Спосіб кількісного визначення диклофенаку

Спосіб кількісного визначення диклофенаку, що включає приготування проби, взаємодію її з хімічними реагентами у розчині, вимірювання інтенсивності флуоресценції розчину, який відрізняється тим, що пробу піддають взаємодії з стандартним розчином хлориду тербію при рН 7,0-7,2 у присутності 2,2'-дипіридилу і неіоногенної поверхнево-активної речовини - Брідж-35 та вимірюють інтенсивність флуоресценції тербію (ІІІ), за величиною якої визначають концентрацію диклофенаку. (19) (21) a200507402 (22) 25.07.2005 (24) 15.05.2006 (46) 15.05.2006, Бюл. № 5, 2006 р. (72) Теслюк Ольга Іванівна, Бельтюкова Світлана Вадимівна, Єгорова Алла Володимирівна (73) ФІЗИКО-ХІМІЧНИЙ ІНСТИТУТ ІМ. О.В. БОГАТСЬКОГО НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ НАУК УКРАЇНИ, ОДЕСЬКА НАЦІОНАЛЬНА АКАДЕМІЯ ХАРЧОВИХ ТЕХНОЛОГІЙ 3 14100 4 флуоресценції розчину тим, що пробу піддають несценції цих розчинів вимірюють при мaкc=545нм. взаємодії з стандартним розчином хлориду тербію За отриманими даними будують калібрувальний при рН 7,0-7,2 у присутності 2,2'-дипіриділу (Дип) і графік, відкладаючи на осі абсцис концентрацію полімерної неіоногенної поверхнево-активної реДиклофенаку, а на осі ординат - значення інтенсичовини (ПАР) - Брідж-35 з подальшим вимірюванвності люмінесценції. Прямолінійна залежність ням інтенсивності флуоресценції тербію (III) по спостерігається в інтервалі концентрацій 0,2величині якої визначають концентрацію диклофе40мкг/мл (R=0,9978) (Фіг.4). Приклад. наку. Двадцять таблеток препарату диклофенак, Новим у винаході, що заявляється, є викорисрозтирали у ступці до стану порошку. Кількість тання сенсибілізованої флуоресценції іону тербію, порошку, еквівалентну середній масі таблетки кіпосиленої до 250 разів у присутності органічної лькісно переносили у мірну колбу на 100мл, розоснови 2,2'-дипіриділу та неіоногенної ПАР чиняли у 50мл бідистильованої води, доводили Брідж-35. розчин до мітки та фільтрували. Отриманий фільПричинно-наслідковий зв'язок між сукупністю трат розводили бідистильованою водою до кінцеознак, що заявляється і досягнутим результатом вої концентрації 100мкг/мл (розчин А). можна пояснити наступним. Підвищення чутливосУ пробірку містили 2,0мл розчину А і додавали ті стало можливим завдяки утворенню різноліганвсі реагенти, як при побудові калібрувального дної комплексної сполуки іона тербія (III) та внутграфіка. Проби перемішували та вимірювали інтерішньомолекулярної передачі енергії збудження нсивність люмінесценції тербію при =545нм . від диклофенаку та Дип на іон лантаніду. Кількість диклофенаку в одиниці дозованої ліДиклофенак має в ультрафіолетовій зоні спеккарської форми розраховували за формулою: тру смугу поглинання max=276,6нм. Молярний C x b 100 r X , де коефіцієнт поглинання =15000 обумовлює ефек106 a тивне поглинання світлової енергії лігандом. ТриСх - концентрація диклофенаку, знайдена за плетний рівень диклофенаку складає 21280см-1, калібрувальним графіком, мкг/мл. що значно більше енергії резонансного рівня іона b - середня маса таблетки, г; тербія (III) (20500см-1). Величина енергії триплет106 - перерахунок у грами; -1 ного рівня Дип становить 20650см . Можна припу100, r - розведення; стити, що у даному випадку виникає передача а - наважка препарату, г; енергії збудження з триплетного рівня диклофенаКількісне визначення основної речовини в доку на триплетний рівень Дип, а потім на енергетизованих лікарських формах виконували виходячи з 5 -1 чний рівень тербію D4 (20500см ). Це значно скорозрахунку на середню масу таблетки. Середню рочує ступінь безвипромінювальних втрат енергії масу таблеток визначали як зазначено в статті збудження і сприяє підвищенню інтенсивності «Однорідність маси для одиниці лікарського засофлуоресценції, що надає можливості знизити мебу» [Державна фармакопея України, 1 вид., Харків, жу визначення зрівняно з прототипом. "PIPER" 2001, ст.2.9.5]. Результати досліджень Використання неіоногенної ПАР Брідж-35 допоказані в таблиці 1. зволяє підвищити інтенсивність аналітичного сигРезультати визначення диклофенаку наведені налу на 30% внаслідок стабілізації комплексу на у таблиці 2. Аналіз таблетованих лікарських форм, міцелах ПАР та зменшенню безвипромінювальних які наведені у таблиці 2, проводили за аналогією. втрат енергії збудження. Чутливість способу, яка визначена за допомогою Взаємодія диклофенаку з тербієм відбуваєтьстандартних розчинів диклофенаку, складає ся при рН 3,0-8,5, максимум флуоресценції ком0,05мкг/мл. плексу спостерігається при рН 7,0-7,2 (Фіг.1). В Точність і достовірність визначення диклофеспособі, що пропонується, для створення рН рознаку у розчині перевірена шляхом статистичної чину (7,0-7,2) використовується уротропін (0,1мл обробки результатів визначення. При n=5, Р=0,95 40%-го водного розчину). величина відносної похибки визначення стаІнтенсивність флуоресценції тербію у розчині новить 3%. оптимальна при вмісті Дип - 5 10мол/л (Фіг.2). Таким чином, спосіб дозволяє підвищити чутОптимальна концентрація Брідж-35 становить ливість визначення диклофенаку у 3 рази, а також . -3 1 10 моль/л (Фіг.3). Кількісне визначення вмісту уникнути використання токсичних органічних роздиклофенаку проводили за калібрувальним графічинників. ком. Інтенсивність люмінесценції іонів тербію в широких межах концентрацій препарату прямо Таблиця 1 пропорційна їх вмісту у розчині. Побудова калібрувального графіка Результати визначення однорідності маси для одиниці лікарського засобу У мірні пробірки об'ємом 10мл містили 0,05; 0,1; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0 мл стандартМаса основної Середня маса ного розчину диклофенаку (100мкг/мл). У кожну Препарат діючої речовини, г таблетки, г пробірку додавали по Імл розчину хлориду тербію Диклофенак 0,050 0,500±0,0250 (0,01М), 0,5мл етанольного розчину 2,2'-дипіриділу Ортофен-ЗТ 0,025 0,100±0,0750 (0,01М), 1мл водного розчину Брідж-35 і 0,1мл Діклоберл 0,100 0,215±0,0161 40%-го водного розчину уротропіну. Об'єм розчину Наклофен 0,100 0,260±0,0130 в кожній пробірці доводять бідистильованою воДоларен 0,050 0,635±0,0317 дою до мітки та перемішують. Інтенсивність люмі 5 14100 6 Таблиця 2 Результати визначення Диклофенаку в таблетованих лікарських формах (Р = 0,95; n = 5) Знайдено Регламентований вміст дикМетрологічні характеристики лофенаку, г г % «Диклофенак» по 0,05 г (Україна, ВАТ "ХФЗ "Червона зірка", м. Харків) 0,0505 101,0 0,0500 100,0 X=0,0502(100,4 %) 0,05 0,0510 102,0 S= ±0,000543 0,0497 99,4 Х= ±0,0015099 0,0498 99,6 = ±3,01% «Наклофен таблетки ретард» по 0,1г (KRKA, Novo mesto, Slovenia) 0,1000 100,0 0,1020 102,0 Х=0,1013 (101,3%) 0,1 0,1000 100,0 S= ±0,00113 0,1030 103,0 Х= ±0,00314 0,1015 101,5 = ±3,10% «Диклоберл ретард» по 0,1г ( Berlin-Chemie AG) 0,1010 101,0 0,1000 100,0 Х=0,0998 (99,8 %) 0,1 0,0985 98,5 S= ±0,001036 0,0990 99,0 Х= ±0,00288 0,1005 100,5 = ±2,89% «Ортофен-ЗТ» по 0,025г (Україна, ТОВ "Фармацевтична компанія "ЗДОРОВ'Я", Харків) 0,0260 104,0 0,0255 102,0 Х=0,0252 (100,8 %) 0,025 0,0250 100,0 S= ±0,00045 0,0248 99,2 Х= ±0,00125 0,0247 99,0 = ±4,96% «Долорен» Диклофенак-Натрия 0,05; Парацетамол 0,5 (Индия, "НабросФарма" Национал Хайвей, Кеда) 0,0497 99,4 0,0500 100,0 Х=0,04974 (99,5%) 0,05 0,0505 101,0 S= ±0,000559 0,0490 98,0 Х= ±0,00155 0,0495 99,0 = ±3,13% Комп’ютерна верстка Н. Лисенко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601