Похідні ортозаміщеної бензойної кислоти для лікування від інсулінової резистентності

1. Сполука формули І C2 2 (19) 1 3 78050 4 2-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(пропіл)аміно]-32-[(4-{3-[(2,3-диметоксибензил)(гептил)аміно]-3оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; 2-[(4-{2-[етил(2-флуорбензил)аміно]-22-[(4-{3-[(3-етоксипропіл)(4-ізопропілбензил)аміно]оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; 3-оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; 2-[(4-{3-[етил(2-флуорбензил)аміно]-32-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(пропіл)аміно]-3оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; 2-({[4-(2-{етил[4-(трифлуорметил)бензил]аміно}-22-[(4-{2-[етил(2-флуорбензил)аміно]-2оксоетил)феніл]тіо}метил)бензойна кислота; оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; 2-{[(3-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-22-[(4-{3-[етил(2-флуорбензил)аміно]-3оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота та оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; та 2-{[(4-{2-[(4-хлорбензил)(етил)аміно]-2її фармацевтично прийнятні солі. оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; та 12. Сполука за п.3, вибрана з групи: її фармацевтично прийнятні солі. 2-{[(4-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-211. Сполука за п.2, вибрана з групи: оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; 2-[(4-{3-[бензил(гексил)аміно]-32-{[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; оксопропіл}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; 2-[(4-{2-[бензил(гексил)аміно]-22-{[4-(2-{етил[4-(трифлуорметил)бензил]аміно}-2оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; оксоетил)феніл]тіо}метил)бензойна кислота; 2-[(4-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-22-{[(3-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота та 2-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-32-{[(4-{2-[(4-хлорбензил)(етил)аміно]-2оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота 2-[(4-{3-[бутил(2,3-диметоксибензил)аміно]-3та її фармацевтично прийнятні солі. оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; Представлений винахід стосується деяких нових похідних бензойної кислоти, способів отримання таких сполук, їх корисності у лікуванні клінічних станів, асоційованих з резистентністю до інсуліну, способів їх терапевтичного застосування та фармацевтичних композицій, що їх містять. Синдром резистентності до інсуліну (СРІ), залучаючи цукровий діабет типу 2, який стосується сукупності виявів, залучаючи резистентність до інсуліну з супроводжуючою гіперінсулінемією, можливо цукровий діабет типу 2, артеріальну гіпертензію, центральне (вісцеральне) ожиріння, дисліпідемію, виявлювану, як ненормальні рівні ліпопротеїну, що звичайно характеризується підвищеним ЛДНГ (ліпопротеїни дуже низької густини), частинками ЛНГ низької густини та зменшенням концентрацій ЛВГ (ліпопротеїн високої густини) та зменшенням фібринолізу. Нещодавнє епідеміологічне дослідження документувало, що особи з резистентністю до інсуліну мають значно збільшений ризик серцевосудинної захворюваності та смертності, особливо потерпаючи від інфаркту міокарду та нападу. У цукровому діабеті типу 2 споріднені з атеросклерозом стани викликають до 80% усіх смертей. У клінічній медицині відома необхідність у збільшенні чутливості до інсуліну у потерпаючих від СРІ пацієнтів та отже до коректування дисліпідемії, яка, як вважають, викликає прискорений прогрес атеросклерозу. Однак, тепер це не є всебічно добре визначеною хворобою. Модулятори пероксизомних активованих проліфератором рецепторів [АППР, для огляду АППР дивись Т. M.Willson et al, J Med Chem 2000, Vol 43, 527] є ефективними у лікуванні станів, асоційованих з резистентністю до інсуліну. [US 5750783] розкриває, що деякі бензилокси заміщені фенілгліциноламіди, які мають циклоалкільний замісник, є антіатеросклеротичними медикаментами. Цей документ не розкриває або передбачає сполуки представленого винаходу. Несподівано виявлено серію сполук, які є селективними модуляторами АППРa. Представлений винахід стосується сполуки формули І I де n дорівнює 0, 1 або 2, a R 1 представляє галоген, С1-4алкіл, який, як варіант, заміщено одним або більше флуором, С1-4алкоксил, який, як варіант, заміщено одним або більше флуором, а якщо n дорівнює 2, замісники R1 можуть бути однаковими або різними; R2 представляє С 2-8-алкіл, який, як варіант, перерваний оксигеном; Υ відсутня або представляє метилен; а X представляє О чи S; та її фармацевтично прийнятних солей та проліків. Подальші значення R1, R2, Υ та X у сполуках формули І нижченаведено. Зрозуміло, що такі значення можна використовувати з будь-яких визначень, пунктів патентної формули або втілень, визначених вище або далі. Згідно з однимаспектом X представляє О. Згідно з другим аспектом X представляє S. Згідно з третім аспектом Υ представляє метилен. Згідно з четвертим аспектом Υ відсутнє. Згідно з п'ятим аспектом R1 представляє галоген, С1-4алкіл або С1-4алкоксил, а n дорівнює 0,1 5 78050 6 або 2. 2-{[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3Особливо R1 представляє флуор, метокси, оксопропіл}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; або ізопропіл, коли n дорівнює 1 або 2. Особливо n 2-[(4-{3-[бутил(2,3-диметоксибензил)аміно]-3дорівнює 0. оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; Згідно з шостим аспектом R2 представляє С 52-[(4-{3-[(2,3-диметоксибензил)(гептил)-аміно]3-оксопропіл}фенокси)метил]-бензойна кислота; 7алкіл. Термін С 2-8алкіл означає лінійно-ланцюговий 2-[(4-{3-[(3-етоксипропіл)(4або розгалужений насичений аліфатичний вуглеізопропілбензил)аміно]-3водень, що має від 2 до 8 атомів карбону. Приклаоксопропіл}фенокси)метил]-бензойна кислота; ди вказаного алкілу залучають етил, н-пропіл, ізо2-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(пропіл)аміно]-3пропіл, н-бутил, ізобутил, втор-бутил, трет-бутил оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; та лінійно- та розгалужено-ланцюговий пентил, 2-[(4-{2-[етил(2-флуорбензил)аміно]-2гексил, гептил та октил. оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; Фахівцям зрозуміло, що термін перерваний, 2-[(4-{3-[етил(2-флуорбензил)аміно]-3який використано вище, означає, що атом оксигеоксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; ну розташовано всередині алкільного ланцюга, а 2-({[4-(2-{етил[4не є кінцевим атомом. Термін "проліки", який вико(трифлуорметил)бензил]аміно}-2ристано у цьому описі залучає похідні карбоксильоксоетил)феніл]тіо}метил)-бензойна кислота; ної групи, які перетворюються у ссавці, особливо 2-{[(3-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2людині, у карбоксильну групу або її сіль чи кон'юоксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; та гат. Зрозуміло, що без звернення до теорії, вва2-{[(4-{2-[(4-хлорбензил)(етил)аміно]-2жають, що більша частина активності, асоційована оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота та з проліками, обумовлена активністю сполуки форїх фармацевтично прийнятні солі. мули І, у яку перетворюються проліки. Проліки Друга гр упа конкретних сполук винаходу місможна отримати звичайними способами, доступтить сполуку, вибрану з гр упи: ними фахівцям. Різноманітні проліки на основі ка2-{[(4-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2рбоксигрупи відомі у рівні техніки. Наприклад, диоксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; вись про такі похідні проліків: 2-{[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3a) Design Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elоксопропіл}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; sevier, 1985) та Methods in Enzymology. 42: 3092-{[4-(2-{етил[4396, edited by K.Widder, et al. (Academic Press, (трифлуорметил)бензил]аміно}-21985); оксоетил)феніл]тіо}-метил)бензойна кислота; b) A Te xtbook of Drug Design and Development, 2-{[(3-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2edited by Krogsgaard-Larsen та Н.Bundgaard, Chapоксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; та ter 5 "Design and Application of Prodrugs", by 2-{[(4-{2-[(4-хлорбензил)(етил)аміно]-2H.Bundgaard p,113-191 (1991); оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота та c) Н. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reїх фармацевтично прийнятні солі. views, 8:1-38 (1992); Третя група конкретних сполук винаходу місd) Η. Bundgaard, et al, Journal of Pharmaceutical тить сполуку вибрану з групи: Sciences, 77: 285 (1988); та 2-[(4-{3-[бензил(гексил)аміно]-3e) N. Kakeya, et al., Chem Pharm Bull, 32: 692 оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; (1984). 2-[(4-{2-[бензил(гексил)аміно]-2Вищенаведені документи а - е уведені як пооксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; силання. 2-[(4-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2Розщеплюванні in vivo естери є як раз одним оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; типом проліків вихідної молекули. 2-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3Сполуки формули І мають активність, як медиоксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; каменти, зокрема, сполуки формули І є селектив2-[(4-{3-[бутил(2,3-диметоксибензил)аміно]-3оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; ними агоністами АППРa, їх ЕK50 для АППРa є 2-[(4-{3-[(2,3-диметоксибензил)(гептил)-аміно]принаймні у чо тири рази нижче, а переважно при3-оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; наймні у 10 або 50 разів нижче їх відповідних ЕK50 2-[(4-{3-[(3-етоксипропіл)(4для ΑΠΠΡg, де ЕK50 виміряно та розраховано, як ізопропілбензил)аміно]-3описано у дослідженнях подалі у цьому документі. оксопропіл}фенокси)метил]-бензойна кислота; Сполуки формули І є потужними та селективними. 2-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(пропіл)аміно]-3Конкретні сполуки винаходу є одною або біоксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; льше з наступного: 2-[(4-{2-[етил(2-флуорбензил)аміно]-22-[(4-{3-[бензил(гексил)аміно]-3оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; 2-[(4-{3-[етил(2-флуорбензил)аміно]-32-{[(4-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота; та їх фармацевтично прийнятні солі. 2-[(4-{2-[бензил(гексил)аміно]-2Деякі сполуки представленого винаходу мооксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; жуть бути таутомерами. Зрозуміло, що представ2-[(4-{2-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2лений винахід стосується усі х таких та утомеріє. оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота; В описі та доданій формулі винаходу, хімічна 2-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3формула або назва залучає усі стерео та оптичні оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота; 7 78050 8 ізомери та їх рацемати, а також суміші окремих диметиламінопіридину або 1-етил-3-(3енантіомерів у різних пропорціях, коли такі ізомери диметиламінопроліл)карбодіімід гідрохлориду, при та енантіомери існують, а також їх фармацевтично температурі у межах від -25°С до 150°С. прийнятні солі. Ізомери можна розділяти, застосоСполуки формули II можна також отримати вуючи звичайні способи, наприклад, хроматограреакцією сполуки формули V фією або фракційною кристалізацією. Енантіомери можна виділяти розділенням рацемату, наприV клад, фракційною кристалізацією, розділенням або ВЕРХ. Діастереомери можна виділяти розділенв якій R1, n, R2, X та Υ визначено раніше зі ням ізомерних сумішей, наприклад, фракційною сполукою формули VI кристалізацією, ВЕРХ або флеш-хроматографією. Альтернативно стереоізомери можна отримувати VI хіральним синтезом з хіральних вихідних матеріалів в умовах, які не викликатимуть рацемізації або в якій PG визначено раніше, a L представляє епімеризації, або дериватизацією хіральним реавідщеплювану гр упу, наприклад галоген, напригентом. Усі стереоізомери залучено в рамки винаклад, бром, як варіант, у присутності розчиннику, ходу. наприклад ацетонітрилу, та, як варіант, у присутСпособи отримання ності основи, наприклад, карбонату калію, при теСполуки винаходу можна отримати, як нижчемпературі у межах від 0 до 150°С. наведено. Однак, винахід не обмежено цими споСполуки формули III, IV, V та VI можна отрисобами, сполуки можна також отримати, як описамати способами, описаними у прикладах або анано для структурно споріднених сполук у сучасному логічними способами, що відомі фахівцям. рівні техніки Реакції можна проводити стандартСполуки формули II, III, IV та V є корисними інними способами, або як описано в експериментатермедіатами при отриманні сполук формули І. льному розділі. Деякі із цих сполук, можна вважати новими. Нові Сполуки формули І можна отримати реакцією сполуки формули II, або формули III, або формули сполуки формули II IV або формули V заявлені тут, як подальший аспект представленого винаходу. Сполуки винаходу можна виділяти із їх реакII ційних сумішей, застосовуючи звичайні способи. Фахівцям ясно, що для отримання сполуки винаходу у альтернативних та у деяких випадках, в якій R1, R2, X та Υ визначено раніше, a PG більш зручним способом, конкретні етапи способу, представляє захисну груп у для карбоксильного згаданого тут раніше, можна здійснювати у різній гідроксилу, яку [описано у довіднику "Protective послідовності, та/або конкретні реакції можна здійGroup in Organic Synthesis", 2 Edition (1991) by снювати на різних етапах загального шляху (тобто Greene та Wuts], із засобом зняття захисту. За хисхімічні трансформації можна здійснювати з інтерною групою може також бути смола, як-то смола медіатами, відмінними від асоційованих з вищенаВанга або 2-хлортритилхлоридна смола. Захисні веденими конкретними реакціями). групи можна видаляти способами, які добре відомі У будь-якому з попередніх способів отриманфа хівцям. Одною такою є захисна група, де PG ня, де необхідно, гідроксид, аміно або інші реакпредставляє С 1-6алкоксил або арилалкоксил, наційні групи можна захистити, застосовуючи захисприклад, бензил, так що COPG представляє естер. ну гр упу R p, [як описано у довіднику "Protective Такі естери можуть реагувати з гідролізувальним Group in Organic Synthesis", 2 Edition (1991) by засобом, наприклад, літій гідроксидом у присутноGreene та Wuts]. Захисною групою може також сті розчиннику, наприклад, суміші ТГФ та води або бути смола, як-то смола Ванга або 2калій гідроксидом у С 1-3спирті, наприклад, метанохлортритилхлоридна смола. Захист та зняття залі, при температурі у межах 0-200°С або мікрохвихисту з функціональних груп можна здійснювати льовим опроміненням, з утворенням сполуки форперед або після будь-якого з реакційних етапів, мули І. описаних тут раніше. Захисні групи можна видаляСполуки формули II можна отримати реакцією ти способами, які добре відомі фахівцям. сполуки формули III Вираз "інертний розчинник" стосується розчиннику, як не реагує з вихідними матеріалами, III реактивами, інтермедіатами або продуктами спо1 собом, який шкідливо впливає на вихід потрібного або її солі, наприклад гідрохлориду, в, яких R , продукту. R2 і n визначено раніше, зі сполукою формули IV Фармацевтичні препарати Сполуки винаходу звичайно застосовуватимуть перорально, парентерально, внутрішньовенIV но, внутрішньом'язово, підшкірно або іншими придатними для ін'єкції шляхами, букально, ректально, вагінально, трансдермально та/або або її хлорангідридом, в яких Χ, Υ та PG виназально, та/або інгаляціями, у формі фармацевзначено раніше у інертному розчиннику, напритичних препаратів, що містять активний інгредієнт клад, дихлорметані, як варіант, у присутності заяк вільну кислоту або фармацевтично прийнятну собу сполучення, наприклад 4 9 78050 10 сіль у фармацевтично прийнятній дозованій форбу нирок, пошкодження сітчатки та, як очікують, мі. Залежно від розладу та пацієнта, якого лікують, затримуватимуть хворобу периферійних судин та шляху застосування, композиції можна застосонижніх кінцівок. Крім того сполуки можуть бути вувати у різних дозах. корисними у лікуванні різноманітних станів поза Придатні добові дози сполук винаходу у терасерцево-судинною системою, асоційованих або ні певтичному лікуванні людей є приблизно 0,0001з резистентністю до інсуліну, типу синдрому полікі100мг/кг маси тіла, переважно 0,001-10мг/кг маси стозного яєчнику, ожиріння, раку та станів запальтіла. ної хвороби, залучаючи нейродегенеративні розПероральні композиції є кращими, особливо лади, як-то помірні когнитивні порушення, хвороба таблетки або капсули, які можна формувати споАльцгеймера, хвороба Паркінсона та розсіяний собами, відомими фахівцям для забезпечення склероз. дози активної сполуки у межах 0,5мг до 500мг, Сполуки представленого винаходу, як очікунаприклад, 1мг, 3мг, 5мг, 10мг, 25мг, 50мг, 100мг ють, є корисними у регулюванні рівнів глюкози у та 250мг. потерпаючих від діабету типу 2 пацієнтів. Згідно з наступним аспектом винаходу запроПредставлений винахід стосується способу ліпоновано фармацевтичну композицію, що містить кування або попередження дисліпідемій, синдрому будь-яку сполуку винаходу, або її фармацевтично резистентності до інсуліну та/або розладів метаприйнятну сіль, у суміші з фармацевтично прийняболізму (які визначено вище), що залучає застосутними ад'ювантами, розріджувачами та/або новання сполуки формули і до ссавця (особливо люсіями. дини), що цього потребує. Фармакологічні властивості Представлений винахід стосується способу ліПредставлені сполуки формули (І) є корисникування або попередження діабету типу 2, що зами для профілактики та/або лікування клінічних лучає застосування ефективної кількості сполуки станів, асоційованих з притаманною чи індуковаформули І до ссавця (особливо людини), що цього ною зменшеною чутливістю до інсуліну (резистенпотребує. тністю до інсуліну) та асоційованими розладами Згідно з наступним аспектом представлений метаболізму (також відомими, як метаболічний винахід стосується застосування сполуки формули синдром). Ці клінічні стани залучають, але без обІ, як медикаменту. меження, загальне ожиріння, абдомінальне ожиЗгідно з наступним аспектом представлений ріння, артеріальну гіпертензію, гіперінсулінемію, винахід стосується застосування сполуки формули гіперглікемію, діабет типу 2 та дисліпідемію, що І у виробництві медикаменту для лікування резисхарактеристично проявляються резистентністю до тентності до інсуліну та/або розладів метаболізму. інсуліну. Ця дисліпідемія, також відома, як атероКомбінаційна терапія генічний профіль ліпопротеїну, охарактеризована Сполуки винаходу можна комбінувати з іншим помірно підвищеними неестерифікованими жиртерапевтичним засобом, що є корисним у лікуванні ними кислотами, підвищеними збагаченими трирозладів, асоційованих з розвитком та прогресом гліцеридами частинками ліпопротеїну дуже низької атеросклерозу, як-то гіпертензії, гіперліпідемії, густини (ЛДНГ), високими рівнями Аро В, низькими дисліпідемії, діабету та ожиріння. Сполуки винахорівнями ліпопротеїну високої густини (ЛВГ), асоціду можна комбінувати з іншим терапевтичним зайованими з низькими рівнями частинок ароАІ та собом, що зменшує співвідношення ЛНГ:ЛВГ або високими рівнями Аро В у присутності невеликих, засобом, що викликає зменшення циркуляційних щільних частинок ліпопротеїнів низької густини рівнів ЛНГ-холестерину. У пацієнтів з цукровим (ЛНГ), фенотипу В. діабетом сполуки винаходу можна також комбінуСполуки представленого винаходу, як очікувати з терапевтичними засобами, використовувають, є корисними у лікуванні пацієнтів з комбіноними для лікування ускладнень, споріднених з ваними або змішаними гіперліпідеміями або різмікро-ангіопатіями. номанітними ступенями гіпертригліцеридемій та Сполуки винаходу можна використовувати попісляобідньої дисліпідемії з іншими виявами метаруч з іншими терапіями для лікування метаболічболічного синдрому або без них. ного синдрому або діабету типу 2 та асоційованих Лікування представленими сполуками, як очіз ними ускладнень, що залучають бігуанідні ліки, кують, знижуватиме серцево-судинну захворюванаприклад, метформін, фенформін та буформін, ність та смертність, асоційовані з атеросклерозом інсулін (синтетичні аналоги інсуліну, амілін) та певнаслідок їх антидисліпідемічних, а також антизароральні антигіпергліцемічні засоби (які поділяють пальних властивостей. Стани серцево-судинних на регулятори глюкози з їжі та інгібітори альфахвороб залучають макро-ангіопатії різноманітних глюкозидази). Прикладом інгібітору альфавнутрішніх органів, що спричиняють інфаркт міоглюкозтдази є акарбоз або воглібоз або міглітол. карду, застійну серцеву недостатність, цереброваПрикладом регулятору глюкози з їжі є репаглінід скулярну хворобу та периферійну артеріальну або натеглінід. недостатність нижніх кінцівок. Внаслідок їх е фекту Згідно з іншим аспектом винаходу, сполук у сенсибілізування стосовно інсуліну сполуки форформули І або її фармацевтично прийнятну сіль, мули І, як очікують, також попереджуватимуть та сольват, сольват такої солі або її проліки, можна затримуватимуть розвиток діабету типу 2 від мезастосовувати в асоціації з іншим АППРтаболічного синдрому та діабету вагітни х. Відтак модулювальним засобом. АППР-модулювальні розвиток довготермінових ускладнень, асоційовазасоби залучають, але без обмеження агоніст них з хронічною гіперглікемією при цукровому діаАППР-альфа та/або гама та/або дельта, або його беті, як-то мікро-ангіопатії, що спричиняють хворофармацевтично прийнятні солі, сольвати, сольва 11 78050 12 ти таких солей або проліки. Придатні агоністи іл](3R,5S)-3,5-дигідроксигепт-6-енова кислота] або АППР альфа та/або гама, їх фармацевтично приїї фармацевтично прийнятна сіль або сольват, або йнятні солі, сольвати, сольвати таких солей або сольват такої солі Сполуку (Е)-7-[4-(4проліків, відомі у рівні техніки. Вони залучають флуорфеніл)-6-ізопропіл-2-[метилсполуки, [описані у WO 01/12187, WO 01/12612, (метилсульфоніл)-аміно]-пірімідин-5-іл](3R,5S)-3,5WO 99/62870, WO 99/62872, WO 99/62871, WO дигідроксигепт-6-енова кислота та її солі кальцію 98/57941, WO 01/40170, J Med Chem, 1996,39, 665, та натрію розкрито [у Європейській патентній заExpert Opinion on Therapeutic Patents, 10 (5), 623явці, публікація №ЕР-А-0521471, та у Bioorganic та 634 (зокрема, сполуки, описані у патентній заявці Medicinal Chemistry, (1997), 5(2), 437-444]. Цей на стор.634) та J Med Chem, 2000, 43, 527], що останній статин є зараз відомим під загальною уведені як посилання. Особливо агоніст АППР назвою розувастатин. альфа та/або гама стосується BMS 298585, клофіУ представленій заявці термін "засіб зниження брату, фенофібрату, безафібрату, гемфіброзилу холестерину" також залучає хімічні модифікації та ципрофібрату; GW9578, піоглітазону, розиглітаінгібіторів HMG-Co A-редуктази, як-то естери, прозону, ривоглітазону, балаглітазону, KRP-297, JTTліки та метаболіти, активні або неактивні. 501, SB 213068, GW1929, GW 7845, GW 0207, LПредставлений винахід також стосується спо796449, L-165041 та GW 2433. Особливо агоніст лук представленого винаходу у комбінації з комАППР альфа та/або гама стосується (S)-2-етоксиплексотвірною сполукою жовчної кислоти, напри3-[4-(2-{4-метансульфонтоксиклад, холестипол або холестирамін або феніл}етокси)феніл]пропанової кислоти та її фархолестагель. мацевтично прийнятних солей. Представлений винахід також стосується споНа додаток комбінацію винаходу можна виколуки представленого винаходу у комбінації з інгібіристовувати у сполученні з сульфонілсечовиною, тором транспортної системи клубово-кишкових як-то глімепірид, глібенкламід (глімідин), гліклазид, жовчних кислот (інгібітор ТККЖК). гліпізид, гліхідон, хлорпропамід, толбутамід, ацеПридатні сполуки, що виявляють інгібіторну тогексамід, глісопірамід, карбутамід, глібонурид, активність стосовно ТККЖК, [описано, дивись, наглізоксепід, глібутіазол, глібузол, глігексамід, гліміприклад, сполуки, описані у WO 93/16055, WO дин, гліпінамід, фенбутамід, толциламід та тола94/18183, WO 94/18184, WO 94/24087, WO замід. Переважно сульфонілсечовиною є глімепі96/05188, WO 96/08484, WO 96/16051, WO рид або глібенкламід (глімідин). Більше переважно 97/33882, WO 98/07749, WO 98/38182, WO сульфонілсечовиною є глімепірид. Відтак предста98/40375, WO 98/56757, WO 99/32478, WO влений винахід стосується застосування сполуки 99/35135, WO 99/64409, WO 99/64410, WO представленого винаходу у сполученні з одним, 00/01687, WO 00/20392, WO 00/20393, WO двома або більше існуючими терапіями, описани00/20410, WO 00/20437, WO 01/34570, WO ми у цьому розділі. Дози інших існуючи х терапій 00/35889, WO 00/47568, WO 00/61568, WO для лікування діабету типу 2 та асоційованих з 01/68637, WO 01/68096, WO 02/08211, WO ними ускладнень відомі фахівцям та затверджені 00/38725, WO 00/38726, WO 00/38727, WO для застосування регуляторними органами, на00/38728, WO 00/38729, DВ 19825804, JP приклад, FDA та можуть бути знайденими у Or10072371, US 5070103, ЕР 251 315, ЕР 417 725, ange Book, опублікованою FDA. Альтернативно ЕР 489 423, ЕР 549 967, ЕР 573 848, ЕР 624 593, менші дози можна використовувати, як результат ЕР 624 594, ЕР 624 595, ЕР 869 121, ЕР 864 582, корисності завдяки комбінації. Представлений вита ЕР 1 070 703], зміст цих патентних заявок, осонахід також стосується сполук представленого бливо сполук, описаних у п.1 та названих приклавинаходу у комбінації із засобом зниження холесдах, уведено як посилання. терину. Засоби зниження холестерину стосовно Особливими класами інгібіторів ТККЖК, прицієї заявки залучають, але без обмеження, інгібідатних для застосування згідно з представленим тори редуктази HMG-CoA (3-гідрокси-3винаходом, є бензотієпіни та сполуки, [описані у метилглутарил-кофермент редуктази А). Відповідформулах винаходів, особливо п.1 WO 00/01687, но інгібітором редуктази HMG-CoA є статин, вибWO 96/08484 та WO 97/33882], що уведені як пораний з групи, що складається з аторвастатину, силання, іншими придатними класами інгібіторів бервастатину, церивастатину, далвастатину, флуТККЖК є 1,2-бензотіазепіни, 1,4-бензотіазепіни та вастатину, і тавастатину, ловастатин у, мевастати1,5-бензотіазепіни. Наступним придатним класом ну, нікостатину, нівастатин у, правастатину та симінгібіторів ТККЖК є 1,2,5-бензотіадіазепіни. вастатину, або їх фармацевтично прийнятної солі, Одною особливо придатною сполукою, що виособливо натрію або кальцію, або сольвату, або являє інгібіторну активність стосовно ТККЖК є сольвату такої солі. Особливим статином є атор(3R,5R)-3-бутил-3-етил-1,1-діоксидо-5-фенілвастатин, або його фармацевтично прийнятні сіль, 2,3,4,5-тетрагідро-1,4-бензотіазепін-8-іл-b-Dсольват, сольват такої солі або проліки. Ще більглюкопіранозидуронова кислота [ЕР 864 582]. Інші ше особливим статином є сіль аторвастатину і придатні інгібітори ТККЖК залучають один з групи: кальцію. Особливо кращим статином є, однак, 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8сполука з хімічною назвою (Е)-7-[4-(4(N-{(R)-1'-феніл-1'-[N'флуорфеніл)-6-ізопропіл-2(карбоксиме[метил(метилсульфоніл)-аміно]-пірімідин-5тил)карбамоїл]метил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5іл](3R,5S)-3,5-дигідроксигепт-6-енова кислота, [татетрагідро-1,5-бензотіазепін; кож відома як (Е)-7-[4-(4-флуорфеніл)-6-ізопропіл1,1-дiоксо-3,3-дибутил-5-фенiл-7-метилтiо-82-[N-метил-N-(метилсульфоніл)-аміно]-пірімідин-5(N-{(R)-a-[N'-(карбоксиметил)карбамот]-4 13 78050 14 гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,51,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіотетрагідро-1,5-бензотіазепін; 8-{N-[(R)-a-[N'-(R)-{21,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8[(гідро(N-{(R)-1'-феніл-1'-(N'-(2кси)(метил)фосфорил]етил}карбамоїл)бензил]карб сульфоетил)карбамоїл]метил]карбамоїлметокси)амоїлметокси}-2,3,4,5-тетрагідро-1,52,3,4,5-тетрагідро-1,5-бензотіазепін; бензотіазепін; 1,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіо1,1-дiоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-88-(N-{(R)-1'-феніл-1'-[N'-(2(N-{(R)-a-[N'-(2-метилтіо-1сульфоетил)карбамоїл]метил}карбамоїлметокси)карбоксіе2,3,4,5-тетрагідро-1,5-бензотіазепін; тил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,51,1-дiоксо-3,3-дибутил-5-фенiл-7-метилтio-8тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N-(2-сульфоетил)карбамот]-41,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5(N-{(R)-a-[N'-{2тетрагідро-1,5-бензотіазепін; [(метил)(етил)фосфорил]етил}карбамоїл)-41,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіогідроксибензил]карбамоїлметокси}-2,3,4,58-(N-{(R)-a-[N'-(2-сульфоетил)карбамоiл]-4тетрагідро-1,5-бензотіазепін; гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,51,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтю-8тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N'-{21,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіо[(метил)(гідрокси)фосфорил]етил}карбамоїл)-48-(N-{(R)-a-[N'-(2гідроксибензил]карбамоїлметокси}-2,3,4,5карбоксіететрагідро-1,5-бензотіазепін; тил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,51,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N'-(2-метилсульфініл-11,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8карбоксіе(N-{(R)-a-[N'-(2-карбоксіетил)карбамоїл]-4тил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5тетрагідро-1,5-бензотіазепін; тетрагідро-1,5-бензотіазепін; 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метокси-8-(N1,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіо{(R)-a-[N'-(2-сульфоетил)карбамоїл]-48-(N-{(R)-a-[N'-(5гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5карбоксипентетрагідро-1,5-бензотіазепін; тил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,51,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N'-1-карбокси-2-метилтіо1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8етил)карбамоїл]-4(N-{(R)-a-[N'-(2гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5карбоксіететрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; тил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,51,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N-((S)-1-карбокси-2-(R)1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8гідроксипропіл)карбамоїл]-4(N-(a-[N'-(2-сульфоетил)карбамоїл]-2гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5флуорбензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5тетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; тетрагідро-1,5-бензотіазепін; 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-81,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіо(N-{(R)-a-[N-((S)-1-карбокси-28-(N-{(R)-a-[N'-(R)-(2-гідрокси-1метилпропiл)карбамот]-4карбоксіегідроксибензил}карбамотметокси)-2,3,4,5тил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5тетрапдро-1,2,5-бензотіадіазепін; тетрагідро-1,5-бензотіазепін; 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-81,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8(N-{(R)-a-[N-((S)-1-карбоксибутил)карбамоїл]-4(N-{(R)-a-[N'-(R)-(2-гідрокси-1гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5карбоксіететрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; тил)карбамоїл]бензил}карбамоїл]метокси)-2,3,4,51,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N-((S)-11,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8карбоксипро(N-{(R)-a-[N'-(R)-1-[N"-(R)-(2-гідрокси-1піл)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5карбоксіетил)карбамоїл]-2тетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; гідроксіетил}карбамоїл)бензил]карбамоїлметокси}1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-82,3,4,5-тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N-((S)-11,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіокарбоксіе8-(N-{(R)-a-[N'-(R)тил)карбамоїл]бензил)карбамоїлметокси)-2,3,4,5(карбоксимететрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; тил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,51,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8тетрагідро-1,5-бензотіазепін; (N-{(R)-a-[N-((S)-1-карбокси-2-(R)1,1-діоксо-3-бутил-3-етил-5-феніл-7-метилтіогідроксипро8-(N-{(R)-a-[N'-(R)-((етокси)(метил)фосфорилпіл)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5метил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)тетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; 2,3,4,5-тетрагідро-1,5-бензотіазепін; 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8 15 78050 16 та ніцеритрол; (N-{(R)-a-[N-(2-сульфоетил)карбамоїл]-4фітостерольну сполуку, наприклад, етаноли; гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5тетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; пробукол; сполука проти ожиріння, наприклад, орлістат 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8[ЕР 129,748] та сибутрамін [GB 2 184 122 та US 4 (N-{(R)-a-[N-((S)-1-карбоксіетил)карбамот]-4929 629]; омега-3 жирна кислота, наприклад, Omaгідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5cor™; тетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; антигіпертензивна сполука, наприклад, інгібі1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8тор ангіотензин-конвертувального ферменту (N-{(R)-a-[N-((R)-1-карбокси-2(АКФ), антагоніст рецептору ангіотензину II, адреметилтіоенергічний блокатор, альфа адренергічний блокатил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5тор, бета адренергічний блокатор, наприклад, мететрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; топролол, змішаний альфа/бета адренергічний 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8блокатор, адренергічний стимулятор, блокатор (N-{(R)-a-[N-((S)-1-[N-((S)-2-гідрокси-1каналу кальцію, блокатор АТ-1, салуретик, діурекaрбоксіетил)карбамоїл]пропіл}карбамоїл]бензил}к тик або судинорозширювач; арбамоїлметокси)-2,3,4,5-тетрагідро-1,2,5антагоніст або інверсивний агоніст СВ1, [набензотіадіазепін; приклад, який описано у WO 01/70700 та ЕР 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтio-865635]; (N-{(R)-a-[N-((S)-1-карбокси-2аспірин; метилпроантагоніст меланін-концентруючого гормону піл)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5(МКГ); тетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; інгібітор PDK, або 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8модулятори ядерних рецепторів, наприклад, (N-{(R)-a-[N-((S)-1-карбоксипропіл)карбамоїл]-4LXR, FXR, RXR, та ROR-альфа; або гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5їх фармацевтично прийнятні солі, сольвати, тетрагідро-1,2,5-бeнзотіадіазепін; сольвати таких солей або проліки, як варіант, ра1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8зом з фармацевтично прийнятним розріджувачем [N-((R,S)-a-{N-[1-(R)-2-(S)-1-гідрокси-1-(3,4або носієм, до теплокровної тварини, як-то людидигідроксифеніл)проп-2-іл]карбамоїл}-4ни, що потребує такого терапевтичного лікування. гідроксибензил)карбамоїлметокси]-2,3,4,5Особливі інгібітори АКФ або їх фармацевтично тетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; прийнятні солі, сольвати, сольвати таких солей 1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8або проліки, залучаючи активні метаболіти, які (N-{(R)-a-[N-(2-(S)-3-(R)-4-(R)-5-(R)-2,3,4,5,6можна використовува ти у комбінації зі сполукою пентагідроксигексил)карбамоїл]-4формули І, залучають, але без обмеження, такі гідроксибензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5сполуки: алацеприл, алатриоприл, алтіоприл тетрапдро-1,2,5-бензотіадіазепін; та кальцію, анковенін, беназеприл, беназеприл гідро1,1-діоксо-3,3-дибутил-5-феніл-7-метилтіо-8хлорид, беназеприлат, бензоїлкаптоприл, каптоп(N-{(R)-a-[N-(2-(S)-3-(R)-4-(R)-5-(R)-2,3,4,5,6рил, каптоприл-цистеїн, каптоприл-глутатіон, цепентагідроксигекранаприл, цераноприл, церонаприл, цилазаприл, сил)карбамоїл]бензил}карбамоїлметокси)-2,3,4,5цилазаприлат, делаприл, делаприл-діацид, енатетрагідро-1,2,5-бензотіадіазепін; лаприл, еналаприлат, енаприл, епікаптоприл, фоабо його фармацевтично прийнятну сіль, сороксимітин, фосфеноприл, фосеноприл, фосенопльват, сольват такої солі або проліки. рил натрій, фосиноприл, фосиноприл натрій, Згідно з додатковим аспектом представленого фосиноприлат, фосиноприлова кислота, глікопвинаходу запропоновано комбінаційне лікування, рил, геморфін-4, ідраприл, імідаприл, індолаприл, що залучає застосування ефективної кількості індолаприлат, лібензаприл, лізиноприл, ліціумін А, сполуки формули І або її фармацевтично прийнятліціумін В, міксанприл, моексиприл, моексиприлат, ної солі, сольвату, сольвату такої солі або проліків, мовелітиприл, мурацеїн А, м урацеїн В, мурацеїн як варіант, разом з фармацевтично прийнятним С, пентоприл, периндоприл, періадоприлат, піврозріджувачем або носієм, з одночасним, послідоалоприл, півоприл, хінаприл, хінаприл гідрохловним або окремим застосуванням одного або бірид, хінаприлат, раміприл, раміприлат, спіраприл, льше з наступних засобів, вибраних з групи спіраприл гідрохлорид, спіраприлат, спіроприл, інгібітор БПХЕ (білок переносу холестериловоспіроприл гідрохлорид, темокаприл, темокаприл го естеру), наприклад, [описаний у WO 00/38725 гідрохлорид, тепротид, трандолаприл, трандолапстор.7 стр.22 - стор.10, стр.17], що уведено як порилат, утибаприл, забіциприл, забіциприлат, зосилання; феноприл та зофеноприлат. Кращими інгібіторами антагоніст поглинання холестерину, наприАКФ для застосування згідно з представленим клад, азетидинони, як-то SCH 58235 та [описані у винаходом є раміприл, раміприлат, лізиноприл, US 5 767 115], які уведені як посилання; еналаприл та еналаприлат. Ще кращими АКФ інгіінгібітор БМП (білок мікросомального перенобіторами для застосування згідно з представлесу), наприклад, [описаний у Science, 282, 751-54, ним винаходом є раміприл та раміприлат. 1998], що уведено як посилання; Кращі антагоністи ангіотензину II, їх фармацепохідне нікотинової кислоти, залучаючи продувтично прийнятні солі, сольвати, сольвати таких кти з уповільненим вивільненням та комбінації, солей або проліки для застосування у комбінації зі наприклад, нікотинову кислоту (ніацин), аципімокс сполукою формули І залучають, але без обмежен 17 78050 18 ня, сполуки: кандесартан, кандесартан цилексемацевтично прийнятну сіль, сольват, сольват такої тил, лосартан, валсартан, ірбесартан, тасосартан, солі або проліки; у др угій одиничній дозованій фоселмісартан та епроартан. Особливо кращими рмі; та антагоністами ангіотензину II або їх фармацевтичc) контейнер, що містить вказані першу та друно прийнятними похідними для застосування згідгу дозовані форми. но з представленим винаходом є кандесартан та Згідно з іншою особливістю винаходу запрокандесартан цилексетил. поновано застосування сполуки формули І, або її Відтак згідно з додатковою особливістю винафармацевтично прийнятної солі, сольвату, сольходу, запропоновано спосіб лікування діабету типу вату такої солі або проліків, та одної з інших спо2 та асоційованих з ним ускладнень у теплокровлук, описаних тут, або її фармацевтично прийнятних тварин, як-то людини, що потребують такого ної солі, сольвату, сольвату такої солі або проліків, терапевтичного лікування, який залучає застосуу виробництві медикаменту для застосування у вання до вказаної тварини ефективної кількості лікуванні метаболічного синдрому або діабету тисполуки формули І, або її фармацевтично прийняпу 2 та асоційованих з ними ускладнень у теплотної солі, сольвату, сольвату такої солі або пролікровних тварин, як-то людини. ків при одночасному, послідовному або окремому Згідно з іншою особливістю винаходу запрозастосуванні з ефективною кількістю одної іншої поновано застосування сполуки формули І, або її сполуки, описаної тут, або фармацевтично прийнфармацевтично прийнятної солі, сольвату, сольятної солі, сольвату, сольвату такої солі або провату такої солі або проліків, та одної з інших споліків. лук, описаних тут, або її фармацевтично прийнятВідтак згідно з додатковою особливістю винаної солі, сольвату, сольвату такої солі або проліків, ходу, запропоновано спосіб лікування гіперліпідеу виробництві медикаменту для застосування у мічних станів у теплокровних тварин, як-то людилікуванні гіперліпідемічних станів у теплокровних ни, що потребує такого терапевтичного лікування, тварин, як-то людини. як залучає застосування до вказаної тварини ефеЗгідно з наступним аспектом представленого ктивної кількості сполуки формули І, або її фармавинаходу запропоновано комбінаційне лікування, цевтично прийнятної солі, сольвату, сольвату тащо залучає застосування ефективної кількості кої солі або проліків при одночасному, сполуки формули І, або її фармацевтично прийняпослідовному або окремому застосуванні з ефектної солі, сольвату, сольвату такої солі або пролітивною кількістю одної іншої сполуки, описаної тут, ків, як варіант, разом з фармацевтично прийнятабо її фармацевтично прийнятної солі, сольвату, ним розріджувачем або носієм, з одночасним, сольвату такої солі або проліків. послідовним або окремим застосуванням ефектиЗгідно з наступним аспектом винаходу запровної кількості одної з інших сполук, описаних тут, поновано фармацевтичну композицію, як містить або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату, сполуку формули І або її фармацевтично прийнятсольвату такої солі або проліків, як варіант, разом ну сіль, сольват, сольват такої солі або проліки, та з фармацевтично прийнятним розріджувачем або одну іншу сполук у, описану тут, або її фармацевносієм до теплокровної тварини, як-то людини, що тично прийнятну сіль, сольват, сольват такої солі потребує такого терапевтичного лікування або проліки, в асоціації з фармацевтично прийнятПриклади ним розріджувачем або носієм. Виміри 1Н ЯМР та 13С ЯМР здійснюють на спеЗгідно з наступним аспектом представленого ктрометрах Varian Mercury 300 або Varian UNITY винаходу запропоновано комплект, що містить plus 400, 500 або 600, працюючи при частотах 1Н сполуку формули І або її фармацевтично прийнят300. 400, 500 та 600МГц, відповідно, та при частону сіль, сольват, сольват такої солі або проліки, та тах 13С 75, 100, 125 та 150МГц, відповідно. Виміри одну іншу сполук у, описану тут, або її фармацевроблять на дельта-шкалі (δ). тично прийнятну сіль, сольват, сольват такої солі Якщо не вказано інше, хімічні зсуви представабо проліки. лено у млн -1 з розчинником як внутрішнім станЗгідно з наступним аспектом представленого дартом. винаходу запропоновано комплект, що містить: Скорочення a) сполуку формули І або її фармацевтично СРІ синдром резистентності до інсуліну прийнятну сіль, сольват, сольват такої солі або ТШХ тонко-шарова хроматографія проліки, у першій одиничній дозованій формі; НОВТ 1-гідроксибензотриазол-гідрат b) одну іншу сполуку, описану тут, або її фарDIB АН діізобутилалюміній гідрид мацевтично прийнятну сіль, сольват, сольват такої ДМСО диметилсульфоксид солі або проліки; у др угій одиничній дозованій фоЕtOАс етилацетат рмі; та DMF Ν,Ν-диметилформамід c) контейнер, що містить вказані першу та друТГФ тетрагідрофуран гу дозовані форми. ВЕРХ високоефективна рідинна хромаЗгідно з наступним аспектом представленого тографія винаходу запропоновано комплект, що містить: MeCN ацетонітрил a) сполуку формули І або її фармацевтично ТФОК трифлуороцтова кислота прийнятну сіль, сольват, сольват такої солі або Pd/C паладій на вугіллі проліки, разом з фармацевтично прийнятним розHATU О-(7-азабензотриазоліл-1-іл)-N,N,N',N'ріджувачем або носієм, у першій одиничній дозотетраметилуроній гексафлуорфосфат ваній формі; ДХМ ди хлорметан b) одну іншу сполуку, описану тут, або її фарTBTU О-(бензотриазол-1-іл)-N,N,N',N' 19 78050 20 тетраметилуронійтетрафлуорборат 7,52-7,56 (m, 1H), 7,75 (t, 1H), 8,00-8,03 (m, 1H). DIPEA Ν,Ν-діізопропілетиламін c) 2-[(4-{3-[бензил(гексил)аміно]-3DMAP 4-диметиламінопіридин оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота Трисамін Трис(гідроксиметил)амінометан Метил 2-[(4-{3-[бензил(гексил)аміно]-3ISOLUTE ® FLASH Si - колонка з оксидом сиоксопропіл}фенокси)метил]бензоат (61мг, ліцію, придатним для хроматографії 0,13ммоль) та гідроксид літію (7мг, 0,29ммоль) Борогідрид на полімерній підкладці - борогідрозчиняють у 3мл 1:1 суміші ТГФ та води у мікрорид на Amberlite IRA-400 від Aldrich хвильовій ампулі. Утворену реакційну суміш опроРХ-МС рідинна хроматографія - масмінюють у мікрохвильовій шафі при 120°С протяспектроскопія гом 40мін. t триплет Додають воду та ТГФ, випарюють під зменшеs синглет ним тиском. Залишок підкислюють 1М гідрохлориd дублет дною кислотою та екстрагують етилацетатом (´3). q квартет Органічні фази поєднують, промивають (водою, q vint квінтет розсолом), сушать (натрій сульфат) та випарюють. m мультиплет Сирий матеріал продукту подалі очищають препаbr широкий ративною ВЕРХ (застосовуючи градієнт bs широкий синглет CH3CN/10%CH3CN-вода фаза, що містить 0,1Μ dm дублет мультиплету NH4OAc, як елюент). 38мг (вихід 64%) чистого bt широкий триплет продукту отримують після сушки сублімацією. 1Н dd дублет дублетів ЯМР (ротамери, 400МГц, CDCI3): δ 0,86 (t, 3Н), Приклад 1 1,19-1,28 (m, 6H), 1,43-1,55 (m, 2H), 2,60, 2,69 (t, t, а) N-бензил-N-гексил-3-(42H), 2,92, 2,99 (t, t, 2H), 3,11, 3,36 (t, t, 2H), гідроксифеніл)пропан амід 4,43,4,61 (s, s, 2H), 5,52, 5,53 (s, s, 2H), 6,87-6,93 N-гексилбензиламін (0,6г, 3,136ммоль) та 3-(4(m, 2H), 7,05-7,09 (m, 2H), 7,14-7,33 (m, 5H), 7,36гідроксифеніл)пропіонову кислоту (0,52г 7,40 (m, 1H), 7,55-7,59 (m, 1H), 7,77 (t, 1H) та 8,123,136ммоль) змішують у ДМФ (10мл) та суміш 8,15 (m, 1H). 13 охолоджують. НОВТ (0,424г, 3,136ммоль) та реаC ЯМР (ротамери, 100МГц, CDCI3): δ 14,17, гент TBTU (1г, 3,136ммоль) додають, а потім 14,23, 22,73, 22,79, 26,75, 26,88,27,68, 27,72, 31,11, DIPEA (1,216г, 9,409ммоль). Суміш перемішують 31,26, 31,61, 31,82, 35,39, 35,68, 46,84, 47,48, при кімнатній температурі протягом ночі, а потім 48,72, 51,35, 68,42, 115,16, 115,22, 126,39, 127,15, випарюють. Утворену суміш розподіляють між 127,42, 127,49, 127,72, 128,23, 128,70, 129,10, етилацетатом та водним розчином гідрокарбонату 129,72, 131,31, 133,45, 133,81, 133,84, 137,10, натрію (насичен.). Водні порції екстрагують етила137,82, 140,88, 157,33, 157,40, 171,20, 173,10, цетатом та комбіновані органічні екстракти сушать 173,39. сульфатом магнію, а потім випарюють. ХроматогПриклад 2 рафія залишку на колонці (ISOLUTE® SI, 5г/25мл) а) N-(2,4-дифлуорбензил)-N-гептиламін застосовуючи етилацетат/гептан (10:90, тоді Гептиламін (345,6мг, 3ммоль) додають у 2,425:75), як елюенту, дає 760мг потрібного продукту, дифлуорбензальдегід (440,5мг, 3,1ммоль) у МеОН вихід 71%. (3мл) та триметилортоформіат (2мл), а потім оц1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,84 (t, тову кислоту (0,05мл). Суміш тримають у мікро3Н), 1,16-1,27 (m, 6H), 1,41-1,51 (m, 2H), 2,55,2,63 хвильовій шафі (синтезатор Сміта) при 150°С про(t, t, 2H), 2,88, 2,94 (t, t, 2H), 3,09, 3,31(t, t, 2H), тягом 10 хвилин. Тоді додають ДХМ (3мл) та 4,40,4,57 (s, s, 2H), 6,69, 6,73 (d, d, 2H), 6,98 (d, подалі борогідрід на полімерній підкладці (1,2г, 2H), 7,05,7,07 (d, d, 2H), 7,14 (d, 1H) та 7,21-7,31 ~3ммоль). Суміш струшують протягом ночі та до(m, 5H) дають ще борогідрид на полімерній підкладці b) Метил 2-[(4-{3-[бензил (гексил)аміно]-3(1,2г). Суміш струшують протягом уікенду, а потім оксопропіл}фенокси)метил]бензоат фільтрують та випарюють. Залишок додають у N-бензил-N-гексил-3-(4колонку ((ISOLUTE®PRS, 10г) та елюють MeCN, гідроксифеніл)пропанамід (183мг, 0,54ммоль), MeOH, а потім МеОН (наси-чен. NH3). Отримують метил 2-(бромметил)бензоат (136мг, 0,59ммоль) 536мг маслянистого продукту, ви хід 72%. 1 та карбонат калію (112мг, 0,81ммоль) змішують у Н ЯМР (400МГц, CDCI3): δ 0,87 (t, 3Н), 1,23ацетонітрилі. Суміш перемішують при 66°С протя1,32 (m, 8H), 1,45-1,52 (m, 2H), 2,59 (t, 2H), 3,78 (s, гом ночі. Розчинник випарюють під зменшеним 2H), 6,75-6,85 (m, 2H) та 7,27-7,33 (m, 1H) тиском та залишок розчиняють в етилацетаті. Орb) (4-([2ганічну фазу промивають (водою ´2, розсолом ´1), (Метоксикарбоніл)бензил]тіо)феніл)оцтова киссушать (N2SO4) та випарюють. Подальша очистка лота препаративною ВЕРХ (застосовуючи градієнт 4-Меркаптофенілоцтову кислоту (995мг, CH3CN/10%CH3CN-вода фаза, що містить 0,1Μ 5,915ммоль) у ТГФ (15мл) охолоджують у льодяній NH4OAc, як елюент) дає 91мг (вихід 34%) потріббані та додають гідрид натрію (55-65%, 520мг, ного продукту. 1Н ЯМР (ротамери, 400МГц, 13ммоль). Суміш перемішують протягом 30 хвиCDCI3,): δ 0,84-0,88 (m, 3Н), 1,19-1,29 (m, 6H), 1,42лин, а потім додають метиловий естер 21,53 (m, 2H), 2,57, 2,65 (t, t, 2H), 2,92, 2,99 (t, 2H), бромметил-бензойної кислоти (1,49г, 6,507ммоль) 3,10, 3,34 (t, t, 2H), 3,89, 3,90 (s, s, 3H), 4,42, 4,60 у ТГФ (5мл). Утворену суміш перемішують протя(s, s, 2H), 5,47, 5,48 (s, s, 2H), 6,86-6,93 (m, 2H), гом ночі та температурі дають дійти до кімнатної. 7,07 (t, 2H), 7,14-7,19 (m, 2H), 7,21-7,38 (m, 4H), Воду уводять краплями та суміш перемішують 21 78050 22 приблизно 20 хвилин. Тоді випарюють для вида22,51, 26,78, 26,85, 27,28, 28,56, 28,85, 28,93, лення ТГФ. Залишок підкислюють 1% гідрохлори31,65, 31,70, 38,22, 39,94, 40,25, 41,57, 41,60, дною кислотою, рН~3, а потім екстрагують етила45,16, 46,48, 47,94, 103,53 (t), 104,26(t), 111,50(br), цетатом. Органічні екстракти поєднують, сушать 111,71(br), 119,65(d), 120,37(d), 127,05, 128,95 (br), сульфатом магнію та випарюють. Хроматографія 129,61, 129,68, 131,15, 131,66(d), 131,76(d), 132,41, залишку на колонці (ISOLUTE®SI, 20г/70мл), за132,80, 132,88, 133,85, 134,03, 140,43, 160,58 (dd), стосовуючи , як елюенту, ДХМ, тоді МеОН/ДХМ 160,91(dd), 162,21(dd), 162,53(dd), 170,46, 171,44 (1:99), дає 224мг потрібного продукту, ви хід 65%. та 171,54. 1 Н ЯМР (500МГц, CDCI3): δ 3,62 (s, 2H), 3,90 (s, Приклад 3 3Н), 4,52 (s, 2H), 7,17 (d, 2H), 7,23-7,40 (m, 5H) та a) (4-{[27,94 (d, 1Н)). (Метоксикарбоніл)бензил]окси}феніл)оцтова кисc) Метил 2-{[(4-(2-[(2,4лота дифлуорбензил)(гептил)аміно]-24-Гідроксифенілоцтову кислоту (760мг, оксоетилiфеніл)тіо]-метил}бензоат 4,995ммоль) розчиняють в етанолі (99,5%, 20мл). (4-{[2Додають гідроксид калію (560,5мг, 9,99ммоль). (метоксикарбоніл)бензил]тіо}феніл)оцтову кислоту Суміш перемішують при кімнатній температурі (581мг, 1,836ммоль) та N-(2,4-дифлуорбензил)-Nпротягом 30 хвилин. Тоді уводять краплями мегептиламін (465,3мг, 1,968ммоль) поєднують у тиловий естер 2-бромметилбензойної кислоти ДМФ та суміш охолоджують у льодяній бані. НОВТ (1144,2мг, 4,995ммоль). Утворену суміш гріють до (260,6мг, 1,928ммоль) та TBTU (619мг, кипіння під зворотним холодильником протягом 2 1.928ммоль) додають, а потім DIPEA (747,7мг, годин, а потім випарюють у вакуумі досуха. У за5,785ммоль). Суміш перемішують при кімнатній лишок додають воду та етилацетат і фази відотемпературі протягом ночі, а потім випарюють. кремлюють. Водну фазу підкислюють 10% гідроУтворену суміш розподіляють між етилацетатом та хлоридною кислотою, рН~5, а потім екстрагують водним розчином гідрокарбонату натрію (насиетилацетатом. Органічну фазу сушать сульфатом чен.). Водну порцію екстрагують етилацетатом та магнію та випарюють у вакуумі досуха. Хроматогкомбіновані органічні екстракти сушать сульфатом рафія залишку на колонці (ISOLUTE®SI, 5г/6мл), із магнію, а потім випарюють. Хроматографія залишзастосуванням ДХМ, МеОН/ДХМ (1:99), як елюенку на колонці (ISOLUTE®SI, 20г/70мл), застосовуту, дає потрібний продукт (262мг), вихід 17:5%. 1 ючи етилацетат/гептан (5:95, тоді 10:90), як елюеН ЯМР (500МГц, CDCI3): δ 3,61 (s, 2H), 3,91 (s, нту, дає 767мг потрібного продукту, ви хід 77%. 3Н), 5,50 (s, 2H), 6,97 (d, 2H), 7,22 id, 2H), 7,39 (t, 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,881H), 7,57 (t, 1H), 7,76 (d, 1H) та 8,04 (d, 1H). 0,93 (m, 3Н), 1,23-1,34 (m, 8H), 1,48-1,57 (m, 2H), b) Метил 2-Г(4-{2-[бензил(гексил)аміно]-23,19-3,24, 3,30 - 3,37 (m, m, 2H), 3,67-3,74 (m, 2H), оксоетил}фенокси)метил]бензоат 3,92 (s, 3H), 4,50, 4,63 (s, s, 2H), 4,53 (s, 2H), 6,78(4-{[26,89 (m, 2H), 7,00-7,40 (m, 8H) та 7,95 (d, 2H). (Метоксикарбоніл)бензил]окси}феніл)оцтову кисd) 2-{[(4-{2-[(2,4лоту (50мг, 0,166ммоль) розчиняють у ДХМ (2мл), Дифлуорбензил](гептил)аміно]-2додають N-гексилбензиламін (38,2мг, 0,2ммоль), оксоетил)феніл)тіо]метил]бензойна кислота тоді додають EDC (38,3мг, 0,2ммоль), а потім доМетил 2-{[(4-{2-[(2,4дають ДМАР (24,4мг, 0,2ммоль). Суміш перемішудифлуорбензил)(гептил)аміно]-2ють при кімнатній температурі протягом ночі. 1% оксоетил}феніл)тіо]метил}-бензоат (31мг, НСІ (1мл) та воду (1мл) додають у суміш. Дві фази 0,057ммоль) розчиняють у ТГФ (1мл) та охоловідокремлюють, застосовуючи фільтр Ватмана. джують у льодяній бані. Додають гідроксид літію Отриманий органічний розчин випарюють у вакуу(2мг, 0,075ммоль) у воді (1мл). Після додавання мі і маслянистий продукт (71 мг) залишають, а тоді охолоджувальну баню видаляють та суміш перевикористовують безпосередньо на наступному мішують протягом ночі. РХ-МС показує наявність етапі. 1 дуже малої кількості продукту. Додають більше Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,86гідроксиду літію (3мг) та суміш переміщують про0,91 (m, 3Н), 1,22-1,32 (m, 6H), 1,47-1,58(m, 2H), тягом більше 6 діб і ВЕРХ показує приблизно 30% 3,21, 3,39 (t, t, 2H), 3,65, 3,75 (s, s, 2H), 3,93 (s, 3H), продукту. Додають ще (3мг) гідроксид літію та су4,53, 4,64 (s, s, 2H), 5,51, 5,52 (s, s, 2H), 6,96, 6,99 міш перемішують протягом ще 13 діб, випарюють (d, d, 2H), 7,16 (d, 2H), 7,23-7,42 (m, 6H), 7,59 (t, у вакуумі для видалення ТГФ. Залишок підкислю1H), 7,78 (d, 1H) та 8,06 (d, 1H). ють 10% гідрохлоридною кислотою, рН~3, та екстc) 2-[(4-{2-[Бензил(гексил)аміно]-2оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота рагують етилацетатом (´2). Органічні фази поєдМетил 2-[(4-{2-[бензил(гексил)аміно]-2нують, сушать сульфатом магнію та випарюють. оксоетил}фенокси)метил]бензоат (70мг, Хроматографія залишку на колонці (ISOLUTE®SI, 500г/3мл) із застосуванням ДХМ, МеОН/ДХМ 0,148ммоль) у ТГФ (2мл) охолоджують у льодяній бані. Гідроксид літію (7,08мг, 0,296ммоль) у воді (0,5:99,5), як елюенту, дає 17мг потрібного продук(1мл) уводять краплями. Охолоджувальну баню ту, вихід 56%. 1 тоді видаляють та суміш перемішують протягом Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,89ночі. ВЕРХ показує, що реакція не завершується, 0,93 (m, 3Н), 1,25-1,34 (m, 8H), 1,52-1,60 (m, 2H), 3,27, 3,37 (t, t, 2H), 3,71, 3,76 (s, s, 2H), 4,55, 4,65 додають більше гідроксиду літію (0,2М, 0,5мл) . Реакційну суміш перемішують протягом більше 4 (s, s, 2H), 6,80-6,92 (m, 2H), 7,07-7,17 (m, 2H), 7,28діб, тоді випарюють у вакуумі для видалення ТГФ. 7,37 (m, 5H), 7,42-7,47 (m, 1H) та 7,95-7,98 (m, 1H). 13 Залишок підкислюють 1% гідрохлоридною кислоC ЯМР (ротамери, 125МГц, CDCI3): δ 14,01, 23 78050 24 тою, рН=3-4, та екстрагують етилацетатом. Оргата 8,15(d, 1H). 13 нічну фазу сушать сульфатом магнію та випарюC ЯМР (ротамери, 125МГц, CDCI3): δ 14,00, ють. Хроматографія залишку на колонці 22,51, 26,75, 26,84, 27,26, 28,54, 28,86, 28,94, (ISOLUTE®SI, 2г/6мл) із застосуванням ДХМ, Ме31,64, 31,70, 39,75, 40,08, 41,39, 45,05, 46,30,47,98, ОН/ДХМ (1:99, а потім 2:98), як елюенту, дає 24мг 68,21, 103,67 (t), 104,12 (t), 111,52 (d), 115,17, потрібного продукту, ви хід 35%. 119,80 (d), 120,52 (d), 126,97, 127,04, 127,21, 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,86128,81 (br), 129,78, 129,85, 131,52, 133,16, 140,33, 0,90 (m, 3Н), 1,21-1,30 (m, 6H), 1,46-1,58(171, 2H), 157,65, 160,48 (dd), 160,85 (dd), 162,13 (dd), 162,46 3,21, 3,39 (t, t, 2H), 3,68, 3,77 (s, s, 2H), 4,53, 4,65 (dd), 171,01, 171,93 та 171,99. (s, s, 2H), 5,53, 5,54 (s, s, H), 6,95, 6,98 (d, d, 2H), Приклад 5 7,14-7,17 (m, 2H), 7,22-7,33 (m, 4H), 7,35-7,43 (m, a) N-(2,4-дифлуорбензил)-N-гептил-3-(42H), 7,60 (t, 1H), 7,80 (d, 1H) тa 8,16(d, 1H). гідроксифеніл)пропан амід 13 C ЯМР (ротамери, 125МГц, CDCI3): δ 13,94, 3-(4-Гідроксифеніл)пропіонову кислоту (108мг, 13,97, 22,49, 22,53, 26,47, 26,57, 27,29, 28,36, 0,650ммоль) розчиняють у ДМФ. Додають N-(2,431,40, 31,50, 39,82, 40,12, 46,50, 47,43, 48,28, дифлуорбензил)-N-гептиламiн (164,7мг, 51,31, 68,21, 115,15, 126,25, 126,85, 127,20, 127,24, 0,682ммоль). Суміш охолоджують у льодяній бані. 127,36, 127,48, 127,54, 127,97,128,49, 128,87, Додають TBTU (219мг, 0,682ммоль) та потім 129,76, 129,89, 131,52, 133,18, 136,80, 137,57, DIPEA (0,238мл, 1,365ммоль). Суміш перемішують 140,40, 157,59, 170,60, 171,76 та 172,03. протягом ночі та температурі дають досягнути кімПриклад 4 натної температури. Додають етилацетат та вода) Метил 2-[(4-{2-[(2,4ний розчин гідрокарбонату натрію (насичен.), а дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2потім дві фази відокремлюють. Водну фазу екстоксоетил}фенокси)метил]-бензоат рагують етилацетатом. Органічні фази поєднують а) N-(2,4-Дифлуорбензил)-N-гептиламін та сушать сульфатом магнію та випарюють. Хро(106мг, 0,44ммоль) додають у (4-{[2матографія залишку на колонці (ISOLUTE®SI, (метоксикарбоніл)бензил]окси}феніл)оцтову кис5г/І5мл) із застосуванням ДХМ, а потім МеОН/ДХМ лоту (120мг, 0,4ммоль) у ДХМ (10мл), а потім EDC (1:99). як елюенту, дає 223мг потрібного продукту, (84,3мг, 0,44ммоль), а потім ДМАР (54мг, вихід 88%. 1 0,44ммоль). Суміш перемішують при кімнатній Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,86температурі протягом ночі, а потім промивають 1% 0,90 (m, 3Н), 1,21-1,31 (m, 8H), 1,47-1,53 (m, 2H), гідрохлоридною кислотою, водою та розсолом та 2,60, 2,67 (t, t, 2H), 2,85-2,96 (m, 2H), 3,15, 3,32 (t, t, сушать сульфатом магнію та випарюють. Хрома2H), 4,41, 4,60 (s, s, 2H), 6,75-6,85 (m, 4H), 6,90тографія залишку на колонці (ISOLUTE®SI, 6,96, 7,12-7,18 (m, m, 1H) та 7,00, 7,04 (d, d, 2H). 5г/15мл) із застосуванням ДХМ та МеОН/ДХМ b) Метил 2-[(4-{3-[2,4(0,5:99,5), як елюенту, дає 155мг потрібного продудифлуорбензил)(гептил)аміно]-3кту, ви хід 74%. оксопропіл}фенокси)метил]-бензоат 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,88N-(2,4-дифлyopбeнзил)-N-гeптил-3-(40,92 (m, 3Н), 1,23-1,33 (m, 8H), 1,49-1,57 (m, 2H), riдpoкcифeнiл)пpoпaнaмiд (195мг, 0,501ммоль), 3,24, 3,34 (t, t, 2H), 3,66, 3,72 (s, s, 2H), 3,92 (s, 3H), метилового естеру 2-бромметилбензойної кислоти 4,53, 4,62 (s, s, 2H), 5,50, 5,51 (s, s, 2H), 6,77-6,89 (120,4мг, 0,526ммоль) та безводного карбонату (m, 2H), 6,95, 6,98 (d, d, 2H), 6,99-7,04, 7,29-7,33 калію (103мг, 0,751ммоль) змішують у ацетонітрилі (m, m, 1H), 7,17,7,20 (d, d, 2H), 7,39(t, 1H), 7,57 (t, (15мл). Суміш гріють до кипіння під зворотним хо1H), 7,75-7,79 (m, 1H) та 8,05 (d, 1H). лодильником протягом ночі, а потім випарюють b) 2-[(4-{2-{[2,4-Дифлуорбензил)(гептил)аміно]досуха. Додають воду та етилацетат та дві фази 2-оксоетил}фенокси]метил]бензойна кислота відокремлюють. Органічну фазу сушать сульфаЛітій гідроксид (13,3мг, 0,554ммоль) у воді том магнію та випарюють. Хроматографія залишку (1,5мл) додають у 70335 метил 2-[(4-{2-[(2,4на колонці (ISOLUTE®SI, 2г/6мл) із застосовувандифлуорбензил)(гептил)аміно]-2ням суміші гептан/ДХМ (50:50), тоді ДХМ, а потім оксоетил}фенокси)метил]бензоат (145мг, МеОН/ДХМ (0,5:99,5), як елюенту, дає 187мг по0,277ммоль), розчинений у ТГФ (3мл). Суміш тоді трібного продукту, ви хід 69,5%. 1 витримують у мікрохвильовій шафі (синтезатор Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,87Сміта) при 150°С протягом 7 хвилин, а потім випа0,91 (m, 3Н), 1,21-1,31 (m, 8H), 1,44-1,56 (m, 2H), рюють для видалення ТГФ. Залишок підкислюють 2,56-2,69 (m, 2H), 2,91-3,01 (m, 2H), 3,14, 3,32 (t, t, 1% гідрохлоридною кислотою, рН~4, а потім екст2H), 3,92 (s, 3H), 4,43, 4,59 (s, s, 2H), 5,49 (s, 2H), 6,75-6,97 (m, 4H), 7,08-7,28 (m, 3H), 7,38 (t, 1H), рагують етилацетатом (´2). Органічні порції поєд7,56 (t, 1H), 7,76 (d, 1H) та 8,04 (d, 1H), нують, промивають розсолом, сушать сульфатом c) 2-[(4-{3-[(2,4-Дифлуорбензил)(гептил)аміно]магнію, а потім випарюють. Хроматографія залишку на колонці (ISOLUTE®SI, 2г/6мл) із застосуван3-оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота Літій гідроксид (13,3мг, 0,554ммоль) у воді ням ДХМ і МеОН/ДХМ (0,5:99,5, тоді 1:99), як елю(1мл) додають у метил 2-[(4-{3-[(2,4енту, дає 94мг потрібного продукту, ви хід 67%. 1 дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,86оксопропіл}фенокси]метил]бензоат (140мг, 0,91 (m, 3Н), 1,22-1,32 (m, 8H), 1,48-1,56 (m, 2H), 3,23, 3,34 (t, t, 2H), 3,68, 3,73 (s, s, 2H), 4,52,4,63 (s, 0,277ммоль), розчинений у ТГФ (2мл). Суміш тоді розміщують у мікрохвильовій шафі (синтезатор s, 2H), 5,53 (s, br, 2H), 6,77-6,87 (m, 2H), 6,93- 6,97 Сміта) при 150°С протягом 7 хвилин, а потім випа(m, 2H), 6,99-7,04, 7,27-7,33 (m, m, 1H), 7,16-7,20 рюють для видалення ТГФ. Залишок підкислюють (m, 2H), 7,41 (t, 1H), 7,58-7,62 (m, 1H), 7,78 (d, 1H) 25 78050 26 1% гідрохлоридною кислотою, рН~4, та екстрагутрафлуорборат (0,85г, 2,65ммоль) та діізопропілетиламін (0,65г, 5,05ммоль) . Суміші дозволяють ють етилацетатом (´2). Органічні екстракти поєднують та промивають розсолом та сушать сульфанагрітися до кімнатної температури та перемішують протягом ночі. Додають EtOAc (15мл) та оргатом магнію, а потім випарюють. Хроматографія нічну фаз у промивають двома порціями гідрокарзалишку на колонці (ISOLUTE®SI, 2г/6мл) із застобонату натрію (водн., 10мл). EtOAc видаляють суванням ДХМ, тоді МеОН/ДХМ (1:99), як елюенту, випарюванням і сирий продукт очищають препадає 121 мг потрібного продукту, вихід 83%. 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,89ративною ВЕРХ (починаючи з ацетонітрил/буфер 60/40, а потім концентрацію ацетонітрилу збіль0,93 (m, 3Н), 1,24-1,33 (m, 8H), 1,49-1,58 (m, 2H), шують до 100%, буфером є суміш ацетоніт2,64-2,74 (m, 2H), 2,97-3,03 (m, 2H), 3,17, 3,37 (t, t, рил/вода 10/90 та ацетат амонію (0,1М, колонка 2H), 4,46, 4,65 (s, s, 2H), 5,58, 5,59 (s, s, 2H), 6,786,87 (m, 2H), 6,94-6,97 (m, 2H), 6,99-7,04, 7,27-7,31 KR-100-7-C8, 50мм ´250мм, потік 40мл/хвил). Фра(m, m, 1H), 7,14, 7,17 (d, d, 2H), 7,42-7,45 (m, 1H), кції, що містять продукт, поєднують та ацетонітрил 7,61-7,64 (m, 1H), 7,82-7,85 (m, 1H) та 8,19-8,22 (d, видаляють випарюванням. Додають ЕtOАс (10мл) 1H), та органічну фазу промивають двома порціями 13 C ЯМР (ротамери, 125МГц, CDCI3): δ 13,96, розсолу та сушать сульфатом магнію. Розчинник 22,46, 22,49, 26,67, 26,85, 27,38, 28,57, 28,80, видаляють випарюванням та отримують 1,10г ме28,94, 30,69, 30,84, 31,58, 31,67, 35,01, 35,26, тил 2-{[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-341,63, 44,76, 44,78, 46,43, 47,78, 68,15, 103,60(t), оксопропіл}феніл)тіо]метил}-бензоату (ви хід 104,07(t), 111,41(dd), 111,49 (dd), 114,91, 119,74 82,2%). 1 (d), 120,45 (d), 126,86, 127,'2, 128,53 (br), 129,40, Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,89 (t, 131,49, 131,58, 133,15, 133,32, 140,54, 157,12, 3Н), 1,22-1,32 (m, 8H), 1,47-1,55 (m, 2H), 2,55, 2,66 160,33 (dd), 160,81 (ad), 162.07 (dd), 162,33 (dd), (t, t, 2H), 2,95-3,01(m, 2H), 3,16, 3,33 (t, t, 2H), 3,89, 171,07, 173,04 та 173,11. 3,90 (s, s, 3H), 4,44, 4,60 (s, s, 2H), 4,50,4,51 (s, s, Приклад 6 2H), 6,76-6,85 (m, 2H), 6,92-6,96, 7,20-7,25 (m, m, а) 3-(4-Меркаптофеніл)пропанову кислоту 4H), 7,07, 7 12 (d, d, 2H), 7,27-7,31 (m, 1H), 7,32(2,0г, 10,97ммоль) розчиняють у сухому ТГФ 7,34 (m, 1H) та 7,91-7,92 (m, 1H). (60мл) та охолоджують до 0°С. Додають гідрид c) 2-{[(4-{3-[(2,4натрію (0,64г, 24,1ммоль). Суміш перемішують Дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3протягом 30 хвилин, додають краплями метил 2оксопропіл}феніл)тіо](бромметил)бензоат (2,77г, 12,07ммоль), розчинеметил)бензойна кислота ний у сухому ТГФ (10мл). Розчину дають нагрітися Метил 2-{[(4-{3-[(2,4до кімнатної температури та перемішують протядифлуорбензил)(гептил)аміно]-3гом ночі. Додаванням води (10мл) краплями дезаоксопропіл}феніл)тіо]-метил}бензоат (1,05г, ктивують залишки гідриду натрію. Розчинник ви1,89ммоль) розчиняють у ЕtOН (95%, 5мл), додадаляють випарюванням, та залишок підкислюють ють гідроксид калію. (0,21г, 3,77ммоль). Реакцію до рН3 (НСІ 1%). Водну фаз у промивають EtOAc проводять в одиничному блоці мікрохвильової шафи (7 хвилин, 150°С). Закінчують додаванням (3´10мл). Органічні фази поєднують, сушать сульфатом магнію та випарюють. Сирий матеріал ЕtOАс (5мл) та промиванням НСІ (2´5мл, 1М). Орочищають препаративною ВЕРХ (починаючи 3 ганічний шар сушать сульфа том магнію та розчинсуміші ацетонітрил/буфер 60/40, а потім концентник видаляють випарюванням з утворенням 0,96г рацію ацетонітрилу збільшують до 100%, буфером 2-{[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3є суміш ацетонітрил/вода 10/90 та ацетат амонію оксопропіл}феніл)тіо]метил}бензойної кислоти (вихід 94,3%). (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм ´250мм, потік 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,8840мл/мін). Фракції, що містять продукт, поєднують 0,92 (m, 3Н), 1,24-1,33 (m, 8H), 1,50-1,57 (m, 2H), та ацетонітрил видаляють випарюванням. Додають EtOAc (10мл) та органічну фазу промивають 2,64, 2,69 (t, t, 2H), 2,95-3,00 (m, 2H), 3,20, 3,34 (t, t, 2H), 4,48,4,62 (s, s, 2H), 4,55, 4,56 (s, s, 2H), 6,79двома порціями розсолу та сушать сульфатом 6,87 (m, 2H), 6,98-7,03, 7,27-7,30 (m, m, 2H), 7,06магнію. Видалення розчиннику випарюванням дає 7,10 (m, 2H), 7,22-7,24 (m, 2H), 7,31-7,36(m, 1H), 2,26г 3-(4-{[27,41-7,46 (m, 1H) та 8,03 (d, 1H). (метоксикарбоніл)бензил]тіо}феніл)пропанової 13 кислоти (вихід 62,3%). C ЯМР (ротамери, 125МГц, CDCI3): δ 14,01, 1 22,51, 22,54, 26,74, 26,90, 27,42, 28,63, 28,86, H ЯМР (500МГц, CDCI3): δ 2,66 (t, 2H), 2,92 (t, 28,98, 30,92, 31,18, 31,64, 31,72, 34,65, 38,23, 2H), 3,90 (s, 3Н), 4,51 (S, 2H), 7,10 (d, 2H), 7,19 (d, 38,28, 41,58, 44,82, 46,44, 47,77, 103,46(t), 1H), 7,25 (d, 2H), 7,29 (t, 1H), 7,36 (t, 1H) та 7,94 (d, 104,14(t). 111,52(dd), 111,58(dd), 119,74(dd), 1H). b) Метил 2-{[(4-(3-[(2,4120,51(dd), 127,09,128,55, 128,63, 129,03, 131,16, 131,49, 131,55, 131,78 (dd), 132,30, 132,50, 132,96, дифлуорбензил)(гептил)аміно]-3140,04, 140,11, 140,59, 140,68, 160,47(dd), оксопропіл}феніл)тіо]-метил)бензоат 160,88(dd), 162.l6(dd), 162,44(dd), 170,88(br), N-(2,4-дифлуорбензил)-N-гептиламiн (0,64г, 172,56 та 172,59. 2,65ммоль) розчиняють у ДМФ (10мл), додають 3(4-{[2Приклад 7 a) N-(2,3-диметоксибензил)бутан-1-амн (0,59г, (метоксикарбоніл)бензил]тіо}феніл)пропанову кис2,65ммоль) розчиняють у ДМФ (10мл), додають 3лоту (0,80г, 2,41ммоль) та суміш охолоджують до (4-гідроксифеніл)пропанову кислоту (0,4г, 0°С. Додають N-[(1Н-1,2,3-бензотриазол-1-токси)2,41ммоль), та суміш охолоджують до 0°С. Дода(диметиламіно)метилен]-N-метилметанамоній те 27 78050 28 ють N-[(1Н-1,2,3-бензотриазол-1цію проводять в одиничному блоці мікрохвильової ілокси)(диметиламіно)метилен]-Nшафи (150°С, 7 хвилин). Додають ЕtOАс (10мл) та метилметанамоній тетрафлуорборат (0,85г, промивають органічну фазу двома порціями НСІ 2,65ммоль) та діізопропілетиламін (0,65г, (2´5мл, 1М). Органічну фазу сушать сульфатом 5,05ммоль). Суміш дають нагрітися до кімнатної магнію та розчинник видаляють випарюванням, з температури та перемішують протягом ночі. Доутворенням 13мг 2-[(4-{3-[бутил(2,3дають ЕtOАс (15мл) та органічну фазу промивають диметоксибензил)аміно]-3двома порціями гідрокарбонату натрію (водн., оксопропіл}фенокси)метил]-бензойної кислоти 10мл). ЕtOАс видаляють випарюванням і сирий (вихід 89%). 1 продукт очищають препаративною ВЕРХ (починаН ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,89ючи з ацетонітрил/буфер 60/40, а потім концент0,95 (m, 3Н), 1,24-1,35 (m, 2H), 1,48-1,57 (m, 2H), рацію ацетонітрилу збільшують до 100%, буфером 2,62, 2,69 (t, t, 2H), 2,95, 3,01 (t, t, 2H), 3,17, 3,36 (t, є суміш ацетонітрилу/води 10/90 та ацетату амоt, 2H), 3,83, 3,85, 3,88, 3,89 (s, s, s, s, 6H), 4,48, 4,71 нію (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм ´250мм, (s, s, 2H), 5,50, 5,52 (s, s, 2H), 6,62, 6,75 (d, d, 1H), потік 40мл/хвил). Фракції, що містять продукт, по6,84-6,97 (m, 3H), 7,00-7,04 (m, 1H), 7,11, 7,19 (d, d, єднують та ацетонітрил видаляють випарюванням. 2H), 7,38-7,42 (m, 1H), 7,56-7,60 (m, 1H), 7,78 (t, Додають ЕtOАс (10мл) та органічну фазу проми1H) та 8,04-8,07 (m, 1H). 13 вають двома порціями розсолу та сушать сульфаC Я МР (ротамери, 125 МГц, CDCI3): δ 13,76, том магнію. Розчинник видаляють випарюванням 13,85, 20,02, 20,21, 29,55, 30,30, 30,69, 30,84, та отримують 1,08г N-бутил-N-(2,330,96, 35,13,35,34, 42,60, 46,17, 46,37, 47,20, 55,69, диметоксибензил)-3-(4-гiдроксифеніл)пропанаміду 55,75, 60,35, 61,74, 68,20, 111,23, 111,79, 114,88, (вихід 82,3%). 114,96, 118,79, 120,88, 124,15, 124,21, 126,81, 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,85127,18, 127,26, 129,46, 130,51, 131,25, 131,52, 0,89 (m, 3Н), 1,20-1,30 (m, 2H), 1,44-1,53 (m, 2H), 133,23, 133,65, 140,59, 146,50, 147,17, 152,48, 2,60, 2,65 (t, t, 2H), 2,88, 2,94 (t, t, 2H), 3,13, 3,33 (t, 152,61, 157,02, 157,10, 170,79, 172,93 та 173,25. t, 2H), 3,78, 3,80 3,83, 3,85 (s, s, s, s, 6H), 4,43,4,68 Приклад 8 (s, s, 2H), 6,57, 6,67 (d, d, 1H), 6,74-6,86 (m, 3Н) та а) N-(2,3-Диметоксибензил)-N-гептиламін 6,95-7,05 (m, 3H). (0,70г, 2,65ммоль) розчиняють у ДМФ (10мл), доb) N-бутил-N-(2,3-диметоксибензил)-3-(4дають 3-(4-гідроксифеніл)пропанову кислоту (0,4г, гідроксифеніл)пропанамід (50мг, 0,13ммоль) та 2,41ммоль), та суміш охолоджують до 0°С. Додаметил 2-(бромметил)бензоат (0,034г, 0,15ммоль) ють N-[(1Н-1,2,3-бензотриазол-1розчиняють у ацетонітрилі (10мл) та додають карілокси)(диметиламіно)метилен]-Nбонат калію (37мг, 0,27ммоль). Суміш перемішуметилметанамоній тетрафлуорборат (0,85г, ють при 60°С протягом трьох годин. Додають три2,65ммоль) та діізопропілетиламін (0,65г, самін на полімерній підкладці (0,3екв.) та 5,05ммоль). Суміші дають нагрітися до кімнатної перемішують протягом ночі. Полімер відфільтротемператури та перемішують протягом ночі. Довують та розчинник видаляють випарюванням. дають ЕtOАс (15мл) та органічну фазу промивають Додають ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промидвома порціями гідрокарбонату натрію (водн., вають 3 порціями води. Після сушки сирого проду10мл). ЕtOАс видаляють випарюванням і сирий кту (магній сульфат) розчинник видаляють випапродукт очищають препаративною ВЕРХ (починарюванням. Залишок очищають препаративною ючи з суміші ацетонітрил/буфер 60/40, а потім ВЕРХ (починаючи з ацетонітрилу/буферу 60/40, а концентрацію ацетонітрилу збільшують до 100%, потім концентрацію ацетонітрилу збільшують до буфером є суміш ацетонітрил/вода 10/90 та аце100%, буфером є суміш ацетонітрилу/води 10/90 тат амонію (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм та ацетату амонію (0,1М, колонка KR-100-7-C8, ´250мм, потік 40мл/хвил). Фракції, що містять про50мм ´250мм, потік 40мл/хвил). Фракції, що місдукт, поєднують та ацетонітрил видаляють випатять продукт, поєднують та ацетонітрил видалярюванням. Додають ЕtOАс (10мл) та органічну ють випарюванням. Додають ЕtOАс (10мл) та орфазу промивають двома порціями розсолу та суганічну фаз у промивають двома порціями розсолу шать сульфа том магнію. Розчинник видаляють та суша ть сульфатом магнію. Видалення розчинвипарюванням та отримують 0,98г N-(2,3нику випарюванням дає 15мг метил 2-[(4-{3диметоксибензил)-гептил-3-(4[бутил(2,3-диметоксибензил)аміно]-3оксопрогідроксифеніл)пропанаміду (ви хід 70%). 1 піл}фенокси)метил]бензоату (21,4%). Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,851 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,890,89 (m, 3Н), 1,20-1,30 (m, 8H), 1,4?-1,56 (m, 2H), 0,95 (m, 3Н), 1,24-1,35 (m, 2H), 1,48-1,57 (m, 2H), 2,62, 2,67 (t, t, 2H), 2,89, 2,95 (t, t, 2H), 3,14, 3,33 (t, 2,62, 2,69 (t, t, 2H), 2,95, 3,01 (t, t, 2H), 3,17, 3,36 (t, t, 2H), 3,79, 3,80, 3,84, 3,85 (s, s, s, s, 6H), 4,45, 4,69 t, 2H), 3,83, 3,86, 3,89, 3,90, 3,93, 3,94 (s, s, s, s, s, (s, s, 2H), 6,58, 6,68 (d, d, 1H), 6,74-6,88 (m, 3Н) та s, 9H), 4,48, 4,71 (s, s, 2H), 5,50, 5,52 (s, s, 2H), 6,96-7,05 (m, 3H). 6,62, 6,75 (d, d, 1H), 6,84-6,97 (m, 3H), 7,00-7,04 (m, N-(2,3-диметоксибензил)-N-гептил-3-(41H), 7,11, 7,19 (d, d, 2H), 7,38-7,42 (m, 1H), 7,56гідроксифеніл)пропанамід 0,196г, 0,47ммоль) та 7,60 (m, 1H), 7,78 (t, 1H) та 8,04-8,07 (m, 1H). метил 2-(бромметил)бензоат (0,12г, 0,52ммоль) c) Метил 2-[(4-{3-[бутил(2,3розчиняють в ацетонітрилі (10мл) та додають кардиметоксибензил)аміно]-3бонат калію (131мг, 0,95ммоль). Суміш перемішуоксопропіл}фенокси)метил]-бензоат (15мг, ють при 60°С протягом трьох годин. Додають три0,029ммоль) розчиняють у суміші ТГФ/вода (2/1, самін на полімерній підкладці (0,3екв.) та 2мл) та додають LiOH (1,4мг, 0,058ммоль). Реакперемішують протягом ночі. Полімер відфільтро 29 78050 30 вують, розчинник видаляють випарюванням, дотягом 4 діб, а потім фільтрують. Фільтрат випарюдають ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промивають ють. Залишок розчиняють в ацетонітрилі, тоді поводою. Після сушки (сульфат магнію) сирого проділяють на дві порції та завантажують у 2 колонки дукту та видалення розчиннику випарюванням, (ISOLUTE®PRS, 10г/70мл, змочено ацетонітрисирий продукт очищають препаративною ВЕРХ лом), елюють ацетонітрилом, тоді метанол, а по(починаючи з суміші ацетонітрил/буфер 60/40, а тім метанолом (ΝΗ3 насичен.). Фракції продукту потім концентрацію ацетонітрилу збільшують до поєднують та випарюють. Отримують маслянистий 100%, буфером є суміш ацетонітрил/вода 10/90 та продукт 1,283г, вихід 83%. 1 ацетат амонію (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм H ЯМР (300МГц, CDCI3): δ 1,19 (t, 3Н), 1,25 (d, 6H), 1,75-1,84 (m, 2H), 2,73 (t, 2H), 2,85-2,94 (m, ´250мм, потік 40мл/хвил). Фракції, що містять про1H), 3,43-3,52 (m, 4H), 3,75 (s, 2H), 7,18 (d, 2H) та дукт, поєднують та ацетонітрил видаляють випа7,24 (d, 2H). рюванням. Додають ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промивають двома порціями розсолу та суb) N-(3-етоксипропіл)-N-(413опропілбензил)ам1н (0,62г, 2,65ммоль) розчишать сульфатом магнію. Видалення розчиннику няють у ДМФ (10мл), додають 3-(4випарюванням дає 39мг метил 2-[(4-{3-[(2,3гідроксифеніл)пропанову кислоту (0,4г, 2,41ммоль) диметоксибензил)(гептил)аміно]-3та суміш охолоджують до 0°С. Додають N-[(1Ноксопропіл}фенокси)метил]бензоату (ви хід 14,6%). 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,861,2,3-бензотриазол-1-ілокси)(диметиламіно)метилен]-N-метилметанаможй тетрафлуорборат 0,89 (m, 3Н), 1,19-1,30 (m, 8H); 1,46-1,55 (m, 2H), (0,85г, 2,65ммоль) та діізопропілетиламін (0,65г, 2,60, 2,66 (t, t, 2H), 2,93, 2,98 (t, t, 2H), 3,14, 3,33 (t, 5,05ммоль). Суміші дають нагрітися до кімнатної t, 2H), 3,80, 3,83, 3,86, 3,87, 3,90, 3,91 (s, s, s, s, s, температури та перемішують протягом ночі. Доs, 9H), 4,45, 4,68 (s, s, 2H), 5,48, 5,49 (s, s, 2H), 6,59, 6,73 (d, d, 1H), 6,81-7,01 (m, 4H) 7,08, 7,16 (d, дають EtOAc (15мл) та органічну фазу промивають двома порціями гідрокарбонату натрію (водн., d, 2H) 7,35-7,39 (m, 1H), 7,53-7,57 (m, 1H), 7,76 (t, 10мл). ЕtOАс видаляють випарюванням і сирий 1H) та 8,01-8,04 (m, 1H). продукт очищають препаративною ВЕРХ (починаc) Метил 2-[(4-{3-[(2,3ючи з ацетонітрил/буфер 60/40, а потім концентдиметоксибензил)(гептил)аміно]-3оксопропіл}фенокси)метил]-бензоат (39мг, рацію ацетонітрилу збільшують до 100%, буфером є суміш ацетонітрил/вода 10/90 та амоній ацетат 0,069ммоль) розчиняють у суміші ТГФ/вода (2/1, 2мл) та додають LiOH (3,3мг, 0,14ммоль). Реакцію (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм ´250мм, потік проводять в одиничному блоці мікрохвильової 40мл/хвил). Фракції, що містять продукт, поєднушафи (150°С, 7 хвилин). Видаляють ЕtOАс (10мл) ють та ацетонітрил видаляють випарюванням. та промивають органічну фазу з двома порціями Додають ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промивають двома порціями розсолу та сушать сульфаНСІ (2´5мл, 1М). Органічну фазу сушать сульфатом магнію. Розчинник видаляють випарюванням том магнію та розчинник видаляють випарюванта отримують 1,0г N-(3-етоксипропіл)-3-(4ням, з утворенням 30мг 2-[(4-{3-[(2,3гідроксифеніл)-N-(4-ізопропілбензил)пропанаміду диметоксибензил)(гептил)-аміно]-3-оксопропіл}(вихід 75,8%). фенокси)метил]бензойної кислоти (вихід 78,9). 1 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 1,16Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,841,21 (m, 3Н), 1,26,1,27 (d, d, 6H), 1,75-1,80,1,840,87 (m, 3Н), 1,20-1,28 (m, 8H), 1,45-1,55 (m, 2H), 1,90 (m, m, 2H), 2,64, 2,74 (t, t, 2H), 2,86-3,00 (m, 2,63, 2,69 (t, t, 2H), 2,93, 2,99 (t, t, 2H), 3,13, 3,33 (t, 3H), 3,33, 3,37 (t, t, 2H), 3,4 1 -3,50 (m, 4H). 4,43, t, 2H), 3,79, 3,81, 3,84, 3,85 (s, s, s, s, 6H), 4,45, 4,69 4,62 (s, s, 2H), 6,80-6,84 (m, 2H) та 6,97-7,22 (m, (s, s, 2H), 5,52, 5,53 (s, s, 2H), 6,60, 6,72 (d, d, 1H), 6H). 6,79-7,01 (m, 4H) 7,08, 7,16 (d, d, 2H) 7,36-7,41 (m, d) N-(3-етоксипропіл)-3-(4-гідроксифеніл)-N-(41H), 7,55-7,60 (m, 1H), 7,79 (t, 1H) та 8,13-8,16 (m, ізопропілбензил)пропанамід (0,18г, 0,47ммоль) та 1H) 13 метил 2-(бромметил)бензоат (0,12г, 0,52ммоль) C ЯМР (ротамери. 125МГц. CDCI3): δ 14,04, розчиняють в ацетонітрилі (10мл) та додають кар22,52, 22,56, 26,77, 26,96, 27,45, 28,60, 28,92, бонат калію (131мг, 0,95ммоль). Суміш перемішу29,03, 30,83, 30,97, 31,66, 31,75, 35,16, 35,36, ють при 60°С протягом трьох годин. Додають три42,61, 46,42,46,46, 47,45, 55,69, 55,75, 60,35, 60,73, самін на полімерній підкладці (0,3екв.) та 68,19,111,26,111,83, 114,88, 114,95, 118,84,120,91, перемішують протягом ночі. Полімер відфільтро124,14, 124,20, 126,85, 127,15, 127,22, 129,46, вують, розчинник видаляють випарюванням, до130,52, 131,26, 131,51, 133,19, 133,66, 140,61, дають ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промивають 146,59 147,19, 152,48,152,60,157,02, 157,11,170,77, 3 порціями води. Після сушки магній сульфатом 172,92 та 173,23. розчинник видаляють випарюванням, сирий проПриклад 9 дукт очи щають препаративною ВЕРХ (починаючи а) N-(3-етоксипрспіл)-N-(4з суміші ацетонітрил/буфер 60/40, а потім конценізопропілбензил)амін трацію ацетонітрилу збільшують до 100%, буфеp-ізопропілбензальдегід (1,007г, 6,798ммоль) ром є суміш ацетонітрил/вода 10/90 та амоній ацерозчиняють у метанолі (5мл). Триметил ортоформіат (5мл) додають. 3-Етоксипропіламін (681мг, тат (0,1 М, колонка KR-100-7-C8, 50мм ´250мм, 6,6ммоль) тоді додають та потім оцтову кислоту потік 40мл/хвил). Фракції, що містять продукт, по(0,2мл). Після стояння при кімнатній температурі єднують та ацетонітрил видаляють випарюванням. протягом ночі, додають ДХМ (5мл), а потім борогіДодають ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промидрид на полімерній підкладці (5,28г, 13,2ммоль). вають двома порціями розсолу та сушать сульфаСуміш струшують при кімнатній температурі протом магнію. Видалення розчиннику випарюванням 31 78050 32 дає 0,16г метил 2-[(4-{3-[(3-етоксипропіл)(43,096ммоль). Суміш перемішують при кімнатній ізопропілбензил)аміно]-3температурі протягом ночі. Водний розчин гідрооксопропіл}фенокси)метил]бензоату (ви хід 63,5%). карбонату натрію (насичен.) додають. Суміш ексте) 1Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 1,17, рагують етилацетатом (´2). Екстракти поєднують 1,21 (t, t, 3H), 1,27,1,28 (d, d, 6H), 1,75-1,80, 1,84та сушать сульфатом магнію та випарюють. Хро1,89 (m, m, 2H), 2,63, 2,73 (t, t, 2H), 2,89-3,04 (m, матографія залишку на колонці (1SOLUTE®SI, 3H), 3,32, 3,37 (t, t, 2H), 3,4 1 -3,50 (m, 4H), 3,93, 5г/25мл) із застосуванням ДХМ/гептан (50:50), 3,94 (s, s, 3H), 4,46,4,61 (s, s, 2H), 5,51, 5,53 (s, s, ДХМ, а потім МеОН/ДХМ (1:99, тоді 2:98), як елю2H), 6,92, 6,95 (d, d, 2H), 7,04-7,22 (m, 6H), 7,40 (t, енту, дає 336мг потрібного продукту, ви хід 68%. 1 1H), 7,58 (t, 1H), 7,78-7,80 (m, 1H) та 8,05-8,07 (m, Н ЯМР (ротамери, 300МГц, CDCI3): δ 0,821H). 0,88 (m, 3Н), 1,45-1,58 (m, 2H), 2,59, 2,65 (t, t, 2H), d) Метил 2-[(4-{3-[(3-етоксипропіл)(42,88-2,98 (m, 2H), 3,11, 3,27 (t, t, 2H), 4,40,4,59 (s, s, ізопропілбензил)аміно]-3-оксопропіл}фенокси)2H), 6,71-7,03 (m, 6H), 7,07-7,16 (m, 1H)Ta7,79(s, метил]бензоат (0,16г, 0,30ммоль) розчиняють у br, 1H). суміші ТГФ/вода (2/1, 2мл) та додають LiOH c) Метил 2-[(4-{3-{[2,4(14,4мг, 0,60ммоль). Реакцію проводять в одиничдифлуорбензил)(пропіл)аміно]-3ному блоці мікрохвильової шафи (150°С, 7 хвиоксопропіл}фенокси)метил]-бензоат лин). Видаляють ЕtOАс (10мл) та промивають орN-(2,4-Дифлуорбензил)-3-(4-гідроксифеніл)-Nганічну фазу двома порціями НСІ (2´5мл, 1М). пропілпропанамід (290мг, 0,87ммоль) розчиняють Органічну фазу сушать сульфатом магнію та розв ацетонітрилі (10мл). 2-Бромметил-бензойної чинник видаляють випарюванням з утворенням кислоти метиловий естер (209мг, 0,913ммоль) до0,108г 2-[(4-{3-[(3-етоксипропіл)(4дають, а потім карбонат калію, безводн. (180мг, ізопропілбензил)аміно]-3-оксопропіл}фенокси)1,305ммоль). Суміш гріють до кипіння під зворотметил]бензойної кислоти (вихід 69,3%). ним холодильником протягом ночі, а потім випа1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ рюють досуха. Воду та етилацетат додають та дві 1,15,1,19 (t, t, 3H), 1,23-1,25 (m, 6H), 1,74-1,79,1,84фази відокремлюють. Органічну фазу сушать су1,89 (m, m, 2H), 2,66, 2,76 (t, t, 2H), 2,86-3,03 (m, льфатом магнію та випарюють. Хроматографія 3H), 3,30, 3,36 (t, t, 2H), 3,40-3,50 (m, 4H), 4,44, 4,61 залишку на колонці (ISOLUTE®SI, 20г/70мл) із за(s, s, 2H), 5,55, 5,56 (s, s, 2H), 6,90-6,94 (m, 2H), стосуванням ДХМ, а потім МеОН/ДХМ (1:99), як 7,02-7,20 (m, 6H), 7,40 (t, 1H), 1,57-1,60 (m, 1H), елюенту, дає 184мг потрібного продукту, ви хід 7,79-7,82 (m, 1H) та 8,15-8,18 (m, 1Н). 44%. 13 1 C ЯМР (ротамери, 125МГц, CDCI3): δ 15,15, Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 0,8523,98, 27,78, 28,61, 30,93, 31,01, 33,73, 35,07, 0,92 (m, 3Н), 1,52-1,60 (m, 2H), 2,61, 2,68 (t, t, 2H), 35,38, 43,86, 44,13, 47,96, 51,26, 66,06, 66,22, 2,95-3,01 (m, 2H), 3,15, 3,32 (t, t, 2H), 3,92, 3,93 (s, 66,82, 67,98, 68,13, 114,77, 126,03, 126,38, 126,72, s, 3H), 4,45, 4,62 (s, s, 2H), 5,51, 5,52 (s, s, 2H), 126,97, 127,90, 129,31, 131,31, 132,88, 133,23, 6,77-6,86 (m, 2H), 6,92-6,99, 7,23-7,27 (m, m, 3H), 133,39, 133,84, 134,56, 140,30, 140,38, 147,71, 7,12, 7,16 (d, d, 2H), 7 38-7,42 (m, 1H), 7,57 (t, 1H) 148,05, 156,90, 170,48, 173,02 та 173,26. 7,78 (d, 1H) та 8,04-8,07 (m, 1H). Приклад 10 d) 2-[(4-{3-[(2,4-дифлуорбензил)(пропіл)аміно]а) N-(2,4-дифлуорбензил)-N-пропіламін 3-оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота 2,4-Дифлуорбензальдегід (1,003г, 7,055ммоль) Суміш метил 2-[(4-{3-[(2,4розчиняють у метанолі (5мл). Триметил ортофордифлуорбензил)(пропіл)аміно]-3міат (5мл) додають. Пропіламін (401мг, оксопропіл}фенокси)-метил]бензоату (0,184г, 6,784ммоль) тоді додають, а потім оцтову кислоту 0,382ммоль) та літій гідроксиду (0,018г, (0,2мл). Після 1 годин, додають ДХМ (5мл) та по0,76ммоль) у ТГФ (2мл) та воді (2мл) гріють при тім борогідрид на полімерній підкладці 150°С протягом 7 хвилин. Суміш розводять водою, (2,5ммоль/г, 5,42г, 13,55ммоль). Суміш струшують підкислюють пдрохлоридною кислотою та екстрапри кімнатній температурі протягом 4 діб, а потім гують метиленхлоридом. Комбіновані екстракти фільтрують. Фільтрат випарюють. Залишок розчисушать сульфатом магнію та випарюють, з утвоняють в ацетонітрилі, тоді поділяють на дві порції ренням 2-[(4-{3-[(2,4та завантажують у 2 колонки (ISOLUTE®PRS, дифлуорбензил)(пропіл)аміно]-310г/70мл, змочено ацетонітрилом), елюють ацетооксопропіл}фенокси)метил]бензойної кислоти. 1 нітрил, тоді метанол, а потім метанол (NH3 насиН ЯМР (400МГц, CDCI3): δ 0,85 (t, 3), 1,4-1,6 нен.). Фракції продукту поєднують та випарюють. (m, 2), 2,6-2,7 (m, 2), 2,9-3,0 (m, 2), 3,05-3,15 та Отримують маслянистий продукт (892мг), вихід 3,25-3,35 (мультиплети, ротамери, 2), 4,4 та 4,6 71%. (синглети, ротамери, 2), 5,5 (m, 2), 6,7-6,8 (m, 2), 1 Н ЯМР (400МГц, CDCI3): δ 0,91 (t, 3Н), 1,476,9-7,0 (m, 2), 7,05-7,2 (m, 2), 7,4 (t, 1), 7,6 (t, 1), 7,8 1,56 (m, 2H), 2,57 (t, 2H), 3,79 (s, 2H), 6,75-6,85 (m, (d, 1), 8,15 (d, 1). 2H) та 7,27-7,33 (m, 1H). Приклад 11 b) N-(2-(4-дифлуорбензил)-3-(4a) Метил 2-({[4-(2-{етил[4гідроксифеніл)-N-пропілпропанамід (трифлуорметил)бензил]аміно}-23-(4-Гідроксифеніл)пропіонову кислоту (245мг, оксоетил)феніл]тіо] метил)бензоат 1,474ммоль) у ДМФ (5мл) охолоджують у льодяній Етил[4-(трифлуорметил)бензил]амін (284мг, бані. N-(2,4-Дифлуорбензил)-N-проліламін 1,40ммоль) та (4-{[2(300,4мг, 1,622ммоль) додають, потім TBTU (метоксикарбоніл)бензил]тіо}феніл)оцтову кислоту (521мг, 1,622ммоль), а потім DIPEA (400мг, (443мг, 1,40ммоль, Дивись Приклад 2b) змішують 33 78050 34 у ДМФ (15мл). TBTU (472мг, 1,47ммоль) додають, сушать сульфатом магнію та розчинник видаляють а потім додають DIPEA (190мг, 1,47ммоль). Суміш випарюванням! з утворенням 0,69г N-етил-N-(2перемішують при кімнатній температурі протягом 1 флуорбензил)-2-(4-гідроксифеніл)ацетаміду (вихід годин. ЕtOАс (20мл) додають. Суміш тоді проми73,1%). 1 вають водним розчином гідрокарбонату натрію Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 1,12 (m, 3Н), 3,35-3,5 (m, 2H), 3,62-3,72 (m, 2H), 4,57-4,78 (насичен.), 1% НСІ, водою (´2) та розсолом, су(m, 2H), 6,7 (t, 2H), 6,98-7,38 (m, 6H). шать сульфатом магнію та випарюють. Названа сполука (663мг) залишається, вихід 94%. b) N-Етил-N-(2-флуорбензил)-2-(41 гідроксифеніл)ацетамід (0,381г, 1,327ммоль) та H ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 1,08метил 2-(бромметил)бензоат (0,334г, 1,460ммоль) 1,15 (m, 3Н), 3,31, 3,45 (q, q, 2H), 3,63 -3,76 (s, s, розчиняють в ацетонітрилі (10мл) та додають кар2H), 3,92 (s, 3H), 4,52-4,66 (m, 4H), 7,09-7,40 (m, бонат калію (0,367г, 2,654ммоль). Суміш перемі8H), 7,56, 7,62 (d, d, 2H) та 7,94 (d, 2H). b) 2-({[4-(2-{Етил[4шують при 65°С протягом трьох годин. Коли Nетил-N-(2-флуорбензил)-2-(4трифлуорметил)бензил]аміно}-2гідроксифеніл)ацетамід витрачається, додають оксо)феніл]тіо}метил)бензойна кислота PS-трисамін (0,3екв.) та розчин перемішують проМетил 2-({[4-(2-{етил[4тягом ночі при кімнатній температурі. Полімер (трифлуорметил)бензил]аміно}-2оксоетил)феніл]тіо}метил)-бензоат (640мг, відфільтровують та ацетонітрил видаляють випарюванням. Додають ЕtOАс (10мл) та органічну 1,276ммоль) розчиняють у ТГФ (20мл). Літій гідрофазу промивають двома порціями води, сушать ксид (61мг, 2,552ммоль) у воді (10мл) додають. сульфатом магнію та розчинник видаляють випаСуміш перемішують при кімнатній температурі та рюванням, з утворенням 0,545г метил 2-[(4-{2реакцію перевіряють РХ-МС. Після 24 годин, ще додають літій гідроксид (30мг) та воду (10мл). Піс[етил(2-флуорбензил)аміно]-2оксоетил}фенокси)метил]бензоату (ви хід 94,3%). ля усього 70 годин РХ-МС показує завершення 1 Н ЯМР (ротамери, 300МГц, CDCI3): δ 1,12 (m, реакції. Суміш випарюють для видалення ТГФ. 3Н), 3,23-3,35 (m, 2H), 3,6-3,75 (m, 2Н), 3,88 (s, 3Н), Залишок промивають діетиловим етером, тоді 4,45-4,70 (m, 2Н), 5,45 (s, 2Н), 6,84-7,35 (m, 9Н), підкислюють 10% НСІ, рН=2, та екстрагують ЕtOАс 7,5 (t, 1H), 7,72 (d, 1H), 8,0 (d, 1H). (´2). Екстракти поєднують та промивають розсоc) Метил 2-[(4-{2-[етил(2-флуорбензил)аміно]лом, сушать сульфатом магнію та випарюють. 2-оксоетил}фенокси)метил]-бензоат (0,545г, Хроматографія залишку на колонці (ISOLUTE SI, 5 1,251ммоль) розчиняють у ЕtOН (5мл) та додають г/25мл), із застосуванням ДХМ, а потім МеОН/ДХМ калій гідроксид (0,105г, 1,877ммоль). Реакцію про(0,5:99,5, тоді 1:99), як елюенту, дає названу споводять в одиничному блоці мікрохвильової шафи луку (510мг), вихід 82%. 1 (7 хвилин, 150°С). Видаляють розчинник випарюН ЯМР (ротамери, 300МГц, CDCI3): δ 1,07ванням, додають НСІ (20мл, 1М) та водну фазу 1,15 (m, 3Н), 3,31, 3,45 (q, q, 2H), 3,64, 3,77 (s, s, промивають двома порціями ЕtOАс (20мл). Орга2H), 4,54 (s, 2H), 4,55, 4,66 (s, s, 2H), 7,05-7,40 (m, нічні фази поєднують та розчинник видаляють 8H), 7,55, 7,60 (d, d, 2H) та 7,97 (d, 2H). 13 випарюванням. Сирий матеріал очищають препаC Я МР (ротамери, 75МГц, CDCI3): δ 12,60, ративною ВЕРХ (починаючи з ізократичної суміші 13,80, 38,17, 38,25, 40,00, 40,44, 41,63, 42,40, ацетонітрил/буфер 60/40, а потім концентрацію 47,94, 50,61, 118-134 (комплекс мультиплет), ацетонітрилу збільшують до 100%, буфером є су140,32, 140,70, 141,50, 170,48 та 171,20 міш ацетонітрил/вода 10/90 та амоній ацетат Приклад 12 2-[(4-{2-[Етил(2-флуорбензил)аміно]-2(0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм´250мм, потік 40мл/хвил). Фракції з вмістом продукту поєднують оксоетил}фенокси)метил]бензойна кислота, та ацетонітрил видаляють випарюванням. Додаа) N-(2-Флуорбензил)етанамін (0,554г, ють ЕtOАс (10мл) та органічну фазу (промивають 3,615ммоль) розчиняють у ДМФ (10мл). (4двома порціями розсолу та сушать сульфатом Гідроксифеніл)оцтову кислоту (0,500г, 3,286) домагнію. Розчинник видаляють випарюванням, з дають та суміш о холоджують до 0°С. Ν-[(1Η-1,2,3утворенням 0,124г 2-[(4-{2-[етил(2Бензотриазол-1-ілокси)(диметиламіно)метилен]-Nфлуорбензил)аміно]-2метилметанамоній тетрафлуорбо-рат (1,161г, оксоетил}фенокси)метил]бензойної кислоти 3,615ммоль) та N-етил-N,N-діізопропіламін (0,892г, (23,5%). 6,901ммоль) додають. Розчин перемішують протя1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 1,12 (m, гом ночі при кімнатній температурі. ЕtOАс (20мл) 3Н), 3,25-3. 5 (m, 2H), 3,65-3,8 (m, 2H), 4,5-4,75 (m, додають та органічну фазу промивають двома 2H), 5,52 (m, 2H), 6,84-7,45 (m, 9H), 7,55 (t, 1H), порціями натрій карбонату (2´20мл, водн.). Орга7,78 (d, 1H), 8,13 (d, 1H). нічний шар сушать сульфатом магнію та розчинПриклад 13 ник видаляють випарюванням. Сирий Maтeріал 2-[(4-{3-[Етил(2-флуорбензил)аміно]-3очищають препаративною ВЕРХ (починаючи з оксопропіл}фенокси)метил]бензойна кислота, Nізократичної суміші ацетонітрил/буфер 60/40, а (2-Флуорбензил)етанамт (0,554г, 3,615ммоль) розпотім концентрацію ацетонітрилу збільшують до чиняють у ДМФ (10мл), додають 3-(4100%, буфером є суміш ацетонітрил/вода 10/90 та гідроксифеніл)пропанову кислоту (0,546г, амоній ацетат (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 3,286ммоль) та суміш охолоджують до 0°С. N-[(1Н50мм´250мм, потік 40мл/хвил). Фракції з вмістом 1,2,3-бензотриазол-1-токси)(диметиламiно)продукту поєднують та ацетонітрил видаляють метилен]-N-метилметанамонiй тетра-флуорборат випарюванням. Додають ЕtOАс (10мл) та органіч(1,161г, 3,615ммоль) та N-етил-N,Nну фаз у промивають двома порціями розсолу та 35 78050 36 діізопропаламін (0,892г, 6,901ммоль) додають. промивають двома порціями ЕtOАс (20мл). ОргаРозчин перемішують протягом ночі при кімнатній нічні фази поєднують та розчинник видаляють температурі. ЕtOАс (20мл) додають та органічну випарюванням. Сирий матеріал очищають препафазу промивають двома порціями натрій карбонаративною ВЕРХ (починаючи з ізократичної суміші ацетонітрил/буфер 60/40, а потім концентрацію ту (2´20мл, водн.). Органічний шар сушать сульацетонітрилу збільшують до 100%, буфером є суфатом магнію та розчинник видаляють випарюміш ацетонітрил/вода 10/90 та амоній ацетат ванням. Сирий матеріал очищають препаративною ВЕРХ (починаючи з ізократичної (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм´250мм, потік суміші ацетонітрил/буфер 60/40, а потім концент40мл/хвил.). Фракції з змістом продукту поєднують рацію ацетонітрилу збільшують до 100%, буфером та ацетонітрил видаляють випарюванням. Додає суміш ацетонітрил/вода 10/90 та амоній ацетат ють ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промивають двома порціями розсолу та сушать сульфатом (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм´250мм, потік магнію. Розчинник видаляють випарюванням, з 40мл/хвил). Фракції з вмістом продукту поєднують утворенням 0,079г 2-[(4-{3-[етил(2та ацетонітрил видаляють випарюванням. Додафлуорбензил)аміно]-3-оксопропіл}ють ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промивають фенокси)метил]бензойної кислоти (18,0%). двома порціями розсолу та сушать сульфатом 1 Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 1,12 (m, магнію, а потім розчинник видаляють випарюван3Н), 2,60-2,75 (m, 2H), 3,03 (m, 2H), 3,23-3,50 (m, ням, з утворенням 0,803г N-етил-N-(22H), 4,45-4,73 (m, 2H), 5,57 (s, 2H), 6,88-7,35 (m, флуорбензил)-3-(4-гідроксифеніл)пропанаміду 8H), 7,41 (t, 1H), 7,60 (t. 1H), 7,80 (d, 1H),8,18 (d, (вихід 81,1%). 1 1H). Н ЯМР (ротамери, 500МГц, CDCI3): δ 1,1 (m, Наступні приклади отримують подібним чином. 3Н), 2,58-2,72 (m, 2H), 2,83-3,0 (m, 2H), 3,2-3,5 (m, Приклад 14 2H), 4,45-4,7 (у, 2Н), 6,78 (t, 2H), 6,95-7,35 (m, 6H). 2-{[(3-{2-[(2,4-Дифлуорбензил)(гептил)аміно]-2b) N-Етил-N-(2-флуорбензил)-3-(4оксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота. гідроксифеніл)пропанамід (0,400г, 1,327ммоль) та Приклад 15 метил 2-(бромметил)бензоат (0,334г, 1,460ммоль) 2-{[(4-{2-[(4-Хлорбензил)(етил)аміно]-2розчиняють в ацетонітрилі (10мл) та додають кароксоетил}феніл)тіо]метил}бензойна кислота. бонат калію (0,367г, 2,654ммоль). Суміш переміБіологічна активність шують при 65°С протягом трьох годин. Коли NКомпозиції етил-N-(2-флуорбензил)-2-(4Сполуки розчиняють у ДМСО для отримання гідроксифеніл)ацетамід витрачається, додають 16мМ вихідних розчинів. Для дослідження вихідPS-трисамін (0,3екв.) та розчин перемішують проний розчини подалі розводять ДМСО та культиватягом ночі при кімнатній температурі. Полімер ційними середовищами. відфільтровують та ацетонітрил видаляють випаЗагальні хімікати та реактиви рюванням. Додають ЕtOАс (10мл) та органічну Реагент дослідження люциферази отримано фазу промивають двома порціями води, сушать від Packard, USA. Рестрикційні ферменти отримасульфатом магнію та розчинник видаляють випано від Boehringer та Vent-полімераза від New Engрюванням. Додають ЕtOАс (10мл) та органічну land Biolabs. фазу промивають двома порціями води, сушать Лінії клітин та умови культивації клітин сульфатом магнію та розчинник видаляють випаU2-OS, (Остеогенна саркома людини) отримарюванням. Сирий матеріал очищають препаратино з АТСС, USA. Клітини нарощують та знов замовною ВЕРХ (починаючи з ізократичної суміші ацерожують партіями від числа переносу 6. Клітини тонітрил/буфер 60/40, а потім концентрацію культивують у середовищі Дульбекко, модифікоацетонітрилу збільшують до 100%, буфером є суваному Іглом (DMEM) з 25мМ глюкози, 2мМ глутаміш ацетонітрил/вода 10/90 та амоній ацетат міну або 4мМ L-аланіл-L-глутаміну, 10% сироватки (0,1М, колонка KR-100-7-C8, 50мм´250мм, потік зародка теляти, при 5% СО2. Використовують бу40мл/хвил). Фракції з вмістом продукту поєднують ферований фосфатом фізіологічний розчин та ацетонітрил видаляють випарюванням. Дода(БФФР) без додавання кальцію або магнію. Усі ють ЕtOАс (10мл) та органічну фазу промивають реактиви культур клітин отримано від Gibco (USA) двома порціями розсолу та сушать сульфатом та 96-коміркові планшети культур клітин отримано магнію. Розчинник видаляють випарюванням з від Waliach. утворенням 0,454г метил 2-[(4-{3-[етил(2Констракти плазмід для гетерологічної ексфлуорбензил)аміно]-3-оксопропіл}фенокси)метил]пресії бензоату (ви хід 76,1%). 1 Стандартні рекомбінантні способи ДНК провоН ЯМР (ротамери, 400МГц, CDCI3): δ 1,08 (m, дять, як описано Ausubel (7). Репортерний люци3Н), 2,52-2,68 (m, 2H), 2,9-3,03 (m, 2H\ 3,18-3,45 феразний вектор, pGLSUAS (клон складається з 5 (m, 2H), 3,88 (s, 3Н), 4,45-4,7 (m, 2H), 5,45 (s, 2H), копій зв'язувальної послідовності ДНК GAL4, 5'6,82-7,28 (m, 8H), 7,36 (t, 1H,!, 7,53 (t, 1·Η), 7,73 (d, CGACGGAGTACTGTCCTCCGAGCT-3', клоновано 1H), 8,0 (d, 1H). у сайти Saci/Xhol промотеру pGL3 (Promega). Фрас) Метил 2-[(4-{3-[етил(2-флуорбензил)аміно]гмент Sacl/Xhol, що несе сайти UAS, створюють, 3-оксопропіл}фенокси)метил]-бензоат (0,454г, застосовуючи гібридизовані перекривувані оліго1,001ммоль) розчиняють у ЕtOН (5мл) та додають нуклеотиди. калій гідроксид (0,085г, 1,514ммоль). Реакцію проВикористані вектори експресії базуються на водять в одиничному блоці мікрохвильової шафи pSG5 (Stratagene). Усі вектори містять фрагмент (7 хвилин, 150°С). Видаляють розчинник випарюEcoRI/Nhel, що кодує зв'язувальний домен ДНК ванням, додають НСІ (20мл, 1М) та водну фазу 37 78050 38 GAL4 (що кодує амінокислотні позиції 1-145, вхідвання жирно-кислотними компонентами СЗТ. Дений номер бази даних Р04386) а потім конденсосорбовану смолою-вугіллям СЗТ продукують, як ваний у рамці з фрагментом, що кодує послідовнижченаведено; до 500мл активованої теплом ність нуклеарної локалізації від Т-антигену вірусу СЗТ додають 10г вугілля та 25г аніонообмінної поліоми. Послідовність нуклеарної локалізації смоли для аналізу Bio-Rad 200-400меш, та розчин створюють, застосовуючи гібридизовані перекриперемішують на магнітній мішалці при кімнатній вувані олігонуклеотиди, створені Nhel/Kpnl клейтемпературі протягом ночі Наступної доби СЗТ кими кінцями (5'центрифугують та десорбування повторюють проCTAGCGCTCCTAGAAGAAACGCAAGGTTGGTACтягом 4-6 годин. Після другої обробки, СЗТ центрифугують та фільтр стерилізують для вида3'). Ліганд-зв'язувальні домени від АППРa людини лення залишків вугілля та смоли. та миші та ΑΠΠΡg людини та миші ПЛРСпосіб дослідження ампліфікують, як фрагменти KрnІ/ВаmНl та клонуВихідні розчини сполук у ДМСО розводять до ють у рамці до зв'язувального домену ДНК GAL4 прийнятної концентрації в еталонних планшетах. З та послідовності нуклеарної локалізації. Послідоветалонних планшетів сполуки розводять у культиності усіх використаних констрактів плазмід підваційних середовищах для отримання розчинів тверджені секвенсуванням. Наступні вектори екстест-сполук для кінцевих доз. пресії використовують для тимчасових Після доведення кількості середовища клітин трансфекцій: до 75мкл у кожній комірці, додають 50мкл розчину тест-сполуки. Тимчасово трансфектовані клітини підтип кодованого дов ідков і послідовнов ектор АППР сті піддають дії сполуки протягом приблизно 24 годин pSGGALhPPa ΑΠΠΡa людини S74349, nt 625-1530 до здійснення дослідження люциферази. Для доpSGGALmPPa ΑΠΠΡa миші Х57 638, nt 668-1573 слідження люциферази, 100мкл реагенту для доpSGGALhPPg ΑΠΠΡg людини U63415, nt 613-1518 слідження додають вручну до кожної комірки та pSGGALmPPg ΑΠΠΡg миші U09138, nt 652-1577 планшети залишають протягом приблизно 20 хвилин для лізису клітин. Після лізису люциферазну стосується позиції нуклеотиду з входу бази активність виміряно у мультикомірковому лічильданих, що використано для вираження ліганднику 1420, Victor, від Waflach. зв'язувального домену. Контрольні сполуки Перехідні трансфекції TZD-піоглітазон використовують, як контрольЗаморожені вихідні розчини клітин від числа ну речовину для активування ΑΠΠΡg людини та переносу 6 розморожують та нарощують до числа миші. 5,8,11,14-Ейкозатетрайонову кислоту (ЕТЙК) переносу 8 для трансфекції. Конфлюєнтні клітини використовують, як контрольну речовину для трипсинізують, промивають та гранулюють АППРa людини. центрифугуванням при 270хg протягом 2 хвилин. Розрахунки та аналіз Гранулу клітин ресуспендують у холодному БФФР Для розрахунку величин ЕK50 будують криву 6 до концентрації клітин приблизно 18´10 клітин/мл концентрація-ефект. Використані величини є похіПісля додавання ДНК, суспензію клітин інкубують дними від середнього двох або трьох незалежних на льоду протягом приблизно 5 хвилин до електвимірів (після віднімання фонової середньої велиропорації при 230V, 960мкФ у Biorad's Gene чини) та виражені, як процент від максимального Pulser™ партіями по 0,5мл. Усього 50мкг ДНК доактивування, отриманого від контрольної сполуки. дають до кожної партії по 0,5мл клітини, залучаюВеличини відкладають проти логарифмів концентчи 2,5мкг вектору експресії, 25мкг репортерного рацій тест-сполук. Величини ЕK50 встановлюють вектору та 22,5мкг неспецифічної ДНК (pBluescript, лінійною інтерполяцією між даними точками та Stratagene). розрахованими концентраціями, потрібними для Після електропорації, клітини розводять до досягнення 50% максимального активування, концентрації приблизно 320000клі-тин/мл у DMEM отриманого від контрольної сполуки. без фенол-червоного, та приблизно Сполуки формули І мають ЕK50 менше 25000клітин/комірку засівають у 96-коміркові 50мкмоль/л для АППРa, а кращі сполуки мають планшети. Для зворотного отримання клітин засіяЕK50 менше 5мкмоль/л, наприклад, ЕK50 з деяких ні планшети інкубують при 37°С протягом 3-4 гоприкладів для АППР-апьфа людини такі: дин до додавання тест-сполук. У дослідженнях Приклад 50,163мкмоль/л; АППРa, клітинне середовищ доповнюють десорПриклад 100,168мкмоль/л; бованою смолою-вугіллям сироваткою зародка Приклад 110,026мкмоль/л; та теляти (СЗТ) для запобігання зворотного активуПриклад 150,027мкмоль/л. Комп’ютерна в ерстка Т.Чепелева Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601