Спосіб впливу на біологічні властивості вірусів коксакі в-1

Спосіб впливу на біологічні властивості вірусів Коксакі В-1, що включає культивування на перещеплювальних культурах клітин, який відрізняється тим, що культивування проводять під дією штучного геомагнітного потоку різної направленості, що призводить до зміни інфекційної активності вірусу та маркуючої ознаки rct40. (19) (21) u200900257 (22) 14.01.2009 (24) 25.09.2009 (46) 25.09.2009, Бюл.№ 18, 2009 р. (72) ЗАДОРОЖНА ВІКТОРІЯ ІВАНІВНА, ФРОЛОВ АРКАДІЙ ФЕДОРОВИЧ, ЗУБКОВА НАТАЛІЯ ЛЕОНІДІВНА, БУРА ТАМАРА ОЛЕКСАНДРІВНА, БОНДАРЕНКО ВАЛЕНТИНА ІВАНІВНА, ВЕДМЕДЕНКО ВАЛЕНТИНА ВОЛОДИМИРІВНА, ГАЛАГУЗА ЮРІЙ ПЕТРОВИЧ (73) ЗАДОРОЖНА ВІКТОРІЯ ІВАНІВНА, ФРОЛОВ АРКАДІЙ ФЕДОРОВИЧ, ЗУБКОВА НАТАЛІЯ ЛЕО 3 44112 Кожне розведення вірусу вносять по 0,1мл в лунки планшети з культурою клітин, по 4 лунки на кожне розведення. Заражені і контрольні клітинні культури інкубують при температурі 37°С у СO2інкубаторі з вмістом 5% вуглекислого газу протягом 7-ми діб. Облік результатів проводять щоденно за появою цитопатогенної дії у культурі клітин. Титр вірусу розраховують за методом Кербера [2, 3]. У дослід беруть вірус Коксакі В-1 у концентрації 101,0–108,0 ТЦД50/0,1мл. Магнітне навантаження становило 16 та 32нТл на північному та південному полюсах. Після культивування вірусу на пере 4 щеплювальній культурі клітин НЕр-2 при температурі 36°С та зазначених параметрах магнітного потоку проводять титрацію вірусомісткого матеріалу з лунок планшети з відповідними концентраціями вірусу, які в досліді виявилися останніми щодо розвитку цитопатогенної дії. Інфекційна активність вірусу Коксакі В-1 при його культивуванні під впливом південного полюса магніту при силі магнітного навантаження 16мТл становила 6,0±0,21lgТЦД50/мл, при 32мТл 7,5±0,21 lgТЦД50/мл (табл. 1). Таблиця 1 Інфекційна активність вірусу Коксакі В-1 за умов впливу магнітного потоку різного навантаження Рівень магнітного навантаження 16нТл 32нТл 16нТл 32нТл Полюс магніту південь південь північ північ контроль Інфекційна активність вірусу під впливом магнітного потоку lgТЦД50/мл ±m 6,0 0,20 7,5 0,21 7,5 0,20 9,0 0,20 9,0 0,20 При культивуванні вірусу на північному полюсі при силі магнітного навантаження в 16нТл інфекційна активність вірусу становила 7,5±0,20 lgТЦД50/мл, що вірогідно відрізняється від показника контролю у бік зниження понад 0,5 lg ТЦД50/1мл. Під впливом північного полюса при силі магнітного навантаження в 32мТл інфекційна активність вірусу Коксакі В-1 була такою ж, як і в контролі вірусу, який не піддавався дії магнітного потоку. Приклад 2. Маркуюча ознаки rct40 (здатність до репродукції ентеровірусів при температурі +40°С). Для визначення маркуючої ознаки rct40 проводять паралельно титрування вірусів при 36°С та 40°С на перещеплювальній клітинній культурі НЕр2. Ознаку rct40 вважають позитивною (rct40+) при різниці в інфекційному титрі при 36°С та 40°С в 2 lg ТЦД50 і менше, (rct40-) - негативною при 5 lg ЦПД50 і більше. При інших значеннях lg ТЦД50 вважається проміжною (гсt40±). 5 і > lg ТЦД50/1,0мл - низьковірулентний, >2 - 7,5 lgТЦД50/мл, тобто вірус набуває ознаки „-“. 5 44112 Таким чином, запропонований корисною моделлю спосіб впливу на біологічні властивості вірусів Коксакі В дозволяє отримувати віруси зі зміненими інфекційною активністю та маркуючою ознакою rct40. Література 1. Ворошилова М.К. Энтеровирусные инфекции человека. - М.: Медицина, 1979.-300с. Комп’ютерна верстка М. Ломалова 6 2. Ворошилова М.К., Жевандрова В.И., Балаян М.С. Методы лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций. - М.: Медицина, 1964. - 152с. 3. Руководство по вирусологическим исследованиям полиомиелита // Глобальная программа по вакцинации и иммунизации. РПИ. ВОЗ. - Женева.: Москва, 2005. - 112с. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601