Спосіб одержання 4-{[6-(діметіламіно)гексіл]оксі}-2-фенілацетофенону та його фармацевтично прийнятних солей з кислотами

Спос об получения 4-([6-(д иметиламино)гєксил]окси)-2-фенилацетофснона формулы (32) 27 07 89 (33) СН (46)25 12 96. Бюл Н 4 (56) Машковский М Д Лекарс твенные сред ства, т 2, М , Мед ицина, 1986, с 362 (72) ФІліпп ГуеррІ (СН), Зіньз Жолідон (СН), Рене Цурфлю (СН) (73) Ф. Хоффманн-Ля Р ош АГ (СН) и его фармацевтически приемлемых солей с кислотами о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, 4-оксуі-2-фенилзцетофенон подвергают взаимодейс твию с N.N-диметил-б-амино-і-гек санолом э прису тствии трифенилфос фина и сложного дизтмлового э фира азодикарбоновой кислоты с пос ледующим выделением продук та в чис том вид е или в вид е соли с > Изобретение относитс я к органической химии 4-{[6-(Диметиламино)гексилЗокси}-2-фе нилэцетофенон форму лы I СН, ° и его фармацевтически приемлемые соли с кислотами можно использовать д ля под ав ления или предупрежд ения грибковых инфекций, в час тнос ти локальных ин фек ций или инфекций исего организма, которые вызываютс я патогенными грибками, а также для приготовления с редс тв, обладающих антигрибковым д ейс твием Соед инение ! обладает не только ярк о выраженным антигрибк овым д ейс твием но и пок азывает с инергетические э ффек ты в комбинации с другими извес тными вещ ес твами, обладаю щими антигрибковым д ейс твием, которые тормозят биосинтез с теролов, как кетоконазол и тербинафин Целью изобретения является разработка спос оба получения нового соед инения формулы I, обладающего повыш енным антигрибковым д ейс твием Соед инение I и его фармацевтически приемлемые с оли с кис лотами получают взаимодейс твием 4-окси~ 2-фенилацетофенона с N N-дмметип-б-амино-і-гексанолом в прису тс твии трифенилфос фина и с ложного диэтилового э фира азодикарбоновой кислоты, а продукт реакции выделяют в чис том пиде in и в виде соли В случае проводимой согласно изобретению реакции речь идет об известном методе, а именно о так называемом 'связывании Мицу нобу ' Р еакция провод итс я преимущественно в инертном органическом рас творителе и в температу рном д иапазоне от приблизительно 0°С до температуры кипения ре ак ци он но й с мес и П од х од ящ им рас творителем являю тс я например, хлорированные низш ие углевод ород ы как мети ел О з 11235 ленх лорид и х лороформ, и простые э фиры ~ с открытой цепью и циклические - как д иэтиловый э фир, метил-трет, бу тиловый э фи р и тетрэгнд рофу ран, а также их Приготовление фармацевтически при- 5 емлсмых солей с кис лотами соед инения I можно осущес твлять извес тным и привычным каждому с пециалис ту методом. При этом имеются в виду соли с фармацевтически приемлемыми неорганическими и орга- 10 ммческими кис лотами. Пред почтительными солями с кис лотами являются гид рох лориды, гидробромиды, сульфаты, мигрлта, цитраты, аце та ты, с у к цина ты, фу м ара ты, мстапсульфоматы и п-толуолсульфоноти. 15 П р и м е р 1. Смесь из 2, 5 г N. N-Диметмл-6-аміш о-1-гекс онола, 3/. г 4-окс и-2-фенилацетофенона, 4,5 г трифзнил фос фина и 140 мл тетрагпдрофурана при 20° мед ленно смешивают с рас твором 2,7 мл диэ тилового 20 э фира азэдикарбоноБой кис лоты D 15 млтеграгид рофу ранз. После окончания смеш ивания (прикапывания) смесь еще в течение 1 ч перемешивают при комнатной температуре. Затем реакционную смесь упаривают на 25 роторноя испарителе, а ос таток х роматог рафиру ют на окс ид е алюминия. Полу чают 4{[(б-д иметиламино)гексил] окси}-2- фенилацетофенон в виде бесцветного твердого вещества с температу рой плавления &0 - 71° 30 (выход 25%). П р и м е р 2. Соединение 4-{[ (6-Диметилэмипо)гексил]окси}-2- фенилацетофонона может следующим образом ис пользоваться д ля приг отовления таблеток в качес тве био- 35 логически активного вещес тво: Составные части мг/ таблетка биологически ак тивное вещество 200 молочный сахар порошок 100 40 гшаидон к 30 15 Na-карбоксимет ил -крахмал 10 тальк • 3 стеарат магния 2 сес таблетки 330 45 ІЗиологичоски ак тивное вещ ес тво и молочный с ахар (пу льверизованими) интенсивно перемеш ивают. Полученную с мес ь затем смачивают рас твором Повидома К 30 и месят, пос ле чего полученну ю массу гра- 50 ну лируют, высушивают п прос еивают. Гранулят смешивают с ос тальными сос тавными час тями и прессуют о таблетки требу емого размера. Соед инение ! и его фармацевтически 55 приемлемые с оли с кис лотами облад ают весьма ценными антигрибкооыми спойс івами. Они яоляк>гся д ейс твенными против больш ого чис ла патогенных грибкоо, которые обус лавливают локальные ин фекции и ин фекции вс его организма, как Candida alblcans и I llst oplasma capsulat um 2, 3-Эпок с исквален-лапос терол-циклаза, э нзим, учас твующий в биос интезе с теролоз зпкприотических клеток, являетс я существенным э нзимом д ля г рибк ов, Так, например S. cerevisiaR siarnm, в к отором э тот энзим отсу тс тву ет, является нежизнеспособным. Тормозящ ее (под авляющее) д ейс твие соединения I на названный энзим из С. alblc nns дыпо принято кзк мера для оигигрнбковото дейс твия. Торможение может быть измерено, например, пос редс твом описанного метода, Определение 1С50-зчачепим длп подавления 2,3-Эпоксискваленланос терол-циклазы Candida alblcans. Клетки культуры . Candida albfeans в конце логарифмической фазы рос та были собраны и промывались 100 мМ фос фатным бу фером (рН=6,9), пищеварительным бу фером и 50 мМ фос фатным бу фером (рН=7,4), который с одержал 1 М маниитола и 5 мМ ДТТ. 1 г э тих клеток взвеш иваютс я D 5 м л пищ еварительного бу фера, смешиваютс я с 1 мг Цимолазы 100Т и 12,5 мкл /J-меркаптоэтанола и инкубируются в течение 30 мину т при 30°С. Образующиеся протоплас ты изолируются посредс твом центрифугирования {10 мин при 2500 г) и, в заключение, посред ством-добавления 2 мл 100 мМ фос фатного бу фера (рН = 6,9)обрабатываются до растрескивания. Пос редс твом нового центрифугирования (10 мин при 10000 г) получают свободный от к леток экс трак т (CFE ). Он будет разбавлятьс я 10 мг протеина/ мл, и рН будет устанавливаться 6,9. А ктивнос ть 2, 3-Эпокс исквален-ланостерол-циклазы в CFE измеряется посредством превращения С-Сквален-э покс ид о о прису тс твии н-д ецилпентаокс иэ тилена как детергента. Титрование с подх одящ им количес твом тес тового вещес тва позволяет опред елить ICs o-значение (концентрация тестового вещества, которая снижает активнос ть энзима наполовину), Опыт провод ится следующим образом. Посредс твом обработки УФ -излучением подготаплиоают 250 мкм рас твор С1 Скоален-зпокс ид а в 00 мМ фос фа тном бу фере (рН = 6,9) при добавлений l% н-д ецилпеитаокс изтилена. 100 мкл э того рас твора с меш иваютс я с 20 мкл рас твора тес тового вещества в диметилсульфоксиде (или же 20 мкл чис того диметилсульфоксидл о качес тве контроля). Пос ле д обавления 880 мкл CFE х орош о перемешанный растаор а течение 1 ч, при 30°С. при вс тряхивании, инку бируется. В заключение, реакция 11235 ос танавливаетс я пос редс твом д обавления GOO мкл 15%-го гиАроксида калия в 90% - М этаноле. Смесь дважд ы экс трагиру ется 1 мл нгсксана, гексан у паривается и липидный ос та ток внос итс я із 20 0 мкл д иэ тп лового э фира. Пос ле тонк ослойной хроматографии на силикагеле с метиленх лорид ом в качес тве рас творителя плас тины исследуютс я на рад иоактивном тонк ос лойн ом с каниру ю щем устройс тве. В привед енных ус ловиях обнаружили исклгачитетыю ланос тс рол а качес тве рад иоактивного п род у кта. Е го количес тво сравниваетс я с количес твом рад иоактивного ламостерола на контроле. Таким образом, определили д ля соединения 1 ICs o ~ значение, с ос тавляющее 0, 065 мкг/ кл. Уже упомяну тое синерг с тическоо действие соед инения I и его фармацевтически приемлемых кис лых с олей в комбинации с другими вещ ествами, тормозящими (под аолизающими) биос интез с теролоо, так ими как кетокоиазол и тербниа фин, может быть пок азано, например, пос редс твом метод а arap-разбавленил. Для э того используют казитонагар и припнтку (10 клеток/мл) культуры Candida albicans, возрас т которой сос тавляет 48 ч. Тес товые вещес тва (TS, соединения і) ис пользуютс я D концентрациях 80 1,25 мкг/мл, а вещества, подавляющие биос интез с теролов (SB H) - в концентрациях 20 - 0, 001 мкг/мл, прич ем шаг рзэ баплемия составляет каждый рал 1: 2. Культу ры каж дый раз инку бируются в течение 2 дней при 37°С. Затем ус танавливают минимальные под авляющие концентрации (MIC) различных биологически ак тивных вещ ес тв при их инд ивиду альном и комбинированном применении, и из установленных МІС-значений рассчитывают под авляющие концентрации (F1CJ по следующей формуле: FI г -М!С(Т$ инд ивид у альное) MIC ( TS с комбин ац ии) ч- МІЄ ( S ОН инд ивидуальное ) MIC( S В И в к омбина ции ) Синерготпч еский э ффект сущес тву ет, когд а FlC