Штам гриба cladosporium clfdosporioides 396-продуцент меланінового пигменту

Штамм гриба Cladosporium cladosporioides 3*96 (Коллекция Центрального Музея промышленных микроорганизмов "ВНИИГенетика", коллекционный номер ЦМПМ Г-16 2} - продуцент меланинового пигменд-а. (Л 00 1 106,3834 Изобретение относится к микробиоОбразующуюся при росте гриба, логической промышленности и касабиомассу отделяют фильтрованием от ется нового штамма гриба, применяе•культуральной жидкости и высушивают при 60°С.• мого 'для связывания ионов тяжелых металловп Выход,биомассы гриба составляет • Биомасса микроскопического гриба 15-20 г/л. или полученный из нее меланиновый . Штамм' гриба образует меланиновый* пигмент используется для непосредпигмент индольной природы, который ственной ОЧИСТКИ СТОЧНЫХ ВОД. относится к группе высокомолекулярМеланиновые пигменты животного ных веществ нерегулярной структупроисхождения, недоступные дли про10 ры и имеет фенольные, хиноидные/, мышленного получения, адсорбируют карбоксильные и другие функциональионы тяжелых металлов к'по этой споные группы.' Пигмент содержит,%! собности не уступают дорогостоящим углерод 58,2, водород 3,6 и азот синтетическим ионообменным материа9,72 и близок меланину животного пролам [і] и [2] , исхождения. В грибной клетке пигмент образует комплекс с белком, состав, Известные грибы рода Cladosporium ляющий 30% по отношению к биомассе образуют меланиновый пигмент, досгриба. Пигмент растворяется в едтупны для культивирования на предком натре и концентрированных Н-50* приятиях микробиологической промыши HCf, не растворяется в тетрагидленности [з] . рофуране, сухом пиридине, хлорэтане, Однако известные грибы не находят бутаноле, этаноле, диэтиловом эфире, практического применения. ацетоне, хлороформе,- метаноле, обесЦель изобретения - получение штамцвечивается под действием Н-О^, бромма Cladosporium cladosporioides 396, ной воды, КМйОд, дает положительную обладающего способностью связывать 25 реакцию с аммиачными ионами серебра. ионы тяжелых металлов, который моСпектроскопия: неизбирательно погложет быть применен * промышленности.. щает лучи УФ, видимого и ИК-света Морфологические признаки. Колонии в пределах от 200 до, 900 им.. На гриба на сусловом агаре бархатистые, приборе электро«ного пеірамагнитного олнвково-эеленые, на обратной, сторо30 резонанса выявлена высокая .конценне темно-коричневые до черных, на трация, парамагнитных центров- поагаризованной среде Чапека колонии рядка 1 • 10 1 ' ПП/г .сухого вещества1, , растут менее интенсивно, окраска колоний* та же,Конидиеносцы до 400 * 3,0-. . Меланиловый пигмент выделяется 4 ,э мг, гладкие, несут ветвящиеся цеиз биомассы гриба^по модифицированпочки конидий.Конидии одноклеточные,- 35 ному методу путем гидролизата его немеслегка зеленоватые, в разветвленных ланиновых компонентов при кипячении ее цепочках, гладкие, овальные, удлив смеси уксусной и соЯяноЙ ісислот. ненно-Ъвальные до почти шаровидных; Штамм депонирован во ВНИИгенетике, верхушечные конидии 2,2-3,5 • 2,0коллекционный, номер ЦМПМ Г-162. 3,3 мк ; срединные и базальные 6,5Получение пигмента из биомассы 40 гриба. 11,4 -3,2-3,8 мк. П р и м е р . Смесь 100 г сухой Гриб является аэробом, оптимум порошкообразной биомассы гриба роста и спороношения при 25^С, опСCladosporioides, 530 мл ледяной тимальное значение активности воды уксусной кислоты, 330 'мл конценравно О',98, оптимальная кислотность, 45 трированной соляной кислоты и 130 ил среды рН 4-5, высокоустойчив к товоды кипятят с обратным- холодильнитальным дозам УФ- и У -излучения, ком в течение 4 ч. Горячую смесь искусственному, солнечному свету отфильтровывают, осадок промывают высокой интенсивности. Гриб усваивагорячей 80%-ной уксусной кислотой, ет нитратные формы азота, в качест50 затем горячей водой и высушивают ве единственного источника углерона воздухе при 80°С. ,При этом из да использует глюкозу, сахарозу, 100 г биомассы получают 36 г меланикрахмал, пектин, целлюлозу, лимоннового пигмента в виде черно-коричную, щавелевую, уксусную кислоты, невого порошка.. обладает целлюлозолитической и тираэиназной активностью. 5S . Штамм гриба нетоксичен, легко ' Установлено, что при адсорбции культивируется в лабораторных услоионов металлов может применяться не виях. только меланин,'выделенный из гриба, . но и биомасса самого гриба-МіродуценДля наработки грибной биомассы "в условиях глубинного культивирова- 60 та (который при этом требуется в . 2,5-3,0' раза больше) , так как мелания используют модифицированную ниновые гранулы расположены в наружсреду Чапека/ в которую добавляют ном слое клеточной оболочки и доступ, 1Q кукурузного э-кстракта и вместо ны для взаимодействия с ионами сахарозы используют сахар. Стоимость металлов. 1 л среды составляет 3,6 коп. 1063834 . П р и м е р . Извлечение металла из раствора меланином. Меланин (1 г) или измельченную высушенную биомассу гриба перемешивают в течение 3 ч с 1 л раствора, содержащего 0,001 М РЪ (С1ЦСОО)2 , т . е . 0,32 г. РЪ (сн^СОО)г . Суспензию, фильтруют и определяют содержание свинца в маточном' р а с т в о р е . Количество свинца, адсорбированного меланином,' определяют по разности содержания ионов свинца в растворе до и после адсорбции. Извлечение ионов других металлов, представленных в таблице, осуществляют подобным образом. Как следует- из таблицы, полу-, ченный меланин по способности адсорбировать ионы указанных металлов не уступает меланину животного происхождения [lj . ..'.,'. Максимальная емкость меланина • (весовой процент адсорбированного металла по отношению к весу меланина) Состав исходного г/л (СИ^СОО) г в воде ^ ^ достигает 40% при адсорбции ртути из нейтрального раствора Hg (СН3СОО)Ї(1 30% из раствора Н£(сн Л СОО) 2 в 0;17 М СН^СООН(, 16% при адсорбции свинца из раствора РЬ (СН*СОО)2 в £ 0,17 М CH-jCOOH. Регенерация сорбента (в случаевh ) ' осуществляется путем замачивания пигмента 20%-НОЙ СОЛЯНОЙ КИСЛОТОЙ В течение 5 ч', в случае ртути - путем 10 промывания в 10%-ном водном растворе тиосульфата .натрия в течение 5 ч. • • Таким образом, меланинсодержащая • биомасса гриба или меланиновый пиг15-мент используют для очистки воды . от ионов тяжелых металлов, при этом в связи с локализацией меланинового пигмента в клеточной оболочке гриба возможно использование и самой гриб• л ной биомассы, сам же меланиновый пигч мент адсорбирует из "водны* растворов ионы свинца, цинка, хромата, палладия тория, латения и ртути. ч І 0,32 2 * 1 •I б 3 10 б а ' 1 б б 37 80 75 52 95 66 70 95 50 100 16 17 13 68 16 60 68 33 91 13 20 0,30 • в 0 , 0 1 і КНСЇО4 ТЬ (N0-^4 0 , 4 8 в 0 , 0 1 ИІҐСЇО4 La в воде 7. 0,33. 2 0,0028 в воде Zn (СН3СОО)2' 2Н2О 0', 4 3 в воде 0, 02 3 в воде Сіо 0 39 95 0,76 95 9,4 94 0', 55 воде 0,3 100 3,2. 10,6 100 0,8 -" 97 100 с\Юз Hg (СН-»,СООЬ в * воде 0,76- 100 60-70*4-5 Сі *о? 0, 15 В воде В t Количество меланина, г/л раствора, 40 70-90 100130 0,32 П р и м е ч а н и е 90 180 - В зависимости от времени перемешивания) количество адсорбированного металла: а - к исходной кон-центрации,*, б - на 1 г меланина, мг. a K a 3 1 0 4 2 2 7 ВИП НИИ g Z / . Тира* 523 Подписное Филиал ІЇПП "Патент"/г.Ужгород,ул.Проектная,4 L