Протипухлинні похідні аплідину

1. Сполука формули: C2 2 (19) 1 3 76718 4 каптогрупою, необов'язково захищеною аміногруO R3 пою, гуанідиногрупою або галогеновою групою; с) R1 і R2 можуть утворювати з Х2 необов'язково N заміщену циклоалкільну, необов'язково заміщену арильну або необов'язково заміщену гетероциклічну групи, де необов'язкові замісники вибирають з aa8 , алкільної групи, алкенільної групи, арильної групи, де R3 незалежно означає Н або органічну групу, аралкільної групи і їх заміщених похідних, що завибрану з алкільної групи, алкенільної групи, ариміщені однією або більше карбонільною групою, льної групи, аралкільної групи, групи RSO2- або гідроксигрупою, меркаптогрупою, необов'язково ацильної групи RCO-, де R означає алкільну групу, захищеною аміногрупою, гуанідиногрупою або алкенільну групу, арильну групу, аралкільну групу і галогеновою групою; або заміщені похідні, що заміщені однією або більше d) aa8 є заміщеним органічною групою, вибраною меркаптогрупою, необов'язково захищеною аміноз арильної групи, аралкільної групи, групи RSО2-, групою, гуанідиногрупою або галогеновою групою; де R означає алкільну групу, арильну групу, аралабо кільну групу і заміщені похідні, що заміщені однією с) R1 і R2 можуть утворювати з Х2 необов'язково або більше алкоксигрупою, гідроксигрупою, мерказаміщену циклоалкільну, необов'язково заміщену птогрупою, аміногрупою, гуанідиногрупою або гаарильну або необов'язково заміщену гетероциклілогеновою групою; чну групу, де необов'язкові замісники вибирають з і її фармацевтично прийнятні солі. алкільної групи, алкенільної групи, арильної групи, 2. Сполука за п.1, де X означає -NR-, у якому R аралкільної групи і їх заміщених похідних, що заприймає вказані значення. міщені однією або більше карбонільною групою, 3. Сполука за п.2, де X означає -NH- або -NMe-. гідроксигрупою, меркаптогрупою, необов'язково 4. Сполука за п.3, де X означає -NH-. захищеною аміногрупою, гуанідиногрупою або 5. Сполука за п.1, де X означає -О-. галогеновою групою; або 6. Сполука за будь-яким з пунктів 1-5, де Y означає d) aa8 є заміщеною органічною групою, вибраною -СО-. з арильної групи, аралкільної групи, групи RSО27. Сполука за п.1, де X означає –NH- або O і Y або ацильної групи RCO-, де R означає алкільну означає -СОСНСН3СO- або -СО-. групу, арильну групу, аралкільну групу і заміщені 8. Сполука за будь-яким з попередніх пунктів, де похідні, що заміщені однією або більше карбонільR4 означає метил. ною групою, алкоксигрупою, гідроксигрупою, мер9. Сполука за будь-яким з попередніх пунктів, де каптогрупою, аміногрупою, гуанідиногрупою або X1 означає О. галогеновою групою; 10. Сполука за будь-яким з попередніх пунктів, де коли Y означає –СОСНСН3СО-, тоді X2R1 означає необов'язково заміщену аралкілоксиа) Х2 означає N, і R1 і R2 кожен незалежно означає групу. Н або органічну групу, вибрану з алкільної групи, 11. Сполука за п.10, де X2R1 означає бензилоксигалкенільної групи, арильної групи, аралкільної рупу. групи, амідогрупи RCONH-, -SО2R група або аци12. Сполука за будь-яким з пунктів 1-9, де X2R1 льної групи RCO-, де R означає алкільну групу, означає необов'язково заміщену аміногрупу. алкенільну групу, арильну групу, аралкільну групу і 13. Сполука за п.12, де X2R1 означає групу –NHR1, заміщені похідні, що заміщені однією або більше де R1 означає необов'язково заміщену алкільну гетероциклічною групою, алкоксигрупою, гідроксигрупу, алкенільну групу, арильну групу або аралкігрупою, меркаптогрупою, необов'язково захищельну групу. ною аміногрупою, гуанідиногрупою або галогено14. Сполука за п.13, де R1 означає алкільну групу вою групою, або або арильну групу. в) де група аа8 формули 15. Сполука за п.14, де R1 означає фенільну групу X1 або бутильну групу. 16. Сполука за будь-яким з пп. 1-9, де X2R1 ознаR1 X2 чає необов'язково заміщену алкільну групу. 17. Сполука за п.16, де X2R1 означає пропільну R2 групу, ізопропільну групу, пентильну або групу біотину. aa8 , 18. Сполука за будь-яким з пп. 1-9, де -С(=О)Х2 яка утворює N-заміщений пролін формули R1R2 утворює необов'язково заміщену ацильну групу амінокислоти. O R3 19. Сполука по п.18, де необов'язково заміщеною N ацильною групою амінокислоти є необов'язково заміщений пролін. 20. Сполука за п.19, де необов'язково заміщений пролін означає необов'язково заміщений норваліaa8 , нпролін, необов'язково заміщений аланінпролін, де R3 означає групу RSО2-, де R означає алкільну Вос-пролін, необов'язково заміщений алкілпролін. групу, R3 означає алкенільну групу, аралкільну 21. Сполука за п.19, де необов'язково заміщений групу і заміщені похідні, що заміщені однією або пролін означає норвалінпролін, Z-норвалінпролін, більше карбонільною групою, гідроксигрупою, мераланінпролін, Z-аланінпролін, Вос-аланінпролін, 5 76718 6 ізобутирилпролін або необов'язково захищений D3-[Hiv]-9-[ізобутирил]амплідин, лактилпролін. 3-[Val]-9-[ізобутирил]амплідин, 22. Сполука за будь-яким з пп. 1-8, де X1 означає S 3-[Hiv]-8-[ізобутирил]дидемнін А, і X2R1 означає групу –NHR1, де R1 означає заміще3-[Hiv]-9-[Ala]амплідин, ну алкільну групу, алкенільну групу, арильну групу 3-[Hiv]-9-[Nva-Pro]амплідин, або аралкільну групу. 8-[фенілтіосечовина]дидемнін А, 23. Сполука за п.22, де R1 означає алкільну групу 8-[кумарин]дидемнін А, або арильну групу. 8-[бутилтіосечовина]дидемнін А, 24. Сполука за п.23, де R1 означає фенільну групу 8-[метилсульфоніл]дидемнін А, або бутильну групу. 3-[val]-Z-дидемнін А, 25. Сполука за будь-яким з пп. 1-9, де R1 і R2 ра3-[Hiv]-8-[Val]дидемнін А, зом з Х2 утворює необов'язково заміщену гетеро3-[Hiv]-8-[бутирил]дидемнін А, циклічну групу. 3-[Hiv]-9-[Z-ala]амплідин, 26. Сполука за п.25, де гетероциклічна група озна3-[Hiv]-Z-дидемнін А, чає кумарин. 3-[Hiv]-9-[Z-Nva-Pro]амплідин, 27. Сполука за кожним з пп. 1-8, де аа8 заміщений 3-[Hiv]-9-[Вос-Ala]амплідин, органічною групою RSO2-, де R приймає вказані 3-[Hiv]-8-[Boc-Val]дидемнін A, значення. 3-[Hiv]-8-[Val]-9-[ізобутирил]дидемнін А, 28. Сполука за п.27, де R означає метил. 3-[Hiv]-8-[гексаноїл]дидемнін А, 29. Сполука за п.1, яку вибирають із групи, що 3-[Hiv]-8-[Pro]дидемнін А, включає: 9-[метилсульфоніл]аплідин. 8-[фенілсечовина]дидемнін А, 30. Сполука за будь-яким з попередніх пунктів у 8-[бутилсечовина]дидемнін А, формі фармацевтично прийнятної солі. 3-[val]-8-[ізобутирил]амплідин А, Даний винахід відноситься до способів синтезу аплідину і нових протипухлинних похідних, способів їх промислового одержання і застосування. Аплідин має наступну циклічну структуру з бічним ланцюгом: Дидемніни утворюють клас циклічних депсипептидів, які були виділені з різних видів Trididemnum genus [Rinehart, Jr. et al. J, Am. Chem. Soc, 103, 1857-59 (1981), Rinehart, Jr. et al. Science, 212, 933-935 (1981), і володіють протипухлинною і противірусною активністю. З їх числа аплідин є одним з найбільш активних природних дидемнінів протипухлинної дії. Опис виділення і протипухлинної активності аплідину наведений [в патенті США 5.834.586]. Описаний ряд синтетичних і природних аналогів аплідину [Rinehart, Jr. et al. J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834], що включає різні модифікації бічного ланцюга при збереженні тієї ж структури макроциклу. Нещодавно описана споріднена структура дидемнінів, що одержали назву тамандарини [Fenical, W. et al, J, Org. Chem., 2000, 65, 782-792], виділених з неідентифікованих сполук асцидій сімейства дидемнідових. Знайдено, що ці молекули відрізняються тільки наявністю гідроксіізовалеріанової кислоти (Hiv3), замість гідроксіізовалерил пропіонової кислоти (Нір3). Вказані сполуки описані як високо активні противірусні, протипухлинні та імунодепресивні пептиди. Даний винахід стосується вищезгаданих сполук, що одержали назву похідні аплідину, призначених для застосування в медицині, зокрема, для лікування пухлин. Винахід стосується також фармацевтичних препаратів, що включають вказані сполуки, призначених для лікування пухлин, наприклад, солідних пухлин, і використання сполук при одержанні лікарського засобу для лікування пухлин. Особливо переважне лікування солідних пухлин, таких як пухлини сечового міхура, молочної залози, ободової або товстої кишки, шлунка, печінки, nscl=ндрл (недрібноклітинного рака легень), яєчника, підшлункової залози, глотки, передміхурової залози, нирок, scl=дрл (дрібноклітинного рака легень), ретинобластоми, меланоми, фібросаркоми, хондросаркоми або остеосаркоми, або лікування лейкозу/лімфом, таких як ALL (промієлоцитний лейкоз), ALL (гострий лімфобластичний), CML (хронічний мієлогенний), ALL (Вклітинний), лейкоз (волохато-В-клітинний), лейкоз (плазмоклітинний), лімфома (Т-клітинна), лімфома (Т-клітин шкіри), лімфома (не диференціюється), лімфома (В-клітин Беркітта), лімфома (гістиоцитарна), лімфома (В-клітинна), лімфома (асцит Беркітта). Приклади фармацевтичних композицій за ви 7 76718 8 находом включають будь-які тверді (наприклад, ліки: адриаміцин, доксорубіцин, фарморубіцин або таблетки, пілюлі, капсули, гранули) або рідкі форепірубіцин; ми (розчини, суспензії або емульсії) з відповідною e) лікарські засоби, націлені на топоізомеразу, композицією, придатною для перорального, місцетакі як етопозид; вого або парентерального введення, і вказані комf) гормони і агоністи або антагоністи гормонів, позиції можуть містити чисту сполуку або в комбітакі як естрогени, антиестрогени (тамоксифен і нації з будь-яким носієм або іншими споріднені сполуки) і андрогени, флутамід, лейпфармакологічно активними сполуками. При паренрорелін, гозерелін, ципротрон або октреотид; теральному введенні вказані композиції повинні g) ліки, націлені на трансдукцію сигналу в пухбути стерильними. линних клітинах, включаючи похідні антитіл, такі як Для зручності сполука може бути кон'югована герцептин; з білком-носієм або іншим відповідним засобом h) алкілуючі лікарські засоби, такі як ліки на для доставки в організм тварини або людини. основі платини (цис-платин, карбонплатин, оксаліКон'югація може здійснюватися безпосередньо між платин, параплатин) або нітрозосечовини; носієм і сполукою або непрямо, через відповідний і) лікарські засоби, що потенційно впливають зв'язуючий агент. на метастази пухлин, такі як інгібітори матриксної Введення сполуки або композицій за даним металопротеїнази; винаходом, можна здійснювати будь-яким відповіj) засоби генової терапії і антисенсорні засоби; дним способом, таким як внутрішньовенне влиk) терапевтичні засоби на основі антитіл; і вання, пероральний прийом препаратів, внутрішl) інші біологічно активні сполуки морського ньоочеревинне або внутрішньовенне введення. походження, особливо ектеїнасцидини, такі як ЕТЗаявники вважають за краще використати час 743. вливання до 24 годин, більш бажано, 2-12 годин і, Один з аспектів даного винаходу стосується найбільш переважно, 2-6 годин. Короткий час влисполук формули: вання, що дозволяє проводити лікування, не залишаючи в лікарні на ніч, особливо бажаний. Однак, при необхідності, вливання може тривати 1224 години або навіть довше. Вливання можна виконувати з відповідними інтервалами, скажемо в 24 тижні. Фармацевтичні композиції, що містять сполуки за винаходом, можуть доставлятися за допомогою ліпосомального або наносферного інкапсулювання, в складах уповільненого вивільнення або іншими стандартними способами доставки. Точна доза сполуки змінюється в залежності від конкретного складу, способу застосування, де: конкретного місцезнаходження, реципієнта і карX незалежно означає -C(R)2-, -О-, -S - або -NRциноми або пухлини, що вимагає лікування. Інші , де R незалежно означає Η або органічну групу, фактори, такі як вік, маса тіла, стать, дієта, час вибрану з алкільної групи, алкенільної групи, аривведення, швидкість екскреції, стан реципієнта, льної групи, аралкільної групи і їх заміщених похілікарські комбінації, реакції чутливості і важкість дних, які заміщені однією або більше гетероциклізахворювання, також повинні братися до уваги. чною групою, алкоксигрупою, гідроксигрупою, Введення можна здійснювати безперервно або меркаптогрупою, необов'язково захищеною аміноперіодично в межах максимальної допустимої групою, гуанідиногрупою або галогеновою групою; дози. Х2 незалежно означає CR, О (і R2 відсутній), S Сполуки за даним винаходом можуть бути ви(і R2 відсутній) або N, де R незалежно означає Η користані з іншими лікарськими засобами для заабо органічну групу, вибрану з алкільної групи, безпечення комбінованої терапії. Додаткові ліки алкенільної групи, арильної групи, аралкільної можуть входити до складу тієї ж композиції, або групи і їх заміщених похідних, які заміщені однією передбачатися у вигляді окремої композиції для або більше гетероциклічною групою, алкоксигрувведення в той же момент часу або в інший час. пою, гідроксигрупою, меркаптогрупою, необов'язІдентичність додаткових ліків спеціально не обмеково захищеною аміногрупою, гуанідиногрупою жується, і відповідні приклади включають: або галогеновою групою; а) ліки з антимітотичною дією, особливо ті, які Υ означає - (COR')nCO-, де n дорівнює 0 або 1 і мають мішенню елементи цитоскелету, включаюR' означає органічну групу, вибрану з алкільної чи модулятори мікротрубочок, такі як таксанові групи, алкенільної групи, арильної групи, аралкільлікарські засоби (такі як таксол, паклітаксел, такної групи і їх заміщених похідних, які заміщені одсотер, доцетаксел), подофілотоксини або алкалоїнією або більше гетероциклічною групою, алкоксиди барвінку (вінкристин, вінбластин); групою, гідроксигрупою, меркаптогрупою, b) антиметаболітні лікарські засоби, такі як 5необов'язково захищеною аміногрупою, гуанідинофторурацил, цитарабін, гемцитабін, аналоги пуригрупою або галогеновою групою; ну, такі як пентостатин, метотрексат); Х1 означає О або S; c) алкілуючі агенти, такі як азотисті сполуки гікожний з R1, R2 і R4 незалежно означає Η або рчиці (такі як циклофосфамід або іфосфамід); органічну групу, вибрану з амідогрупи RCONH- або d) ліки, націлені на ДНК, такі як антрациклінові ацильної групи RCO-, де R означає, як вказано, 9 76718 10 алкільну групу, алкенільну групу, арильну групу, групу –NHR1 де R1 означає необов'язково заміщеаралкільну групу і заміщені похідні, які заміщені ну алкільну групу, алкенільну групу, арильну групу однією або більше гетероциклічною групою, алкокабо аралкільну групу, особливо, алкільну групу сигрупою, гідроксигрупою, меркаптогрупою, неабо арильну групу, таку як фенільна група або обов'язково захищеною аміногрупою, гуанідиногбутильна група. рупою або галогеновою групою, і R1 або R2, коли Додаткові переважні сполуки включають ті Х2 означає N, і R4 додатково можуть означати сполуки, в яких X2R1 означає необов'язково заміSO2R, де R приймає вищезгадані значення; щену алкільну групу, особливо, де X2R1 означає або R1 і R2 можуть утворювати з Х2 необов'язпропільну групу, ізопропільну групу, пентильну ково N-заміщений пролін, N-заміщений пролін аа8 групу або групу біотину. має формулу Групу переважних сполук представляють ті сполуки, в яких -C(=X2)R1R2 утворює необов'язково, заміщену ацильну групу амінокислоти. Відповідною необов'язково заміщеною ацильною групою амінокислоти є необов'язково заміщений пролін де R3 незалежно означає Η або органічну груабо необов'язково заміщений гліцин, або необопу, вибрану з групи RSO2- або ацильної групи в'язково заміщений валін, і, більш конкретно, неRCO-, де R приймає вказані значення, або R3 обов'язково заміщений пролін означає необов'язозначає алкільну групу, алкенільну групу, арильну ково заміщений норвалінпролін, необов'язково групу, аралкільну групу і заміщені похідні, які замізаміщений аланінпролін, Вос-пролін, необов'язкощені однією або більше карбонільною групою, гідво заміщений алкіл пролін, або необов'язково зароксигрупою, меркаптогрупою, необов'язково заміщений гліцин означає гетероциклічно заміщений хищеною аміногрупою, гуанідиногрупою або гліцин, або необов'язково заміщений валін означає галогеновою групою; валін, Вос-валін або алкілвалін. Переважно неабо R1 і R2 можуть утворювати з Х2 циклоалкіобов'язково заміщений пролін означає норвалінпльну, арильну або гетероциклічну групу, необов'яролін, Z-норвалінпролін, аланінпролін, Zзково заміщену однією або більше групами R3; аланінпролін, Вос-аланінпролін, ізобутирилпролін або R1, R2, Х2, R4 і азот, що несе R4, можуть або необов'язково захищений D-лактилпролін, або утворювати оксадіазаспіроалкан, N-заміщений гетероциклічно заміщений гліцин означає кумаригрупою R5, де R5 незалежно означає Η або органінілгліцин, або необов'язково заміщений валін чну групу, вибрану з групи RSO2- або ацильної означає валін, Вос-валін або ізобутирилвалін. групи RCO-, де R означає, як вказане, алкільну Ще одна група переважних сполук включає ті групу, арильну групу, аралкільну групу і заміщені сполуки, в яких Х1 означає S і X2R1 означає групу похідні, які заміщені однією або більше карбонільNHR1, де R1 означає необов'язково заміщену алкіною групою, алкоксигрупою, гідроксигрупою, мерльну групу, алкенільну групу, арильну групу або каптогрупою, аміногрупою, гуанідиногрупою або аралкільну групу. R1 переважно означає алкільну галогеновою групою; групу або арильну групу, більш бажано, фенільну або аа8 є заміщеним органічною групою, вибгрупу або бутильну групу. раною з групи RSO2- або ацильної групи RCO-, де R1 і R2 можуть утворювати з Х2 гетероциклічну R означає, як вказане, алкільну групу, арильну групу, необов'язково заміщену однією або більше групу, аралкільну групу і заміщені похідні, які замігрупами R3. Наприклад, гетероциклічною групою щені однією або більше карбонільною групою, алможе бути кумарин. коксигрупою, гідроксигрупою, меркаптогрупою, Переважні сполуки включають ті сполуки, в аміногрупою, гуанідиногрупою або галогеновою яких аа8 заміщений органічною групою RSO2-, де групою; R приймає вказані значення, такі як метил. і їх фармацевтично прийнятних солей. R1, R2, X2, R4 і азот, що несе R4, можуть утвоПереважні сполуки включають ті сполуки, в рювати оксадіазаспіроалкан, N-заміщений R5, де яких X означає -NR-, де R приймає вказані значенR5 означає Н. N-заміщений оксадіазаспіроалкан ня. Більш переважно, X означає -NH- або -NMe-, і переважно означає 6-окса-1,7найбільш бажано, щоб X означав -NH-. діазаспіро[4,4]нонан. Інші переважні сполуки включають ті сполуки, Приклади сполук за даним винаходом вклюв яких X означає -О-. чають: Група Υ переважно означає -COR'CO-, де R1 3-(Aip]-Z-дидемнін А, означає алкільну групу, особливо, де R' означає – 8-[фенілсечовина]дидемнін А, СНСН3-. 8-[бутилсечовина]дидемнін А, Інші переважні сполуки включають ті сполуки, 3-[уаl]-8-[ізобутирил]аплідин, в яких Υ означає -СО-. 9-[норвалін]аплідин, У зв'язку з вказаними перевагами переважним 3-[Hiv]-9-[ізобутирил]аплідин, класом сполук є той клас, де X означає --ΝΗ- або 3-[Vаl]-9-[ізобутирил]аплідин, О- і Υ означає –СОСНСН3СО- або -СО-. 3-[hiv]-8-[ізобутирил]дидемнін А, Переважно R4 означає метил. 3-[Hiv]-9-[Ala]аплідин, Переважно Х1 означає =0. 3-[Hiv]-9-[Nva]аплідин, Переважно X2R1 означає необов'язково замі8-[фенілтіосечовина]дидемнін А, щену аралкілоксигрупу, таку як бензилоксигрупу. 8-[кумарин]дидемнін А, Інші переважні сполуки включають ті сполуки, 8-[бутилтіосечовина]дидемнін А, в яких X2R1 означає необов'язково заміщену амі3-[Hiv]-9-[D-Lac]аплідин, ногрупу, більш переважно, ті, в яких X2R1 означає 11 8-[метилсульфоніл]дидемнін А, 3-[val]-Z-дидемнін А, 3-[Ніv]-8-[Vаl]дидемнін А, 3-[Ніv]-8-[бутирил]аплідин, 3-[vаl]дидемнін А, 3-[Hiv]дидемнін А, Z-дидемнін А, 9-[Z-Nva]aплідин, 3-[Hiv]-9-[Z-ala]aплідин, 8-[Gly]-9-[кумарин]дидемнін А, 8-[біотин]дидемнін А, 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[Вос]аплідин, 3-[Hiv]-Z-дидемнін А, 3-[Hiv]-9-[Z-Nva]аплідин, 7,8-[спіро]-9-[руr]аплідин, 3-[Hiv]-9-[lac(OTBDMS)]aплідин, 3-[Ніv]-9-[Вос-Аlа]аплідин, 7,8-[спіро]-9-[Вос]аплідин, 3-[Hiv]-8-[Вое-Val]аплідин, 8-[Vаl]-9-[ізобутирил]дидемнін А, 3-[Ніv]-8-[гексаноїл]дидемнін А, 3-[Val]-9-[Lac(OTBDMS)]аплідин, 3-[Аір]дидемнін А, 3-[Hiv]-9-[D-Lac(OTBDMS)]аплідин, 7,8-[спіро]-9-[ізобутирил]аплідин, 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-(Руr]аплідин, 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[ізобутирил]аплідин, 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[акрилоїл]амплідин або [Аір]3-аплідин. 76718 12 де R незалежно означає Η або органічну групу, вибрану з групи, що включає алкільну групу, арильну групу, аралкільну групу і їх похідні, заміщені гідроксигрупою, меркаптогрупою, аміногрупою, гуанідиногрупою, галогеновою групою. Де R найбільш переважно містить приблизно від 1 до 12 атомів вуглецю, більш переважно, приблизно від 1 до 8 атомів вуглецю і, ще більш бажано, приблизно від 1 до 6 атомів вуглецю, найбільш переважно, 1, 2, 3 або 4 атоми вуглецю. Метил, етил і пропіл, включаючи ізопропіл, є особливо переважними алкільними групами в сполуках за даним винаходом. Де аа3 найбільш переважно означає а-(а'гідроксіізовалерил)пропіоніл (Нір), (X=О, Υ=СОСНСН3СО-)-серію А, або -( 'аміноізовалерил)пропіоніл (Аір) (X=ΝΗ, Υ=СОСНСН3СО-)-серію N або валін (X=ΝΗ, Υ=-СО-)серію V, або -гідроксіізовалерил (X=-О-, Υ=-CO-)серію Η, або N-метилвалін (Χ=NMe, Υ=-СО-)-серію Μ. Де аа8 незалежно означають -амінокислоти L або D конфігурації, якщо використовуються; де Х2 незалежно означає CR, О (і R2 відсутній), S (і R2 відсутній) або N, де R незалежно означає Η або органічну групу, вибрану з групи, що включає алкеніл, алкільну групу, арильну групу, аралкільну групу і їх похідні, заміщені гідроксигрупою, меркаптогрупою, аміногрупою, гуанідиногрупою, галогеновою групою, де кожний з R1, R2, R3 і R4 незалежно означає Η або органічну групу, вибрану з групи, що включає алкільну групу, арильну групу, аралкільну групу і їх похідні, заміщені гідроксигрупою, меркаптогрупою, аміногрупою, гуанідиногрупою, галогеновою групою. Аа8 може також бути проліновим залишком, як в формулі II. Де R3 незалежно означає Η або органічну групу, вибрану з групи, що включає алкільну групу, арильну групу, аралкільну групу і їх похідні, заміщені гідроксигрупою, меркапДаний винахід стосується також сполук, що тогрупою, аміногрупою, гуанідиногрупою, галогемають наступні формули: новою групою. Де R3 найбільш переважно може означати піровиноградну кислоту, аралкілосикарбонільну групу або амінокислоту, або пептиди. Алкільні групи переважно мають приблизно від 1 до 12 атомів вуглецю, більш переважно, приблизно від 1 до 8 атомів вуглецю, ще більш бажано, приблизно від 1 до 6 атомів вуглецю, і, найбільш переважно, 1, 2, 3 або 4 атоми вуглецю. Метил, етил і пропіл, включаючи ізопропіл, є особливо переважними алкільі споріднених структур. ними групами в сполуках за даним винаходом. Як За одним з особливо переважних варіантів вивикористано тут, термін алкіл, якщо не указано конання даний винахід стосується способу синтезу особливо, відноситься як до циклічних, так і нециз утворенням аа3=[Hiv]3 або [Val]3, або [Аір]3, що є клічних груп, якщо навіть циклічні групи складаскладовою частиною ряду надзвичайно ефективються, щонайменше, з трьох вуглецевих членів них і рідких протипухлинних засобів, розроблених і циклу. Переважні амінокислоти означають захизаявлених для клінічних випробувань, після того, щений або незахищений D або L гліцин, валін, як вони стали доступними в адекватних кількостях, лейцин, ізолейцин, фенілаланін, тирозин, триптоі їх найпростіших ізомерів, в яких переставлені фан, метіонін, цистеїн, аспартат, аспарагін, глутаамінокислотні залишки. Вказаний спосіб є енантіомінову кислоту, глутамін, лізин, аргінін, пролін, і стереорегульованим і швидким, що володіє пересерин, треонін, гістидин і гідроксипролін. Переважвагами стандартних способів методик синтезу у ні пептиди можуть бути складені з вищезгаданих фазі розчину. амінокислот. Переважний варіант даного винаходу описуКрім того, аа8 і R4 можуть бути пов'язані через ється формулою І, де аа3 незалежно означають похідні 6-оксо-1,7-діазаспіро[4,4]нонану структури: амінокислоти L або D конфігурації. Якщо використовується, X незалежно означає С, О, S або NR; 13 76718 14 більше кисневих містків і приблизно від 1 до 12 атомів вуглецю, більш переважно, приблизно від 1 до 8 атомів вуглецю, ще бажаніше, приблизно від 1 до 6 атомів вуглецю, і найбільш переважно 1, 2, 3 або 4 атомів вуглецю. Відповідні гетероароматичні групи в сполуках за даним винаходом містять один, два або три гетероатоми, вибраних з атомів Ν, Ο або S, і включають, наприклад, кумариніл, включаючи 8де R5 найбільш переважно може означати пікумариніл, хінолініл, включаючи 8-хінолініл, пірировиноградну кислоту, аралкілосикарбонільну грудил, піразиніл, піримідил, фурил, піролил, тієніл, пу або амінокислоту, або пептиди. Алкільні групи тіазоліл, оксазоліл, імідазоліл, індоліл, бензофупереважно мають приблизно від 1 до 12 атомів раніл і бензотіазол. Відповідні гетероалициклічні вуглецю, більш переважно, приблизно від 1 до 8 групи в сполуках за даним винаходом містять атомів вуглецю, ще більш бажано, приблизно від 1 один, два або три гетероатоми, вибраних з атомів до 6 атомів вуглецю, і, найбільш переважно, 1, 2, 3 Ν, Ο або S, і включають, наприклад, групи: тетраабо 4 атоми вуглецю. Метил, етил і пропіл, вклюгідрофураніл, огетрагідропіраніл, піперидиніл, чаючи ізопропіл, є особливо переважними алкільморфоліно і піролідиніл. ними групами в сполуках за даним винаходом. Як Відповідні карбоциклічні арильні групи в сповикористано тут, термін алкіл, якщо не указано луках за даним винаходом включають одно- або особливо, відноситься як до циклічних, так і нециполіядерні сполуки, що включають поліядерні споклічних груп, якщо навіть циклічні групи складалуки, які містять окремі і/або конденсовані арильні ються, щонайменше, з трьох вуглецевих членів групи. Типові карбоциклічні арильні групи містять циклу. Переважні амінокислоти означають захи1-3 окремих або конденсованих цикли і приблизно щений або незахищений D або L-гліцин, валін, від 1 до 18 атомів вуглецю у циклі. Особливо пелейцин, ізолейцин, фенілаланін, тирозин, триптореважні карбоциклічні арильні групи включають фан, метіонін, цистеїн, аспартат, аспарагін, глутафеніл, включаючи заміщений феніл, такий як 2мінову кислоту, глутамін, лізин, аргінін, пролін, заміщений феніл, 3-заміщений феніл, 2,3серин, треонін, гістидин і гідроксипролін. заміщений феніл, 2,5-заміщений феніл, 2,3,5- заПереважні пептиди можуть бути складені з міщений і 2,4,5-заміщений феніл, де один або бівищезгаданих амінокислот. льше фенільних замісників означають електроноЯк використано тут, термін "органічна група" притягальну групу, таку як галоген, ціано, нітро, означає вуглеводневу групу, що поділяється на алаканоїл, сульфініл, сульфоніл і тому подібні; аліфатичну групу, циклічну групу або комбінацію з нафтил, включаючи 1-нафтил і 2-нафтил; дифеніл; аліфатичної і циклічної груп (наприклад, аралкільні фенантрил і антрацил. групи). В контексті даного винаходу, термін "аліНеобов'язково захищені аміногрупи можуть фатична група" означає насичений або ненасичебути захищені із застосуванням відомих для вканий лінійний або розгалужений вуглеводень. Вказаної мети груп. Відповідні захисні групи для амінів заний термін використовується, наприклад, як включають карбамати, аміди і інші захисні групи, такий, що охоплює алкільну, алкенільну і алкінільтакі як алкіл-, арилалкіл-; сульфо- або галогенну групи. Термін "алкільна група" означає насичеарилалкіл-; галогеналкіл-, алкілсилілалкіл-, арилану лінійну або розгалужену вуглеводневу групу, що лкіл-, циклоалкілалкіл-, алкіл арилалкіл-, гетероцивключає, наприклад, метил, етил, ізопропіл, ізобуклоалкіл-, нітроарилалкіл-, ациламіноалкіл-, нітротил, трет-бутил, гептил, додецил, октадецил, аміл, арилдитіоарилалкіл-, 2-етилгексил, 2-метилбутил, 5-метилгексил і тому дициклоалкілкарбоксамідоалкіл-, циклоалкіл-, алподібні. Термін "алкенільна група" означає ненакеніл-, арилалкеніл-, нітроарил алкеніл-, гетероцисичену, лінійну або розгалужену вуглеводневу груклоалкеніл-, гетероцикло-, гідроксигетероцикло-, пу з однією або більше подвійними вуглецьалкілдитіо-; алкокси- або галоген-, або алкілсульвуглецевими зв'язками, таку як вінільна група. Тефініларилалкіл; гетероциклоацил- і інші карбамармін "алкінільна група" означає ненасичену, лінійти, і алаканоїл-, галогеналаканоїл-, арилалаканону або розгалужену вуглеводневу групу з однією їл-, алкеноїл-, гетероциклоацил-, ароїл-, або більше потрійними вуглець-вуглецевими зв'язарилароїл-, галогенароїл-, нітроароїл- і інші аміди, ками. Термін "циклічна група" означає замкнену в а також алкіл, алкеніл, алкілсилілалкоксіалкіл, алкільце вуглеводневу групу, що поділяється на коксіалкіл, ціаноалкіл, гетероциклічний, алкоксіаалициклічну групу, ароматичну групу або гетерорилалкіл, циклоалкіл, нітроарил, арилалкіл, алкокциклічну групу. Термін "алициклічна група" означає си- або гідроксіарилалкіл і багато які інші групи. циклічну вуглеводневу групу, що володіє характеТакі групи можуть бути необов'язково заміщені ристиками, що додають їй схожість з аліфатичнивищезгаданими замінюючими групами. ми групами. Термін "ароматична група" або "ариПри посиланні тут на заміщені групи в сполульна група" означає моно- або поліциклічну ках за даним винаходом мається на увазі конкретароматичну вуглеводневу групу. Термін "гетероциний радикал, який може бути заміщений за одним клічна група" означає замкнену в кільце вуглеводабо більше наявним положенням однієї або більневу групу, в якій один або більше атоми циклу ше відповідними групами, наприклад, галогеном, означають елемент, що відрізняється від вуглецю таким як фтор, хлор, бром і йод; ціано; гідрокси(наприклад, азот, кисень, сірку і т.д.). лом; нітро; азидо; алаканоїлом, таким як С1-6 алПереважні алкоксигрупи в сполуках за даним каноїльна група, така як ацил і тому подібні; карвинаходом включають групи, що мають один або 15 76718 16 боксамідо; алкільними групами, включаючи алкільні групи приблизно з 1-2 атомами вуглецю або 1-6 атомами вуглецю, і більш переважно, 1-3 атомами вуглецю; алкенільною або алкінільною групами, включаючи групи, що мають одну або більспосіб включає поєднання Boc-D-allo-Ileu-OH з ше ненасичених зв'язків і приблизно 2-12 літійенолятом бензилацетату. Карбонільна група вуглецевих або 2-6 вуглецевих атомів; алкоксигруфрагмента дидемніну формули; пами, включаючи вказані групи, що мають один або більше кисневих містків і приблизно 1-12 атомів вуглецю або 1-6 атомів вуглецю; арилокси, таким як фенокси; алкілтіогрупами, включаючи вказані групи, що мають одну або більш простих може бути відновлена з одержанням фрагментіоефірних зв'язків і приблизно 1-12 атомів вуглета дидемніну формули: цю або 1-6 атомів вуглецю; алкілсульфінільними групами, включаючи вказані радикали, що мають один або більше сульфінільних зв'язків і приблизно 1-12 атомів вуглецю або 1-6 атомів вуглецю; алкілсульфінільними групами, включаючи вказані радикали, що мають один або більше сульфонільГідроксильна група сполуки формули: них зв'язків і приблизно 1-12 атомів вуглецю або 16 атомів вуглецю; аміноалкільними групами, такими як групи, що мають один або більше атоми N і приблизно 1-12 атомів вуглецю або 1-6 атомів вуглецю; карбоциклоарилом з 6 або більш атомами, може бути захищена з одержанням фрагмента зокрема, фенілом (наприклад, R є заміщеним або дидемніну, що має структуру незаміщеним дифенільним радикалом); і аралкілом, таким як бензил. Як добре відомо з даної області техніки, висока міра заміщення не тільки допустима, але часто доцільна. Сполуки згідно з даним винаходом можуть бути заміщені. З метою спрощення термінології, що використовується в даному описі, терміни "група" і "радикал" застосовуються для того, щоб розрізнювати хімічні групи, передбачені для заміщення або які можуть бути заміщені, і відповідні групи, для яких не передбачається заміщення або які можуть не бути заміщеними таким чином. Таким чином, у разі використання терміну "група" для опису хімічного замісника мається на увазі незаміщена група і ця група з атомами О, N або S, наприклад, в ланцюгу, а також як карбонільна група або інше стандартне заміщення. Коли використовують термін "радикал" для опису хімічної сполуки або замісника, мається на увазі, що він включає тільки незаміщену хімічну структуру. Наприклад, мається на увазі, що вираз "алкільна група" включає не тільки насичені вуглеводневі алкільні замісники з повністю відкритим ланцюгом, такі метил, етил, пропіл, ізобутил і тому подібні, але також алкільні замісники, що несуть додаткові замісники, відомі з рівня техніки, такі як гідрокси, алкокси, аміно, карбоксил, карбоксамідо, атоми галогенів, ціано, нітро, алкілсульфоніл і так далі. Таким чином, "алкільна група" включає прості ефірні групи, галогеналкіли, спирти, тіоли, карбоксил, аміни, гідроксіалкіли, сульфоалкіли і так далі. З іншого боку, вираз "алкільний радикал" обмежується включенням тільки насичених вуглеводневих алкільних замісників з повністю відкритим ланцюгом, таких як метил, етил, пропіл, ізобутил і тому подібне. Інші аспекти даного винаходу стосуються способів синтезу. Спосіб передбачає одержання фрагмента дидемніну, що має структуру Подальше зняття захисної групи з групи складного бензилового ефіру дає фрагмент дидемніну, що має структуру Інший спосіб за даним винаходом для одержання фрагмента дидемніну включає поєднання першого реагенту, що має структуру і другого реагенту, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру 17 76718 де X вибирають з групи, що включає -О- і -NH-; дидемніну де R означає амінозахисну групу і де R означає гідроксизахисну групу. Зручно, коли X означає -О- і R означає трет-бутилдиметилсиліл або X означає -NH- і R означає Вос. Інший спосіб за даним винаходом для одержання фрагмента дидемніну включає поєднання першого реагенту, що має структуру 18 що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру і другого реагенту, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -NH2 і NHMe. Розроблений ще один спосіб одержання фрагмента дидемніну, спосіб включає поєднання першого реагенту, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О-, NMe і -NH-; де R означає амінозахисну групу і де R означає Н. Зручно, коли X означає -О- і R означає Н; або X означає -NH- і R означає Вос; або X означає -NMe- і R означає Вос. Спосіб за даним винаходом включає гідроліз фрагмента дидемніну формули: і другого реагенту, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О-, -NMe і -NH-; де Υ означає -(СОСНСН3)nСО-, де n дорівнює 0 або 1. Спосіб, який відрізняється тим, що включає гідроліз фрагмента дидемніну де X вибирають з групи, що включає -ОН і NH2. Ще один спосіб включає гідроліз фрагмента 19 76718 20 що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О- і -ΝΗ-; де Υ означає -(СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Даним винаходом представлений ще один спосіб одержання фрагмента дидемніну, спосіб включає поєднання першого реагенту, що має структуру і другого реагенту, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру Спосіб за даним винаходом включає зняття захисної групи з групи складного бензилового ефіру фрагмента дидемніну формули Згідно з даним винаходом спосіб одержання фрагмента дидемніну включає поєднання першого реагенту, що має структуру і другого реагенту, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О- і -NH-; де Υ означає -(СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Спосіб включає зняття захисту фрагмента дидемніну 21 що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О- і -ΝΗ-; де Υ означає -(СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Ще один спосіб за даним винаходом для одержання фрагмента дидемніну включає циклізацію фрагмента формули: що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О- і -ΝΗ-; де Υ означає -(СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Спосіб включає гідроліз аналога дидемніну що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру 76718 22 де X вибирають з групи, що включає -О- і -ΝΗ-; де Υ означає -(СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Додатково розроблений спосіб одержання аналога дидемніну, спосіб включає поєднання першого реагенту, що має структуру і другого реагенту, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О- і -ΝΗ-; де Υ означає; -(СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Ще один спосіб включає зняття захисту фрагмента дидемніну формули: що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру 23 де X вибирають з групи, що включає -О- і -ΝΗ-; де Υ означає -(СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Спосіб одержання фрагмента дидемніну включає поєднання фрагмента дидемніну, що має структуру 76718 24 де X вибирають з групи, що включає -О- і -NH-; де Υ означає (СОСНСН3)nСО-; де n дорівнює 0 або 1. Спосіб одержання аналога дидемніну включає поєднання аналога дидемнії що має структуру: і другого реагенту, що має структуру і фрагмента, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру Інший спосіб включає зняття захисту фрагмента дидемніну формули: що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру де X вибирають з групи, що включає -О- і -ΝΗ-, і R означає ізопропіл; де X означає -О- і R означає н-пропіл і R означає н-пентил. Спосіб за даним винаходом для одержання аналогу дидемніну включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру: Спосіб за даним винаходом для одержання аналога дидемніну включає поєднання аналога дидемніну формули: і фрагмента, що має структуру з фрагментом що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру 25 76718 26 де: Розроблений спосіб одержання аналога дидемніну, що включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру Спосіб за даним винаходом включає зняття захистів аналога дидемніну і фрагмента, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру що приводить до утворення фрагмента дидемніну, що має структуру Спосіб додатково включає зняття захисту аналога дидемніну де: що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру 27 Розроблений спосіб одержання аналога дидемніну, що включає поєднання аналога дидемніну 76718 28 і фрагмента, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру і ізобутирилхлориду, що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру де R означає SO2Me або Z-Nva. Розроблений спосіб за даним винаходом, що включає зняття захисту аналога дидемніну Розроблений спосіб одержання аналога дидемніну, що включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру і фрагмента, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру де R2 означає Nva. Складовою частиною даного винаходу є спосіб одержання аналога дидемніну, що включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру де R означає Вос, ізобутирил, пірувіл або акрилоїл. Спосіб одержання аналога дидемніну включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру 29 і фрагмента, що має структуру 76718 30 і фрагмента, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру Спосіб одержання аналога дидемніну, що включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру де R означає Вос, ізобутирил або пірувил. Спосіб одержання аналога дидемніну включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру і фрагмента, що має структуру і фрагмента, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру Розроблений спосіб одержання аналога дидемніну, що включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру Розроблений спосіб одержання аналога дидемніну, що включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру 31 76718 32 Сполуки за даним винаходом можуть бути одержані синтетичними способами. Описані тут способи синтезу аплідину і похідних можуть також бути використані для синтезу широкого ряду дидемнінів. Структури деяких сполук приведені на Фігурі 1: і метилсульфонілхлориду, що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру Спосіб одержання аналога дидемніну, включає поєднання аналога дидемніну, що має структуру і фрагмента, що має структуру X=C=N-R що приводить до утворення аналога дидемніну, що має структуру де X означає О і S, де R означає бутил і феніл. Потрібно розуміти, що всі вказані способи є такими, що ілюструють даний винахід, і, за бажанням, можуть бути модифіковані. Зокрема, інші захисні групи можуть бути застосовані для захисту аміногруп або гідроксигруп. Інші реагенти можуть бути використані для введення намічених груп. За бажанням, можна варіювати замісники при конкретному втіленні загальної формули сполук за даним винаходом і приклади переважних значень замісників. Модифіковані способи є складовою частиною даного винаходу. Для того, щоб даний опис в необхідному об'ємі включав всі розкриття пріоритетних заявок на патент і для забезпечення права заявлені пріоритети відповідно до дат подання, заявники включають в опис як посилання зміст [патентних заявок GB 0016148.9 і GB 0103750.6]. Похідні аа3-аплідину є синтетичними циклічними депсипептидами, структурно подібними аплідину (сполуці II) (аа3=Нір, відомому також як дегідродидемнін В), який є природним дидемніном, виділеним зі сполук асцидій Aplidium albicans (фігура 1). Одержані молекули відрізняються наявністю гідроксіізовалеріанової кислоти (Hiv) (сполука І), або валіну (сполука V), або метилваліну (сполука VI), або -( '-аміноізовалерил)пропіонілу (Аір) (сполук VII), замість гідроксіізовалерилпропіонової (Нір) (II) ланки, яка присутня у всіх інших сполуках природного походження, що відносяться до класу дидемніну. Подібність цих двох структур нещодавно також була виявлена при порівнянні дидемніну В (сполука III), найбільш добре відомого члена вказаного класу депсипептидів, і нового циклічного депсипептиду, виділеного з неідентифікованих сполук бразильської асцидії сімейства дидемнідових: тамандарину А (сполука IV). Сполуки І, V, VI і VII є неприродними похідними дидемніну. Структурна гомологія між III і IV відбивається також на відповідній їм біологічній активності. При зіставленні обох сполук показано, що IV зберігає такі ж рівні протипухлинної активності in vitro в клоногенних випробуваннях, а також інгібуючі властивості відносно біосинтез білка, і є трохи більш активним in vitro, ніж III проти карциноми підшлункової залози. Однак, сполука IV не виявляє абсолютно ніякої специфічності відносно якого-небудь типу пухлин NCI 60-клітинної панелі. Показано, що дидемнін В токсичний при дозах, близьких до доз, необхідних для терапевтичного застосування, і, схоже, що IV швидше є токсином широкого спектра, ніж селективним агентом. [Hiv]3- аплідин (І), навпаки, володіє тими ж перевагами, що виявлені для аплідину (II) у відношенні дидемніну В (III), тобто є більш специфічним відносно солідних пухлин, таких як пухлина товстої кишки, хондросаркома або остеосаркома, згідно з MTS випробуванням. Навпаки, [Vаl]3-аплідин (V) і [МеVаl]3-аплідин (VI) є новими сполуками, що володіють високим рівнем протипухлинної активності in vitro. Нарешті, сполуки V, VI і VII викликають, очевидно, в порівнянні з вихідним аплідином, під 33 76718 34 вищене утворення водневих зв'язків на активній цилбромідом, що дає безпосередньо спирт D3, ділянці, і, таким чином, являють собою більш акякий естерифікують за допомогою Z-N(Me)-O(Me)тивні сполуки. Додатково, існуюча заміна амідного Tyr-OH, використовуючи DCC в присутності DMAP, зв'язку складноефірним зв'язком може підвищуваодержуючи D2. Видалення фенацильної групи за ти стабільність циклодепсипептидного ядра. допомогою Zn в оцтовій кислоті дає чистий фрагТут описаний основний загальний синтез різмент D1. них серій похідних аплідину. Як приклад на фігурі Одержання попередника А1 для різних серій 2 приведений ретросинтетичний аналіз. схематично зображене на схемі 2. Для серій SHPL, Ключові стадії включають ефективну макроциSVPL і SMPL перша стадія поєднання Leu-Proклізацію лінійних попередників 6, зручний стереоOBzl (A5) і кислоти (В1), що промислово випускаселективний синтез Ist-аа3-Leu-Pro ланки (А1) і ється, дає безпосередньо спирт A3, готовий для правого фрагмента D1. Заключна сполука макронаступної взаємодії з ізостатином (С1). Для синтециклу 4 з різними бічними ланцюгами дає аа3-аа8зу SAPL і SNPL серій, спосіб відрізняється від виаплідин і похідні. Надійність даного синтетичного щезгаданого тим, що В1 означає складний βпідходу успішно доведена при розробці практичнокетоефір, синтезований з [ -( 'го синтезу аплідину II (аа3=Нір). гідроксіізовалерил)пропіонової і [ -( 'аміноізовалерил)пропіонової кислоти, відповідно. Синтез фрагмента В2 (SAPL і SNPL серії) схематично зображений на схемі 3. Гідрогеноліз з перетворенням В2 в В1 здійснюють безпосередньо перед (в одному реакторі) реакцією поєднання з А5. Утворення макроциклічного ядра є основною ключовою стадією у всіх серіях. У колишніх синтезах дидемнінів досягнута успішна циклізація всіх чотирьох можливих амідних зв'язків. Однак, в даній роботі, утворення зв'язку N(Me)-O(Me)-Туr і Pro вибрано як момент макроциклізації, що засновано на попередніх розробках, пов'язаних із загальним синтезом аплідину II [G. Jou, I. Gonzalez, F. Albericio, Chem. 1997, 62, 354-366 і патент ES2102322]. Макроциклічне ядро цільової молекули розділяється на ліву ланку тетрапептиду Ist-aa3-Leu-Pro A1 і дипептид Boc-Thr-(Z-NMe-OMe-Tyr)-OH D1. Синтез правого фрагмента дипептиду D1 вже описаний. Однак синтез, схематично зображений схемою 1, дозволяє одержувати даний проміжний продукт в кілограмових масштабах. Кислотну функціональність Boc-Thr(OH)-OH захищають фена Одержання повного фрагмента А1 залежить від доступності частини, що являє собою ізоста 35 76718 36 тин, який одержують з непротеїногенного амінозакласу, що розглядаються, оскільки N-кінцева, вільхищеного Boc-D-алоізолейцину (С5) у великих на вторинна аміногрупа є ділянкою приєднання кількостях. Синтетичний спосіб одержання СІ схерізних ацильних груп до циклічного депсипептиду. матично зображений на схемі 4. Активація карбоксильної функціональності Boc-D-allo-Ile карбонілдіімідазолом з подальшою конденсацією літійенолятом бензилацетату дає складний β-кетоефір (С4). Стереоселективне відновлення за допомогою КВН4 в метанолі дає С3. Захист повторної гідроксильної групи у вигляді простого ефіру TBDMS (C2) і гідрогеноліз складного бензилового ефіру, що утворився, дають ізостатин (С1). Подальші стадії одержання сполук І, II, V і VII зображені на схемі 5. Зв'язування фрагментів А1 і D1 з HBTU/HOBt дає лінійний попередник типу 7. Гідрогеноліз Cbz і бензильної захисних груп протікає чисто і спокійно з Pd(OH)2, що дає 6. Стадія макроциклізації із застосуванням HATU/HOAt дає проміжний продукт 5 з хорошим виходом (75%). Хлористий водень в діоксані використовують для розщеплення Восзахисної групи, що приводить до аміну 4. Вказану сполуку зв'язують з Z-NMe-D-Leu-OH, одержуючи 3, яку піддають гідрогенолізу під впливом Pd-C. Одержану сполуку 2 зв'язують з Pyr-Pro-ОН бічним ланцюгом, використовуючи DIPCDI, що дає відповідні сполуки. Цікаво, що попередники типу 2, що є аналогами у всіх вищезгаданих відношеннях дидемніну А, служать вихідними блоками, що використовуються в синтезі для побудови деяких сполук вказаного Більш ранніми дослідженнями [Rinehart et al J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834] також виявлено, що ацильні похідні дидемніну A (dA) 3 активні як вихідні сполуки 2. Для серії аа3 заявниками також виявлена активність в сполуках 3. У таблицях 1 і 2 приведені значення ІС50, знайдені для сполук 1. Таблиця 1 Цитотоксичність сполук типу [аа3]-аплідин ІС50 (молярна) Сполука/серія Аплідин (II)/SAPL1 3 [НІv] -аплідин(І)/SНРL1 3 [Vаl] -аплідин(V)/SVPL1 3 [Aip] -аплідин(VII)/SNPL1 Р388 1,80Е-10 4,74Е-10 1,13Е-10 А549 1,80Е-10 4,74Е-10 1,13E-10 9,01Е-10 НТ29 4,50Е-10 4,74Е-10 1,13Е-10 9,01E-10 MEL28 4,50Е-10 4,74Е-10 1,13Е-10 Методика: за Berjeron et al, Biochem and Bioph Res, Comm., 1984, 121, 3, 848-854. P388= лімфома миші. А549= карцинома легкої людини. НТ-29= карцинома ободової кишки людини. MEL-28 - меланома людини. 37 76718 38 Таблиця 2 Значення ІС50 (молярна) для сімейства аплідину Солідні пухлини Сечовий міхур Молочна залоза Ободова або товста кишка Шлунок Печінка НДРЛ Яєчник Підшлункова залоза Глотка Передміхурова залоза Передміхурова залоза Передміхурова залоза Нирки ДРЛ Ретінобластома Меланома Фібросаркома Хондросаркома Остеосаркома ALL (промієлоцитний лейкоз) ALL (гострий лімфобластичний) CML (хронічний мієлогенний) ALL (В-клітинний) Лейкоз (волохато-В-клітинний) Лейкоз (плазмоклітинний) Лімфома (Т-клітинна) Лімфома (Т-клітин шкіри) Лімфома (що не диференціюється) Лімфома (В-клітин Беркітта) Лімфома (гістиоцитарна) Лімфома (В-клітинна) Лімфома (асцит Беркітта) Методика: Лінія 5637 МХ-1 НТ-29 Hs746t SK-HEP-1 А549 SK-OV-3 PANC-1 FADU РС-3 DU-145 LNCAP 786-0 NCl-Н187 Y-79 Меl-28 SW694 CHSA OSA-FH HL-60 Molt3 К562 CCRF-SB Мо-В ARH-77 Н9 Hut 78 MC116 RAMOS U-937 MoB P3HR1 Дидемнін В 9USAPL1 III 2,50Е-08 1,54Е-06 8,07Е-08 6,60Е-09 9,21Е-08 1,21Е-04 1,63Е-07 1,52Е-10 9,79Е-08 9,00Е-08 2,90E-07 3,28E-06 144E-07 5,45E-07 3,31E-06 6,55E-07 2,13E-07 3,56E-08 8,84E-09 1,87E-07 5,58E-08 МТТ Аплідин SAPL1 II 3,59Е-08 1,67Е-07 6,87Е-07 2,52Е-08 9,44Е-08 2,40Е-05 7,20Е-08 1,7Е-07 7,29Е-08 5,13-07 8,31E-08 1,49Е-06 7,89E-08 5,95E-07 5,72E-07 4,72E-07 1,78E-07 5,25E-07 4,47E-08 9,21E-07 5,62E-07 5,34E-08 МТТ 3 [Hiv] Аплідин SHPL1 l 9,02Е-08 Н/А 1,02Е-08 7,16Е-08 2,65Е-07 Н/А 3,71Е-08 Н/А 1,46E-08 H/A 4,86E-07 H/A 3,45E-09 5,89E-09 H/A 1,77E-06 5,21E-07 H/A 3,82E-07 MTS (нова) Η/Α = не активний Одержані тут сполуки приведені на схемах 5 і 6, Вказані сполуки включають N -пропіоніл-[аа]3dА, N -бутирил-[аа]3-dА, N -ізобутирил-[аа]3-dА і N -пентаноїл-[aa]3-dA. Одержані аналоги, що мають два ацильних замісники після N-кінців аа3-dA ядра, для вивчення впливу структурних факторів на специфічність відносно деяких пухлин. Одержані діацильні сполуки, ізобутирил-Рrо-ОН, О-ізобутирил-Lac-Pro ОН, N-бензил-Аіа-Рrо-ОН, і конденсовані зі сполуками типу 2 DIPCDI способом, що дає, відповідно, після зняття захисту і очищення, [аа]3[ізобутирил]9-аплідин, [О-ізобутирил-Lас]9-аплідин, [Аlа]9-аплідин. Переважні похідні аплідину: сполуки серій: Н, V 39 Синтез спіроциклічних фрагментів схематично представлений на схемі 7. Синтез виходить з раніше описаної сполуки 8. Посилання: a) Seebach, D. et al. J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5390-5398. b) Genin, M. J. et al. J. Org. Chem, 1993, 58, 23342337. 76718 40 Спіросполуки також зв'язують, як в попередніх серіях, одержуючи активні сполуки: 41 76718 42 Таблиця 3 Цитотоксичність похідних аплідину ІС50 (молярна) Серія SNPL3 8PUSAPL1 8BUSAPL1 8ISVPL1 9NVSAPL1 9ISHPL1 9ISVPL1 8ISHPL1 9ASHPL1 8PSHPL2 9NVSHPL1 8PTSAPL1 8CSAPL1 8BTSAPL1 9LSHPL(L) 9LSHPL(D) 9LSVPL(L) 8MSAPL1 SVPL3 8PSHPL1 8VSHPL1 8BSHPL1 SVPL2 SHPL2 SAPL3 9NVSAPL2 9ZASHPL2 SAPL2 8G9CSAPL1 8BISAPL1 9SBSHPL1 SHPL3 9NVSHPL2 9SPSAPL1 9LSHPL2(L) 9BASHPL2 9SBSAPL1 8VSHPL2 8V9ISHPL1 8HSHPL1 9LSVPL2(L) SNPL2 9LSHPL2(D) 9SISAPL1 9SPSHPL1 9SISHPL1 9SASHPL1 SNPL3 8PUSAPL1 Опис 3-[Аір]-Z-дидемнін А 8-[фенілсечовина]дидемнін А 8-[бутилсечовина]дидемнін А 3-[val]-8-[ізобутирил]аплідин 9-[норвалін]аплідин 3-[Hiv]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[Val]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[hiv]-8-[ізобутирил]дидемнін А 3-[Hiv]-9-[Ala]аплідин 3-[Ніv]-8-[Вос-Рrо]дидeмнін А 3-[Hiv]-9-[Nva]аплідин 8-[фенілтіосечовина]дидемнін А 8-[кумарин]дидемнін А 8-[бутилтіосечовина]дидемнін А 3-[Ніv]-9-[L-Lас]аплідин(Тамандарин А) 3-[Ніv]-9-[D-Lас]аплідин 3-[Val]-9-[Lac]аплідин 8-[метилсульфоніл]дидемнін А 3-[val]-Z-дидемнін А 3-[Ніv]-8-[Рrо]дидємнін А 3-[Ніv]-8-[Val]дидемнін А 3-[Ніv]-8-[бутирил]аплідин 3-[vаl]дидемнін А 3-[Ніv]дидeмнін А Z-дидемнін А 9-[Z-Nva]аплідин 3-[Ніv]-9-[Z-аlа]аплідин Дидемнін А 8-[Glу]-9-[кумарин]дидемнін А 8-[біотин]дидемнін А 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[Вос]аплідин 9-[Hiv]-Z-дидемнін А 3-[Hiv]-9-[Z-Nva-Pro]аплідин 7,8-[спіро]-9-[руr]аплідин 3-[Hiv]-9-[lac(OTBDMS)]аплідин 3-[Ніν]-9-[Воc-Ala]аплідин 7,8-[спіро]-9-[Вос]аплідин 3-[Ніv]-8-[Вос-Vаl]аплідин 8-[Val]-9-[ізобутирил]дидемнін А 3-[Ніv]-8-[гексаноїл]дидемнін А 3-[Val]-9-[Lac(OTBDMS)]аплідин 3-[Аір]дидемнін А 3-[Hiv]-9-[D-Lac(OTBDMS)]аплідин 7,8-[спіро]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[Ніv]-7,8-[Спіро]-9-[Руr]аплідин 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[Hiv]-7,8-[cnipo]-9-[акриноїл]аплідин 3-[Аір]-2-дидемнін А 8-[фенілсечовина]дидемнін А Мол. Μ 1076 1062 1062 956 1139 1054 1053 957 1091 1084 1083 1078 1062 1058 1056 1056 1055 1021 1020 984 986 957 886 886 1077 1273 1189 943 1172 1169 1096 1021 1217 1122 1170 1155 1152 1086 1056 985 1169 942 1170 1122 1066 1066 1064 9,29Е-11 9,42Е-11 Р388 9,8Е-10 1,1Е-09 1,1Ε-09 9,ЗЕ-09 7,9Е-09 5,30Е-09 4,9Е-09 AS49 9,29Е-11 9,42Е-11 9,59Е-11 1,05Е-10 4,39Е-10 4,74Е-10 4,75Е-10 5,22Е-10 9,16Е-10 9,22Е-10 9,23Е-10 9,27Е-10 9,41Е-10 9,45Е-10 9,47Е-10 9,47Е-10 9,48Е-10 9,79Е-10 9,8Е-10 1,01Е-09 1,01Е-09 1,04Е-09 1,13Е-09 1,13Е-09 2,32Е-09 3,93Е-09 4,21Е-09 4,24Е-09 4,26Е-09 4,27Е-09 4,56Е-09 479Е-09 8,22Е-09 8,55Е-09 8,55Е-09 8,65Е-09 8,68Е-09 9,21Е-09 9,46Е-09 1,01Е-08 1,02Е-08 1,06Е-08 8,55Е-08 8,91Е-08 9,38Е-08 9,38Е-08 9,39Е-08 43 8BUSAPL1 8ISVPL1 9NVSAPL1 9ISHPL1 9ISVPL1 8ISHPL1 9ASHPL1 8PSHPL2 9NVSHPL1 8PTSAPL1 8CSAPL1 8BTSAPL1 9LSHPL1(L) 9LSHPL1(D) 9LSVPL1(L) 8MSAPL1 SVPL3 8PSHPL1 8VSHPL1 8BSHPL1 SVPL2 SHPL2 SAPL3 9NVSAPL2 92ASHPL2 SAPL2 8G9CSAPL1 8BISAPL1 9SBSHPL1 SHPL3 9NVSHPL2 9SPSAPL1 9LSHPL2(L) 9BASHPL2 9SBSAPL1 8VSHPL2 8V9ISHPL1 8HSHPL1 9LSVPL2(L) SNPL2 9LSHPL2(D) 9SISAPL1 9SPSHPL1 9SISHPL1 9SASHPL1 76718 8-[бутилсечовина]дидемнін А 3-[vаl]-8-[ізобутирил]аплідин 9-[норвалін]аплідин 3-[Hiv]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[Val]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[hіv]-8-[ізобутирил]дидемнін А 3-[Hiv]-9-[Ala]аплідин 3-[Ніv]-8-[Вос-Рrо]дидeмнін А 3-[Hiv]-9-[Nva]аплідин 8-[фенілтіосечовина]дидемнін А 8-[кумарин]дидемнін А 8-[бутилтіосечовина]дидемнін А 3-[Ніv]-9-[L-Lас]аплідин(Тамандарин А) 3-[Hiv]-9-[D-Lac]аплідин 3-[Val]-9-[Lac]аплідин 8-[метилсульфоніл]дидемнін А 3-[Vаl]-2-дидемнін А 3-[Ніv]-8-[Рrо]дидeмнін А 3-[Hiv]-8-[Val]дидемнін А 3-[Ніv]-8-[бутирил]аплідин 3-[vаl]дидемнін А 3-[Hiv]дидемнін А Z-Дидемнін А 9-[Z-Nva]аплідин 3-[Hiv]-9-[Z-ala]аплідин Дидемнін А 8-[Glу]-9-[кумарин]дидемнін А 8-[біотин]дидемнін А 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[Вос]аплідин 3-[Hiv]-Z-дидемнін А 3-[Hiv]-9-[Z-Nva]аплідин 7,8-[спіро]-9-[руr]аплідин 3-[Hiv]-9-[lac(OTBDMS)]аплідин 3-[Ніv]-9-[Вос-Аlа]аплідин 7,8-[спіро]-9-[Вос]аплідин 3-[Ніv]-8-[Вос-Vаl]аплідин 8-[Vаl]-9-[ізобутирил]дидемнін А 3-[Ніv]-8-[гексаноїл]дидемнін А 8-[VаL]-9-[Lас(ОТВОМS)]аплідин 3-[Аір]дидемнін А 3-[Hiv]-9-[Lac(OTBDMS)]аплідин 7,8-[спіро]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[Руr]аплідин 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[ізобутирил]аплідин 3-[Ніv]-7,8-[спіро]-9-[акрилоїл]аплідин Спіро = [(5R)-1-(замісник в позиції 9)-7-[(1R)-1карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7діазаспіро[4.4]нонан]7-9 (1) Дана сполука описана в літературі: [Joe Org. Chem. 2000, 65, 782-792]. Їх синтез опублікований до їх відкриття (j): [Org. Lett., 2000, vol.07 No.0, A-D]. Методика: по Berjeron et al, Biochem and Bioph Res. Comm., 1984, 121, 3, 848-854 44 9,59Е-11 1,05Е-10 4,39Е-10 4,74Е-10 4,75Е-10 5,22Е-10 9,16Е-10 9,22Е-10 9,23Е-10 9,27Е-10 9,41E-10 9,16Е-10 9,47Е-10 9,47Е-10 9,48Е-10 9,79Е-10 9,8Е-10 1,01Е-09 1,01Е-09 1,04Е-09 1,13Е-09 1,13Е-09 4,64Е-09 3,93Е-09 4,21Е-09 8,48Е-09 4,26Е-09 4,27Е-09 4,56Е-09 4,9Е-09 8,22Е-09 8,9Е-09 8,55Е-09 8,65Е-09 8,68Е-09 9,21Е-09 9,46Е-09 1,01Е-08 8,55Е-09 1,06Е-08 8,55Е-08 8,91Е-08 9,38Е-08 9,38Е-08 9,39Е-08 9,8Е-10 9,8Е-10 1,13Е-09 1,13Е-09 4,64Е-09 3,93Е-09 1,13Е-09 3,93Е-09 1,13Е-09 4,9Е-09 4,9Е-09 388 = лімфома миші. А549= карцинома легкої людини. НТ-29= карцинома ободової кишки людини, MEL-28 - меланома людини. DU145 - карцинома передміхурової залози людини. 388= Murine lyrnphoma. A549 - human lung carcinoma. HT-29 - human colon carcinoma. MEL-28 - human melanoma. DU145= human prostate carcinoma 45 76718 46 Аналітичну тонкошарову хроматографію (ТШХ) Список позначень здійснюють на алюмінієвих пластинах з силікагелем Merck'a (60, F254), заздалегідь покритих флуРізне оресцентним індикатором. Візуалізацію здійснюAA Амінокислота ють, використовуючи ультрафіолетове світло Ist Ізостатин (254нм), фосфомолібденову кислоту (5% м/о) в Hip Гідроксіізовалерилпропіонова кислота 95% етанолі або ванілін. Протонний або вуглецеHiv Гідроксіізовалеріанова кислота вий спектр магнітного резонансу (1H, 13С-ЯМР) Aip Аміноізовалерилпропіонова кислота знімають на Varian-300 (300МГц) спектрометрі з Lac Молочна кислота Фур'є-перетворенням, і хімічні зсуви виражають в LC Рідинна хроматографія (РХ) HPLC Високоефективна рідинна хроматографія мільйонних частках (м.ч.) відносно СНСІ3 як внут(ВЕРХ) рішнього стандарту (7,26м.ч. для гН і 77,0 для 13С). TLC Тонкошарова хроматографія (ТШХ) Мультиплети позначені як синглет (с), дублет (д), M.p. Температура плавлення (т.пл.) дублет дублетів (дд), дублет триплетів (дт), триRt Час утримання плет (т), квартет (кв), мультиплет (м) і уширений Quant. Кількісний вихід (кільк.) синглет (уш.с), і константи взаємодії (J) виражені в ESI-MS Маса-спектр іонізаційного електророзпилення Гц. Оптичне обертання (в градусах) вимірюють за Захисні групи допомогою Jasco P1020 поляриметра. Мас-спектр Bn Бензил Воc Бутилоксикарбоніл іонізаційного розпилення електронів (ESI-MC) TBDMS Бутилдиметилсиліл одержують на Hewlett Packard Series 1100 MSD. Ζ Бензилоксикарбоніл Elemental. Флеш хроматографію на колонці викоРас Фенілацетил нують на Е. Merck силікагелі 60 (240-400 меш) або Розчинники RP С18 (40-63мкм), використовуючи системи розTHF Тетрагідрофуран (ТГФ) чинників, вказані в окремих експериментах. Hex Гексан Наступні методики описують синтез проміжних ACN Ацетонітріл сполук, одержаних на основі аплідину (SAPL), DCM Дихлорметан EtOAc Етилацетат [Aivf-аплідин (SNPL), [Hivf-аплідин (SHPL), [ValfDMF Диметилформамід (ДМФ) аплідин (SVPL) і [MeValf-аплідин (SMPL). MTBE Метил-трет-бутиловий ефір Приклад 1 Et2O Діетиловий ефір Синтез Бензил(4R,5S)-4-(третt-BuOH трет-Бутанол бутоксикарбоніламіно)-5-метил-3-оксогептаноату TFA Трифтороцтова кислота (С4) MeOH Метанол EtOH Етанол IPA Ізопропанол Реагенти GDI 1,1'-Карбонілдіімідазол HOBt 1-Гідроксибензотріазол HBTU N-оксид N-[(1 Н-Бензотриазол-1-іл)(диметил аміно)метилен]-Nметанамонійгексафторфосфату BOP-CI Хлорангідрід біс(2-оксо-3оксазолідиніл)фосфінової кислоти HATU N-оксид N-[(диметиламіно)-1Н-1,2,3,триазоло[4,5-b]піридин-1-ілметилен]-Nметилметанамонiйгексафторфосфату HOAt 1-Гідрокси-7-аза-бензотриазол DCC Дициклогексилкарбодіімід DIPCDI Ν,Ν'-Діізопропілкарбодіімід TBAF Тетрабутиламонійфторід AcOH Оцтова кислота p-TsOH п-толуолсульфонова кислота DMAP 4-Диметиламінопіридин NMM N-Метилморфолін DIPEA Діїзопропілетиламін TEA Триетиламін TFA Трифтороцтова кислота Загальна методика Всі роботи виконують в інертній атмосфері аргону. Всі розчинники мають реагентну чистоту (використовуються для обробки) або ВЕРХ чистоту (використовуються як розчинник для реакції або очищення). Безводні розчинники використовують безпосередньо в тому вигляді, в якому вони поступають в продаж. Тетрагідрофуран свіже переганяють перед застосуванням для видалення стабілізатора. Всі інші реагенти є сполуками найбільшої доступної чистоти, що промислово випускаються. До розчину Boc-D-alloIle-OH (15,26г, 65,9ммоль) в сухому ТГФ (200мл) при 0°С в атмосфері аргону додають CDI (16,04г, 98,96ммоль). Через 15хв. суміші дають нагрітися до кімнатної температури і перемішують протягом 16год. Одержаний розчин охолоджують до -78°С і додають через канюлю до розчину, що добре перемішується, бензиллітійеноляту, охолодженого до -78°С (625мл, 0,37М), [одержаному додаванням краплями розчину бензилацетату (33,34мл) в ТГФ (165мл) до розчину літійдіізопропіламіду (0,36М) в ТГФ/гекс. 3:1 (642мл) при -78°С]. Температуру потрібно підтримувати < -75°С. Реакційну суміш перемішують при -78°С протягом 60хв. Потім суміші дають нагрітися до -10°С (30хв.), знову охолоджують до -78°С і гасять насиченим водн. хлоридом амонію (200мл), після чого екстрагують DCM (3 500мл) при кімнатній температурі. Об'єднані екстракти промивають послідовно водн. нас. NaHCO3 (500мл) і насиченим розчином солі (200мл). Сушіння (Na2SO4) з подальшим видаленням розчинника дає масло, яке наносять на діоксид кремнію С18 і заповнюють доверху LC-RPC18 [Lichroprep RFC-18 (40-60 мікрон) колонку. Елюювання з використанням градієнта ACN-H2O (60100% ACN)] дає продукт С4 у вигляді безбарвного масла (16,7г, 70%). [ ]20D-20,0 (с 1, СНСl3), ТШХ: Rf=0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H2O 7:3). 47 76718 48 Н-ЯМР (300МГц, CDCl3) δ 0,77 (д, 3Н), 0,94 (т, фільтр і концентрують при зниженому тиску, одер3Н), 1,25 (с, 9Н), 1,60 (м, 1Н), 1,90 (м, 2Н), 3,58 (с, жуючи 7,8г безбарвного масла. Безбарвні криста2Н), 4,47 (дд, 1Н), 5,00 (д, 1H), 5,18 (с, 2Н), 7,35 ли (6г, 70%) одержують після кристалізації в ACN (уш.с, 5Н). при -20°С. [ ]20D 1,8 (с 0,594, DCM) [Літ. [a]D 1,74 (с Приклад 2 2,64, СНС13). Synthesis, 1991, 294]; Rf=0,45 (Merck Синтез бензилового ефіру (3S,4R,5S)-N-(третHPTLC, RP-C18, ACN-H2O 8:2). 1 бутоксикарбоніл)ізостатичну (С3) H-ЯМР (300МГц, CDCl3) δ 0,18 (с, 6Н), 0,82 (с, 9Н), 0,85 (д, 3Н), 0,89 (т, 3Н), 1,10-1,20 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н), 1,80 (м, 1Н), 2,50 (м, 2Н), 3,58 (м, 1H), 4,11 (м, 1H). Приклад 5 Синтез (2S)-2-трет-Бутил(диметил)силілоксиС4 (16,7г, 45,9ммоль) розчиняють в метанолі 3-метилмасляної кислоти (SAPLB4) (690мл) при 0°С. До розчину, що перемішується, додають боргідрид калію (7,43г, 137,8ммоль) і через 30хв. реакцію гасять водн. НСl (0,1Н), до рН4, і суміш екстрагують DCM (300мл). Екстракт промивають послідовно водн. NaHCO3 (100мл, нас.) і насиченим розчином солі (100мл). Сушіння До розчину, що перемішується, (S)-2-гідрокси(Na2SO4) з подальшим видаленням розчинника 3-метилмасляної кислоти (21,12г, 181,9ммоль) в дає спирт С3 (15,7г, 93%) у вигляді безбарвного ДМФ (91мл) при 0°С в атмосфері аргону додають масла. Rf=0,45 (гекс, -ЕtOАс 2:1); [ ]D=-9,5 (с 0,76, імідазол (27,24г, 400,11ммоль) і DMAP (6,94г, СНСl3); Rf=0,45 (ЕtOАс-гекс. 1:2). 54,56ммоль). Через 5хв. додають трет1 H-ЯМР (300МГц, CDCl3) δ 0,81 (д, 3Н), 0,90 (т, бутилдиметилхлорсилан (60,31г, 400,11ммоль). 3Н), 1,20 (м, 1Н), 1,36 (м, 1H), 1,40 (с, 9Н), 1,90 (м, Суміші дають нагрітися до 23°С і перемішують 1H), 2,55 (дд, 1H), 2,70 (дд, 1Н), 3,20 (д, 1Н), 3,61 протягом ночі. Сиру реакційну суміш розподіляють (м, 1H), 3,90 (м, 1H), 4,40 (д, 1H), 5,18 (с, 2Н), 7,40 між Et2O (250мл) і водн. НСl (250мл, 0,1н). Органі(уш.с, 5Н). чну фазу промивають послідовно водн. NaHCO3 Приклад 3 (250мл, нас.) і насиченим розчином солі (250мл), Синтез Boc-(3S,4R,5S)-Ist(TBDMS)-OBn (C2) сушать (Na2SO4), фільтрують і концентрують при зниженому тиску, одержуючи біссилільований продукт у вигляді ясно-жовтого масла. Розчин вказаного продукту в ТГФ (100мл) додають краплями (10хв.) до охолодженого (0°С) розчину КОН (30,47г, 543ммоль) в ТГФ/Н2О (543мл: 181мл). ЧеДо розчину С3 (15,7г, 42,9ммоль) в сухому рез 40хв. реакційну суміш розподіляють між Н2О ДМФ (65мл) при 0°С додають імідазол (8,77г, (300мл) і Et2O (500мл). Водну фазу розподіляють 128,8ммоль), DMAP (1,57г, 12,81ммоль) і TBDMSміж охолодженою (0°С) водн. НСl (200мл, 3н) і C1 (19,42г, 128,8ммоль). Реакційну суміш залишаЕtOАс (5 250мл). Об'єднані органічні екстракти ють нагріватися до кімнатної температури протясушать (Na2SO4), фільтрують і концентрують при гом ночі, потім розподіляють між Et2O (200мл) і зниженому тиску, одержуючи SAPLB4 у вигляді послідовно водн. НСl (100мл, 0,1н), водн. NaHCO3 ясно-жовтого масла (38,38г, 91%). 1 (100мл, нас.) і насиченим розчином солі (50мл). Н-ЯМР (300МГц, CDCl3) δ 0,02 (м, 6Н), 0,90 Після сушіння (Na2SO4) і видалення розчинника (м, 15Н), 2,08 (м, 1H), 4,06 (д, 1Н). залишок очищають флеш РХ (силікагель, гекс), Приклад 6 одержуючи С2 (19,96г, 97%). Синтез Бензил-(4S)-4-трет[ ]D=10,6 (с 1,01, СНСl3); Rf=0,73 (ЕtOАс-Гекс. бутил(диметил)силілокси-5-метил-31:2). оксогексаноату (SAPLB3) 1 Н-ЯМР (300МГц, CDCl3) δ 0,15 (с, 6Н), 0,82 (с, 9Н), 0,85 (д, 3Н), 0,89 (т, 3Н), 1,18 (м, 1H), 1,35 (м, 1Н), 1,41 (с, 9Н), 1,77 (м, 1H), 2,45 (дд, 1H), 2,60 (дд, 1H), 3,62 (м, 1H), 4,20 (м, 1H), 4,40 (д, 1H), 5,05 (д, 1Н), 5,15 (д, 1Н), 7,40 (уш.с, 5Н). Приклад 4 До розчину (S)-2-(третСинтез Boc-(3S,4R,5S)-Ist(TBDMS)-OH (С1) бутилдиметилсилілокси)-3-метилмасляної кислоти (15,31г, 65,9ммоль) в сухому ТГФ (200мл) при 0°С в атмосфері аргону додають CDI (16,04г, 98,96ммоль). Через 15хв. суміші дають нагрітися до кімнатної температури і перемішують протягом 16год. Одержаний розчин охолоджують до -78°С і додають через канюлю до розчину бензиллітійеДо розчину С2 (10,48г, 21,8ммоль) в ТГФ ноляту (625мл, 0,37М), що добре перемішується, (110мл), дегазованого і продутого аргоном, додаохолодженого до -78°С, [одержаному додаванням ють Pd/C 10% (2,096г, 20 масових %). Суміш пекраплями розчину бензилацетату (33,34мл) в ТГФ ремішують в атмосфері Н2 (1атм.) протягом 16год., (165мл) до розчину літійдіізопропіламіду (0,36М) в потім фільтрують через 0,45мм тефлоновий 1 49 76718 50 ТГФ/гекс. 3: 1 (642мл) при -78°С]. Температуру льтрують і концентрують, одержуючи жовте масло потрібно підтримувати