Похідні циклогексанкарбонової кислоти, суміш їх ізомерів або окремі ізомери і фізіологічно прийнятні солі і фармацевтична композиція з активністю, що гальмує ферментний комплекс глюкоза-6-фосфатази

1. Производные циклогексанкарбоновой кислоты общей формулы (I); где R1 - циано, карбоксил, имеющая защитную группу карбоксильная группа, алканоил с 1-4 атомами углерода, SO3-алкил С1-С4, SO3H, SO2NR8R9, 41340 PO(OH)2, РО(ОН)(О-алкил С1-С4), РО(О-алкил С1С4)2, R2 - алкил С1-С10(R11)n, O-алкил С1-С10(R11)n, алкенил С2-С10(R11)n, O-алкенил С3-С10(R11)n, алкинил С2-С10(R11)n, O-алкинил С3-С10(R11)n, S-алкил С1С10(R11)n, S-алкенил С3-С10(R11)n, S-алкинил C3С10(R11)n, NH-алкил С1-С10(R11)n, NH-алкенил C3С10(R11)n или NH-алкинил С3-С10(R11)n, причем R11 незамещен или замещен радикалом R12, R3, R11 и R13 - одинаковы или различны и означают алкил с 1-10 атомами углерода, циклоалкил с 3–8 атомами углерода, фенил, нафтил, фенантрил, пиридил, тиенил, фурил, пиримидил, индолил, имидазолил, кумаринил, фталиминил, хинолил, пиперазинил, тетразолил, триазолил, оксазолил или их тиено-, пиридино-, пиримидино или бензоанеллированные производные, причем указанные ароматические и гетероароматические кольца могут быть одно- или многократно замещены одинаковыми или различными заместителями из группы, включающей фтор, хлор, бром, йод, гидроксил, трифторметил, нитро, циано, алкоксил с 1-4 атомами углерода, алкил с 1-4 атомами углерода, группу NR8R9, фенил, бензил, тиенил, фурил, имидазолил, пиридил, O-фенил или O-бензил, R4, R5 и R6 – одинаковы или различны и означают водород, гидроксил, имеющий обычную защитную группу гидроксил, фтор, хлор, бром или имеют указанные для R2 значения, R7 - алкил с 1-4 атомами углерода, фенил или бензил, R8 и R9 - одинаковы или различны и означают водород, алкил с 1-4 атомами углерода, алканоил с 1-4 атомами углерода, фенил, незамещенный или замещенный остатками из группы, включающей фтор, хлор, бром, йод, гидроксил, О-алкил С1–С4, трифторметил, нитро и циано, или R8 и R9 вместе с атомом азота образуют 4-10-членное, насыщенное гетероциклическое кольцо, в котором одна группа CH2 может быть заменена кислородом, серой или группой NR10, R10 - водород, алкил с 1-4 атомами углерода, фенил или бензил, R12 - фенил, нафтил, фенантрил, пиридил, тиенил, фурил, пиримидил, индолил, имидазолил, кумаринил, фталиминил, хинолил, пиперазинил, тетразолил, триазолил, оксазолил или их тиеноили бензоанеллированные производные, причем указанные ароматические и гетероароматические кольца могут быть одно- или многократно замещены одинаковыми или различными остатками из группы, включающей фтор, хлор, бром, йод, гидроксил, трифторметил, нитро, циано, алкоксил с 14 атомами углерода, алкил с 1-4 атомами углерода, алкенил с 2-4 атомами углерода, группу NR8R9, где R8 и R9 имеют вышеуказанные значения, фенил, бензил, тиенил, фурил, имидазолил, пиридил, О-фенил или О-бензил, Х - группы -(СН2)m-, -СН=СН-, -СºС-, -CH2O-CH2-, , где R8 имеет выше-CH2-S-CH2- и СН=СВ r, СН2-СО, CH2-CHF, CH2CHCl, СН2-СНВr, СН2-СHJ, циклоалкилен с 3-10 атомами углерода, циклоалкенилен с 3-10 атомами углерода, причем 1-3 атомов углерода могут быть заменены атомами серы, кислорода или азота, группы COOR7, СºС, СН=С - (алкил с 1-4 атомами углерода), CH=C(NR8R9), где R8 и R9 имеют вышеуказанные значения, СН=С(алканоил с 1-4 атомами углерода), CH=C(CN), CH=C(R13), где R13 имеет вышеуказанное значение, NR8, где R8 имеет вышеуказанное значение, причем если Y означает кислоозначает аминоксилотный остарод, то ток, выбранный из группы, включающей Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ilе, Leu, Lys, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Туr и их производные, имеющие обычные защитные группы, n – 0,1 или 2, m - 0, 1, 2, 3 или 4, и их физиологически переносимые соли, тормозящие ферментный комплекс глюкоза-6-фосфатазы печени в млекопитающих (см. заявку ЕР № 0587088 А1, МКИ: С07С69/757, опубл. 16.03.1994). Согласно данным в этой заявке соединение примера 44 ([1S,3R,4R,5S]-1-(4-хлoр-фенилпропил)окси-3-[(Е)-3-(4-оксифенил)пропоил]окси-4,5диокси-циклогексанкарбоновая кислота) имеет наилучшую активность (КТ50: 9,3 мкмоль). Было найдено, что производные циклогексанкарбоновой кислоты, которые подпадают под вышеуказанную общую формулу, но в вышеуказанной заявке ЕР ни описаны, ни исследованы, имеют тормозящую ферментный комплекс глюкоза-6фасфатазы печени активность, которая намного превышает активность исследованных в европейской заявке производных циклогексана. Поэтому объектом изобретения являются производные циклогексанкарбоновой кислоты общей формулы (I) (І) где R1 - группа О-алкил С3-C5(R4), в которой алкильная часть является линейной или разветвленной, а R4 означает фенил, незамещенный или замещенный в положении 4 фтором, хлором или метилом, или группа О-СН2-циклоалкил С3-C5(R4), в которой R4 имеет указанное значение, R2 и R3 одинаковы или различны и означают водород или гидроксил, смесь их изомеров или отдельные изомеры и физиологически переносимые соли. Активность предлагаемых соединений на ферментный комплекс глюкоза-6-фосфатазы исследовали с применением микросом печени тем же образом, что и в прототипе. Глюкоза-6-фосфатаза (ЕС 3.1.3.9) представляет собой имеющийся в эндоплазматической сетке мультиэнзимный комплекс. Этот энзимный ком ука-занное значение, Y - группа -(СН2)m -, кислород, сера, группа NR8, где R8 имеет вышеуказанное значение, Z – группа -(СН2)m-, сера, кислород, S-алкил С1С10, O-алкил С1-С10, СН=СН , CH=CF, СН=СС l, 2 41340 плекс состоит из имеющейся в мембране сетки глюкоза-6-фосфат-транслоказы, установленной на люминальной стороне эндоплазматической сетки глюкоза-6-фосфатазы и фосфат-транслоказы (см. Asmore, J. и Weber, G., "The Role of Hepatic Glucose-6-Phosphatase in the Regulation of Carbohydrate Metabolism", в справочнике Vitamins and Hormones, т. XVII (изд. Harris, R.S., Marrian, G.F., Thimann, K.V.,), с. 92-132, 1959; Burchell, A., Waddell, I.D., "The molecular basis of the hepatic microsomal glucose-6-phosphatase system", Biochim. Biophys. Acta 1092, с. 129-137, 1990). Для получения содержащей глюкоза-6-фосфатазу фракции микросом использовали свежую печень самцов крыс рода Вистар, которую перерабатывали известными приемами (см. Canfield, W.K. и Arion, W.J., J. Biol. Chem. 263, с. 7458-7460, 1988). Эту фракцию микросом можно хранить по меньшей мере в течение двух месяцев при температуре -70°С без значительной потери активности. Доказательство активности глюкоза-6-фосфатазы осуществляли с помощью описанного в литературе метода (см. Arion, W.J., Methods Enzymol. 174, изд. Academic Press, 1989, с. 58-67), то есть путем определения фосфата, выделяющегося из глюкоза-6-фосфата. В 0,1 мл исследуемой фракции содержались глюкоза-6-фосфат (1 ммоль/л), исследуемое вещество, 0,1 мг фракции микросом и 100 ммоль/л буфера HEPES (4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновая кислота), рН 7,0. Реакцию начинали путем добавления энзима. По истечении 20 минут при комнатной температуре реакцию заканчивали путем добавления 0,2 мл вещества, взаимодействующего с фосфатом. Пробу инкубировали при температуре 37°С в течение 30 минут и затем измеряли абсорбцию (А) синего цвета при 570 нм. Тормозящую активность исследуемого вещества определяли путем сравнения с контрольным опытом (без исследуемого вещества) согласно следующему уравнению % торможения = А( контроль - А(исследуемо е вещество ) = ´ 100 А( контроль ) По полученным данным рассчитывали концентрацию исследуемого вещества, необходимую для 50%-ного торможения активности энзима (КТ50). В этом опыте исследовали нижеследующие соединения А-Ж. Соединение № A Соединение № В Соединение № Г Соединение № Д Соединение № E Соединение № Ж Значение КТ50 этих соединений сведено в нижеследующей таблице. Таблица Соединение No. А Б В Г Д Е Ж КТ50[моль] 2×10-9 13×10-8 4×10-9 6×10-9 3×10-9 1×10-8 4×10-8 Производные циклогексанкарбоновой кислоты общей формулы (I) получают, например, за счет того, что соединение общей формулы (II) Соединение № Б (II) где R1 имеет вышеуказанное значение и гидроксильные группы в положениях 4 и 5 защищены обычной защитной группой, 3 41340 в виде соли щелочного металла подвергают взаимодействию с соединением формулы (III) лы, водные, спиртовые или масляные суспензии или растворы. В качестве инертных носителей можно использовать, например, гуммиарабик, окись магния, карбонат магния, фосфат калия, молочный сахар, глюкозу или крахмал, в частности кукурузный крахмал. При этом приготовление можно осуществлять как сухим, так и влажным методом. В качестве масляных носителей или растворителей используют растительные или животные масла, как, например, подсолнечное масло или рыбий жир. Для подкожной или внутривенной аппликации активные соединения или их физиологически переносимые соли, в случае необходимости вместе с обычными веществами, такими, как, например, способствующий растворению агент, эмульгаторы или дальнейшие вспомогательные вещества, переводят в раствор, суспензию или эмульсию. В качестве растворителя используют, например, воду, физиологический раствор поваренной соли или спирты, такие, как, например, этанол, пропанол, глицерин, а также растворы сахара, как, например, растворы глюкозы и маннита, а также смеси различных растворителей. В качестве фармацевтических препаратов для топического или локального применения пригодны глазные капли, содержащие активные соединения в водном или маслянистом растворе. Для применения через нос пригодны аэрозолы и препараты для распыления, а также крупнозернистые пудры, которые апплицируют путем быстрой ингаляции через нос, и прежде всего носевые капли, содержащие активные соединения в водном или маслянистом растворе. Дозировка активного вещества формулы (I) и частота его дачи зависят от интенсивности и продолжительности действия используемого предлагаемого соединения, от вида и серьезности болезни, а также от пола, возраста, веса и восприимчивости подвергаемого лечению млекопитающего. В среднем рекомендуемая дневная доза предлагаемого соединения составляет около 10500 мг/75 кг веса тела млекопитающего, прежде всего человека, предпочтительно около 25250 мг/75 кг веса тела, причем дачу можно осуществлять несколькими дозами за сутки. Нижеследующий пример иллюстрирует получение исследуемых выше соединений № А-Ж. В данном примере описывается также получение исходных продуктов формул (II) и (III). Пример Получение соединения № A 1. Получение исходного соединения формулы (II) Стадия А: (III) в присутствии инертного органического растворителя, из полученного при этом соединения общей формулы (IV) (IV) где R1 имеет вышеуказанное значение, отщепляют защитные группы в положениях 4 и 5 циклогексанового кольца с последующим выделением целевого продукта в желаемом виде. Исходные соединения формул (II) и (III) получают известными приемами. Дальнейшим объектом изобретения является фармацевтическая композиция с тормозящей ферментный комплекс глюкоза-6-фосфатазы печени активностью, которая кроме по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества, содержит по меньшей мере одно производное циклогексанкарбоновой кислоты общей формулы (I) в виде смеси изомеров или отдельного изомера или его физиологически переносимую соль в эффективном количестве. Предлагаемая фармацевтическая композиция может иметься в виде любого известного препарата, полученного известными приемами. Предлагаемая композиция предпочтительно представляет собой таблетки, драже, капсулы, суппозитории, эмульсию, суспензию, гранулят, порошок, раствор или же препарат продленного действия, причем содержание активного вещества преимущественно составляет 0,1-95%. Специалисту известно какие именно вспомогательные вещества пригодны для каждого конкретного лекарственного препарата. Кроме растворителей, гелеобразователей, основообразующих веществ для суппозиториев, вспомогательных веществ для таблеток и других носителей активного вещества можно также использовать, например, антиокислители, диспергаторы, эмульгаторы, пеногасители, вкусовые вещества, способствующие растворению агенты или красители. Активные вещества можно апплицировать топически, орально, парентарально или внутривенно, причем предпочитаемый вид аппликации зависит от болезни. Однако предпочитают оральную дачу. Для орального препарата активные вещества смешивают с пригодными для этого вспомогательными веществами, такими, как, например, носители, стабилизаторы или инертные разбавители и обычными приемами переводят в желаемый препарат, как, например, таблетки, драже, капсу К раствору 5 л безводного метанола и 1,5 л безводного тетрагидрофурана добавляют порциями в атмосфере аргона при комнатной температуре 2,95 г (0,0985 моль) 80%-го гидрида на 4 41340 трия. Затем добавляют также при комнатной температуре соединение 1а в качестве твердого вещества. По истечении 3-4 часов получают прозрачный раствор, который перерабатывают за счет того, что добавляют 6,0 г ледяной уксусной кислоты (рН~5) и затем порциями добавляют еще 2 л воды. Образуется хлопьевидный осадок непрореагаровавшего лактона, который можно отфильтровывать без проблем (рекуперация исходного соединения). Затем фильтрат сгущают до тех пор, пока не образуется густой белый осадок. Охлаждают льдом, отсасывают осадок и промывают холодной смесью метанола и воды в соотношении 1:1. После сушки осадка при давлении 1 мбар и температуре 40°С получают 370 г (86%) соединения 1b в качестве бесцветного твердого вещества. Точка плавления: 102-104°С. Стадия Б: К 2 л безводного дихлорэтана (вместо дихлорэтана можно также использовать другие инертные растворители, как, например, дихлорметан, толуол, тетрагидрофуран) добавляют при температуре 0°С в атмосфере аргона 80,5 мл (0,785 моль) имеющегося в толстостенной стальной трубке чистого диэтилового цинка при помощи стальной канюли (вместо чистого диэтилового цинка можно также использовать 1-молярный раствор в толуоле). Затем прикапывают при температуре 0-10°С 114,4 мл (1,57 моль) хлорйодметана, полученную суспензию перемешивают в течение 30 минут и затем прикапывают 169,89 г (0,314 моль) олефина 1с стадии Б, растворенного в 500 мл безводного дихлорметана. Через час при температуре 0-10°С реакционной смеси дают нагреваться до комнатной температуры и перемешивают еще в течение 3 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь медленно вливают в атмосфере азота в раствор 300 г хлористого аммонияв 1,5 л ледяной воды и экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические фазы встряхивают вместе с насыщенным раствором хлорида натрия и сушат над сульфатом натрия. Затем растворитель в основном удаляют в вакууме и разбавляют изопропанолом. Затем сгущают далее до тех пор, пока не получится густой осадок. Этот осадок отсасывают и два раза перекристаллизовывают из изопропанола. Получают 109,8 г (63%) соединения 1d чистотой >98%. Точка плавления: 143-144°С. Стадия Г: 384,0 г (0,879 моль) спирта 1b стадии А растворяют в 1,3 л безводного дихлорметана. Затем добавляют 10,74 г (0,0879 моль) 4-диметиламинопиридина и 364,8 мл (2,637 моль) безводного триэтиламина. Раствор охлаждают до температуры 010°С и прикалывают 164,7 мл (1,418 моль) бензоилхлорида, растворенного в 350 мл безводного дихлорметана. По истечении 4 часов при комнатной температуре обнаруживаются только следы исходного соединения (по данным тонкослойной хроматографии с применением в качестве элюента смеси сложного этилового эфира уксусной кислоты и циклогексана в соотношении 1:2). Продукт реакции подают на смесь 1,5 л воды, 400 г хлористого аммония и 1 л льда. Затем экстрагируют два раза дихлорметаном, раз промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия и объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия. После сгущения остаток перекристаллизовывают из изопропанола. Получают 437,0 г (91,9%) продукта 1с. Точка плавления: 104107°С. Стадия В: 99,0 г (0,178 моль) соединения 1d стадии В растворяют в 1200 мл диоксана и добавляют 890 мл 2 н. натрового щелока. Суспензию нагревают при температуре 80°С в течение 2 часов. Реакционный раствор охлаждают до температуры около 10°С и медленно прикапывают 228 мл (2 моль) полуконцентрированной ледяной уксусной кислоты (рН 5-6). Затем раствор упаривают в ротационном испарителе до тех пор, пока не возникнет помутнение. Полученный концентрат при интенсивном перемешивании вливают примерно в 1500 мл воды, из которой после перемешивания в течение 10 минут выделяется кристаллический осадок. Этот осадок отсасывают и сушат в вакууме при температуре 22°С и давлении 0,5 бар. Получают 82,2 г соединения формулы (II). 2. Получение исходного соединения формулы (III) (III) 5 После кристаллизации: >98 Et = этил согласно следующей реакционной схеме: 1