Очні краплі протиглаукомної дії з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом pleurotus ostreatus

Реферат: Винахід належить до галузей фармацевтики та медицини та стосується очних крапель протиглаукомної дії з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus. UA 102355 C2 (12) UA 102355 C2 UA 102355 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід має відношення до фармації та медицини, а саме до засобів фармакокорекції з біологічно активними сполуками, зокрема до очних крапель протиглаукомної (оптичної нейропротекторної) дії з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом, який одержано з грибу Pleurotus ostreatus. Структура очних хвороб населення нашої планети свідчить про превалююче місце первинної глаукоми, яка веде до сліпоти та інвалідизації [1]. За сучасною класифікацією глаукому визначають як глаукомну оптичну нейропатію, а погіршення відтоку водянистої вологи й підвищення внутрішньоочного тиску сприймають тільки як фактори ризику. При первинній відкритокутовій глаукомі основними структурами-мішенями є дренажна система ока і голівка зорового нерва. Як і катаракта, первинна глаукома розвивається на фоні старіння організму і належить до вікових хвороб [1]. Глаукому відносять до мультифакторіальних захворювань з пороговим ефектом. Незалежні дослідження, що були проведені в різний час і в різних місцях, підтверджують спільність і зв'язок патологічних станів: атеросклерозу, гіпертензії, діабету, судинної церебральної патології, глаукоми похилого і старечого віку, ішемічної оптичної нейропатії, оклюзії вен і артерій сітківки ока [1, 2]. Дисциркуляторні судинні та реологічні порушення, зміни ауторегуляції призводять до ішемії і гіпоксії сітківки і диску зорового нерва [3, 4]. Для лікування глаукоми найчастіше використовують М-холіноміметики (Пілокарпін, Тимолол, Арутимол) у вигляді очних крапель. Механізм дії цих субстанцій полягає у збудженні холінорецепторів ока, внаслідок чого виникає міоз (звуження зіниці) і спазм акомодації. Відтік рідини з передньої камери поліпшується завдяки відкриттю фонтанового простору, який лежить в основі райдужки і шлемового каналу [1, 5]. Проте, як наслідок резорбтивної дії холіноміметиків спостерігається бронхоспазм і брадикардія (навіть, може бути зупинка серця) [5]. Кращі результати лікування глаукоми дає застосування препаратів простагландинів (Траватан). Проте ці препарати надто дорогі і не доступні пересічним українцям [1]. Тож, аналізуючи комплекс процесів, що відбуваються в організмі в цілому і в тканинах ока, можна відзначити провідну роль гемодинамічних порушень у розвитку глаукоми [1-4]. В результаті недостатнього венозного відтоку, який нерідко сполучається з недостатнім артеріальним припливом, відбувається затримка видалення продуктів метаболізму, накопичення в тканях внутрішніх оболонок очного яблука продуктів розпаду, глибоке порушення внутрішньотканинного обміну речовин в сітківці і зоровому нерві [7]. У хворих на глаукому виявляються атеросклеротичні ураження судин ока, відкладення в їх стінці ліпопротеїнів низької щільності і холестерину, що в свою чергу стимулює тиск, гіперплазію і міграцію до ендотелію гладком'язових клітин, підсилення продукції цими клітинами колагену і фіброзної тканини, внаслідок чого стінки судин піддаються фіброзному потовщенню, а їх отвір звужується і створюються умови для прогресування атеросклерозу і ішемізації тканин [1-4, 7]. Тому, субстанції, які впливають на метаболізм субстрату атерогенного процесу (атерогенні ліпопротеїни крові) і чинять гіполіпідемічну дію, можна вважати потенційними засобами для покращення показників гемодинаміки судин ока і внутрішньотканинного обміну речовин в сітківці і зоровому нерві. Як прототип заявленого засобу фармакокорекції глаукоми (глаукомної оптичної нейропатії) вибраний засіб корекції ліпідного статусу крові з використанням водорозчинного білковополісахаридного комплексу (ВБПСК) - біологічно-активної субстанції, яка отримана з грибу Pleurotus ostreatus. Субстанція знижує рівень загального холестерину крові, рівні ліпопротеїнів низької і дуже низької щільності та підвищує рівень ліпопротеїнів високої щільності, тобто виявляє гіполіпідемічну дію [8, 9]. Гіполіпідемічна дія ВБПСК у прототипі проявлялася при внутрішньошлунковому введенні субстанції щурам. Таким чином була встановлена її системна дія. Задачею винаходу є створення засобу фармакокорекції глаукоми (глаукомної оптичної нейропатії) з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus при місцевому лікуванні. Поставлена задача вирішується наступним чином. Із субстанції ВБПСК [9] шляхом розчинення устерильній воді очищеній in bulk готують очні краплі у 1 % концентрації (мас. %). Розчин фільтрують крізь беззольний фільтрувальний папір або скляний фільтр № 2. Розчин не ізотонують і не піддають стабілізації. Винахід ілюструється прикладом. Приклад У білих нелінійних щурів моделювали експериментальну глаукому, яка за ознаками відповідала первинній відкритокутовій глаукомі людини. Моделювання глаукоми здійснювали 1 UA 102355 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 введенням щурам розчину дексаметазону (ампули 2 мл; 4 мг/мл) у нижню повіку в дозі 0,1 мл 3 рази на тиждень протягом 4 тижнів. Використання дексаметазону для моделювання експериментальної глаукоми засновано на його побічній дії: підвищенні внутрішньочерепного тиску, підвищенні артеріального тиску, підвищенні внутрішньоочного тиску з можливим пошкодженням зорового нерву [5]. Протягом останнього тижня на фоні глаукоми, що розвивалася, здійснювали лікування щурів шляхом закапування в очі розчину ВБПСК. Після закінчення експерименту оцінювали стан голівки зорового нерва. Дослідження проводили на білих дорослих щурах-самцях масою 240,0-260,0 г у відповідності до рекомендацій Державного фармакологічного центру (ДФЦ) МОЗ України [10]. В експерименті були використані тварини після проходження ними карантину в умовах віварію протягом 28 діб. Тварини отримували стандартну дієту у вигляді гранульованого корму за встановленими нормами. Доступ до води у щурів був вільним. В ході експерименту один раз на тиждень проводили контрольне зважування тварин. Піддослідні тварини (21 тварина, 42 ока) були розділені на 3 експериментальні групи по 7 тварин (14 очей) у кожній групі: 1 - інтактна (тварини не піддавались ніяким діям); 2 група тварини з експериментальною глаукомою (позитивний контроль); 3 група - тварини з експериментальною глаукомою, яким паралельно з уведенням розчину дексаметазону проводили інстиляцію 1 % розчину (мас. %) ВБПСК у стерильній очищеній воді в обидва ока 2 рази на день протягом 7 днів. З експерименту тварин виводили під хлороформним наркозом шляхом швидкої декапітації. Зразу ж після забою тварин очі були енуклейовані. Для приготування мікропрепаратів очей використовували метод гомогенатів [11]. В результаті моделювання у тварин дослідних груп розвинулась глаукома. Експериментальна глаукома, яка була сформована шляхом екзофтальмічного введення розчину дексаметазону (4 мг/мл), за своїм клінічним проявом імітує первинну відкритокутову глаукому людини. Цей вид патології характеризується розширенням фізіологічної екскавації диска зорового нерва і нерізко вираженими змінами у парацентральній зоні поля зору (появою невеликих скотом, збільшенням розмірів сліпої плями, симптомом "оголення" сліпої плями, порушенням пігментного шару, зменшенням кількості колбочок і паличок). Мікрофотографії препаратів очей щурів усіх груп представляють фіг. 1-3 (Креслення). Мікропрепарат (фіг. 1) являє собою мікроскопічний зріз ока щура контрольної (інтактної) групи. Пігментний шар не містить будь-яких морфологічних змін. Фіг. 2 представляє мікроскопічний зріз ока щура з групи позитивного контролю (модельна глаукома). На мікрофотографії чітко видно прояви дестабілізації й руйнування пігментного шару під впливом підвищеного внутрішньоочного тиску. Біомікроскопічну картину зрізу ока щура з третьої дослідної групи (лікування глаукоми паралельно з моделюванням патології) представляє фіг. 3. Дана біомікроскопічна картина характеризується значно меншим руйнуванням пігментного шару під впливом підвищеного внутрішньоочного тиску порівняно зі зразком із дослідної групи № 2. Стосовно самого пігментного шару можна відзначити, що його стан практично подібний стану цієї структури в контрольній групі щурів. Таким чином, можна зробити висновок, що заявлений засіб - очні краплі з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus - зменшує прояви глаукомної оптичної нейропатії, тобто виявляє протиглаукомну активність, що знайшло вираження у позитивному впливі на стан пігментного шару і затримці некрозу зорового нерва. Заявлений засіб є перспективним для лікування первинної відкритокутової глаукоми людини. Засіб передбачає використання поширеної в Україні доступної сировини і може бути виготовлений в умовах хіміко-фармацевтичних підприємств з використанням стандартного обладнання. Джерела інформації: 1. Нестеров А.П. Глаукома: Основные проблемы, новые возможности // Вестник офтальмологии.-2008. - № 1. - С. 3-5. 2. Луценко Н.С. Глаукома и половые стероиды: миф или реальность? // Офтальмологический журнал.-2004. - № 2. - С. 36-41. 3. Краснов М.М. О внутриглазном кровообращении при глаукоме // Вестник офтальмологии.1998. - № 5. - С. 5-7. 2 UA 102355 C2 5 10 15 20 25 4. Муха А.И. Об адекватности назначения дезагрегантов при сосудистых заболеваниях глазного дна и первичной открытоугольной глаукоме // Вестник офтальмологии.-2005. - № 1.- С. 30-33. 5. Дроговоз С.М. Фармакологія на допомогу лікарю, провізору та студенту: Підручникдовідник / С.М. Дроговоз, В.В. Дроговоз. - Харків, 2004.-476 с. 6. Компендиум 2005 - лекарственные препараты / Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. - К.: МОРИОН, 2005.-1920 с. 7. Краснов М.М. О внутриглазном кровообращении при глаукоме // Вестник офтальмологии.1998. - № 5. - С. 5-7. 8. Кучеренко Н.В. Розробка складу і технології гіполіпідемічного засобу з Плевроту черепичастого: Дис… канд. фарм. наук: 15.00.01; Захищена 19.12.2008; Затв. 27.05.2009. Харків, 2008.-151 с; іл. Бібліогр.: С. 124-149. 9. Патент України на винахід № 83530 від 25.07.2008 р. "Спосіб одержання білковополісахаридного комплексу гіполіпідемічної дії" (Н.В. Кучеренко, В.Г. Дем'яненко, Ю.В. Столєтов). 10. Доклінічні дослідження лікарських засобів: Методичні рекомендації / Під ред. член. кор. АМН України О.В. Стефанова. - К.: Авіценна, 2002.-567 с. 11. Микроскопическая техника: руководство для врачей и лаборантов / Под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова - М.: Медицина, 1996.-544 с. Перелік фігур креслення: 1. Фіг. 1. Мікропрепарат зрізу ока щура контрольної групи № 1. 2. Фіг. 2. Мікропрепарат зрізу ока щура дослідної групи № 2 (позитивний контроль). 3. Фіг. 3. Мікропрепарат зрізу ока щура дослідної групи № 3. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ Очні краплі протиглаукомної дії з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus, які відрізняються тим, що їх готують із субстанції шляхом розчинення у стерильній воді очищеній in bulk при наступному співвідношенні компонентів (мас. %): водорозчинний білковополісахаридний комплекс Pleurotus ostreatus 1,0 вода очищена стерильна in bulk до 100,0 г. 3 UA 102355 C2 Комп’ютерна верстка Л. Бурлак Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4