Заміщені піролідин-2-карбоксаміди

Реферат: Запропоновані сполуки формули (72) Винахідник(и): Бартковіц Девід Джозеф (US), Чу Сінь-Цзе (CN), Ву Бін Тан (US), Чжао Чунлінь (CN), Фішлок Даніель (CH) (73) Власник(и): Ф. ХОФФМАНН-ЛЯ РОШ АГ, Grenzacherstrasse 124, CH-4070 Basel, Switzerland (CH) (74) Представник: Новiкова Лiдiя Аркадiївна, реєстр. №36 (56) Перелік документів, взятих до уваги експертизою: WO 2011/098398 A1, 18.08.2011 NUDELMAN A. ET AL.: "Prodrugs of butyric acid. Novel derivatives possessing increased aqueous solubility and potential for treating cancer and blood diseases", EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, EDITIONS SCIENTIFIQUE ELSEVIER, PARIS, FR, vol. 36, no. 1, 1 January 2001 (2001-01-01), pages 63-74 UA 113541 C2 (12) UA 113541 C2 Z H N O O H H R2 NH H O O R4 R3 R1 N X Y , (I) де X, Y, Z, R1, R2, R3 і R4 такі, як розкрито в даному описі, їх енантіомери і фармацевтично прийнятні солі і ефіри; а також способи одержання таких сполук, фармацевтичні композиції, що включають зазначені сполуки, та їх застосування в лікуванні раку. UA 113541 C2 5 10 15 20 25 30 Область техніки Білок p53 є супресором пухлин, що відіграє ключову роль в захисті проти розвитку раку. Він сприяє збереженню цілісності клітин і запобігає розмноженню перманентно пошкоджених клітинних клонів шляхом індукції затримки проліферації або апоптозу. На молекулярному рівні p53 є чинником транскрипції, який може активувати групу генів, що беруть участь в регуляції клітинного циклу і апоптозу. Білок p53 є могутнім інгібітором клітинного циклу, який жорстко регулюється за допомогою MDM2 на клітинному рівні. Білки MDM2 і p53 складають контур контролю із зворотним зв'язком. Білок MDM2 може зв'язувати p53 та інгібувати його здатність трансактивувати p53-регульовані гени. Крім того, MDM2 опосередковує убіквітин-залежну деградацію p53. Білок p53 може активувати експресію гена MDM2, підвищуючи таким чином клітинний рівень білка MDM2. Завдяки такому контуру контролю із зворотним зв'язком гарантується утримання концентрації обох білків MDM2 і p53 на низькому рівні в нормально проліферуючих клітинах. Білок MDM2 є також кофактором для E2F, який відіграє ключову роль регуляції клітинного циклу. При багатьох типах раку співвідношення між рівнем MDM2 і p53 (E2F) розрегульоване. Наприклад, було показано, що молекулярні дефекти, які часто зустрічаються, в локусі p16INK4/p19ARF впливають на деградацію білка MDM2. Інгібування взаємодії MDM2-p53 в пухлинних клітинах з p53 дикого типу приводитиме до накопичення p53, затримки клітинного циклу та/або апоптозу. Таким чином, антагоністи MDM2 можуть забезпечувати новий підхід в лікуванні раку як окремі агенти або в комбінації з широким спектром інших протипухлинних терапевтичних засобів. Здійснення такої стратегії була показана при застосуванні різних макромолекулярних інструментів для інгібування взаємодії MDM2-p53 (наприклад антитіла, антисмислові олігонуклеотиди, пептиди). MDM2 також зв'язує E2F через консервативну ділянку зв'язування, як і p53, і активує E2F-залежну транскрипцію цикліну A, що свідчить про можливість дії антагоністів MDM2 на клітини з мутантним p53. У WO2010/031713 і WO2011/098398 розкриті сполуки в якості інгібіторів взаємодії MDM2p53, на які в деяких випадках можна посилатися в даному описі як на “вихідні сполуки.” Суть винаходу Даний винахід відноситься до похідних піролідин-2-карбоксаміду формули (I), які діють як антагоністи взаємодій білка MDM2 і тому корисні як ефективні і селективні протиракові агенти. Запропоновані сполуки загальної формули Z O H H R2 X H N O O NH H R1 O R 4 R3 N Y (I) 35 , де X, Y, Z, R1, R2, R3 і R4 такі, як розкрито в даному описі, а також відповідні енантіомери і фармацевтично прийнятні солі та ефіри. Докладний опис винаходу В одному здійсненні запропоновано сполуку формули 1 UA 113541 C2 Z O H H R2 X H N O O NH H R1 O R 4 R3 N Y (I) 5 10 15 20 25 30 35 , де X вибирають з групи, що складається з H, F, Cl, Br, I, ціаногрупи, нітрогрупи, етинілу, циклопропілу, метилу, етилу, ізопропілу, вінілу та метоксигрупи, Y позначає від однієї до чотирьох груп(и), незалежно вибраних з групи, що складається з H, F, Cl, Br, I, CN, OH, нітрогрупи, нижчого алкілу, циклоалкілу, нижчої алкоксигрупи, нижчого алкенілу, циклоалкенілу, нижчого алкінілу, Z позначає нижчу алкоксигрупу, R1 вибирають з групи, що складається з нижчого алкілу, заміщеного нижчого алкілу, нижчого алкенілу, заміщеного нижчого алкенілу, арилу, заміщеного арилу, гетероарилу, заміщеного гетероарилу, гетероциклу, заміщеного гетероциклу, циклоалкілу, заміщеного циклоалкілу, циклоалкенілу і заміщеного циклоалкенілу, R2 позначає заміщений феніл, який вибраний з: , W позначає F, Cl або Br, V позначає H або F, R3 вибирають з групи, що складається з водню, нижчого алкілу або заміщеного нижчого алкілу, R4 вибирають з групи, що складається з: R5 вибирають з групи, що складається з нижчого алкілу, заміщеного нижчого алкілу, гетероциклу, заміщеного гетероциклу, циклоалкілу, заміщеного циклоалкілу, природних і синтетичних амінокислот, -(OCH2CH2)n-OH, -(OCH2CH2)n-OCH3, -(NCH2CH2)n-OH, -(NCH2CH2)nOCH3 та -(OCH2CH2)n-OP(O)(OR6)2, де n дорівнює від 3 до 60, переважно від 3 до 45, R6 позначає водень або бензил; або її фармацевтично прийнятна сіль або ефір. В іншому втіленні запропоновано сполуку формули I, де X вибирають з H, F або Cl, Y вибирають з H, F або Cl, R1 позначає нижчий алкіл або заміщений нижчий алкіл, R3 позначає водень або нижчий алкіл, R5 вибирають з групи, що складається з нижчого алкілу, заміщеного нижчого алкілу, природних і синтетичних амінокислот, -(OCH2CH2)n-OH, -(OCH2CH2)n-OCH3, -(NCH2CH2)n-OH, -(NCH2CH2)n-OCH3, -(OCH2CH2)n-OP(O)(OR6)2, де n дорівнює від 3 до 60, переважно від 3 до 45, та 2 UA 113541 C2 5 R6 позначає водень; або її фармацевтично прийнятна сіль. В іншому втіленні запропоновано сполуку формули (I), де X вибирають з H, F або Cl; Y вибирають з H, F або Cl; Z позначає C1-6-алкоксигрупу; R1 позначає C1-6-алкіл; R2 позначає W V * 10 15 20 25 30 35 40 45 50 , де W позначає F, Cl або Br; V позначає H або F; R3 позначає водень або C1-6-алкіл; R4 позначає -C(O)-R5; при цьому R5 вибирають з групи, що складається з, -(OCH2CH2)n-OH; -(OCH2CH2)n-OCH3; і -(OCH2CH2)n-OP(O)(OR6)2, де n дорівнює від 3 до 60, а R6 позначає водень; або її фармацевтично прийнятна сіль. В іншому окремому втіленні n дорівнює від 3 до 55, переважніше n дорівнює від 3 до 45. У даному втіленні особливо переважні сполуки, в яких R 5 позначає -( OCH2CH2)n-OCH3, а n дорівнює від 40 до 60. Ще в одному втіленні втіленні запропоновані сполуки, вибрані з наступних: 1-(етил(ізопропіл)карбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, ди-трет-бутоксифосфорилоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3метоксибензойної кислоти, 1-[біс-(2-метоксиетил)-карбамоїлокси]-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензойної кислоти, 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір 4метилпіперазин-1-карбонової кислоти, 1-ацетоксиетил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, рац-1-(ізобутирилокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, ацетоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-(циклогексилоксикарбонілокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, рац-1-(ізопропоксикарбонілокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, 1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етил-морфолін-4-карбоксилат, (R)-1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір морфолін-4карбонової кислоти, (S)-1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір морфолін-4карбонової кислоти, рац-1-трет-бутил-4-(1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етил)піперазин-1,4дикарбоксилат, 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір піперазин-1 3 UA 113541 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 карбонової кислоти дигідрохлорид, 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір рац-1,1діоксотіоморфолін-4-карбонової кислоти, 1-(2,2-диметил-[1,3]діоксолан-4-ілметилкарбамоїлокси)-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-(2,3-дигідроксипропілкарбамоїлокси)-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензойної кислоти, 1-(тетрагідро-2H-піран-4-ілкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, 1-{2-[2-(2-метоксиетокси)-етокси]-етоксикарбонілокси}-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-(2-{2-[2-(2-метоксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілокси)-етиловий ефір 4{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-[2-(2-{2-[2-(2-метоксиетокси)-етокси]-етокси}-етокси)-етоксикарбонілокси]-етиловий ефір 4{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 21-оксо-2,5,8,11,14,17,20,22-октаоксатетракозан-23-іл-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат, 1-мПЕГ-карбонілоксиетиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-(2-(бензилокси)-2-оксоетилкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, 2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етокси)карбоніламіно)оцтова кислота, (S)-2-[1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етоксикарбоніламіно]пентандіова кислота, 1-((S)-1-карбокси-етилкарбамоїлокси)-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензойної кислоти, 2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)-карбоніламіно)оцтова кислота, (S)-дибензил-2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)карбоніламіно)пентандіоат, (S)-2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)-метокси)карбоніламіно)пентандіова кислота, 15-метил-12-оксо-2,5,8,11,13-пентаоксагексадекан-14-іл-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат, 3-оксо-2,4,7,10,13-пентаоксатетрадецил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, 3-оксо-2,4,7,10,13,16,19-гептаоксаікозил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, 1-мПЕГ-карбонілоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-мПЕГ-карбонілоксиетиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 4 UA 113541 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 1-мПЕГ-карбонілоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 3-оксо-2,4,7,10,13-пентаоксатетрадецил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, 27-оксо-2,5,8,11,14,17,20,23,26,28-декаоксатриаконтан-29-іл-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат, 24-оксо-2,5,8,11,14,17,20,23,25-нонаоксагептакозан-26-іл-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат, 1-мПЕГ-карбонілоксиетил амід 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-мПЕГ-карбонілоксиетил амід 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-мПЕГ-карбонілоксиетил амід 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-мПЕГ-карбонілоксиметил амід 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-мПЕГ-карбонілоксиметил амід 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-мПЕГ-карбонілоксиметил амід 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, (S)-2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)карбоніламіно)пропанова кислота, 2-{2-[2-(2-фосфонооксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілоксиметиловий ефір дибензил-4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 2-{2-[2-(2-фосфонооксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілоксиметиловий ефір 4{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, фосфонооксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти; сполука з трифтороцтовою кислотою, 1-(((3aR,5R,6S,6aR)-5-((R)-2,2-диметил-1,3-діоксолан-4-іл)-2,2-диметилтетрагідрофуро[3,2d][1,3]діоксол-6-ілокси)карбонілокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат, 1-[(2R,3R,4R,5S)-2-((R)-1,2-дигідроксиетил)-4,5-дигідрокситетрагідрофуран-3ілоксикарбонілокси]-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти, 1-(2-{2-[2-(2-дибензилоксифосфорилоксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілокси)етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти та 1-(2-{2-[2-(2-фосфонооксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілокси)-етиловий ефір 4{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку: 2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етокси)карбоніламіно)оцтова кислота. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5 5 UA 113541 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)-карбоніламіно)оцтова кислота. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 3-оксо-2,4,7,10,13,16,19-гептаоксаікозил 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 1-мПЕГ-карбонілоксиетиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти (мПЕГ, середня M.W. ~2000). Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 1-мПЕГ-карбонілоксиетиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти (мПЕГ, середня M.W. ~2200). Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 1-мПЕГ-карбонілоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти (мПЕГ, середня M.W. ~2000). Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 3-оксо-2,4,7,10,13-пентаоксатетрадецил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 27-оксо-2,5,8,11,14,17,20,23,26,28-декаоксатриаконтан-29-іл-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 1-[(2R,3R,4R,5S)-2-((R)-1,2-дигідроксиетил)-4,5-дигідрокситетрагідрофуран-3ілоксикарбонілокси]-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 1-(2-{2-[2-(2-дибензилоксифосфорилоксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілокси)етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти. Ще в одному втіленні запропоновано сполуку 1-(2-{2-[2-(2-фосфонооксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілокси)-етиловий ефір 4{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти. У даному описі, де це зазначено, різні групи можуть містити 1-5 або, переважно, 1-3 замісники, незалежно вибрані з групи, що складається з нижчого алкілу, нижчого алкенілу, нижчого алкінілу, діоксо- нижчого алкілену (утворюючого, наприклад, бензодіоксильну групу), галогену, гідроксигрупи, CN, CF3, NH2, N(H, нижчий алкіл), N(нижчий алкіл)2, амінокарбонілу, карбоксигрупи, NO2, нижчої алкоксигрупи, нижчої тіоалкоксигрупи, нижчого алкілсульфонілу, аміносульфонілу, нижчого алкілкарбонілу, нижчої алкілкарбонілоксигрупи, нижчого алкоксикарбонілу, нижчої алкілкарбоніл-NH-групы, нижчого фторалкілу, нижчої фторалкоксигрупи, нижчої алкокси-карбоніл-нижчої алкоксигрупи, карбокси-нижчої алкоксигрупи, карбамоїл-нижчої алкоксигрупи, гідрокси-нижчої алкоксигрупи, нижчої NH 2алкоксигрупи, N(H, нижчий алкіл)-нижчої алкоксигрупи, N(нижчий алкіл)2-нижчої алкоксигрупи, нижчого алкіл-1-оксираніл-нижчого алкокси-нижчого алкілу, 2-оксопіролідин-1-ілу (1,1-діоксо)-2ізотіазолідину, 3-нижчого алкілсульфінілу, заміщеного або незаміщеного гетероциклічного кільця, заміщеного або незаміщеного арильного кільця, заміщеного або незаміщеного гетероарильного кільця, трифтор-нижчого алкілсульфоніламіноарилу, нижчого алкілсульфоніламінокарбонілу, нижчого алкілсульфоніламінокарбоніларилу, гідроксикарбамоїлфенілу, бензилокси-нижчої алкоксигрупи, моно- або ди-нижчого алкілзаміщеного аміносульфонілу і нижчого алкілу, можливо заміщеного галогеном, гідроксигрупою, NH2, N(H, нижчий алкіл) або N(нижчий алкіл) 2. Переважними замісниками для циклоалкільного, циклоалкенільного, арильного, гетероарильного і гетероциклічного кілець є галоген, нижча алкоксигрупа, нижчий алкіл, гідроксикарбоніл, карбоксигрупа, карбокси-нижча алкоксигрупа, оксогрупа і CN. Переважними замісниками для алкілу є алкоксигрупа і N(нижчий алкіл) 2. Термін “мПЕГ” в даному описі позначає метоксиполіетиленгліколь, що є в продажі (наприклад в Sigma-Aldrich або ID Biochem (Корея)). Розподіл молекулярної маси мПЕГ може 6 UA 113541 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 варіюватися залежно від виробника та/або партії. В одному здійсненні даного винаходу мПЕГ має середню молекулярну масу (M.W.) приблизно від 1500 Да до 3000 Да. В іншому втіленні даного винаходу мПЕГ має середню M.W. приблизно від 2000 Да до 2200 Да. Середню M.W. визначають за допомогою MALDY-TOF мас-спектрометрії. Термін “алкіл” позначає насичені вуглеводневі групи з лінійним або розгалуженим ланцюгом, що містять від 1 до приблизно 20 атомів вуглецю, включаючи групи, що містять від 1 до приблизно 7 атомів вуглецю. У конкретних втіленнях алкільні замісники можуть бути нижчими алкільними замісниками. Термін “нижчий алкіл” позначає алкільні групи, що містять від 1 до 6 атомів вуглецю, і в конкретних втіленнях від 1 до 4 атомів вуглецю. Приклади алкільних груп включають, без обмеження, метил, етил, н-пропіл, ізопропіл, н-бутил, втор-бутил,трет-бутил, нпентил і втор-пентил. У даному описі термін “циклоалкіл” позначає будь-яку стабільну моноциклічну або поліциклічну систему, що складається тільки з атомів вуглецю, кожне з кілець якої є насиченим, а термін “циклоалкеніл” позначає будь-яку стабільну моноциклічну або поліциклічну систему, що складається тільки з атомів вуглецю, в якій щонайменше одне кільце є частково ненасиченим. Приклади циклоалкілів включають, без обмеження, циклопропіл, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, адамантил, циклооктил, біциклоалкіли, включаючи біциклооктани, такі як [2.2.2]біциклооктан або [3.3.0]біциклооктан, біциклононани, такі як [4.3.0]біциклононан, і біциклодекани, такі як [4.4.0]біциклодекан (декалін), або спіросполуки. Приклади циклоалкенілів включають, без обмеження, циклопентеніл або циклогексеніл. Термін “алкеніл” в даному описі позначає ненасичену аліфатичну вуглеводневу групу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, що містить один подвійний зв'язок і що включає від 2 до 6, переважно від 2 до 4 атомів вуглецю. Прикладами таких “алкенільних груп” є вініл, етеніл, аліл, ізопропеніл, 1-пропеніл, 2-метил-1-пропеніл, 1-бутеніл, 2-бутеніл, 3-бутеніл, 2-етил-1бутеніл, 3-метил-2-бутеніл, 1-пентеніл, 2-пентеніл, 3-пентеніл, 4-пентеніл, 4-метил-3-пентеніл, 1-гексеніл, 2-гексеніл, 3-гексеніл, 4-гексеніл і 5-гексеніл. Термін “алкініл” в даному описі позначає ненасичену аліфатичну вуглеводневу групу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, що містить один потрійний зв'язок і що включає від 2 до 6, переважно від 2 до 4 атомів вуглецю. Прикладами таких “алкінільних груп” є етиніл, 1пропініл, 2-пропініл, 1-бутиніл, 2-бутиніл, 3-бутиніл, 1-пентиніл, 2-пентиніл, 3-пентиніл, 4пентиніл, 1-гексиніл, 2-гексиніл, 3-гексиніл, 4-гексиніл і 5-гексиніл. Термін “галоген”, використовуваний у визначеннях, позначає фтор, хлор, бром або йод, переважно фтор і хлор. Термін “арил” позначає моновалентний, моноциклічний або біциклічний, ароматичний карбоциклічний вуглеводневий радикал, переважно 6-10-членну ароматичну кільцеву систему. Переважні арильні групи включають, без обмеження, феніл, нафтил, толіл і ксиліл. Якщо арильна група є біциклічною, переважна група є 1,3-діоксо-2,3-дигідро-1H-ізоіндол-5-ільною групою. Термін “гетероарил" позначає ароматичну гетероциклічну кільцеву систему, що містить аж до двох кілець. Переважні гетероарильні групи включають, без обмеження, тієніл, фурил, індоліл, піроліл, піридиніл, піразиніл, оксазоліл, тіаксоліл, хінолініл, піримидиніл, імідазол, заміщений або незаміщений триазоліл і заміщений або незаміщений тетразоліл. У випадку якщо арил або гетероарил є біциклічними, слід розуміти, що одне кільце може бути арильним, а інше гетероарильним, при цьому обидва кільця можуть містити або не містити замісники. “Гетероцикл” або “гетероциклічне кільце” позначає заміщену або незаміщену, моно- або біциклічну, неароматичну вуглеводневу групу, що включає від 5 до 8 членів, в якій від 1 до 3 атомів вуглецю заміщено гетероатомом, вибраним з атома азоту, кисню або сірки. Приклади включають піролідин-2-іл; піролідин-3-іл; піперидиніл; морфолін-4-іл і т. п., які у свою чергу можуть бути заміщені. Термін “гетероатом” позначає атом, вибраний з N, O і S. Термін “алкоксигрупа, алкоксил або нижча алкоксигрупа” позначає будь-яку з розкритих вище нижчих алкільних груп, приєднану до атому кисню. Типові приклади нижчих алкоксигруп включають метокси-, етокси-, ізопропокси- або пропокси-, бутилоксигрупу і т. п. Крім того, термін “алкокси” охоплює також декілька бічних алкокси-ланцюгів, наприклад етоксиетокси-, метоксиетокси-, метоксиетоксиетоксигрупи і т. п., а також заміщені бічні алкокси-ланцюги, наприклад, диметиламіноетокси-, діетиламіноетокси-, диметокси-фосфорилметоксигрупа і т. п. Термін “фармацевтично прийнятний”, наприклад фармацевтично прийнятний носій, ексципієнт і т. п. позначає фармакологічно прийнятний і по суті не токсичний для суб'єкта, якому вводять конкретну сполуку. Термін “фармацевтично прийнятна сіль” позначає звичайні кислотно-адитивні солі або 7 UA 113541 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 основно-адитивні солі, які зберігають біологічну ефективність і властивості сполук за даним винаходом, і одержані з нетоксичних органічних або неорганічних кислот або ж органічних або неорганічних основ. Приклади кислотно-адитивних солей включають ті, що одержані з неорганічних кислот, таких як хлороводнева кислота, бромоводнева кислота, йодоводнева кислота, сірчана кислота, сульфамінова кислота, фосфорна кислота і азотна кислота, а також ті, що одержані з органічних кислот, таких як п-толуолсульфонова кислота, саліцилова кислота, метансульфонова кислота, щавлева кислота, янтарна кислота, лимонна кислота, яблучна кислота, молочна кислота, фумарова кислота, трифтороцтова кислота і т. п. Приклади основноадитивних солей включають ті, що одержані з аміаку, калію, натрію і четвертинних амонієвих гідроксидів, таких як, наприклад, гідроксид тетраметиламонію. Спосіб хімічного перетворення фармацевтичної сполуки (тобто, лікарської речовини) у сіль добре відомий хімікамфармацевтам для досягнення покращеної фізичної і хімічної стабільності, гігроскопічності, текучості і розчинності сполуки. Див., наприклад: Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Ed. 1995), стор. 196 і 1456-1457. Сполуки формули (I), а також їх солі, що містять щонайменше один асиметричний атом вуглецю, можуть існувати у вигляді рацемічних сумішей або різних стереоізомерів. Різні ізомери можна виділяти відомими способами виділення, наприклад, за допомогою хроматографії. Сполуки, розкриті в даному описі і охоплювані наведеною вище формулою (I), можуть проявляти таутомерію або структурну ізомерію. Мається на увазі, що даний винахід охоплює всі таутомерні або структурно ізомерні форми цих сполук, а також суміші подібних форм, і не обмежено будь-якою однією таутомерною або структурно ізомерною формою, зображеною в наведених вище формулах. Сполуки за даним винаходом корисні в лікуванні або контролі розладів клітинної проліферації, зокрема, онкологічних розладів. Зазначені сполуки і композиції, що містять зазначені сполуки, можуть бути, зокрема, корисні в лікуванні або контролі твердих пухлин, таких як, наприклад, пухлини або саркома молочної залози, прямої кишки, легенів і простати. Запропоновані сполуки можуть бути також корисні в лікуванні деяких нетвердих пухлин, таких як лейкоз і лімфоми. Таким чином, в іншому втіленні даного винаходу запропонована фармацевтична композиція, що включає сполуки формули (I), спільно з фармацевтично прийнятними ексципієнтами. Ще в одному втіленні даного винаходу запропоновані сполуки формули (I) для застосування як лікарського засобу. Ще в одному втіленні даного винаходу запропоновані сполуки формули (I) для застосування як лікарських засобів для лікування раку, зокрема твердих пухлин, в окремому випадку пухлин або саркоми молочної залози, прямої кишки, легенів і простати. Ще в одному втіленні даного винаходу запропоновані сполуки формули (I) для застосування як лікарських засобів для лікування деяких нетвердих пухлин, таких як лейкоз і лімфоми, зокрема гострий мієлоїдний лейкоз (AML). Ще в одному втіленні даного винаходу запропоновано застосування сполук формули (I) у виготовленні лікарських засобів для лікування раку, в окремому випадку твердих пухлин, таких як пухлини або саркоми молочної залози, прямої кишки, легенів і простати; або, в іншому випадку, також для лікування деяких нетвердих пухлин, таких як лейкоз і лімфоми, зокрема для лікування гострого мієлоїдного лейкозу (AML). Термін “терапевтично ефективна кількість” сполуки за даним винаходом позначає таку кількість сполуки, що ефективна для запобігання, часткового зняття або поліпшення симптомів захворювання або подовження терміну життя суб'єкта, якому проводять лікування. Фахівець в даній області техніки здатний визначити терапевтично ефективну кількість. Терапевтично ефективна кількість або дозування сполуки заданим винаходом може варіюватися в широких межах, та її можна визначати способом, відомим в даній області техніки. Таке дозування слід підбирати відповідно до індивідуальних вимог у кожному конкретному випадку, включаючи конкретну сполуку(и), що вводиться, спосіб введення, стан, що піддається лікуванню, а також пацієнта, якому проводять лікування. У загальному випадку, для перорального або парентерального введення дорослій людині масою приблизно 70 кг підходить добова доза приблизно від 10 мг до приблизно 10 000 мг, переважно приблизно від 200 мг до приблизно 1 000 мг, але верхню межу можна перевищувати, якщо до цього є показання. Добову дозу можна вводити однією дозою або розділеними дозами, або для парентерального введення; її можна вводити у вигляді безперервної інфузії. Композиції за даним винаходом включають композиції, відповідні для перорального, інтраназального, місцевого (включаючи трансбукальне і сублінгвальне), ректальне, вагінальне та/або парентеральне введення. Такі композиції в цілях зручності можна представляти у вигляді 8 UA 113541 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 лікарських форм із стандартним дозуванням та їх можна виготовляти будь-яким способом, добре відомим у фармацевтичній області. Кількість активного інгредієнта, яку можна комбінувати з матеріалом носія для одержання лікарської форми з одноразовим дозуванням, варіюватиметься залежно від реципієнта, якому проводитимуть лікування, а також від конкретного способу введення. Кількість активного інгредієнта, яку можна комбінувати з матеріалом носія для одержання лікарської форми з одноразовим дозуванням, в загальному випадку є кількістю сполуки формули I, яка надає терапевтичний ефект. В цілому, виходячи із ста відсотків, така кількість варіюватиметься приблизно від 1% до приблизно 99% активного інгредієнта, переважно приблизно від 5% до приблизно 70%, найпереважніше приблизно від 10% до приблизно 30%. Способи виготовлення таких препаратів або композицій включають стадію приведення в контакт сполуки за даним винаходом з носієм і, можливо, одним або більше допоміжними інгредієнтами. У загальному випадку композиції виготовляють шляхом однорідного і ретельного змішування сполуки за даним винаходом з рідкими носіями, або тонкоподрібненими твердими носіями, або з ними обома, а потім, при необхідності, формування одержаного продукту. В іншому втіленні даного винаходу запропоновані фармацевтичні композиції або лікарські засоби, що містять сполуки за даним винаходом і терапевтично інертний носій, розчинник або ексципієнт, а також способи застосування сполуки за даним винаходом для виготовлення таких композицій і лікарських засобів. У одному прикладі сполуки формули I можна включати в лікарську форму шляхом змішування при кімнатній температурі, при відповідному значенні pH і при бажаному ступені чистоти з фізіологічно прийнятними носіями, тобто носіями, які не токсичні для реципієнтів при дозуваннях і концентраціях, вживаних в галеновій лікарській формі. Значення pH композиції залежить в основному від конкретного застосування і концентрації сполуки, але у будь-якому випадку знаходиться переважно в інтервалі приблизно від 3 до 8. В одному прикладі сполуки формули I включають в лікарську форму в ацетатному буфері при pH 5. В іншому втіленні сполуки формули I є стерильними. Сполуку можна зберігати, наприклад, у вигляді твердої або аморфної композиції, у вигляді ліофілізованої композиції або у вигляді водного розчину. У розчині сполуки за даним винаходом можуть утворювати міцелярні структури з розміром частинок в інтервалі від 10 до 100 нм (нанометрів). Виготовлення лікарських форм з композиціями, їх дозування і введення здійснюють відповідно до належної медичної практики. Фактори, які слід враховувати в даному контексті, включають конкретний розлад, що підлягає лікуванню, конкретного ссавця, якому проводять лікування, клінічний стан конкретного пацієнта, причину розладу, сайт доставки діючої речовини, спосіб введення, схему введення та інші фактори, відомі практикуючим лікарям. “Ефективна клькість” сполуки, яку необхідно ввести, визначають з урахуванням приведених вище міркувань, і вона є мінімальною кількістю, яка необхідна для інгібування взаємодії MDM2 з p53. Наприклад, така кількість може бути нижче кількості, що токсична для нормальних клітин або в цілому для організму ссавця. Сполуки за даним винаходом можна вводити будь-яким зручним способом, включаючи оральне, місцеве (в т.ч. трансбукальне і сублінгвальне), ректальне, вагінальне, трансдермальне, парентеральне, підшкірне, внутрішньоочеревинне, внутрішньолегеневе, внутрішньошкірне, інтратекальне, епідуральне та інтраназальне, а також, в цілях місцевого лікування, внутрішньоосередкове введення. Парентеральні інфузії включають внутрішньом'язове, внутрішньовенне, внутрішньоартеріальне, внутрішньоочеревинне або підшкірне введення. Сполуки за даним винаходом особливо корисні, якщо їх вводять парентерально або шляхом інфузій, завдяки їх чудовій розчинності і довшому періоду напіввиведення з плазми крові, в порівнянні з не-ефірними/не-амідними формами вихідних сполук. Крім того, сполуки за даним винаходом демонструють чудову постійність фармакокінетичного профілю (PK), в порівнянні з вихідними сполуками. Сполуки за даним винаходом можна вводити в будь-якій зручній формі для введення, наприклад, у вигляді пігулок, порошків, капсул, розчинів, дисперсій, суспензій, сиропів, спреїв, супозиторіїв, гелів, емульсій, пластирів і т. п. Такі композиції можуть містити компоненти, які зазвичай застосовуються у фармацевтичних препаратах, наприклад, розчинники, носії, модифікатори pH, підсолоджувачі, об'ємоутворюючі агенти і додаткові діючі речовини. Типову лікарську форму виготовляють шляхом змішування сполуки за даним винаходом з носієм або ексципієнтом. Відповідні носії і ексципієнти добре відомі фахівцям в даній області техніки і детально описані в літературі (наприклад: Ansel, Howard C., et al., Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004; Gennaro, Alfonso R., et al. Remington: The Science and Pрацtice of Pharmacy. 9 UA 113541 C2 5 10 15 20 Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceurical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005). Такі лікарські форми можуть також включати один або більше буферних агентів, стабілізаторів, поверхнево-активних речовин, що зволожують агенти, лубрикантів, емульгаторів, що суспендують агенти, консервантів, антиоксидантів, криючих агентів, ковзаючих речовин, допоміжних речовин для виробничого процесу, фарбників, підсолоджувачів, ароматів, ароматизаторів, розчинників та інших відомих добавок для забезпечення належної форми випуску ліків (тобто сполуки за даним винаходом або її фармацевтичній композиції) або допоміжного засобу при виготовленні фармацевтичного продукту (тобто лікарського засобу). Термін “ефективна кількість" позначає таку кількість, якої виявляється достатньо для запобігання, часткового зняття або поліпшення симптомів захворювання або подовження терміну життя суб'єкта, якому проводять лікування. Термін “IC50” позначає концентрацію конкретної сполуки, яка потрібна для інгібування на 50% специфічній вимірюваній активності. Величину IC50 можна вимірювати, крім іншого, так, як описано далі. Способи синтезу Загальний спосіб одержання сполук формули I представлений на Схемі 1. Стисло, даний спосіб включає алкілування бензойної кислоти (II) сполукою хлору (III) у присутності основи, такої як карбонат цезію. Сполуки формули II відомі в даній області техніки (див., наприклад, US 2010/0152190-A1). Хлоровмісну сполуку (III) зазвичай одержують реакцією 1хлоралкілхлорформіату із спиртом або аміном у присутності основи, такої як піридин. Схема 1 Z Z O H H R2 X H N NH H R1 N O OH H H R3 O + Cl O (III) X Y 30 35 O O NH H R1 O R 4 R3 N Y (I) (II) 25 R2 R4 H N Сполуки за даним винаходом можна одержати способами, відомими в даній області техніки. Відповідні способи для синтезу даних сполук наведені в прикладах. Таким чином, в іншому втіленні запропоновано спосіб одержання сполук формули (I), як показано на схемі 1. Нижче наступні приклади і посилання наведені з метою кращого розуміння даного винаходу. При цьому дійсний об'єм даного винаходу представлений у формулі винаходу, що додається. У Прикладах вся використовувана абревіатура вживається в загальноприйнятому значенні, відомому фахівцеві в області хімії. Якщо однозначно не зазначене інше, середню молекулярну масу (M.W.) визначають за допомогою MALDI-TOF мас-спектрометрії і виражають в Дальтонах (Да). Приклади Приклад 1 1-(Етил(ізопропіл)карбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат 10 UA 113541 C2 O O O O O N N Cl F O N N F Cl 5 10 15 20 25 30 M.W. 773,71 C39H44Cl2F2N4O6 До охолодженого розчину 2-пропанолу (1,57 г; 2 мл; 26,1 ммоль) і N,N-діізопропілетиламіну (6,75 г; 9,13 мл; 52,3 ммоль) в метиленхлориді (15 мл) повільно додавали 1хлоретилкарбонохлоридат (Aldrich; 4,11 г; 28,7 ммоль) при 0°C. Після закінчення внесення реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Цю суміш концентрували насухо і неочищену речовину, що містила приблизно 50% 1-хлоретилового ефіру етилізопропілкарбамінової кислоти, використовували на наступній стадії без додаткового очищення. До розчину хіральної 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислоти (одержаній, як описано в US20100152190A1, 150 мг; 0,243 ммоль) в диметилформаміді (6 мл) додавали карбонат цезію (243 мг; 0,746 ммоль). Перемішували протягом декількох хвилин, після чого додавали розчин вищезгаданого свіжоприготованого 1-хлоретилового ефіру етилізопропілкарбамінової кислоти (190 мг; 0,491 ммоль) в сухому диметилформаміді (1 мл) і реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Цю реакційну суміш розбавляли етилацетатом, промивали водою і сольовим розчином і концентрували насухо. Неочищену речовину очищали хроматографією (гексан/етилацетат, від 90/10 до 10/90) з одержанням 1-(етил(ізопропіл)-карбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату у + вигляді білої твердої речовини (102 мг; вихід 54%). LCMS (ES ) m/z розрахований для + C39H45Cl2F2N4O6 [(M+H) ]: 773, фактично: 773. Приклад 2 Ди-трет-бутокси-фосфорилоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3метоксибензойної кислоти M.W. 838,72 C40H48Cl2F2N3O8P До розчину ди-трет-бутилфосфату калію (2,45 г; 9,51 ммоль), бікарбонату натрію (3,19 г; 38,0 ммоль) і гідросульфату тетрабутиламонію (340,2 мг; 0,972 ммоль) у воді (80 мл), додавали метиленхлорид (50 мл). Цю суміш охолоджували до 0°C та інтенсивно перемішували в атмосфері аргону протягом 10 хв. Додавали повільно хлорметилхлорсульфат (1,92 г; 1,2 мл; 11,6 ммоль) в метиленхлориді (30 мл) і реакційній суміші перемішували при кімнатній 11 UA 113541 C2 5 10 15 температурі протягом ночі. Органічний шар відокремлювали, промивали сольовим розчином і висушували над безводним сульфатом натрію і концентрували з одержанням ди-третбутилхлорметилфосфату у вигляді безбарвного масла (1,46 г; вихід 59%). До розчину хіральної 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислоти (одержаної, як описано в US20100152190A1; 200,0 мг; 0,324 ммоль) в диметилформаміді (8 мл) додавали карбонат цезію (529 мг; 1,62 ммоль). Цю суміш перемішували протягом ~20 хв, після чого додавали ди-трет-бутилхлорметилфосфат (TCI, 236 мг; 0,9912 ммоль) в диметилформаміді (1 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 3 г, після чого її ділили між етилацетатом і водою, промивали водою, висушували над безводним сульфатом натрію і концентрували. Неочищений продукт очищали флеш-хроматографією (гексан/етилацетат, від 85/15 до 5/95) з одержанням хірального ди-трет-бутоксифосфорилоксиметилового ефіру 4{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини (192 + + мг; вихід 70%). LCMS (ES ) m/z розрахований для C40H49Cl2F2N3O8P [(M+H) ]: 838, фактично: 838. Приклад 3 1-[Біс-(2-метоксиетил)-карбамоїлокси]-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензойної кислоти O O O O O N O N Cl O F O N N F 20 25 30 35 40 Cl M.W. 819,74 C40H46Cl2F2N4O8 До охолодженого розчину біс(2-метоксиетил)аміну (1,94 г; 14,5 ммоль; Aldrich) і піридину (1,26 г; 1,29 мл; 15,9 ммоль) в метиленхлориді (18 мл) при -78°C, повільно додавали 1хлоретилкарбонохлоридат (1,98 г; 1,5 мл; 13.8 ммоль; Aldrich) протягом ~15 хв. Реакційну суміш перемішували при -78°C протягом 3 г, з одержанням білого осаду. Одержану холодну реакційну суміш фільтрували для видалення твердої речовини і фільтрат концентрували насухо, з одержанням неочищеного 1-хлоретил-біс(2-метоксиетил)карбамату, який використовували на наступній стадії без додаткового очищення. До розчину хіральної 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислоти (US20100152190A1, 200 мг; 0,324 ммоль) в диметилформаміді (8 мл) додавали карбонат цезію (846 мг; 2,6 ммоль). Перемішували протягом 10 хв, після чого додавали розчин вищезгаданого свіжоприготованого 1-хлоретил-біс(2-метоксиетил)карбамату (510 мг; 2,13 ммоль) в диметилформаміді (3 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Цю реакційну суміш розводили в етилацетаті, промивали водою, сольовим розчином і концентрували насухо. Неочищену речовину очищали флеш-хроматографією (гексан/етилацетат, від 90/10 до 10/90) з одержанням 1-[біс-(2-метоксиетил)-карбамоїлокси]-етилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]аміно}-3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини (168 мг; вихід 63%). LCMS + + (ES ) m/z розрахований для C40H47Cl2F2N4O8 [(M+H) ]: 819, фактично: 819. Приклад 4 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-Хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір 4метилпиперазин-1-карбонової кислоти 12 UA 113541 C2 O O O O O N N N Cl F O N N F Cl 5 10 15 M.W. 786,71 C39H43Cl2F2N5O6 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретил карбонохлоридат вводили в реакцію з 1-метилпіперазином і піридином в метиленхлориді при -78°C протягом 3 г з одержанням гідрохлоридної солі 1-хлоретил-4-метилпіперазин-1-карбоксилату, яку вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флешхроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензоїлокси)-етилового ефіру 4-метилпіперазин-1-карбонової кислоти у вигляді білої + + твердої речовини. LCMS (ES ) m/z розрахований для C39H44Cl2F2N5O6 [(M+H) ]: 786,, фактично: 786. Приклад 5 Ацетоксиетил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат Cl H F O O NH Cl 20 25 30 35 F O O N O O N M.W. 702,59 C35H35Cl2F2N3O6 Суміш паральдегіду (JT-Baker, 1,39 г; 1,4 мл; 10,5 ммоль) та йодиду натрію (5,01 г; 33,4 ммоль) в метиленхлориді (75 мл) обробляли ацетилхлоридом (2,21 г; 2 мл; 27,8 ммоль) в метиленхлориді (25 мл) протягом 20 хв і перемішували при кімнатній температурі в темноті протягом 18 г. Реакційну суміш фільтрували і концентрували з одержанням 1-йодетилацетату у вигляді коричневого масла. До суміші вищезгаданого 1-йодетилацетату (311 мг; 1,457 ммоль) і хіральної 4((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислоти (US20100152190A1; 201,7 мг; 0,327 ммоль) в диметилформаміді (6 мл) додавали карбонат цезію (659 мг; 2,00 ммоль) і цю суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 16 г. Реакційну суміш розводили в етилацетаті, промивали водою і потім сольовим розчином. Органічний шар висушували над сульфатом натрію і концентрували насухо. Неочищену речовину очищали флешхроматографією (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80) з одержанням 1-ацетоксиетил-4((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2+ карбоксамідо)-3-метоксибензоату (149,4 мг; вихід 65%). MS (ES ) m/z розрахований для + C35H36Cl2F2N3O6: [(M+H) ]: 702, фактично: 702,4 Приклад 6 Рац-1-(ізобутирилокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат 13 UA 113541 C2 Cl H F O O F 5 10 15 20 25 30 35 O O NH Cl O O N N M.W. 730,64 C37H39Cl2F2N3O6 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 5, паральдегід (JT-Baker, 1,37 г; 10,4 ммоль) вводили в реакцію з ізобутирилхлоридом (Aldrich, 2,93 г; 27,5 ммоль) та йодидом натрію (4,9472 г; 33,0 ммоль) в метиленхлориді (100 мл) при кімнатній температурі протягом 16 г з одержанням 1-йодетилізобутирату. Частину цієї речовини (400,2 мг; 1,65 ммоль) потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою (200,8 мг; 0,332 ммоль) і карбонатом цезію (653,2 мг; 2,00 ммоль) в диметилформаміді (6 мл) при кімнатній температурі протягом 3 г з одержанням 1-(ізобутирилокси)етилу-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату у + вигляді брудно-білої твердої речовини (198,8 мг; вихід 83%). MS (ES ) m/z розрахований для + C37H40Cl2F2N3O6: [(M+H) ]: 730, фактично: 730. Приклад 7 Ацетоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти M.W. 688,56 C34H33Cl2F2N3O6 Суміш 1,3,5-триоксану (Aldrich; 970,8 мг; 10,8 ммоль) та йодиду натрію (5,12 г; 34,2 ммоль) в метиленхлориді (100 мл) обробляли ацетилхлоридом (2,26 г; 2,1 мл; 28,5 ммоль) і перемішували при кімнатній температурі в темноті протягом 16 г. Реакційну суміш фільтрували і концентрували з одержанням неочищеного йодметилацетату у вигляді коричневого масла. Частину одержаного йодметилацетату (661 мг; 3,31 ммоль) додавали до суспензії хіральної 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин2-карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислоти (200,1 мг; 0,325 ммоль) і карбонату цезію (964,4 мг; 2,93 ммоль) в диметилформаміді (8 мл) і реакційну суміш перемішували в темноті протягом ночі. Потім її розводили в етилацетаті, промивали водою і сольовим розчином, висушували над безводним сульфатом натрію і концентрували. Неочищений продукт очищали флешхроматографією (гексан/етилацетат, від 80/20 до 10/90) з одержанням хірального ацетоксиметилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти у вигляді + білої твердої речовини (42,8 мг; вихід 19%). MS (ES ) m/z розрахований для C34H34Cl2F2N3O6: + [(M+H) ]: 688, фактично: 688. Приклад 8 1-(Циклогексилоксикарбонілокси)етилу-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат Cl H F O O O NH Cl F O N O O O N 14 UA 113541 C2 5 10 15 M.W. 786,71 C40H43Cl2F2N3O7 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретил хлорформіат (Oakwood Products; 1,99 г; 1,5 мл; 13,9 ммоль) вводили в реакцію з циклогексанолом (Alfa Aesar; 1,33 г; 1,4 мл; 13,3 ммоль) і піридином (1,27 г; 1,3 мл; 16,1 ммоль) в метиленхлориді (11 мл) при -78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлоретилциклогексилкарбонату. Частину 1хлоретилциклогексилкарбонату (253 мг; 1,22 ммоль) потім вводили в реакцію з хіральною 4((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою (150,3 мг; 0,244 ммоль) у присутності карбонату цезію (487,4 мг; 1,5 ммоль) в диметилформаміді (5 мл) протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 1(циклогексилоксикарбонілокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату (135,4 мг; вихід + + 70%). MS (ES ) m/z розрахований для C40H44Cl2F2N3O7 : [(M+H) ]: 786, фактично: 786. Приклад 9 Рац-1-(ізопропоксикарбонілокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат Cl F O O H N O NH F Cl 20 25 30 F O O H N NH Cl 45 O N O 40 O O M.W. 746,64 C37H39Cl2F2N3O7 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат (Oakwood Products, 1,99 г; 1,5 мл; 13,9 ммоль) вводили в реакцію з 2-пропанолом (785 мг; 1 мл; 13,0 ммоль) і піридином (1,27 г; 1,3 мл; 16,1 ммоль) в метиленхлориді (11 мл) при кімнатній температурі протягом 4 г з одержанням 1-хлоретилізопропілкарбонату. Частину 1хлоретилізопропілкарбонату (221,6 мг; 1,33 ммоль) потім вводили в реакцію з хіральною 4((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою (150,3 мг; 244 мкмоль) у присутності карбонату цезію (478 мг; 1,47 ммоль) в диметилформаміді (5 мл) протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 1(ізопропоксикарбонілокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату (134,4 мг; вихід + + 73%). MS (ES ) m/z розрахований для C37H40Cl2F2N3O7: [(M+H) ]: 746, фактично: 746. Приклад 10 1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-Хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етилморфолін-4-карбоксилат Cl 35 O F O O O N O N M.W. 773,67 C38H40Cl2F2N4O7 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат (2,64 г; 2 мл; 18,5 ммоль) вводили в реакцію з морфоліном (1,69 г; 1,7 мл; 19,4 ммоль) і піридином (1,68 г; 1,72 мл; 21,2 ммоль) в метиленхлориді (25 мл) при кімнатній температурі протягом ночі з одержанням неочищеного продукту, 1-хлоретилморфолін-4-карбоксилату. Частину 1-хлоретилморфолін-4карбоксилату (670,1 мг; 3,46 ммоль) потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензойною кислотою (200,5 мг; 0,325 ммоль) у присутності карбонату цезію (1,094 г; 3,36 ммоль) в диметилформаміді (7 мл) протягом ночі з одержанням 1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоїлокси)етилморфолін-4-карбоксилату у вигляді брудно-білої твердої речовини 15 UA 113541 C2 + 5 O 10 Cl O O O H N O NH O F 15 20 N O N F O O H N NH Cl 35 O O O 30 N M.W. 773,67 C38H40Cl2F2N4O7 Зазначені в заголовку сполуки одержували шляхом розділення за допомогою суперкритичної флюїдної хроматографії суміші діастереомерів 1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3+ метоксибензоїлокси)етилморфолін-4-карбоксилату (Приклад 10). MS (ES ) m/z розрахований + для C38H41Cl2F2N4O7: [(M+H) ]: 773, фактично: 773 Приклад 12 Рац-1-трет-бутил 4-(1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етил)піперазин-1,4дикарбоксилат Cl 25 F O O O N Cl NH O Cl F F O O O N N O O N M.W. 872,8 C34H36Cl2F2N4O4 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат (Oakwood, 1,46 г; 1,1 мл; 10,2 ммоль) вводили в реакцію з 1-Boc-піперазином (Alfa Aesar; 1,5756 г; 8,37 ммоль) і піридином (870 мг; 0,89 мл; 11,0 ммоль) в метиленхлориді (10 мл) при -78°C протягом 1 г і потім при кімнатній температурі протягом ночі з одержанням трет-бутилового ефіру 1-хлор-етилового ефіру піперазин-1,4-дикарбонової кислоти. Частина трет-бутилового ефіру 1-хлор-етилового ефіру піперазин-1,4-дикарбонової кислоти (682 мг; 1,67 ммоль) потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою (201,4 мг; 0,327 ммоль) у присутності карбонату цезію (743,4 мг; 2,28 ммоль) в диметилформаміді (7 мл) протягом ночі з одержанням 1-трет-бутил-4-(1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоїлокси)етил)піперазин-1,4-дикарбоксилату у вигляді брудно-білої ліофілізованої 16 O O N N F Cl O O NH O O + (186,5 мг; вихід 74%). MS (ES ) m/z розрахований C38H41Cl2F2N4O7: [(M+H) ]: 773, фактично: 773 Приклад 11 (R)-1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-Хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір морфолін-4карбонової кислоти і (S)-1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір морфолін-4карбонової кислоти. (R)-ізомер позначає сполуку A, а (S)-ізомер позначає B. Cl Cl O O F H F H O O N N O UA 113541 C2 + 5 твердої речовини (259,9 мг; вихід 91%). MS (ES ) m/z розрахований для C34H36Cl2F2N4O4: + [(M+H) ]: 872, фактично: 872. Приклад 13 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-Хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір піперазин-1карбонової кислоти дигідрохлорид Cl F O O H N O NH O O N O NH 2HCl 10 15 20 N F Cl M.W. 845,59 C38H41Cl2F2N5O6 · 2 HCl Розчин 1-трет-бутил-4-(1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етил)піперазин-1,4дикарбоксилату (Приклад 12; 115,3 мг; 0,132 ммоль) в метиленхлориді (2 мл) обробляли розчином хлороводневої кислоти в 1,4-діоксані (Sigma Aldrich; 4 M, 0,33 мл; 1,32 ммоль) протягом 5 хв. Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 90 хв і концентрували з одержанням 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)етилового ефіру піперазин-1-карбонової кислоти дигідрохлориду у вигляді білої твердої + + речовини (119 мг; вихід 100%). MS (ES ) m/z розрахований для C38H42Cl2F2N5O6: [(M+H) ]: 772, фактично: 772. Приклад 14 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-Хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)-етиловий ефір рац-1,1діоксо-тіоморфолін-4-карбонової кислоти Cl F O O H N O NH O O O N S O O Cl 25 30 35 40 F N M.W. 821,73 C38H40Cl2F2N4O8S За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат (Oakwood, 1,32 г; 1 мл; 9,27 ммоль) вводили в реакцію з тіоморфолін-1,1-діоксидом (1,1638 г; 8,61 ммоль) і піридином (783 мг; 801 мкл; 9,9 ммоль) в метиленхлориді (15 мл) при кімнатній температурі протягом 3 г з одержанням 1-хлоретилового ефіру 1,1-діоксотіоморфолін-4-карбонової кислоти. Частину 1-хлоретилового ефіру 1,1-діоксотіоморфолін-4-карбонової кислоти (577 мг; 1,614 ммоль) потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою (150,5 мг; 0,244 ммоль) у присутності карбонату цезію (598,4 мг; 1,84 ммоль) в диметилформаміді (7 мл) протягом ночі з одержанням 1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензоїлокси)-етилового ефіру 1,1-діоксотіоморфолін-4-карбонової кислоти у вигляді + брудно-білої твердої речовини (175,3 мг; вихід 87%). MS (ES ) m/z розрахований для + C38H41Cl2F2N4O8S: [(M+H) ]: 821, фактично: 821. Приклад 15 1-(2,2-Диметил-[1,3]діоксолан-4-ілметилкарбамоїлокси)-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти 17 UA 113541 C2 Cl H F O O O N O NH O N H O O O 5 10 15 N F Cl M.W. 817,72 C40H44Cl2F2N4O8 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат (1,46 г; 1,1 мл; 10,2 ммоль) вводили в реакцію з (2,2-диметил-[1,3]-діоксолан-4-іл)-метиламіном (Aldrich; 1,21 г; 1,2 мл; 8,98 ммоль) і піридином (870 мг; 0,89 мл; 11,0 ммоль) в метиленхлориді (15 мл) при 78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлоретил(2,2-диметил-1,3-діоксолан-4-іл)метилкарбамату з піридином гідрохлоридом (1:1). Частина цієї речовини (622 мг; 1,76 ммоль) в диметилформаміді (5 мл) потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою (201 мг; 0,326 ммоль) у присутності карбонату цезію (806,9 мг; 2,48 ммоль) в диметилформаміді (7 мл) протягом ночі з одержанням 1-(2,2-диметил-[1,3]діоксолан-4-ілметилкарбамоїлокси)етилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої + + твердої речовини (97,7 мг; вихід 36%). MS (ES ) m/z розрахований для C40H45Cl2F2N4O8: [(M+H) ]: 817, фактично: 817. Приклад 16 1-(2,3-Дигідроксипропілкарбамоїлокси)-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензойної кислоти Cl H F O O O N O NH O N H O OH OH 20 25 30 35 N F Cl M.W. 777,66 C37H40Cl2F2N4O8 Розчин 1-((2,2-диметил-1,3-діоксолан-4-іл)метилкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоату (Приклад 15: 75,7 мг; 0,092 ммоль) у ацетонітрилі (4 мл) обробляли 2 M розчином хлороводневої кислоти в ефірі (Sigma Aldrich; 0,5 мл; 1,00 ммоль) і перемішували протягом 70 хв. Реакційну суміш концентрували, розбавляли етилацетатом і промивали насиченим водним бікарбонатом натрію і сольовим розчином, висушували і концентрували. Неочищену речовину потім очищали флеш-хроматографією (метиленхлорид/метанол) з одержанням 1-(2,3-дигідроксипропілкарбамоїлокси)-етилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4хлор-2-фторфеніл)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]аміно}-3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини (36,6 мг; вихід 50%). MS + + (ES ) m/z розрахований для C37H40Cl2F2N4O8: [(M+H) ]: 777 фактично: 777. Приклад 17 1-(Тетрагідро-2H-піран-4-ілкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат Cl F O O H N O NH Cl F O O O O N H N M.W. 787,69 C39H42Cl2F2N4O7 18 UA 113541 C2 5 10 15 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат (Oakwood, 1,32 г; 1,0 мл; 9,27 ммоль) вводили в реакцію з 4-амінотетрагідропіраном (Oakwood, 899 мг; 0,92 мл; 8,62 ммоль) і піридином (782 мг; 0,8 мл; 9,89 ммоль) в метиленхлориді (20 мл) при -78°C протягом 3 г з одержанням сполуки 1-хлоретилтетрагідро-2H-піран-4-ілкарбамату з піридином гідрохлоридом (1:1). Частину цієї речовини (520 мг; 1,61 ммоль) в диметилформаміді (5 мл) потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою (151,4 мг; 0,246 ммоль) і карбонатом цезію (599,5 мг; 1,84 ммоль) в диметилформаміді (4,00 мл) при кімнатній температурі протягом 17 г з одержанням 1-(тетрагідро-2H-піран-4ілкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату у вигляді білої твердої речовини + + (145,7 мг; вихід 75%). MS (ES ) m/z розрахований для C39H42Cl2F2N4O7: [(M+H) ]: 787, фактично: 787. Приклад 18 1-{2-[2-(2-Метоксиетокси)-етокси]-етоксикарбонілокси}-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]аміно}-3-метоксибензойної кислоти O O O O O O O O O N Cl F O N N F Cl 20 25 30 M.W. 850,75 C41H47Cl2F2N3O10 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат вводили в реакцію з 2-(2-(2-метоксиетокси)етокси)етанолом (TCI) і піридином в метиленхлориді при -78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлоретил-2-(2-(2-метоксиетокси)етокси)етил карбонату. Цю речовину потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 1-{2-[2-(2метоксиетокси)-етокси]-етоксикарбонілокси}-етилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}+ 3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини. LCMS (ES ) m/z розрахований + для C41H48Cl2F2N3O10 [(M+H) ]: 850, фактично: 850. Приклад 19 1-(2-{2-[2-(2-Метоксиетокси)-етокси]-етокси}-етоксикарбонілокси)-етиловий ефір 4{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти O O O O O O O N O Cl F O O N O N F 35 Cl 19 UA 113541 C2 5 10 15 M.W. 894,80 C43H51Cl2F2N3O11 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат вводили в реакцію з 2,5,8,11-тетраоксатридекан-13-олом (TCI) і піридином в метиленхлориді при -78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлоретил-2,5,8,11-тетраоксатридекан-13-ілкарбонату. Цю речовину потім вводили в реакцію з 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 1-(2-{2-[2-(2-метоксиетокси)етокси]-етокси}-етоксикарбонілокси)-етилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3+ метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини. LCMS (ES ) m/z розрахований для + C43H52Cl2F2N3O11 [(M+H) ]: 894, фактично: 894. Приклад 20 1-[2-(2-{2-[2-(2-Метоксиетокси)-етокси]-етокси}-етокси)-етоксикарбонілокси]-етиловий ефір 4{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти O O O O O O O O N Cl F O O N O N F O Cl 20 25 30 M.W. 938,86 C45H55Cl2F2N3O12 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат вводили в реакцію з монометиловим ефіром пентаетиленгліколю (TCI) і піридином в метиленхлориді при 78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлоретил-2,5,8,11,14-пентаоксагексадекан-16-ілкарбонату. Цю речовину потім вводили в реакцію з 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 1-[2-(2-{2-[2-(2метоксиетокси)-етокси]-етокси}-етокси)-етоксикарбонілокси]-етилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2+ карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини. LCMS (ES ) m/z + розрахований для C45H56Cl2F2N3O12 [(M+H) ]: 938, фактично: 938. Приклад 21 21-Оксо-2,5,8,11,14,17,20,22-октaоксатетракозан-23-іл 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат O O O O O O O O N Cl O F O N O N F O O Cl 35 M.W. 982,91, C47H59Cl2F2N3O13 20 UA 113541 C2 5 10 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат вводили в реакцію з 2,5,8,11,14,17-гексаоксанонадекан-19-олом (TCI) і піридином в метиленхлориді при 78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлоретил-2,5,8,11,14,17-гексаоксанонадекан-19-ілкарбонату. Цю речовину потім вводили в реакцію з 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 21-оксо-2,5,8,11,14,17,20,22октaоксатетракозан-23-іл-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату у вигляді білої твердої + + речовини. LCMS (ES ) m/z розрахований для C47H60Cl2F2N3O13 [(M+H) ]: 982, фактично: 982. Приклад 22 1-мПЕГ-карбонілоксиетиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти (мПЕГ, середня M.W. ~750). O O O O O O O nO HN Cl F O H N N F 15 20 25 30 Cl Середня M.W.: 1438 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлоретилхлорформіат вводили в реакцію з полі(етиленгліколь)монометиловим ефіром (мПЕГ) (Aldrich; середня M.w. ~750) і піридином в метиленхлориді при -78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлоретил-мПЕГ-карбонату. Одержаний 1-хлоретил-мПЕГ-карбонат потім вводили в реакцію з 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (від 10% до 100% ацетонітрил у воді), 1-мПЕГ-карбонілоксиетилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]аміно}-3-метоксибензойної кислоти (мПЕГ, середня M.W. ~750) у вигляді воскоподібної твердої речовини. Приклад 23 1-(2-(Бензилокси)-2-оксоетилкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат O O O O O O N H O HN F O Cl H N F N Cl M.W. 851,74 C43H42Cl2F2N4O8 Бензил-2-аміноацетат, одержаний в результаті обробки бензил-2-аміноацетату гідрохлориду (Aldrich) в метиленхлориді водним розчином бікарбонату натрію, з подальшою промивкою 21 UA 113541 C2 5 10 15 20 водою. До охолодженого розчину бензил-2-аміноацетату (1,837 г; 11,1 ммоль) і піридину (1,1 г; 1,1 мл; 13,9 ммоль) в метиленхлориді (17 мл) при -78°C повільно додавали 1хлоретилхлорформіат (Aldrich; 1,67 г; 11,7 ммоль) протягом ~10 хв. Реакційну суміш перемішували при -78°C протягом 3 г з одержанням білого осаду. Цю холодну реакційну суміш фільтрували для видалення твердої речовини і одержаний фільтрат концентрували насухо з одержанням неочищеного бензил-2-((1-хлоретокси)карбоніламіно)ацетату, який використовували на наступній стадії без додаткового очищення. До розчину 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислоти (215 мг; 0,349 ммоль) в диметилформаміді (22 мл) додавали карбонат цезію (2,15 г; 6,6 ммоль). Перемішували протягом 10 хв, після чого додавали розчин свіжоприготованого бензил-2-((1хлоретокси)карбоніламіно) ацетату (2,77 г неочищеного ~5,55 ммоль) в диметилформаміді (5 мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Цю реакційну суміш розводили в етилацетаті, промивали водою і сольовим розчином і концентрували насухо. Неочищену речовину очищали флеш-хроматографією (гексан/етилацетат, від 90/10 до 10/90) з одержанням 1-(2-(бензилокси)-2-оксоетилкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3+ метоксибензоату у вигляді білої твердої речовини (191 мг; вихід 64%). LCMS (ES ) m/z + розрахований для C43H43Cl2F2N4O8 [(M+H) ]: 851, фактично: 851. Приклад 24 2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-Хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етокси)карбоніламіно)оцтова кислота O O O OH O O N H O HN Cl F O H N F 25 30 35 N Cl M.W.: 761,61 C36H36Cl2F2N4O8 До розчину 1-(2-(бензилокси)-2-оксоетилкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоату (Приклад 23; 35,8 мг; 0,042 ммоль) у етилацетаті (8 мл) додавали 10% паладій на вугіллі (12 мг). Вміст перемішували при кімнатній температурі при тиску водню 1 атм протягом 2 г. Тверді залишки паладію на вугіллі фільтрували і промивали етилацетатом. Одержаний розчин концентрували з одержанням 2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоїлокси) етокси)карбоніламіно)оцтової кислоти у вигляді білої твердої речовини + + (20,6 мг; 61%). MS (ES ) m/z розрахований для C36H37Cl2F2N4O8 [(M+H) ]: 761, фактично: 761. Приклад 25 (2S)-Дибензил-2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етокси)карбоніламіно)пентандіоат 22 UA 113541 C2 O O O O O O O N O N Cl O F O N N F Cl 5 10 15 20 25 M.W. 1013,93; C53H52Cl2F2N4O10 (S)-Дибензил-2-амінопентандіоат одержували шляхом обробки ди-бензилового ефіру (S)глутамінової кислоти гідрохлориду (Aldrich) в метиленхлориді водним розчином бікарбонату натрію з подальшою промивкою водою. До охолодженого розчину (S)-дибензил-2амінопентандіоату (6,70 г; 20,5 ммоль) і піридину (2,05 г; 2,1 мл; 26,0 ммоль) в метиленхлориді (40 мл) при -78°C, повільно додавали 1-хлоретилхлорформіат (Aldrich; 3,07 г; 2,32 мл; 21,5 ммоль) протягом ~10 хв. Реакційну суміш перемішували при -78°C протягом 3 г з одержанням білого осаду. Холодну реакційну суміш фільтрували для видалення осаду і фільтрат концентрували насухо, з одержанням неочищеного (2S)-дибензил-2-((1хлоретокси)карбоніламіно)-пентандіоату (11,1 г, який використовували на наступній стадії без додаткового очищення. До розчину хіральної 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойної кислоти (931 мг; 1,51 ммоль) в диметилформаміді (40 мл) додавали карбонат цезію (7,80 г; 23,9 ммоль). Перемішували протягом 10 хв, після чого додавали розчин вищезгаданого свіжоприготованого (2S)-дибензил2-((1-хлоретокси)карбоніламіно)-пентандіоату (11,10 г неочищеного ~20 ммоль) в диметилформаміді (10 мл), і цю суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Цю суміш потім розводили в етилацетаті, промивали водою, сольовим розчином і концентрували насухо. Неочищену речовину очищали флеш-хроматографією (гексан/етилацетат, від 90/10 до 10/90) з одержанням (2S)-дибензил-2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоїлокси)етокси)-карбоніламіно)пентандіоату у вигляді білої твердої речовини (107 + + мг; вихід 7%). MS (ES ) m/z розрахований для C53H53Cl2F2N4O10 [(M+H) ]: 1013, фактично: 1013. Приклад 26 Одержання (S)-2-[1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензоїлокси)етоксикарбоніламіно]-пентандіової кислоти 23 UA 113541 C2 O O OH O O O O HN Cl F O 10 15 OH H N N F 5 O N H Cl M.W. 833,68 C39H40Cl2F2N4O10 До розчину (2S)-дибензил-2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)етокси)карбоніламіно)-пентандіоату (Приклад 25, 44 мг; 0,043 ммоль) в етилацетаті (7 мл) додавали 10% паладій на вугіллі (33 мг). Вміст перемішували при кімнатній температурі при тиску водню 1 атм протягом 3 г. Тверді залишки паладію на вугіллі фільтрували і промивали етилацетатом. Одержаний розчин концентрували з одержанням (S)-2-[1-(4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензоїлокси)-етоксикарбоніламіно]-пентандіової кислоти у вигляді білої твердої + + речовини (18,6 мг; 48%). MS (ES ) m/z розрахований для C39H41Cl2F2N4O10 [(M+H) ]: 833, фактично: 833. Приклад 27 1-((S)-1-(Бензилокси)-1-оксопропан-2-ілкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат O O O O HN Cl F O O N H O O H N N F Cl 20 25 30 M.W.: 865,74 C44H44Cl2F2N4O8 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 23 (S)-бензил-2-((1-хлоретокси)карбоніламіно)пропаноат одержували з (S)-бензил-2-амінопропаноату і 1хлоретилхлорформіату (Aldrich) у присутності піридину в метиленхлориді. Потім його вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою і карбонатом цезію в диметилформаміді з одержанням 1-((S)-1-(бензилокси)-1-оксопропан-2-ілкарбамоїлокси)етил-4((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2+ карбоксамідо)-3-метоксибензоату у вигляді білої твердої речовини. MS (ES ) m/z розрахований + для C44H45Cl2F2N4O8 [(M+H) ]: 865, фактично: 865. Приклад 28 1-((S)-1-Карбоксиетилкарбамоїлокси)-етиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензойної кислоти 24 UA 113541 C2 O O O O O N H HN Cl F O OH O H N N F Cl 5 10 M.W. 775,62 C37H38Cl2F2N4O8 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 24, розчин 1-((S)-1-(бензилокси)-1оксопропан-2-ілкарбамоїлокси)етил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату (Приклад 27) у етилацетаті обробляли за допомогою 10% паладію на вугіллі при тиску водню 1 атм з одержанням 1-((S)-1-карбокси-етилкарбамоїлокси)-етилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]+ аміно}-3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини. MS (ES ) m/z + розрахований для C37H39Cl2F2N4O8 [(M+H) ]: 775, фактично: 775. Приклад 29 Бензилоксикарбонілметилкарбамоїлоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}3-метоксибензойної кислоти O O O O HN Cl F O 20 25 30 N H O O H N N F 15 O Cl M.W. 837,71, C42H40Cl2F2N4O8 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 23, бензиловий ефір хлорметоксикарбоніламінооцтової кислоти одержували з бензилового ефіру амінооцтової кислоти і 1-хлоретилхлорформіату (Aldrich) у присутності піридину в метиленхлориді. Потім його вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою і карбонатом цезію в диметилформаміді з одержанням хірального бензилоксикарбонілметилкарбамоїлоксиметилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}+ 3-метоксибензойної кислоти у вигляді білої твердої речовини. MS (ES ) m/z розрахований для + C42H41Cl2F2N4O8 [(M+H) ]: 837, фактично: 837. Приклад 30 2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-Хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)-карбоніламіно)оцтова кислота 25 UA 113541 C2 O O O O O OH N H O HN Cl F O H N N F 5 10 Cl M.W. 747,57 C35H35Cl2F2N4O8 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 24, розчин бензилоксикарбонілметилкарбамоїлоксиметилового ефіру 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти (Приклад 29) в етилацетаті обробляли за допомогою 10% паладію на вугіллі при тиску водню 1 атм з одержанням 2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)+ карбоніламіно) оцтової кислоти у вигляді білої твердої речовини. MS (ES ) m/z розрахований + для C35H36Cl2F2N4O8 [(M+H) ]: 747, фактично: 747. Приклад 31 (S)-Дибензил-2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)карбоніламіно)пентандіоат O O O O O O HN Cl F O 20 25 N H O O H N N F 15 O Cl M.W,999,88 C52H50Cl2F2N4O10 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 23 (S)-дибензил-2((хлорметокси)карбоніламіно)пентандіоат одержували з (S)-дибензил-2-амінопентандіоату і хлорметилхлорформіату у присутності піридину в метиленхлориді. Потім його вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою і карбонатом цезію в диметилформаміді з одержанням хірального (S)-дибензил-2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоїлокси)метокси)карбоніламіно)пентандіоату у вигляді білої твердої речовини. MS + + (ES ) m/z розрахований для C52H51Cl2F2N4O10 [(M+H) ]: 999, фактично: 999. Приклад 32 (S)-2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)карбоніламіно)пентандіова кислота 26 UA 113541 C2 O O OH O O O O N H HN Cl F O O OH H N N F Cl 5 10 M.W.: 819,63 C38H38Cl2F2N4O10 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 24, розчин хірального (S)-дибензил-2-(((4((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)карбоніламіно)-пентандіоату (Приклад 31) в етилацетаті обробляли за допомогою 10% паладію на вугіллі при тиску водню 1 атм з одержанням хіральної (S)-2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоїлокси)метокси)карбоніламіно)+ пентандіової кислоти у вигляді білої твердої речовини. MS (ES ) m/z розрахований для + C38H39Cl2F2N4O10 [(M+H) ]: 819, фактично: 819. Приклад 33 15-Метил-12-оксо-2,5,8,11,13-пентаоксагексадекан-14-іл-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3метоксибензоат O O O O O O O O O HN Cl F O H N N F 15 20 25 30 Cl M.W. 878,8 C43H51Cl2F2N3O10 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, 1-хлор-2-метилпропілхлорформіат (Aldrich) вводили в реакцію з 2-(2-(2-метоксиетокси)етокси)етанолом (TCI) і піридином в метиленхлориді при -78°C протягом 3 г з одержанням 1-хлор-2-метилпропіл-2-(2-(2метоксиетокси)-етокси)етилкарбонату. Цю речовину потім вводили в реакцію з хіральною 4((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), 15-метил-12-оксо-2,5,8,11,13-пентаоксагексадекан-14-іл4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин+ 2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату у вигляді білої твердої речовини. MS (ES ) m/z + розрахований для C43H52Cl2F2N3O10: [(M+H) ]: 878, фактично: 878. Приклад 34 3-Оксо-2,4,7,10,13-пентаоксатетрадецил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат 27 UA 113541 C2 O O O O O O O O O HN Cl F O H N N F Cl 5 10 15 20 25 30 M.W. 836,72 C40H46Cl2F2N3O10 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, хлорметилхлорформіат (Aldrich) вводили в реакцію з 2-(2-(2-метоксиетокси)етокси)етанолом (TCI) і піридином в метиленхлориді при 78°C протягом 3 г з одержанням хлорметил-2-(2-(2-метоксиетокси)етокси)етилкарбонату. Цю речовину потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), хірального 3-оксо2,4,7,10,13-пентаоксатетрадецил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату у вигляді білої + + твердої речовини. MS (ES ) m/z розрахований для C40H47Cl2F2N3O10: [(M+H) ]: 836, фактично: 836. Приклад 35 3-Оксо-2,4,7,10,13,16,19-гептаоксаікозил-4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоат M.W. 924,83 C44H53Cl2F2N3O12 За аналогією із способом, описаним в Прикладі 3, хлорметилхлорформіат (Aldrich) вводили в реакцію з монометиловим ефіром пентаетиленгліколю (TCI) і піридином в метиленхлориді при -78°C протягом 3 г з одержанням хлорметил-2,5,8,11,14-пентаоксагексадекан-16-ілкарбонату. Цю речовину потім вводили в реакцію з хіральною 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4(4-хлор-2-фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензойною кислотою у присутності карбонату цезію в диметилформаміді протягом ночі з одержанням, після очищення в ході флеш-хроматографії (гексан/етилацетат, від 80/20 до 20/80), хірального 3-оксо2,4,7,10,13,16,19-гептаоксаікозіл 4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-неопентилпіролідин-2-карбоксамідо)-3-метоксибензоату у вигляді білої + + твердої речовини. MS (ES ) m/z розрахований для C44H54Cl2F2N3O12: [(M+H) ]: 924, фактично: 924. Приклад 36 1-мПЕГ-Карбонілоксиметиловий ефір 4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-хлор-2-фторфеніл)-4-(4-хлор-2фторфеніл)-4-ціано-5-(2,2-диметилпропіл)-піролідин-2-карбоніл]-аміно}-3-метоксибензойної кислоти (мПЕГ, середня M.W. ~750) 28