Антрациклінглікозид, спосіб одержання та фармацевтична композиція

1 Антрациклінглікозид формули (І) метансульфонілдаунорубіцин 3 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що являє собою 4-деметокси-13(3)-дипдро-3'-дезамшо3'-азиридиніл-4'-метансульфонілдаунорубіцин 4 Спосіб одержання антрациклінглікозиду формули (І) за п 1, який включає відновлення антрацикліну формули (II) о он он CH,SO. де хвиляста ЛІНІЯ означає, що гідроксильна група в положенні 13 може знаходитися в а - або р - положенні, або суміш його ізомерів 2 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що являє собою 4-деметокси-13(3/Р)-дигідро-3'дезамшо-3'-азиридиніл-4'метансульфонілдаунорубіцин або 4-деметокси13(3)-дипдро-3'-дезаміно-3'-азиридиніл-4'метансульфонілдаунорубіцин, чи 4-деметокси13(Р)-дипдро-3'-дезаміно-3'-азиридиніл-4' Винахід стосується антрациклінглікозидів, способу їх одержання та фармацевтичних композицій, що містять їх, і може бути використаний в ХІМІЧНІЙ за присутності відновника в суміші органічних розчинників і, якщо бажано і потрібно, поділ одержаної в результаті суміші 13(R)- і 13(S)-cnonyK на індивідуальні діастереоізомери 5 Спосіб за п 4, який відрізняється тим, що в ньому відновником є борпдрид натрію 6 Спосіб за п 4 або 5, який відрізняється тим, що в ньому відновлення здійснюють при температурі нижче 50°С 7 Спосіб за п 6, який відрізняється тим, що в ньому відновлення здійснюють при температурі 70°С 8 Фармацевтична композиція, що містить антрациклінглікозид формули (І) за п 1 і фармацевтично прийнятний носій або розріджувач 9 Сполука за п 1 або 2 для застосування при лікуванні людського або тваринного організму консервативним методом 10 Сполука за п 9 для застосування як протипухлинний засіб промисловості та медицині Винахід стосується антрациклінглікозидів, що відповідають формулі (І) О со Ю 45493 ОН CH.SO де хвиляста ЛІНІЯ означає, що гідроксильна група в положенні 13 може знаходитися в а-або рположенні або у вигляді їхньої суміші Сполуки формули (1) включають ПОХІДНІ, В яких гідроксильна група в положенні 13 має конфігурацію 13(S), 13(R), або суміші 13(R) і 13(S) діастереоізомерів, яка являє собою 4-деметокси-13(8/К)-дипдро-3'-дезамшо-3'азиридиніл-4'-метансульфонілдаунорубіцин (Іа), 4-деметокси-13(8)-дипдро-3'-дезамшо-3'азиридиніл-4'-метансульфонілдаунорубіцин (Іб) і 4-деметокси-13(Р) -дипдро-З'-дезаміно-З'азиридиніл-4'-метансульфонілдаунорубіцин (їв) Більш прийнятне даний винахід стосується антрациклінглікозидів вищенаведеної формули (І), які відрізняється тим, що атом вуглецю в положенні 13 має конфігурацію S, тобто антрациклінглікозид являє собою 4-деметокси-13(3) -дипдро-3'дезамшо-3'-азиридиніл-4'метансульфонілдаунорубіцин (Іб) Сполуки формули (І) можуть бути отримані шляхом відновлення антрацикліну формули (II) індивідуальні 13-дипдродіастереоізомери можуть бути одержані шляхом поділу суміші за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) Зокрема, поділ за допомогою ВЕРХ можна здійснювати в колонці з оберненою фазою при використанні суміші фосфатного буфера, такого як ЮмМ К2НРО4, доведеного до рН = 7,0 за допомогою 85%-ноі фосфорної кислоти, з органічним розчинником як рухлива фаза, таким як тетрапдрофуран чи ацетонітрил Вихідним матеріалом для одержання нових антрациклінглікозидів є 4-деметокси-3'-дезамшо3'-азиридиніл-4'-метансульфонілдаунорубіцин формули (II), описаний в патенті США А-5532218 Винахід стосується, далі, фармацевтичної композиції, що включає антрациклін-глікозид формули (І) у суміші з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм Можуть бути використані звичайні носи і розріджувачі Композицію можна готувати і вводити звичайним чином Сполуки ВІДПОВІДНО до винаходу придатні для лікування людського або тваринного організму консервативними методами Вони корисні як протипухлинні засоби Вони придатні для лікування лейкозу і твердих пухлин, таких як пухлини товстої кишки, товстої кишки-ректальні пухлини, оваріальні пухлини, пухлини молочної залози, простати, легенів, нирок, а також меланоми Отже, людину можна лікувати методом, що включає уведення йому терапевтичне ефективної КІЛЬКОСТІ сполуки ВІДПОВІДНО до винаходу Таким чином може бути поліпшений стан пацієнта Доза, що вводиться, може бути встановлена при використанні відомих діапазонів доз щодо антрациклінів і змінюватися ВІДПОВІДНО до активності, яка виявляється сполуками даного винаходу в in vitro та in vivo протипухлинних тестах Придатні дози звичайно знаходяться в діапазоні від 1 до 200мг/м2 поверхні тіла, більш прийнятне від 1 до 100мг/м2, в залежності від природи та тяжкості захворювання, що лікується, і від загального стану пацієнта Сполуки формули (І) випробували і вони визнані активними in vitro проти ряду мишачих і людських пухлинних клітинних ЛІНІЙ та in vivo у випадку поширеного P388/DX мишачого лейкозу In vitro та in vivo активність сполуки формули за присутності відновника, такого як борпдрид натрію, в суміші органічних розчинників, таких як дихлорметан і метанол, переважно при температурі нижче 50°С, більш прийнятне при температурі 70°С, і, якщо бажано і потрібно, шляхом поділу одержаної в результаті суміші 13(R)-i 13(S)-cnonyK на індивідуальні діастереоізомери Наприклад, М У випадку ряду мишачих і людських пухлинних клітинних ЛІНІЙ сполука формули (Іа) має високу цитотоксичність, як видно із значень ІЧ50, вказаних у таблиці 1 Результати тесту in vivo для сполуки формули (Іа) у випадку поширеного P388/DX мишачого лейкозу подані в таблиці 2 Таблиця 1 In vitro цитотоксичність сполуки формули (Іа) Клітинна ЛІНІЯ1' L1210" JURKAT *' СЕМ" LoVo 4 ) Сполука формули (Іа) ІЧ 50 2) , нг/мл, середнє значення ± стандартне відхилення 3,76 ±0,13 4,87 ±0,7 5,86 ±0,4 20,3 ± 2 1) клітини, шкубовані з сполукою протягом 1 45493 години, 2) концентрація, що інгібує, на 50% , являє собою середнє значення ± стандартне відхилення, розраховане з кривих доза-відповідь щонайменше для двох експериментів, 6 3) приглушення росту, яке визначається шляхом підрахунку клітин, що вижили, 4) приглушення росту, яке визначається шляхом КІЛЬКІСНОГО аналізу за допомогою SRB колориметрм Таблиця 2 In vivo протипухлинна активність сполуки формули (Іа) проти поширеного P388/DX Сполука Іа D) 1) клітини лейкозу P388/DX Johnson (105/миша) уводять шляхом ін'єкції внутрішньовенне в день 0, 2) лікування одержують внутрішньовенне в день 1 після трансплантації пухлини (день 0), сполуку формули (Іа) солюбілізують у 3,5] / [ІЗОТОНІЧНИЙ роз чин] = 20/80 за об'ємом, 3) збільшення тривалості життя [(середній час життя оброблених мишей / середній час життя контрольних мишей) х 100] -100, 4) число токсичних смертей / число мишей, 5) ті, що залишилися в живих, (>60 днів) по закінченні експериментів Наступний приклад ілюструє винахід Приклад 1 13(R/S) -дипдро-4-деметокси-3'-дезамшо-3'азиридиніл-4'-метансульфонілдаунорубіцин (Іа) 600мг(1 ммоль) 4-деметокси-3'-дезамшо-3'азиридиніл-4'-метансульфонілдауно-рубіцину (II) розчиняють у 50мл дихлорметану і охолоджують до температури -70°С Розчин додають краплями до розчину 120мг (3,2 ммоля) борпдриду натрію в 5мл метанолу Через 15 хвилин додають Юмл ацетону, потім реакційну суміш доводять до кімнатної температури, додають 500мл дихлорметану і промивають дворазове по 200мл водою Органічну фазу відокремлюють, концентрують до невеличкого обсягу і піддають флеш-хроматографм на силікагелі, використовуючи суміш толуолу з ацетоном в об'ємному співвідношенні 8 2 Фракції, що містять цільову сполуку, об'єднують, концентрують до Тох ' LTS 80 102 Де [СгеторИогв/етанол = 6,5 4 ILS %*' Доза" (мг/кг/день) 2,9 3,8 0/20 4/17 0/20 0/17 невеличкого обсягу і осаджують за допомогою суміші гексану з діетиловим ефіром в об'ємному співвідношенні 85 5, одержуючи 400мг 13(R/S) дипдро-4-деметокси-3'-дезаміно-3'-азиридиніл-4'метан-сульфонілдаунорубіцину (Іа) Rf = 0,3 (тонкошарова хроматографія на силікагелевій пластині (Мерк) при використанні як елюювальний засіб суміші толуолу з ацетоном в об'ємному співвідношенні 80 20) 'Н-ЯМР-спектр (400МГц, дейтерохлороформ) 5 в м д 1,14, 1,23, 1,72 (м, СН 2 СН2_азиридину,1а + 16), 1,27(fl,J = 6,3Гц, СНз-13, Іб), 1,32(д, J = 6,3Гц, СНз- 13, Іа), 1,38 (д, J = 6,5 Гц, СН 3 - 5', Іа + 16), 1,47 (ддд, J = 2,6, 4,5, 12,5 Гц, СН 3 - 3', Іа + 16), 1,78 (м, Н - 2' акс , Іа + 1 б, Н - 8 акс , Іа), 1,87 (дд, J = 4,1, 15,0 Гц, Н - 8 акс , 16), 2,07 (дд, J = 4,0, 13,4 Гц, Н - 2' екв , Іа), 2,10 (дд, J = 4,0, 13,4 Гц, Н - 2' екв , 16), 2,12 (д, J = 7,8 Гц, ОН-13, Іа), 2,35 (ддд, J = 1,7, 2,6, 15,0 Гц, Н - 8 е к в , 16), 2,40 (д, J = 3,8 Гц, ОН-13, 16), 2,54 (ддд, J = 1,7, 2,6, 15,0 Гц, Н - 8 екв , 1а), 2,61 (д, J = 19,1 Гц, Н -10 акс , 1а), 2,65 (д, J = 19,1 Гц, Н -10 акс ,1б),3,20(дд J = 1,9, 19,1 Гц, Н - Юекв ,1а + 16), 3,21 (c,SO2CH3), 3,67(м,СН 13, 1а), 3,82(м, СН-13, 16), 4,11(м,Н - 5',1а + 16), 4,22(с,ОН - 9, Іа), 4,36(с,ОН - 9,Іб), 4,74 (м,Н - 4', Іа + 16), 5,27 (дд, J = 2,6, 4,4 Гц, Н - 7, Іа), 5,29 (дд, J = 2, 6, 4,4 Гц, Н - 7,16), 5,55 (д, J = 3,8 Гц, Н - Г, la + 16), 7,84 (м, Н - 2 + Н - 3, la + 16), 8,36 (м, Н - 1 + Н-4, Іа+ 16), 13,38 (с, О Н - 1 1 , Іа), іЗ,39(с,ОН - 1 1 , 16), ІЗ,59(с,ОН - 6, Іа), 13,60(с, ОН - 6, 16), мас-спектрометрія (бомбардування швидкими атомами) (+) м/е 604 [МН]+ ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20- 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71