Спосіб інтенсифікації технологічних етапів промислового культивування їстівного гриба гливи звичайної (pleurotus ostreatus (jacg.:fr.) kumm.)

Спосіб інтенсифікації технологічних етапів промислового культивування базидіального їстівного гриба Pleurotus ostreatus (Jacq.:Fr.)Kumm), оснований на ефекті впливу червоного світла на посівний міцелій гриба, який відрізняється тим, що опромінення посівного міцелію проводять червоним світлом при дозі 230 мДж/см2, отриманим із використанням як джерела світла лампи розжарювання з червоним фільтром. (19) (21) 2004010295 (22) 15.01.2004 (24) 15.09.2006 (46) 15.09.2006, Бюл. № 9, 2006 р. (72) Поєдинок Наталія Леонідівна, Бухало Ася Сергіївна, Бісько Ніна Анатольївна, Михайлова Оксана Борисівна, Негрійко Анатолій Михайлович, Потьомкіна Жанна В'ячеславівна (73) Поєдинок Наталія Леонідівна, Негрійко Анатолій Михайлович 3 16930 4 макромолекул ДНК. Як наслідок цих процесів впливає на утворення регуляторів росту і виникнення небажаних мутацій, зникнення інтенсивність ростових процесів цих грибів, а корисних ознак та поява небажаних [И.А.Захаров, також є модифікатором ліпідного та вуглеводного С.В.Ковальцова, Т.Н.Кожина и др. Мутационный складу спор. Зміни, які викликані світлом, мають процесс у грибов. Наука, 1980]. пролонговану дію і зберігаються на наступній Відомі способи стимулювання росту дріжджів і стадії онтогенезу тобто у міцелії. Esherichea coli шляхом впливу низькоінтенсивного Однак, до теперішнього часу не вивчена дія лазерного опромінювання у видимій ділянці червоного світла на ріст і розвиток базидіоміцетів, спектру (He-Ne лазер 632.8нм). Величина ефекту їх урожайність і продуктивність. стимуляції залежить також і від інтенсивності В основу корисної моделі способу світла даної довжини хвилі [Т.И.Кару. Про інтенсифікації технологічних етапів промислового молекулярный механизм терапевтического культивування базидіального їстівного гриба действия низькоинтенсивного лазерного Pleurotus ostreatus доставлена задача облучения. Докл. Акад. Наук 1986. Т.291, N 5, інтенсифікації росту посівного міцелію шляхом стор.1245-49.] впливу на нього червоного світла з довжиною Відомий спосіб активації проростання хвилі 630-700нм. отриманого за допомогою базидіоспор Hericium erinaceus та інтенсифікації фільтра із різнокольорового скла, при дозі росту міцелію моноспорових культур, отриманих з 230мДж/см2. У результаті цього зменшується доза цих ,базидіоспор, який оснований на впливі на внесення в субстрат посівного міцелію, базидіоспори лазерного опромінювання (He-Ne збільшується швидкість росту міцелію, лазер) у червоній області спектру в дозах від 45 до зменшується час обростання субстрату, значно 230мДж/см . В результаті проведених маніпуляцій раніше починається плодоношення, збільшується збільшується кількість пророслих спор у 10-105 врожайність. Це, без сумніву, має важливе разів у різних штамів, зменшується час їх практичне значення при культивуванні їстівних проростання, збільшується швидкість росту грибів. моноспорових культур [Деклараційний Патент Поставлена задача розв'язується шляхом України А01Gl/04. Спосіб активації проростання впливу червоного світла, отриманого.за спор вищого базидіального гриба Hericium допомогою фільтра із різнокольорового скла на erinaceus. 16.04.2001p.]. дикаріотичний міцелій гриба при дозі 230мДж/см2. Відомі способи інтенсифікації росту та Дикаріотичний міцелій вирощється протягом 14 діб плодоношення вищих базидіальних їстівних грибів на стерильному зерні пшениці після термічної Pleurotus ostreatus, Lentinus edodes та Hericium обробки (100°С 40хв.). Отриманий міцелій erinaceus, які базуються на впливі на посівний розкладається в стерильні чашки Петрі тонким міцелій цих видів грибів лазерного світла у шаром і опромінюється вищевказаним способом. червоній та зеленій областях спектру Одразу після обробки червоним світлом різних доз [Деклараційний Патент України №53880 від міцелій використовується для засіву субстрату 17.02.2003; Деклараційний Патент України (термічно оброблена солома). До початку №53900 від 17.02.2003; Деклараційний Патент плодоношення інкубація блоків проводиться у України №53867 від 17.02.2003; Н.Л.Поєдинок и повній темряві при температурі 26°С, потім на др. Использование лазерного излучения при світлі при 18°С. Після цього показники росту, культивировании некоторых видов съедобных розвитку і процесу плодоношення гриба на цих грибов // Биотехнология, 2003. №3]. блоках порівнюються з аналогічними показниками Недоліком цього способу є висока ціна, на контрольних блоках. Отримані результати обумовлена використанням дорогих лазерних аналізуються за допомогою методу дисперсійного джерел, малим коефіцієнтом корисної дії лазерних аналізу. установок, що використовуються, технічною Суть корисної моделі, яка заявляється, складністю апаратури, що потребує пояснюється прикладами. висококваліфікованого обслуговування. Приклади використання червоного світла для Як найбільш перспективний природний зменшення дози внесення посівного міцелію в екологічно чистий регуляторний фактор, світло в субстрат і для прискорення процесу обростання видимій області спектру використовується в субстрату. технологіях глибинного культивування Посівний міцелій на зерні отримували і міцеліальних грибів [Горнова И.Б. Использование опромінювали вищевказаними способами. Оідразу видимого света в биотехнологии. Тез. докл. після опромінення посів проводили на субстрат, Первого съезда микологов России "Современная який розміщували у поліпропіленових мішках по микология в России". - М., 2002. - С.286-287]. 5кг. Кількість посівного матеріалу становила 5, 2,5 та 1,2%, як у досліді, так і у контролі. Встановлено, що світло з 650нм і 530нм, отриманих за допомогою фільтрів, суттєво 5 16930 6 Таблиця 1 Характеристика плодоношення Pleurotus ostreatus (шт.431) на соломі при різних дозах внесення опроміненого і неопроміненого посівного міцелію Кількість посівного міцелію, % до маси готового субстрату 5 2,5 1,2 5 2,5 1,2 Кількість мішків з примордіями, % до загальної кількості 6 діб після 16 діб після 20 діб після 13 діб після інокуляції інокуляції інокуляції інокуляції Інокуляція неопроміненим міцелієм 4 5 20 80 3 5 0 60 2 5 0 0 Інокуляція опроміненим міцелієм 5 5 60 100 4 5 20 100 3 5 0 20 Ступінь обростання субстрату, бали Примітка: 1 - початок колонізації субстрату; 2 - окремі ділянки обростання; 3 - 40-60% обростання субстрату; 4 - 70-90% обростання субстрату; 5 - 100% обростання субстрату. Отримані результати (табл. 1) дозволяють стверджувати, що при однаковому внесенні опроміненого і неопроміненого міцелію повне обростання субстрату в першому варіанті виникає на 7 днів раніше, ніж при інокуляції неопроміненого. Зменшення в 2-4 рази кількості внесеного неопроміненого міцелію значно зменшило швидкість колонізації субстрату грибом (на 7-14 діб). В той же час, порівнюючи показники росту опроміненого міцелію на соломі при дозі його внесення 2,5% і неопроміненого міцелію при 5% інокуляції, можна підкреслити, що характер росту міцелію і час повного обростання субстратних блоків практично не відрізняються. Параметри росту міцелію на субстраті, інокульованому 1,2% опроміненого зернового міцелію, рівнозначні ростовим показникам у варіанті субстрату, котрий був інокульований 2,5% неопроміненого посівного міцелію. Утворення ж примордіїв у всіх варіантах застосування опроміненого міцелію відбувається значно раніше, ніж у контролі. Крім того, опромінення посівного міцелію сприяло одночасному утворенню великої кількості примордіїв. Приклади використання червоного світла для стимулювання процесу плодоношення і збільшення врожайності Pleurotus ostreatus. Отримання посівного міцелію, його опромінення, посів на субстратні блоки і інкубування проводили, як описано у попередніх прикладах. Порівняння процесів плодоношення у досліді і контролі дозволило встановити, що опромінювання посівного матеріалу у вказаному режимі дозволяє на 7 днів скоротити період плодоношення. Максимум урожайності в дослідних варіантах припадає на 1 хвилю, яка спостерігається на 1-ому тижні плодоношення. На блоках, інокульованих 2,5 і 1,2% неопроміненого міцелію, найбільшу кількість грибів збирали на другому та третьому тижнях плодоношення (табл. 2, рис.). Порівнюючи врожайність плодових тіл у різних варіантах досліду і в контролі, можна стверджувати, що ефект опромінення збільшується при зниженні дози внесення в міцелію субстрат. Урожайність збільшується вже при мінімальній дозі внесення опроміненого міцелію (1,2%) у порівнянні з максимальною дозою внесення неопроміненого міцелію (5%) і складає 27,1 і 20,6% відповідно. Однак при 5%-ій інокуляції опроміненим міцелієм врожайність збільшується на 43%, а при 1,2%-ній інокуляції опроміненим міцелієм - вже на 60 % у порівнянні з тими ж дозами неопроміненого міцелію. При зменшенні дози внесення опроміненого міцелію відбувається досить незначне зменшення урожайності у порівнянні з аналогічним показником для неопроміненого міцелію. Необхідно також підкреслити, що зменшення дози внесення опроміненого міцелію не настільки значне, як у випадку зменшення кількості неопроміненого, впливає на зниження урожайності гливи. Так, при зниженні дози неопроміненого посівного матеріалу до 1,2% врожайність зменшувалась на 18%, а при внесенні 1,2% опроміненого міцелію - лише на 8 % у порівнянні із врожаями, отриманими при внесенні стандартних (5%) доз (табл. 2). 7 16930 8 Таблиця 2 Динаміка плодоношення Pleurotus ostreatus (шт.431) на соломі при різних дозах внесення опроміненого і неопроміненого посівного міцелію Кількість посівного міцелію, % до маси готового субстрату 5 2,5 1,2 5 2,5 1,2 Врожайність, % свіжих плодових тіл до вологого субстрату Кількість діб після інокуляції 20 27 10,4 1,6 2,4 7,2 2,5 14,0 9,6 2,8 4,0 8,3 34 41 48 55 62 Інокуляція неопроміненим міцелієм 0,4 0,2 4,5 2,6 0,1 1,2 1,5 0,1 3,7 1,3 7,5 1,0 0,1 0,3 4,3 Інокуляція опроміненим міцелієм 0,8 0,5 8,0 3,2 0,2 1,2 0,1 0,6 8,3 4,0 6,0 2,0 0,1 0,2 6,3 Всього 69 76 0,2 1,2 0,1 0,3 3,7 0,5 20,6 18,4 16,9 29,5 27,9 27,1 Примітка: (-) - плодові тіла відсутні Зазначені в прикладах показники використання червоного світла для інтенсифікації технологічних етапів промислового культивування базидіального їстівного гриба Pleurotus ostreatus показує, що опромінення посівного міцелію червоним світлом з довжиною хвилі 630-700нм при дозі 230мДж/см2, отриманим із використанням лампи накалу (теплового джерела), дозволяє в 2-4 раза зменшити дозу посівного міцелію який вноситься в субстрат, на 7-14 днів скоротити період культивування і збільшити врожайність плодових тіл на 43-60%. 9 Комп’ютерна верстка Н. Лисенко 16930 Підписне 10 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601