Спосіб прогнозування розвитку загрозливого аборту у жінок з урахуванням поліморфізму гена прогесторонового рецептора

Реферат: Спосіб прогнозування розвитку загрозливого аборту у жінок з урахуванням поліморфізму гена прогестеронового рецептора включає визначення рівня сприйняття стресу за шкалою Perceived Stress Scale (PSS) та алельного варіанта за поліморфізмом гена рецептора прогестерону rs 590688 методом полімеразної ланцюгової реакції, за якими розраховують ймовірність розвитку загрозливого аборту "р" за формулою: у у р=е */(е *+1), де е - число Ейлера (е2,718); у*=-2,532+0,132•а+0,828•b, де а - величина визначеного рівня сприйняття стресу за шкалою PSS; b - варіант алельного поліморфізму, який для генотипу G/G дорівнює 1, а для генотипів G/C та С/С дорівнює 0. UA 118250 U (54) СПОСІБ ПРОГНОЗУВАННЯ РОЗВИТКУ ЗАГРОЗЛИВОГО АБОРТУ У ЖІНОК З УРАХУВАННЯМ ПОЛІМОРФІЗМУ ГЕНА ПРОГЕСТОРОНОВОГО РЕЦЕПТОРА UA 118250 U UA 118250 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі медицини, а саме до акушерства і гінекології, і може бути використана для прогнозування розвитку загрозливого аборту у жінок. Ранні репродуктивні втрати залишаються вкрай актуальною медичною та соціально значущою проблемою сучасного акушерства та охорони здоров'я в цілому. Загрозливий аборт зустрічається до 25 % серед усіх вагітностей і може завершитись викиднем у 15 % випадків. До основних факторів розвитку аборту належать інфекційні, анатомічні, гормональні та генетичні чинники. Відомий спосіб діагностики загрози самовільного аборту методом визначення вмісту периферичних Ту - лімфоцитів до та після інкубації з альфа-2-мікроглобуліном фертильності, при зниженні експресії FcyR на поверхні Т у - лімфоцитів на 12 та більше відсотків по відношенню до вихідного рівню діагностують загрозу аборту [1]. Відомий спосіб прогнозування загрози аборту при цитомегаловірусній інфекції. У вагітних з цитомегаловірусною інфекцією в першому триместрі визначають вміст в крові титру антитіл до IgG до ЦМВ, рівня загальних IgG та IgM, додатково розраховуючи співвідношення IgM/IgG. При титрі антитіл до ЦМВ 1:1600 та значенні IgM/IgG 0,2 та більше прогнозують розвиток загрози аборту [2]. Відомий спосіб прогнозування загрози переривання вагітності в 1 триместрі за допомогою проведення доплерометричного дослідження кровоток) в маткових артеріях, який оснований на тому, що визначають систоло-діастолічне відношення (СДВ) у домінантній (з боку жовтого тіла яєчника) і недомінантній артеріях та при СДВ у домінантній артерії більше З і СДВ и недомінантній артерії більше 4 визначають загрозу переривання вагітності [3]. Відомий спосіб прогнозування виникнення загрози переривання вагітності у вагітних з трубно-перитонеальною безплідністю в анамнезі, який здійснюють шляхом оцінки: перенесених операцій на органах малого таза, місця проживання, тривалості менструації, перенесених інфекціях, що передаються статевим шляхом, кількості артифіційних абортів, лікування з приводу інфекцій, що передаються статевим шляхом, тривалості хронічного запальною процесу геніталій, загострення хронічного запального процесу геніталій, віку, перенесених інфекційних захворювань, рівня IL8 в сироватці крові, збирання анамнезу у вагітної з трубноперитонеальною безплідністю в анамнезі і вирахування індексів факторів ризику [4]. Відомий також спосіб діагностики самовільного викидню шляхом визначення естрадіолу та прогестерону та CD8 клітин в крові пацієнток, що включає визначення відмінностей в величині естрадіол-прогестеронового співвідношення та CD8 клітин в крові вагітних, тим самим визначаючи гормонально-імунологічний індекс, що дозволяє встановити етіологічний фактор розвитку самовільного викидня [5]. Кожний з наведених способів має однаковий недолік по відношенню до способу, що заявляється, - не враховується рівень сприйняття стресу на розвиток загрози аборту та рецепторна чутливість до прогестерону через генетичні чинники. При цьому всі відомі заявнику аналоги є аналогами за призначенням, оскільки вони не мають ознак, які збігаються з ознаками способу, що заявляється, який враховує вплив сприйняття стресу на розвиток загрози аборту і а рецепторну чутливість до прогестерону через генетичні чинники. Як відомо прогестерон забезпечує розвиток вагітності, його дія реалізується через активацію прогестеронових рецепторів, які кодуються геном прогестерону (PGR). За рахунок порушення експресії PGR може змінюватися перебіг біохімічних процесів в організмі жінки, сприяючи розвитку зазначеного патологічного процесу. В основу корисної моделі поставлена задача розробки способу прогнозування розвитку загрозливого аборту у жінок з урахуванням поліморфізму гена прогестеронового рецептора шляхом визначення рівня сприйняття стресу та генетичних чинників вагітної жінки, чим забезпечується залучення можливостей сучасної генетики до клінічної практики і сприяє більш ефективному прогнозуванню, визначенню ризиків виникнення зазначеної патології, й, як наслідок, більш ранньому та ретельному динамічному спостереженню груп ризику, більш ранньому та ефективному залученню сучасних терапевтичних можливостей. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб прогнозування розвитку загрозливого аборту у жінок з урахуванням поліморфізму гена прогестеронового рецептора характеризується тим, що включає визначення рівня сприйняття стресу за шкалою Perceived Stress Scale (PSS) та алельного варіанта за поліморфізмом гена рецептора прогестерону rs 590688 методом полімеразної ланцюгової реакції, за якими розраховують ймовірність розвитку загрозливого аборту "р" за формулою: у у р=е */(е *+1), де е - число Ейлера (е2,718); 1 UA 118250 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 у*=-2,532+0,132•а+0,8281•b, де а - величина визначеного рівня сприйняття стресу за шкалою PSS; b - варіант алельного поліморфізму, який для генотипу G/G дорівнює 1, а для генотипів G/C та С/С дорівнює 0. У дослідження при розробці способу прогнозування загрозливого аборту у жінок з урахуванням поліморфізму гена прогестеронового рецептора було включено 197 жінок репродуктивного віку в терміні гестації 8-16 тижнів. Основну групу склали 95 пацієнток, у яких було діагностовано загрозу аборту, контрольну групу - 102 практично здорові жінки. Всім пацієнткам, крім загально клінічних методів обстеження проводилось ультразвукове дослідження органів малого таза, оцінювались рівні гормонів: естрадіолу, прогестерону, пролактину. Визначався рівень сприйняття стресу за методикою Perceived Stress Scale (PSS) за Sheldon Cohen (1988). Для визначення поліморфізму гена рецептора прогестерона rs590688 використовувались молекулярно-генетичні дослідження. Першим було виділення ДНК біологічного матеріалу з букального епітелію. Отриману ДНК безпосередньо використовували для проведення полімеразної ланцюгової реакції. SNP PGR rs590688 визначали при програмі ампліфікації з 50 циклів (денатурація 92 °С, 15 с, гібридизація та елонгація - 60° С, 1 хв.), після чого проводили аналіз дискримінації алелей. Серед зазначених факторів для пошуку найбільш значущих з них був використаний статистичний метод "Random Forest". За результатами досліджень найбільш статистично значущими факторами виявили: рівень сприйняття стресу за шкалою PSS та алельний варіант за поліморфізмом гена рецептора прогестерона rs590688. Підсумком використаного методу "Random Forest" є побудовані моделі з наступними формулами у у р=е */(е *+1), де е - число Ейлера (е2,718); у*=-2,532+0,132•а+0,8281•b, де а - величина визначеного рівня сприйняття стресу за шкалою PSS; b - варіант алельного поліморфізму, який для генотипу G/G дорівнює 1, а для генотипів G/C та С/С дорівнює 0. Спосіб здійснюють наступним чином: Визначають рівень сприйняття стресу за методикою Perceived Stress Scale (PSS) за Sheldon Cohen (1988) та алельного варіанта за поліморфізмом гена рецептора прогестерону rs590688 методом полімеразної ланцюгової реакції (як наведено вище). Для розрахунку ймовірності (р) розвитку загрозливого аборту для кожного конкретного випадку необхідно провести розрахунок: у у р=е */(е *+1), де е - число Ейлера (е2,718); у*=-2,532+0,132•а+0,8281•b, де а - величина визначеного рівня сприйняття стресу за шкалою PSS; b - варіант алельного поліморфізму, який для генотипу G/G дорівнює 1, а для генотипів G/C та С/С дорівнює 0. На основі побудованої формули можна привести декілька клінічних прикладів застосування розрахунку ризику розвитку загрозливого аборту. Приклад 1 Пацієнтка має генотип С/С за SNP PGR rs590688, рівень стресу за шкалою PSS складає 14 балів. у*=-2,532+0,132*14+0,828*0=-0,684 -0,684 -0,684 р=е /(е +1)=0,34. Ймовірність розвитку загрозливого аборту в даному випадку становить 34 %. Приклад 2 Пацієнтка має генотип G/G за SNP PGR rs590688, рівень стресу за шкалою PSS складає 19 балів, у*=-2,532+0,132*19+0,828*1=0,804 0,804 0,804 р=е /(е +1)=0,69. Ймовірність розвитку загрозливого аборту в даному випадку становить 69 %. Розроблений спосіб прогнозування розвитку загрозливого аборту у жінок з урахуванням поліморфізму гена прогестеронового рецептора сприяє більш ефективному прогнозуванню, визначенню ризиків виникнення зазначеної патології, й, як наслідок, більш ранньому та ретельному динамічному спостереженню груп ризику, більш ранньому та ефективному залученню сучасних терапевтичних можливостей. 2 UA 118250 U 5 10 Джерела інформації: 1. Способ диагностики угрозы невынашивание плода в первом триместре беременности. М.В. Корулина, Н.Ю. Сотникова, Л.Б. Брагина, А.А. Мартенова. Патент RU 2077727, опубл. 20.04.1997. 2. Способ прогнозирования угрозы прерывания беременности в первом триместре при цитомегаловирусной инфекции. М.Т. Луценко, И.А. Андриевская. Патент RU 2599516, опубл. 10.10.2016. 3. Спосіб прогнозування загрози переривання вагітності в 1 триместрі. І.М. Дикан, Н.К. Волик, Т.М. Бабкіна, Ю.П. Вдовиченко. Патент UA 59085, опубл. 10.05.2011. 4. Спосіб прогнозування вірогідності виникнення загрози переривання вагітності у вагітних з трубно-перитонеальною безплідністю в анамнезі. О.В. Мілєвський, Л.Є. Туманова. Патент UA 93967, опубл. 25.03.2011. 5. Способ прогнозирования угрозы прерывания беременности при урогенитальной инфекции. М.А. Левкович, В.И. Орлов, Л.П. Сизякина. Патент RU 2281000, опубл. 15.09.2004. 15 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 20 25 Спосіб прогнозування розвитку загрозливого аборту у жінок з урахуванням поліморфізму гена прогестеронового рецептора, який відрізняється тим, що включає визначення рівня сприйняття стресу за шкалою Perceived Stress Scale (PSS) та алельного варіанта за поліморфізмом гена рецептора прогестерону rs 590688 методом полімеразної ланцюгової реакції, за якими розраховують ймовірність розвитку загрозливого аборту "р" за формулою: у у р=е */(е *+1), де е - число Ейлера (е2,718); у*=-2,532+0,132•а+0,828•b, де а - величина визначеного рівня сприйняття стресу за шкалою PSS; b - варіант алельного поліморфізму, який для генотипу G/G дорівнює 1, а для генотипів G/C та С/С дорівнює 0. Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3