Амінокислотні похідні хіноксалін-2,3-діону, фармацевтична композиція, що має антагоністичну відносно рецептора глутамату і протисудомну активність, спосіб лікування захворювань судин мозку або судом і проміжний

1 АМІНОКИСЛОТНІ ПОХІДНІ хіноксалш-2,3-дюну загальної формули (І) R О Де R - амінокислотний залишок формули Л -. N Де - водень або метил, - група формули О Де - гідроксил, нижчий алкоксил, аміногрупа, - нижчий алкіл або аралкіл, - водень, бром, нітро, F 2 нижчий алкіл, ВІНІЛ, ? при цьому F?2, може знаходитися в b-положенні, а група R-CH2- в а-положенні кільця, або їх фармацевтично прийнятні солі 2 АМІНОКИСЛОТНІ ПОХІДНІ хіноксалш-2,3-дюну зага льної формули (І) згідно з п 1, вибрані з групи, що включає [(7-бром-2,3-д юксо-б-вініл-1,2,3,4тетрапдрохіноксалін-5-ілметил)метиламшо]оцтову кислоту, [(7-бром-6-етил-2,3-д юксо-1,2,3,4тетрапдрохіноксалін-5-ілметил)метиламшо]оцтову кислоту, етиловий естер [(6-етил-7-нітро-2,3-дюксо-1,2,3,4тетрапдрохіноксалш-5ілметил)метиламшо]оцтовоі кислоти, [(6-етил-7-нітро-2,3-д юксо-1,2,3,4тетрапдрохіноксалін-5-ілметил)метиламшо]оцтову кислоту 3 Фармацевтична композиція, що має антагоністичну відносно рецептора глутамату активність і протисудомну активність, що містить активну речовину і фармацевтично прийнятний носій, яка відрізняється тим, що як активну речовину містить терапевтично ефективну КІЛЬКІСТЬ сполуки загальної формули (І) згідно з пунктом 1 4 Спосіб лікування захворювань судин мозку або судом шляхом введення активної речовини, який відрізняється тим, що як активну речовину використовують терапевтично ефективну КІЛЬКІСТЬ сполуки загальної формули (І) згідно з пунктом 1 5 Етиловий естер [(2-амшо-5-бром-3-нітро-6вінілбензил)метиламшо]оцтовоі кислоти, що використовується як вихідна сполука для одержання сполуки формули (І) згідно з п 1, в якій R означає залишок N-метиламшооцтовоі кислоти, Ri - бром і R2 - В І Н І Л О (О со ю 54396 Винахід відноситься до нових похідних хіноксалін-2,3-дюну, що мають ЦІННІ біологічні властивості, більш конкретно амінокислотних похідних хіноксалш-2,3-дюну, фармацевтичної композиції, що має антагоністичну відносно рецептора глутамату і протисудомну активність, способу лікування захворювань судин мозку або судом і проміжного продукту З міжнародної заявки WO 95/12417 від 11-го травня 1995 р ВІДОМІ ПОХІДНІ хіноксалш-2,3-дюну, що мають біологічні властивості, що зокрема є антагоністами рецептора глутамату Задачею винаходу є розширення асортименту похідних хіноксалш-2,3-дюну, що мають ЦІННІ біологічні властивості Поставлена задача вирішується пропонованими амінокислотними похідними хшоксалш-2,3дюну загальної формули (1) (1) де R - амінокислотний залишок формули Де кислоту До фармацевтичне прийнятних кислотноадитивних солей сполук формули 1 відносяться солі з нетоксичними неорганічними кислотами, такими, як хлорводнева кислота, азотна кислота, фосфорна кислота, сірчана кислота, бромводнева кислота, йодводнева кислота, фосфориста кислота й ш , а також солі з нетоксичними органічними кислотами такими, як аліфатичні моно- і дикарбонові кислоти, заміщені фенілом алканові кислоти, оксиалканові кислоти, алкандикарбонові кислоти, ароматичні кислоти, аліфатичні і ароматичні сульфокислоти й ш До таких солей зараховують сульфат, пиросульфат, бісульфат, сульфіт, бісульфіт, нітрат, фосфат, пдрофосфат, первинний фосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромід, йодид, ацетат, пропионат, каприлат, ізобутират, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацинат, фумарат, малешат, манделат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динітробензоат, фталат, фенілсульфонат, толуол сул ьфонат, фенілацетат, цитрат, лактат, тартрат, метансульфонат і ш Можливі І СОЛІ З амінокислотами, як, наприклад, аргинат і ш і глюконат, галактуронат Кислотно-адитивні солі зазначених основних сполук одержують звичайним образом шляхом контактування вільної основи з достатньою КІЛЬКІСТЮ бажаної кислоти Вільна основа може регенерувати шляхом контактування солі з основою і виділенням вільної основи звичайним чином ВІЛЬНІ основи відрізняються від ВІДПОВІДНИХ солей визначеними фізичними властивостями, як розчинністю в полярних розчинниках, однак для мети представленого винаходу солі є еквівалентами ВІДПОВІДНИХ ВІЛЬНИХ ОСНОВ - водень або метил, - група формули Де Rs - гідроксил, нижчий алкоксил, амід, F?6 - нижчий алкіл або аралкіл, Ri - водень, бром, нітро, F?2 - нижчий алкіл, ВІНІЛ, при цьому F?2, може знаходитися в Ьположенні, а група R-Cbb- в а-положенні кільця, або їх фармацевтичне прийнятні солі Переважні сполуки формули (1), вибрані з групи, що включає [(7-бром-2,3-дюксо-6-вшіл-1,2,3,4тетрапдрохіноксалш-5-ілметил)метиламшо]оцтову кислоту, [(7-бром-6-етил-2,3-дюксо-1,2,3,4тетрапдрохіноксалін-5-ілметил)-метиламшо] оцтову кислоту, етиловий естер [(6-етил-7-нітро-2,3-дюксо1,2,3,4-тетрапдрохшоксалін-5-ілметил)метиламшо]оцтовоі кислоти, [(6-етил-2,3-дюксо-1,2,3,4тетрапдрохіноксалін-5-ілметил)метиламшо]оцтову Деякі зі сполук представленого винаходу можуть існувати в нерозчиненій формі, а також у розчиненій формі, включаючи пдратовану форму Як правило, розчинені, у тому числі і пдратовані форми є еквівалентами нерозчинених форм Деякі з сполук представленого винаходу можуть існувати у виді суміші цис- і транс-ізомерів у виді окремих цис- і транс-ізомерів R- і Sстереоізомерів Суміш ізомерів, а також окремі ізомери входять в обсяг представленого винаходу Амінокислотними залишками вищенаведеної формули є, наприклад, аланін, р -аланін, цистеїн, гліцин, фенілаланін і валін Пропоновані сполуки мають ЦІННІ біологічні властивості завдяки їхній сильній антагонізуючій дії на збуджуючу амінокислоту в одному з зв'язуючих сайтів рецепторів глутамату у з'єднувальному сайті рецептора а-амшо-3-пдрокси-5-метил-4ізоксазолпропюновой кислоти (далі АМПК) або рецептора солі З-карбоксиметил-4ізопропенілпроліна (далі КІПП) на рецепторах АМПК і рецепторах, що не зв'язуються з рецептором N-метил-О-аспартату (далі NMDA) або на сайті гліцину (далі ГЛІ) рецептору NMDA Спорідненість пропонованих сполук з рецепторами АМПК визначалося за способом, описаним Honor Т і ш , Neuroscience Letters 1985, 54 27-32 У даному ДОСВІДІ сполуки згідно з винаходом виявляють виражену як КТбо активність, рівну 3 0,71 ГЛІ 0,049 0,20 1,8 0,084 0,089 Крім того, попереднім показником наявної m vivo активності на центральну нервову систему стосовно активності протисудомного засобу і потенційного нейрозахисту є досвід максимального електрошка мишей штаму CF-1 (20-25г) при використанні рогових електродів за стандартними способами, описаними нещодавно КгаІІ і ш , Epilepsia, 1988, 19 409-428 Сполуки представленого винаходу, як правило, виявляють виражену як ЕД50 активність, рівну < 50мг/кг Завдяки зазначеній біологічній активності другим об'єктом представленого винаходу є фармацевтична композиція, що має антагоністичну у відношенні рецептора глутамату і протисудомну активність, що крім фармацевтичне прийнятного носія містить сполуки вищенаведеної загальної формули (1) утерапевтичне ефективній КІЛЬКОСТІ Пропонована фармацевтична композиція може являти собою будь-який стандартний лікарський препарат Так, наприклад, як тверді препарати можна назвати таблетки, капсули, як рідкі препарати - розчини, суспензії, емульсії, еліксири або наповнені ними капсули, причому всі ці форми застосовують орально, фармацевтична композиція може існувати і у виді супозиторіїв для ректального застосування, або у виді стерильних розчинів для парентерального (у тому числі, підшкірного) застосування Одержання етилового естеру [(2-амшо-5-бром3-нітро-6-вінілбензил)метиламшо]- оцтової кислоти У суспензію 2,86г (10 ммоль) 5-бром-2-метил7-нітро-1,2,3,4-тетрапдроізохинолш-8-іламину і 2,76г (20 ммоль) карбонату калію в середовищі 50мл ацетону додають 1,67г (10 ммоль) етилбромацетату Реакційну суміш змішують зі зворотним холодильником до завершення, що визначають тонкошаровою хроматографією на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші петролейного ефіру і етилацетату в співвідношенні, рівному 1 1 Летучі речовини випаровуються під вакуумом і до жовтого залишку додають 150мл води Продукт екстрагують два рази, використовуючи по 150мл етилацетату, екстракти етилацетату промивають два рази, використовуючи по 50мл води, і сушать над сульфатом магнію Продукт очищають хроматографією на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші петролейного ефіру і етилацетату в співвідношенні, рівному 95 5 - 75 25 Вихід 2,25г, 60 %, температура плавлення 68-70°С, Масспектроскопія (хімічна іонізація) М + 1 = 373 Визначають вміст С, Н і N сполуки Ci4HisBrN3O4 C, 45,18, Н, 4, 87, N, 11,29 Знайдено С, 45,46, Н, 4,95, N, 10,99 Н,С ос,н е НзС. ос,н 300°С Mac-спектроскопія (хімічна іонізація) М + 1 = 368 Визначають вміст С, Н і N сполуки Ci4Hi4BrN3O4-HCI С, 41,56, Н, 3,74, N, 10,38 Знайдено С, 41,5, Н, 3,87, N, 10,05 Приклад 2 О ^ ^г"» НХ н,с Одержання амонієвої солі [(6-етил-7-нітро-2 3дюксо-1,2,3,4-тетрапдрохіноксалін-5ілметил)метиламшо]оцтовоі кислоти 0,368г [(6етил-2,3-дюксо-1,2,3,4-тетрапдрохіноксалін-5ілметил)метиламшо]оцтовоі кислоти розчиняють у 5мл концентрованої сірчаної кислоти Темний розчин охолоджують до 0°С и 0,5г (5 ммоль) нітрату калію додають при одночасному перемішуванні Реакційній суміші дають нагрітися до кімнатної температури і охолоджують льодом протягом 12 годин Світло-коричневий залишок фільтрують і матковий розчин підлуговують шляхом барботування аміаку Одержують світло-зелений осад, що фільтрують і сушать на повітрі Вихід 0,100г, 25,4 %, температура плавлення > 300°С Масспектроскопія (хімічна іонізація) М + 1 = 337 Приклад З ос,н. Одержання етилового естеру [2,3-діамшо-6етилбензил) метиламино]оцтовоі кислоти Розчин 0,5г (1,34 ммоль) етилового естеру [(2аміно-5-бром-3-нітро-6-вшілбензил)- метиламшо] оцтової кислоти і 0,13г (1,34 ммоль) ацетату калію в середовищі етанолу піддають гідруванню газоподібним воднем при приблизно 350кПа на 0,1г 20%- ного паладію на вугіллі в пристрої Парра Реакційну суміш фільтрують і фільтрат випарюють в ротаційному випарнику з одержанням 0,42г напівтвердої речовини, що використовують далі без додаткового очищення Н-ЯМР (CDCI3) 1,09 (т, ЗН, J = 7 4Гц), 2,27 (с, ЗН), 2,52 (кв, 2Н), 6, 92 (с, 1Н) ос,нк Одержання етилового естеру [(2,3-діамшо-5бром-6-етилбензил)метиламшо]- оцтової кислоти Розчин 0,475г (1,27 ммоль) метилового естеру [(2-амшо-5-бром-3-нітро-6вінілбензил)метиламшо]оцтовоі кислоти в середовищі 75мл етанолу піддають гідруванню газоподібним воднем при приблизно 350кПа в присутності 0,2г нікеля Ренея Розчинник випарюють з одержанням 0,450г білого продукту, що використовують далі без додаткового очищення 54396 Одержання [(7-бром-6-етил-2,3-дюксо-1,2,3,4тетрапдрохіноксалш-5-ілметил)- метиламшо]- оцтової кислоти У розчин 0,450г етилового естеру [(2,3-діамшо5-бром-6-етилбензил)метиламшо]- оцтової кислоти в середовищі 5 мл 5-н соляної кислоти при перемішуванні додають 0,327г (2,6 ммоль) дигідрату щавлевої кислоти Реакційну суміш нагрівають до 90°С протягом 16 годин, після чого додатково додають 0,163г (1,3 ммоль) дигідрату щавлевої кислоти Через дві години суміш охолоджують і виділяють 0,037г чистового осаду з домішками Після подальшого охолодження одержують не зовсім білу тверду речовину, що фільтрують, промивають водою і метанолом і сушать Вихід 0,174г, 34 %, температура плавлення > 245-248°С Масспектроскопія (хімічна іонізація) М-СС^Н + 1 = 326 (-СО2Н) Н-ЯМР (CDCI3) (5 м д ) 1,15 (т, ЗН, J = 8,5Гц), 2,84 (с, ЗН), 3,11 (kb, 2H), 4,32 (с, 2Н), 4,71 (с, 2Н, обмін D2O), 7,56 (с, 1Н) Приклад 4 О н,с н,с Одержання етилового естеру [(6-етил-2,3дюксо-1,2,3,4-тетрапдрохіноксалін-5ілметил)метиламшо]оцтовоі кислоти Розчин 0,57г (1,9 ммоль) етилового естеру [(2,3-діамшо-б-етилбензил)метиламшо]оцтовоі кислоти і 0,472г (4 ммоль) диметилоксалату в середовищі 5 мл етанолу нагрівають зі зворотним холодильником протягом 16 годин Розчинник частково випарюють, а реакційну суміш охолоджують Одержують 0,828г жовто-коричневого осаду Продукт очищають колоночною хроматографією на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші петролейного ефіру і етилацетату в співвідношенні, рівному 95 5 - 75 25 Вихід 0,274г, 45% Масспектроскопія (хімічна іонізація) М + 1 = 320 Визначають вміст С, Н і N сполуки C16H21N3O4 C, 60,18, Н, 6,63, N, 13,16 Знайдено С, 59,87, Н, 6,63, N, 12,74 н,с Одержання етилового естеру [(6-етил-7-нітро2,3-дюксо-1,2,3,4-тетрапдрохіноксалін-5-ілметил) метиламшо] оцтової кислоти У розчин 0,175г (0,57 ммоль) етилового естеру [(6-етил-2,3-дюксо-1,2,3,4-тетрапдрохіноксалін-5ілметил)метиламшо]оцтовоі кислоти в середовищі 2мл концентрованої сірчаної кислоти, при перемішуванні і 0°С додають 0,071г (0,71 ммоль) нітрату калію Реакційну суміш змішують протягом 16 годин і виливають на лід Коричневий осад фільтру 10 ють, промивають водою і сушать Продукт очищають колоночною хроматографією на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші трихлорметану і метанолу в співвідношенні, рівному 95 5 80 20 Вихід 0,135Г, 65%, температура плавлення 110°С (скипання), 185°С Mac-спектроскопія (хімічна іонізація) М + 1 = 365 Визначають вміст С, Н і N сполуки Ci6H2oN406 С, 52,74, Н, 5,53, N, 15,38 Знайдено С, 52,98, Н, 5,48, N, 15,0 Приклад 5 НО. Вг, Одержання 2-бромметил-3-метил-6нітрофеніламину В розчин 2,18г (6,6 ммоль) тетрабромметану і 1,73г (6,6 ммоль) трифенілфосфшу в середовищі 100 мл безводного простого ефіру, при перемішуванні в атмосфері азоту додають 1,08г (5,9 ммоль) (2-амшо-6-метил-3-нітрофеніл)метанолу Реакцію зупиняють після контролювання тонкошаровою хроматографією на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші петролейного ефіру і етилацетату в співвідношенні, рівному 1 1 Реакційну суміш фільтрують і фільтрат випарюють Темножовтий залишок хроматографують на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші петролейного ефіру і етилацетату в співвідношеннях 9 1 8 2 Жовта тверда речовина, 0,620г, 43% Н-ЯМР (CDCI3) 2,38 (с, ЗН), 4,49 (с, 2Н), 6,45 (шир с, 2Н), 6,57 (д, 1Н, 8,7Гц), 8,03 (д, 1Н, 8,7Гц) Де Me - метил, Et - етил Одержання етилового естеру [(2-амшо-6метил-3-нітробензил)метиламшо]- оцтової кислоти У суспензію 0,765г (5 ммоль) етилового естеру саркозину у виді хлоргидрату в середовищі Юмл суміші диметилформаміду і тетрапдрофурану в співвідношенні, рівному 1 1, при перемішуванні додають 1,01г (10 ммоль) триетиламіну Через 15 хвилин додають 0,6г (2,4 ммоль) 2-бромметил-Зметил-6-нітрофеніламину Реакційну суміш змішують при кімнатній температурі протягом 18 годин і піддають випарюванню Продукт екстрагують з використанням ЮОмл трихлорметану, промивають водою і сушать над сульфатом магнію Розчинник випарюють з одержанням 0,711 г масла, що хроматографують на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші петролейного ефіру і етилацетату в співвідношенні, рівному 95 5 - 80 20 Одержують оранжево-жовту тверду речовину Вихід 0,530 г, 77% Mac-спектроскопія (хімічна іонізація) М + 1 = 282 11 54396 12 ни Вихід 0,38Г, 62% Mac-спектроскопія (хімічна іонізація) М + 1 = 306 Аналогічно прикладам 1-5 одержують ще сполуки формули (1), приведені в таблиці 2 Таблиця 2 Приклад № Т Пл °С Де Me - метил, Et - етил Одержання етилового естеру [(6-метил-2,3дюксо-1,2,3,4-тетрапдрохіноксалін-5-ілметил)- метиламшо] оцтової кислоти Розчин 0,49г етилового естеру [(2-амшо-6метил-3-нітробензил)метиламшо]оцтовоі кислоти в середовищі 75мл тетрапдрофуране піддають гідруванню газоподібним воднем при приблизно 350кПа на 0,2г нікелю Ренея в пристрої Парра Реакційну суміш фільтрують, 0,500г темної твердої речовини обробляють 0,295г (2,5 ммоль) диметилоксалату в середовищі метанолу Реакційну суміш нагрівають зі зворотним холодильником протягом 16 годин і піддають випарюванню Продукт екстрагують ЮОмл трихлорметану, промивають водою і сушать над сульфатом магнію 0,689г неочищеного продукту хроматографують на силікагелі з застосуванням у якості елюенту суміші трихлорметану і метанолу в співвідношенні, рівному 100 1 - 95 5, з одержанням жовтої твердої речови 224 он hL О ОН 320(розк) 260-265 232-235 10 Підписано до друку 03 04 2003 р 225 Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24