Гель для розм’якшення рубців з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом pleurotus ostreatus

Реферат: Винахід належить до галузей фармацевтики та медицини та стосується гелю для розм’якшення рубців з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus. UA 102209 C2 (12) UA 102209 C2 UA 102209 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід стосується фармації та медицини, а саме засобів фармакокорекції з біологічно активними сполуками, зокрема м'яких лікарських засобів гелевої структури для розм'якшення рубців з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом, який одержано з грибу Pleurotus ostreatus. Лікування рубцевої тканини є актуальною задачею як медицини, так і косметології. Травматичні та післяопераційні рубці є значним косметологічним дефектом, який важко приховати від оточуючих. Рубець - це щільне сполучнотканинне утворення, що виникає внаслідок регенерації тканин після пошкодження або запалення. Основними структурними елементами рубця є колагенові волокна. Самостійно рубцеві елементи не зникають, а їх видалення являє собою певне утруднення [1]. Найбільш складним є лікування келоїдних рубців. Ці рубці можуть збільшуватися протягом кількох років після їх утворення за рахунок надлишкового накопичення колагену у місці дефекту шкіри. В келоїдних рубцях спостерігається підвищена синтетична і проліферативна активність фібробластів, а синтез колагену перевищує його розпад, що веде до розвитку фіброзу і тоді рубці утворюють рельєф, що височить над рівною поверхнею шкіри [1]. На теперішній час позбавитися рубців раз і назавжди не виявляється можливим. За допомогою сучасних методик лікування можливо лише зробити грубий, широкий рубець косметично більш придатним. Найчастіше для лікування гіпертрофічних і келоїдних рубців застосовують дермабразію, хімічний і лазерний пілінги, кріодеструкцію, променеву та СВЧтерапію, хірургічне відсікання [1]. З терапевтичних методів лікування рубців можна виділити застосування ферментних препаратів (лідаза, ронідаза, колалізин, келофібраза), які діють на колаген сполучної тканини рубців, викликаючи його деструкцію, і тим самим сприяють розм'якшенню рубців [2-4]. Проте суттєвим недоліком застосування вищезгаданих препаратів є ін'єкційний шлях їх уведення, болісність процедур, гіпертермія на місці ін'єкцій, підвищення температури тіла, тахікардія [3]. Більш зручним і приємнішим для пацієнтів є місцевий метод лікування - застосування мазей, кремів та гелів. Проте арсенал цих форм окресленої спрямованості дії - є досить обмеженим. Серед лікарських препаратів для лікування гіпертрофічних і келоїдних рубців найчастіше використовують гель "Контрактубекс" (Німеччина), діючими компонентами якого є екстракт ріпчастого луку, гепарин і алантоїн [4]. Проте існують природні субстанції, у структурі яких є центр з активним ферментом. Однією з цих субстанцій є водорозчинний білково-полісахаридний комплекс (ВБПСК), який було отримано з їстівного грибу Pleurotus ostreatus. Доведеною є гіполіпідемічна активність ВБПСК [5, 6]. Відомо також, що здатність грибів роду Pleurotus руйнувати лігнін пов'язана з присутністю ферменту, що приєднаний до полісахаридного комплексу у складі гриба. Оскільки лігнін і холестерин мають схожу структуру, дія лігнінруйнуючого ферменту гриба проявляється по відношенню до холестерину [5]. Проте у біохімічному плані походження макромолекул організму людини має схожі риси. Тому, субстанція, яка впливає на метаболізм субстрату атерогенного процесу (атерогенні ліпопротеїни крові) і чинить гіполіпідемічну дію, є потенційним засобом для деструкції колагенових волокон і розм'якшення рубців. Як прототип заявленого засобу фармакокорекції рубцевої тканини вибраний засіб корекції ліпідного статусу крові з використанням водорозчинного білково-полісахаридного комплексу (ВБПСК) - біологічно активної субстанції, яка отримана з гриба Pleurotus ostreatus. Субстанція знижує рівень загального холестерину крові, рівні ліпопротеїнів низької і дуже низької щільності та підвищує рівень ліпопротеїнів високої щільності, тобто виявляє гіполіпідемічну дію [5, 6]. Гіполіпідемічна дія ВБПСК у прототипі проявлялася при внутрішньошлунковому введенні субстанції щурам. Таким чином була встановлена її системна дія. Задачею винаходу є створення засобу фармакокорекції рубцевої тканини з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus при місцевому лікуванні. Поставлена задача вирішується наступним чином. Із субстанції ВБПСК [6] шляхом змішування з допоміжними речовинами, що широко застосовуються у виробництві м'яких лікарських форм [7], готують гель. Винахід ілюструється прикладом. Приклад У білих нелінійних щурів моделювали рубець згідно з рекомендаціями Державного фармакологічного центру (ДФЦ) МОЗ України [8]. 1 UA 102209 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Вплив ВБПСК у складі гелю на стан рубцевої тканини досліджували у порівнянні з аналогом за формою випуску, фармакологічною дією і показанням до застосування - гелем "Контрактубекс" (Німеччина). Рубець відтворювали на 21 статевозрілому щуру-самцю з масою тіла 240,0-260,0 г. Були сформовані 3 експериментальні групи по 7 тварин у кожній: група № 1 - позитивний контроль (ПК) - неліковані тварини з відтвореною патологією; група № 2 - тварини, у яких на тлі патології застосовували препарат порівняння - гель "Контрактубекс" (Німеччина), група № 3 - тварини, у яких на тлі патології застосовували гель з ВБПСК. Гель з ВБПСК і гель "Контрактубекс" наносили на шкіру тварин 2 рази на день в умовно2 терапевтичній дозі 20 мг/см , яка повністю всмоктується в шкіру та достатньо її зволожує. Перед формуванням рубців шкіру тварин звільняли від шерсті шляхом нанесення депіляційного крему. Рубці відтворювали на спинах щурів по 2 наступним чином. Після розрізання шкіри на усю глибину краї рани зшивали шовковою ниткою неперервним обвивним швом. Перед зшиванням у рану засипали стерильний ліофілізований порошок ампіциліну у кількості 0,05 г для попередження запалення з виділенням гнійного ексудату. Додатково після зшивання рани рубець змащували 5 % спиртовим розчином йоду. Довжина рубця на початку експерименту складала в усіх групах 30 мм. Після загоєння ран, починаючи з 4-го дня експерименту, почали лікувати тварин, періодично звільняючи досліджувані ділянки шкіри від шерсті, яка відростала. Паралельно з лікуванням вимірювали ширину і довжину рубця. Гістологічні показники впливу препаратів на стан рубця реєстрували на 30-й день експерименту. Зразки тканин витинали з ділянки рубця та з прилеглих до нього ділянок шкіри. Підготовку зразків до дослідження проводили за загальноприйнятими методиками [9]. Ефекти препарату порівняння та гелю з ВБПСК оцінювали візуально за зміненням розмірів рубців, а також за виразністю волокноутворення (проліферація фібробластів). Результати вимірювань і розрахунків були оброблені статистично за ДФУ [10]. Для приготування мікропрепаратів рубцевої тканини використовували метод гомогенатів [9]. На момент закінчення експерименту в усіх тварин рубці скоротилися і шкіра розгладилася. Ширина рубця в групі ПК склала 1,22±0,01 мм, в групах №2 і №3-0,9±0,04 мм. У тварин групи ПК довжина рубця склала 26,8±0,06 мм. Довжина рубця у тварин групи №2 склала 26,5±0,03 мм, групи №3-25,3±0,02 мм. Таким чином, за візуальними ознаками стан шкіри покращився порівняно з групою ПК в групах № 2 (на 1,1 %) і № 3 (на 5,6 %). Результати мікроскопічного дослідження зразків рубцевої тканини тварин усіх груп представляють фіг. 1-3 (Креслення). Мікропрепарат (фіг. 1) являє собою мікроскопічний зріз рубцевої тканини щура групи позитивного контролю. Рубцева тканина добре сформована, фібробласти розташовані паралельними тяжами, колагенові волокна є досить виразними. Фіг. 2 представляє мікроскопічний зріз рубцевої тканини щура з другої групи (тварини, у яких на тлі патології застосовували препарат порівняння – гель "Контрактубекс"). В групі порівняння спостерігається зменшення ознак фіброзного перетворення шкіри. Фібробласти розташовані окремими групами, тяжі не спостерігаються. Біомікроскопічну картину зрізу рубцевої тканини щура з третьої групи (тварини, у яких на тлі патології застосовували гель з ВБПСК) представляє фіг 3. Аналізуючи мікроскопічну картину зразків рубцевої тканини щурів, лікованих гелем з ВБПСК, можна спостерігати зменшення проявів фіброзу порівняно з групою позитивного контролю і препарату порівняння. Фібробласти не утворюють тяжів, розташовуються мозаїчно. Таким чином, можна зробити висновок, що заявлений засіб - гель з водорозчинним білковополісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus – покращує зовнішній стан шкіри, зменшує прояви фіброзу, розм'якшує рубець, тобто виявляє літичну по відношенню до рубцевої тканини активність. За виразністю літичної активності гель з ВБПСК випереджає препарат порівняння "Контрактубекс" (Німеччина). Заявлений засіб є перспективним для лікування контрактур суглобів, рубців після опіків та операцій. Засіб передбачає використання поширеної в Україні доступної сировини і може бути виготовлений в умовах хіміко-фармацевтичних підприємств з використанням стандартного обладнання. Джерела інформації: 1. Ахтямов С.Н. Практическая дерматокосметология / С.Н. Ахтямов, Ю.С. Бутов. - М.: Медицина, 2003.-400с. 2 UA 102209 C2 5 10 15 20 25 2. Грагова И.М. Технология ферментных препаратов / И.М. Грагова, А.Ю. Крылова. - М.: Элевар, 2000.-512с. 3. Дроговоз С.М. Фармакологія на допомогу лікарю, провізору та студенту: Підручникдовідник / С.М. Дроговоз, В.В. Дроговоз. - Харків, 2004.-476с. 4. Компендиум 2005 - лекарственные препараты / Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. - К.: МОРИОН, 2005.-1920 с. 5. Кучеренко Н.В. Розробка складу і технології гіполіпідемічного засобу з Плевроту черепичастого: Дис… канд. фарм. наук: 15.00.01; Захищена 19.12.2008; Затв. 27.05.2009. Харків, 2008.-151 с; іл. Бібліогр.: с 124-149. 6. Патент України на винахід № 83530 від 25.07.2008 р. "Спосіб одержання білковополісахаридного комплексу гіполіпідемічної дії" (Н.В. Кучеренко, В.Г. Дем'яненко, Ю.В. Столетов). 7. Допоміжні речовини в технології ліків: вплив на технологічні, споживчі, економічні характеристики і терапевтичну ефективність / І.М. Перцев, Д.І. Дмитрієвський, В.Д. Рибачук та ін.; за ред. І.М. Перцева. - X.: Золоті сторінки, 2010.-600с. 8. Доклінічні дослідження лікарських засобів: Методичні рекомендації / Під ред. член. кор. АМН України О.В. Стефанова. - К.: Авіценна, 2002.-567 с 9. Микроскопическая техника: руководство для врачей и лаборантов / Под ред. Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова - М.: Медицина, 1996.-544 с. 10. Державна Фармакопея України / Державне підприємство "Науково-експертний фармакопейний центр".-1-е вид. Доп. 1. - Харків: РІРЕГ, 2004.-520 с. Перелік фігур креслення: 1. Фіг. 1. Мікропрепарат зрізу рубцевої тканини щура групи позитивного контролю (групи № 1). 2. Фіг. 2. Мікропрепарат зрізу рубцевої тканини щура групи № 2. 3. Фіг. 3. Мікропрепарат зрізу рубцевої тканини щура групи № 3. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 30 Гель для розм'якшення рубців з водорозчинним білково-полісахаридним комплексом Pleurotus ostreatus, який відрізняється тим, що його готують із субстанції шляхом змішування з допоміжними речовинами при наступному співвідношенні компонентів (мас. %): водорозчинний білково-полісахаридний комплекс Pleurotus ostreatus карбопол 940 триетаноламін (до рН=7) гліцерин пропіленгліколь димексид вода очищена 3 1,0 0,5 0,5 20,0 50,0 1,0 до 100,0 г. UA 102209 C2 4 UA 102209 C2 Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5