то СGPIIa/lllb-антагонисты могут рассматриваться как действенные ингибиторы метастаза Соединения формулы I могут далее применяться как антимикробные вещества при операциях, при которых применяются биоматериалы, имплантаты, катетеры или сердечные стимуляторы При этом они действуют антисептически Антимикробная эффективность может быть доказана способом, описанным Р Valentin-Weigund et al , in Infection and Immunity, 2851 - 2855(1988) Так как соединения формулы I представляют собой ингибиторы связывания фибриногена и, тем самым, лигандов рецепторов фибриногена на кровяных пластинках, их можно использовать как диагностические средства для обнаружения и локализации тромбов в сосудистой системе in vivo, поскольку они замещаются остатком, меченым изотопом или обнаруживаемым с помощью УФлучей Способ визуализации позволяет обнаруживать и локализовать с их помощью даже опухоли(визуализация опухолей, PET) Соединения формулы I могут применяться в качестве ингибиторов связывания фибриногена также и как эффективные вспомогательные вещества для изучения метаболизма кровяных пластинок в различных стадиях активации или внутриклеточных сигнальных механизмов рецептора фибриногена Обнаруживаемая единица встраиваемой метки("ІаЬеІ"), например биотинил, позволяет после присоединения к рецептору исследовать названные механизмы Соединения имеют также свойство ингибировать связывание природных или искусственных лигандов с интегринами, особенно интегринами avp3, avp5, ацьрз, но также и a v pi, avpe и avps В сравнении с уровнем техники они имеют к тому же то преимущество, что благодаря Nалкилированию одной или нескольких пептидных 49799 связей достигается метаболическая стабилизация и повышенная растворимость в жирах Благодаря уменьшению возможных водородных мостиков, так как N-алкил не может быть Н-донором для С = О, улучшается способность проникания через мембраны, так что может быть получена повышенная оральная всасываемость, к тому же может увеличиться образование протеина плазмы N-Алкилирование пептидной связи поднимает ингибирующую потенцию соединений и повышает селективность ингибирования в отношении определенных интегринов В частности, на селективность можно влиять выбором положения и количества N-алкильных групп Соединения могут применяться в качестве действующего начала лекарственных средств в медицине и ветеринарии, в частности для профилактики и лечения заболеваний кровообращения, тромбоза, инфаркта миокарда, артериосклероза, воспалений, апоплексии, стенокардии, опухолевых заболеваний, остеолитических заболеваний, в частности остеопороза, ангиогенеза и обусловленных ангиогенезом заболеваний, как, например, диабетической ретинопатии глаз, макулярной дегенерации, миопии, окулярного гистоплазмоза, ревматического артрита, остеоартрита, рубеотической глаукомы, но также и колита, болезни КроHa(Morbus Crohn), рассеянного склероза, псориаза, а также рестеноза после ангиопластии Далее, соединения могут применяться для улучшения и поддержки процессов заживления ран при микробных инфекциях и острой почечной недостаточности Эти соединения могут быть обнаружены, например, с помощью известных из литературы методов, описанных, например, Р С Brooks et al in Cell, 79,1157 - 1164(1994) или Science 264, 569 571(1994) Выше и нижеприведенные сокращения аминокислотных остатков обозначают остатки следующих аминокислот Abu - 4-Аминомасляная кислота, Aha - 6Аминогексановая кислота, Ala - Алании, Asn Аспарагин, Asp - Аспарагиновая кислота, Asp(OR) - Аспарагиновая кислота(р-эфир), Arg - Аргинин, Спа - З-Циклогексилаланин, Cit - Цитрулин, Cys Цистеин, Dab - 2,4-Диаминомасляная кислота, Dap - 2,3-Диаминопропионовая кислота, Gin - Глутамин, Glu - Глутаминовая кислота, G l y - Глицин, His - Гистидин, Не - Изолейцин, Leu - Лейцин, Lys Лизин, Lys(Ac) - Ne-Алканоиллизин, LysfAcNbb) Ne-аминоалканоиллизин, Lys(AcSH) №Меркаптоалканоиллизин, Met - Метионин, Nal - 3(2-Нафтил)-аланин, Nle - Норлейцин, Orn - Орнитин, Phe - Фенилаланин, 4-Hal-Phe - 4-Галогенфенилаланин Phg - Фенилглицин, Pro - Пролин, Руа - 3-(2-Пиридил)-аланин, Sar - Саркозин(І\Іметилглицин), Ser - Серии, Тіа - 3-(2-Тиенил)аланин, Tic - Тетрагидроизохинолин-3 -карбоновая кислота, Thr - Треонин, Тгр - Триптофан, Туг Тирозин, Val - Валин Далее обозначают ниже ВОС - трет-Бутоксикарбонил, Bzl - Бензил, DCCI - Дициклогексилкарбодиимид, DMF - Диметилформамид, EDCI г\1-Этил-г\Г-(3 диметиламинопропил)-карбодиимид-гидрохлорид, Et - Этил, Fmoc - 9-Флоренилметоксикарбонил, HOBt - 1-Гидроксибензотриазол, Me - Метил, Mtr 4-Метокси-2,3,6-триметилфенил-сульфонил, Nme - N-метилированная а-аминогруппа, Obut - Сложный трет-бутиловый эфир, Оме - Сложный метиловый эфир, Oet - Сложный этиловый эфир, РОА - Феноксиацетил, i-Pr - изопропил, п-Рг - нПропил, TBTU - 2-( 1 Н-Бензотриазол-1 -ил)-1,1,3,3тетраметилуроний-тетрафторборат, TFA - Трифторуксусная кислота Поскольку вышеназванные аминокислоты встречаются в нескольких энантиомерных формах, то выше и ниже все эти формы и также их смеси(например, DL-формы) включены, например, в качестве составных частей соединений формулы I Далее, аминокислоты, например в качестве составной части соединений формулы I, могут быть снабжены соответствующими известными сами по себе защитными группами Далее, изобретением охватываются также такие пептиды, аминокислотные остатки которых частично или полностью дериватизированы Под "дериватизированы" следует понимать, что включены также и так называемые пролекарства, как, например, N-гуанидино-ацил производные Arg, бета-эфиры, Asp, Ne-алканоил-, аминоалканоил-, меркаптоалканоил- производные лизина(здесь названы лишь некоторые из них) Кроме того, аминокислотные остатки могут быть частично альфа-ал кил и рованы или, например, для диагностических целей, мечены изотопами Далее включены такие соединения формулы I, которые в боковых цепях звеньев D и Е дополнительно дериватизированы амино-, карбокси- или меркаптогруппами, так как такого рода производные являются важными исходными соединениями для получения более высокомолекулярных конъюгатов, например для цели иммунизации и получения антител Далее возможно применять функциональные группы в боковой цепи определенных аминокислотных остатков или дериватизированных аминокислотных остатков для иммобилизации пептидов на полимерных материалах с целью получения аффиннохроматографических колонок или использовать функциональные группы для дериватизации с диагностическими вспомогательными реагентами, как-то флуоресцирующие заместители Предметом изобретения далее является способ получения соединения формулы I по п 1 или одной из его солей, отличающийся тем, что его выделяют в свободном виде из одного из его функциональных производных обработкой сольвол изирующим или гидрогенолизирующим средством или тем, что пептид формулы II H-Z-OH (II) где Z обозначает -nArg-nGly-nAsp-nD-nE-nGly-nAsp-nD-nE-nArg-nAsp-nD-nE-nArg-nGly-nD-nE-nArg-nGly-nAspили -nE-nArg-nGly-nAsp-nDили реакционноспособное производное такого пептида обрабатывают цикл изирующим средством; или что циклопептид, сам по себе соответствующий формуле I, но имеющий одну или не 49799 сколько свободных аминогрупп, кислотных групп и/или активированные а-С-атомы, дери вати зируют алкилированием, ацилированием или этерификацией; и/или что основное или кислое соединение формулы I обработкой кислотой или основанием переводят в одну из его солей Выше и ниже остатки D, Е и п имеют указанные в формулах I и II значения, не указано ничего иного Использованные буквы для соответствующих остатков не находятся ни в какой связи с однобуквенным кодом для аминокислот В вышеприведенных формулах алкил обозначает преимущественно метил, этил, изопропил, нбутил, втор -бутил или трет -бутил Группа D преимущественно является Phe, также предпочтительно D-Phe, но также 4-Hal-Phe, особенно 4-l-Phe, а также Тгр, Туг, гомо-Phe, Nal или Phg, причем равным образом предпочтительны также и D-формы Е является преимущественно гидрофобным аминокислотным остатком, в частности Gly, Ala, Val, Leu, Nle или lie Переменная п обозначает преимущественно N-метил, N-этил, N-пропил-, Nбензил- или N-изопропил- замещенные ааминогруппы в пептиде, причем несколько аминокислотных остатков могут быть N-замещены одинаковыми или различными алкильными остатками В соответствии с этим являются предметом изобретения, в частности, те соединения формулы І, в которых по меньшей мере один из названных остатков имеет одно из вышеуказанных предпочтительных значений Предпочтительная группа соединений может быть выражена частной формулой 1а, соответствующей формуле І, в которой, однако, обозначают D - D-Phe, Phe, D-Trp, Trp, D-Tyr, Туг, DгомоРпе, гомоРпе, D-Nal, Nal, D-Phg, Phg или 4Hal-Phe(D- или L-форма) и E - Val, Gly, Ala, Leu, lie или Nle Еще одна предпочтительная группа соединений может быть выражена частной формулой Ib, соответствующей формуле I, в которой, однако, D обозначает D-Phe и Е обозначает Gly, Ala, Val, Leu, lie или Nle, и один из аминокислотных остатков Arg, Gly или Asp в а-аминогруппе имеет алкильный заместитель Еще одна предпочтительная группа соединений может быть выражена частной формулой 1с, соответствующей частным формулам 1а и Ib, a также формуле І, в которой, однако, один из аминокислотных остатков D или Е алкилирован в ааминогруппе Далее особенно предпочтительны все физиологически переносимые соли соединений, подпадающих под частные формулы la, Ib и 1 с Соединения формулы I и также исходные вещества для их получения получают, впрочем, по известным методам, описанным в литературе[например, в стандартных трудах как-то HoubenWeyl, Methoden der orgamschen Chemie, GeorgThieme-Verlag, Stuttgart], а именно в условиях реакции, которые известны и подходят для названных превращений При этом можно воспользо 8 ваться известными, подробно здесь не оговариваемыми вариантами Исходные вещества могут, при желании, быть образованы in situ, так что их не выделяют из реакционной смеси, а тотчас же подвергают дальнейшему взаимодействию с получением соединений формулы I Соединения формулы I могут быть получены выделением их в свободном виде из их функциональных производных путем сольволиза, в частности гидролиза, или гидрогенолиза Предпочтительными исходными веществами для сольволиза или, соответственно, гидрогенолиза являются такие, которые содержат вместо одной или нескольких свободных амино- и/или гидроксигрупп соответствующие защищенные амино- и/или гидроксигруппы, предпочтительно такие, которые вместо Н-атома, соединенного с Nатомом, несут одну аминозащитную группу, например такие, которые соответствуют формуле I, но вместо NH2-rpynnbi содержат NHR'-rpynny(rfle R' обозначает аминозащитную группу, например ВОС или CBZ) Далее предпочтительны исходные вещества, несущие вместо Н-атома гидроксильной группы гидроксизащитную группу, например такие, которые соответствуют формуле I, но вместо гидроксифенильной группы содержат R''O-фенильную группу(где R" обозначает гидроксизащитную группу) В молекуле исходного вещества может быть также несколько одинаковых или разных - защищенных амино- и/или гидроксигрупп В случае если имеющиеся защитные группы отличаются одна от другой, их можно во многих случаях селективно отщепить Выражение "Аминозащитная группа" в общем известно и относится к группам, пригодным для защиты(блокирования) аминогруппы от химических превращений, но которые легко могут быть удалены, после того как нужная химическая реакция проведена в другом месте молекулы Типичны для таких групп - в частности незамещенные или замещенные ацил-, арил-, аралкоксиметил- или аралкилгруппы Так как аминозащитные группы после прохождения желательной реакции(или серии реакций) удаляются, то их вид и величина в общем не имеют критически важного значения, предпочтительны, однако, группы, содержащие 1 20, в частности 1 - 8 С-атомов Выражение "Ацильная группа" следует понимать в связи с настоящим способом в самом широком смысле Оно охватывает ацильные группы, производные от алифатических, аралифатических, ароматических или гетероциклических карбоновых кислот или сульфоновых кислот, а также, в частности, алкоксикарбонильные, арилоксикарбонильные и, прежде всего, аралкоксикарбонильные группы Примерами такого рода ацильных групп являются алканоил, как-то ацетил, пропионил, бутирил, аралканоил как-то фенилацетил, ароил как-то бензоил или толуоил, арилоксиалканоил как-то РОА, алкоксикарбонил как-то метоксикарбонил, этоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, ВОС, 2-йодэтоксикарбонил, аралкоксикарбонил, как-то СВ2("карбобензокси"), 4 49799 10 метоксибензилоксикарбонил, Fmoc, арилтвора диметиламина, диэтиламина или пиперидисульфонил, как-то Mtr Предпочтительные аминона в диметилформамиде при 15 - 30°С защитные группы - это ВОС и Mtr, далее CBZ, Гидрогенолитически удаляемые защитные Fmoc, бензил и ацетил группы(например, CBZ или бензил) могут быть Выражение "Гидроксизащитная группа" также отщеплены, например, обработкой водородом в общеизвестно и относится к группам, пригодным присутствии катализатора(например, благородно, для защиты гидроксигруппы от химических преметаллического катализатора, как-то палладий, вращений, но которые легко могут быть удалены, предпочтительно на носителе, например на угле) после того как нужная химическая реакция провеВ качестве растворителя при этом годятся вышедена в другом месте молекулы Типичны для таких указанные, в частности, например спирты, как-то групп - вышеназванные незамещенные или замеметанол или этанол или амиды, как-то диметилщенные арил-, аралкил- или ацилгруппы, затем формамид Гидрогеннолиз проводят, как правило, также алкильные группы Природа и величина при температурах от 0 до 100°С и давлениях от 1 гидроксизащитных групп не являются критическидо 200бар, предпочтительно при 20 - 30° и 1 ми, так как после прохождения нужной химической Юбар Гидрогеннолиз CBZ-группы удается, нареакции или серии реакций они снова удаляются, пример, хорошо на 5 - 10%-ном Pd-C в метаноле предпочтительны группы с 1 - 20, особенно с 1 или с формиатом аммония(вместо ЬЬ) на Pd-C в 10 С-атомами Примерами гидроксизащитных метанол/диметилформамиде при 20 - 30°С групп являются, между прочим, бензил, пСоединения формулы I могут быть получены нитробензоил, п-толуолсульфонил, трет-бутил и путем циклизации соединений формулы II в услоацетил, причем бензил и трет -бутил особенно виях пептидного синтеза При этом работают цепредпочтительны СООН-группы в аспарагиновой лесообразно по обычным методам пептидного и глутаминовой кислотах предпочтительно защисинтеза, описанным, например, в Houben-Weyl, 1 щаются в форме их трет -бутилэфиров(например, с Band 15/11, Seiten 1 bis 806(1974) Asp(OBut)) Проведение реакции, как правило, удается в присутствии дегидратизирующего средства, наФункциональные производные соединений пример карбодиимида, как-то DCCI или EDCI, заформулы I, применяемые в качестве исходных тем ангидрида пропанфосфоновой кислоты[ср веществ, могут быть получены обычными метоAngew Chem 92, 129(1980)], дифенилфосфоридами аминокислотного и пептидного синтеза, опилазида или 2-этокси-1\1-этоксикарбонил-1,2санными, например, в названных стандартных дигидрохинолина, в инертном растворителе, натрудах и патентных заявках, а также, например, пример галогенированном углеводороде, как-то твердофазным методом по Меррифилду[В F дихлорметан, эфире, как-то тетрагидрофуран или Gysm и R В Mernfield, J Am Chem Soc 94, 3102 диоксан, амиде как-то диметилформамид или диff (1972)] метилацетамид, нитриле как-то ацетонитрил, или Выделение в свободном виде соединений в смесях этих растворителей, при температурах формулы I из их функциональных производных между прибл -10 и 40, преимущественно между 0 удается - в зависимости от примененной защитной и 30°С Чтобы внутримолекулярная циклизация группы - например, с сильными кислотами, предпроходила раньше межмолекулярного образовапочтительно с TFA или хлорной кислотой, но такния пептида, целесообразно работать в разбавже и с другими сильными неорганическими кислоленных растворах(принцип разбавления) тами, как-то соляной или серной кислотами, сильными органическими карбоновыми кислотаВместо соединения формулы II могут быть исми, как-то трихлоруксусная кислота, или сульфопользованы в реакции также подходящие реакциновыми кислотами, как-то бензол- или понноспособные производные этих веществ, натолуолсульфокислоты Присутствие дополнительпример такие, в которых реактивные группы ного инертного растворителя возможно, но не всепромежуточно блокированы защитными группами гда требуется В качестве инертных растворитеАминокислотные производные соединений форлей годятся, как правило, органические, например, мулы II могут быть, например, применены в виде карбоновые кислоты, как-то уксусная кислота, их активированных сложных эфиров, целесообэфиры, как-то тетрагидрофуран или диоксан, амиразно получаемых in situ, например добавкой ды, как-то диметилформамид, галогенированные HOBt или N-гидроксисукцинимида углеводороды, как-то дихлорметан, затем также Исходные вещества формулы II, как правило, спирты, как-то метанол, этанол или изопропанол, новые Они могут быть получены известными меа также вода Далее могут применяться смеси тодами, например вышеуказанными методами вышеназванных растворителей TFA применяется, пептидного синтеза и отщепления защитных как правило, в избытке без добавки другого расгрупп творителя, хлорная кислота в виде смеси из укКак правило, сначала синтезируют защищенсусной кислоты и 70%-ной хлорной кислоты в соные пентапептидные сложные эфиры формулы R'отношении 9 1 Температуры реакции для Z-OR", например, BOC-Z-OMe или BOC-Z-OEt, отщепления целесообразно выбираются между 0 которые затем омыляют в кислоты формулы R'-Zи прибл 50°С, как правило работают при темпераОН, например BOC-Z-OH, из последних отщеплятуре от 15 до 30°С(комнатная температура) ют защитную группу R', получая в результате свободные пептиды формулы H-Z-OH(II) Группы ВОС, OBut и Mtr могут предпочтительно отщепляться с помощью TFA в дихлорметане Дериватизация циклопептида, который соотили прибл 3 - 5 н HCI в диоксане при 15 - 30°С, ветствует соединению формулы I, происходит группа Fmoc - с помощью прибл 5 - 50%-ного растакже известными методами, например, методом 12 11 49799 алкилирования аминов, этерификации карбоновых ного(например, локального, дермального, офкислот или нуклеофильного замещения алифатитальмического или назального) применения или ческих С-атомов и описанных в любом учебнике для применения в форме ингаляционных аэрозоорганической химии, например J March, Adv Org лей и не реагирующие с новыми соединениями, Chem , John Wiley & Sons, N Y (1985) например вода или водный изотонический раствор поваренной соли, низшие спирты, растительные Основание формулы I может быть переведено масла, бензиловые спирты, полиэтиленгликоли, кислотой в соответствующую соль присоединения глицеринтриацетат и другие жирнокислотные гликислоты Для этой реакции обменного разложения цериды, желатин, соевый лецитин, углеводы, какособенно подходят кислоты, которые дают физиото лактоза или крахмал, стеарат магния, тальк, логически не вызывающие сомнения соли Так, целлюлоза, вазелин Для орального применения могут применяться неорганические кислоты, наслужат, в частности, таблетки, драже, капсулы, пример серная кислота, азотная кислота, галогенсиропы, соки или капли, интерес представляют водородные кислоты, как-то хлорводородная киспециальные лаковые таблетки и капсулы с послота или бромводородная кислота, фосфорные крытиями или, соответственно, с оболочками, кислоты, как-то ортофосфорная кислота, сульфастойкими к желудочному соку Для ректального миновая кислота, далее органические кислоты, в применения служат суппозитории, для парентечастности алифатические, эпициклические, арарального применения - растворы, главным обралифатические, ароматические или гетероцикличезом масляные или водные растворы, затем сусские одно- или многоосновные карбоновые, сульпензии, эмульсии или имплантаты Для местного фоновые или серные кислоты, например применения годятся, например, растворы, котомуравьиная кислота, уксусная кислота, пропионорые могут применяться в форме глазных капель, вая кислота, пивалиновая кислота, диэтилуксусдалее, например, суспензии, эмульсии, кремы, ная кислота, малоновая кислота, янтарная кисломази или комприматы Для применения в качестве та, пимелиновая кислота, фумаровая кислота, ингаляционных аэрозолей могут применяться расмалеиновая кислота, молочная кислота, винная пыляемые растворы, содержащие действующее кислота, яблочная кислота, бензойная кислота, начало либо в растворенном состоянии, либо во салициловая кислота, 2- или 3-фенилпропионовая взвешенном в рабочем газе или смеси гакислота, лимонная кислота, глюконовая кислота, зов(например, СОг или вещества - заменители аскорбиновая кислота, никотиновая кислота, изофторхлоруглеводородов) состоянии Целесообникотиновая кислота, метан- или этансульфоноразно применять при этом действующее начало в вая кислота, этандисульфоновая кислота, 2микронизированной форме, причем могут присутгидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульствовать один или несколько физиологически пефоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, реносимых растворителей, например этанол Иннафталин-моно- и дисульфоновые кислоты, лаугаляционные растворы могут вводиться пациенту риловая кислота Соли с физиологически небезус помощью обычных ингаляторов Новые соедипречными кислотами, например пикраты, могут нения могут также быть лиофилизированы и полуприменяться для выделения и/или очистки соедиченные лиофилизаты, например, применяться для нений формулы I получения инъекционных растворов Инъекции могут при этом делаться в виде уколов или в виде С другой стороны, кислота формулы I взаимонепрерывного вливания(например, внутривенно, действием с основанием может быть переведена внутримышечно, подкожно или подоболочечно) в одну из ее физиологически переносимых металУказанные композиции могут быть стерилизованы лических или аммонийных солей В качестве сои/или содержать вспомогательные вещества, каклей при этом, в частности, рассматриваются соли то консерванты, стабилизаторы и/или смачиваюнатрия, калия, магния, кальция и аммония, далее, щие агенты, эмульгаторы, соли для регулировазамещенные соли аммония, например, соли димения осмотического давления, буферные вещесттил-, диэтил-, или диизопропиламмония, соли мова, красящие и/или ароматизирующие вещества ноэтанол-, диэтанол- или триэтаноламмония, соли Они могут, при желании, содержать также одно циклогексил-, дициклогексиламмония, соли дибенили несколько других активных веществ, напризилэтилендиаммония, далее, например, соли с Nмер один или несколько витаминов метил-О-глюкамином или с аргинином или лизином Новые соединения формулы I и их физиолоВещества согласно изобретению могут ввогически не вызывающие сомнений соли могут диться пациенту, как правило, аналогично другим применяться для получения фармацевтических известным, имеющимся на рынке пептидам, в препаратов путем перевода их вместе с по меньособенности же аналогично описанным в US-A 4 шей мере, одним носителем или вспомогатель472 305 соединениям, предпочтительно в дозиным веществом и, если необходимо, вместе с одровках от прибл 0,05 до 500, в частности от 0,5 до ним или несколькими другими активными 100мг на дозиметрическую единицу Ежедневная веществами в подходящую дозировочную форму дозировка предпочтительно находится между Полученные таким образом комбинации могут прибл 0,01 и 2мг на кг веса тела Специальная применяться как лекарственные средства в медидоза для каждого определенного пациента завицине или ветеринарии Веществами-носителями сит, однако, от различных факторов, например от служат органические или неорганические вещестдейственности применяемого специального сова, пригодные для энтерального(например, единения, возраста, веса тела, общего состояния орального или ректального), парентеральноздоровья, пола, питания, момента и пути приема го(например, внутривенные инъекции) или местлекарственного средства, от скорости выведения, 14 13 49799 комбинации лекарственных веществ и тяжести С-терминальные анкеры могут быть, наприсоответствующего заболевания Предпочтительна мер, -O-CnH2n-SH-, -O-CnH2n-OH, -O-CnH2n-NH2, -Опарентеральная форма введения лекарства CnH2n-COOH, -NH-CnH2n-SH, -NH-CnH2n-OH, -NHCnH2n-NH2 или -NH-CnH2n-COO, причем для n, a Одно соединение из настоящего изобретения, также для алкиленовой цепи справедливо уже в котором Arg или DArg заменен на Огп или DOrn, сказанное в предыдущем абзаце может использоваться как предшественник для синтеза пептидов, составляющий предмет наN- и С-терминальные анкеры могут также стоящего изобретения, так как Огп может быть служить в качестве якорного звена для уже функпревращен в Arg посредством гуанидирования ционализированной боковой цепи аминокислотноЭтот метод особенно пригоден для получения Argго остатка Особенно годятся, например, амино11 содержащих пептидов, меченых изотопами С кислотные остатки, как-то Lys(CO-CsHio-NH2), 14 или С Asp(NH-C3H6-COOH) или Cys(C3H6-NH2), причем анкер всегда соединен с функциональной группой Далее, новые соединения формулы I могут боковой цепи применяться в качестве интегринлигандов для получения колонок для аффинной хроматографии Получение материалов для аффинной хромас целью получения интегринов в чистом виде тографии для очистки интегринов осуществляется в условиях, обычных для конденсации аминокисЛиганд, т е производное пептида формулы I, лот и известных сами по себе и уже обсужденных при этом ковалентне присоединяется к полимерв разделе о получении соединений формулы I ному носителю через якорные функции В качестве носителей пригодны известные в Наряду с применением циклопептидов для химии пептидов полимерные твердые фазы с иммобилизации на полимерных материалах для преимущественно гидрофильными свойствами, получения колонок аффинной хроматографии например поперечно - сшитые полисахара, как-то возможно использовать соединения с их функциоцеллюлоза, сефароза или Sephadex®, акриламинализированными боковыми цепями для дальды, полимеры на полиэтиленгликолевойоснове нейшей дериватизации диагностическими вспомоили Tentakelpolymere® гательными реагентами, например флуоресцирующими заместителями В качестве якорных функций, связанных с полимерными носителями, преимущественно годятДалее возможно дополнительное введение в ся линейные алкиленовые цепи с 2 - 12 Сбоковые цепи остатков D и Е функциональных атомами, присоединенные одним концом непогрупп, таких как амино-, меркапто- или карбоксисредственно к полимеру, а на другом конце группы, через которые затем могут быть получены имеющие функциональную группу, как, например, конъюгаты с протеинами или другими высокомогидрокси, амино, меркапто, малеинимидо или лекулярными веществами, как, например, для СООН-группу и к тому же способные соединяться целей иммунизации и/или производства антител с С- или N-концевым участком соответствующего Все температуры указаны в °С В нижеслепептида дующих примерах "Обычная обработка" обозначает Добавляют, при необходимости, воду, нейПри этом возможно, чтобы пептид был непотрализуют, экстрагируют эфиром или средственно или также через вторую анкерную дихлорэтаном, отделяют, сушат органическую функцию соединен с анкером полимера Далее фазу над сульфатом натрия, фильтруют, упаривозможно, чтобы пептиды, содержащие аминокисвают и очищают с помощью хроматографии на лотные остатки с функционализированными бококизельгеле и/или кристаллизации RZ = время выми цепями, были соединены через них с анкерудерживания(минуты) Аналитическое исследованой функцией полимера ние проводилось посредством жидкостной хромаКроме того, определенные аминокислотые остографии высокого давления на Lichrosorb® select татки, входящие в состав пептидов формулы I, В(7мкм) - 250 х 4мм - колонке, элюент А 0,3% TFA могут быть так модифицированы в их боковых в воде, элюент В 0,3% TFA в 2-пропанол/воде(8 цепях, что они могут соединяться через группы 2) градиент 1 - 99% В за 50мин при потоке SH-, ОН-, NH2- или СООН с якорем полимера 1 мл/мин и определении при 215нм М + = молекуВозможны при этом необычные аминокислолярный пик в массовом спектре, полученном по ты, как, например, производные фенилаланина, методу бомбардировки быстрыми атомами(РАВ) несущие в 4-й позиции фенильного кольца меркапто-, гидрокси-, амино- или карбоксицепь, приПример 1 чем функциональная группа находится в конце Раствор 0,6г H-NMe-Arg(Mtr)-Gly-Asp (OBut)-Dцепи Рпе-\/аІ-ОІ\Іа[например, полученного из FmocNMe-Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Val-O-Wang, Примеры аминокислотных остатков, боковые причем O-Wang обозначает применяемый в моцепи которых могут непосредственно служить в дифицированных методах Меррифилда остаток 4качестве анкерной функции, - это, например, Lys, оксиметил-феноксиметилполистирольной смолы, Orn, Arg, Dab, Dap, Asp, Asn, Glu, Gin, Ser, Thr, отщеплением Fmoc-группы с помощью пипериCys, Cit или Туг дин/диметилформамида и отщеплением смолы с Примерами N-концевых анкеров являются оспомощью TFA/CH2CI2(1 1)] в 15мл диметилфортатки, как-то -CO-CnH2n-NH2, -СО-СпН2п-ОН, -СОмамида разбавляют 85мл дихлорметана и смешиCnH2nSH или -СО-СпНгп-СООН с п = 2 - 12, причем вают с 50мг NaHCO2 После охлаждения в смеси длина алкиленовой цепи не имеет критически сухого льда с ацетоном добавляют 40мкл дифеважного значения и она может при необходимости нилфосфорилазида Через 16часов стояния при быть заменена также, например, соответствуюкомнатной температуре раствор концентрируют щими арильными или алкиларильными остатками 15 49799 Концентрат фильтруют(колонка SephadexGIO в изопропанол/воде 8 2) и затем, как обычно, очищают посредством жидкостной хроматографии высокого давления Получают после обработки посредством TFA/H2O(98 2) qHmo-(NMe-Arg-GlyAsp-D-Phe-Val), RZ = 18,1, FAB-MS(M + H) 589 Аналогично получают циклизацией соответствующих линейных пептидов и отщеплением защитных групп Cyclo-(Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Val), RZ = 17,9, FAB-MS(M + Н) 589, Cyclo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Val), RZ = 18,3, FAB-MS(M + H) 589, Cyclo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Val) x TFA, RZ = 15.4, FAB-MS(M + H) 589, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NMeDPhe-Val), RZ = 18,9, FAB-MS(M + H) 589, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), RZ = 19,5, FAB-MS(M + H) 589, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeLys), RZ = 11,1, FAB-MS(M + H) 618, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPheММеІ_у5(бензилоксикарбонил) x TFA, RZ = 23,4, FAB-MS(M + H) 752, Cyclo-(NEtArg-Gly-Asp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-NEtGly-Asp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-Gly-NEtAsp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NEtDPhe-Val), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NEtVal), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe(4 - l)-NMeVal), RZ = 23.5, FAB-MS(M + H) 715, Cyclo-(NPrArg-Gly-Asp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-NPrGly-Asp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-Gly-NPrAsp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NPrDPhe-Val), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NPrVal), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(NBzlArg-Gly-Asp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 665, Cyclo-(Arg-NBzlGly-Asp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 665, Cyclo-(Arg-Gly-NBzlAsp-DPhe-Val), FAB-MS(M + H) 665, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NBzlDPhe-Val), FAB-MS(M + H) 665, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NBzlVal), FAB-MS(M + H) 665, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DNMeVal) x TFA, RZ = 18,2, FAB-MS(M + H) 589, Cyclo-(NMeArg-Gly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NMeDPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 603, 16 Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeLeu), FAB-MS(M + H) 603, Cyclo-(NEtArg-Gly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-NEtGly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-Gly-NEtAsp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NEtDPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NEtLeu), FAB-MS(M + H) 617, Cyclo-(NPrArg-Gly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 631, Cyclo-(Arg-NPrGly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 631, Cyclo-(Arg-Gly-NPrAsp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 631, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NPrDPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 631, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NPrLeu), FAB-MS(M + H) 631, Cyclo-(NBzlArg-Gly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 679, Cyclo-(Arg-NBzlGly-Asp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 679, Cyclo-(Arg-Gly-NBzlAsp-DPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 679, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NBzlDPhe-Leu), FAB-MS(M + H) 679, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NBzlLeu), FAB-MS(M + H) 679, Cyclo-(NMeArg-Gly-Asp-DPhe-Ala), Cydo-(Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NMeDPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeAla), RZ = 16,2, FAB-MS(M + H) 561, Cyclo-(NEtArg-Gly-Asp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-NEtGfy-Asp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-NEtAsp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NEtDPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NEtAla), Cyclo-(NPrArg-Gly-Asp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-NPrGly-Asp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-NPrAsp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NPrDPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NPrAla), Cyclo-(NBzlArg-Gly-Asp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-NBzlGly-Asp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-NBzlAsp-DPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NBzlDPhe-Ala), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NBzlAla), Cyclo-(NMeArg-Gly-Asp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NMeDPhe-Gly), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeGly), RZ = 14,3, FAB-MS(M + H) 547, Cyclo-(DArg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) x TFA, RZ = 18,7, FAB-MS(M + H) 589, Cyclo-(NEtArg-Gly-Asp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-NEtGly-Asp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-Gly-NEtAsp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NEtDPhe-Gly), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NEtGly), 18 17 49799 Cyclo-(NPrArg-Gly-Asp-DPhe-Gly), из 4Hmo-(D-Arg(Mtr)-NMeGly-Asp(OBut)-DPheNle) 4Hmo-(D-Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Nle), Cyclo-(Arg-NPrGly-Asp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-Gly-NPrAsp-DPhe-Gly), из MHmo-(NMeArg(Mtr)-Gly-D-Asp(OEt)-DPheCyclo-(Arg-Gly-Asp-NPrDPhe-Gly), lle) MHmo-(NMeArg-Gly-D-Asp-DPhe-lle), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NPrGly), из qHmo-(NMeArg(Mtr)-Gly-Asp-Phe-Dlle) цикno-(NMeArg-Gly-Asp-Phe-Dlle), Cyclo-(NBzlArg-Gly-Asp-DPhe-Gly), Cyclo-(Arg-NBzlGly-Asp-DPhe-Gly), из qHmo-(Arg(Mtr)-Gly-NMeAsp-Phe-DLeu) Cyclo-(Arg-Gly-NBzlAsp-DPhe-Gly), qHmo-(Arg-Gly-NMeAsp-Phe-DLeu), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NBzlDPhe-Gly), из MHmo-(Arg(Mtr)-NMeGly-Asp-Phe-DSer) MHmo-(Arg-NMeGly-Asp-Phe-DSer), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NBzlGly), Cyclo-(NMeArg-Gly-Asp-Phg-Val), из qHmo-(Arg(Mtr)-NMeGly-Asp-DNal-Leu), цикCyclo-(Arg-NMeGly-Asp-Phg-Val), no-(Arg-NMeGly-Asp-DNal-Leu), Cyclo-(Arg-Gly-NMeAsp-Phg-Val), из qHmo-(NMeArg(Mtr)-Gly-Asp-Nal-D-lle) цикno-(NMe Arg-Gly-Asp-Nal-Dlle), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NMePhg-Val), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Phg-NMeVal), из qHmo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp-NMePhg-DVal) цикCyclo-(NEtArg-Gly-Asp-Phg-Val), no-(Arg-Gly-Asp-NMePhg-DVal), Cyclo-(Arg-NEtGly-Asp-Phg-Val), из qHmo-(Arg(Mtr)-Gly-NMeAsp-Trp-DVal MHmo-(Arg-Gly-NMeAsp-Trp-DVal) Cyclo-(Arg-Gly-NEtAsp-Phg-Val), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NEtPhg-Val), Пример 3 Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Phg-NEtVal), 80мг qHmo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) пять шесть раз растворяют в 0,01 М HCI и после каждоCyclo-(NPrArg-Gly-Asp-Phg-Val), го растворения сушат вымораживанием ПослеCyclo-(Arg-NPrGly-Asp-Phg-Val), дующая очистка с помощью жидкостной хроматоCyclo-(Arg-Gly-NPrAsp-Phg-Val), графии высокого давления позволяет получать Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NPrPhg-Val), MHmo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) x HCI, FABCyclo-(Arg-Gly-Asp-Phg-NPrVal), MS(M + Н) 589 Cyclo-(NBzlArg-Gly-Asp-Phg-Val), Cyclo-(Arg-NBzlGly-Asp-Phg-Val), Аналогично получают Cyclo-(Arg-Gly-NBzlAsp-Phg-Val), из L(Hmo-(NMeArg-Gly-Asp-DPhe-Val) цикло(NMeArg-Gly-Asp-DPhe-Val) HCI, Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NBzlPhg-Val), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Phg-NBzlVal), из L(Hmo-(Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Val) цикло(Arg-NMeGly-Asp-DPhe-Val) х HCI, FAB-MS(M + Н) Cyclo-(NMeArg-Gly-Asp-Trp-Val), 589, Cyclo-(Arg-NMeGly-Asp-Trp-Val), Cyclo-(Arg-Gly-NMeAsp-Trp-Val), из L(Hmo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe- Val) цикло(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Val) x HCI Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NMeTrp-Val), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Trp-NMeVal), из L(Hmo-(Arg-Gly-Asp-NMeDPhe- Val) циклоCyclo-(NEtArg-Gly-Asp-Trp-Val), (Arg-Gly-Asp-NMeDPhe-Val) x HCI, Cyclo-(Arg-NEtGly-Asp-Trp-Val), из L(Hmo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DNMe-Val) цикло(Arg-Gly-Asp-Phe-DNMe-Val) x HCI, RZ = 18,2, FABCyclo-(Arg-Gly-NEtAsp-Trp-Val), MS(M + H), 589 Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NEtTrp-Val), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Trp-NEtVal), Аналогично получают обработкой уксусной кислотой(АсОН) Cyclo-(NPrArg-Gly-Asp-Trp-Val), Cyclo-(Arg-NPrGly-Asp-Trp-Val), из L(Hmo-(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Val) цикло(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-Val) x AcOH, RZ = 15,4, Cyclo-(Arg-Gly-NPrAsp-Trp-Val), FAB-MS(M + Н) 589 Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NPrTrp-Val), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Trp-NPrVal), Аналогично получают обработкой метансульфоновой кислотой(МеЗОзН) Cyclo-(NBzlArg-Gly-Asp-Trp-Val), Cyclo-(Arg-NBzlGly-Asp-Trp-Val), из L(Hmo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) циклоCyclo-(Arg-Gly-NBzlAsp-Trp-Val), (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) x MeSO3H, RZ = 17,8, FAB-MS(M + Н) 589 Cyclo-(Arg-Gly-Asp-NBzlTrp-Val), Cyclo-(Arg-Gly-Asp-Trp-NBzlVal), Пример 4 Пример 2 Для получения фаз сродства суспендируют Раствор 0,28г MHmo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp0,9г М-малеинимидо-(СН2)5-СО-МН-(СН2)зNMePhe-DVal) (получаемый путем циклизации полимера(получаемого конденсацией Nсогласно примеру 1) в 8,4мл TFA, 1,7мл дихлормалеинимидо-(СН2)5-СООН с Н2М-(СН2)зметана и 0,9мл тиофенола оставляют стоять на полимером) в 10мл 0,1 М натрийфосфатного бу4часа при комнатной температуре, затем конценфера при рН7 и добавляют при 4°С один эквиватрируют и после разбавления водой сушат вымолент L(Hmo-(Arg-Gly-Asp-DPheраживанием С помощью гельфильтрации на NMeLys(Co(CH2)2SH) Перемешивают 4часа при Sephadex СІ0(уксусная кислота/вода 1 1) и поодновременном нагревании реакционной смеси до следующей очистки посредством препаративной комнатной температуры, отфильтровывают твержидкостной хроматографии высокого давления дый остаток и дважды промывают каждый раз 10 при указанных условиях получают цикло-(Агд-СІумл буферного раствора(рН7) и затем трижды воAsp-NMePhe-DVal), FAB-MS(M + Н) 589 дой по 10мл каждый раз Получают цикло-(АгдGly-Asp-DPhe-NMel_ys(CO(CH2)2S-3Аналогично получают (Ммалеинимидо-(СН2)5-СОМН-(СН2)з-полимер)) из 4Hmo-(Arg(Mtr)-Gly-NMeAsp-Phe-lle) цикло(Arg-Gly-NMeAsp-DPhe-lle), FAB-MS(M + Н) 603, Пример 5 19 49799 Аналогично примеру 4 получают конденсацией полимер-О-(СН2)3-І\ІН2 (имеется на рынке) и qHmo-(Arg-Gly-Asp-NMe-DPhe-Lys(СО(СН2)4СООН) (получаемого конденсацией адипиновой кислоты с qnmo-fArg-Gly-Asp-NMeDPhe-Lys-) в указанных условиях) следующую полимерную фазу L(Hmo-(Arg-Gly-Asp-NMe-DPheLys-(Co-(CH2)4-Co-NH-(CH2)3-O-nonHMep) Аналогично получают конденсацией 4Hmo-(NMe-Arg-Gly-Asp-DPhe-Lys-(CO-(CH2)5NH2)) с HOOC-CHrO полимером 4Hmo-(NMe-Arg-Gly-Asp-DPhe-Lys-(CO-(CH2)5NH-CO-CHrO-полимер)) Нижеследующие примеры касаются фармацевтических композиций Пример А Инъекционные склянки Раствор ЮОг циклопептида формулы I и 5г вторичного фосфата натрия в Зл дважды дистиллированной воды доводят 2н соляной кислотой до рН6,5, стерильно фильтруют, разливают в инъекционные склянки, лиофилизируют в стерильных условиях и стерильно закрывают Каждая инъекционная склянка содержит 5мг активного вещества Пример В Суппозитории Расплавляют смесь 20г активного вещества формулы I со ЮОг соевого лецитина и 1400г какао-масла, разливают в формы и дают остыть Каждый суппозиторий содержит 20 мг активного вещества Пример С Раствор Готовят раствор из 1 г активного вещества формулы I, 9,38г NaH2Po4 х 2Н2О, 28,48г Na2HPO4 х 12Н2О и 0,1 г бензальконийхлорида в 940мл два 20 жды дистиллированной воды Доводят рН до 6,8, доливают до 1л и стерилизуют облучением Этот раствор может применяться в форме глазных капель Пример D Мазь Смешивают 500мг активного вещества формулы I с 99,6г вазелина при асептических условиях Пример Е Таблетки Смесь ЮОг циклопептида формулы I, 1кг лактозы, 600г микрокристаллической целлюлозы, 600г кукурузного крахмала, ЮОг поливинилпирролидона, 80г талька и Юг стеарата магния спрессовывают обычным способом в таблетки, так что каждая таблетка содержит 10мг активного вещества Пример F Драже Таблетки прессуют, как указано в примере Е, и покрывают затем обычным способом покрытием из сахарозы, кукурузного крахмала, талька, траганта и красителя Пример G Капсулы Обычным способом капсулы из твердого желатина заполняют активным веществом формулы I, так что каждая капсула содержит 5мг активного вещества Пример Н Ингаляционный аэрозоль Растворяют 14г активного вещества формулы І в Юл изотонического раствора NaCI и раствор заливают с помощью насосного механизма в обычные для торговли аэрозольные сосуды Раствор можно распылять в рот или нос Каждая порция распыляемого раствора(прибл 0,1мл) соответствует дозе прибл 0,14мг ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71