Похідні 1,3,5-триазину як ліганди для людських рецепторів аденозину-а3

1. Сполуки загальної формули (1) UA 2 (19) 1 C2 (54) ПОХІДНІ 1,3,5-ТРИАЗИНУ ЯК ЛІГАНДИ ДЛЯ ЛЮД СЬКИХ РЕЦ ЕПТОРІВ АДЕНОЗИНУ-А3 3 77816 4 7. Сполуки за п. 1 загальної формули (1), де Y – R1 1 група загальної формули (С), а R1, R2, R3, R4, R5, R9 R6, Х та n мають значення, наведені у п. 1. N 8. Сполуки за п.1 загальної формули (1), де R1=Сl, R2=Н, Х=NH, Y – одна з груп (А), (В) або (С), R6=Н, R 10 Z , (C) n=1, Z=О, R10=Н, а R3, R4, R5, R7 , R8, R9 та R11 мау якій: ють значення, наведені у п. 1. R5 – ОН або СН 2OН, 9. Сполуки за п. 1 загальної формули (1), де R1=Сl, R6 – Н, алкіл(1-3С), феніл, NH2, N-(ді)-алкіл(1-3С), R2=Н, Х=NH, Y – одна з груп (А), (В) або (С), R5=3ОН, О-алкіл(1-3С) або гідроалкіл(1-2С), СН2OН, R6=Н, n=1, R7=СН3, R8=Н, R9=Н , Z=О, n має значення 0, 1 або 2, R10=Н, R11=СН3, а R 3 та R4 мають значення, навеR7 – алкіл(1-3С), бензил, гідроксіалкіл(1-2С) або дені у п. 1. метоксіалкіл(1-2С), 10. Сполуки за п. 1 формули (8) та їх енантіомери: R8 та R9 незалежно один від одного - Н, галоген, Cl алкіл(1-3С), СF3, ОН, О-алкіл(1-3С), N-(ді)-алкіл(13С), 1-морфолініл, 1-піперидиніл, 1-піперазиніл, O N N ОСF3, SСН3 , SОСН3 або SO 2СН3, (8). R10 – Н або алкіл(1-3С), O N N N H H R11 – Н, алкіл(1-3С), бензил, гідроксіалкіл(1-2С) або метоксіалкіл(1-2С), OH Z – NOH, NОалкіл(1-3С), О або S, 11. Сполуки за п. 1 формули (9) та їх фармакологічно прийнятні солі й усі сполуки Cl формули (1), де замісники на потенційно асиметO ричних атомах вуглецю знаходяться або у RN N S (9). конфігурації, або у S-конфігурації, а також їхні O N N проліки. N R H H 2. Сполуки за п. 1 загальної формули (1), де R1 OH представляє галоген, алкіл(1-3С), О-алкіл(1-3С), 12. Фармацевтична композиція, яка містить фарСF3, NH2 або N-(ді)-алкіл-(1-3С); R2, R3 та R4 незамакологічно прийнятну кількість принаймні однієї зі лежно один від одного представляють Н, галоген, сполук, вказаних в пп. 1-11. алкіл(1-3С), СF3, ОН, О-алкіл(1-3С), феніл, N-(ді)13. Застосування сполуки, вказаної в будь-якому з алкіл(1-3С), 1-морфолініл, 1-піперидиніл, 1пп. 1-11, для приготування фармацевтичної компіперазиніл, ОСF3, SСН3, SOСН3, SO 2СН3, або R2 позиції для лікування розладів, пов’язаних з рецета R3 разом з фенільним кільцем, до якого вони пторами аденозину-А3, або таких, що їх можна приєднані, представляють кільцеву систему бенлікувати дією на ці рецептори. зофурану, бензодіоксану або бензодіоксолану, Х 14. Застосування за п. 13, яке відрізняється тим, представляє NH, N-алкіл(1-3С), СН2, О, S або вугщо зазначеними розладами є гострий та хронічний лець-вуглецевий зв’язок, Y представляє груп у забіль, запальні хвороби (артрит, множинний склегальної формули (А) або (В), у якій R5 - ОН або роз, астма та псоріаз); шлунково-кишкові захворюСН2OН; R6 представляє Н, алкіл(1-3С), феніл, NH2, вання (виразка, запальна хвороба кишечнику або N-(ді)-алкіл(1-3С), ОН, О-алкіл(1-3С) або гідроксіахвороба Крона, виразковий коліт); алергійні реакції лкіл(1-2С); n має значення 0, 1 або 2; R7 представ(екзема, атопічний дерматит, ринит); серцеволяє алкіл(1-3С), бензил або гідроксілакіл(1-2С); R8 судинні захворювання (інфаркт міокарда, аритмія, та R9 незалежно представляють Н, галоген, алгіпертензія, тромбоз, анемія, атеросклероз, грудна кіл(1-3С), СF3, ОН, О-алкіл(1-3С), N-(ді)-алкіл(1жаба), шкірні захворювання (сверблячка, вовчак, 3С), 1-морфолініл, 1-піперидиніл, 1-піперазиніл, кропивниця); офтальмологічні розлади (глаукома); ОСF3, SСН3 , SОСН3, SO 2СН3, a R10=Н. респіраторні розлади (хронічні обструктивні леге3. Сполуки за п. 1 загальної формули (1), де Y – неві захворювання, бронхіт, цисто фіброз); розлади група загальної формули (А), а R1, R 2, R3, R 4, R5, центральної нервової системи, серед них різні R6, Х та n мають значення, наведені у п. 1. форми епілепсії, інсульт, депресія, безсоння; роз4. Сполуки за п. 1 загальної формули (1), де Y – лади, пов’язані з ураженням пізнавальної здатносгрупа загальної формули (А), а R1, R 2, R3, R 4, R5, ті та пам’яті, як хвороба Альцгеймера, хвороба R6, Х та n мають значення, наведені у п. 2. Крейцфельда-Якоба, хвороба Гантінгтона, хворо5. Сполуки за п. 1 загальної формули (1), де Y – ба Паркінсона, нейрореабілітація (посттравматичні група загальної формули (В), а R1, R2, R3, R 4, R5, ураження мозку); гострі травми мозку або хребта; R6, Х та n мають значення, наведені у п. 1. діабет, остеопороз, захворювання імунної систе6. Сполуки за п. 1 загальної формули (1), де Y – ми, різні карциноми та лейкемія, бактеріальні та група загальної формули (В), а R1, R2, R3, R 4, R5, вірусні інфекції. R6, Х та n мають значення, наведені у п. 2. R8 Цей винахід стосується групи нових похідних триазину, які є лігандами для людських рецепторів аденозину-A3. Винахід також стосується фармаційних композицій, що містять фармаційно дійсну 5 77816 6 дозу принаймні одного з цих нових похідних триΥ - гр упа загальної формули (А), (В) або (С): азину в якості діючої речовини. Фармакологічна активність кофеїну та теофіліну - дво х відомих природних сполук - виявляється у взаємодії з рецепторами аденозину. Це відкриття мало великий вплив на дослідження рецепторів аденозину. На цей час виявлено чотири типи рецепторів аденозину, які позначаються у якій: А1 , А2A, А2В та А3. Усі вони належать до суперроR5 - ОН або СН 2ОН дини з семи трансмембранних рецепторів, пов'яR6 - Η, алкіл(1-3С), феніл, ΝΗ2, N-(ді)-алкіл(1заних з -протеїном. Рецептори аденозину є та бе3С), ОН, О-алкіл(і-3С) або гідроалкіл(1-2С), руть участь у найрізноманітніших біологічних n має значення 0,1 або 2, процесах. Тому протягом останніх десятиріч тераR7 - алкіл(1-3С), бензил, гідроксіалкіл(1-2С) певтичний потенціал лігандів рецепторів аденозиабо метоксіалкіл(1-2С), ну привертав величезну увагу дослідників. Серед R8 та R9 незалежно один від одного - Н, галоостанніх оглядів назвемо [S.Hess, Recent advances ген, алкіл(1-3С), CF3, ОН, О-алкіл(1-3С), N-(ді)in adenosine receptor antagonist research, Expert алкіл(1-3С), 1-морфолініл, 1-піперидиніл, 1Opin.Ther. Patents 11, 1547-1562, 2001, та піперазиніл, OCF3, SCH3, SOCH 3 або SO 2CH3, M.A.Jacobson, Adenosine receptor agonists, Expert R10 - Η або алкіл(1-3С), Opin.Ther. Patents 12 (4), 489-501, 2002]. R11 - Η, алкіл(1-3С), бензил, гідроксіалкіл(1-2С) На ліганди для різних рецепторів аденозину або метоксіалкіл(1-2С), подано чимало заявок і одержано патентів. Лише у Ζ - ΝΟΗ, NОалкіл(1-3С), О або S, двох згадуються триазини. У заявці WO 991163 та їх фармаційно прийнятні солі. описано низку 2,4-бісфенілзаміщених триазинів, При описі замісників скорочення "алкіл(1-3С)" що виявляють наномолярну спорідненість до людозначає метил, етил, пп-пропил або ізопропил. ських рецепторів аденозину-А1. У цьому описі "С2-С8 циклоамін" означає будьДруга заявка, у якій описуються триазини, а який циклічний амін, що містить у кільці від 2 до 8 саме JP 11158073, є найближчим аналогом цього атомів вуглецю. Циклоамінове кільце може містити винаходу. Там йдеться про низку заміщених 1,3,5інші атоми й може бути заміщеним. Приклади С 2триазинів, які є лігандами для людських рецептоС8 циклоамінів - піролідиніл, піперидиніл, морфорів аденозину-А3 , причому наймогутніший з них лініл, азиридиніл, піролініл та подібні. посідає спорідненість близько 15нМ. У даному описі "можливо заміщений" означає, Зараз несподівано встановлено, що у низці що та чи інша група може бути або не бути надалі похідних триазину з новою комбінацією замісників заміщена однією або кількома групами, обраними певна група сполук посідає спорідненість до людз-поміж алкілу, алкенілу, алкінілу, арилу, фтору, ських рецепторів аденозину-А3 у низьконаномолехлору, брому, гідроксилу, алкілоксі, алкінілоксі, кулярному діапазоні. арилоксі, ацилоксі, аміну, алкіламіну, діалкіламіну, Винахід стосується сполук загальної формуариламіну, тіо, алкілтіо, арилтіо, ціану, оксо, нітро, ли (1) ацилу, аміду, алкіламіду, діалкіламіду, карбоксилу, або ж два можливі замісники можуть разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, утворювати 5- або 66-членне ароматичне або неароматичне кільце, що містить 0,1 або 2 гетероатоми, обрані з-поміж азоту, кисню або сірки. Можливі замісники можуть самі мати додаткові замісники. До таких додаткових замісників переважно наледе: жать С1-3 алкіли, як, наприклад, метил, етил та R1 представляє галоген, алкіл(1-3С), Отрифторметил, фтор, хлор, бром, гідроксил, С1-3 алкіл(1-3С), CF3, NH2, N-(ді)-алкіл(1-3С), Ν-(ді)алкоксі, як, наприклад, метоксі, етоксі та трифторалкеніл(1-3С), N-(ді)-алкініл(1-3С), N-алкіл(1метоксі, а також аміни. 3С)алкеніл(1-3С), N-алкіл(1-3С)алкініл(1-3С), NУсі сполуки формули (1), у яких замісники на алкеніл(1-3С)алкініл(1-3С) або С2-C8 циклоалекіасиметричних атомах вуглецю знаходяться як у Rламіногрупу, можливо заміщену, , так і в S-конфігурації, о хоплюються обсягом виR2, R3 та R4 незалежно один від одного - Н, ганаходу. логен, алкіл(1-3С), CF3, ОН, О-алкіл(1-3С), фенокТакож і проліки, тобто сполуки, які, потраплясі, гідроксіалкіл(1-3С), алкоксі(1-2С)-алкіл(1-2С), ючи будь-яким шляхом до людського організму, феніл, N-(ді)-алкіл(1-3С), 1-морфолініл, 1метаболізуються у сполуки формули (1), належать піперидиніл, 1-піперазиніл, OCF3, SCH3, SOCH3, до обсягу винаходу. Зокрема, це стосується споSO2CH3 або R2 та R3 разом з фенільним кільцем, лук з первинними або вторинними аміногрупами до якого вони приєднані, представляють можливо або гідроксігрупами, типовим прикладом яких є заміщені бензофуран, дігідробензофуран, бензосполуки формули (9), та їх енантіомерів (дивись діоксан, бензодіоксолан або систему нафталіноводалі). Такі сполуки здатні реагувати з органічними го кільця, кислотами, утворюючи сполуки, що можуть метаX - ΝΗ, N-алкіл(1-3С), СН2, О, S або вуглецьболізуватися у сполуки формули (1). вуглецевий зв'язок, Винахід, зокрема, стосується сполук формули 7 77816 8 (1), де R1 представляє галоген, алкіл(1-3С), Оалкіл(1-3С), CF3, NH2, N-(ді)-алкіл(1-3С) та усі інші позначки, значення яких наведені вище. Зокрема, винахід стосується сполук формули (1), де R1 = СІ, R2 = Η, Χ = ΝΗ, Υ - одна з груп (А), (В) або (С), R6 = Η, n = 1, Ζ = Ο, R10 = Η, a R3 , R4, R5, R7, R 8, R9 та R11 мають значення, наведені виДеталі експерименту для першої стадії цього ще, включаючи усі можливі стереоізомери та прозагального шляху наведено у: ліки, як зазначено вище, представлені загальними - J.Amer.Chem.Soc. 116, 1994, 4326 для X = формулами (2), (3) та (4): NH; Більш конкретно винахід стосується сполук однієї з формул (2), (3) або (4), де R5 = 3СН2ОН; R7 = СН3; R8 = Η; R9 = Η; R11 = CH3, a R3 та R4 мають значення, наведені вище, включаючи усі можливі стереоізомери та проліки, як зазначено вище, представлені загальними формулами (5), (6) та (7): Більш переважною є сполука формули (8) та її енантіомери. - Chem.Pharm.Bull. 45, 1997, 291 для X = Nалкіл; - Tetrahedron 56, 2000, 9705 для X = СН2 - Pol.J.Chem. 74, 2000, 837 для X = О; - J.Chem.Soc. С 1967, 466 для Χ = S; - Tetrahedron 56, 2000, 9705 для X = вуглецьвуглецевий зв'язок. Сполуки за винаходом, де R1 = F або Вr, можна одержувати цілком аналогічним чином з відповідних тригалопохідних. Деталі експерименту наведено у: - J.Med.Chem. 36 (26), 4195-4200, 1993 для R1=F - J.PraktChem. 82, 536, 1910 для R1 = Br Сполуки за винаходом, де R1 = О-алкіл(1-3С) або будь-які амінні замісники: NH2, N-(ді)-алкіл(13С), N-(ді)-алкеніл(1-3С), N-(ді)-алкініл(1-3С), Nалкіл(1-3С)алкеніл(1-3С), N-алкіл(1-3С)алкініл(13С), N-алкеніл(1-3С)алкініл(1-3С) або можливо заміщена С 2-С8 циклоалекіламіногрупа, можна одержувати подальшим заміщенням хлорпохідних, як описано нижче, за схемою 2: Деталі експерименту наведено у: - Heterocycles 31 (5), 895-909, 1990 для R 1 = алкоксі, - Tetrahedron, 54 (1998) 4051 -4065 для R1 = (заміщений) амін. Сполуки за винаходом, де R1 = алкіл(1-3С), CF3 або йод, можна одержати, виконуючи послідовність етапів синтезу за схемою 3: Оптимальною для винаходу є сполука формули (9): Ця сполука має спорідненість до людських рецепторів аденозину-A3 pKj 9,0±0,3. Сполуки за винаходом та їхні солі можна одержувати загальними шляхами, що наведені нижче. Сполуки з R1 = СІ синтезують за схемою 1: Деталі експерименту наведено у: - J.Med.Chem 42 (5), 805-818, 1999 для R1 = алкіл, - J.Chem.Soc, Chem.Comm. 1988, (10) 638-639 для R1 = CF3, - Eur.J.Org.Chem., 2002, 4181-4184 для R1 = йод. Фармаційно прийнятні солі можна одержувати відомими способами, наприклад, змішуванням 9 77816 10 сполуки за винаходом з відповідною кислотою. рацій перебудівної сполуки, при яких перебудовуПридатні адуктні солі можна одержувати з неється 50% радіоліганду. Величини pKj розраховуорганічними кислотами, наприклад, соляною, сірють, коригуючи значення ІС50 з урахуванням чаною, фосфорною та азотною, або з органічними концентрації радіоліганду та його спорідненості до кислотами, як цитринова, фумарова, малеїнова, людських рецепторів аденозину-А3 за рівнянням винна, оцтова, трифтороцтова, бензойна, рЧенга-Прусова: толуолсульфонова, метансульфонова та нафталіРКi=-log(IC 50/(1+S/Kd)) нсульфонова. де ІС 50 зазначено вище, S - концентрація [125І]Сполуки за винаходом загальної формули (1), АВ-МЕС А, який використовувався у тесті, у моа також їхні солі, посідають (ант)агоністичну актилях/л (як правило, 0,1нМ), а Kd - постійна дисоціавність щодо аденозину-А3. Вони можуть бути кориції рівноваги [125І]-АВ-МЕСА для людських рецепсні при лікуванні розладів, пов'язаних з рецептоторів аденозину-А3 (0,22нМ). рами аденозину-А3, або таких, що їх можна Сполуки за винаходом посідають високу сполікувати дією на ці рецептори. Наприклад, це: госрідненість до рецепторів аденозину-А3 у описанотрий та хронічний біль, запалювальні хвороби (арму ви ще тесті на зв'язування. Ця властивість ротрит, множинний склероз, астма та псоріаз); шлунбить їх корисними при лікуванні розладів, ково-кишкові захворювання (виразка, пов'язаних з рецепторами аденозину-А3 , або тазапалювальна хвороба кишковика, або хвороба ких, що їх можна лікувати дією на ці рецептори. Крона, виразковий коліт); алергійні реакції (екзема, Приклади атопічний дерматит, рінит); серцево-судинні за(1S,2R)-2-{[4-хлор-6-(3,4-метилендіоксіхворювання (інфаркт міокарду, аритмія, гіпертенфеніламін)-[1,3,5]триазин-2-іл]-амін}-1-фенілзія, тромбоз, анемія, атеросклероз, грудна жаба), пропан-1-ол шкірні захворювання (сверблячка, вовчанка, кроДо розчину 1,84г ціанурового хлориду у 20мл пивниця); офтальмологічні розлади (глаукома); ацетонітрилу, який підтримують при температурі респіраторні розлади (хронічні обструктивні леге20°С при перемішуванні, послідовно додають по неві захворювання, бронхіт, цисто фіброз); розлади краплинах розчини 1,37г 3,4-метилендіоксіаніліну у центральної нервової системи, серед них різні 20мл ацетонітрилу та 1,20г діізопропилетиламіну форми епілепсії, інсульт, депресія, безсоння); роз(ДІПЕА) у 20мл ацетонітрилу. Після перемішуванлади, пов'язані з ураженням пізнавальної здатносня при -20°С протягом 1 години послідовно додаті та пам'яті, як хвороба Альцгеймера, хвороба ють по краплинах ще розчини 1,29г ДІПЕА у 20мл Крейцфельда-Якоба, хвороба Гантінгтона, хвороацетонітрилу та 1,51г (1S,2R)-(+)-норефедрину у ба Паркінсона, нейрореабілітація (посттравматичні 20мл ацетонітрилу. Суміші дають нагрітися до кімураження мозку); гострі травми мозку або хребта; натної температури й перемішують ще 2 години. діабет, остеопороз, захворювання імунної систеОдержану реакційну суміш концентрують у вакууми, різні карциноми та лейкемія, бактеріальні та мі. Після додання 250мл етилацетату органічну вірусні інфекції. фазу послідовно промивають розчином 1Μ НСI у (Ант)агоністичні властивості сполук за винахо100мл води, розчином 1Μ NaOH у 100мл води та дом щодо аденозину-А3 визначалися наступним 50мл розсолу. Ор ганічну фазу сушать над сульметодом. фатом натрію, фільтрують та концентрують у ваТест на зв'язування людських рецепторів адекуумі. Одержаний продукт очищують колонковою нозину-А3 хроматографією з силікагелем та сумішшю 3:1 Спорідненість сполук до людських рецепторів гептан:етилацетат у якості елюенту. Одержують аденозину-А3 визначають за допомогою тесту на чистий білий твердий продукт (формула (9), див. зв'язування рецепторів, описаного у роботі вище, приклад В-44, див. таблицю) з ви ходом [C.A.Salvatore et al.:Molecular cloning and 80%. characterization of the human A3 adenosine receptor, Далі винахід ілюструється наступними конкреProc.Natl.Acad.Sci. USA, 90, 10365-10369, 1993]. тними прикладами, які перелічені у нижченаведеКоротко кажучи, одержують препарати мембран них таблицях та представлені загальною формулюдських рекомбінантних клітин (НЕК 293), у яких лою: людський рецептор аденозину-А3 виражений стабільно. Мембрани інкубують при 22°С протягом 90 хвилин з [125 І]-АВ-МЕС А у присутності тест-сполук або без них в інтервалі концентрацій від 10мкМ до 0,1нМ при розбавленні відповідним буфером. Зв'язану та вільну радіоактивність розділяють на фільтрі GF/B Паккард зі скловолокна з кількома промиваннями крижаним буфером, використовуюде представляє групу загальної формули (А), чи харвестер клітин Паккард. Зв'язану радіоактив(В) або (С): ність вимірюють сцинтиляційним лічильником (Topcount фірми Паккард) з використанням рідкого сцинтиляційного коктейлю (Microscint 0 фірми Паккард). Виміряні значення радіоактивності відкладають на графіку відносно концентрації перебудівної тест-сполуки, а криві перебудови розраховують за допомогою чотирьохпараметричної логістичної Ці приклади лише докладніше ілюструють вирегресії, одержуючи значення ІС50, тобто концент 11 нахід, ніяким чином не обмежуючи його обсяг. 77816 12 Приклади проліків Щоб проілюструвати поняття "проліків", готують наступні сполуки загальної формули (10): Проліки формули (10) не посідають спорідненості до людських рецепторів А3, але після гідролізу утворюють сполуку формули (9) (див. вище), яка є дуже активною. Комп’ютерна в ерстка О. Гапоненко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601