Штам хламідій ugc chlamydia trachomatic исрм-2

Штам хламідій UGС Chlamydia trachomatis ИСРM-2, що використовується для діагностики хламідіозів. (19) (21) 98020848 (22) 18.02.1998 (24) 15.11.2000 (33) UA (46) 15.11.2000, Бюл. № 6, 2000 р. (72) Мавров Іван Іванович, Кутова Валентина Василівна, Гончаренко Валентина Василівна 30286 скопічному та бактеріологічному обстеженнях інфекційного матеріалу з уретри та цервіксу гонококи, трихомонади та гриби не знайдені. В епітеліальних зіскобах з слизової оболонки каналу шийки матки методами Романовського-Гімзи та ПІФ знайдені морфологічні структури та антигени хламідій. У реакції НІФ знайдені хламідійні антитіла у титрі 1:512. При діагностичному виділенні патогенного агенту у курячих ембріонах виявлені хламідії. Через місяць після комбінованої етіотропної терапії (еритроміцин, тетрациклін) наступило клінічне одуження. Штам характеризується такими ознаками та властивостями. За даними електронно-мікроскопічних досліджень елементні тільця являють собою утворення сферічної форми, обмежені двома мембранами товщиною до 8 нм. Діаметр основної маси частинок 250-300 нм. В середині елементних тільців є цитоплазма та нуклеоїд, який має частково ексцентричне розташування. Ретикулярні тільця являють собою овальні утворення, обмежені двома мембранами з середніми розмірами 400800 нм. Елементні тільця при фарбуванні по методу Маккіавелло фарбуються у рожево-червоний колір, а по Май-Грюнвальда-Гімзи у синьо-фіолетовий. Ретикулярні тільця фарбуються по Маккіавелло у синій або блакитний колір по Май-Грюнвальда-Гімзи у синій колір. Штам добре розмножується у епітеліальних клітинах стінок жовткових мішків 6-7-денних розвиваючихся курячих ембріонів при 37±0,5°С, з характерним утворенням морфологічних структур збудника різної міри зрілості та накопичується у титрі 107-108 ELD 50/0,5 мл. Штам добре розмножується у культурі перевиваємої лінії фібробластів миші (клітини L-929). Утворює цитоплазматичні включення з характерною для представників роду хламідій динамикою нуклеїнових кислот та появою зрілих, які утримують переважно ДНК, елементних тілець у більшості включень першої генерації на 24-48-ю годину в залежності від заражаючої дози. Цитоплазматичні включення дрібних розмірів, в зараженій культурі клітин L-929 до 90% клітин моношару мають включення хламідій. У клітинах, які культивуються, штам вдається розмножувати до 15 пасажів. Вихідний збудник виділений з каналу шийки матки хворої, адаптований до епітелію жовткових мішків 6-7дених розвиваючихся курячих ембріонів, та до перевиваємої культури клітин L-929. Штам хламідій UGC володіє антигенними властивостями, які визначаються в РСК, РНГА, ПІФ, ІФА та РНІФ, спільними для роду хламідій. При імунізації кролів та свиней очищеним препаратом елементних тілець хламідій штаму UGC з ад'ювантом Фрейнда, який вводився внутрішкірно з інтервалом в 14 днів (4кратно), вироблялися антитіла проти антигенів хламідій, які визначались непрямим імунофлуоресцентним методом у титрі 1:512-1:2148, імуноферментним методом у титрі 1:350-1:12000. При інтраназальному зараженні білих миш штам викликає загибель 50% тварин на 3-6-у добу. Причиною смерті тварин є пневмонія. У фарбованих мазкахвідпечатках з легень загиблих миш виявляються типові для хламідій внутріклітинні включення на різних стадіях розвитку. Вивчаємий мікроорганізм проходить у цитоплазматичних включеннях складний цикл розвитку з послідовною зміною морфологічних структур. Оскільки штам чутливий до сульфаніламідних препаратів, то отже він володіє здібністю до сінтезу фолієвої кислоти. Штам володіє власною гликогенсінтетазою. Штам утримує родоспецифічний антиген, який виявляють у різних серологічних реакціях. Антиген екстрагується етиловим ефіром, термостабільний, розчинюється ефіром, осаджується ацетоном. Штам утримує гликоген у включеннях на ранніх етапах свого розвитку. Гликоген виявляється за допомогою фарбування йодом (розчин Люголя), який зафарбував полісахарідний компонент у коричневий колір. Штам проявляє чутливість до препаратів сульфаніламідної дії: етазол натрію, нітазол, хлорхінальдол. Етазол натрію затримує строки загибелі курячих ембріонів, заражених даним штамом, знижує титр накопичення хламідій у жовткових мішках курячих ембріонів (загиблих). Половина заражених ембріонів у спробі не загибла. У експерименті з інфікованою штамом культурою клітин L-929 проявили антихламідійну активність такі сульфаніламідні препарати як нітазол та хлорхінальдол. Цитоплазматичні включення першого типу. Вони характеризуються правильною округлою формою, рухлим, неогрядним розташуванням внутрішнього вмісту (чітко видного на електронних фотографіях), присутністю вуглеводутримального компоненту. Штам добре зберігається при -196°С у рідкому азоті. Також зберігається при температурі -20°С протягом менш тривалого відрізка часу. Штам культивується у жовткових мішках 6-7-денних розвиваючихся курячих ембріонів. Адаптований до культури клітин L-929. Внаслідок оптимального сполучення антигенності, імуногенності та стабільності генетичних ознак (понад 100 пасажів, вивчений інтервал) штам може знайти використання у біологічній промисловості, для виготовлення специфічного антигену та імунної сироватки для діагностування хламідіозів. Джерела інформації 1. Шаткін А.А., Мавров І.І. Урогенітальні хламідіози. - Київ: Здоров'я, 1983. - С. 32-33. Таблиця Ефективність інфікування двома штамами хламідій культур клітин L-929 при різних умовах культування Штами хламідій Титр ELD 50/0,5 мл UGC ЮЦ 103,5 103,5 Кількість включень у 50 полях зору мікроскопу Центрифугування + Стандартні умови Центрифугування циклогексимід 20 150 176 9 85 164 2 30286 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 35 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3