Похідні сахарину, що мають інгібуючу активність по відношенню до протеолітичних ферментів і фармацевтична композиція на їх основі

1 Производные сахарина общей формулы (I), обладающие ингибирующей активностью в отношении протеолитических ферментов 9і .0 у г, соединение имеет кислотную функциональную группу 2 Производные сахарина по п 1, где п равно 4 3 Производные сахарина по п 2, где Ri представляет изопропил, R2 представляет 6диметиламино-СН2С(О)О(СЬІ2)2-Оили 6бензилоксиэтокси, и X представляет водород 4 Производные сахарина по п 3 общей структурной формулы сн(бн3; 0 CH-O-Z в которой R2 представляет диметиламино-СН2С(О)О(СЬІ2)2О- или бензилоксиэтокси и Z представляет одну из следующих групп о О N—СН—( в которой Ri представляет низший алкил, F 2 представляет от одного до трех заместителей в ? одном или всех положениях 5, 6 и 7 и выбран из группы, включающей B=N-(CH2)PC(O)O(CH2)P, -О- и Р-окси(низший)алкокси, где р и р' представляют целое число от 1 до 4, R представляет фенил (низший)ал кил и B=N представляет ди(низший)алкиламино, F 3 представляет водород, ? X представляет водород или галоген, и -Y- представляет -N=C(Z")-N(Z")- или -N=C(R"> N(R'")- и где R'" группы вместе с атомами углерода или азота, к которым они присоединены, представляют группу -(Cbbjn-, n равно целому числу от 3 до 5, и Z" группы вместе с атомами углерода и азота, к которым они присоединены, представляют пиридогруппу, или их фармацевтически приемлемая кислотноаддитивная соль, если соединение имеет основную функциональную группу, или их фармацевтически приемлемая основно-аддитивная соль, если 5 Фармацевтическая композиция, имеющая ингибирующую активность в отношении протеолитических ферментов для лечения дегенеративных заболеваний, содержащая активный ингредиент и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента она содержит производное сахарина формулы (I) в которой Ri представляет низший алкил, R2 представляет от одного до трех заместителей в одном или всех положениях 5, 6 и 7 и выбран из группы, включающей B=N-(CH2)PC(O)O(CH2)P, -О- и ^-окси(низший)алкокси, где р и р' представляют целое число от 1 до 4, R представляет фенил (низший)ал кил и B=N представляет ди(низший)алкиламино, 00 (О F?3 представляет водород, X представляет водород или галоген, и -Y- представляет -N=C(Z")-N(Z")- или -N=C(R"> N(R'")- и где R'" группы вместе с атомами углерода или азота, к которым они присоединены представляют группу -(Cbbjn-, n равно целому числу от 3 до 5, и Z" группы вместе с атомами углерода и азота, к которым они присоединены представляют пиридогруппу, или его фармацевтически приемлемая кислотноаддитивная соль, если соединение имеет основную функциональную группу, или его фармацевтически приемлемая основно-аддитивная соль, если соединение имеет кислотную функциональную группу, в эффективном количестве 6 Фармацевтическая композиция по п 5, где п равно 4 7 Фармацевтическая композиция по п 6, Ri представляет изопропил, R2 представляет 6диметиламино-СН2С(О)О(СЬІ2)2-Оили 6бензилоксиэтокси, и X представляет водород Изобретение относится к производным сахарина, которые ингибируют ферментативную активность протеолитических (расщепляющих белки) ферментов, способам их получения, способам их использования при лечении дегенеративных заболеваний, и к содержащим их фармацевтическим композициям Ингибиторы протеолитических ферментов полезны при лечении дегенеративных расстройств, таких как эмфизема, ревматоидный артрит и панкреатит, существенным элементом которых является расщепление белков Наиболее широко распространенным классом протеолитических белков являются серинпротеазы Некоторые серинпротеазы можно охарактеризовать, основываясь на их специфичности по отношении к определенным субстратам, таким как химотрипсин-подобные или эластаза подобные Химотрипсин и химотрипсинподобные ферменты обычно расщепляют пептидную связь в белке в месте, где аминокислотой со стороны карбонильной группы является Тгр, Туг, Phe, Met, Leu или другая аминокислотная, которая содержит ароматический фрагмент или большую боковую алкильную цепочку Эластаза и эластаза подобные ферменты обычно расщепляют пептидную связь в место, где аминокислотным остатком с карбонильной стороны пептидной связи является Ala, Val, Ser, Leu или другие маленькие аминокислоты Как химотрипсин подобные, так и эластаза подобные ферменты обнаруживаются в лейкоцитах, клетках молочной железы и секрециях поджелудочной железы и могут выделяться многими типами бактерий, дрожжей и паразитов Dunlap et al в Международной заявке Wo 90/13549 описывают серию 2-замещенных производных сахарина, полезных в качестве ингибиторов протеолитических ферментов Barber et al, в Патенте США 2855401 приводят соединение формулы 44682 8 Фармацевтическая композиция по п 7, где соединение имеет общую структурную формулу CH-O-z о в которой R2 представляет диметиламино-СН2С(О)О(СЬІ2)2О- или бензилоксиэтокси и Z представляет одну из следующих групп 1 9 Соединение по любому из пп 1-4 для получения лекарственного средства для лечения дегенеративных заболеваний 10 Композиция по любому из пп 5-8 для лечения дегенеративных заболеваний где Ri и R2 каждый выбирают из атома водорода, низшего алкила или низшего гидроксиалкила, п обозначает целое число от 5 до 9, а R3 является группой, выбранной из метансульфона мидной группы, бензолсульфонамидной группы и осульфонбензимидной группы Указывается, что эти соединения полезны при лечении бильгарциоза Brown et al в Патенте США 3220940 сообщают об использовании кислых никелевых ванн соединения формулы О А N - [CH(R)]n - (O)nА - SO3H С О или его никелевой, натриевой, кобальтовой, калиевой, литиевой, магниевой и т п сульфонатных солей, где А выбирают из группы, включающей бензольное, бифенильное и нафталиновое кольца, R выбирают из группы, включающей атом водорода, гидроксил, атом хлора, брома, SO3H и метил, п является целым числом от 1 до 4 включительно, пі равно 0 или 1, П2 равно 0, 1 или 2, при этом, если П2 равно нулю, то и пі равно нулю Sunket et al в Европейском патенте 253092 описывают 2-сахаринил-(низший алкил)-1,4дигидропиридин-3-карбоксилаты, которые пре 44682 пятствуют агрегированию тромбоцитов и обладают антитромботической активностью Очень похожее описание может быть также найдено в Sunket etal , J MedChem , 1886-1890 (1988) Mylvey et al в Патенте США 4195023 приводят R1-2-R2CO-1,2-бензизотиазол-З-оны, где Ri обозначает атом галогена, алкокси-группу, алкиламино-группу, диалкиламино-группу, алкоксикарбонильную группу, амино-группу, нитрогруппу или атом водорода в бензоидном кольце, а R2 обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, галогенфенил, гетероарил или замешенный гетероарил, Ri-2-A-CO сахарины, где Ri имеет те же значения, что и заместители в бензеноидном кольце 1,2-бензизотиазол-З-онов, а А обозначает алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, фтор-фенил, гетероарил или замешенный гетероарил Указывается, что описанные соединения обладают ингибируюшей активностью по отношению в эластазе и полезны при лечении эмфиземы Аналогичное описание может быть найдено в Патенте Франции 2321288 Dunlap et al в Европейской заявке на патент 483928 А1 раскрыта 4-R4-R5 2сахаринилметиларилкарбоксилаты и 4,5,6,7тетрагидро-2-сахаринилметиларилкарбоксилаты, которые, как указывается, обладают ингибируюшей активностью по отношению к ферменту протеазе и полезны при лечении дегенеративных болезней Аналогичное описание может быть найдено в Патенте США 5128339 (авторы Dunlap etal) Jones et al в Патенте США 4276298 приводят 2^-1,2-бензизотиазолинон-1,1-диоксиды, где R является фенилом, замешенным атомом фтора, динитро-группой, трифторметильной группой, циано-группой, алкоксикарбонильной группой, алкилкарбонильной группой, карбоксильной группой, карбамоильной группой, алкилациламиногруппой, алкилсульфонильной группой, N,Nдиалкилсульфамоильной группой, трифторметокси-группой, трифторметилтио-группой, трифторметилсульфонильной группой и трифторметилсульфинильной группой или пиридилом, замешенным также как и R в том случае, когда R обозначает фенил, за исключением того, что пиридил может быть также мононитрозамешен-ным Указывается, что эти соединения обладают ингибирующей активностью по отношению к ферменту протеазе и полезны при лечении эмфиземы, ревматоидного артрита и других воспалительных заболеваний В настоящем изобретении заявляется соединение, имеющее следущую структурную формулу где Ri обозначает атом водорода, атом галогена, низший алкил, перфторзамещенный низший алкил, перхлорзамещенный низший алкил, низший алкенил, низший алкинил, циано-группу, амино группу, низшую алкиламино-группу, ди(низший алкил) амино-группу, низшую алкокси-группу, бензилокси-группу, низшую алкоксикарбонильную группу или фенил, и R2 обозначает от одного до трех заместителей по любому или во всех 5-, 6- или 7-, положениях выбранных из группы, включающей группу В = N(СН2)рС(0)0(СН2)р'-0-, группу -0-(СН2)р-(5-((СН2)р'В = N-2-фуранил) и R-OKCH(HH3LUH^anKnnoKCH группу, где Р и р' являются целыми числами от 1 до 4, R обозначает низший алкил, фенил или фенил(низший)алкил, при этом фенил может содержать от одного до трех заместителей, выбранных из группы, включающей низший алкил, В = Nкарбонил, группу В = N, низшую алкокси-группу, В=І\І-(низшую)алкокси-группу и атом галогена, а В = N обозначает амино-группу, низшую алкиламино-группу, ди(низший)алкиламино-группу, карбокси(низший)алкиламино-группу, 1пирролидинильную группу, 1-пиперидинильную группу, 1 -азетидинильную группу, 4морфолинильную группу, 1-пиреразинильную группу, 4-(низший)алкил-1-пиперазинильную группу, 4-бензил-1-пиперазинильную группу или 1имидазолинильную группу нил, R3 обозначает атом водорода, низший алкил или фе X обозначает атом водорода, нитро-группу, атом галогена, низший алкил, перфторзамещенный низший алкил, перхлорзамещенный низший алкил, фенил, фенил(низший)алкил, феникарбонильную группу, пирид ил (низший) алкил, формильную группу, низшую алканоильную группу, карбоксильную группу, низшую алкоксикарбонильную группу, аминокарбонильную группу, низшую алкиламинокарбонильную группу, ди(низший)алкиламинокарбонильную группу, циано-группу, группу В = N, В = І\І-(низший)алкил, В =N-( низшую) алкалоильную группу, В = N(низшую)алкоксикарбонильную группу, гидроксильную группу, низшую алкокси-группу, фенилокси-группу, В = І\І-(низшую)алкокси-группу, низшую алкилтио-группу, фенилтио-группу, низшую алкилсульфонильную группу, фенилсульфонильную группу или В = N-сульфонильную группу, при этом фенил является незамещенным или содержит от одного до трех заместителей, выбранных из группы, включающей низший алкил, низшую алкокси-группу и атом галогена, а группа В = N имеет указанное выше значение, и -Y- обозначает остальные атомы моноциклической или бициклической, замещенной или незамещенной карбоциклической или гетероциклической кольцевой системы, или его фармацевтически приемлемая кислотноаддитивная соль в том случае, если соединение имеет основную функциональную группу или его фармацевтически приемлемая основа - аддитивная соль, если соединение имеет кислотную функциональную группу* В изобретении далее заявляется способ получения соединения формулы I, который заключается в конденсации соответствующего соединения, имеющего структурную формулу II 8 пиперазинильная группа, фенил (низший)ал кил, пиридил(низший)алкил, низшая алкиламинокарбонильная группа, низшая алкилтиогруппа и карбокси(низшая) алкиламино-группы В следующих группах часть указанных соединений, представляющая собой углеродную цепочку, содержит от двух до десяти атомов углерода, преимущественно от двух до четырех атомов углерода, и является разветвленной или неразветвленной низший алкенил, низший алкинил, амино(низший) алкил, низшая алкоксильная часть группы В = N -(низшая)алкоксикарбонильной группы, низшая алканоильная группа, В = N - (низший) алкил, В = N -(низшая)алканоильная группа и В = N -(низшая)алкоксикарбонильная группа Галоген обозначает атом фтора, хлора, брома или иода В соединениях формулы I Ri преимущественно обозначает первичный или вторичный алкил, имеющий от двух до четырех атомов углерода, или низшую алкокси-группу, а R2 преимущественно присоединяется по положению 6 и наиболее преимущественно является группой В = N-(CH2)pC(O)O(CH2)P,-O- или Rокси(низший)алкоксилом Далее, -Y- преимущественно обозначает группы -(СН2)т-, С=0)-, -(СН 2 )т-0-), CHR-O-,-CR2-O-, -C[(CH2)n]-O-, -C[CH2CH2N(R)CH2CH2]-O-, -(CH2)mN(R')-, -CHR-N(R')-, -CR2-N(R')-, -C(R') = (R')-O-, C(R') = C(R')-N(R')-, -C(=O)-C(R ) = C(Z')-, -C(Z')=C(Z')-O-, -C(Z') = C(Z' C(Z") = N-, -N = C(Z")-N-(Z"), C(Z")-( Z")-S-, N = C(R" )-N(R" )- или -C(R" ") = C(L)-N(L), где группы Z" совместно с атомами углерода, к которым они присоединяются, обозначают бензо-группу, группы R" вместе с атомами углерода или атомами азота, к которым они присоединены, обозначают группы -(C2)n'-, -(CH2)qN(R*) (CH2) q'- или тиазоло-группу, группы L вместе с атомами углерода или атомами азота, к которым они присоединены, обозначают пиридо-группу, п' - целое число от 3 до 5, R* обозначает атом водорода, фенил, фенил (низший )алкил или низший алкил, q равно 1 или 2, q' равно 1 или 2, R" " обозначает атом водорода, циано-группу, группы CO2U, и SO2L" или нитро-группу, U обозначает атом водорода, низший алкил или ди(низшую) алкиламино-группу, L" обозначает атом водорода, низшую алкокси-группу, ди(низшую)алкиламино-группу или трифторметильную группу, m равно 1, 2, 3 или 4, п равно 3, 4 или 5, R обозначает тот же или отличный низший алкил, фенил или фенил(низший)алкил, R' обозначает атом водорода или группу R, R" обозначает атом водорода или группу R или же группа R" объединена с атомом углерода, к которому она присоединена, с образованием фураногруппы, группы Z' объединены с атомами углерода, к 44682 где О обозначает атом хлора или орома, с соответствующим соединением, имеющим структурную формулу III X ,0 в присутствии основания или с соответствующей основной солью соединения формулы III Еще одной целью настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для лечения дегенеративных заболеваний, которая содержит соединение формулы I с концентрацией, достаточной для ингибирования протеолитического фермента, в фармацевтическом носителе Наконец, еще одной целью настоящего изобретения является использование соединения формулы І в количестве, достаточном для ингибирования протеолитического фермента, в производстве лекарственного средства для лечения дегеративного заболевания у пациента, нуждающегося в подобном лечении Соединение формулы I ингибирует ферментативную активность протеолитических ферментов и полезно при лечении дегенеративных заболеваний Часть соеденения формулы I имеющая структурную формулу X ниже описывается далее формулой -Z Аналогично соединение формулы III описывается далее формулой H-O-Z, Сахарин является 1,2-бензизотиазол-(1 Н)-3ОН-1,1-ди-оксидом и соединения формулы I, которые представляют собой 2-[Z-O-CH(R3)]-4-Rr(5, 6 и/или 7)-R2-1,2-бензизотиазол-(1 Н)-3-0Н-1,1 диоксидами, являются, соответственно 2-[Z-0CH(R3)]-4-R-i(5,6 и/или 7)-R2-caxapHHaMH В соединениях по формулам I-III выражение "соответствующий" означает, что определяемая переменная в одной формуле имеет то же значение и в другой формуле Углеродная цепочка, представляющая часть указанных соединений, содержит от одного до десяти атомов углерода, преимущественно от одного до четырех атомов углерода и является разветвленной или неразветвленной в следующих группа низший алкил, перфторзамещенный низший ал кил, перхлорзамещенный низший алкил, низшая алкоксикарбонильнал группа, низшая алкиламино-группа, ди-(низшая)алкиламино-группа, низшая алкокси-группа, карбокси (низшая) алкиламино-группа, 4-(низший алкил)-1 44682 10 которому они присоединены, и образуют бензориле, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире, дигруппу, фурано-группу, пиридо-группу, пиримидиметилформамиде, N-метилпирролидоне, дихлорно-группу или пиридазино-группу и метана, ксилоле, толуоле или низшем алканоле или смеси указанных растворителей, в интервале Z" объединены с атомом углерода или атомом от комнатной температуры до температуры кипеазота, к которому они присоединены, и образуют ния растворителя или смеси растворителей пиридо-группу, пиримидино-группу или пиридазино-группу, в которых фенил, бензо-группа, фураСоединения формулы II и формулы III известно-группа, пиридо-группа, пиримидино-группа или ны или могут быть получены известными спосопиридазино-группа могут содержать от одного до бами, описанными ниже трех заместителей, выбранных из группы, вклюСоединение формулы II, в котором R3 обозначающей низший алкил, В=1\1-карбонильную группу, чает атом водорода, можно получить диазотирогруппу B=N, низшую алкокси-группу, B=Nванием соответствующего (низший) алкил 2(низшую)алкокси-группу и атом галогена, при этом амино-3,4 или 5-R2-6-Pi-6eH3oaTHoro эфира, хлорзначение группы В= указано выше сульфонилированием полученной 2-диазониевой соли (низший)алкил 3,4 или 5-P2-6-Ri-6eH3oaTHoro Предпочтительными соединениями по наэфира диоксидом серы в присутствии хлорида стоящему изобретению являются, в частности, меди (II) и циклизацией полученного (низтакие, в которых п' равно 4, R* обозначает атом ший)алкилового эфира 2-хлорсульфонил-З, 4 или водорода, q равно 1, q' равно 2, R" " обозначает 5-R2-6-Ri-6eH3oaTa аммиаком с образованием соатом водорода, циано-группу, группу CO2L' или ответствующего соединения, имеющего структурSO2L", U является низшим алкилом, a L" является ную формулу IV ди(низшей)алкиламино-группой, в частности, если Ri является низшим алкилом, R2 является группой ди(низший)алкиламино-(СЬІ2) рС(О)О(СЬІ2)р'-Оили фенил (низшей) алкилокси(низшей)алкоксигруппой, R3 обозначает атом водорода, а X является атомом водорода, атомом галогена, низшим алкилом, фенилом, фенил(низшим)алкилом, фенил карбонильной группой, группой B=N, B=N(низшим)алкилом, фенилокси-группой или низшей гидроксиметилированием которого с помощью алкоксикарбонильной группой формальдегида можно получить соответствующий Наиболее предпочтительными соединениями 2-гидроксиметил -4-Rr(5, 6 или 7)-R2-caxapnH, являются такие, в котором Ri обозначает изозамещением гидроксильной группы в котором пропильную группу, R2 является группой 6хлором или бромом, используя, например, хлоридиметиламино-СН2С(О)О(СЬІ2)2-Оили 6стый тионил, бромистый тионил, треххлористый бензилокси-этокси-группой, а X является атомом фосфор или трехбромистый фосфор, можно поводорода, в частности такие, в которых Z обозналучить соответствующее соединение формулы II чает одну из следующих структурных формул Соединение формулы II, в котором R3 обозначает атом водорода, a Q обозначает атом хлора, можно получить в одну стадию из соответствующего соединения формулы IV хлорметилированием формальдегидом и хлортриметилсиланом в присутствии кислоты Льюса, например, хлорида олова При получении соединения формулы I из соответствующего соединения формулы II и соотСоединение формулы II, в котором R3 обознаветствующего соединения формулы III в присутстчает низший алкил, a Q обозначает атом хлора, вии основания последнее может быть любым можно получить винилированием соответствуюоснованием, которое само не вступает в реакцию щего соединения формулы IV соответствующим в условиях ее проведения и предпочтительно явзамещенным или незамещенным виниловым ляется гидридом щелочного металла, карбонатом эфиром или низшей алкановои кислотой в присутщелочного металла, алкоксидом щелочного мествии динатриевой соли тетрахлорида палладия, талла, три(низшим)алкиламином, талловым низобрабатывая затем полученные 2-(замещенный шим алкоксидом, 1,8-диазабицикло 5 4 0 кндец-7или незамещенный BHHHn)-4-Rr(5, 6 или 7)-R2еном или 7-метил-1,5,7-триазабицикло 4 4 0 дец-5сахарин хлористым водородом Используя, наеном В условиях проведения реакции основание пример, незамещенный винилацетат, можно полуможет образовывать соль с соединением формучить соответствующее соединение формулы II, в лы III, которая вступает во взаимодействие с сокотором R3 обозначает метил единением формулы II Соединение формулы II, в котором R3 обознаОсновная соль соединения формулы III может чает атом водорода или фенил, можно получить быть также получена отдельно, а затем конденсипо реакции фенилтио^з-метилирования соответроваться с соединением формулы II и предпочтиствующего соединения формулы IV или его остельно является солью щелочного металла, в чановной соли с соответствующим фенил-Rsстности цезия, или талловой солью Реакцию хлорметилсульфидом с образованием соответстконденсации проводят в органическом растворивующего 2-(фенилтио^з-метил)-4^г(5, 6 или 7)теле или смеси органических растворителей, коR2-caxapHHa с последующим замещением фенилторые являются инертными в условиях реакции, тио-группы в нем на атом хлора или брома, иснапример, в ацетоне, метилэтилкетоне, ацетонитпользуя, например, хлористый сульфурил или 11 44682 12 бромистый сульфурил в бис-хлорангидрид кислоты, который далее с помощью бензиламина переводят в бисСоединение формулы IV можно получить оббензиламид, циклизация которого с помощью хлоработкой соответствующего 2-Ri-3, 4 или 5-R2ристого сульфурила позволяет получить 5-хлор-2г\І,І\І-ди(низший)алкилбензамида низшим алкиллибензил-2Н-изотиазол-3-ОН Окислением с помотием и аминосульфонилированием полученного 2щью одного молярного эквивалента надкислоты Ri-3, 4 или 5-Р2-литий-г\І,г\Іполучают 5-хлор-2-бензил-2Н-изотиазол-3-ОН-1ди(низший)алкилбензамида диоксидом серы, с оксид, нагреванием которого под давлением вмепоследующей обработкой гидроксиламин-Осте с 2-(низшим)алкоксифураном получают 4сульфоновой кислотой или хлористым сульфури(низший)алкокси-7-гидрокси-2-бензил-1,2лом и аммиаком, а затем циклизуя полученный 2бензоизотиазол-2Н-3-ОН-1-оксид, а окислением Ri-3, 4 или 5-Р2-6-аминосульфонил-г\І,І\Іодним молярным эквивалентом надкислоты полуди(низший)алкилбензамид кипячением с обратчают соответствующий 4-(низший)алкокси-7ным холодильником в уксусной кислоте гидрокси-2-бензил-1,2-бензоизотиазол-2Н-3-ОН-1 Соединение формулы IV, в котором Ri ободи-оксид С помощью каталитического гидрировазначает первичный или вторичный алкил, содерния затем получают соответствующий 4-(низший) жащий от двух до четырех атомов углерода, моалкокси-7-гидроксисахарин формулы IV жет быть получено металлированием соответствующего соединения формулы IV, в коАналогично алкилированием полученного укатором Ri обозначает метил, двумя молярными занным способом 4-(низший)алкокси-7-гидрокси-2эквивалентами низшего алкиллития в инертном бензил-2-бензил-1,2-бензоизотиазол-2Н-3-ОН-1 растворителе, например, в тетрагидрофуране, и оксида низшим галоидным алкилом или подходяалкированием полученного 4-литийметил-5, 6 или щим замещенным низшим галоидным алкилом с 7-R2-caxapHHa подходящим галоидным алкилом последующим окислением и дебензилированием Обе указанные реакции проводят в интервале получают соответствующий 4-(низший)алкокси-7температур от -80°С до -50°С Приведенный выше R2-caxapnn формулы IV, в котором R2 является 2-Ri-3, 4 или 5^2-г\І,г\І-ди(низший)алкилбензамид, низшей алкокси-группой, циклоалкокси-группой, в котором Ri обозначает первичный или вторичВ=І\І-(низшей) алкокси-группой, гидроный алкил, имеющий от двух до четырех атомов кси(низшей)алкокси-группой, полигидроуглерода, может быть получен по аналогичной кси(низшей)алкокси-группой или ее ацеталем или последовательности превращений металлировакеталем, (низшей)алкокси(низшей) алкоксиние-алкилирование, начиная с соответствующего группой, поли(низшей)алкокси(низшей)алкокси2-метил, этил или пропил-3, 4 или 5-R2-N.Nгруппой, гидроксиполи(низшей)алкиленоксиДИ(низший)алкил-бензамида группой или (низСоединение формулы IV, в котором Ri обошей)алкоксиноли(низшей)алкиленокси-группой значает первичный или вторичный алкил, содерПростые химические превращения, которые жащий от двух до четырех атомов углерода, моявляются обычными и хорошо известным специажет быть также получен введением группы Ri на листам в области химии, могут быть осуществлеболее ранних стадиях синтеза Сопряженным прины для проведения изменений в функциональных соединением соответствующего Ri-купрата к 2группах соединений по настоящему изобретению циклогексанону и последующим метоксикарбониНапример, каталитическим восстановлением гелированием полученного енолята меди с помотероциклической системы с образованием соотщью метилциано-формиата по методу Wmkler et ветствующей частично насыщенной гетероциклиal (Tetrahedron Letters, p 1051, 1987, Journal of ческой системы, каталитическим Organic Chemistry, Vol 54, p 4491, 1989) получают дебензилированием бензиловых эфиров с обрасоответствующий 2-MeTOKCHKap6oHHn-3-Rr зованием соответствующих спиртов, конденсацией спиртов с кислотами в присутствии конденсициклогексанон, енольной этерификацией которого рующего агента с образованием соответствующих бензилтиолом в присутствии кислой глины полуэфиров, десилилированием силиловых эфиров с чают смесь соответствующих метилового эфира образованием соответствующих спиртов 6-Ri-2-6eH3nnTHO-1 -циклогексенкарбоновой кислоты и метилового эфира 6^1-2-бензилтио-3Фармацевтически приемлемой кислотно- или циклогексенкарбоновой кислоты, ароматизация основно-аддитивной солью может быть любая которых дихлордицианобенхохиноном позволяет фармацевтически приемлемая кислотно или осполучить соответствующий метиловый эфир 2-Rr новно-аддитивная, однако предпочтительно она 6-бензилтиобензойной кислоты, последовательсодержит простой анион, например, является гидным окислением-хлорированиемрохлоридной солью,или катион, например, являдебензилированием полученного соединения хлоется натриевой или калиевой солью, соответстром в водной уксусной кислоте получают метиловенно Если соль, содержащая простой анион или вый эфир 2^1-6-хлор-сульфонбензойной кислоты, катион, неприемлема, поскольку не является крициклизацией которой с помощью аммиака полусталлической или не обладает достаточной расчают соответствующий 4Ri-caxapHH формулы IV творимостью или гигроскопичностью, то можно использовать соль со сложным анионом, наприПриготовление некоторых соединений формер, метансульфонат, или сложным катионом, мулы IV требует связывания обоих колец Напринапример, диэтиламмониевую соль, соответстмер, для получения соединения формулы IV, в венно В любом случае при использовании для котором Ri является низшей алкокси-группой, a R2 лечения человека кислотно- или основноявляется гидроксилом, 3,3-тиобиспропионовую аддитивная соль должна быть нетоксичной и не кислоту с помощью хлористого тионила переводят 13 44682 14 должна препятствовать ингибирующему воздейстной температуры По каплям в течение 15 минут вию на эластазу свободной основной или кислотпри непрерывном перемешивании добавляют ной формы соединения формулы I хлористый сулъфурил (54г) Перемешивают при -0 - 5°С еще в течение 30 минут, белый осадок отВ приводимых ниже способах получения и фильтровывает и промывают безводным эфиром примерах продукты получены исходя из известных (2л) Растворитель удаляют в вакууме и получают используемых материалов и ожидаемых путей бледно-желтое масло, которое растворяют в тетпротекания реакций в процессе синтеза Очистка рагидрофуране (150мл) Полученный раствор охили чистота и подтверждение структуры исходных лаждают до 0°С и порциями в течение 15 минут соединений и продуктов реакций проводили или порциями добавляют концентрированный водный измеряли путем измерения интервала температураствор аммиака (28%, 60мл) В течение этой ры плавления, оптического вращения, элементоперации поддерживают температуру не выше ным анализом, инфракрасным спектральным ана10°С После перемешивания в течение 15 минут лизом, ультрафиолетовым спектральным при комнатной температуре тетрагидрофуран и анализом, масс-спектральным анализом, спектроизбыток аммиака удаляют, а остаток подкисляют скопией ядерного магнитного резонанса, газовой соляной кислотой (2N раствор) до рН1 Полученхроматографией, колоночной хроматографией, ное твердое вещество белого цвета отделяют, жидкостной хроматографией высокого давления, промывают водой (200мл) и гексаном (200мл) и жидкостной хроматографией среднего давления сушат, получал 2-амино-сульфонил-6-изо-пропили/или тонкослойной хроматографией N.N-диэтилбензамид (54г, выход 90%) Изобретение далее поясняется следующими примерами, которые ни в коем случае не ограниРаствор 2-аминосульфонил-6,-изо-пропилчивают настоящее изобретение N.N-диэтилбензамида (60г) в уксусной кислоте (400мл) кипятят с обратным холодильником в теПример 1 чение 24 часов, а затем охлаждают до комнатной Получение исходных соединений температуры Растворитель удаляют в вакууме а) Получение 2-хлорметил-4-изоМаслянистый остаток растворяют в воде (500мл) пропилсахарина и доводят рН до 1 с помощью 2 раствора соляной (II, Ri = i-Pr, R 2 = H, R 3 = H, Q = CI) кислоты Сырой продукт отделяют фильтрованин-Бутиллитий (2,5М, 10мл) добавляют в течеем, промывают водой (300мл), сушат в вакууме ние 10 минут при перемешивании в токе азота при при 60°С в течение 18 час и перекристаллизовытемпературе 0 - 5°С к раствору 2-изовают из смеси эфир - гексан, получая 4-изопропилбромбензола в безводном эфире (500мл) пропилсахарин (40г, выход 90%, т пл 177°С) Дают смеси нагреться до комнатной температуры, перемешивают при комнатной температуре в те(IV, Ri = і - Pr, R2 = Н) чение шести часов и охлаждают до -60°С 3 течеСмесь 4-изо-пропилсахарина (37,9г), фенилние 20 минут, поддерживая температуру не выше хлорметилсульфида (33,3г), тетрабутиламмо-50°С добавляют раствор диэтилкарбамилхлорида нийбромида (5,4г) и толуола (200мл) кипятят с (34г) в безводном эфире (50мл) В течение одного обратным холодильником в течение 24 час, а зачаса дают температуре смеси подняться до комтем летучие вещества отгоняют, колоночной хронатной Добавляют воду (100мл) Эфирный слой матографией на силикагеле (485г), элюируя внаотделяют, промывают насыщенным водным расчале гексаном, затем смесью гексан-дихлорметан твором соли (200мл), сушат над сульфатом маг(1 1), а затем дихлорметаном получают из гекния и эфир отгоняют Остаток перегоняют (80 сан-дихлорметанового элюита 2-фенилтиометил90° / 0,1мм ртст) и получают 2-изопропил-г\І,І\І4-изопропилсахарин в виде масла бледно-желтого диэтил-бензамид (44г, выход 80%) цвета (53,5г, выход 92%) К раствору N,N,N,N,2-Фенилтиометил-4-изопропилсахарин (53,5г), хлористый сульфурил (40мл, 67,2г) и дихлорметан тетраметилэтилендиамина (25,5г) в безводном (250мл) смешивают при комнатной температуре эфире (600мл) добавляют S-бутиллитий (1,ЗМ, Начинается слабая экзотермическая реакция и 170мл) и смеси охлаждают в токе азота до -70°С смесь оставляют при комнатной температуре на По каплям добавляют раствор 2-изо-пропил-г\І,І\І17 час, а затем летучие вещества отгоняют Остадиэтилбензамида (44г) в безводном эфире ток перекристаллизовывают из гексана и получа(300мл) в течение 20 минут В процессе прикапыют три порции (33,55г, Тпл 101 - 102°С, 3,45г, вания поддерживают температуру на уровне -60°С Тпл 100 - 10ГС, 0,45г, Тпл 99 - 100°С, всего или ниже По завершении указанной операции 38,55г, выход 91%) Все три порции объединяют и смесь перемешивают при температуре -70°С в перекристаллизовывают из смеси изо-пропиловый течении 30 минут, затем в течение 30 минут дают спирт (ЗОмл)-гексан (270мл) и получают 2нагреться до температуры -50°С, выдерживают хлорметил-4-изо-пропилсахарил в виде двух порпри этой температуре в течение 10 минут и вновь ций (33,5г. Тпл 101 - 102,5°С, 2,65г, Тпл 1 0 0 охлаждают до -70°С При помощи избыточного 101 °С) давления азота в течение 10 минут подают через трубку предварительно охлажденный до -60°С б) Получение 2-хлорметил-4-изо-пропил-6раствор диоксида серы (50г) в безводном эфире метоксисахарина (50мл) Температуру реакционной смеси в процес(II, Ri = і - Pr, R2 = 6 - Оте, R3 = Н, Q = СІ) се добавления поддерживают на уровне -50°С К раствору N,N,N,NПрактически мгновенно выпадает белый порошкотетраметилэтилендиамина (300мл) в безводном образный осадок сульфината ариллития Дают эфире (4л) добавляют втор-бутиллитий (1,ЗМ растемпературе в течение часа подняться до комнаттвор, 4л) и смесь охлаждают в токе азота до 15 44682 16 70°С По каплям в течение 30 минут добавляют смесь в течение 18 час, охлаждают до комнатной раствор 2-изо-пропил-4-метоксиN,Nтемпературы и выливают в воду Органический слой отделяют, промывают водным раствором диэтилбензамида (454,2г) в безводном эфире едкого натра (2 N, 50мл), сушат над сульфатом (300мл) Во время проведения этой операции магния и упаривают в вакууме Остаток перекритемпературу поддерживают ниже -60°С По оконсталлизовывают из смеси этилацетат - гексан и чании добавления смесь перемешивают при -70°С получают 2-хлорметил-4-изо-пропил-6в течение часа, дают нагреться до температуры 50°С, выдерживают при этой температуре в течеметоксисахарин (57г, выход 87% Т пл 151°С) ние 30 минут и вновь охлаждают до -70°С При в) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6- 2помощи избыточного давления азота в течение 20 (бензилокси) этокси сахарина минут подают через трубку предварительно охла(II, Ri = і - Pr, R2 = 6 - ОСН2СН2ОСН2РГ1, R3 = H, жденный до -40°С раствор диоксида серы (200г) в Q = CI) безводном эфире (200мл) Температуру реакциК раствору 1,0г (0,0039мол) 4-изо-пропил-6онной смеси в процессе добавления поддерживаметоксисахарина в 15мл хлористого метилена при ют на уровне -40°С Практически мгновенно выпакомнатной температуре добавляют 1,28г (5,122мл) дает белый порошкообразный осадок сульфината 1М раствора трехбромистого бора в хлористом ариллития По окончании добавления охлаждаюметилене По окончании добавления реагента щую баню убирают и перемешивают смесь при смесь кипятят с обратным холодильником в течекомнатной температуре двух часов, а затем охлание пяти час, охлаждают, упаривают досуха в важдают до -5°С По каплям в течение 15 минут при кууме и к остатку добавляют лед и насыщенный непрерывном перемешивании добавляют хлориводный раствор бикарбоната натрия Водный расстый сульфурил (190г), поддерживая температуру твор один раз экстрагируют этилацетатом, а затем не выше 10°С Перемешивают при 0 - 5°С еще в подкислят до рН 1 с помощью концентрированной течение 30 минут, белый осадок отфильтровывасоляной кислоты После экстракции смесью этиют и промывают безводным эфиром (2л) Растволадетат/диэтиловый эфир (8 2), сушки органичеритель удаляют при обычном давлении и получаского экстракта и удаления растворителя в вакууют темное масло, которое растворяют в ме получают 0,9г (96%) 6-гидрокси-4-изотетрагидрофуране (1,4л) Полученный раствор пропилсахарина (IV, Ri = і - Pr, R2 = 6 - ОН) в виде охлаждают до -10°С и порциями в течение 15 микристаллического вещества белого цвета, которое нут добавляют концентрированный водный расбез дальнейшей очистки используют на следуютвор аммиака (28%, 540мл) В течение этой опещей стадии рации поддерживают температуру не выше 15°С Используют также альтернативную методику После перемешивания в течение 15 минут при К перемешиваемой суспензии 62,74г (0,47мол) комнатной температуре тетрагидрофуран и избыхлорида алюминия (III) в 500мл хлороформа при ток аммиака удаляют в вакууме, получал темное 0°С добавляют 43,9г (0,7мол) этантиола В течемасло, которое разбавляют вбдой (6,0л) и подкисние одной минуты образуется прозрачный расляют соляной кислотой (3 раствор) до рН 1 Полутвор К полученному раствору в течение 30 минут ченное твердое вещество светло-желтого цвета добавляют раствор 20,Ог (0,078мол) 4-изо-пропилотделяют фильтрованием, промывают водой 6-метоксисахарина Дают раствору нагреться до (800мл), сушат при 60°С в вакууме в течение 18 комнатной температуры и перемешивают при час, перекристаллизовывают из смеси этилацетат 60°С в течение 3 - 4 час После охлаждения смесь гексан (800мл - Зл) и получают 2выливают в ледяную воду и подкисляют разбаваминосульфонил-6-изо-пропил-4-метоксиN,Nленным раствором соляной кислоты Выделивдиэтилбензамид (429г, выход 72%, Т пл 122 шийся осадок отделяют фильтрованием, промы125°С) вают водой и сушат, получая 18,4г (970) 6гидрокси-4-изо-пропилсахарина Раствор 2-аминосульфонил-6-изо-пропил-4метокси-г\1,1\1-ди-этилбензамида (429,6г) в уксусной кислоте (1,5л) кипятят с обратным холодильником в течение 20 час, а затем охлаждают до комнатной температуры Растворитель удаляют в вакууме Маслянистый остаток растворяют в воде (6л) и доводят рН до 1 с помощью 6 раствора соляной кислоты Сырой продукт отделяют фильтрованием, промывают водой (2л), сушат в вакууме при 60°С в течение 18 час и перекристаллизовывают из смеси этиладетат -гексан, получая 4-изопропил-6-метоксисахарин (ЗОЗг, выход 91%, Т пл 188°С) (IV, Ri = і - Pr, R2 = 6 - ОМе) К суспензии параформальдегида (24г) и хлортриметилсилана (86,4г) в 1,2-дихлорэтана (200мл) прибавляют безводным хлорид олова (IV) (0,8мл) и полученный раствор перемешивают при нагревании на паровой бане в течение одного час К полученному прозрачному раствору добавляют 4изо-пропил-6-метоксисахарин (51,4г) и кипятят 6-Гидрокси-4-изо-пропилсахарина (30,0г, 0,12мол) в метаноле обрабатывают карбонатом цезия (20,28г, 0,062мол) Перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 3 - 4 час, избыток метанола удаляют при пониженном давлении и остаток сушат в вакууме Его растворяют в ДМФА и добавляют хлорметил фен и л сульфид (21,72г, 0,14мол) Нагревают смесь до 70 - 80°С в течение 24 час, охлаждают, выливают в ледяную воду и экстрагируют смесью этилацетат/эфир Органические вытяжки промывают водой, насыщенным раствором соли и сушат Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на сили-кагеле, элюируя смесью этилацетат/гексан, и получают 30,5г (67%) 4-изопропил-б-гидрокси-2-фенилтиометилсахарина К раствору 4-изо-пропил-6-гидрокси-2фенилтиометилсахарина (2,0г, 5,5ммол) в ТГФ (40мл) добавляют трифетилфосфин (1,46г, 5,56ммол), 2-бензилоксиэтанол (0,87г, 5,71 ммол) и 17 44682 18 диэтилазодикарбоксилат (0,99г, 5,68ммол) Смесь (100%) и заканчивая 20%-ным раствором этилперемешивают при комнатной температуре в теацетата в гексане, и получают 0,37г (81%) 2чение 16 часов, растворитель удаляют в вакууме хлорметил-4-изопропил-6и остаток очищают колоночной хроматографией (бензилоксикарбонилметокси)сахарина на силикагеле, элюируя 20%-ным раствором е) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6этилацетата в гексане, и получают 2,1 г (77%) 4гидроксисахарина изо-пропил-6-2-(бензилокси)этокси 2(II, Ri = і - Pr, R2 = 6 - ОН, R3 = Н, Q = СІ) фенилтиометилсахаринасТ пл 98 - 99°С 4-изопропил-6-гидрокси-2К раствору полученного соединения (2,1 г, фенилтиометилсахарин (1,78г) в хлористом мети4,22ммол) в хлористом метилене при комнатной лене обрабатывают хлористым сульфурилом температуре добавляют хлористый сульфурил (0,43мл, 0,73г) и получают 1,2г (84%) 2-хлорметил(0,37мл, 4,65ммол) и смесь перемешивают в тече4-изопропил-6-гидроксисахарина с Т пл 149 ние 3 час Растворитель удаляют в вакууме, оста150°С, ток растирают с гексаном, полученное при этом ж) Получение 2-хлорметил-4-втор-бутил-6твердое вещество отделяют фильтрованием и метоксисахарина получают 1,67г (93%) 2-хлорметил-4-изо-пропил-6(II, Ri = втор - Ви, R2 = 6 - ОМе, R3 = Н, Q = СІ) 2-(бензокси)этокси сахарина с Т пл 101-102°с К смеси диэтиламина (89,1мл), триэтиламина (120,2мл) и хлористого метилена (500мл), охлажг) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6- 2денной в бане со льдом, по каплям в течение 40 (три-изопропил-силилокси)этокси сахарина минут добавляют п-анизоилхлорид (133,8г) (II, Ri = і - Pr, R = 6 - O C H C H O S I ( I - Pr), R = H, Q = СІ) Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в те-чение 40 минут, отК раствору 4-изо-пропил-6-гидрокси-2фильтровывают, промывают эфиром и растворифенилтиометилсахарина (2,0г, 5,509ммол) в ТГФ тель удаляют в вакууме Добавляют эфир, а затем (35мл), содержащему трифенилфосфин (1,59г, воду, органический слой отделяют и промывают 6,Обмол) и 2-(три-изо-пропилсилилокси)этанол 5%-ным раствором едкого натра, затем соляной (1,1 Зг, б.Оммол), при комнатной температуре докислотой, насыщенным раствором соли и сушат бавляют диэтилазодикарбоксилат (1,04мл, над сульфатом натрия Растворитель удаляют в б.бммол) Смесь оставляют перемешиваться на вакууме и остаток перегоняют на колонке Kugelночь (16 час), растворитель удаляют в вакууме и roht при температуре 140 - 180°С в условиях глуостаток очищают колоночной хроматографией на бокого вакуума и получают 164,8г 4-метокси-, силикагеле, элюируя 10%-ым раствором этилаледиэтилбензамида с Т пл 40-42°С тата в гексане, и получают 2,66г (86%) 4-изопропил-6-2-(три-изо-пропилсилилокси)этокси -2К раствору тетраглетилэтилендиаглина фенилтиометилсахарина в виде масла (50,3мл) в ТГФ (800мл) при -78°С добавляют вторбутиллитий (308мл, 1,08М), а затем 4-метоксиРаствор полученного соединения (2,6г, N.N-диэтилбензамида (62,2г) Полученную смесь 4,62ммол) в хлористом метилене обрабатывают перемешивают при -78°С в течение 70 минут и в хлористым сульфурилом (0,65г, 4,51 ммол) и петечение 35 минут добавляют этилиодид (26,63г, ремешивают смесь в течение 3 час Растворитель ЗЗЗммоля) Нагревают реакционную смесь до удаляют в вакууме, остаток растирают с гексаном комнатной температуры и перемешивают в течеПродукт отделяют фильтрованием и получают ние 1,5 час Реакцию прерывают, добавляя насы1,73г (76%) 2-хлорметил-4-изо-пропил-6- 2-(трищенный раствор хлорида аммония (100мл) Оргаизопропилсилилокси)этокси сахарина с Т пл 85 нический слой отделяют, сушат над сульфатом 86°С натрия и упаривают в вакууме Остаток очищают д) Получение 2-хлорметил-4-изопропил-6перегонкой на колонке Kugelroht при температуре (бензилоксикарбонилметокси)сахарина 190 - 210°С в условиях глубокого вакуума и полу(II, Ri = і - Pr, R2 = 6 - OCH2(CO)OCH2Ph), R3 = чают 58,1г 2-этил-4-метоксиN,NH, Q = Cl) диэтилбензамида Смесь 4-изопропил-6-гидрокси-2фенилтиометилсахарина (3,5г, 9,63ммол), ацетона К смеси ди-изопропиламина (40,7мл, (25мл) и карбоната калия (2,66г, 19,26ммол) пере290ммол) в ТГФ (800мл) при -78°С добавляют нмешивают в токе азота в течение 2 минут, а затем бутиллитий (100мл, 2.15М раствор) Смесь передобавляют бензилбромацетат (2,4мл, 14,45ммол) мешивают в течение 1/4 час, а затем при -78 С Смесь перемешивают в течение 6 час, отфильтдобавляют 2-этил-4-метокси- N.N-диэтилбензамид ровывают и фильтрат упаривают в вакууме Оста(235,Зг) в ТГФ (300мл) Полученную смесь переток очищают жидкостной хроматографией среднемешивают при -78°С в течение 2,5 час, а затем в го давления, элюируя 20%-ным раствором течение 1 часа при температуре 0°С и в течение этилацетата в гексане, и получают 4,67г (100%) 410 минут при -78°С добавляют этилиодид (23,2мл) изо-пропил-6-(бензилоксикарбонилметокси)-2в ТГФ (150мл) Реакцию прерывают добавлением фенилметилтиометилсахарина насыщенного раствора хлорида аммония (100мл) и растворитель удаляют в вакууме К остатку доК раствору полученного соединения (0,5г, бавляют эфир (500мл), эфирный слой промывают 1,043ммол) в хлористом метилене (5мл) при комнасыщенным раствором бикарбоната натрия натной температуре добавляют хлористый суль(50мл), 1 N раствором соляной кислоты, водой, фурил Смесь перемешивают в течение 4 час, насыщенным раствором соли, эфирный слой сурастворитель отгоняют в вакууме и остаток очишат над сульфатом натрия и растворитель удащают колоночной хроматографией на силикагеле ляют в вакууме Остаток очищают перегонкой под градиентным элюированием, начиная с гексана 2 2 2 3 20 19 44682 вакуумом (2мм ртст) и получают 46,6г (76%) 2(0,04мол) этилиодида, поддерживая температуру втор-бутил-4-метокси- N.N-диэтилбензамида на уровне -78°С Дают смеси нагреться до комнатной температуре, перемешивают в течение 16 К раствору тетраметилэтилендиамина (31мл) час и выливают в воду Полученное масло отдев ТГФ (500мл) при -78°С добавляют вторляют и хроматографируют на силикагеле, элюируя бутиллитий (170мл, 1,1М раствор), а затем 2-втор19%-ным раствором этилацетата в гексане, и побутил-4-метокси- N.N-диэтилбензамид (45г) в ТГФ лучают 2,86 (43%) 2-втор-бутилN,N(150мл) Смесь перемешивают при -78°С в течедиэтилбензамида в виде масла желтого цвета ние 15 минут, затем в течение 30 минут при температуре 0°С и в смесь при -78° С конденсируют Полученное вещество (10,45г, 0,045мол) расдиоксид серы (50мл) Нагревают смесь до -10°С, творяют в 70мл ТГФ и добавляют к смеси 39,2мл добавляют хлористый сульфурил (17мл), смесь (0,047мол) 1,2М раствора втор-бутиллития в цикмедленно при перемешивании нагревают до комлогексане и 7,1мл (0,047мол) тетранатной температуре и оставляют перемешиваться метилэтилендиамина в 250мл ТГФ, поддерживал на ночь Реакционную смесь добавляют к раствотемпературу на уровне -78°С По окончании дору гидроокиси аммония (94мл) в ТГФ (200мл), бавления смесь перемешивают еще в течение смесь отфильтровывают через слой силикаполучаса при -78°С, а затем обрабатывают при гель/сульфат натрия/песок и получают 51,8г 270°С диоксидом серы и дают нагреться до комаминосульфонил-6,-втор-бутил-4-метоксиN,Nнатной температуры Смесь упаривают досуха в диэтил-бензамида вакууме, осоаток растворяют в воде и добавляют при перемешивании к холодному раствору 15,2г Смесь уксусной кислоты (200мл) и 2(0,134мол) гидроксиламино-О-сульфоновой киаминосульфонил-6-втор-бутил-метоксиN,N слоты и 15,4мл (0,134мол) 35%-ного раствора еддиэтилбензамида (51,7г) оставляют на ночь кикого натра, получая 10,1 г (72%) 2петь с обратным холодильником Уксусную кислоаминосульфонил-6-втор-бутилN,Nту удаляют отгонкой, остаток выливают в смесь льда и 2М раствора едкого (80мл) Водный слой диэтилбенземида промывают хлористым метиленом, подкисляют Полученное соединение (6,83г, 0,22мол) расконцентрированной соляной кислотой и образотворяют в 100мл ледяной уксусной кислоты и кивавшийся осадок отделяют фильтрованием, полупятят полученный раствор с обратным холодильчая 4-втор-бутил-6-метоксисахарин ником в течение тринадцати часов, а затем упаривают досуха Остаток обрабатывают диэти(IV, Ri = вторбутил, R2 = ОМе) ловым эфиром и продукт отделяют фильтрованиСмесь 4-втор-бутил-6-метоксисахарина (Зг), ем, получая 5,7г (83%) диэтиламмониевой соли 4толуола, трет-бутоксида калия (1,4г) и тетрабутивтор-бутилсахарина ламмонийбромида (0,4г) нагревают до кипения и вносят фенилхлорметилсульфид (1,8мл) ПолуПолученное вещество (3,0г, 0,0096мол) после ченную смесь кипятят с обратным холодильником взаимодействия с 1,13мл (0,012мол) хлорметилприблизительно в течение 27 час, растворитель фенилсульфида в толуоле дает 3,47г (100%) 2удаляют в вакууме, остаток экстрагируют этилацефенилтиометил-4-втор-бутилсахарина татом, промывают насыщенным раствором соли и Взаимодействием полученного соединения сушат над сульфатом натрия Растворитель уда(3,2г, 0,00097мол) с 2,3мл (0,029мол) хлористого ляют в вакууме и остаток очищают колоночной сульфурила в 20мл хлористого метилена получахроматографией на силикагеле, элюируя 10%-ным ют2,4г (87%) 2-хлорметил-4-втор-бутилсахарина раствором этиладетата в гексане, и получают Получение целевых продуктов 2,63г (60%) 2-фенилтиометрил-4-втор-бутил-6Пример 1А метоксисахарина 2- (2,5-дигидро-5-оксо-3-фуранил)оксиметил 4-изопропил-сахарин К раствору 2-фенилтиометил-4-втор-5утил-6сщсци метоксисахарина (2,6г) в хлористом метилене (20мл) добавляют хлористый сульфурил (0,7мл) Смесь оставляют при комнатной температуре перемешиваться на ночь, затем растворитель упаривают в вакууме Остаток обрабатывают гексаном и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 6 час Образовавшийся осадок отделяют Раствор тетроновой кислоты (0,22г) в димефильтрованием и получают 1,33г 2-хлорметил-4тилформамиде (5мл) добавляют к суспензии гидвтор-бутил-6-метоксисахарина рида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном з/) Получение 2-хлорметил-4-втормасле, 0,Юг) в диметилформамиде (4мл) в токе бутилсахарина азота перемешивают на бане со льдом Баню со (II, Ri = вторбутил, R2 = Н, R3 = Н, Q = CI) льдом удаляют и перемешивание продолжают К раствору 4,74мл (0,031 мол) тетраметилэтиеше в течение 15 минут, а затем по каплям долендиамина в 300мл ТГФ (пропускают перед исбавляют раствор 2-хлорметил-4пользованием через слой оксида алюминия) доизопропилсахарина (0,547г) в диметилформамиде бавляют 5,8г (О.ОЗмол) 2-этилN,N(10мл), перемешивают еще в течении двух с подиэтилбензамида Раствор охлаждают до -78° С и ловиной дней, а затем выливают в воду Полученобрабатывают 34,9мл (0,031 мол) 0,9М раствора ную смесь экстрагируют этилацетатом, слой этилбутиллития в циклогексане, По завершении доацетата сушат над сульфатом магния и бавления перемешивают смесь в течение 20 миэтилацетат удаляют Перекристаллизацией полунут, а затем обрабатывает раствором 3,2мл 21 44682 ченного бесцветного твердого вещества (0,60г) из этилацетата получают целевое соединение (0,34г, выход 51%, Т.пл. 174-175°С) Примеры 1 B - 1W По методикам, аналогичным приведенном выше в Примере 1А, из 2-хлорметил-4изопропилсахарина или 2-хлорметил-4-изопропил6-метоксисахарина и соответствующего соеденения формулы III (H-O-Z-) получают соединения, обозначенные в Таблице 1. 22 ЗЫХОД (В) йитераал т.пд, і °С) Ра г творитея*. Ri =.Z__ 50 П2.5-174 СМ{ЄЦ); 24 P5-I77 N-CSi-0-l C5HSCO -Q интервал т . п л . ( с ) Пример ЕЛЯ перенрнотаялнааї 8-1Н 229-23G 0 си-.о 4І І 65 5-167 5 зіюшетет C)% этшацетат a \ = / 51 І85-ІЙН Выкод В.г~ -7 CKjO 34 168-170 этилацетат Та&нща I (тгродолжение) Пример Ф Бьссоа {К} Интервал т . п л . {"с) ?^;твориталь для перекристаллизso « Н 58 188-189 5 этаноя-гексан Ctfc 13 204-207 IK 178-189 5 ЮОВРОЯВІіОВЬіЙ СПИр (К) Интервал г.пл ; с ) Рэстаоригель для їїврекрйетаяявзаіщи 23 24 44682 Таблица I {продолжение) Табчица І (продолжение) з ы х о д (%) Интервал і ял f°Ci раотэорятэпь ДйЯ переврчсташгизащіи Ri_ -JL. їм* . (U -ерзал т пл І с) Растзоритйі ЛЬ для іесекрпсталлнз аттп ci-ho 29 129-131 227 228 згнанетат-цшшйгмаин метанол 77 СН3О 33 і 53 203 (ifcc) 195 1У65 эишацегат 10 CH3O 4В 22.5 Пена 136 5 137 5 четыркшюриегай углерод (Ь) Выход (S) Интервал т пл ( °С) Раетэо р нтг щ> для весекристаллизации Пример Таблица Ї (продолжение) выход (а) р интервал т ял ( с I 3 145 147 для перекристаллизации CHiO 33 I29-B2 сц. nv сн-о 36 І22 3-І24 32 СНзО П5 U7 четыреххлорисгай углерод 29 149 5-150 5 чешрекхжриетый углерод \ (a) Продукт перед проведением перекристаллизации очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя хлористым метиленом, а затем изменяющимся по соотношению компонентов растворами этилацетата в гексане (b) Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя хлористым метиленом, а затем изменяющимися по соотношению компонентов растворами этилацетата в гексане (c) Продукт очищают колоночной хроматографией (2 х) на силикагеле, элюируя хлористым метиленом, а затем изменяющимися по соотношению компонентов растворами этилацетата в гексане (d) Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесями этилаце 25 44682 26 тат/гексан (от 1/3 до 1/2), целевое соединение (0,24г, выход 24%, Т пл 210 212°С) * Кроме соединения по Примеру ЇМ с выходом 38% выделяют 2-(1-метил-2,6Пример ЗВ диоксоциклогексил)метил-4-изопропил-6-метокси2-(1-метил-3-ацетилкарбостирил-4сахарин (Т пл 159,5-161,5°С, из этилацетата) ил)оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин Пример 2 СН(СЦ) 2-(1-метил карбостирил-4-ил)оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин г 4-Гидрокси-1-метилкарбостирил (1,44г) добавляют при перемешивании к суспензии гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле, 0,36г) в диметилформамиде Смесь в течение 3/4 час при непрерывном перемешивании нагревают до температуры 100°С, а затем обрабатывают при комнатной температуре ультразвуком в течение получаса Добавляют 2-хлор-4-изопропил-6метоксисахарин (1,83г) Полученную смесь при перемешивании в течение 2 час нагревают до температуры 100°С, а затем выливают в воду (300мл), Добавляют соляную кислоту (1N раствор, 25мл) и экстрагируют хлороформом Хлороформенный экстракт сушат сульфатом натрия и хлороформ упаривают Тонкослойной испарительной хроматографией полученного твердого вещества (3,3г) на силикагеле, используя в качестве элюента смесь этилацетат - гексан (1 1), и перекристаллизацией полученного твердого вещества (0,7г, 23%) из этанола (90%) получают целевое соединение в виде твердого вещества желтого цвета (0,39г, выход 15%, Т пл 198 - 200°С) Пример ЗА 2-(1-фенил-3-ацетилкарбостирил-4ил)оксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин СЩСЦ): Смесь 3-ацетокси-4-гидрокси-1 фенил карбостирила (0,52г), карбоната калия (0,28г) и диметилформамида (7мл) перемешивают при комнатной температуре в течение получаса Добавляют 2-хлор-метил-4-изо-пропил-6метоксисахарин (0,71 г) и смесь обрабатывают ультразвуком при 40 С в течение часа, а затем перемешивают при комнатной температуре в течение 16 часов Дальнейшая обработка ультразвуком не влияет на степень полноты протекания реакции, что показано с помощью тонкослойной хроматографии Реакционную смесь выливают в воду и экстрагируют этилацетатом Органические вытяжки сушат и растворитель упаривают Жидкостной хроматографией среднего давления остатка (0,5г) на силикагеле, используя в качестве элюента смесь этилацетат - гексан (З 7), и перекристаллизацией продукта из метанола получают По методике, аналогичной приведенной выше в Примере ЗА, конденсируют З-ацетил-4-гидрокси1-метил карбостирил (0,63г) с 2-хлорметил-4изопропил-6-метоксисахарином (1,10г) и очищают продукт перекристаллизацией из смеси метанол эфир, получая целевое соединение в виде порошка белого цвета (0,28г, выход 20% Т пл 194 196°С) Пример 4А 2-(2,5-дигидро-2-оксо-3-фенилфуран-4-ил) оксиметил-4 -изо-пропил-6-метоксисахарин К раствору 3-фенил-2(5Н)-фуранона (0,88г) в метаноле (15мл) добавляют карбонат цезия (0,82г) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение часа, а затем метанол удаляют Остаток растворяют в диметилформамиде (15мл), добавляют к нему 2-хлор-4изопропил-6-метоксисахарин (1,52г) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух дней Добавляют силикагель (4,4г), летучие вещества отгоняют в вакууме и полученное твердое вещество подвергают испарительной хроматографии на силикагеле, используя смесь этиладетат - гексан (3 7) в качестве элюента Перекристаллизацией продукта из смеси этанол эфир получают целевое соединение в виде бесцветного твердого вещества (0,45г, выход 20%, Тпл 180-182°С) Примеры 4B-4I По методикам, аналогичным приведенной выше в Примере 4А, из 2-хлорметил-4-изопропил6-метоксисахарина и соответствующего соединения формулы III (H-O-Z) получают соединения, обозначенные в таблице II (a) Реакционную смесь обрабатывают, выливая в воду со льдом, экстрагируя ж этиладетатом, промывая органический слой 5%-ным раствором едкого натра, 1N раствором соляной кислоты, водой, затем насыщенным раствором соли и удаляя растворитель в вакууме Затем остаток перед кристаллизацией предварительно очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 40%ным раствором этилацетата в гексане, (b) Реакционную смесь обрабатывают, выливая в воду, добавляя 5%-ный раствор едкого натра и экстрагируя смесью этилацетат - хлористый метилен Органические вытяжки объединяют, промывают и сушат сульфатом натрия Растворитель удаляют в вакууме и остаток перед кристал 28 27 44682 лизацией предварительно очищают колоночной хроматографией на силикагеле, градиентно элюируя, начав с 25%-ного раствора этилацетата в гексане и заканчивая чистым этилацетатом Таблица П (продолжение) (К) Интервал т пл.Е С) Растворитель для пйрекрнсталлизашгЕ Пример Таблица П 19Й0-88 отсутствует CHjO Выход (ж) Интервал т . п и . ( " с ) Растворитель вля перекристаллизации пример 20 5/133-135 (в кме иашгидрагз) 46/204-206 дяхдомкпш-эфнр 39/218-220 (я визе ІМШфаге) Й1/173-176 метанші •1С 0 Ы-~~л V \» / \ Таблица В. (продолжение) Выкод (%) интервал т . н я . ( * С і Растворитель для перекриетаяяпэалпи Пример 4D Пример 4J 2-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6(бензилоксикарбонилметокси)сахарин о о 9/:25-22'? а а 4Є метзноп-дихаорметан апо 58/141-142 5 шсутегвует 5Ш5-87 отсутствует J Используя методику, аналогичную приведенной в Примере 4А, получают 0,71 г (62,8%) целевого соединения с Т пл 69 - 71 °С, исходя из 2хлорметил-4-изо-пропил-6(бензилоксикарбонилметокси)сахарина (0,876г), карбоната-цезия (0,326г), метанола, 2гидроксипиридо- 1,2-а пиридимин-4-она (0,324г) и ДМФА (5мл) Реакционную смесь разрабатывают, выливая ее в воду со льдом, экстрагируя этилацетатом и отделяя органический слой, который промывают насыщенным раствором соли и сушат над сульфатом натрия Пример 4К 2-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиридимин-2-ил оксиметил-4-втор-бутил-б-метоксисахарин (СН 3 СН 2 )(СН 3 )СН Используя методику, аналогичную приведенной в Примере 4А, получают 0,267г (58%) целевого соединения с Т пл 160 - 185°С, исходя из 2хлорметил-4-втор-бутил-6-метоксисахарина (0,318г, 1,0ммол), карбоната цезия (0,18г, 0,56ммол), метанола ( мл), 2-гидроксипиридо- 1,2а пиримидин-4-она (0,18г, 1,11ммол) и ДМФА Ре 29 44682 30 акционную смесь разрабатывают, выливая ее в соединение (60мл, выход 12,7%, Т пл 164 насыщенный раствор хлорида аммония, экстраги166°С) руя етилацетатом, упаривая органический слой в Пример 7 вакууме и очищал остаток колоночной хромато2,5-ацетил-4,7-дигидро-4,7графией на силикагеле элюированием вначале диоксобензофуран-6-ил) оксиметил-4-изопропил50%-ным раствором этилацетата в гексане, а за6-метоксисахарин тем 5%-ным раствором метанола в этилацетате Пример 5 2-3-(4-морфолинилметил)-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6СН.О метоксисахарин сцсо Смесь гидрохлорида 3-(4морфолинилметил)пиридо 1,2-а пиромидин-2,4диона (0,6г) и трет-бутоксида калия (0,4 г) в диметилформамиде (20мл) перемешивают при комнатной температуре в течение пяти минут Добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин (0,61 г) и перемешивание при комнатной температуре продолжают в течение часа Разбавляют реакционную смесь водой (50мл) и экстрагируют дихлорметаном (3 х 200мл) Органические вытяжки объединяют, сушат над сульфатом натрия и летучие вещества отгоняют, а потом высушивают в глубоком вакууме Сырой продукт (780мг) объединяют с 0,65г этого же продукта, полученного в другом эксперименте при том же загрузке исходных соединений, но при использовании гидрида натрия (60%-ная дисперсия в масле, 0,19г) вместо трет-бутоксида калия, и очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью дихлорметан-метанол (95 5), и получают целевое соединение (500мг, выход 23%), часть которого перекристаллизовывают из этанола (Т пл 177 180°С) Пример 6 2-3,5,6-триметил-1,4-диоксо-2,5циклогексадике-2-ил) оксиметил-4-изопропил-6метоксисахарин При перемешивании при комнатной температуре добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6метоксисахарин (0,34г) к раствору 2-гидрокси-3,5триметил-1,4-гидрохинона (0,182г) и метилтриазабициклодецена (0,18г) в ацетонитриле (20мл) Перемешивание при комнатной температуре продолжают в течение 24 час и образовавшийся темно окрашенный раствор выливают в ледяную воду, содержащую несколько капель соляной кислоты Полученное твердое вещество коричневого цвета очищают вначале колоночной хроматографией на силикагеле, а затем перекристаллизацией из горящего этанола и получают целевое При перемешивании при комнатной температуре добавляют 2-хлорметил-4-изопропил-6метоксисахарин (0,5г) к раствору 4,7-диметокси-5ацетил-6-гидроксибензофурана (0,39г) и метилтриазабициклодедена (0,28г) в ацетонитриле (20мл) Полученную смесь оставляют на ночь перемешиваться при комнатной температуре Поскольку тонкослойная хроматография показывает наличие непрореагировавшего 4,7-диметокси5~ацетил-6-гидрокси-бензофурана, то добавляют еще некоторое количество 2-хлорметил-4изопропил-6-метоксисахарина и одну каплю основания и перемешивание продолжают еще в течение 24 час, а затем смесь выливают в ледяную воду, содержащую соляную кислоту Полученное твердое вещество золотистого цвета частично очищают, используя в качестве элюента дихлорметан Реакцию повторяют, оставляя перемешиваться не при комнатной температуре, а при температуре 35 - 40°С Продукт и частично очищенный продукт из первого синтеза объединяют и очищают колоночной хроматографией на силикагеле, получая 2-(4,7-диметокси-5ацетилбензофуран-6-ил)оксиметил-4-изопропил-6метоксисахарин (0,4г, выход 24%) К раствору 2-(4,7-диметокси-5ацетилбензофуран-6-ил)окси-метил-4-изопропил6-метоксисахарина (0,3г) в ацетонитриле (5мл) добавляют по каплям раствор трицерийтетрааммоний-гекса-нитрата (0,98г) в воде (Змл) Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 минут и выливают в ледяную воду Полученное твердое вещество золотистого цвета очищают быстрой хроматографией на силикагеле, элюируя смесью дихлорметан эфир (95 5), и перекристаллизовывают при одновременной обработке ультразвуком из этанола, получая целевое соединение (0,13г, выход 46,6%, Т пл 193 - 195°С, с разложением) Пример 8 2- (3-хлор-6-метил-2-оксо-2Н-пиран-4-ил) оксиметил-4-изопропил-б-метоксисахарин Смесь 3-хлор-4-гидрокси-6-метил-2Н-пиран-2она (0,493г, 3,07ммол), ДМФА и карбоната калия (0,467г, 3,38ммол)перемешивают при комнатной температуре в токе азота в течение 0,5 час, а затем в одну порцию добавляют 2-хлорметил-4 31 32 остаток очищают так, как указано в Таблице III, либо (б) продукт осаждают из смеси льда с водой и отделяют фильтрованием, а затем очищают так, как указано в Таблице III Метод 2 растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают так, как указано в Таблице III (a) Продукт очищают перед кристаллизацией методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя 5%-ным раствором метанола в хлороформе (b) Продукт перед последней перекристаллизацией очищают перекристаллизацией из ацетонитрила, а затем колочной хроматографией на силикагеле, элюируя 5%-ным раствором этилацетата в хлористом метилене (c) Перед образованием гидрохлоридной соли обработкой 4.6N раствором хлористого водорода в этаноле свободное основание очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью 65% этилацетата / 30% метанола/ 5% триэтиламина (d) Продукт перед кристаллизацией очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, градиентно элюируя смесью гексан/эти л ацетат (от 3/1 до 2/1) (e) Продукт, очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 60%-ным раствором этилацетата в гексане (f) Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 60%-ным раствором этилацетата в гексане 44682 изопропил-6-метоксисахарин (0,978г, 3,22ммол) Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 час, а затем 3 час при температуре 75°С Выливают в воду, экстрагируют етилацетатом и органические вытяжки промывают насыщенным раствором соли и сушат Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 30%-ным раствором этиладетата в гексане, и после перекристаллизации из смеси эфир - гексан получают 0,25г (18,1%) целевого соединения с Тпл 182,5-183,5°С Примеры 9A-9J Соединения, приведенный ниже в Таблице III, получают по следующей методике Смесь подходящего соединения формулы III (Н-О-2), приблизительно 1,0 - 1,5 эквивалентов подходящего основания и подходящего растворителя перемешивают при комнатной температуре в течение приблизительно 0 - 6 0 минут, а, затем добавляют приблизительно 1,0-1,2 эквивалентов соответствующего 2-хлорметил-4-изопропил-6-Р2)сахарина Смесь перемешивают при температуре, близкой к комнатной, или при нагревании до температуры приблизительно 90°С в течение 1 - 4 8 час, а затем разрабатывают следующим образом Метод 1 реакционную смесь выливают в воду со льдом и либо (а) экстрагируют подходящим растворителем (в частности, этилацетатом, хлороформом или хлористым метиленом), органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и упаривают, а полученный Таблица III Основание/ рзсгаоритвяь Пример СН 3 О х> ДМФА МЕТОД Т ал (°С) Выхоз (%) 211 93 Растворитель для перйуриСЕталнззцнн 213 CHjO ДМФА СІ I 3 CN 33 34 44682 Таблица Ш (продолжение) Метод выделения СП3О РЬСІЬО (СИз)зО 1' пя (°С) Выход {%) мегипірна-щб Шікнпдсцен Растворитель для пе|іекр!!сіапшізашіи бензол/ КіСО 3 ДМФА дена 70 (є) (D (a) Продукт очищают колоночной хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью 5% метанол / СНСІз перед перекристаллизацией (b) Продукт очищают прекристаллизацией из CH3CN и затем колоночной хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью 5% этилацетат / СН2СІ2 перед указанной перекристаллизацией (c) Свободное основание продукта очищают колоночной хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью 65% этилацетат / 30% метанол / 5% триэтиламин пред образованием гидрохлоридной соли обработкой 4,6н раствором НСІ в метаноле (d) Продукт очищают колоночной хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью гексан/эти л ацетат (3/1 до 2/1) перед перекристаллизацией (e) Продукт очищают колоночной хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью 60% этилацетат / гексан (f) Продукт очищают колоночной хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью 40% этилацетат / гексан (g) Продукт очищают колоночной хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью этилацетат/гексан (1/7 до 1/6) перед перекристаллизацией (п) Продукт перед кристаллизацией очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, градиентно элюируя смесью этиладетат / гексан (от 1/7 до 1/6) Пример 10 СН(СН 3 ) а СН г - Смесь соединения по Примеру 4Н (0,359г, 0,834ммол), этилацетата (35мл) и палладия на угле гидрируют под давлением 50 фунтов на кв дюйм в аппарате гидрирования Парра в течение 1 и 3/4 час Добавляют дополнительное количество палладия на угле (0,16г) и реакцию продолжают еще в течение 2 час Катализатор удаляют фильтрованием и фильтрат упаривают в вакууме Сырой продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этиладетат/метанолл'риэтиламин (88,5 / 7,5 / 4) и получают 0,132г (36,5%) целевого продукта в виде свободного основания, которое растворяют в этаноле и обрабатывают раствором лимонной кислоты в метаноле, получая 0,142г продукта в виде лимоннокислой соли с Т пл 198-200°С Пример 11 2-3-(этоксикарбонил)-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6метоксисахарин CHICHI ЕЮ(О)С. Н—CHj—О К смеси трет-бутоксида калия (0,37г, З.Зммол) 36 35 44682 в ТГФ (20мл) добавляют этил 5-оксо-2сахарин (пиримидинил-2-ил)-2,5-дигидро-изоксазол-4карбоксилат (0,70г, З.Оммол) и перемешивают смесь в токе азота при температуре 40°С в течение 0,5 час Растворитель удаляют в вакууме и остаток высушивают в глубоком вакууме Сырой продукт смешивают с ДМФА (20мл) и добавляют К суспензии соединения по Примеру 9Н (0,76г) 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин в метаноле (30мл) добавляют ТГФ, а затем 2 рас(0,91г, З.Оммол) в ДМФ (5мл) Полученную смесь твор соляной кислоты (20 - 30мл) Смесь переперемешивают при комнатной температуре примешивают в течение 4 - 5 час, добавляют дополблизительно в течение 23 дней, выливают в воду нительно количество 2 раствора соляной кислоты со льдом и экстрагируют этиладетатом Органичеи смесь оставляют перемешиваться на ночь Расский слой отделяют, сушат над сульфатом натрия творитель удаляют в вакууме, остаток разбавляют и упаривают в вакууме Остаток очищают колотетрагидрофураном и обрабатывают концентриночной хроматографией на силикагеле, элюируя рованной соляной кислотнй (2мл) После переме5%-ным раствором метанола в этилацетате, и шивания в течение 5 - 6 час растворитель удаляпосле перекристаллизации из смеси толуолгекса, ют в вакууме и остаток экстрагируют получают 0,17г (12%) целевого соединения с Т пл этилацетатом Органический слой промывают 189-191 °С водой, насыщенным раствором соли и сушат Растворитель удаляют в вакуз и остаток очищают Пример 12 колоночной хроматографией на силикагеле, 2-4-оксо-6,7,8,9-тетрагидро-4Н-пиридо 1,2-а элюируя 80%-ным раствором этилацетата в гекпиримидин-2ил оксиметил-4-изопропил-6-(2сане, и получают 0,43г целевого соединения с гидроксиэтокси)сахарин Тпл 214-215,5°С Смесь продукта по Примеру 9G (1,35г) в этилацетате (200мл) и метаноле (5мл) и 10%-ного палладия на угле (0,5г) гидрируют в аппарате Парра под давлением 50 фунтов на кв дюйм в течение 3 час Добавляют дополнительное количество палладия на угле (0,5г) и смесь гидрируют еще в течение 8-9 час Отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме, а остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя етилацетатом, и получают 0,89г целевого продукта в виде пенообразного вещества Пример 13 2-4-оксо-6,7,8,9-тетрагидро-4Н-пиридо 1 2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-62(диметиламинометилкарбонилокси)этокси сахарин Примеры 15A-15G Предполагается, что используя методику, аналогичную приведенной в Примере 9D, но взяв в качестве исходного подходящее соединение формулы III (H-O-Z), можно получить следуюпш соединения Примар Пример В раствор соединения по Примеру 12 (0,8г, 1,72ммол) в хлористом метилене (25мл), содержащем 1,3-дициклогексилкарбодимид (1,06г, 5,14ммол), добавляют глицерин (0,19г, 1,9ммол), а затем 4-диметиламинопиридин (0,21 г, 1,72ммол) Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 час, растворитель удаляют в вакууме и остатке очищают колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 10%-ным раствором метанола в этилацетате, и получают 0,64г (68%) целевого соединения в виде пенообразного вещества Пример 14 2- 3-хлор-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2ил оксиметил-4-изопропил-6- 2-гидроксиэтокси 15С Пример 16 (а) 2- 3-хлор-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-6-гидрокси-4изопропилсахарин 37 44682 СН!СН3) Предполагается, что используя методику, аналогичную приведенной в Примере 6, можно получить целевое соединение из 3-хлор-пиридо 1,2-а пиримидин-2,4-диона (2 эквивалента), метилтриазабициклодецена (2 эквивалента), ДМФА и 2хлорметил-4-изо-пропил-6-гидроксисахарина (б) 2-3-хлор-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6І~(5~диметиламинометил-2-фуранил)метокси сахарин CHfCHal Предполагается, что целевое соединение может быть получено обработкой раствора 2-3-хлор4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-6-гидрокси-4-изопропилсахарина в ДМФА трифенилфосфином, 5-диметиламинометил-2гидроксиметилфураном и диэтилазодикарбоксилатом Пример 17 2-4-оксо-6,7,8,9-тетрагидро-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2-ил оксиметил-4-изопропил-6метоксисахарин СН(СН 8 )г СНзО" Смесь соединения по Примеру 4С (0,Зг, 0,708ммол), этилацетата (14мл) и 10%-ного палладия на угле (0,Зг) гидрируют в аппарате Парра под давлением 50 фунтов на кв дюйм в течение 7 час Реакционную смесь отфильтровывают через целит, фильтрат упаривают в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле градиентным элюированием, начав с 50%ного раствора и заканчивая 70%-ным раствором этилацетата в гексане, и получают после перекристаллизации из смеси этилацетат - гексан 0,165г (54%) целевого соединения с Т пл 183,5 185,5°С Пример 18 2 - 3-хлор-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин2-ил окси-метилсахарин о о' о К смеси 2-гидрокси-З-хлорпиридо 1,2-а пиримидин-4-она (0,324г) и метилтриазабициклодецена (0,24мл) в ДМФА (15мл) добавляют 2брометилсахарин (0,414г) Смесь оставляют пе 38 ремешиваться на ночь, выливают в воду и образовавшийся осадок выделяют фильтрованием и перекристаллизовывают из ДМФА, получая 0,371 г (65%) целевого соединения Пример 19а) 2- 3-хлор-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-2ил оксиметил-4-втор-бутилсахарин Пример 19() 2- 3-хлор-4-оксо-4Н-пиридо 1,2-а пиримидин-4ил оксиметил-4-втор-бутилсахарин (Пример 19 (в)) К смеси 2-гидрокси-З-хлорпиридо 1-2-а пиримидин-4-она (0,29г) к метилтриазабициклодефена (0,22мл) в ДМФА (12мл) добавляют 2-хлорметил4-втор-бутилсахарин (0,39г) Смесь перемешивают в течение 8 час, выливают в воду и образовавшийся осадок выделяют фильтрованием Полученный сырой продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле градиентным элюированием смесями этилацетат - гексан (от 2/1 и до 1/1) и получают после перекристаллизации из этилацетата 0,284г (46,7%), целевого соединения по Примеру 19а с Т пл 211 - 212°С, а после перекристаллизации из хлористого метилена 0,027г целевого соединения по Примеру 19 с Т пл 268 - 271 °С (с разложением) Как указывалось ранее, соединения формулы 1 ингибируют ферментативную активность протеолитических ферментов и полезны при лечении дегенеративных заболеваний В частности они ингибируют эластазу лейкоцитов человека и химотрипсин подобные ферменты и полезны при лечении эмфиземы, ревматоидного артрита, пакреатита, кистоизного фиброза, хронического бронхита, респираторного дистресс-синдрома у взрослых, воспалительных заболеваний кишечника, псориаза, пузырчатого пемфигоида и альфа-1антитрипсиновой недостаточности Полезность соединений формулы I была показана в тестах по ингибированию в условиях in vitro эластазы лейкоцитов человека Измерение константы ингибирования (UL) эластазы лейкоцитов человека ингибируюшим комплексом описано ( Cha, Biochemical Pharmacology, Vol 24, рр 2177-2185, 1975) для истинных обратных констант ингибирования, обычно по отношению к конкурентным ингибиторам Соединения формулы I не дают истинно обратимых ингибируюших комплексов, а скорее могут рассматриваться как своего рода ферменты По этой причине вычисляют значение Ki* , которое определяют как отношение скорости реактивирования фермента и скорости инактивирования фермента (К Off / on) Измеряют значения К off и К on и вычисляют Ki* Значение К on определяют, измеряя ферментативную активность аликвоты фермента как 40 39 44682 функции времени, прошедшего после добавления 2 и 3, соответственно), содержащих 2,4мл буфериспытуемого соединения (ингибитора) Построив ного раствора (50мМ 1\1-[2-гидроксиэтил] пипераграфик логарифмической зависимости величины зин-1\1-[2-этансульфоновая] кислота / NaOH, активности фермента относительно времени, оп500мМ хлорида натрия, рН 7,8 при 25°С), и добавределяют наблюдаемую скорость инактивироваляют ДМСО, так чтобы общий объем жидкости в каждой пробирке составлял 3,2мл 70мкл, 35мкл и ния по уравнению К obs = In 2/ ty2, где t ^ обо25мкл ингибитора из пробирки для анализа 1 позначает время, в течение которого активность мещают в первые четыре ячейки микролитической фермента снижается на 50% Затем выиисляют пластины с 96 ячейками и доводят объем каждой ячейки до 90мкл с помощью смеси 25% значение К on по уравнению К on = К obs / [I] , где ДМСО/буферный раствор С ингибитором из про[I] обозначает концентрацию ингибитора Значебирок 2 и 3 поступают аналогичным образом и ние К off определяют аналогичным образом, а помешают в ячейки 5 - 1 2 , соответственно, полузначение Ki* выводят из уравнения Кі* = К off / К чая 12 различных концентраций ингибитора Анаon логично в качестве контрольные готовят четыре Таблица ГУ ячейки (ячейки 1 3 - 1 6 ) , содержащие 90мкл смеси 25% ДМСО/буферный раствор без добавления Ингибиравашезяастазы лейкоцитоз человека ингибитора Затем одновременно в каждую из 16 ячеек добавляют по 150мкл раствора субстрата К,* (получают добавлением 500мкл субстрата эласта04 зы лейкоцитов человека MeOSuL-Ala-Ala-Pro-ValЇА pNA (18,7мМ в ДМСО) к 19,5мл буферного рас0 22 1В твора) и раствор в каждой ячейки тщательно пе07 1С ремешивают 0 25 m IE 0.035 IF0 22 !G 0 05 IH 0 027 И 0 25 1J OBS !K 0 013 IL 0 09 1M 0 18 IN 0 052 10 0 016 IP €04 і QOS 0 038 0.5 ЗА 0 43 0 27 0 025 09 4C 0C78 4D 4Є 0 093 0 23 0 92 Результаты, приведенные в таблице IV, получены для соединений формулы I, приведенных в примерах Ингибируюшая активность представленных соединений по отношению к эластазе лейкоцитов человека была также продемонстрирована в следующем тесте Испытуемое соединение (ингибитор) растворяют в ДМСО в пробирке, получая исходный раствор с концентрацией в интервале 200 - ЮООмМ Исходный раствор ингибитора разбавляют (1 4, 1 16 и 1 64) в пробирках для анализа (пробирки 1, Пластину с 96 ячейками помешают в спектрофотометр Microplate Reader # 89815А и в каждую из 16 ячеек одновременно добавляют по 110мкл раствора фермента (получают следующим образом смесь 20мл буферного раствора и 20мг бычьего сывороточного альбумина осторожно встряхивают в сосуде для проведения сцинтилляционных измерений) и 5мкл исходного раствора эластазы лейкоцитов человека (1мг/мл в деионизованной воде) Каждый из растворов в ячейках тщательно перемешивают и получают значения поглощения в зависимости от времени при 410нм до тех пор, пока анализ не закончится Следует отметить, что хотя анализ можно проводить вручную, однако более предпочтительным является автоматизированное проведение анализа с использованием робота для проведения микроанализа фирмы "Hewlett Packard" Полученный указанным образом график зависимости поглощения от времени позволяет получить кривые прогрессии, наклон которых определяет конечную равновесную скорость (VF) Используя программу ENZFITTER (программное обеспечение фирмы "Elsevier"), кривые прогрессии для четырех контрольных образцов ([I] = 0) согласовывают методом линейной регрессии и получают значения скорости реакции фермента в отсутствии ингибитора (Vo), которые усредняют и получают фиксированное значение Константу ингибирования Кі (нМ) далее получают из графика функции гп против Vo / VF 1-VF/V0 который позволяет получить линейную зависимость, где [S] наклон = К. 1 + Km 41 44682 Таблиш V Ингибирование эластазы лейкоцитов человека Соединения Примера jit_ IS 0.22 IT 0 083 ш 007S IV 0 033 0 034 4F 0 08 4G 0 2U 4Н 0 066 41 0 19 4J il ,20 4К 2.5 8 U 025 9А 0 044 913 О 12 9С 0 058 9D 0 OKI УЕ О 035 О 138 9G 91 9J 10 П 12 ІЗ [4 17 18 19а 19b О 140 0 210 0 021 О 120 0 40 О 130 О 063 О 095 О ПО 14 0 0 72 42 a [S] обозначает концентрацию субстрата, а Km - константа Михаэлиса В следующей таблице суммированы результаты, полученные при проведении испытаний представленных соединений по изобретению описанным выше методом Количество соединений формулы I, ингибирующее протеолитические ферменты, можно определить из результатов испытаний по ингибированию эластазы лейкоцитов человека и может дополнительно меняться для конкретного пациента в зависимости от физического состояния пациента, способа введения, продолжительности курса лечения и реакции пациента Эффективная доза соединения формулы I может быть определена лишь врачом после оценки всех необходимых критериев и должна быть оптимальной для пациента Соединение формулы I может быть приготовлено для фармацевтического использования путем включения его в фармацевтическую композицию для орального и парентерального введения или ингаляции аэрозоля и может быть в твердой или жидкой дозировочной форме, включая таблетки, капсулы, растворы, суспензии и эмульсии, а также может содержать подходите вспомогательные добавки Предпочтительной единичной дозировочной формой для орального назначения являются таблетки или капсулы С этой целью в качестве одной или более добавок можно использовать, например, карбонат кальция, крахмал, лактозу, тальк, стеарат магния и камедь Композиции получают обычными способами, принятыми в фармацевтической практике 47 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90