Штам соматичних структур їстівного базидіоміцета pleurotus ostreatus (jacg.: fr.) kumm. р-01- продуцента плодових тіл і міцелію з антиокисними властивостями

Штам соматичних структур їстівного базидюміцета Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm P-01 - продуцента плодових тіл і міцелію з антиокисними властивостями люкс, таким чином, штам потребує стільки ж світла, як і овочеві культури закритого грунту Не повідомляється про антиокисні властивості міцелію і ПЛОДОВИХ ТІЛ [1] Запатентовано штам макроміцету Pleurotus ostreatus ВКМГ-2465Д-продуцент плодових тіл їстівних грибів на відходах лісової та лісопереробноі промисловості Штам ВКМГ-2465Д у інтенсивному виробництві не використовується Він не плодоносить без холодового шоку Цей штам чутливий до недоліку освітлення В якості субстрату для цього штаму використовують деревину - коштовну сировину Не вивчена антиокисна активність штаму [1] Найбільш близький за технічною суттю і досяжності результату є штам гливи звичайної КВ1017 Це високоврожайний штам, який відрізняється підвищеною СТІЙКІСТЮ до несприятливих факторів, здатністю плодоносити без холодового стресу Не наводяться дані щодо його лікувальнопрофілактичних властивостей не вивчені антиокисні властивості міцелію та плодових тіл цього штаму [1] В основу винаходу поставлено завдання отримання нового штаму соматичних структур базидіального дереворуйнівного гриба Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm P-01 - який відрізняється від прототипу підвищеною врожайністю і здатністю до синтезу антиокисних речовин Поставлене завдання вирішується тим, що штродукований штам Р-01 макроскопічного гриба Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm добре плодоносить і виявляє значний рівень вмісту антиокисних речовин у міцели і плодових тілах на живильних середовищах, які складаються з дешевих та доступних компонентів (наприклад, зволоженого (О (О 46461 лушпиння соняшника) Отриманий штам Р-01 макроскопічного гриба Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm має наступні характеристики Штам гливи звичайної Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm Р-01 виділено за методом виділення чистих культур базидіоміцетів [3 - 5] з природної популяції, з плодових тіл, які росли на пні тополі канадської (Populus deltoides Marsh) у екологічно небезпечному районі м Донецька Культурально-морфолопчні ознаки Штам Р-01 досліджували на сусло - агарі, глюкозокартопляному агарі (ГКА), лушпинні соняшника, та рідких глюкозо-пептонному і суслопептонному живильних середовищах На сусло-агарі і ГКА у чашках Петрі, міцелій розповсюджується рівномірно 3 початку розвиваються субстратні, а потім - повітряні гіфи Краще розвинуті субстратні гіфи Колонія гриба має круглу форму, повстиста з вираженими добовими концентричними колами Останнє пов'язане з нерівномірним ростом гіф гриба на протязі доби, який не є наслідком температурних чи світлових умов культивування Колір колонії сніжно - білий, з віком, на 25 - ЗО добу, забарвлюється до світлокремового Субстрат не забарвлює Текстура міцелію бавовняна, вовняна, висота повітряних гіф становить близько Змм На застосованих для культивування живильних середовищах, колонія має грибний запах По мірі появи багаточисельних пряжок і тяжів, починають формуватися примордм з позитивним фототропізмом Мікроскопічні дослідження свідчать, що гіфи гриба гілчасті, звивисті, з початку їх розгалуження дихотомічне, тісно сплітаються між собою Добре спостерігаються стінки і багаточисельні перегородки гіф Перегородки утворюються як в місцях з'яви пряжок, так і між клітинами без пряжок Стінки незабарвлені, їх апекси характеризуються гомогенною структурою протоплазми 3 часом, на 5 добу і більше, в клітинах міцелію з'являються вакуолі та жирові включення Формування примордіів супроводжується появою нештенсивного жовтуватого забарвлення міцелію, особливо повітряних гіф Ширина гіф дорівнює 3-8мкм, а довжина клітин - від 15 до 70 і більше мкм Безстатеве плодоношення представлене хламідоспорами і багаточисельними анаморфами Для визначення ростового коефіцієнту та лінійної швидкості росту [5, 10], штами, що культивують для отримання плодових тіл у грибівництві, гливи флоридської P-F1 і гливи звичайної Р-20, Р35, Р-77, KB 1017 та новий штам Р-01, вирощували на агаризованому глюкозо-пептонному середовищі Культивування грибів проводили в пробірках та чашках Петрі при оптимальній температурі для росту - 24°С 3 даних таблиці 1, бачимо, що найвищу лінійну швидкість росту у пробірках мав штам KB 1017 Найменша швидкість росту при цих умовах зафіксована для штаму Р-01 Ріст штамів грибів роду Pleurotus спостерігали і в чашках Петрі Так, найвищу лінійну швидкість росту у чашках Петрі теж мав штам KB 1017 Найнижча швидкість росту при цій температурі була у штаму Р-20 Взагалі, за ЛІНІЙНОЮ швидкістю росту у пробірках, штами достовірно не відрізнялися За ЛІНІЙНОЮ ШВИДКІСТЮ росту у чашках Петрі, штам KB 1017 мав достовірно найвищі значення Утаблиції, також, представлено дані розрахунку ростового коефіцієнту досліджених штамів [5, 6] Цікаво ВІДМІТИТИ, що найвищій РК-162 ум од мав штам Р-77, який не виявив високої лінійної швидкості росту Це пояснюється більш повним врахуванням показників росту колонії грибів при застосуванні цього методу визначення росту міцелію Дуже низький ростовий коефіцієнт відмічено у штаму P-F1 Це пояснюється тим, що у культурі на агаризованому суслі у чашках Петрі цей штам мав низькі значення висоти і ЩІЛЬНОСТІ колонії Штам Р-01 мав ростовий коефіцієнт 63 умовні одиниці, близький РК до цього значення мав і штам P-F1 На відміну від лінійної швидкості росту, штами, крім Р-01 і P-F1, за ростовим коефіцієнтом достовірно відрізняються між собою Для визначення впливу температури на ріст штамів, культури вирощували у пробірках на скошеному сусло-агарі при температурах від 20 до 35°С з інтервалом 2,5°С Цифрові дані лінійної швидкості росту штамів грибів роду Pleurotus (Fr) Quel представлені в таблиці2 Температурний оптимум росту штамів P-F1, Р-35, Р-77 складає 27,5°С Для штаму Р-20, він знаходиться в межах температур від 22,5°С до 27,5°С Різниця в ЛІНІЙНІЙ ШВИДКОСТІ росту штаму на цих температурах не достовірна Штам Р-01 в ході досліду мав оптимум температур росту в межах від 25°С до 30°С, інтервал оптимальних температур більший, ніж для других штамів Слід ВІДМІТИТИ ЩО штами суттєво не відрізняються за швидкістю росту між собою і мають ідентичні залежності росту від температури Так, з наведених даних видно, що при температурі 27,5°С всі штами, за винятком штаму KB 1017, мали лінійну швидкість росту близько 9мм за добу Слід ВІДМІТИТИ також, що температура 20°С є придатною, але несприятливою для росту обраних штамів Швидкість росту штамів P-F1, Р-01, Р-20 при цій температурі дорівнює швидкості росту їх при температурі 32,5°С - теж несприятливій для їх росту Всі штами суттєво зменшують швидкість росту при температурі 35°С Тут вона дорівнює близько 1мм за добу, а для штаму Р-01 - 0,12мм за добу Слід ВІДМІТИТИ, ЩО міцелій штамів Р-35, Р77 уповільнює свій ріст вже при 32,5°С де він складає 3,6мм за добу Таким чином дослід показує суттєвий вплив температури на лінійну швидкість росту штамів та більш широкий температурний оптимум росту запропонованого штаму Р-01 Ріст міцелію штаму Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm Р-01 відмічали в інтервалі температур від 2° до 40°С Температурний оптимум росту штаму Р-01 на агаризованих середовищах знаходиться в межах 22,5 - 30,0°С, на рідких живильних середовищах - 24 - 26°С На рідких суслопептонному і глюкозо-пептонному живильних середовищах, штам Р-01, при поверхневому способі культивування, утворює рівно розвинуті всі типи міцелію Культуральний фільтрат не забарвлює Фізюлого-бюхімічні ознаки Відношення до джерел вуглецевого живлення Вивчався вплив різних джерел вуглецю на ріст і біосинтез антиокисних речовин штамом Р-01 Pleu 46461 rotus ostreatus (Jaca Fr) Kumm Встановлено, що утилізація моно-, ді- та полісахарідів протікає з різною швидкістю Найвище накопичення біомаси спостерігається при вирощуванні гриба на рідкому живильному середовищі, яке містило лактозу, мальтозу, манніт, глюкозу чи галактозу, дуже слабке - рамнозу, яблуневу кислоту, дульцит чи рафінозу Антиокисна активність (АОА) міцелію не пов'язана з рівнем накопичення штамом вегетативної маси Високий рівень АОА міцелію відмічається в ВІЦІ 20 діб при культивуванні штаму на живильному середовищі, яке містило мальтозу, крохмаль, ксилозу, та фруктозу Не зареєстровано антиокисну активність міцелію штаму Р-01 в ВІЦІ 20 діб, що вирощували на середовищах з сорбітом, інозитом та яблуневою кислотою Відношення до джерел азотного живлення Вивчення придатності неорганічного (амонійного і нітратного) та органічного (ферментативний пептон, сечовина, амінокислоти) азоту для живлення штаму Р-01 засвідчило, що тільки на середовищі з пептоном йде швидке накопичення біомаси і сполук з антиокисною дією Штам Р-01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm на рідкому глюкозо-пептонному середовищі на 20 - 25 добу культивування має найвищий рівень накопичення біомаси, яка дорівнює 12,19 ± 1,824г/л Оптимум рН для накопичення біомаси штамом Р-01 знаходиться в межах 5,18 - 5,37 одиниць Приклад конкретного виконання 1 Штам Р-01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm отримано за методами, які звичайно застосовуються для одержання чистих культур макроміцетів, а саме вилученням "тканинних" ІЗОЛЯТІВ з свіже зібраних плодових тіл [3 - 5] Плодові тіла гриба зібрані з пня тополі канадської (Populus deltoides Marsh) біля проїзної частини автодороги м Донецька Чисту міцеліальну культуру штаму підтримують шляхом пересівів через 5 - 6 МІСЯЦІВ на агаризоване знехмілене пивне сусло (4° по Баллінгу), чи ІНШІ агаризовані живильні середовища Для вивчення АОА, штам Р-01 вирощують на рідкому глюкозо-пептонному середовищі або знехміленому пивному суслі (4° по Баллінгу), яке містить Зг/л ферментативного пептону Кислотність середовища після стерилізації становить 5,3 5,5рН Культуру вирощують в колбах Ерленмейера МІСТКІСТЮ 250мл з об'ємом середовища - 50мл Культивують поверхнево, при температурі 25 ± 0,5°С Посівним матеріалом є 5 - 10 денна культура гриба, яка зростала на агаризованному живильному середовищу Термін культивування - 20 діб Для отримання плодових тіл, штам вирощують за інтенсивною технологією Визначають АОА культурального фільтрату, вегетативного міцелію або плодових тіл штаму Р01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr,) Kumm за методом [15], який базується на ОЦІНЦІ інтенсивності гальмування нагромадження продуктів перекисного окислення жовткових ліпопротеїдів (ЖЛП), що реагують з тюбарбітуровою кислотою з утворенням забарвленого продукту Далі на спектрофотометрі в водній фазі вимірюють оптичну густину контрольної та дослідних проб проти нульової проби при довжині хвилі 532нм Антиокисну активність МІКОЛОГІЧНОГО матеріалу розраховували за модифікованою формулою [15] АОА де, '-•р-Ж% UDK-D-D°K, ДОКФ(МГ)-ОКФ(МГ)-О°КФ(МГ), D°K, О°КФ(МГ) - оптична густина, виміряна в суспензії ЖЛП (контрольній пробі) і в суспензії ЖЛП з культуральним фільтратом (міцеліальним гомогенатом) до інкубації, DV, О'КФ(МГ) - оптична густина, виміряна в тих же зразках в момент часу t ( після 15 хвилин інкубації), р -коефіцієнт розведення Визначення UDK, ДОКФ - потрібно для того, щоб врахувати вихідний рівень окислення суспензії ЖЛП та культурального фільтрату чи міцеліального гомогенату При визначенні та розрахунку АОА МІКОЛОГІЧНОГО матеріалу можливі як позитивні так і негативні значення Від'ємна АОА співпадає за абсолютним значенням з позитивною окисною активністю Данні досліду з антиокисної активності міцелію штамів грибів роду Pleurotus (Fr) Quel, що вирощували в колбах Ерленмейєра на штучному глюкозо-петонному середовищі представлені в таблиціЗ Найвища АОА - близько 25% виявлена в міцели штаму Р-01, що був виділений з природних джерел Найменше значення АОА - близько 5% спостерігали у міцели штаму Р-20 Штами Р-35, Р77, KB 1017 та P-FI не відрізняються за величиною АОА міцелію Враховуючи значний вплив температури на ріст досліджених грибів та високу антиокисну активність культури Р-01, визначали величину АОА міцелію цього штаму при культивуванні в тих же умовах при температурах 22,5, 25,0, 27,5 30,0 і 32,5°С Цифрові дані АОА міцелію цього штаму представлені утаблиці4 З даних таблиці4 видно, що для міцелію дослідженого штаму Р-01 гливи звичайної характерна залежність росту, накопичення біомаси і антиокисної активності від температури культивування Але температурні оптимуми для кожної з величин не співпадають між собою Температурний оптимум синтезу речовин антиокисної дії знаходиться вище оптимумів росту, в інтервалі 27,5 - 30°С Приклад конкретного виконання 2 Промислова, інтенсивна технологія вирощування міцелію грибів роду Pleurotus (Fr) Quel з метою отримання плодових тіл гливи потребує можливість використання некоштовних субстратів, високопродуктивних та стійких до несприятливих факторів штамів, якісного посівного міцелію Виробничі іспити з врожайності штаму Р-01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm у порівнянні з прототипом штамом KB 1017, проводились у навчальновиробничій МІКОЛОГІЧНІЙ лабораторії кафедри фізіологи рослин біологічного факультету Донецького національного університету Посівний міцелій штамів KB 1017 (прототип) і Р-01 (що заявляється) отримано на зерновій основі в однакових умовах У якості субстрату застосовували свіже, не заражене сторонньою мікрофлорою, лушпиння соняшника - ВІДХІД переробки насіння соняшника у харчовій промисловості Підготовка субстрату, його інокуляція Луш 46461 пиння соняшника заливають водою Від температури води залежить час зволоження субстрату При температурі води 15 - 25°С, субстрат витримують 12 годин При підвищенні температури до 50-60°С, час витримки становить 3-4 години Вологість субстрату після замочування становить 6570% Потім субстрат фасують у термостабільні ємності і стерилізують при 0,15 - 0,18МПа (1,5 1,8кгс/см), температурі пару 126,8 - 130,6°С протягом 90 - 120хв Процес стерилізації може бути замінений пастеризацією, ферментацією чи термообробкою субстрату [6, 9, 11] Після стерилізації і повітряного охолодження до 23 - 25°С, субстрат разом з зерновим шокулюмом кладуть у поліетиленові мішки - формують блок КІЛЬКІСТЬ шокулюму розраховують в залежності від маси субстрату у співвідношенні 1 45 ± 5 Заростання субстрату міцелієм при температурі приміщення 20 - 22°С йде близько 20 діб Внутрішня температура субстрату, при заростанні міцелієм, підвищується на 4 - 6°С, що співпадає з оптимумом росту Ініціація плодоношення наступає на 25 добу культивування 3 появою примордмв - зачатків плодових тіл, у мішках роблять надрізи поліетилену Температуру приміщення підтримують в межах 17 - 20°С Зволоження блоків Перший тиждень росту плодових тіл блоки майже не поливають, підтримуючи вологість повітря приміщення 85 - 95% Потім, блоки поливають до 5 разів на день, розпилюючи воду Відносну вологість повітря бажано підтримувати автоматично конусними розпилювачами вологи Залишок води на ПІДЛОЗІ І полках видаляють Під час плодоношення, приміщення провітрюють для видалення надлишку ССЬ Освітлення культиваційних приміщень Перший тиждень росту плодових тіл блоки майже не потребують освітлення 3 моменту масової появи плодових тіл, забезпечують оптимальну силу світла 700 - 800лк на годину Обидва штами при культивуванні не потребують холодового шоку Початок плодоношення штамів наступає на 25 добу Вирощування грибів проводилося в однакових умовах, згідно технологи Характеристики отриманих під час культивування плодових тіл, наводяться утаблиці5 Характерною особливістю для плодоношення штаму Р Штам Р-01 Р-20 Р-35 Р-77 KB 1017 P-F1 8 01 є розвиток концентричних ділянок гіменію на поверхні шляпки плодового тіла Забарвлення плодових тіл сіре Підрахунок врожайності штамів Р-01 і KB 1017 проводили по двом хвилям плодоношення з урахуванням габітусів плодових тіл Товарними плодовими тілами вважали такі, що мали розміри шляпки не менше 40мм і підрізану ніжку на довжину не більше 40мм Результати проведених ДОСЛІДІВ показали наступне Коефіцієнт габітусу плодових тіл штаму Р-01 першої хвилі становив 0,77 умовних одиниці, другої хвилі - 0,52 На субстраті з лушпиння соняшника, із розрахунку на 100кг повітряносухої маси, врожайність штаму Р-01 становила 53,33кг, а штаму KB 1017 - 42,11кг Це дозволяє говорити про більш високу врожайність штаму Р01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm порівняно з прототипом на застосованому субстраті Визначали АОА штучно отриманих подових тіл штаму Р-01 Плодові тіла штаму Р-01, вирощені на лушпинні соняшника мають антиокисну активність, що дорівнює 32,15 ± 3,61% Приклад конкретного виконання 3 Мікроміцети родів Aspergillus, Pemcillum та Tnchoderma виявляють сильний антагонізм до культур гливи звичайної Вивчали взаємодію штамів гливи Р-01, KB 1017 і мікроміцетів в змішаній культурі у чашках Петрі на ГКА Культури вирощували у сухоповітряному термостаті ТС-80-М-2 при температурі 25°С Встановлено, що ДОСЛІДНІ штами гливи звичайної мають близькі за рівнем СТІЙКОСТІ І конкуре НТОЗ дати ОСТІ до мікроміцетів Таким чином, запропонований штам Р-01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm у порівнянні з прототипом - штамом KB 1017 гливи звичайної, здатний до утилізації лушпиння соняшника - відходу харчової промисловості і його врожайність на застосованому субстраті вища у 1,27 рази ніж прототипу Штам Р-01 має вміст антиокисних речовин як у міцели, що дорівнює 32,11 ± 1,69%, так і в плодових тілах, що дорівнює 32,15 ± 3,61% Культура Р-01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm є стійкою і конкурентоздатною до мікроміцетів За рахунок цього може бути використаним у грибівництві і різних галузях харчової промисловості, як лікувально-профілактичний засіб Таблиця 1 Лінійна швидкість росту і ростовий коефіцієнт штамів грибів роду Pleurotus (Fr) Quel Лінійна швидкість росту,мм/добу РК у пробірках у чашках Петрі 6,08 ± 2,93 7,54 ± 3,00 63 6,21 ±3,18 6,50 ±3,21 135 7,13 ±2,98 7,38 ± 2,20 100 6,92 ± 2,96 7,42 ±1,68 162 9,45 ± 2,34 11,80 ±0,20 118 7,54 ± 3,04 9,21 ±2,47 62 Таблиця 2 9 46461 10 Вплив температури культивування на лінійну швидкість росту штамів грибів роду Pleurotus (Fr) Quel Штам Температура культивування, P-F1 Р-01 Р-20 Р-35 Р-77 КВ1017 °С Лінійна швидкість росту, мм/добу 20,0 6,38 ± 0 58 6 25 ± 1 07 6 31 ± 0 74 5 13 ± 0 28 5 50 ± 0 77 5,89 ± 0,77 22,5 7,25 ± 0 33 8 13 ± 0 49 7 81 ± 0 47 7 69 ± 0 42 6 63 ± 0 16 7,62 ±0,1 6 25,0 7,50 ± 0 23 9 13 ± 0 43 7 81 ± 1 88 7 88 ± 0 25 7 50 ± 0 23 11,50±0,23 27,5 9,63 ± 1 09 7 94 ± 2 05 9 31 ± 0 56 9 06 ± 0 47 9 19 ± 0 84 10,91 ±0,84 30,0 7,50 ± 0 18 9 00 ± 0 85 6 38 ± 1 51 7 38 ± 0 ЗО 6 75 ± 0 21 8,54 ±0,21 32,5 6 69 ± 1 21 7 13 ±0 30 6 13 ± 0 31 3 63 ± 0 50 3 69 ± 0 29 3,69 ± 0,29 35,0 1 06 ± 0 10 0 13 ± 0 08 1 09 ± 0 15 0 94 ± 0 14 1,51 ±0,13 1,67 ±0,23 Таблиця З Штам Р-01 Р-20 Р-35 Р-77 KB 1017 P-F1 Антиокисна активність міцелію штамів грибів роду Pleurotus (Fr) Quel Біомаса, г/л АОА, % 4,24 ±0,18 24,70 ±1,45 5,06 ±0,18 5,04+ 1,17 4,13 ±0,42 12,49 + 3,27 4,06 ±0,13 15,19 ±2,81 4,64 ± 0,53 9,44 ± 3,08 3,66 ± 0,22 12,17 ±4,56 Таблиця 4 Вплив температури культивування на антиок йену активність та накопичення біомаси штамом Р-01 Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm № п/п 1 2 3 4 5 Температура культивування, °С 22,5 25,0 27,5 30,0 32,5 Біомаса, г/л 3,41 ±0,17 4,98 ±0,51 5,35 ±0,21 4,74 ±0,12 4,54 ± 0,36 АОА, % 17,95 ±2,03 24,70 ±1,45 32,11 ±1,69 31,01 ±2,81 27,50 ±1,07 Таблиця 5 Габітус плодових тіл штамів Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm Штам N° п/п Показник KB 1017 Р-01 1 Діаметр шляпки, мм 52 ± 2 67,5 ± 2 Довжина ніжки, мм 22 ± 3 24 ± 2 3 Діаметр ніжки, мм 28,1 ± 2 10 ± 2 4 Маса плодового тіла, г 46,5 ± 2 47,5 ± 3 5 ЩІЛЬНІСТЬ, ОД 3,2 3,2 Джерела інформації, які використані при укладанні заявки 1 А с 1755735 СССР Штамм соматических структур макроскопического гриба Pleurotus ostreatus (Jacq Fr) Kumm KB 1017 - продуцент плодовых тел/ Сычев П А , Негруцкий С Ф , Кипень А Н Заявка №4734366 от 04 07 89, М кл C12N 1/14, А 01 G 1/04, БИ №31 1992 (прототип) 2 Белова Н В , Ефремова И Я Препараты из высших грибов - объект патентно-правовой охраны // Микология и фитопатология - 1992 -26, вып 4 -С 321-324 3 Бисько Н А , Дудка И А Биология и культивирование съедобных грибов рода вешенка - К Наук, думка, 1987-148с 4 Бисько Н А , Бухало А С , Вассер С П и др Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре -Киев Наук, думка, 1988-144с 5 Бухало А С Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре -Киев Наук, думка, 1988-144 с 6 Бухало А С Сучасні тенденції культивування грибів з роду Pleurotus (Fr) Quel И Укр ботан журн-1990, т47, № 2 -С 101-103 7 Бухало А С , Соломко Е Ф , Митропольская Н Ю Базидіальні макроміцети з лікарськими властивостями // Укр ботан журн-1996-53, № 3 - С 192-201 8 Дорофеев А Н , Акимов Ю А , Русина И Ф Природные антиоксиданты поиски перспективы применения // Тез докл III Всесоюз конф "Биоантиоксидант"-М-1989-С 252 9 Дудка И А , Вассер С П , Бухало А С и др Промышленное культивирование съедобных грибов-Киев Наук, думка,1978-264с 10 Дудка И А , Вассер С П , Элланская И А Методы экспериментальной микологии Справочник-Киев Наук, думка,1982-550с 11 Дудка И А , Бисько Н А , Билай В Г Культивирование съедобных грибов - Киев Урожай, 1992-160с 12 Капич А Н Биосинтетическая активность 11 46461 12 дереворазрушающих базидиомицетов при глубинприменением желточных липопротеидов // Лаб ном культивировании // Микол, и фитопатол дело-1988, № 5 - С 59-62 1990-24,№5-С 377-384 16 Соломко Э Ф , Дудка И А Перспективы ис13 Капич А Н , Шишкина Л Н Антиоксидантпользования высших базидиомицетов в микроные свойства дереворазрушающих базидиомицебиологической промышленности// ВНИСЭТИ Обтов // Микол, и фитопатол-1992-26,№ 6-С 486зорная информация, сер З - М ,1985-48с 492 17AoyamaT, Nakakita I , Nakagawa М , Sakai 14 Капич А Н Антиокислительная активность Н Screening for antioxidants of microbial origin // экстрактов мицелия ксилотрофных базидиомицеAgnc Biol Chem-1982-46,№9-P 2369-2371 тов // Микол, и фитопатол-1995-29,№ 5-6 С 3518 Eriksson K E , Blanchette R A , Ander P Mi40 crobial and enzymatic degradation of wood and wood components Berlin, Heidelberg Spnngier-Verlag, 15 Клебанов Г И , Бабенкова И В , Тесел1990 кин Ю О , Комаров О С , Владимиров Ю А Оценка антиокислительной активности плазмы крови с ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044) 456 - 20 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71