Похідні камптотецину (варіанти), спосіб їх одержання (варіанти) та фармацевтична композиція на їх основі

І ПОХІДНІ камптотецину формули (І) або їх фармацевтично сприйнятливі солі, в яких Ri - -CN, -CH(CN)-R 4 , -CH=C(CN)-R 4 , -CH 2 -CH(CN)R4, -C(=NOH)-NH 2 , -C(=NH)-NH 2 , -CH=C(NO 2 )-R 4 , CH(CN)-R 5 , -CH(CH 2 NO 2 )-R 5 , 5-тетразоліл, 2-(4,5дипдрооксазоліл), 1,2,4-оксадіазолш-3-іл-5-он, R2 - гідроген, R3- гідроген, OR6, R4 - гідроген, ЛІНІЙНИЙ чи розгалужений Сі-Сєалкіл, -CN, COOR 7 , R5- гідроген, ORs, R6 - гідроген, ЛІНІЙНИЙ чи розгалужений Сі-Сєалкіл, Сб-Сі 2 арилСі-С 4 алкіл, Сі-С 4 алкоксилСі-С 4 алкіл, Сі-С 4 алкілСб-Сі 2 арил, Сє-Сі 2 арилС 2 -С 4 ацил, С2С 4 ацил, амшоСі-С 4 алкіл, амшоС 2 -С 4 ацил, глікозил, R7 - гідроген, ЛІНІЙНИЙ чи розгалужений Сі-Сєалкіл, Сб-Сі 2 арилСі-С 4 алкіл, Сі-С 4 алкоксилСі-С 4 алкіл, Сі-С 4 алкілСб-Сі 2 арил, Rs - те ж саме, що R6, незалежно від нього, їх Ni-оксиди, ізомери, діастереоізомери, енантюмери та їх суміші, а також їх активні метаболіти 2 Ni-оксид похідних камптотецину формули (І) 3 ПОХІДНІ камптотецину за будь-яким з пп 1-2, які в і д р і з н я ю т ь с я тим, що R3 - гідроген 4 ПОХІДНІ камптотецину за будь-яким з пп 1-2, які в і д р і з н я ю т ь с я тим, що R3 - OR6, a R6 визначено вище 5 ПОХІДНІ камптотецину за будь-яким з пп 1-2, які в і д р і з н я ю т ь с я тим, що Ri - CN, a R2 та R3 - гідроген 6 ПОХІДНІ камптотецину за будь-яким з пп 1-2, які в і д р і з н я ю т ь с я тим, що Ri - -CH=C(CN)-R 4 , R4 CN, a R2 та R3 - гідроген 7 ПОХІДНІ камптотецину за будь-яким з пп 1-6, які в і д р і з н я ю т ь с я тим, що їх використовують як активний інгредієнт при виготовленні лікувального засобу 8 ПОХІДНІ камптотецину за будь-яким з пп 1-6, які в і д р і з н я ю т ь с я тим, що їх використовують як активний інгредієнт при виготовленні лікувального засобу, корисного при лікуванні пухлин 9 Спосіб одержання похідних камптотецину за будь-яким з пп 1-6, який відрізняється тим, що включає а) перетворення сполуки формули в якій Ri - СНО, R2 - гідроген, a R3 - те ж саме, що у формулі (І), у ВІДПОВІДНИЙ оксим з наступною обробкою мурашиною кислотою та форміатом натрію для отримання ВІДПОВІДНИХ сполук формули (І), в яких Ri - CN, а, за бажанням, б) обробку сполуки формули (І), отриманої в one О ю о о 49005 рації а), пдроксиламіном для одержання ВІДПОВІДНИХ сполук формули (І), в яких Ri - -C(=NOH)-NH2, а, за бажанням, в) каталітичне гідрування сполуки формули (І), отриманої в операції б), для одержання відповідної сполуки формули (І), в якій Ri - -C(=NH)-NH2, або, за бажанням, перетворення сполуки, отриманої у будь-якій з операцій а), б) чи в) у ВІДПОВІДНИЙ NI-ОКСИД, або фармацевтично прийнятну сіль 10 ПОХІДНІ камптотецину формули (І) в якій RI - -CN, a R2Ta R3 визначено вище, як штермедіат в операції б) способу одержання сполуки формули (І) за п 9 11 ПОХІДНІ камптотецину формули (І) в якій RI - -CN, a R2 та R3 визначено вище, як інтермедіат у способі одержання сполук формули (І) за п 9, в яких Ri вибрано з групи, що включає -C(=NOH)NH2, -C(=NH)-NH2, 5-тетразоліл, 2-(4,5дипдрооксазоліл) 12 Спосіб одержання сполук за будь-яким з пп 16, який відрізняється тим, що Ri вибрано з -CN або -CH(CN)-R4, де R4 визначно вище, що включає реакцію N-оксиду камптотецину, ВІДПОВІДНО, З ціанідом калію чи триметилсилілу, або сполукою R4CH2-CN, де R4 визначено вище, та як варіант Згідно З винаходом запропоновано ПОХІДНІ камптотецину, способам їх виготовлення, їх використанню як активних інгредієнтів для виготовлення лікувальних засобів, корисних при лікуванні пух перетворення у фармацевтично прийнятну сіль 13 Спосіб одержання сполуки за будь-яким з п 16, який відрізняється тим, що Ri - -CH=C(CN)-R4 або -CH2-CH(CN)-R4, де R4 визначено вище, що включає реакцію сполуки формули в якій Ri - СНО, R2 - гідроген, a R3 - те ж саме, що у формулі (І), зі сполукою R4-CH2-CN, де R4 визначено вище, для одержання ВІДПОВІДНИХ сполуки формули (І), в якій Ri - -CH=C(CN)-R4, а, за бажанням, гідрування до сполуки формули (І), в якій Ri -CH2-CH(CN)-R4, або як варіант - перетворення у фармацевтично прийнятну сіль 14 Спосіб одержання сполуки за будь-яким з п 16, який відрізняється тим, що Ri - -CH(CN)-R4 або -CH(CH2NO2)-R5, де R4 визначено вище, a R5 - ОН, що включає реакцію сполуки формули в якій Ri - СНО, R2 - гідроген, a R3 - те ж саме, що у формулі (І), ВІДПОВІДНО, з ціанідом калію чи триметилсилілу, або нітрометаном у присутності неорганічної чи органічної основи та, як варіант перетворення у фармацевтично прийнятну сіль 15 Фармацевтична композиція, що містить суміш активного інгредієнту, фармацевтично сприйнятливого середовища та допоміжних речовин, яка відрізняється тим, що містить як активний інгредієнт ПОХІДНІ камптотецину за будь-яким з п 1-6 лин, а також фармацевтичним композиціям, що їх містять Антипухлинний засіб 203-камптотецин формули 49005 де R1, R2Ta R3 - гідроген, розкритий у 1966 р у M E Wall et al (J Amer Chem Soc 88, 3888-90 (1966), після попередніх КЛІНІЧНИХ випробувань вилучили з терапевтичних засобів внаслідок його токсичної дії на людей та низької розчинності, що заважає його застосуванню у придатних фармацевтичних препаратах Увага академічних та прикладних ДОСЛІДНИКІВ тому була звернута на синтези аналогів камптотецину з кращими терапевтичними властивостями Два з ряду аналогів, що описано вищенаведеною формулою, під назвами топотекан, в якому R1 - гідроген, R2 - група CH2NH(CH3)2, a R3 - ОН, та СРТ-11, в якому R1 етил, R2 - гідроген, a R3 —ОС нещодавно почали використовувати у онкологи для лікування деяких пухлин (J of Clinical Oncology, 10, 1775-80, (1992), J of the National Cancer Inst 85, 271 (1993) іншими похідними, що представлені у КЛІНІЧНИХ випробуваннях, є 9амінокамптотецин та аналоги формули (Cancer Treatment Reviews 20, 73 - 96 (1994)) Найбільше спроби синтетиків були спрямовані на введення придатних замісників, щоб зняти проблеми недостатньої розчинності у воді, що характерно для даного класу сполук і може призводити до труднощів при створенні їх рецептур, а також не-передбачуваному рівні вмісту ЛІКІВ у плазмі Крім того, присутність лактонного кільця у замкненій формі є важливим фактором для антипухлинноі ефективності Доречність цього класу сполук обумовлена також їх специфічним механізмом дії вони проявляють антипухлинну дію інгібуванням топоізомерази 1, ферменту, що регулює топологію ДНК і тому грає критичну роль у таких важливих клітинних процесах, як реплікація, транскрипція, рекомбінація та відновлення ДНК (С Capranico and F Zunmo, Curent Pharm Design, 1, 1 - 14 (1995) Необхідність у нових лікарняних засобах, ефективних проти колоректальної недрібноклітинної карциноми, пух лин яєчника та карциноми простати, які поки що малочутливі до хіміотерапії, робить необхідним пошук нових похідних камптотецину з поліпшеними фармакологічними властивостями Було виявлено, що ПОХІДНІ камптотецину та 10-пдроксикамптотецину, що мають замісники на атомі карбону С-7, виявляють антипухлинну активність та значно сприятливіші фізико-хімічні властивості, що дозволяє їх уведення у фармацевтичні композиції Згідно З винаходом запропоновано сполуки формули (І) О ОН О в яких Ri - -CN, -CH(CN)-R4, -CH=C(CN)-R4, -СН2CH(CN)-R4, -C(=NOH)-NH2, -C(=NH)-NH2l CH=C(NO2)-R4, -CH(CN)-R5, -CH(CH2NO2)-R5, 5тетразоліл, 2-(4,5-дипдрооксазоліл), 1,2,4оксадіазолш-З-іл-5-он, R2 - гідроген, R3 - гідроген, OR6, R4 - гідроген, ЛІНІЙНИЙ чи розгалужений d С6алкіл, -CN, COOR7, Rs - гідроген, ORs, R6 - гідроген, ЛІНІЙНИЙ чи розгалужений С-і-Сє алкіл, Сє-Сі2 арил Сі-С4 алкіл, Сі-С4 алкоксил d С4 алкіл, Сі-С4 алкіл Сє-Сі2 арил, Сє-Сі2 арил С2С4 ацил, С2-С4 ацил, аміно Сі-С4 алкіл, аміно С2-С4 ацил, глікозил, R7 - гідроген, ЛІНІЙНИЙ чи розгалужений С-і-Сє алкіл, Сє-Сі2 арил Сі-С4 алкіл, Сі-С4 алкоксил d С4 алкіл, Сі-С4 алкіл Сє-Сі2 арил, Rs - те ж саме, що R6, незалежно від нього, їх Ni-оксиди, ізомери, діастереоізомери, енантюмери та їх суміші, а також їх метаболіти, зокрема, активні метаболіти В рамки винаходу включено також фармацевтичне прийнятні солі Сполуки формули (І) включено до винаходу як активні інгредієнти для виготовлення лікувальних засобів, зокрема, придатних для лікування пухлин До винаходу включено фармацевтичні композиції, що містять як активні інгредієнти сполуки формули (І) До винаходу включено спосіб виготовлення сполук формули (І) Винахід включає використання сполук формули (І), в яких Ri - -CN, як штер-медіати для виготовлення інших сполук формули (І), в яких Ri - C=(NOH)-NH2, -C(=NH)-NH2l - 5-тетразоліл, 2-(4,5дипдрооксазоліл) Прикладами С-і-Сє алкіла є метил, етил, пропіл, ізопропіл, бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, 2-метилбутил, ізопентил, гексил, 3метилпентил, 2-етилбутил Прикладами Сє-Сі2 арил Сі-С4 алкіла є бен 49005 зил, моно- чи полізаміщений С-і-Сє алкілбензил, ачи р-фенілетил, моно- чи полізаміщений С1-С4 алкілом а- чи р-фенілетил), моно- чи полізаміщений С1-С4 алкілом а-, р- чи у-фенілпропіл), а- чи рнафтилетил, моно- чи полізаміщений С1-С2 алкілом а- чи р- нафтилетил) Прикладами С1-С2 алкоксі С1-С4 алкіла є метоксиметил, етоксіетил, етоксиметил, пропоксіетил, бутоксіетил Прикладами С1-С4 алкіл Сє-Сі2 арила є толіл, ксиліл, етилфеніл, ізопропілфеніл, третбутилфеніл, метилнафтил Прикладами Сє-Сі2 арил С2-С4 ацила є фенілацетил, нафтилацетил, 2-фенілпропюніл, 3фенілпропюніл, 2-, 3- чи 4-феніл бути рил, моно-, ди- чи тризаміще-ний С1-С4 алкілом фенілацетил Прикладами С2-С4 ацила є ацетил, пропюніл, бутирил, або їх ізомери Прикладами аміно С1-С4 алкіла та аміно С2-С4 ацила є С1-С4 алкіл та С2-С4 ацил, в яких аміногрупа приєднана до будь-якого з атомів карбону ланцюга Прикладами фармацевтичне прийнятних солей є у випадку основного атома нітрогену солі з такими фармацевтичне прийнятними кислотами, неорганічними та органічними, як пдрогенхлоридна, сульфатна, оцтова, у випадку таких кислотних груп, як -СООН, солі з такими фармацевтичне прийнятними основами, неорганічними та органічними, як гідроксиди лужних та лужно-земельних металів, амонію та аміни Сполуки формули (І) можуть бути у формі фармацевтичне прийнятних солей та/або Ni-оксидів Перша група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких R3 - гідроген Друга група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких R3 - OR6, a F 6 визначено вище ? Третя група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких Ri - -CN, R3 -гідроген чи OR6, а R6 визначено вище Четверта група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких Ri - -CH(CN)-R4, R4- переважно - -CN чи COOR7, a R7 визначено вище П'ята група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких Ri - -C(=NOH)-NH2, a R3 - OR6, як визначено вище Шоста група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких Ri - -C(=NH)-NH2l a R3 - OR6, як визначено вище Сьома група кращих сполук включає сполуки формули (і), в яких Ri - -CH=C(CN)-R4, R4 переважно - -CN чи COOR7, a R7 визначено вище, зокрема, R4 - -CN, a R2 та R3 - гідроген Восьма група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких Ri - -CH(CH2NO2)-R5, a R5 - ORs, що визначено вище Дев'ята група кращих сполук включає сполуки формули (І), в яких Ri - -CH=C(NO2)-R4, R4 - Н, R3 - OR6, що визначено вище Особливо бажаними є сполуки формули (І), в яких Ri - -CN, -CH=C(CN)2, a6o-CH2CH(CN)-R4, a R2Ta R3 - гідроген Сполуки формули (І) можна виготовити з камптотецин-7-метанолу (II, Ri -СН2ОН, R2 та R3 - Н) або з Ю-пдроксикамптотецин-7-метанолу (II, Ri 8 СН2ОН, R2 -Н, a R3 - ОН), або камптотецин-7альдепду (II, Ri - СНО, R2 та R3 - Н), або камптотецин-Ы-оксиду, придатність усіх сполук описано Sawadaetal Chem Pharm Bull 39,2572(1991) .0 ОН О Сполуки формули (І), в яких Ri - -CN, виготовляють способом, що включає окислення сполуки формули (II), в якій Ri - СН2ОН, до сполуки формули (II), в якій Ri - СНО, таким відомим способом окиснення спирту до альдегіду, як окислення за Моффетом чи Свернем, або юдозобензойною кислотою у диметилсульфоксиді (Fngeno et at J Org Chem 60, 2572-6 (1995), або обробкою кислотою як описано Sawada et a) (Chem Pharm Bull 39, 2572 (1991)), потім обробку цих альдегідів пдроксиламіном з утворенням ВІДПОВІДНИХ ОКСИМІВ, далі нагріванням оксимуз мурашиною кислотою та форміатом натрію, або ІНШІМ ВІДОМИМ способом перетворення альдегідів у нітрили Сполуки формули (І), в яких Ri - -CN, Ri -CH(CN)-R4, можна також отримати реакцією Nоксидів камптотецину, описаною, наприклад, Sawada et al Chem Pharm Bull 39, 2572 (1991), з ціанідом калію або триметилсилілціанідом, або з малоннітрилом чи естерами ціанооцтової кислоти (як описано A Albmi and Pietra, Heterocychc Noxides CRC, 1991, 165), або перетворення сполуки формули (II), в якій Ri - CONH2,відомими способами дегідратації амідів до нітрилів, або іншими способами, придатними для виготовлення хінолш-4карбонітрилів Амінопдроксмміни отримують реакцією ВІДПОВІДНИХ нітрилів формули (І), в якій Ri -CN з пдроксиламіном (F Eloy and R Lenaers, Chem Rev 61, 157 (1961)) Амінопдроксмміни можна відновити до ВІДПОВІДНИХ амідинів формули (І), в якій Ri - C(=NH)-NH2, каталітичним гідруванням, краще з нікелем Ренея як каталізатором (F Eloy and R Lenaers, Chem Rev 61, 157 (1961)) Такі амідини можна також одержати з нітрилів формули (І), в якій Ri -CN, такими відомими способами перетворення нітрилів у амідини, як реакція з НСІ та спиртом з наступною обробкою аміаком чи сіллю амонію, або з амідів формули (II), в якій Ri - CONH2, з тріетилоксонійфлуорборатом (А І Meyer et a) Tetrahedron 39, 1991 (1983)) Сполуки формули (І), в яких Ri - -CH=C(CN)R4, виготовляють, наприклад, реакцією альдегідів формули (II), в якій Ri - -СНО, з малоннітрилом або естерами мало-нової чи ціаноцтової кислот у присутності органічної чи неорганічної основи або без неї, або реакцією альдепда чи кетона формули (II), в якій Ri - -СНО чи -СО-алкіл, з придатними ілідами або аніонами фосфонатів, згідно з реакціями Вітіга або Вудсворта-Еммонса За бажанням, сполуки формули (І), в яких Ri - -C=C(CN)-R4, мо 49005 жна пдрогенувати у присутності такого каталізатора, як Pd, Pt чи Ni, до ВІДПОВІДНИК сполук формули (І), в яких Ri - -CH2CH(CN)-R4 Сполуки формули (І), в яких Ri - -CH(CN)-R4, CHfCbbNC^-Rs, де Rs - -ОН, можна виготовити з альдепдт формули (II), в якій Ri - -СНО, реакцією з ціанідом натрію чи калію або тримегилсилілціанідом та, ВІДПОВІДНО, нітрометаном у присутності органічної чи неорганічної основи Сполуки формули (І), в яких Ri - -CH=CH(NO2)R5- одержують обробкою кислотою сполук де R-і - CH(CH2NO2)-R5 За бажанням, сполуки формули (І), в яких Ri -CN, можна відомими способами перетворити у сполуки формули (І), в яких Ri - гетероцикл, переважно, 2(4,5-дипдрооксазол) (J F Bower et al , J Chem Soc Perkm Trans 1, 333 (1996)) або 5тетразол (Duncia et al , J Org Chem, 56, 2395 (1991)) Сполуки формули (І), в яких Ri - 1,2,4оксадіазолш-З-іл-5-он, одержують з ВІДПОВІДНИХ амідинів N-оксиди сполук формули (І) виготовляють згідно з відомими способами окислення гетероароматичного нітрогену, переважно, окисленням пероксидом гідрогену у присутності оцтової чи трифлуороцтової кислот, або реакцією з органічними пероксикислотами (A Albim and Pietra, Heterocychc N-Oxides CRC, 1991) Фармацевтичне прийнятні солі сполук формули (І) можна отримати відомими з літератури спо 10 собами Сполуки, що описано у винаході, виявляють потужну антипроліферативну активність та мають фізико-хімічні властивості, що роблять їх придатними для уведення у фармацевтичне придатні композиції Цитотоксичну активність сполук згідно з винаходом досліджували на клітинних системах клітин з пухлин людини, використовуючи антипроліферативні тести, як спосіб оцінювання цитотоксичної потенції Спосіб включає визначення числа 72годинних клітин, що вижили через 1 годину витримки з цитотоксичним засобом Цитотоксичну активність сполук згідно з винаходом порівнювали з активністю і) топоте-кану як засобу, що представляє інгібітори ДНК-топоізомерази І, м) доксорубіцину -стандартного протипухлинного засобу, одного з найефективніших з тих, що застосовують у КЛІНІЧНІЙ терапії пухлин Результати представлено у таблиці 1, з якої видно, що сполука формули (І), що описана нижче у прикладі 1, в якій Ri - -CN, R2 та R3 - Н, та сполука формули (І), описана нижче у прикладі 4, в якій Ri - -CH=C(CN)-R4, R4 - -CN, R2 та R3 - H, виявляє цитотоксичну активність, більшу за активність сполук порівняння по відношенню до системи недрібноклітинної карциноми легенів (НДККЛ) Н-460, що спадкове СТІЙКІ ДО цитотоксичної терапії і тільки помірно чутливі до інгібіторів гопоізомерази і, всупереч надмірній експресії цільового ферменту Таблиця 1 Цитотоксична активність аналогів камптотецину відносно клітин пухлини людини (1 година витримки,антипроліферативну активність визначали через 72 години після витримки з лікарняним засобом ЛІНІЯ КЛІТИН Н 460 (карцинома легенів НДККЛ Н 460/ТПТ Глюбластома (ГБМ) Приклад 1 0,08 ± 0,02 12±2 2,7 Більш ТОГО, сполука з прикладу 1 виявляє помітну ефективність при обробці лінії клітин Н 460/ТПТ, відібраних після тривалої витримки з топотеканом, які характеризуються високою СТІЙКІСТЮ до нього ЛІНІЯ Н460 експресує високу КІЛЬКІСТЬ топоізомерази І, поліпшена цитотоксичність сполуки з прикладу 1 при обробці пухлинних клітин цієї лінії виявляється як поліпшення специфічності сполуки по відношенню до клітин Цей висновок підтримується зменшеною ефективністю цих сполук відносно лінії ГБМ-клітин, що СТІЙКІШІ ДО таких інгібіторів, що обумовлено низькою експресією топоізомерази І ДОКЛІНІЧНИМ вивченням активності було оцінено протипухлинну активність сполук згідно з винаходом у порівнянні з топотеканом (перша покоління камптотецину у КЛІНІЧНИХ випробуваннях) ЛІНІЮ КЛІТИН пухлини людини NO-H460, недрібноклітинної карциноми легенів, вибрали завдяки високій експресії топоізомерази ), відомої ЦІЛІ ДЛЯ камптотецинових лікувальних засобів Ця модель пухлини відносно стійка до лікування in vivo звичайними цитотоксичними засобами (наприклад, доксорубі Приклад 4 0,19 Топотекан 0,34 ± 0,04 80 1,2 Доксорубіцин 0,09 цином, цисплатином) Клітини пухлини вводили штраперитонально у голих мишей (2,5 х 10 клітин/мишу, приблизно через 10 тижнів та 3 доби у перитональну порожнину ввели лікуючий засіб (10мг/кг) для забезпечення безпосереднього контакту лікуючого засобу з клітинами пухлини Топотекан та сполука формули (І) з прикладу 1 було доставлено q4d x 4 рази Цей графік відомий як оптимальний для камптотецинових лікувальних засобів в інших доклінічних дослідах Мишей спостерігали кожного дня до смерті Протипухлинну активність лікувальних засобів представляли як Т/С%, тобто відношення середнього часу виживання оброблених лікувальним засобом мишей (Т) до часу виживання необроблених (С) х 100 Оброблених мишей, що померли раніше першої контрольної миші або відразу після обробки зі зменшеною масою тіла, вважали загиблими внаслідок токсичності Мишей, ще живих через 100 діб після пересадки клітин пухлини, вважали довгожителями (ДЖ) (У другому так проведеному ДОСЛІДІ ДЖ вважали виживших через 70 діб) Результати двох незалежних ДОСЛІДІВ показані у таблиці 2 11 49005 12 Таблиця 2 Ефеїсгивність СРТ83 при обробці прищепленої штраперитонально (q4d x 4 рази) пухлини легенів людини, NCI-H460, що розростається Початок обробки через 3 доби після пересадки клітин пухлини Обробка Дослід 1 Приклад 1 Топотекан Дослід 2 Приклад 1 Топотекан мг/кг %Т/С Мтокс/Нзагальн ДЖ(ЮОдіб) 6,6 10 10 157 258 215 0/8 0/8 0/8 2/8 3/8 2/8 10 12 14,4 10 12 14,4 233 200 277 261 77 77 0/7 0/7 1/7 1/7 1/7 2/7 1/7 0/7 0/7 Сполука згідно з винаходом з прикладу 1, закодована як СРТ83, високоефективна при збільшенні часу життя мишей з пересадженою пухлиною, маючи величину %Т/С, вищу за 200 при усіх використаних дозах 3 огляду на токсичність засобу видно, що тільки одна миша вмерла при дозі 14,4мг/кг х 4 (загальна кумулятивна доза 49,6мг/кг) Лікувальна ефективність СПТ83 перевищує ефективність топотекану в умовах досліду 1, коли клітини пухлини призводили до сповільненої смерті (повільно зростаюча пухлина) У випадку швидко зростаючої пухлини (дослід 2) ефективність СПТ83 порівнювали з ефективністю топотекану як Т/С% Однак, н обох експериментах вищий рівень довготривалого виживання (ДТВ, тобто вилікуваних тварин) виявили у груп), яку лікували СПТ83 Це відкриття віддзеркалює можливе поліпшення терапевтичної прийнятності Потенціальні терапевтичні переваги СПТ83 також підкреслено його гарною активністю при лікуванні повільно зростаючої пухлини, яка частіше зустрічається у КЛІНІЧНІЙ практиці На завершення, по відношенню до пухлини, прищепленої NO-H460, СПТ83 має активність, близьку до активності топотекану, але більш толерантний за нього Сполуки згідно з винаходом виявляють особливі переваги, які можна підсумувати 1 Поліпшену специфічність відносно цільових клітин, а тому клітин пухлин, що експресують високий рівень топоізомерази І Цю можливість підтримано збільшеною чутливістю клітин пухлини Н460, про які відомо, що їх рівень топоізомерази високий Справді, ця селективність втрачена для лінії клітин (ГБМ), для яких характерний низький рівень цільової експресії 2 Очевидно, що активність менш залежна від швидкості розмноження пухлини, ніж активність топотекану, що підтримано дослідами in vivo та відчутною активністю проти лінії клітин Н460/ТПТ, для якої характерне дане повільне розмноження Ця характеристика активності може мати клінічне застосування, оскільки повільний ріст типовий для щільної пухлини людини 3 Цитотоксична здатність in vitro не пов'язана з підвищеною токсичністю in vivo, отже, можливо використання широких меж ефективних доз Це збігається з підвищеним терапевтичним показни 4/7 5/7 ком 4 Сполуки згідно з винаходом, особливо СРТ83, виявляють активність при оральному застосуванні Несподівано, СРТ83 орально виявився більш активним, ніж топотекан внутрішньовенне (при оптимальній програмі лікування) Згідно з аспектом винаходу, що стосується виробництва, запропоновано фармацевтичні композиції, що містять ефективну КІЛЬКІСТЬ щонайменше сполуки формули (І), як активного інгредієнта, у суміші з середовищем та допоміжними речовинами Фармацевтичні композиції виготовляють звичайними способами, що добре ВІДОМІ І описані у Remington's Pharmaceutical Scienses Handbook, Mack Pub, N Y , USA Приклади фармацевтичних композицій включають такі композиції для ІН'ЄКЦІЙ, ЯК розчини, суспензії, емульсії у водній чи неводній фазах, такі ентеральні, як капсули таблетки, ПІЛЮЛІ, сиропи, придатні для пиття рідкі рецептури До рамок винаходу включено такі Інші фармацевтичні композиції, сполучені зі сполукою формули (І), як рецептури з регульованим вивільненням Дози активного інгредієнта у фармацевтичній композиції повинен визначати спеціаліст в залежності від активності та фармакокінетичних властивостей активного інгредієнта Дозування повинно бути визначено лікарем за розмірами лікуємої пухлини і станом пацієнта Сполуки згідно з винаходом можна також застосовувати разом з іншими проти пухлинними засобами Подальші приклади ілюструють винахід Приклад 1 208-камптотецин-7-карбонітрил 1) 400мг оксиму камптотецин-7-альдепду (Savada et al Chem Pharm Bull 39, 2572 (1991)), 102мг форміату натрію та 15мл 99% мурашиної кислоти кип'ятили під зворотним холодильником 6 годин, розбавляли розчин 150мл соди та 50мл метиленхлориду, фази розділяли і водну чотири рази екстрагували знов Органічний екстракт випарювали, залишок хроматографували на силікагелі MerckR з елюентом метиленхлорид/метанол (96 4) Отримали ЗООмг жовтого твердого нітрилу Тпл 263°С, масспектр (т/е %) 374 (16), 373 (98), 344 (36), 329 (48), 314 (55), 301 (53), 300 (53), 273(100) ^Н ЯМР (flMCOd6) 0,92 (СН3), 1,92 (СН2), 5,48, 14 13 49005 5,51(СН2-5), 5,56(СН2-17), 6,62(ОН), 7,13 (СН-14), Юмл метанолу гідрували 5 годин у присутності 1 г 8,02 (СН-11), 8,10 (СН-10), 8,30 (СН-9), 8,39 (СНнікелю Ренея при 70°С і тиску 50атм Каталізатор 12) відфільтровували і випарюванням отримували 203-камптотецин-7-карбамідоксим 2) 320мг камптотецин-7-альдепду, 154мг пдАналопчно виготовили такі сполуки рохлориду пдроксиламшу, 578мг форміату натрію 203-10-пдроксі-7-амідинокамптотецин та 20мл мурашиної кислоти кип'ятили під зворот203-10-ацетоксі-7-амідинокамптотецин ним холодильником 3 години, додавали 60мг пд203-10-метоксі-7-амідинокамптотецин рохлориду пдроксиламіну, кип'ятили під зворотним Приклад 4 203-7-(2,2холодильником 2 години, розбавляли розчин 90мл води і екстрагували суміш метиленхлоридом Сподиціаноетеніл)камптотецин луку виділяли та очищали як вищеописане 60мг камптотецин-7-альдепду кип'ятили під 3) 500мг N-оксиду камптотецин-7-альдепду зворотним холодильником 4 години разом з Змл кип'ятили під зворотним холодильником 12 годин малоннітрилу 8мл 1,1,2,2-тетрахлоретану у присуразом з 0,86мл триметилсилілціаніду та 0,32мл жосл 8мг броміду ЛІТІЮ, суміш охолоджували, відпероксиду бензоілу у 45мл 1,1,2,2-тетрахлоретану, фільтровували і хроматографували на силікагелі суміш охолоджували та випарювали і залишок Merck з етилацетатом як елюентом з утворенням R хроматографували на силікагелі Merck з елюенсклоподібного 20S-7-(2,2том гексан/етилацетат (4 6) з утворенням кампдиціаноетеніл)камптотецину Масспектр (т/е) 424, тотецин-7-карбонітрилу 380 1 Починаючи з придатних заміщених у позиції 10 Н ЯМР (flMCOd6) 0,85 (СН3), 1,88 (СН2), 5,38 камптотецинів аналогічно виготовили такі сполуки (СН2-5), 5,45 (СН2-17), 6,56 (ОН), 7,36 (СН-14), 7,82 203-10-пдроксикамптотецин-7-карбонггрил (СН-11), 7,96 (СН-10), 8,18 (СН-9), 8,26 (СН-12), 203-10-ацетоксикамптотецин-7-карбонггрил 9,30 (СН=) 203-10-метоксикамптотецин-7-карбонггрил Приклад 5 208-7-(2-нітро-1203-10-етоксикамптотецин-7-карбонітрил пдроксіетил)камптотецин 203-10-бензоілоксикамптотецин-7-карбонітрил 150мг камптотецину, 0,05мл нітрометану, 203-10-р-0-глікозилоксикамптотецин-70,01мл тріетиламіну у Змл ізопропа-нолу кип'ятили карбонітрил під зворотним холодильником 10 годин і хроматографували на силікагелі MerckR з елюентом мети203-камптотецин-7-іл-малоннітрил ленхлорид/метанол (96 4) Отримали 20S-7-(2Етил(205-камптотецин-7-іл-ціаноацетат) нітро-1-пдроксіетил)камптотецин Приклад 2 208-камптотецин-7-карбамідоксим 1 Суспензію 60мг камптотецин-7-карбонітрилу, Н ЯМР (flMCOd6) 0,80 (СНз), 1-84 (СН2), 4,9040мг пдрохлориду пдроксила-мшу та 0,2мл тріе5,05 (СН2-7), 5,46 (СН2-5), 5,54 (СН2-17), 6,33 тиламшу у 5мл абсолютного етанолу кип'ятили під (СНОН), 6,56 (ОН-16), 6,91 (СНОН), 7,33 (СН-14), зворотним холодильником 8 годин, додаючи через 7,70 (СН-11), 7,82 (СН-10), 8,17 (СН-9), 8,20 (СН4 години ще 40 мг пдрохлориду пдроксиламіну та 12) 0,2мл тріетиламшу, суміш випарювали, розбавляПриклад 6 208-7-(2-нітроетеніл)камптотецин ли водою, фільтрували і осад хроматографували 50мг 208-7-(2-нітро-1-пдроксіетил)камптотециR на силікагелі Merck з елюентом метиленхлону у 5мл тетрапдрофурану кип'ятили під зворотрид/метанол (9 1) Отримали камптотецин-7ним холодильником 1 - 2 години разом з 20мг пкарбамідоксим толуолсульфокислоти або з 0,03мл трифлуороцтової кислоти Отримали жовтий склоподібний Аналогічно виготовили такі сполуки 203-7-(2-нггроетеніл)камптотецин 203-10-пдроксикамптотецин-7-карбамідоксим Аналогічно виготовили такі сполуки 203-10-ацетоксикамптотецин-7-карбамідоксим 203-7-(2-нітроетеніл)-10-метоксикамптотецин 203-10-метоксикамптотецин-7-карбамідоксим 203-7-(2-нітроетеніл)-10-етоксикамптотецин Приклад 3 203-7-амідинокамптотецин ЮОмг 203-камптотецин-7-карбамідоксиму у ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71