Живильне середовище для одержання соматичних ембріоїдів у калюсній культурі моркви in vitro

Живильне середовище для одержання соматичних ембріоїдів у калюсній культурі моркви in vitro, що містить амоній азотнокислий, калій азотнокислий, кальцій хлористий двоводний, магній сірчанокислий семиводний, калій фосфорнокислий однозаміщений, залізо сірчанокисле семиводне, динатрієву сіль етилендіамінтетраоцтової кислоти, борну кислоту, сірчанокислий марганець чотириводний, цинк сірчанокислий чотириводний, калій йодистий, натрій молібденовокислий чотириводний, мідь сірчанокислу п'ятиводну, кобальт хлористий шестиводний, мезоінозит, тіамін хлорид, піридоксин хлорид, нікотинову кислоту, сахарозу, агар і воду, яке відрізняється тим, що містить підвищену концентрацію кальцію хлористого при наступному складі компонентів, мг/л: 2 77741 1 3 77741 4 винаходу є класичне живильне середовище Muraванням 2,4 - Д, а потім ~ на безгормональному shige Т., Skoog F., 1962. запропонованому середовищі, що містить макро" і Склад середовища прототипу наступний, мг/л: мікроелементи та вітаміни за прописом MS, a конмакроелементи: центрація хлориду кальцію двох водного складає NH4NO3 1650 600-800 мг/л. Пропоноване нами підвищення конKNO3 1900 центрації СаСl2 в живильному середовищі обгрунCaCl.2H2O 440 товано важливою роллю кальцію у здійсненні проMgSO4.H2O 370 грами ембріонального розвитку рослин. KH2PO4 170 Приклад. Проводили дослідження з одержанFeSO4.7H2O 27,8 ня соматичних ембріоїдів у калдосній культурі NaEDTA.2H2O 37,3 моркви Daucus carotaL. Було проведено два мікроелементи: розділениху часі досліди, у кожному з яких було H3BO3 6,2 використано калюси трьох генотипів. У досліді І MnSO4.4H2O 22,3 генотипи б.к.9 F1(502 x Нантська харківська), б.к.17 ZnSO4.4H2O 8,6 F1(508 х Нантська харківська х Консервна), б.к.21 Kl 0,83 F1(505 х Нантська харківська); у досліді 2 Na2MoO4.4H2O 0,25 генотипи б.к.13 F1(416 х Нантська харківська), CuSO4 5H2O 0,025 б.к.14 F1(508 х Нантська харківська), б.к. 25 CoCl2.6H2O 0,025 Нантська харківська. Живильні середовища готували за допомогою загальноприйнятих методів. органічні речовини: Рівень рН доводили до 5,8, автоклавування промезоінозит 100 водили при тискові 1 атм протягом 30 хв. тіамін хлорид 0.1 Всі маніпуляції з рослинними об'єктами провоігіридоксин хлорид 0.5 дили в стерильних умовах ламінарного боксу. Канікотинова кислота 0.5 люси спочатку культивували протягом 30 днів на сахароза 30000 агаризованому середовищі MS з додаванням 2,4 агар 7000 Д, а потім на безгормональному середовищі MS і Недоліком відомих середовищ є низький вихід запропонованому середовищі протягом 40 днів. соматичних ембріоідів для більшості генотипів, Підтримували температуру повітря 25°С і 16-ти недостатній при використанні даного методу для годинний фотоперіод з інтенсивністю освітлення масового мікроклонування. Це примушує досягати 1000 лк. Підраховували кількість ембріоїдів, утвоодержання необхідної кількості ембріоїдів за рахурених на кожному калюсі. До уваги приймали нок збільшення об'ємів калусів чи суспензій і числа ембріоїди довжиною не меншою за 2 мм, почиїх пасажів. наючи з стадії ""торпедо". Метою винаходу є підвищення виходу сомаРезультати дослідів (табл. 1) свідчать про те, тичних ембріоїдів у культурі in vitro, що здешевить що запропоноване середовище в середньому у 2,2 і прискорить процес мікроклонування. -2,9 рази збільшує утворення соматичних Мета досягається тим, що для індукції сомаембріоїдів порівняно з середовищем MS і, таким тичного ембріогенезу дедиференційовані культури чином, підвищує е фективність процедури культивують спочатку на середовищі MS з додамікроклонування та зменшує її собівартість. Таблиця 1 Живильне середовище MS (прототип) запропоноване Середній вихід соматичних ембріоїдів з 1 калюсу, шт. дослід 1 дослід 2 3,57 15,08 Комп’ютерна в ерстка М. Клюкін 32.74 6,68 НІР05 10,29 3,92 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601