Модифіковані вуглеводами цитостатичні засоби

1 Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) К - Sp - L - АА1 - АА2 - С , (I) В ЯКІЙ К - незаміщений або репоселективно дифікований вуглеводний залишок, Sp - арилен формули мо г\ та їх ізомери і солі 2 Модифіковані вуглеводами сполуки формули (І) згідно з п 1, в яких К - вуглеводний радикал загальної формули (II) -О— де А - метил, пдроксиметил, алкоксиметил, карбоксіалкілоксиметил, R2, R3, R 4 окремо або разом означають водень, гідрокси, алкілокси, пдроксіалкокси, ка рбоксі алкілкарбонілокси, сульфат, галоген, або два з залишків R2, R3, R4 разом означають епоксигрупу, і Sp, L, АА1, АА2 та С мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі З Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п 1, в якій Sp - арилен формули О.. К, L, АА1, АА2 та С мають наведені в п 1 значення, де R - хлор або пдроксіалкіламіно, АА1 - залишок амінокислоти в D- або Lконфігурацм, що при необхідності може мати захисні групи або другу групу K-Sp-L, в якій К, Sp, L незалежно від іншої групи K-Sp-L може мати вказані вище значення, або прямий зв'язок, та їх ізомери і солі 4 Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п 1, в якій С - хінолонкарбонова кислота, батрацилін, камптотецин, доксорубіцин, мельфалан, К, Sp, L, AA1, АА2 мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі 5 Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п 1, в якій АА1 - залишок амінокислоти, похідний від гліцину, аланіну, валіну, лізину, аспарагінової кислоти, глутамшової кислоти, орнітину, тирозину або серину, в D- або L-конфігурацм, який може бути зв'язаний з О Ю О (О З 61054 іншою додатковою групою K-Sp-L-, або прямий зв'язок, соон К, Sp, L, AA2 і С мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі 6 Модифіковані вуглеводами сполуки загальної формули (І) згідно з п 1, в якій АА2 - залишок амінокислоти, похідний від гліцину, аланіну, лізину, орнітину, діамшопропюнової кислоти або серину, в н3с D- або L-конфігурацм, або прямий зв'язок, К, Sp, L, де Хз - галоген, АА2 і С мають наведені в п 1 значення Т - залишок формули та їх ізомери і солі 7 Модифіковані вуглеводами сполуки формули (1) HN згідно з п 1, в якій С означає залишок формули (III) T-Q , (III) N— АЛЛ. 8 ЯКІЙ Q - залишок формули соон де Y - означає C-R , де R означає водень, галоген або метокси, Хі - водень, галоген, Хг - водень, аміногрупа, або Q - залишок формули Винахід стосується цитостатичних засобів, специфічних щодо пухлин, зокрема модифікованих вуглеводами сполук цитостатичної активності Хіміотерапія при пухлинних захворюваннях частіше за все супроводжується тяжкими побічними явищами, зумовленими токсичним впливом хіміопрепаратів на проліферувальні клітини інших тканин Здавна вчені займаються проблемою покращення селективності застосовуваних активних речовин Часто наслідуваним прийомом є синтез препаратів, що більш або менш селективно вивільняються в ЦІЛЬОВІЙ тканині, наприклад, шляхом зміни значення рН (Тітце та ІНШІ (Tietze et al), патент ФРН 4 229 903), за допомогою ферментів (наприклад, глюкуронідаз, Джеквезі та ІНШІ (Jacquesy et al), європейський патент 511 917, Босслет та ІНШІ (Bosslet et al), європейський патент 595 133) або кон'югатів антитіло-фермент (Багшев та ІНШІ (Bagsheve et al), міжнародна публікація WO 88/07378, Сентер та ІНШІ (Senter et al), патент США 4 975 278, Босслет та ІНШІ (Bosslet et al), європейський патент 595 133) Проблемною в цих спробах є недостатня стабільність кон'югату в інших тканинах та органах, та зокрема повсюдне розподілення активної речовини, що супроводжує екстра целюлярне вивільнення активної речовини в пухлинній тканині Виділений пектиновий рисунок на поверхні пухлинної клітини (Gabius, Onkologie 12, (1989), 175) відкриває принципову можливість шляхом зв'язу де R - водень, алкіл з 1-3 атомами вуглецю, і К, Sp, L, AA1, АА2 мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі 8 Цитостатичний засіб, що містить одну сполуку згідно з будь яким з пп 1-7 вання ВІДПОВІДНИХ вуглеводних модулів до цитостатичних засобів цілеспрямовано адресувати останні на пухлинні клітини Ця перспектива обмежена тим, що і в інших тканинах, особливо в печінці, лектини зустрічаються зі схожими вуглеводами (галактоза, лактоза, маноза, N-ацетилглюкозамш, фукоза і т п) (Ashwell et al , Annu Rev Biochem 46 (1982), 531, Stahl et al , Proc Natl Acad Sci USA 74 (1977), 1521, Hill et al , J Biol Chem 262 (1986), 7433, Jansen et al , J Biol Chem 266 (1991), 3343) Тому слід рахуватися з відчутним накопиченням глікокон'югатів, що містять активну речовину, в печінці та інших багатих на лектин органах, якщо використовуються такі немодифіковані цукри Гетероциклічний амін батрацилін (1) проявив в різних моделях раку кишкового тракту добру протипухлинну дію (описання винаходу до патенту США 4 757 072) Пептидні кон'югати батрациліну (1) з доброю 61054 дією in vitro та прийнятною розчинністю (патент США 4 180 343) в дослідах на тваринах переносяться гірше, ніж батрацилін Описані в європейському патенті 501 250 кон'югати фукози в значній мірі накопичуються в печінці Хінолон-а (2) 7-[(3aRS, 4RS, 7aSR)-4-aMmo1,3,За,4,7,7а-гексапдро-ізошдол-2-іл]-8-хлор-1 циклопропіл-6-фтор-1,4-дипдро-4-оксо-3хінолшкарбонова кислота поряд з ВІДМІННОЮ антибактеріальною активністю має також добру ефективність проти різних ЛІНІЙ пухлинних клітин (європейський патент 520 240, патент Японії 4-253 973) Однак, йому протистоять значні ТОКСИКОЛОГІЧНІ проблеми (наприклад, токсичність відносно генів, кісткового мозку, гостра токсичність in vivo, і т п ) СООН (2) (хінолон-а} Задача винаходу полягає у одержанні нових модифікованих вуглеводами сполук цитостатичної активності, яким властива стабільність у сироватці, кращою клітинною і тканевою селективністю, зокрема, у випадку пухлини печінки, і кращою розчинністю і покращеною переносністю Поставлена задача вирішується пропонуємими модифікованими вуглеводами сполук загальної формули (І) K-Sp-L-AA1-AA2-C, (І) В ЯКІЙ К - незаміщений або репоселективно модифікований вуглеводний залишок, Sp - арилен формули С - цитостатичний залишок, залишок цитостатичного засобу або похідне цитостатичного засобу, та їх ізомери і солі Структурний елемент -SP-L-AA1-AA2- являє собою носій, що зв'язує К та С Сполуки формули (І) можуть бути одержані в стереоізомерній формі, наприклад, як енантюмери або діастереомери, або як їх суміші, наприклад, як рацемат Винахід стосується як чистих стереоізомерів, так і їх сумішей При необхідності суміші стереоізомерів можуть бути розділені на стереоізомерно єдині складові відомими способами, наприклад, шляхом хроматографії або кристалізації Сполуки згідно з винаходом можуть бути одержані також в формі їх солей В загальному випадку тут називаються солі органічних чи неорганічних основ або кислот, а також внутрішні солі До кислотно-адитивних солей належать, переважно, галогеноводневі кислоти, такі, наприклад, як хлороводнева кислота та бромоводнева кислота, особливо хлороводнева кислота, крім того фосфорна кислота, щавелева кислота, сірчана кислота, моно- та біфункцюнальні карбонові кислоти та пдроксикарбонові кислоти, такі як оцтова кислота, малеїнова кислота, малонова кислота, оксапова кислота, глюконова кислота, бурштинова кислота, фумарова кислота, винна кислота, лимонна кислота, саліцилова кислота, сорбінова кислота та молочна кислота, а також сульфонові кислоти, такі як р-толуолсульфонова кислота, 1,5нафталіндисульфонова кислота або камфоросульфонова кислота ФІЗІОЛОГІЧНО безпечними солями сполук згідно з винаходом можуть бути також солі металів та амонію, що мають вільну карбоксильну групу Особливу перевагу мають, наприклад, натрієві, калієві, магнієві або кальцієві солі, а також амонієві солі, ПОХІДНІ від аміаку або органічних амінів, як, наприклад, етиламш, ди- та триетиламш, ди- та триетиноламш, дициклогексиламін, диметиламіноетанол, аргінін, лізин, етилендіамін або фенетиламін В першу групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких К - вуглеводний радикал загальної формули (II) R R L —N f Н або R' -N Н де R - хлор або пдроксиалкіламшо, АА1 - залишок амінокислоти в D- або Lконфігурацм, що при необхідності може мати захисні групи або другу групу K-Sp-L, в якій К, Sp, L незалежно від іншої групи K-Sp-L може мати вказані вище значення, або прямий зв'язок, АА2 - залишок амінокислоти в D- або Lконфігурацм, що при необхідності може мати захисні групи, або прямий зв'язок, А - метил, гідрокси метил, алкоксиметил, карбоксиалкілоксиметил, R2, R3, R4 - окремо або разом означають водень, гідрокси, алкілокси, пдроксиалкокси, карбоксиалкілкарбонілокси, сульфат, галоген, або два з залишків R2, R3, R4 разом означають епоксигрупу, і Sp, L, АА1, АА2 та С мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі В другу групу переважних модифікованих вуг 7 61054 леводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких Sp - арилен формули СООН —о К, L, АА1, АА2 та С мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі В третю групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких С - хінолонкарбонова кислота, батрацилін, камптотецин, доксорубіцин, мельфалан, К, Sp, L, AA1, АА2 мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі В четверту групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких АА1 - залишок амінокислоти, похідне гліцину, аланіну, валіну, лізину, аспарагінової кислоти, глутамшової кислоти, орнітину, тирозину або серину, в D- або L-конфігурацм, який може бути зв'язаний з іншою додатковою групою K-Sp-L-, або прямий зв'язок, К, Sp, L, AA2 і С мають наведені в п 1 значення, та їх ізомери і солі В п'яту групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (і) входять сполуки, в яких АА2 - залишок амінокислоти, похідне гліцину, аланіну, лізину, орнітину, діамінопропюнової кислоти або серину, в D- або L-конфігурацм, або прямий зв'язок, К, Sp, L, AA2 і С мають наведені в п 1 значення та їх ізомери і солі В шосту групу переважних модифікованих вуглеводами сполук загальної формули (І) входять сполуки, в яких С означає залишок формули (III) T-Q, (III) В ЯКІЙ Q - залишок формули соон X X . ) де Y - означає N або C-R , де R означає водень, галоген або метокси, Хі - водень, галоген, Хг- водень, аміногрупа, або Q - залишок формули де Хз- галоген, Т - залишок формули HN N— Де R - водень, алкіл з 1-3 атомами вуглецю, і К, Sp, L, AA1, АА2 мають наведені вище значення, та їх ізомери і солі Завдяки вищезгаданій активності сполуки формули (І) можуть представляти собою активну речовину цитостатичного засобу, що є додатковим об'єктом винаходу Винахід ілюструється наступними прикладами Приклади серії А Біологічне тестування Приклад А 1 Тестування стримування росту для визначення цитотоксичних властивостей глікокон'югатів батрацилінута хінолону-а Ліни КЛІТИН SW 480 та НТ 29 (ATCC-Nr CCL 228 та НВТ-38) товстої кишки людини, а також ЛІНІЮ КЛІТИН В 16 F 10 меланоми миші поміщують в чашки Roux в середовище RPMI 1640 з додаванням 10% FCS Потім трипсинують і в RPMI плюс 10% FCS доводять концентрацію клітин до 50000 клітин на мілілітр По ЮОмкл клітинної суспензії на лунку поміщують в мікротитрувапьну пластину з 96 лунками і шкубують протягом 1 дня в інкубаційній шафі при температурі 37°С в середовищі СОг Потім додають ще ІООмкл середовища RPMI та 1мкл DMSO з дослідними речовинами Ріст контролюють через 3 дні і через 6 днів Для цього до кожної лунки додають 40мкл розчину МТТ (3-(4,5диметилтіазол-2-іл)-2,5-дифенілтетразолшбромід) з висхідною концентрацією 5мг на мілілітр води Інкубують протягом 5 годин в інкубаційній шафі при температурі 37°С в середовищі СОг Потім середовище відсмоктують і додають по ЮОмкл іпропанолу на лунку Через ЗО хвилин струшують зі ЮОмкл води і вимірюють затухання на довжині хвилі 540нм за допомогою Titertek Multiscan МСС/340 (Flow) Цитотоксична дія описаних глікокон'югатів бартациліну наведена в таблиці 1а як значення ICso для ЛІНІЙ клітин SW480 та НТ 29 В таблиці 1Ь зведені значення ICso для хінолону-а на ЛІНІЯХ клітин SW 480, НТ29та В16 F Таблиця 1а Речовина Батрацилін 32 34 37 39 310 311 314 318 319 3 20 3 21 3 23 3 24 3 26 3 27 3 28 3 29 3 30 3 33 41 43 44 45 46 47 48 49 410 411 412 51 52 56 58 59 512 513 514 515 519 5 20 5 21 5 22 5 23 62 63 67 610 612 615 6 20 6 21 6 23 6 25 6 28 6 29 6 30 ІС5о [мкМ] SW480 25 100 100 55 40 100 85 40 15 75 100 90 50 95 50 110 60 110 >250 90 25 20 ЗО 15 10 15 50 20 ЗО 15 15 55 20 >250 100 70 20 20 20 >250 35 50 60 ЗО 25 40 70 60 50 35 >250 80 150 107 50 40 95 60 ІС5о [мкМ] НТ29 20 75 65 ng 55 125 ng ng ng ng ng ng ng ng ng ng ng ng ng 70 30 20 25 15 10 15 40 30 30 15 9 45 55 ng >250 70 20 40 30 70 25 30 80 40 35 50 105 >250 50 50 >250 ng ng 45 40 25 130 70 11 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 61054 32 34 35 36 40 43 46 59 60 80 60 50 20 70 170 90 120 50 50 40 12 60 ng ng 70 60 80 100 50 40 25 Таблиця 1b Речовина 101 102 103 11 2 11 6 11 7 11 8 11 9 11 10 11 16 11 17 11 18 121 122 123 125 126 127 128 129 1210 1211 1212 1213 1214 1215 141 142 143 144 151 152 161 162 171 172 181 182 184 185 189 1814 ІС5о [мкМ] SW480 50 45 ЗО 8 12 12 12 8 10 75 4,5 1 4 2 1 4 60 8 4 15 2 8 35 1 0,3 0,8 1 8 1,5 20 50 50 50 10 4 0,03 0,02 0,02 0,2 0,08 0,015 Залежність біологічної ефеїсгивності від вуглеводів додатково підтверджується неефективністю безвуглеводних порівняльних сполук, покладених в основу серій прикладів 5, 6 та 11 N-[Na,Ns-6ic-(4 ІС5о [мкМ] НТ29 >250 3 4 ng 9 13 16 12 20 10 75 3,5 1,5 nd nd 4 7 >250 7 8 15 2 13 100 2 1 1 6 4 1 20 70 100 60 5 4 0,01 0,02 0,02 0,2 0,06 0,01 IC5o [мкМ] B16F10 15 5 0,7 9 5 15 15 9 2 1,5 8 0,5 0,1 0,8 0,3 0,2 0,3 20 1 і 4 0,5 0,5 1 0,3 0,1 1,5 1,5 4 0,4 2 15 200 80 5 4 0,2 0,2 0,3 1 0,7 0,08 пдроксифеніламіно-тюкарбоніл)-лізил]-батрацилін та М-[Ма,Мг-біс-(4-пдроксифеніламіно-тюкарбоніл)лізил-О-аланіл]-батрацилш або N-[Na,Ns-6ic-(4пдроксифеніламіно-тюкарбоніл)-О-лізил-хінолон-а 14 13 61054 (Значення ІС50>250) аналізу шляхом рідинної хроматографії Умови рідинної хроматографії Приклад А 2 Прилад Установка Уотерса (Waters) ln-vitro-дослідження розщеплюваності глікокоКолонка Bischoff Hypersil OCS RP 18 5мкм н'югатів Кінетика розщеплення крові людини 250x4 мм Елюент А ЮмМ калійфосфатний буфер 1,225мл крові людини шкубують разом з 1,25мл PBS та 25мкл розчину штаму речовини рН4,5 (1мг/мл в 3% DMSO в PBS) при 37°С Через 1 гоВ 80% ацетонггрилу/20% води дину та 24 години беруть проби по 1мл, змішують Потік 1 мл/хв з 1мл етанолу та дають постояти 20 хвилин при Довжина 4°С Після центрифугування (5 хвилин при хвилі 372мм 3500об/хв) відбирають 100мкл залишку для аналіГрадієнт Охв 10% В зу шляхом рідинної хроматографії Юхв 60% В Кінетика розщеплення клітин 15хв 60% В 2,25мл PBS шкубують разом з 225мкл клітин18хв 10% В ної суспензії (30мг/мл) та 25мкл розчину штаму 20хв 60% В речовини (1мг/мл в 3% DMSO в PBS) при 37°С Елюент для кон'югатів хінолону-а Через 1 годину та 24 години беруть проби по 1мл, А 100% метанол змішують з 1мл етанолу та дають постояти 20 В 10мм калійфосфатний буфер рН 2,2, хвилин при 4°С Після центрифугування (5 хвилин 10мм гептансульфонова кислота при 3500об/хв) відбирають ЮОмкл залишку для Таблиця 2а Приклад 34 39 44 59 62 612 73 %-розщеплення в крові людини 1 год 24 год nd nd 0 54* 0 0 0 0 nd nd nd nd 0 0 %-розщеплення в SW-480 1 год 24 год 74* nd 28* 100* 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 - Продуктом розщеплення є г\І-[Р-аланіл]-батрацилін Приклад 11 2 11 6 11 7 121 123 128 %-розщеплення в крові людини 1 год 24 год 0 0 0 11% 0 0 0 0 0 0 0 0 %-розщеплення в SW-480 1 год 24 год 0 0 0 8% 0 0 0 0 0 0 0 0 Приклад А З Дослідження розподілу в органах Для всіх експериментів використовувались атимічні голі миші (штам NMRI nu/nu), вирощені в "Drug Development Laboratory, Oncotest GmbH", проф X X Фібіг (H H Fiebig), м Фрайбург Тварини утримувались в макролонових клітках в умовах Laminar Flow Як пухлинний матеріал використовувалась тканина серії клітин SW480, що в кілька прийомів вводилась в тварин Кожній МИШІ ВІКОМ 6-8 МІСЯЦІВ В обидва боки підшкірне імплантувались дві пухлини До моменту рандомізацм тварини витримувались 26-27 днів Після ЦЬОГО середня маса пухлин становила 500мг, що відповідає діаметрові пухлин близько 10мм Фармакокінетика відбувалася таким чином мишам вводилась речовина, що підлягає дослідженню, і їх знову до взяття проб на 1/2 год або на 4 год поміщали в клітку Власне взяття проб починалось із забору крові Для цього мишей наркоз %-розщеплення в гепатомі 1 год 24 год 98* nd 32* 100* 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Таблиця 2b %-розщеплення в гепатомі 1 год 24 год 0 0 0 12% 0 0 0 0 0 0 0 0 ним ефіром присипляли (тривалість 1/2-1хв) Через 1/2 год або 4 год після введення досліджуваної речовини розкривали черевну порожнину, мишей під наркозом через Vena cava caudahs протягом 12 хвилин знекровлювали, а потім умертвляли шляхом переламування шийного відділу хребта Внаслідок цього розривається центральне коло кровообігу і припиняється перфузія органів Потім протягом 5хв препарували окремі органи Зразу ж після цього проби органів, а потім рештки тіла зважували і заморожували в рідкому азоті Речовина "кон'югат 1" вводилась в КІЛЬКОСТІ ЗООмг на кілограм маси тіла внутрішньочеревно (і р), а речовина "кон'югат 2" - в КІЛЬКОСТІ 100МГ/КГ внутрішньовенно (і v) в хвостову вену Для кожної речовини та відрізку часу використовували 5 тварин Результати розподілу кон'югату 1 зведені в таблиці 3, а для кон'югату 2 в таблиці 4 А Еталонний ряд 16 15 61054 5, 10, 50, 100 та 200мкг речовини, розчинених С Підготовка крові в суміші етанол-вода (1 1, за об'ємом (v/v)), додаВзяті КІЛЬКОСТІ крові змішують з 2мл суміші ють до 1г телячої печінки Потім розтирають з 1г етанол/вода (1 1, v/v), центрифугують протягом морського піску та 2 5мл охолодженої суміші ета2хв при 3500об/хв і зливають надосадову рідину нол/вода (1 1, v/v), проби центрифугують протягом До залишку знову додають 2мл суміші етанол/вода 2хв при 3500об/хв Після видалення надосадової (1 1, v/v), центрифугують і надосадові зливки об'рідини залишок знов змішують з 2,5мл суміші етаєднують ЮОмкл об'єднаних зливків аналізують нол/вода, центрифугують і надосадові зливки об'шляхом HPLC Використовують умови HPLC, наєднують Відбирають ЮОмкл і аналізують за доведені для А помогою рідинної хроматографії (HPLC) Кон'югаті (ЕР 501 250-А1) о = Умови рідинної хроматографії Установка Уотерса (Waters) Прилад Biscchoff Hypersil ODS RP18 Колонка 5мкм 250х4мм Елюент А 80% ацетонітрил 20% вода В 10мм калійфосфатний буфер рН4,5 90% В Ох в Градієнт Кон'югат 2 (Приклад 3 9) 40% В 10хв 15хв 40% В 18хв 90% В 20хв 90% В Потік 1 мл/хв Довжина хвиЛІ 372нм В Підготовка органів Підготовку органів здійснюють аналогічно А, причому всі органи подрібнюють і екстрагують 2,5 мілілітрами суміші етанол/вода Таблиця З Орган Кров Пухлина Печінка Нирки Мозок Речовина Кон'югат 1 Батрацилін Кон'югат 1 Батрацилін Кон'югат 1 Батрацилін Кон'югат 1 Батрацилін Кон'югат 1 Батрацилін Оцінка проб органів Середнє значення 1 год (мкг/г органу) Середнє значення 4 год (мкг/г органу) 31,2 56,6 24,4 770 126 34,1 22,4 81 78,4 26 1 27,5 Таблиця 4 Орган Кров Пухлина Печінка Нирки Мозок Речовина Кон'югат 2 Батрацилін Кон'югат 2 Батрацилін Кон'югат 2 Батрацилін Кон'югат 2 Батрацилін Кон'югат 2 Батрацилін Оцінка проб органів Середнє значення 0,5 год (мкг/г органу) 6,5 20 2,5 0,9 17,5 10,7 Середнє значення 4 год (мкг/г органу) 3,12 1,2 0,5 0,8 17 18 61054 Приклад А 4 Визначення гострої токсичності глікокон'югатів батрациліну (одноразове застосування) Гостра токсичність похідних батрациліну визначали на голих мишах nu/nu Внутрішньовенно вводили речовини у вигляді водного розчину, а внутрічеревно у вигляді розчину DMSO в концентрації до 400мг речовини на кілограм маси миші Допустиму разову дозу вираховували, виходячи із ваги тварин до 21-го дня після введення та із КІЛЬ КОСТІ тварин, що вижили Допустимі дози для речовин наведені в таблиці 5 Для речовин із прикладів 3 16, 3 33, 3 9, 6 12, 6 14, 6 2, 6 81, 8 2 вона становить понад 200мг на кілограм маси миші Для речовин 3 33, 6 12, 614, 6 2, 6 81 навіть при дозі 400мг/кг ще не виявлялась гостра токсичність На противагу цьому, лізил-0-аланілбатрацилін (2 13) вже при разових дозах між 25 та 50мг/кг був явно токсичним Таблиця 5 Максимально допустимі разові дози похідних батрацилінута хінолону-а Приклад Максимально допустимі разові дози в мг на кг маси миші внутрішньочеревно (і р) внутрішньовенно (і v) 50 25 200 200 nd >400 ng >400 ng >400 ng >400 ng >400 ng >200 nd nd 200 213 34 39 316 3 33 62 612 614 6 81 82 Хінолон-а 123 Приклад А 5 Визначення гострої токсичності після багаторазового введення Речовини вводили частково і v та частково і р або щодня в дні 1-4 та 7-10, або в дні 1, 5 та 9 Дози становили 400, 200 та 100мг/кг/день Оцінку здійснювали за вагою на 21-й день та за КІЛЬКІСТЮ тварин, що вижили Для ДОСЛІДІВ на кожну дозу та на кожну речовину було використано по 5 тварин Результати наведені в таблиці 6 Таблиця 6 Максимально допустима доза при багаторазовому введенні Введення 39 ІV 3 33 62 ІV і Р 612 ІV 614 6 81 І р ІV Батрацилін І р Дозування в дні 1-4, 7-Ю 1-4 1, 5, 9 1-4, 7-Ю 1, 5, 9 1-4, 7-Ю 1, 5, 9 1, 5, 9 1-4, 7-Ю 1, 5, 9 1, 5, 9 Приклад А 6 Гематопатична активність глікокон'югатів хінолону-а порівняно з покладеними в їх основу речовинами Матеріали та методики in vitro Клітини КІСТКОВОГО мозку вимивають із бедра миші 105 клітин шкубують при температурі 37°Ста в атмосфері 7% СОг в середовищі McCoy 5A (0,3% агар) разом з рекомбінантним GM-CSF (Genzime, утворення колонії клітин штаму) та досліджуваною речовиною (104-100мкг/мл) Через 7 днів рахують Максимальна денна доза мг/кг/день -50 -100 >400 -400 >400 >400 >400 >400 -200 >400 -100 колонії (21 >21 >21 50 >21 >21 23 >26 25 19 26 >26 Лікування Контрольна група 126 128 1214 пухлин Відносний об'єм пухлин [% відносно дня 0] Ь | Оптимальне Т/СЬ| 10 1552 100% 8 300 7 19 4% 9 502 2 32 3% 8 519 5 33 5% КІЛЬКІСТЬ a) Максимально допустима доза (МДД) b) вдень 19 Сполуки камптотецину серії прикладів 18 в ході цього тесту показували, як правило, порівнювану або кращу ефективність Приклади серії В Приклади синтезу Приклад 1 1 р-амшофеніл-2-О-метил-р-І_-фукозид ОН Me 11а) р-нггрофеніл-3,4-О-ізопропіліден-р-І_фукозид Розчин р-нггрофеніл-р-І_-фукозиду (750мг, 2,63 ммоль) в 40мл суміші DMF/дюксан 1 2 змішують при 0°С з 65мг р-толуолсульфонової кислоти та з інтервалами ЗОхв з 5х100мкл 2метоксипропену Після перемішування протягом 18 год при 20°С згущують та очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 991) Після згущення одержують 710мг (83%) білої твердої речовини 1 1 Ь) р-нітрофеніл-2-О-метил-3,4-Оізопропіліден-р-І_-фукозид ЮОмг (0,307 ммоль) сполуки із прикладу 1 1 а разом з 96мкл метилйодиду кладуть в Юмл THF і потім порціями змішують з 11 мг гідриду натрію (80%) Після перемішування протягом 3 год при 20°С ще раз додають 96мкл метилйодиду та 11 мг гідриду натрію Після подальшого перемішування протягом 16 год при 20°С додають трохи води та ЮОмл дихлорметану Пробу ДВІЧІ струшують з водою, органічну фазу згущують, а потім одержаний продукт очищують на хроматографічній колонці (петролейний ефір/ефір оцтової кислоти 8 1) Вихід 78МГ (75%) 1 1) р-амшофеніл-2-О-метил-р-І_-фукозид 78мг (0,23 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-метил-3,4О-ізопропіліден-р-І_-фукозиду протягом 16 год перемішують при 20°С в Змл 80-% оцтової кислоти Потім оцтову кислоту видаляють у вакуумі, пробу змішують з Юмл метанолу і після додаван 24 23 61054 ня діоксиду титану гідрують в атмосфері водню під триетилортоацетату Після перемішування протянезначним надлишковим тиском Суспензію фільгом 15хв при 20°С розчинник відганяють у вакуумі трують через целіт і фільтрувальний матеріал Залишок розчиняють в 50мл THF та Змл DMF і промивають метанолом Після хроматографічного змішують з 4165мкл бензилброміду, а також 210мг очищення (дихлорметан/метанол 97,5 2,5) одергідриду натрію (60-%) Після перемішування протяжують 77мг (80%) цільового продукту [DC дихлогом 1 год при 20°С додають Юмл 80-% оцтової рметан/метанол 9 1 Rf=0,42] кислоти, згущують і залишок очищують шляхом Приклад 1 2 тонкошарової хроматографії (дихлормер-амшофеніл-3-О-метил-р-І_-фукозид тан/метанол 99 1) Після згущення та сушіння одержують 1236мг (85%) цільового продукту 1 4 Ь) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-ацетил-4О-метил-р-І_-фукозид ЮООмг (2,39 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-бензил4-О-ацетил-р-І_-фукозиду розчиняють в 60мл бензолу Після додавання 2988мкл метилйодиду та 1109мг оксиду срібла пробу протягом 8 год нагріОМе вають зі зворотним холодильником Одержану суміш шляхом тонкошарової хроматографії (дих1 2 а) р-нггрофеніл-3-О-метил-р-І_-фукозид лорметан/метанол 99 1) відокремлюють на компо6г (21 ммоль) р-нггрофеніл-р-І_-фукозиду в ненти Ізолюють 239мг (23%) р-нітрофеніл-2-ОЗООмл абсолютного метанолу змішують з 7,84д бензил-3-О-ацетил-4-О-метил-р-І_-фукозиду поряд (31,5 ммоль) дибутилоксиду олова та протягом 2 з 653мг (63%) ізомерного р-нітрофеніл-2-Огод нагрівають зі зворотним холодильником Потім бензил-3-О-метил-4-О-ацетил-р-І_-фукозиду у згущують, залишок осушують і розчиняють в вигляді білої твердої речовини ЗООмл DMF Після додавання 15,7мл метилйодиду 1 4) р-амшофеніл-4-О-метил-р-І_-фукозид пробу перемішують протягом 40 год при 70°С 224мг (0,52 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-бензил-ЗРозчинник видаляють у вакуумі, а залишок розчиО-ацетил-4-О-метил-р-І_-фукозиду розчиняють в няють в ЗООмл дихлорметану Суспензію фільтру20мл метанолу і змішують з 390мкл 1N розчину ють, залишковий розчин знову згущують і піддають метилату натрію Після перемішування протягом тонкошаровій хроматографії (дихлорме16 год при 20°С нейтралізують 80-% оцтовою кистан/метанол 991) Після згущення одержують лотою, згущують і розчиняють в дихлорметані 3815мг (61%) цільового продукту Органічну фазу промивають 1N розчином гідрока1 2) р-амшофеніл-3-О-метил-р-І_-фукозид рбонату натрію, а також водою, осушують і згущу3,81 г (12,73 ммоль) р-нітрофеніл-3-Оють Залишок розчиняють в 20мл метанолу та гідметил-р-І_-фукозиду гідрують аналогічно прикладу рують в присутності паладію на активованому 1 1 Вихід ЗГ (88%) [DC дихлорметан/метанол 9 1 вугіллі аналогічно прикладу 1 1 Після згущення Rf=0,53] продукт розчиняють у воді і люфілізують ОдерПриклад 1 З жують 119мг (88%) білої аморфної твердої речор-амшофеніл-3-О-метил-а-І_-фукозид вини [DC дихлорметан/метанол 9 1 Rf=0,38] Приклад 1 5 р-амшофеніл-3-О-п-пропіл-р-І_-фукозид OMe Одержання аналогічне прикладу 1 2, виходячи із р-нггрофеніл-а-І_-фукозиду Вихід 63% в 2 стадії [DC дихлорметан/метанол 9 1 Rf=0,39] Приклад 1 4 р-амшофеніл-4-О-метил-р-І_-фукозид МеО он 1 4 а) р-нітрофеніл-2-О-бензил-4-Оацетил-р-І_-фукозид 1г (3,5 ммоль) р-нггрофеніл-р-І_-фукозиду в ЮОмл абсолютного THF змішують з 31 мг ртолуолсульфонової кислоти та 1134мг (7 ммоль) 1 5 а) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3-О-п-пропіл-4О-ацетил-р-І_-фукозид Аналогічно прикладу 1 4 b із сполуки 1 4 а за допомогою пропілйодиду одержують і хроматографічно відокремлюють ізомерні продукти 3- та 4пропілування Одержують р-нітрофеніл-2-Обензил-3-О-п-пропіл-4-О-ацетил-р-І_-фукозид з виходом 49% поряд з р-нітрофеніл-2-О-бензил-ЗО-ацетил-4-О-п-пропіл-р-І_-фукозидом з виходом 29% 1 5 Ь) р-амшофеніл-3-О-п-пропіл-р-І_-фукозид Синтез фракції 1 із прикладу 1 5 а) аналопч 25 61054 ний прикладу 1 4 Вихід 78% [DC дихлорметан/метанол 9 1 Rf=0,42] Приклад 1 6 р-амшофеніл-3-дезокси-р-І_-фукозид 1 6 а) р-нітрофеніл-3,6-ди-дезокси-3-хлор-4-Оацетил-р-Ь-гулозид 1г (3,5 ммоль) р-нггрофеніл-р-І_-фукозиду в ЮОмл THF змішують з 31 мг р-толуолсульфонової кислоти та 1134мг (7 ммоль) триетилортоацетату Після перемішування протягом 15хв при 20°С розчинник відганяють у вакуумі Додають ЮОмл насиченого розчину хлористого водню в дихлорметані Після ЮХВ реакції продукт згущують та очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 99 1) Одержують 793мг (65%) цільового продукту [DC дихлорметан/метанол 97,5 2,5 Rf=0,36] 1 6 b) р-нітрофеніл-3 6-ди-дезокси-3-хлор-р-І_гулозид 375мг (1,08 ммоль) р-нітрофеніл-3,6-дидезокси-3-хлор-4-О-ацетил-р-І_-гулозиду розчиняють в 25мл метанолу та змішують з 10 краплями 1N розчину метилату натрію Через 20хв підкислюють оцтовою кислотою, згущують та розподіляють між 400мл дихлорметану та 60мл води Органічну фазу осушують, згущують і осаджують із суміші дихлорметан/простий ефір Одержують 315мг (96%) цільового продукту 26 27 61054 го ефіру бромооцтової кислоти та ЮОмг йодиду тетрабутиламонію і протягом 16 год нагрівають зі зворотним холодильником Розчинник випарюють, а продукт очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 99 1) Після згущення ВІДПОВІДНИХ фракцій та осадження із суміші метанол/простий ефір одержують 455мг (37%) цільової сполуки 110) р-амшофеніл-3-О-карбоксиметил-р-І_фукозид 282мг (0,79 ммоль) р-нітрофеніл-3метоксикарбонілметил-р-І_-фукозиду розчиняють в 20мл метанолу та змішують з 440мкл 2N розчину гідроксиду ЛІТІЮ Після перемішування 2 год при 20°С кислим юнообмінником SC108 встановлюють рН 3 і фільтрують До фільтрату додають 250мг паладію на активованому вугіллі Потім протягом 1,5 год гідрують з воднем при незначному надлишковому тискові, відокремлюють каталізатор і промивають метанолом Згущення, розчинення у воді та виморожування дає 86-% вихід цільового продукту (212мг) [DC ацето-нітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5 1 0,2 Rf=0 24] Приклад 1 11 р-амшофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-р-І_фукозид О СООМе 250мг (0,7 ммоль) р-нітрофеніл-3метоксикарбонілметил-р-І_-фукозиду (приклад 1 10 а) розчиняють в 20мл метанолу та 1,5 год гідрують з воднем над паладієм на активованому вугіллі при незначному надлишковому тискові Каталізатор відокремлюють та промивають метанолом Згущення, розчинення у воді та виморожування дають 195мг (85%) цільового продукту [DC дихлорметан/метанол 91 Rf=0,43, FAB-MS m/e=328=M+1] Приклад 1 12 р-амшофеніл-3-О-пдроксиетил-р-І_-фукозид Me НО о, 1 1 3) 2 фукозид 1000мг ОН р-нггрофеніл-3-О-пдроксиетил-р-І_(2,8 ммоль) р-нггрофеніл-3 28 метоксикарбонілметил-р-І_-фукозиду розчиняють в суміші 160мл THF та 40мл води і змішують з 53мг боропдриду натрію Через Юхв розчинник випарюють і очищують залишок шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 95 5) Після згущення ВІДПОВІДНИХ фракцій, розчинення у воді та виморожування одержують 362мг (40%) цільового продукту 112) р-амшофеніл-3-О-пдроксиетил-р-І_фукозид Після гідрування 362мг сполуки із прикладу 1 12 а) аналогічно прикладу 1 1 одержують 270мг (82%) цільового продукту [DC ацетонітрил/вода 10 1 Rf=0,43] Приклад 1 13 р-амшофеніл-2-О-карбоксиметил-р-І_фукозид он соон 1 13 а) р-нітрофеніл-2-Ометоксикарбонілметил-р-І_-фукозид 250мг (0,88 ммоль) р-нітрофеніл-p-Lфукозиду розчиняють в 25мл абсолютного THF та Змл DMF Додають 80мг (2,64 ммоль) 80-% гідриду натрію і після Юхв перемішування при 20°С 35мкл - бензилового ефіру бромоцтової кислоти 3 Юхв інтервалами здійснюють 3 подальші додавання по 35мкл бензилового ефіру бромоцтової кислоти Протягом ЗОхв перемішують і охолоджують доливанням метанолу Через наступні Юхв підкислюють 5 мілілітрами 80-% оцтової кислоти Згущують і дистилюють з дихлорметаном Очищення шляхом тонкошарової хроматографії починають з системою розчинника дихлорметан/метанол/льодяна оцтова кислота в пропорції 90 10 1 Потім в такій же системі пропорцію підвищують до 80 20 2 Після згущення ВІДПОВІДНИХ фракцій залишки дигерують складним ефіром і одержують із ранішого елюату 157мг (42%) цільової сполуки [DC ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5 1 0,2 Rf=0,65] Із ПІЗНІШОГО елюата одержують ізомерну З-О-алкіловану сполуку (33%) [DC ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5 1 0,2 Rf=0,54] 113) р-амшофеніл-2-О-карбоксиметил-р-І_фукозид Омилення та гідрування 150мг р-нітрофеніл-2О-метоксикарбоніл-метил-р-І_-фукозиду згідно з описаною в прикладі 110 методикою дає при 83-% виході 109мг цільового продукту [DC ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5 1 0,2 Rf=0,35] Приклад 114 а Синтез репоізомерних моносукцинільованих продуктів р-нггрофеніл-р-І_-фукозиду 1100мг (3,86 ммоль) р-нггрофеніл-р-І_-фукозиду розчиняють в 50мл піридину та змішують з 580мг (5,79 ммоль) ангідриду бурштинової кислоти Після 16 год перемішування при 20°С згущують і ДВІЧІ ДИСТИЛЮЮТЬ з дихлорметаном Осаджують із суміші ЗО 29 61054 дихлорметан/простий ефір і одержують 1г невідоЗгущують та розмішують залишок із сумішшю простий ефір/пентан Після відсмоктування та сушіння кремлюваної суміші речовин, и розчиняють в супродукт, що залишився, розчиняють в 20мл абсоміші метанол/вода і змішують з 846мг (2,6 ммоль) лютного THF, додають 45мг 80-% гідриду натрію і карбонату цезію Випарюють розчинник і дистичерез 15хв вбризкуютьібОмкл метилйодиду Після люють з DMF Залишок розчиняють в DMF і змі20 год перемішування при 20°С охолоджують влишують з 618мкл бензилброміду Після оброблення ванням метанолу та льодяної оцтової кислоти, ультразвуком протягом 1 год бромід цезію відфізгущують і залишок розподіляють між дихлормельтровують і фільтрат згущують Розподіляють між таном та водою Органічну фазу осушують, згу500мл ефіру оцтової кислоти та 50мл води Оргащують і очищують шляхом тонкошарової хроматонічну фазу осушують та згущують Хроматографіграфії (дихлорметан/метанол 1001) Після чне відокремлення складових здійснюють в систезгущення та сушіння ВІДПОВІДНИХ фракцій одержумі розчинника дихлорметан/метанол 991 ють 188мг (79%) цільового продукту Одержують Фракція 1 87мг (4,8%) р-нітрофеніл-3-О-(3бензилоксикарбонілпропюніл)-р-І_-фукозиду [DC дихлорметан/метанол 95 5 Rf=0,45] Фракція 2 27мг (1,5%) р-нітрофеніл-2-О-(3бензилоксикарбонілпропюніл)-р-І_-фукозиду [DC дихлорметан/метанол 95 5 Rf=0,34] Фракція 3 190мг (10,3%) р-нітрофеніл-4-О-(3бензилоксикарбонілпропюніл)-р-І_-фукозиду [DC дихлорметан/метанол 95 5 Rf=0,28] Приклад 1 16 р-амІнофеніл-4-О-сукциніл-р-І_-фукозид 117) р-амшофеніл-3,4-ди-О-метил-р-І_фукозид 180мг (0,45 ммоль) сполуки із прикладу 1 17 b гідрують протягом 2 днів при кімнатній температурі в суміші 15мл метанолу та Змл дихлорметану після додавання 50мг паладію на активованому вугіллі Каталізатор відфільтровують, фільтрат згущують і очищують шляхом тонкошарової хроматографії (дихлорметан/метанол 97,5 2,5) Одержують 86мг (68%) цільової сполуки [DC дихлорметан/метанол 95 5 RpO,21] Приклад 1 18 р-амшофеніл-3-О-карбамоілметил-р-І_фукозид соон Фракцію 3 із прикладу 114 а гідрують аналогічно прикладу 1 14 Вихід 125МГ (88%) [DC ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5 1 0,2 RpO.63] Приклад 1 17 р-амшофеніл-3,4-ди-О-метил-р-І_-фукозид ЮОмг (0,305 ммоль) сполуки із прикладу 111 розчиняють в Юмл метанолу і змішують з 0,5мл 17-% розчину гідроксиду амонію Через 4 год згущують, розчиняють у воді і люфілізують Одержують 95мг цільової сполуки [DC ацетонітрил/вода 10 1 R F O , 4 3 ] Приклад 1 19 р-амшофеніл-2-О-пдроксиетил-р-І_-фукозид 117 а) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-Оізопропіліден-р-І_-фукозид 377мг (1,16 ммоль) сполуки із прикладу 1 1 а розчиняють в ЗОмл абсолютного THF, послідовно змішують з 690мкл бензилброміду та 52мг гідриду натрію перемішують при 20°С Через 4 год та 6 год ще раз додають 690мкл бензилброміду та гідриду натрію Пробу обробляють аналогічно прикладу 1 1 b Одержують 245мг (51%) цільової сполуки 1 17 Ь) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-ди-Ометил-р-І_-фукозид 245мг (0,59 ммоль) р-нітрофеніл-2-О-бензил3,4-О-ізопропіліден-р-І_-фукозиду протягом 16 год перемішують при 20°С в 80-% оцтовій кислоті Цю сполуку одержують, виходячи із 200мг (0,56 ммоль) р-нітрофеніл-2-Ометоксикарбонілметил-р-І_-фукозиду (приклад 113а) аналогічно прикладам 1 12а та 1 12 Вихід 76мг (45% в 2 стадії) [DC дихлорметан/метанол 9 1 RFO,2] Приклад 1 20 31 р-амшофеніл-3,6-ди-дезокси-3-хлор-р-І_гулозид 61054 32 Синтез повністю аналогічний прикладу 1 10, виходячи із р-нітрофеніл-3-О-метоксикарбонілметил-а-І_-рамнозиду Одержують цільовий продукт з виходом 80% [DC ацетонітрил/вода/льодяна оцтова кислота 5 1 0,2 Rf=0,26] Приклад 1 23 р-амшофеніл-р-О-галактопіранозид ОН 50мг (0,165 ммоль) сполуки із прикладу 1 6Ь протягом 1 год гідрують в 5мл метанолу над паладієм на активованому вугіллі Відфільтровують від каталізатора, промивають, згущують, розчиняють у воді і люфілізують Одержують 45мг (89%) цільової сполуки [DC дихлорметан/метанол 91 Rf=0,35] Приклад 1 21 р-амшофеніл-а-І_-рамнозид он Цю сполуку одержують, виходячи із ЗООмг рнггрофеніл-а-І_-рамнозиду (Sigma) аналогічно прикладу 1 1 Вихід 96% Приклад 1 22 р-амшофеніл-3-О-карбоксиметил-а-І_рамнозид р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозид (3,0г, 10 ммоль) розчиняють в суміші метанол/вода 1 1 (50мл) і після додавання паладію на активованому вугіллі (10% Pd, 200мг) протягом 3 год гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском Суспензію через целіт фільтрують і фільтрувальний матеріал промивають гарячою сумішшю метанол/вода 1 1 (ЮОмл) Згущення фільтрату у вакуумі та перекристалізація із метанолу дає безбарвні кристали (2,11г, 78%), DC [метанол] RFO,62, [a]2°=-39,5° (с=1,0/Н2О), т пл =166°С Приклад 1 24 р-амінофеніл-2-О-метил-р-Огалактопіранозид Me , І соон 1 22 а) р-нітрофеніл-3-Ометоксикарбонілметил-а-І_-рамнозид 481 мг (1,63ммоль) р-нітрофеніл-a-Lрамнозиду розчиняють в ЗОмл метанолу і змішують з 629мг (2,45 ммоль) дибутилоксиду олова Протягом 2 год нагрівають зі зворотним холодильником, згущують і розчиняють в ЗОмл діоксану Додають 85мг йодиду тетрабутиламонію та 950мкл метилового ефіру бромоцтової кислоти і протягом 16 год нагрівають зі зворотним холодильником При необхідності ще раз додають 1мл метилового ефіру бромоцтової кислоти та подовжують час реакції Згущують і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії, рнітрофеніл-З-О-метоксикарбонілметил-a-Lрамнозид елююють сумішшю дихлорметан/метанол 99 1 і після сушіння одержують 408мг (70%) (DC дихлорметан/метанол 95 5 Rf=0,36] 1 22) р-Амшофеніл-3-О-карбоксиметил-а-І_рамнозид 1 24 а) р-нітрофеніл-6-О-трифенілметил-р-Огалактопіранозид Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду (9,0г, ЗО ммоль), хлортрифенілметану (16,7г, 60 ммоль) та N.N-ди-метиламінопіридину (609мг, 5 ммоль) в абсолютному піридині (ЮОмл) витримують 4 год при 60°С Після згущення у вакуумі залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 2 1^3 2, за певних умов з 0,5% триетиламіном] Одержують безбарвні кристали (9,23г, 57%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,55, T пл =82°С 1 24 Ь) р-нітрофеніл-3,4-О-ізопропіліден-6-Отрифенілметил-р-О-галактопіранозид Вказану вище сполуку (8,7г, 16 ммоль) змішують з диметоксипропаном (400мл) та каталітичною КІЛЬКІСТЮ (±)-камфоро-[О-сульфоновоі кислоти (400мг, 1,7 ммоль) Через 1 годину при кімнатній температурі припиняють реакцію шляхом додавання триетиламшу (240мл, 1,7 ммоль) та згущують у вакуумі Шляхом тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 2 1] одержують 34 33 61054 безбарвну піну (6,2г, 66%), DC [петролейний 1 год осушують у вакуумі Потім розчиняють діокефір/етилацетат 1 1] Rf=0,46, [a] --42,1° саном (40мл), одержаний розчин змішують з метил (с=0,94/СН2СІ2) йодидом (1,9мл, ЗО ммоль) і протягом 16 год перемішують пробу при 100°С у водяній бані Потім 1 24 с) р-нітрофеніл-2-О-метил-3,4-Орозчинник відганяють у вакуумі і залишок очищуізопропіліден-б-О-трифенілметил-p-Dють шляхом тонкошарової хроматографії [етилагалаїсгопіранозид цетат/петролейний ефір 2 І^етилацетат] ОдерРозчиняють сполуку 1 24 b (5,83г, 10 ммоль) в жують безбарвні кристали (1,32г, 84%), DC диметилформаміді (ЮОмл) та змішують з метил[дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] йодидом (2,5мл, 40 ммоль) та порціями з 80-% 20 RFO,34, Т ПЛ =196°С, [а] =-53,3° (с=1,0/СН3ОН) суспензією гідриду натрію в мінеральному маслі (450мг, 15 ммоль) Через 2 год при кімнатній тем1 25) р-амшофеніл-З-О-метил-р-Опературі припиняють реакцію додаванням краплягалактопіранозид ми метанолу (Юмл) та згущують у вакуумі ЗалиВказану вище сполуку (946мг, 3 ммоль) відношок розчиняють в дихлорметан (ЮООмл) і розчин влюють і оброблюють як описано в прикладі 124 розмішують з водою (500мл) Органічну фазу осуОдержують коричнюваті кристали (656мг, 77%), шують сульфатом магнію (50г), згущують у вакуумі DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] 20 і очищають шляхом тонкошарової хроматографії Rf=0,21 , т пл =196°С, [а] =-25,2° (с=1,0/СН3ОН) [петролейний ефір/етилацетат 12 1^8 1] ОдерПриклад 1 26 жують безбарвну піну (4,72г, 79%), DC [петролейр-амінофеніл-4-О-метил-р-Оний ефір/етилацетат 1 1] Kf=0,72, [a] --35,7° галактопіранозид, ацетат (с=1,0/СН3ОН) ОН 1 24 d) р-нітрофеніл-2-О-метил-р-Огалактопіранозид Розчин одержаної вище сполуки (4,48г, 7,5 ммоль) в дихлорметані (200мл) змішують з 99-% трифтороцтовою кислотою (20мл) і 3 год перемішують при кімнатній температурі Після згущення у вакуумі залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 5 1 ^ 2 1] Одержують безбарвні кристали (1,09г, 1 26 а) р-нітрофеніл-3-О-бензил-р-О46%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) галактопіранозид 15 3 0,2] Rf=0,42, т пл=177°С Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду 1 24) р-амінофеніл-2-О-метил-р-О(1,5г, 5,0 ммоль) в абсолютному діоксані (40мл) галактопіранозид змішують з дибутилоксидом олова (1,87г, 7,5 Сполуку 1 24 d (946мг, 3 ммоль) розчиняють в ммоль) і нагрівають зі зворотним холодильником метанолі (50мл) і після додавання води (0,5мл) та Через 3 год одержаний розчин змішують з бензилосновного нікелю Ренея (близько 200мг) протягом бромідом (3,6мл, ЗО ммоль) і перемішують пробу 2 год гідрують в атмосфері водню під незначним ще 48 год зі зворотним холодильником Потім віднадлишковим тиском Суспензію фільтрують через ганяють розчинник у вакуумі і залишок очищують целіт і фільтрувальний матеріал ретельно промишляхом тонкошарової хроматографії [етилацевають метанолом (ЮОмл) Згущення фільтрату у тат/петролейний ефір 2 1 —>1 1 ] Одержують безвакуумі дає коричнювату піну (579мг, 68%), DC барвні кристали (1,58г, 81%), DC [дихлорме[дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] тан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RFO,69, T Rf=0,28, [а]20=-39,3° (с=0,15/ СН3ОН) пл =127°С Приклад 1 25 1 26 Ь) р-нітрофеніл-3-О-бензил-4,6-Ор-амшофеніл-З-О-метил-р-Оізопропіліден-р-О-галактопіранозид галактопіранозид Сполуку 1 26 а (6,26г, 16 ммоль) перетворюОН ють як описано в прикладі 1 24 b Після хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 5 1 ^ 3 1] одержують безбарвну піну (6,54г, 95%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] Rf=0,34, [a] =38,9°(с=1,0/СН 2 СІ 2 ) 1 26 С) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-4,6-Оізопропіліден-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 26 b (4,31г, 10 ммоль) розчиняють в диметилформаміді (ЮОмл) і змішують з бензилбромідом (12мл, 100 ммоль) та порціями з 80-% суспензією гідриду натрію в мінеральному маслі 1 25 а) р-нітрофеніл-3-О-метил-р-О(450мг, 15 ммоль) Через 2 год при кімнатній темгалактопіранозид пературі реакцію припиняють додаванням крапляРозчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду ми метанолу (Юмл) і згущують у вакуумі Залишок (1,5г, 5,0 ммоль) в абсолютному метанолі (40мл) розчиняють в дихлорметані (ЮООмл) і розчин роззмішують з дибутилоксидом олова (1,87г, 7,5 мішують з водою (500мл) Органічну фазу осушуммоль) і нагрівають зі зворотним холодильником ють сульфатом магнію (50г), згущують у вакуумі і Через 3 год згущують у вакуумі і залишок протягом 36 35 61054 очищають шляхом тонкошарової хроматографії Фракція 1 р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-О[петролейний ефір/етилацетат 20 1 —>15 1 —>10 1] ізопропіліден-б-О-трифенілметил-p-DОдержують ще не очищену безбарвну маслянисту галактопіранозид, рідину (2,72г, 52%), DC [петролейний жовтувата піна (1,71г, 25%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] RpO,62 ефір/етилацетат 2 1] RFO,72, [a] --8,1° (с=1,0/СН2СІ2) 1 26 d) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-р-0галактопіранозид Фракція 2 р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-ОВказану вище сполуку (2,6г, 5 ммоль) переізопропіліден-р-О-галактопіранозид, творюють як описано в прикладі 1 24 d Після згужовтувата масляниста рідина (806мг, 19%), щення у вакуумі та випарювання залишку діетилоDC [петролейний ефір/етилацетат 2 1] Rf=0,45, 20 вим ефіром одержують безбарвні кристали (805мг, [а] =+2,8°(с=1,2/СН3ОН) 33%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] 1 27 Ь) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4-ОRf=0,23, т пл =160°С ізопропіліден-6-О-метил-р-0-галактопіранозид 1 26 є) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-6-ОФракцію 2 із прикладу 1 27 а (777мг, 1,8 трифенілметил-р-О-галактопіранозид ммоль) метилюють як описано в прикладі 1,24 с Сполуку 1 26 d (722мг, 1,5 ммоль) триетилюПісля тонкошарової хроматографії [петролейний ють як описано в прикладі 1 24 а Після тонкошаефір/етилацетат 10 1^8 1] одержують коричнюварової хроматографії [петролейний ту маслянисту рідину (730мг, 91%), DC [петролейефір/етилацетат 15 1^10 1^5 1] одержують безний ефір/етилацетат 2 1] RFO,54, [a] =-11,6° (с= барвну піну (880мг, 81%), DC [петролейний 1,1/СН2СІ2) ефір/етилацетат 2 1] Rf=0,79, [a] --25,3° (с=0,3 / 1 27 с) р-нітрофеніл-2-О-бензил-6-ОСН2СІ2) метил-р-О-галактопіранозид 1 26 f) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-бензил-4-ОВказану вище сполуку (668мг, 1,5 ммоль) пеметил-6-О-трифенілметил-р-0-галактопіранозид ретворюють як описано в прикладі 1 24 d ЗгущенВказану вище сполуку (724мг, 1 ммоль) меня фільтрату у вакуумі та випарювання залишку з тилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонневеликою КІЛЬКІСТЮ діетилового ефіру після охокошарової хроматографії [петролейний лодження до кімнатної температури дає світлобеефір/етилацетат 10 1 —>5 1] одержують безбарвну жеві кристали (388мг, 64%), DC [петролейний піну (662мг, 90%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] RpO,15, т пл=143°С ефір/етилацетат 5 1] RFO,66, [a] --38,7° 1 27) р-амінофеніл-6-О-метил-р-О(с=0,2/СН2СІ2) галактопіранозид 1 26) р-амінофеніл-4-О-метил-р-ОСполуку 1 27 с (324мг, 0,8 ммоль) протягом 16 галактопіранозид, ацетат год відновлюють як описано в прикладі 1 24 Після Вказану вище сполуку (590мг, 0,8 ммоль) роззгущення фільтрату у вакуумі та випарювання зачиняють в 90-% оцтовій кислоті (50мл) і після долишку з невеликою КІЛЬКІСТЮ діетилового ефіру давання паладію на активованому вугіллі (10% Pd, одержують бежеві кристали (184мг, 81%), DC 200мг) гідрують протягом 16 год в атмосфері вод[етилацетат] Rf=0,05, т пл =115°С (розклад ) ню під незначним надлишковим тиском Суспензію Приклад 1 28 фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал р-амшофеніл-2,3-ди-О-метил-р-0ретельно промивають метанолом (ЮОмл) Згугалактопіранозид щення фільтрату у вакуумі та осадження залишку із суміші діетиловий ефір/петролейний ефір дає безбарвні кристали (253мг, 92%), DC [дихлорметан/метанол 5 1] Rf=0,12 Приклад 1 27 р-амінофеніл-6-О-метил-р-Огалактопіранозид 1 27 а) бензиліешпд сполуки 1 24 b Сполуку 1 24 b (5,84г, 10 ммоль) бензилюють як описано в прикладі 1 26 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 15 1 —>12 1^5 1 ^етилацетат, при необхідності 0,5% триетиламш] одержують дві фракції 1 28 а) ізопропіліденішпд Рvon нітрофеніл-р-О-галактопіранозид Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду (7,5г, 25 ммоль) в абсолютному ацетоні (ЮООмл) змішують з безводною толуолсульфоновою кислотою (500мг) Протягом ЗОхв при нормальному тискові відганяють ацетон (250мл) і зразу ж нейтралізують додаванням карбонату калію (500мг) Після згущення у вакуумі залишок розмішують з діетиловим ефіром (ЮООмл) Відфільтровують, згущують фільтрат і очищають шляхом тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 2 1 —>1 1^3 2] При цьому в осад випадають дві фракції 37 61054 Фракція 1 р-нітрофеніл-3,4-0ізопропіліден-р-О-галактопіранозид, безбарвна піна (3,74г, 44%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RFO,59, 20 [а] =-54,2° (с=0,38/СН 3 ОН) Фракція 2 р-нітрофеніл-4,6-0ізопропіліден-р-О-галактопіранозид, безбарвна піна (4,3г, 50%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RF3,54, 20 [а] =-81,0°(с=0,31/СН 3 ОН) 1 28 Ь) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-метил-4,6-Оізопроптіден-р-О-галактопіранозид Фракцію 2 із прикладу 1 28 а (4,1г, 12 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 5 1 ^ 2 1] одержують безбарвну піну (2,93г, 66%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] RFO,42, [a] 2 0 =-52,6° (с=0,34/СН 3 ОН) 1 28 с) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-метил-р-0галактопіранозид Вказану вище сполуку (2,77г, 7,5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 24 d Через 1 год згущують при кімнатній температурі у вакуумі і залишок протягом 1 год сушать у вакуумі Шляхом дигерування із сумішшю діетиловий ефір/петролейний ефір 1 1 (ЮОмл) одержують безбарвні кристали (1,11г, 45%), DC [етилацетат] R F O , 2 4 , т пл =156°С 38 20 ефір/етилацетат 2 1] RFO,22, [a] =-22,6° (с=1,03/СН 2 СІ 2 ) 1 29 Ь) р-нітрофеніл-2,4-ди-О-метил-3-Обензил-6-О-трифенілметил-р-0-галактопіранозид Фракцію 2 із прикладу 1 29 а (7,6г, 12 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 15 1 —>10 1] одержують безбарвну піну (7,07г, 89%), DC [петролейний ефір/етилацетат 2 1] RFO,79, [a] --35,8° (с=1,09/СН 3 ОН) 1 29 с) р-амшофеніл-2,4-ди-О-метил-3-Обензил-р-О-галактопіранозид Вказану вище сполуку (6,0г, 9 ммоль) протягом 48 год гідрують як описано в прикладі 1 26 Одержують безбарвні кристали (1,39г, 40%), DC [етилацетат/петролейний ефір 2 1] R F 0 , 2 0 , т п л = 1 4 8 ° С 1 29) р-амшофеніл-2,4-ди-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 29 с (779мг, 2 ммоль) протягом 5 днів гідрують як описано в прикладі 1 24 Після випарювання об'єднаних фільтратів у вакуумі та виварювання залишку з діетиловим ефіром (2х50мл) одержують зеленуваті кристали (391 мг, 65%), DC [етилацетат] R F O , 1 6 , Т ПЛ =260°С (розклад ) Приклад 1 ЗО р-амшофеніл-2,6-ди-О-метил-р-0галактопіранозид 1 28) р-амшофеніл-2,3-ди-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 38 с (989мг, 3 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1 24 Одержують безбарвну маслянисту рідину (396мг, 44%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2], R F 0 , 5 0 , [a] = 19,4°(с=0,16/СН 3 ОН) Приклад 1 29 р-амшофеніл-2,4-ди-О-метил-р-0галактопіранозид ОН 1 29 а) триетилювання сполуки 1 26 а Сполуку 1 26 3 (11,7г, ЗО ммоль) триетилюють як описано в прикладі 1 24 а Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 10 1 ^ 7 1 ^ 5 1, при необхідності з 0,5% триетиламіном] одержують два продукти Фракція 1 трифенілметил-2-О-(р-нітрофеніл)3-О-бензил-6-О-трифенілметил-р-0галактопіранозид, безбарвна піна (8,5г, 32%), DC [петролейний ефір/етилацетат 2 1] RFO,68, [a] -+42,8° (с=1,0/СН 2 СІ 2 ) Фракція 2 р-нітрофеніл-З-О-бензил-6-Oтрифенілметил-р-О-галактопіранозид, безбарвна піна (9,0г, 47%), DC [петролейний 1 ЗО а) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-метил-3,4-Оізопропіліден-р-О-галактопіранозид Фракцію 1 із прикладу 1 28 а (4,1г, 12 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 10 1 ^ 8 1 ^ 5 1] одержують безбарвну маслянисту рідину (3,25г, 73%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] R F O , 6 5 1 ЗО Ь) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-метил-р-0галактопіранозид Вказану вище сполуку (2,77г, 7,5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 24 d Після тонкошарової хроматографії [етилацетат/петролейний ефір 2 1] одержують безбарвні кристали (1,63г, 66%), DC [етилацетат] R F O , 3 1 , T пл =222°С 1 ЗО) р-амшофеніл-2,6-ди-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 ЗО b (989мг, 3 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1 24 Одержують безбарвну маслянисту рідину (597мг, 66%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 53,1°(с=0,49/СН 3 ОН) Приклад 1 31 15 3 0,2] R F O , 5 6 , [a] = 39 61054 р-амшофеніл-3,4-ди-О-метил-р-0галактопіранозид, ацетат ОН сн 3 соон 1 31 а) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-Оізопропіліден-р-О-галактопіранозид Фракцію 1 із прикладу 1 28 а (4,1г, 12 ммоль) бензилюють як описано в прикладі 1 26 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 6 1] одержують жовтувату маслянисту рідину (5,3г, 85%), DC [етилацетат/петролейний ефір 21] Rf=0,76, [a]20=+8,8° (с=1,2/СН3ОН) 1 31 Ь) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-р-0галактопіранозид, Вказану вище сполуку (4,69г, 9 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 24 d Через ЗОхв згущують у вакуумі при кімнатній температурі і залишок протягом 1 год сушать у вакуумі Шляхом перекристалізації із етанолу одержують безбарвні кристали (2,89г, 67%), DC [етилацетат/петролейний ефір 2 1] Rf=0,42, т пл=133°С, [а] 20 =-64,2°(с=1,0/СН 3 ОН) 1 31 с) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-ди-Ометил-р-О-галактопіранозид Вказану вище сполуку (2,4г, 5 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після перекристалізації із суміші етанол/n-гексан одержують безбарвні кристали (1,74г, 69%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] RpO,74, т пл=149°С 1 31) р-амшофеніл-3,4-ди-О-метил-р-0галактопіранозид, ацетат Сполуку 1 31 с (1,52г, 3 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 26 Одержують безбарвні кристали (664мг, 62%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,47, т пл =140°С (розклад) Приклад 1 32 р-амшофеніл-3,6-ди-О-метил-р-0галактопіранозид о' • СН 1 32 а) р-нітрофеніл-3-О-метил-6-О-(третбутилдіметилсиліл)-р-О-галактопіранозид Розчин сполуки 1 25 а (1,58г, 5 ммоль) в диметилформаміді (150мл) змішують з імідазолом (1г, 15 ммоль) та хлоридом трет-бутилдіметилсилілу (1,25г, 8 ммоль) і протягом 24 год перемішують 40 при кімнатній температурі Потім реакцію припиняють шляхом додавання води (ЮОмл) Розводять дихлорметаном (ЮООмл), органічну фазу промивають водою (2х1000мл), сушать сульфатом магнію (20г) та згущують у вакуумі Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 15 1 —>10 1^5 1] одержують неочищену жовтувату піну (826мг, 38%), DC [етилацетат] Rf=0,59, [a] =56,3°(с=1,0/СН 2 СІ 2 ) 1 32 Ь) р-нітрофеніл-2,4-ди-О-бензил-3-Ометил-6-О-(трет-бутилдіметилсиліл )-p-Dгалактопіранозид Вказану вище сполуку (773мг, 1,8 ммоль) бензилюють як описано в прикладі 1 26 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 30 1^5 1] одержують безбарвну піну (810мг, 74%), DC [петролейний ефір/етилацетат 5 1] RpO,58 1 32 с) р-нітрофеніл-2,4-ди-О-бензил-3-Ометил-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 32 b (732мг, 1,2 ммоль) розчиняють в тетрапдрофурані (бмл) і при 0°С змішують з 1Nрозчином фториду тетрабутиламонію в THF (2,4мл) Протягом 40хв перемішують при кімнатній температурі, а потім згущують у вакуумі Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 5 1^3 1^2 1] одержують безбарвні кристали (512мг, 86%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] RpO,36, т пл=177°С 1 32 d) р-нітрофеніл-2,4-ди-О-бензил-3,6-ди-Ометил-р-О-галактопіранозид Вказану вище сполуку (446мг, 0,9 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 20 1^10 1^8 1] одержують безбарвну маслянисту рідину (401 мг, 87%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] Rp70, [a] =-56,5° (с=0,96/СН2С12) 1 32) р-амшофеніл-3,6-ди-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 32 d (357мг, 0,7 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Після випарювання об'єднаних фільтратів у вакуумі та виварювання залишку з діетиловим ефіром (20мл) одержують безбарвні кристали (207мг, 99%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] Rp0,02, т пл =>280°С (розклад) Приклад 1 33 р-амшофеніл-4,6-ди-О-метил-р-0галактопіранозид 1 33 а) р-нітрофеніл-2 3-ди-О-бензил-4,6-ди-Ометил-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 26 d (2,4г, 5 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової 42 41 61054 хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 5 1 ^ 3 1 ] одержують безбарвні кристали (1,89г, 74%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] Rf=0,76 т пл =100°С 1 33) р-амшофеніл-4,6-ди-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 33 а (1,53г, 3 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Одержують безбарвні кристали (890мг, 99%), DC [метанол/етилацетат 1 1] Rf=0,71,T пл=180°С (розклад ) Приклад 1 34 р-амшофеніл-2,3,4-три-О-метил-р-0галактопіранозид ОН 1 34 а) р-нітрофеніл-2,3,4-три-О-метил-6-Отрифенілметил-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 24 а (1,63г, 3 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 5 1^3 1] одержують безбарвну піну (1,24г, 71%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] Rf=0,54, [а]20=-53,6° (с=0,3 / СНзОН) 1 34 Ь) р-нітрофеніл-2,3,4-три-О-метил-р-0галактопіранозид Вказану вище сполуку (1,17г, 2 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 24 d Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 3 1^2 1] одержують безбарвні кристали (468мг, 68%), [петролейний DC ефір/етилацетат 1 1] Rf=0,12, т пл=104°С, [а] 20 =-68,2 (с=0,47 / СНзОН) 1 34) р-амшофеніл-2,3,4-три-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 34 b (343мг, 1 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1 24 Одержують бежеві кристали (224мг, 71%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,67, т пл =138°С Приклад 1 35 р-амшофеніл-2,3,6-три-О-метил-р-0галактопіранозид 1 35 а) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 ЗО b (2,63г, 3 ммоль) селективно метилюють як описано в прикладі 1 25 а Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 5 1^2 1] одержують коричнювату маслянисту рідину (890мг, 32%), DC [етилацетат] RFO,37, [а]20=-63,3° (с=0,9 / СН2СІ2) 1 35) р-амшофеніл-2,3,6-три-О-метил-р-0галактопіранозид Вказану вище сполуку (858мг, 2,5 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1 24 Одержують бежеву піну (519мг, 66%), DC [етилацетат] RFO,23, [а]20=-34,5° (с =0,86 / СН3ОН) Приклад 1 36 р-амшофеніл-2,4,6-три-О-метил-р-0галактопіранозид 1 36 а) р-нітрофеніл-2,4,6-три-О-метил-3-Обензил-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 26 а (1,96г, 5 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 10 1 —>8 1] одержують безбарвні кристали (1,47г, 68%), DC [петролейний ефір/етилацетат 21] RFO,46, т пл =164°С 1 36) р-амшофеніл-2,4,6-три-О-метил-р-0галактопіранозид Вказану вище сполуку (1,3г, 3 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1 26 Одержують безбарвні кристали (642мг, 68%), DC [етилацетат/петролейний ефір 2 1] RFO,12, т пл =147°С (розклад ) Приклад 1 37 р-амшофеніл-3,4,6-три-О-метил-р-0галактопіранозид 43 .сн. ч о 61054 Ґ о к. ОТ .0 44 єднаних фільтратів у вакуумі та виварювання залишку з діетиловим ефіром (20мл) одержують безбарвні кристали (412мг, 84%), DC [етилацетат] Rf=0,42, т пл =204°С (розклад ) Приклад 1 39 р-амшофеніл-а-О-маннопіранозид ОН '''он 1 не" Q 1 37 а) р-нітрофеніл-2-О-бензил-р-Огалактопіранозид ( Фракцію 1 із прикладу 1 27 а (1,17г, 2 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 24 d Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 3 1^2 1] одержують безбарвні кристали (468мг, 68%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] Rp 0,12, т пл =104°С, [а] 20 =68,2°(с=0,47/СН 3 ОН) 1 37 Ь) р-нітрофеніл-2-О-бензил-3,4,6-три-Ометил-р-О-галактопіранозид Вказану вище сполуку (391 мг, 1 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 10 1^5 1] одержують СВІТЛОЖОВТІ кристали (ЗОЗмг, 70%), DC [етилацетат] Rf= 0,81, [а]20=-76,5°(с=1,1 /СН2СІ2) 1 37) р-амшофеніл-3,4,6-три-О-метил-р-0галактопіранозид Сполуку 1 37 b (260мг, 0,6 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Одержують бежеві кристали (161мг, 86%), DC [етилацетат] R F 0 , 2 0 , T пл =132°С Приклад 1 38 р-амшофеніл-2,3,4,6-тетра-О-метил-р-0галактопіранозид 1 38 а) р-нітрофеніл-2,3,4,6-тетра-Ометил-р-О-галактопіранозид р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозид (904мг, З ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 8 1^6 1^4 1^2 1] одержують безбарвну, воскоподібну тверду речовину (633мг, 59%), DC [етилацетат] RFO,67, [а]20=-55,7° (с=0,9/ СН2СІ2) 1 38) р-амшофеніл-2,3,4,6-тетра-Ометил-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 33 а (536мг, 1,5 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Після випарювання об' р-нітрофеніл-а-О-маннопіранозид (3,0г, 10 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 23 Переосадження із суміші метанол/діетиловий ефір дає безбарвні кристали (2,03г, 75%), DC [метанол] RFO,69, [аГ=+102,7°(с=1,0/Н 2 О) т пл=161°С Приклад 1 40 р-амшофеніл-З-О-метил-а-О-маннопіранозид ОН 1 40 а) р-нітрофеніл-6-О-трифенілметил-а-Оманнопіранозид р-нітрофеніл-а-О-маннопіранозид (3,0г, Юммоль) триетилюють як описано в прикладі 1 24 а Одержують безбарвні кристали (4,35г, 80%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RpO,52, [а]20=+104,0° (с=1,0 / СН3ОН), т пл =102-104°С 1 40 Ь) р-нітрофеніл-З-О-метил-6-Oтрифенілметил-а-О-маннопіранозид Вказану вище сполуку (2,72г, 5 ммоль) перетворюють метилйодидом (2мл, ЗО ммоль) як описано в прикладі 1 26 а Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 2 1] та осадження із суміші етанол/n-гексан одержують безбарвні кристали (1,83г, 66%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RFO,68, [а]20=+106,4° (с=1,0 / СН3ОН), т пл =104°С 1 40) р-амшофеніл-З-О-метил-а-Оманнопіранозид Сполуку 1 40 b (1,4г, 2,5 ммоль) розчиняють в метанолі (50мл) і після додавання паладію на активованому вугіллі (10% Pd, 300мг) протягом 24 год гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском Суспензію фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал ретельно промивають метанолом (ЮОмл) Після згущення фільтрату у вакуумі залишок розчиняють водою (50мл), відфільтровують і фільтрат люфілізують Одержу 45 61054 ють коричнювату аморфну речовину (709мг, 99%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] 20 Rf=0,33, [а] =+92,9° (с=1,1 / СН3ОН) Приклад 1 41 р-амшофеніл-2,3-ди-О-метил-а-0маннопіранозид 46 ОН 1 41 а) р-нітрофеніл-4,6-О-бензиліден-а-0маннопіранозид Розчин р-нітрофеніл-а-О-маннопіранозиду (6,0г, 20 ммоль) в диметилформаміді (120мл) змішують з бензальдепд-ди-метилацеталом (3,2мл, 21,4 ммоль) та 54-% розчином тетрафторборної кислоти в діетиловому ефірі (2,7мл, 20 ммоль) Протягом 5 год перемішують при кімнатній температурі, потім припиняють реакцію шляхом додавання триетиламшу (2,8мл, 20 ммоль) та згущують у вакуумі Після тонкошарової хроматографії [толуол -^толуол/етанол 20 1] одержують безбарвні кристали (6,48г, 83%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,82, [а] 20 =+170,7°(с=1,0/СН 2 СІ2),т пл =116°С 1 41 Ь) р-нітрофеніл-2,3-ди-О-метил-4,6-Обензиліден-а-О-маннопіранозид Вказану вище сполуку (3,9г, 10 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 20 1^7 1] та осадження із суміші етил а цетат/n-гексан одержують безбарвну піну (3,2г, 77%), DC [етилацетат/петролейний ефір 2 1] Rf=0,67, [а]20=+167,3°(с=1,05/СН3ОН) 1 41) р-амшофеніл-2,3-ди-О-метил-а-0маннопіранозид Сполуку 1 41 b (1,25г, 3 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 26 Після тонкошарової хроматографії [етилацетат/петролейний ефір 2 1 ^етилацетат, при необхідності з 0,5% триетиламіном] одержують червонувато-коричневу піну (480мг, 53%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RpO.31, [a]=+83,6° (с=0,76 / СНзОН) Приклад 1 42 1 42 а) р-нітрофеніл-3-Ометоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду (7,53г, 25 ммоль) в абсолютному діоксані (180мл) змішують з дибутилоксидом олова (9,3г, 37,5 ммоль) і нагрівають зі зворотним холодильником Через 4 год одержаний розчин змішують з метиловим ефіром бромоцтової кислоти (8,3мл, 90 ммоль) та йодидом тетрабутиламонію (9,25г, 25 ммоль) і перемішують пробу протягом наступних З год зі зворотним холодильником Потім розчинник відганяють у вакуумі і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії [дихлорметан/метанол 50 1^20 1] Одержують поряд з деякими побічними продуктами сполуку 1 42 а у вигляді безбарвних кристалів (4,05г, 43%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RFO,54, [а]20=-62,0° (с=1,0/СН3ОН),т пл =176°С 1 42) р-амінофеніл-3-Ометоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 42 а (3,73г, 10 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Після осадження із суміші етанол/n-гексан одержують безбарвні кристали (2,98г, 87%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RFO,39, [а]20=-36,3° (с=1,07 / СНзОН), т пл =155°С Приклад 1 43 1 43 а) р-нітрофеніл-З-О-карбоксиметил-р-Огалактопіранозид, натрієва сіль Розчин сполуки 1 42 а (3,73г, 10 ммоль) в метанолі (ЮОмл) змішують з розчином гідроксиду натрію (400мг, 10 ммоль) у воді (5мл) і протягом 2 год перемішують при кімнатній температурі Після згущення у вакуумі залишок протягом 2 год сушать у вакуумі, а потім змішують з етанолом (ЮОмл) Кип'ятять 5хв зі зворотним холодильником, фільт 47 61054 рують після охолодження у льодяній бані і одержують безбарвні кристали (3,66г, 96%), DC [метанол] RpO,62, [а]20=-50,0° (с=1,0 / СН3ОН), т пл =180-185°С 1 43) р-амшофеніл-З-О-карбоксиметил-р-Огалактопіранозид, натрієва сіль Вказану вище сполуку (3,05г, 8 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Після виварювання з етанолом (50мл) одержують безбарвні кристали (2,03г, 72%), DC [метанол] RpO.70, [а] 20 =22,4° (с=1,0 / СНзОН), т пл =180-182°С Приклад 1 44 р-амшофеніл-З-О-карбамоілметил-р-Огалактопіранозид ОН 1,44 а) р-нітрофеніл-З-О-карбамоілметил-р-Огалактопіранозид Розчин сполуки 1 42 а (373мг, 1 ммоль) в метанолі (ЗОмл) змішують з 25-% водним розчином аміаку (Юмл) і протягом 15хв Перемішують при кімнатній температурі Після згущення у вакуумі залишок протягом 2 год осушують у вакуумі, а потім змішують з етанолом (ЗОмл) Кип'ятять 5хв зі зворотним холодильником, фільтрують після охолодження у льодяній бані і одержують безбарвні кристали (306мг, 85%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,14, [a] =41,7° (с=1,0 / СНзОН), т пл =229°С (розклад ) 1 44) р-амшофеніл-З-О-карбамоілметил-р-Огалактопіранозид Вказану вище сполуку (287мг, 0,8 ммоль) як описано в прикладі 1 24 гідрують Після осадження із суміші метанол/діетиловий ефір одержують безбарвні кристали (207мг, 79%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rp 0,10, т пл =205°С (розклад) Приклад 1 45 р-амінофеніл-3-О-(г\І-метилкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид 1 45 а) р-нггрофеніл-3-О-(г\І-метилкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид Розчин сполуки 1 42 а (373мг, 1 ммоль) в метанолі (ЗОмл) змішують з 30-% водним розчином метиламіну (Юмл) і 2 год перемішують при кімнатній температурі Після згущення у вакуумі залишок протягом 2 год сушать у вакуумі, а потім перекристалізують із етанолу Одержують безбарвні кристали (372мг, 100%), DC [дихлорметан/ метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RpO.33, [а]20=-36,7° (с=1,0/СНзОН), т пл=205°С 1 45) р-амінофеніл-3-О-(г\І-метилкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 45 а (298мг, 0,8 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Після осадження із суміші метанол/діетиловий ефір одержують безбарвні DC кристали (180мг, 66%), 15 3 0,2] [дихлорметан/метанол/аміак (25%) Rf=0,16, Т ПЛ =239°С Приклад 1 46 р-амінофеніл-3-О-(г\І-пропілкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид ОН 1 46 а) р-нггрофеніл-3-О-(г\І-пропілкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 42 а (373мг, 1 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 45 а п-пропіламіном (823мкл, 10 ммоль) Після згущення у вакуумі залишок осаджують із суміші етанол/n-гексан Одержують безбарвні кристали (340мг, 85%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,49, [а]20=-32,4° (с=1,0 / СНзОН), т пл =155°С 1 46) р-амінофеніл-3-О-(І\І-пропілкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 46 а (320мг, 0,8 ммоль) гідрують як 49 50 61054 описано в прикладі 1 24 Після осадження із суміші метанол/діетиловий ефір одержують безбарвні кристали (188мг, 63%), DC 15 3 0,2] [дихлорметан/метанол/аміак (25%) Rf=0,31,T пл =154°С Приклад 1 47 р-амінофеніл-3-О-(І\І-бутилкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид ОН R F 0 , 5 0 , Т ПЛ =95-97°С 1 48) р-амінофеніл-3-Ометоксикарбонілметил-а-О-маннопіранозид Сполуку 1 48 а (1,23г, 2 ммоль) гідрують та оброблюють як описано в прикладі 1 40 Одержують коричнювату аморфну речовину (250мг, 36%), DC [дихлорметан/ метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RFO,45 Приклад 1 49 р-амшофеніл-З-О-карбоксиметил-а-Оманнопіранозид ОН 1 47 а) р-нітрофеніл-3-О-(І\І-бутилкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 42 а (373мг, 1 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 45 а п-бутиламіном (900мкл, 10 ммоль) Після згущення у вакуумі залишок осаджують Із суміші етанол/n-гексан Одержують безбарвні кристали (413мг, 100%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,51, [аГ=-26,8° (с=1,0 / СНзОН), т пл =92°С 1 47) р-амінофеніл-3-О-(г\І-бутилкарбамоілметил)-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 47 а (332мг, 0,8 ммоль) гідрують як описано в прикладі 1 24 Після осадження із суміші етанол/n-гексан одержують безбарвні кристали (105мг, 34%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,32, т пл =135°С Приклад 1 48 р-амшофеніл-З-О-метоксикарбонілметил-а-Оманнопіранозид ОН О Na 1 49 а) р-нітрофеніл-3-Обензоксикарбонілметил-б-О-трифенілметил-a-Dманнопіранозид Сполуку 1 40 а (13,6г, 25 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 42 а бензиловим ефіром бромоцтової кислоти (14,4мл, 90 ммоль) Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 20 1 —>10 1] поряд з деякими побічними продуктами одержують жовтувату піну (5,0г, 29%), DC [етилацетат/петролейний ефір 21] RFO,66, [a]20=+74,8° (c=1,0 / СН2СІ2) 1 49) р-амшофеніл-3-О-карбоксиметил-а-Оманнопіранозид Вказану вище сполуку (2,08г, 3 ммоль) протягом 36 год гідрують як описано в прикладі 1 40 Після згущення фільтрату осаджують залишок із суміші етанол/n-гексан Шляхом промивання етилацетатом та повторного осадження із суміші етанол/диетиловий ефір одержують безбарвні кристали (495мг, 50%), DC [метанол] RFO,53, T пл =205-207°С Приклад 1 50 р-амшофеніл-З-О-карбамоілметил-а-Оманнопіранозид ОН 1 48 а) р-нітрофеніл-3-Ометоксикарбонілметил-б-О-трифенілметил-a-Dманнопіранозид Сполуку 1 40 а (13,6г, 25 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 42 а Після тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 10 1] поряд з деякими побічними продуктами одержують безбарвні кристали (2,79г, 18%), DC [етилацетат/петролейний ефір 21] 1 50 а) р-нітрофеніл-З-О-карбамоілметил-6-Oтрифенілметил-а-О-маннопіранозид 51 61054 52 Сполуку 1 49 а (1,04г, 1,5 ммоль) перетворю1 51 с) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3ють як описано в прикладі 1 44 а Після сушіння у дезокси-р-О-галактопіранозид вакуумі залишок очищують шляхом тонкошарової Вказану вище сполуку (1,31г, 2 ммоль) розчихроматографії [петролейний ефір/етилацетат 2 3] няють в толуолі (25мл) і змішують з тетраборопдОдержують безбарвні кристали (561 мг, 62%), DC ратом тетрабутиламонію (1,54г, 6 ммоль) Через 2 [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] год при 80°С пробу розводять дихлорметаном Rf=0,67, [а]20=+91,3° (с=1,0 / СН2СІ2, тпл=125(200мл), один раз промивають водою (50мл), осу127°С шують органічну фазу сульфатом магнію і після 1 50) р-амшофеніл-З-О-карбамоілметил-а-Офільтрування згущують у вакуумі Після тонкошаманнопіранозид рової хроматографії [толуол/етилацетат 7 1] одеВказану вище сполуку (541г, 0,9 ммоль) протяржують безбарвні кристали (596мг 64%), DC [тогом 48 год гідрують як описано в прикладі 1 40 луол/етилацетат 5 1] Rf= 0,10, [а] =-81,3° (с=1,0 / Після згущення фільтрату залишок ретельно проСН 2 СІ 2 ),т пл =114°С мивають метанолом і одержують безбарвні крис1 51) р-амшофеніл-З-дезокси-p-Dтали (134мг, 45%), DC [дихлормегалактопіранозид тан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,21, т Сполуку 1 51 с (465мг, 1 ммоль) гідрують пропл =126-128°С тягом 6 год як описано в прикладі 1 40 Після згуПриклад 1 51 щення фільтрату переосаджують залишок із сумір-амшофеніл-З-дезокси-р-О-галактопіранозид ші етанол/петролейний ефір і одержують ОН безбарвні кристали (206мг, 81%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%)15 3 0,2] RpO,22 Приклад 1 52 р-амшофеніл-3,4-ди-дезокси-р-Огалактопіранозид ОН 1 51 а) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-4-Оацетил-р-О-галактопіранозид Розчин сполуки 1 31 b (2,7г, 5,6 ммоль) в дихлорметані (20мл) змішують з триетилортоацетатом (Змл, 16,3 ммоль) та толуолсульфоновою кислотою (20мг) Через ЗОхв при кімнатній температурі пробу розводять дихлорметаном (200мл), промивають насиченим розчином гідрокарбонату натрію (50мл), осушують органічну фазу сульфатом магнію і після фільтрування згущують у вакуумі Одержану безбарвну піну розчиняють в 80-% оцтовій кислоті (15мл) Ще через ЗОхв при кімнатній температурі пробу виливають в насичений розчин гідрокарбонату натрію (200мл), екстрагують хлороформом (Зх75мл), об'єднані органічні фази промивають водою (ЮОмл), сушать сульфатом магнію і після фільтрування згущують у вакуумі Шляхом осадження із суміші етанол/петролейний ефір одержують безбарвні кристали (2,43г, 83%), DC [етилацетат/петролейний ефір 21] RpO,64, [a] --62,1° (с= 1,0/СН 2 СІ 2 ),т пл =83°С 1 51 Ь) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3-Отрифторметансульфоніл-4-О-ацетил-р-Огалактопіранозид Розчин сполуки 1 51 а (2,3г, 4,4 ммоль) в суміші дихлорметану (ЗОмл) та піридину (Змл) в атмосфері аргону при температурі -20°С краплями змішують з розчином ангідриду тр и фтор метан сульфонової кислоти (2мл, 11,8 ммоль) в дихлорметані (ЗОмл) Через 1 год при -20°С пробу виливають в насичений розчин гідрокарбонату натрію (200мл), відокремлюють органічну фазу, сушать сульфатом магнію і після фільтрації згущують у вакуумі Після тонкошарової хроматографії [толуол -^толуол/етилацетат 20 1] одержують безбарвні кристали (2 39г, 83%), DC [толуол/етилацетат 5 1] RFO,55, [а]20=-61,4° (с=1,0 / СН2СІ2), т пл =105°С 1 52 а) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-ди-Отрифторметансульфоніл-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 31 b (2,12г, 4,4 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 51 b ангідридом трифторметансульфонової кислоти (4мл, 23,6 ммоль) Після тонкошарової хроматографії [толуол -^толуол/етилацетат 50 1] одержують жовтувату маслянисту рідину (2,75г, 84%), DC [толуол/етилацетат 5 1] RFO,67, [a]20=-22,5° (с=1,0/СН2СІ2) 1 52 Ь) р-нітрофеніл-2,6-ди-О-бензил-3,4-дидезокси-р-О-галактопіранозид Сполуку 1 52 а (1,49г, 2 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 51 с тетраборопдратом тетрабутиламонію (2,31г, 9 ммоль) Після тонкошарової хроматографії [толуол -^толуол/етилацетат 50 1] одержують безбарвні кристали (629мг, 70%), DC [толуол/етилацетат 5 1] RpO,53, [а]20=-79,1° (с= 1,0 / СН2СІ2), т пл =89°С 1 52) р-амшофеніл-3,4-ди-дезокси-р-Огалактопіранозид Сполуку 1 52 b (450мг, 1 ммоль) протягом 5 год гідрують як описано в прикладі 1 40 Після згущення фільтрату залишок переосаджують із суміші етанол/петролейний ефір і одержують безбарвні кристали (183мг, 76%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] RpO.47, [a] =115,1° (с= 1,0/СН3ОН),т пл=187°С Приклад 1 53 р-амінофеніл-6-О-ацетил-р-Огалактопіранозид 54 61054 он р-нітрофеніл-б-О-ацетил-р-О1 53 а) галаїсгопіранозид Розчин р-нітрофеніл-р-О-галактопіранозиду (7,53г, 25 ммоль) в абсолютному ацетонітрилі (80мл) при 0°С краплями змішують із свіжоприготовленим розчином піридину (2мл, 25 ммоль) та ацетилхлориду (1,85мл, 26 ммоль) в ацетонітрилі (20мл) Протягом ЗОхв перемішують при 0°С і потім згущують у вакуумі Після тонкошарової хроматографії [дихлорметан/метанол 50 1^20 1] одержують безбарвні кристали (4,02г, 47%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,50 1 53) р-амінофеніл-6-О-ацетил-р-Огалактопіранозид Сполуку 1 53 а (1,72г, 5 ммоль) протягом 2 год гідрують як описано в прикладі 1 40 Після згущення фільтрату осаджують залишок із суміші метанол/диетиловий ефір і одержують безбарвні кристали (1,34г, 86%), DC [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 3 0,2] Rf=0,34, [а]20=-41,0° (с=0,56 / СНзОН), т пл =180°С(розклад ) Приклад 1 54 р-амшофеніл-3,4-ди-Ометоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид шляхом тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 10 1^7 1^5 1^3 1) Одержують три фракції Фракція 1 р-нітрофеніл-2,3,4-три-Ометоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид, безбарвна піна (401 мг, 21%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] 20 Rf=0,47, [а] =-51,9° (с=0,26/ СН3ОН) Фракція 2 не ідентифікована безбарвна піна (88мг), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] 20 Rf=0,39, [а] =-61,5° (с=0,26/СН3ОН) Фракція 3 р-нітрофеніл-3,4-ди-Ометоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид, безбарвна піна (275мг, 16%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] 20 Rf= 0,30, [а] =-38,6° (с=0,28/СН3ОН) 1 54) р-амшофеніл-3,4-ди-Ометоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид Фракцію 3 із прикладу 1 54 а (206мг, 0,3 ммоль) протягом 16 год гідрують як описано в прикладі 1 40год Після згущення фільтрату залишок виварюють із діетиловим ефіром (20мл) і одержують сірі кристали (45,6мг, 37%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] RpO,22, т пл=155°С (розклад) Приклад 1 55 р-амшофеніл-2,3,4-три-Ометоксикарбонілметил-р-О-галактопіранозид ОН ОН •з w О 1 54 а) ацилювання сполуки 1 24 а Сполуку 1 24 а (1,36г, 3 ммоль) розчиняють в диметилформаміді (25мл) і змішують з метиловим ефіром бромоцтової кислоти (1мл, 10,6 ммоль) та порціями з 30-% суспензією гідриду натрію в мінеральному маслі (ЗООмг, 10 ммоль) Через 3,5 год при кімнатній температурі знову додають метиловий ефір бромоцтової кислоти (250мкл, 2,65 ммоль) та гідрид натрію в мінеральному маслі (75мг, 2,5 ммоль) Після наступних 2 год реакцію припиняють додаванням краплями метанол (5мл) та згущують у вакуумі Залишок розчиняють дихлорметані (250мл), розчин інтенсивно розмішують з водою (ЮОмл) Органічну фазу осушують сульфатом магнію (10г), згущують у вакуумі і очищають Фракцію 1 із прикладу 1 54 а (380мг, 0,5 ммоль) протягом 16 год гідрують як описано в прикладі 1,40 Після згущення фільтрату залишок виварюють з діетиловим ефіром (20мл) і одержують жовто-коричневу маслянисту рідину (46,8мг, 19%), DC [петролейний ефір/етилацетат 1 1] Rf= 0,29, т пл =106°С (розклад) Приклад 1 56 р-амшофеніл-4-О-(р-О-галактопіранозил)-р-0глюкопіранозид ОН р-нітрофеніл-4-О-(р-О-галактопіранозил)-р-0галактопіранозид (4,63г, 10 ммоль) гідрують як 55 61054 56 описано в прикладі 1 23 Одержують безбарвні (2х200мл), органічну фазу осушують сульфатом кристали (3,04г, 70%), DC [метанол] Rf=0,55, т магнію (10г), згущують у вакуумі і залишок очищупл =235-237°С (розклад) ють шляхом переосадження із суміші дихлормеПриклад 1 57 тан/діетиловий ефір Одержують безбарвні криср-амшофеніл-4-О-(3'-сульфат-р-0тали (18,0г, 91%), DC [дихлорметан/метанол 20 1] галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид, натрієва Rf=0,18, т пл =234°С сіль 1 57 d) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоіл-4-ООН (2',6'-ди-О-бензоіл-4'-О-ацетил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид Сполуку 1 57 с (5,5г, 5,6 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 51 а Після тонкошарової ОН хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 3 1 ^ 1 1] одержують безбарвні кристали (4,03г, 70%), DC [дихлорметан/метанол 20 1] Rf=0,67, T пл =118°С 1 57 є) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоіл-4-О(2',6'-ди-О-бензоіл-3'-сульфат-4'-О-ацетил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид, натрієва сіль Розчин сполуки 1 57 d (3,59г, 3,5 ммоль) в піридині (200мл) змішують з комплексом «триоксид 1 57 а) р-нітрофеніл-4-О-(3',4'-Осірки-піридин» (4,5г, 28 ммоль) і перемішують споізопропіліден-р-0-галактопіранозил)-р-Очатку 2 год при 60°С, а потім 16 год при кімнатній глюкопіранозид температурі Потім реакцію припиняють додаванр-нітрофеніл-4-О-(р-0-галактопіранозил)-р-0ням краплями метанолу (50мл) та згущують у ваглюкопіранозид (23,2г, 50 ммоль) змішують з дикуумі Залишок очищують шляхом тонкошарової метоксипропаном (400мл) та каталітичною КІЛЬКІСхроматографії [дихлорметан/метанол 10 1] ОдерТЮ (+)-камфоро-[О-сульфоновоі кислоти (400мг, жують твердий продукт, який розчиняють в суміші 1,7 ммоль) Через 3 дні при кімнатній температурі дихлорметан/метанол 1 1 (200мл) і змішують з реакцію припиняють шляхом додавання триетиAmberhte IR120 (форма Na+, 10г) Цю суміш протяламіну (240мкл, 1,7 ммоль), згущують у вакуумі і гом 1 год перемішують при кімнатній температурі, осушують протягом 2 год у вакуумі Одержані крифільтрують і фільтрат згущують у вакуумі Осідастали розчиняють в суміші метанол/вода 10 1 ють безбарвні кристали (3,64г, 92%) an, DC [дих(500мл) і протягом 6 год кип'ятять зі зворотним лорметан/метанол 2 1] RpO,87, т пл =168°С холодильником Після згущення у вакуумі та хро1 57 f) р-нітрофеніл-4-О-(3'-сульфат-р-0матографії [дихлорметан/метанол 25 1^10 1, при галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид натрієва необхідності з 0,5% триетиламіном] одержують сіль безбарвні кристали (15,2г, 60%), DC [дихлормеСполуку 1 57 є (3,4г, 3 ммоль) розчиняють в тан/метанол 5 1] Rf=0,49, т пл =253-255°С (розабсолютному метанолі (150мл), змішують з меклад) тилатом натрію (200мг) і 7 год перемішують при 1 57 Ь) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоіл-4-О60°С Після охолодження до кімнатної температу(2',6'-ди-О-бензоіл-3',4'-О-ізопропіліден-р-0ри нейтралізують леватитом SC108 (форма Н+) і галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид потім фільтрують Підвищують значення рН фільтДо розчину сполуки 1 57 а (15,1г, ЗО ммоль) в рату додаванням краплями IN-розчину їдкого напіридині (300мл) при 0°С протягом ЗОхв повільно тру до 7-8, випарюють у вакуумі і шляхом перекраплями додають бензоілхлорид (50мл, 430 осадження із суміші метанол/діетиловий ефір ммоль) Потім перемішують ще 2 год при кімнатній одержують коричнюваті кристали (1,30г, 77%), DC температурі, а потім пробу з помішуванням вили[дихлорметан/метанол 2 1] Rf=0,55, т пл =230°С вають у льодяну воду (2000мл) Через 15хв оса(розклад) джені кристали відфільтровують і розчиняють у 1 57) р-амшофеніл-4-О-(3'-сульфат-р-0дихлорметані (1500мл) Розчин промивають водою галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид натрієва (2х500мл) та IN-розчином гідрокарбонату натрію сіль (2х500мл), органічну фазу осушують сульфатом Вказану вище сполуку (1,13г, 2 ммоль) відновмагнію (50г), згущують у вакуумі і очищають шлялюють як описано в прикладі 1 24 Після виварюхом перекристалізації із метанолу Одержують вання з діетиловим ефіром (50мл) одержують безбезбарвні кристали (26,7г, 87%), DC [дихлормебарвні кристали (983мг, 92%), DC тан/метанол 50 1] Rf=0,49, [a]2°=+23,6° (с=1,08 / [дихлорметан/метанол 2 1] Rf=0,22, т пл=176°С СН3СІ2), т пл =272-274°С (розклад) 1 57 с) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензоіл-4-ОПриклад 1 58 (2',6'-ди-О-бензоіл-р-0-галактопіранозил)-р-0р-амшофеніл-4-О-(3'-О'-метил-р-0глюкопіранозид галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозидон Розчин сполуки 1 57 b (20,5г, 20 ммоль) в дихлорметані (400мл) змішують з 99-% трифтороцтовою кислотою (20мл) і протягом 20хв перемішують при кімнатній температурі Потім розчин промивають 1 N-розчином гідрокарбонату натрію 61054 он ОН 1 58 а) Селеісгивне метилування р-нітрофеніл4-О-(р-0-галактопіранозил)-р-0-глюкопіранозиду р-нггрофеніл-4-О-(р-0-галактопіранозил)-р-0глюкопіранозид (2,3г, 5 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 25 а Шляхом хроматографії [дихлорметан/метанол 20 1 —>10 1^5 1] одержують два продукти Фракція 1 р-нітрофеніл-2-О-метил-4-О-(3'-Ометил-р-О-галактопіранозил)-р-Оглюкопіранозид, безбарвні кристали (264мг, 11%), DC [дихлорметан/метанол 5 1] RpO.46, [а]20=-73,9° (с=1,0 / СН3ОН), т пл = 228°С (розклад) Фракція 2 р-нітрофеніл-4-О-(3'-О-метил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид, безбарвні кристали (1,0г, 42%), DC [дихлорметан/метанол 5 1], Rf=0,29, [а]20=-65,3° (с=1,1 / СН3ОН), т пл =220°С 1 58) р-амшофеніл-4-О-(3'-О-метил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид Фракцію 2 із прикладу 1 58 а (955мг, 2 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1 24 Після промивання діетиловим ефіром (50мл) одержують безбарвні кристали (894мг, 100%), DC [дихлорметан/метанол 5 1] Rf=0,08, т пл =129°С (розклад ) Приклад 1 59 р-амшофеніл-2-О-метил-4-О-(3'-О-метил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид ОН ОН Фракцію 1 із прикладу 1 58 а (246мг, 0,5 ммоль) відновлюють як описано в прикладі 1 24 Після промивання діетиловим ефіром (20мл) одержують безбарвні кристали (186мг, 81%), DC [дихлорметан/метанол 5 1] Rf=0,13, [a] =-3,6° (с=1,0 /СН 3 ОН),т пл =105°С Приклад 1 60 р-амшофеніл-4-О-(3',4'-ди-О-метил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид 1 60 а) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензил-4-О(2',6'-ди-О-бензил-3'-4'-О-ізопропіліден-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид Сполуку 1 57 а (5,0г, 10 ммоль) протягом 16 год перетворюють як описано в прикладі 1 26 с бензилбромідом (ЗОмл, 250 ммоль) Після згущення у вакуумі залишок розчиняють в етилацетаті (ЗООмл) і розчин промивають водою (200мл) Органічну фазу осушують сульфатом магнію (10г), згущують у вакуумі і очищають шляхом тонкошарової хроматографії [дихлорметан/петролейний ефір 5 І^дихлорметан] Одержують коричнювату маслянисту рідину (5,3г, 56%), DC [дихлорметан/метанол 50 1] Rf=0,70, [аП=-23,2° (с=1,08 / СН2СІ2) 1 60 Ь) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензил-4-О(2',6'-ди-О-бензил-р-0-галактопіранозил)-р-0глюкопіранозид Вказану вище сполуку (4,77г, 5 ммоль) перетворюють як описано в прикладі 1 57 с Після згущення у вакуумі і осадження із суміші діетиловий ефір/петролейний ефір одержують безбарвні кристали (3,94г, 86%), DC [дихлорметан/метанол 50 1] RFO,36, т пл=116°С 1 60 с) р-нітрофеніл-2,3,6-три-О-бензил-4-О(2',6'-ди-О-бензил-3',4'-ди-О-метил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид Сполуку 1 60 b (1,8г, 2 ммоль) метилюють як описано в прикладі 1 24 с Осадженням із суміші дихлорметан/петролейний ефір одержують безбарвні кристали (1,55г, 82%), DC [дихлорметан/метанол 501] Rf=0,74,T пл=161-162°С 1 60) р-амшофеніл-4-О-(3',4'-ди-О-метил-р-0галактопіранозил)-р-О-глюкопіранозид Сполуку 1 60 с (1,41г, 1,5 ммоль) в метанолі (50мл) розчиняють і після додавання гідроксиду паладію на вугіллі (вогкий, 20% Pd, 500мг) протягом 6 дні гідрують в атмосфері водню під незначним надлишковим тиском Суспензію фільтрують через целіт і фільтрувальний матеріал ретельно промивають метанолом (ЮОмл) Згущення фільтрату у вакуумі і промивання залишку дихлорметаном дає коричнюваті кристали (425мг, 61%), т пл =124°С (розклад) Приклад 2 1 N-аланіл-батрацилш О 61054 59 2 1а) г\І-(г\І-(трет-бутоксикарбоніл)-аланіл]батрацилін г\|-(трет-бутоксикарбоніл)-аланін (3,3г, 17,5 ммоль) і 2-ізобутокси-1 -ізобутокси-карбоніл-1,2дипдро-хінолш (6,8мл 23 ммоль) розчиняють в ЮОмл дихлорметану Після 20хв перемішування при кімнатній температурі додають розчин батрациліну (4,1г, 16,5 ммоль) в абсолютному диметилформаміді (350мл) і перемішують пробу ще 48 2 3 а) г\І-[г\І-бензилоксикарбоніл-О-аланіл)год при кімнатній температурі Потім згущують у вакуумі до 50мл, доливають етилацетатом до батрацилін ЗООмл і зразу ж за Юхв нагрівають до кипіння ПоN-бензилоксикарбоніл-О-аланш (3,9г, 17,5 тім дають охолонути до кімнатної температури, ммоль) перетворюють і обробляють як описано в відфільтровують і знову виварюють фільтрувальприкладі 2 1 а Одержані жовті кристали (6,4г, ний матеріал з етилацетатом (200мл) Охоло80%) відокремлюють фільтруванням і об'єднані дженням з перемішуванням до 0°С і фільтруванфільтрати після згущення у вакуумі очищують ням одержують жовті кристали (6,18г, 84%), DC шляхом тонкошарової хроматографії [петролейний [етилацетат] Rf=0,57 т пл =246-247°С (розклад ) ефір/етилацетат 3 2 ^ 1 1] Одержують ще 1,35г (17%), DC [етилацетат] RFO,45, Т ПЛ =256°С, 2 1) N-аланіл-батрацилш [а]20=+75,1 ° (с=1,0 / СН2СІ2 + 0,5% СН3ОН) Розчин сполуки 2 1 а (10,5г, 25 ммоль) безво2 3) І\І-[О-аланіл]-батрацилін дній трифтороцтовій кислоті (150мл) протягом Сполуку 2 3 а (11,4г, 25 ммоль) розчиняють в 15хв перемішують при кімнатній температурі Після згущення у вакуумі до ЗОмл пробу з інтенсив33-% розчині бромистого водню в льодяній оцтовій ним перемішуванням виливають в насичений розкислоті (ЮОмл) Через ЗОхв при кімнатній темпечин гідрокарбонату натрію (ЮООмл) Перемішують ратурі пробу згущують у вакуумі до ЗОмл, а потім з ще Юхв, відфільтровують і промивають водою, інтенсивним перемішуванням виливають в насиізопропанолом і діетиловим ефіром Продукт осічений розчин гідрокарбонату натрію (ЮООмл) Педає жовтими кристалами (7,15г, 89%) an, DC [етиремішують ще Юхв, відфільтровують і промивалацетат] Rf=0,06, т пл =261-262°С (розклад ) ють водою, ізопропанолом і діетиловим ефіром Продукт осідає жовтими кристалами (7,87г, 98%), Приклад 2 2 DC [етилацетат] Rf=0,06, т пл =267°С (розклад ) |\|-(лізил-аланіл]-батрацилін, дитрифторацетат Приклад 2 4 о сн3 н г\І-(г\Іа-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл]СРЯСООН H.N X батрацилін н,с CF3COOH Н7Н 2 2 а) М-[Ма,Мг-ди-(трет-бутоксикарбоніл)лізил-аланіл]-батрацилш г\І,г\І-ди-(трет-бутоксикарбоніл)-лізин (2,1г, 6 ммоль) і 2-ізобутокси-1 -ізобутокси-карбоніл-1,2дипдро-хінолш (2,4мл, 8 ммоль) розчиняють в 20 мл дихлорметану Після 20хв перемішування при кімнатній температурі додають розчин сполуки 2 1 (1,6г, 5 ммоль) в диметилформаміді (40мл) і перемішують пробу ще 16 год при кімнатній температурі Потім згущують у вакуумі і залишок очищують шляхом тонкошарової хроматографії [петролейний ефір/етилацетат 2 1^1 І^етилацетат] Одержують жовті кристали (2,89г, 89%), DC [етилацетат] Rf=0,52, т пл =203-204°С 2 2) І\І-[лізил-аланіл]-батрацилін, дитрифторацетат Суспензію вказаної вище сполуки (2,6г, 4 ммоль) в дихлорметані (25мл) змішують з безводною трифтороцтовою кислотою (Юмл) і одержаний розчин протягом ЗОхв перемішують при кімнатній температурі Після згущення у вакуумі залишок кристалізують шляхом додавання діетилового ефіру (ЮОмл) Осад відфільтровують і інтенсивно промивають діетиловим ефіром Одержують жовті кристали (2,68г, 99%), DC [етилацетат] R F 0 , 0 5 , т пл =144-146°С (розклад ) Приклад 2 3 І\І-[О-аланіл]-батрацилін t-LN 2 4 a) N-(Na-(TpeT-6yroKCHKap6oHin)-Ns(фтореніл-9-метоксикарбоніл)-лізил-О-аланіл]батрацилін Ма-(трет-бутоксикарбоніл)-Мг-(фтореніл-9метоксикарбоніл)-лізин (5,3г, 11,3ммоль) і 2ізобутокси-1-ізобутоксикарбоніл-1,2-дипдрохінолін (4мл, 14 ммоль) розчиняють в 40мл дихлорметану Після 20ХВ перемішування при кімнатній температурі додають розчин сполуки 2 3 (3,2г, 10 ммоль) в диметилформаміді (80мл) і перемішують пробу ще 16 год при кімнатній температурі Потім згущують у вакуумі і залишок суспендують в дихлорметані (ЮОмл) Одержану суспензію заливають діетиловим ефіром (ЗООмл) Після відфільтровування і промивання фільтрувального матеріалу діетиловим ефіром одержують жовті кристали (5,65г, 65%), DC [етилацетат] R F O , 4 5 , T П Л = 1 8 6 ° С 2 4) г\І-[г\Іа-(трет-бутоксикарбоніл)-лізил-Оаланіл]-батрацилш Вказану вище сполуку (5,6г, 7,3 ммоль) розчиняють в диметилформаміді (50мл) Після додавання піперидину (50мл) перемішують протягом 3 год при кімнатній температурі, потім згущують у вакуумі і очищують залишок шляхом тонкошарової хроматографії [дихлорметан/метанол/аміак (25%) 15 З О,1-»15 5 0,1] Оде