Спосіб одержання пробіотика “симбітер-форте”

1. Спосіб одержання пробіотика, що передбачає спільне культивування в молочному середовищі полівидового мультисимбіозу біфідобактерій видів: Bifidobacterium bifidum, В. longum, В. breve, В. infantis, В. adolescentis, лактобацил видів: Lactobacillus acidophilus, L. casei, L. brevis, L. plantarum, L. gasseri, молочнокислих стрептококів видів: Lactococcus lactis і Streptococcus salivarius ssp. thermophilus, пропіоновокислих бактерій видів: 3 34782 4 що не дає можливості підвищення активності конacidipropionici, нарощування і відділення біомаси, центрату за рахунок пробіотичних властивостей відповідно до корисної моделі, до складу пробіотидодаткових таксонів лактобацил і біфідобактерій, ка додатково вводять штами лактобацил зокрема підвищення резистентності до природних Lactobacillus fermentum 1MB В-7133, Lactobacillus інгібіторів травного тракту. salivarius 1MB В-7134 і Lactobacillus helveticus 1MB Найбільш близьким до способу, що заявляєтьВ-7115, із біфідобактерій використовують штами ся, є спосіб одержання пробіотика «Симбітер-2», Bifidobacterium bifidum 1MB В-7113, Bifidobacterium що передбачає спільне культивування в молочноlongum 1MB В-7150, Bifidobacterium adolescentis му середовищі багатокомпонентної асоціації біфі1MB В-7148, Bifidobacterium infantis 1MB B-7147 і добактерій, лактобацил, лакто-коків, стрептококів, Bifidobacterium breve 1MB B-7132, при цьому отрипропіоновокислих і оцтовокислих бактерій видів ману біомасу змішують у співвідношенні 1:1-1:2 із Bifidobacterium bifidum, В. longum, В. infantis, В. протектором-ентеросорбентом, що є 5-10%-ною breve, В. adolescentis, Lactococcus lactis, суспензією гелю бентоніту. Streptococcus salivarius ssp. thermophilus, Крім того, пробіотик можна виготовляти у виLactobacillus acidophilus, L. casei, L. plantarum, L. гляді супозиторіїв для ректального чи вагінального gasseri, L. brevis, Propionibacterium freudenreichii, застосування або мазі для зовнішнього викорисP. acidipropionici і Acetobacter aceti, при цьому потання. передньо отриманий консорціум молочнокислих Пропонований спосіб передбачає використанстрептококів і лактобацил з'єднують із консорціуня у складі пробіотика додаткових штамів лактомом біфідобактерій, пропіоновокислих і оцтовокибацил Lactobacillus fermentum 1MB В-7133, Lactoслих бактерій у співвідношенні 1: 4 [Патент Україbacillus salivarius 1MB В-7134 і Lactobacillus ни № 28040, А 23 С 9/12, С 12 N 1/20, 2000] helveticus 1MB В-7115, а із біфідобактерій - штамів прототип. Bifidobacterium bifidum 1MB В-7113, Bifidobacterium Пробіотик, який одержують відомим способом, longum 1MB В-7150, Bifidobacterium adolescentis містить 24 штами про-біотичних бактерій, пригні1MB B-7148, Bifidobacterium infantis 1MB B-7147 і чує ріст широкого кола патогенних і умовноBifidobacterium breve 1MB B-7132. Властивості патогенних мікроорганізмів, синтезує вітаміни й штамів наведені в таблицях 1-4. екзополісахариди, внаслідок чого проявляє високу Використані у складі пробіотика штами лактопробіотичну активність. бацил і біфідобактерій ізольовані із кишечнику Однак пробіотик має недостатньо високу рездорових людей. За допомогою спеціальних селезистентність до природних інгібіторів травного трактивних методів підвищена резистентність ізольокту й низьку гіпохолестеринемічну й антивірусну ваних штамів до природних інгібіторів травного активності. Крім того, пробіотик має низький термін тракту (шлункового соку, жовчі, фенолу, хлористозберігання (не більше двох місяців), а також місго натрію, травних ферментів, лізоциму). За рахутить велику кількість бактеріальних штамів, що нок здатності до синтезу лізоциму, коротколанцюпідвищує тр удомісткість процесу одержання стабіжкових жирних кислот (КЛЖК) і високої густо ти льних мультикомпонент-них симбіозів. формованих клітинних популяцій штами активно Завданням корисної моделі є створення спопригнічують ріст широкого спектра патогенних і собу одержання пробіотика «Симбітер-форте», в умовно-патогенних мікроорганізмів (табл. 1, 2). якому шляхом введення додаткових штамів лактоЗавдяки цим властивостям, використані бактерії бацил: Lactobacillus fermentum 1MB В-7133 і Lactoможуть зберігати життєздатність при транзиті чеbacillus salivarius 1MB В-7134, Lactobacillus рез проксимальні ділянки травного тракту, досягаhelveticus 1MB В-7115 та використання із біфідоти в активному стані біотопу товстої кишки й реалібактерій штамів Bifidobacterium bifidum 1MB Взувати свій пробіотичний потенціал. 7113, Bifidobacterium longum 1MB В-7150, Крім того, додатково введені до складу пробіоBifidobacterium adolescentis 1MB B-7148, тика штами лактобацил вирізняються здатністю Bifidobacterium infantis 1MB B-7147 і Bifidobacterium знижувати в середовищі культивування вміст хоbreve 1MB B-7132, а також змішування одержаної лестерину. Причому, спеціально проведені дослібіомаси із суспензією гелю бентоніту, забезпечудження встановили, що синтез лізоциму й гіпохоється підвищення резистентності пробіотика до лестеринемічна здатність значно посилюються в природних інгібіторів травного тракту, гіпохолестеконсорціумі лактобацил, а також проявляють сиринемічної і антивірусної здатностей, збільшення нергізм у мультикомпонентному симбіозі з біфідотерміну зберігання та зниження трудомісткості при бактеріями, пропіоновокислими бактеріями й моконструюванні мультисимбіозу за рахунок зменлочнокислими стрептококами (табл. 3, 4). шення кількості штамів, що використовуються. Уведення додаткових штамів лактобацил до Поставлене завдання вирішується тим, що в складу пробіотика для орального застосування, а способі одержання пробіотика "Симбітер-форте", також використання нових штамів біфідобактерій що передбачає спільне культивування в молочнодають можливість підвищити його резистентність му середовищі полівидового мультисимбіозу біфідо природних інгібіторів травного тракту, антагонідобактерій видів Bifidobacterium bifidum, В. longum, стичну активність щодо патогенних і умовноВ. breve, В. infantis, В. adolescentis, лакто-бацил патогенних мікроорганізмів, здатність знижувати видів Lactobacillus acidophilus, L. casei, L. brevis, L. вміст холестерину. Використання високоактивних plantarum, L. gasseri, молочнокислих стрептококів культур біфідобактерій і лактобацил дає змогу видів Lactococcus lactis і Streptococcus salivarius зменшити кількість штамів, що використовуються у ssp. thermophilus, пропіоновокислих бактерій видів складі пробіотика, з 24 (за прототипом) до 17, і за Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii і P. рахунок цього знизити трудомісткість, пов'язану з 5 34782 6 підтриманням штамів і конструюванням мультикоЯк показали спеціально проведені дослідженмпонентних симбіозів. ня, гель бентоніту в зазначеній концентрації має Пропонований спосіб передбачає також змівисокі протекторні властивості щодо біомаси багашування отриманої після культивування клітин товидового симбіозу, що є бактеріальною основою багатовидового симбіозу в живильному середопробіотика. Зв'язуючи кисень і його токсичні похідвищі біомаси з 5-10%-ною суспензією гелю бентоні, гель бентоніту оптимізує умови для розвитку ніту. Бентоніт - це природний глинистий матеріал, облігатно анаеробної пробіотичної флори, насамщо належить до класу алюмосилікатів і має високі перед біфідобактерій, що дає змогу виключити зі гідратаційні та адсорбційні властивості. Здатність складу пробіотика аеробні мікроорганізми (оцтовобентоніту до набрякання й адсорбції стала підстакислі бактерії), які виконують функцію активаторів вою для використання його у фармацевтичній анаеробних сахаролітичних бактерій. У присутноспромисловості як основи для мазей (Муравйов ті гелю бентоніту, який одержують спеціальним І.А., Жакова Н.А. Дослідження бентонітових глин способом, значно краще зберігається бактеріальдля готування мазей-суспензій // Аптечна справа. ний склад і активність пробіотичної біомаси, під1964. - № 5.-С. 23-25). вищується резистентність клітин до шлункового Відомі способи одержання пробіотиків із викосоку й жовчі, знижується концентрація холестериристанням ентеросорбентів передбачають іммобіну в середовищі (табл. 5). лізацію пробіотичних клітин на поверхні часточок На відміну від інши х видів ентеросорбентів, різних сорбентів [Патент РФ № 2017486, МПК 6 А гель бентоніту вирізняється м'яким впливом на 61 К 31/00, опубл. 15.08.94 p.; Патент РФ № травний тракт, не здатний травмувати стінку ки2164801, А 61 К 35/74, А 23 С 9/12, С 12 N 1/08, шечнику або викликати метаболічні розлади, тому опубл. 04.10.2001 р.]. Оскільки у відомих способах пробіотик з використанням гелю бентоніту можна використовуються сорбенти у вигляді досить везастосовувати тривалими курсами без небезпеки ликих часточок (до 100-500мкм), курси застосурозвитку побічних реакцій. вання таких препаратів не можуть бути тривалими, Суспензія, що використовується в даному спотак як при тривалому застосуванні можливі побічні собі, містить 5-10% бентоніту. Зниження концентявища (запори, діарея, зниження в організмі рівня рації бентоніту менш 5% призводить до зменшенвітамінів, гормонів, деяких мікроелементів, корисня протекторної дії гелю бентоніту щодо них мікроорганізмів та ін. за рахунок їхнього зв'япробіотичної мікрофлори й адсорбції холестерину зування сорбентом), що може викликати серйозні й вірусів. Підвищення концентрації бентоніту в метаболічні порушення. Застосування таких сорсуспензії вище 10% недоцільно, оскільки не сприяє бентів, особливо активованого вугілля, протипокапомітному збільшенню захисних властивостей зано при ерозивно-виразкових ураженнях слизової щодо мікрофлори пробіотика, гіпохолестеринемічоболонки стравоходу, шлунка, кишечнику, а також ної і антивірусної активності, але призводить до при шлунково-кишкових кровотечах. зайвого ущільнення консистенції препарату. Гель бентоніту, що використовується у пропоКлітинну біомасу змішують із 5-10%-ною сунованому способі як сорбент, являє собою натрієспензією гелю бентоніту у співвідношенні 1:1-1:2. ву форму дрібнодисперсної фракції бентоніту із Таке співвідношення є найбільш оптимальним. частками 1-5нм, що одержують із сухого природноЗміна співвідношення у бік зменшення частки го бентоніту шля хом обробки його вуглекислим суспензії гелю бентоніту призводить до погіршення натрієм і очищення від забруднювальних речовин і терміну зберігання пробіотика, зниження резистегруби х часток бентоніту. нтності до природних інгібіторів травного тракту й Використання як сорбенту гелю бентоніту не гіпохолестеринемічної активності. Збільшення кіпотребує проведення операції з іммобілізації баклькості суспензії гелю бентоніту недоцільно, оскітеріальних клітин, за якої втрачається значна часльки не сприяє поліпшенню пробіотичних властитина клітин (до 50% від вихідної кількості). Гель востей і терміну зберігання, але приводить до бентоніту має високі адсорбційні властивості щодо зниження концентрації клітин у пробіотику і його вірусів, однак він не зв'язує бактеріальні клітини, активності. тому має високу ефективність виведення з органіСпосіб здійснюють таким чином. зму збудників вірусних інфекцій і різних токсинів, Як середовище культивування використовуне порушуючи при цьому мікробного балансу в ють молоко зі вмістом сухи х речовин 4-5%, у яке біотопах, і не викликає метаболічних порушень. додають 10% молока, гідролізованого панкреатиПри змішуванні концентрованої біомаси з гелем ном, або 5% гідролізату казеїну й 1-2% натрію либентоніту дрібнодисперсний сорбент зв'язується з моннокислого 3-х-заміщеного. Середовище стериповерхневими структурами бактеріальних клітин, лізують, охолоджують до температури покриває їх захисним шаром, захищаючи від впликультивування, інокулюють пробіотичним симбіову інгібуючи х факторів: шлункової кислоти, жовчі, зом і ферментують для накопичення біомаси, яку лізоциму, ферментів та ін. Бентоніт є цінним джевідокремлюють від культуральної рідини центрирелом макро- і мікроелементів. Завдяки здатності фугуванням. активно зв'язувати воду, набрякати й формувати Для готування інокулята використовується мугелі, бентоніт, на відміну від багатьох інших сорбельтикомпонентний симбіоз молочнокислих, пропінтів, не може руйнівно діяти на стінку кишки, а наоновокислих і біфідобактерій. впаки, сприяє зміцненню слизового бар'єра. ВодДля створення симбіозу культури нижчепереночас здатність гелю бентоніту активно лічених штамів з'єднують у наступних співвідноадсорбувати ентеровіруси дозволяє наділити прошеннях: біотик високою антивірусною активністю. Bifidobacterium bifidum 1MB В-7113 - 6 7 34782 8 Bifidobacterium longum 1MB B-7150 - 6 Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii Bifidobacterium adolescentis 1MB B-7148 - 4 ВКПМ B-4544 - 7 Bifidobacterium infantis 1MB B-7147 - 6 P. acidipropionici ВКПМ B-5800 - 6. Bifidobacterium breve 1MB B-7132 - 6 Інокульоване молоко ферментують протягом Lactobacillus fermentum 1MB B-7133 - 4 18год при температурі 36°С. Готовий інокулят хаLactobacillus salivarius 1MB B-7134 - 2 рактеризується густою в'язкою консистенцією, киLactobacillus helveticus 1MB B-7115-2 слотністю 98°Т, рН 4,5, концентрацією живих кліLactobacillus acidophilus ВКПМ В-5863 - 1 тин - 8,6х108КУО/см 3. Lactobacillus casei ВКПМ В-5 724 - 5 Для готування середовища культивування 25кг Lactobacillus brevis 1MB B-7114-4 сухого знежиреного молока розчиняють в 100л Lactobacillus plantarum 1MB B-7116 - 6 водопровідної води. До розчиненого молока долиLactobacillus gasseri 1MB B-713 5 - 3 вають воду (до 500л) з розрахунку одержання відLactococcus lactis ВКПМ В-5725 - 1 новленого молока зі вмістом сухих речовин 5%. Streptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ Відновлене молоко стерилізують при температурі B-5388 - 2 121°С із витримкою протягом 25 хвилин. ОхолоPropionibacterium freudenreichii ssp. shermanii джують до температури 37°С і вносять 5% інокуВКПМ B-4544 - 7 лята. Одночасно з інокулятом уводять 10% стериP. acidipropionici ВКПМ В-5800 - 6. льного панкреатичного гідролізату молока й 1 % Отриманий комплекс штамів вносять у стеринатрію лимоннокислого 3-х-заміщеного (у вигляді льне знежирене молоко зі вмістом сухи х речовин стерильного 50%-го розчину). Процес культиву10%. Інокульоване молоко ферментують протягом вання проводять 22 год при температурі 37°С і рН 15-18 год при температурі 36-37°С. Спеціально 6,5. Концентрація життєдіяльних клітин наприкінці проведеними дослідженнями встановлено, що при культивування становить 1,2х1010КУО/см 3. Клітинз'єднанні штамів у зазначених співвідношеннях ну біомасу відокремлюють центрифугуванням і вони формують стійкий мультикомпонентний симзмішують її в співвідношенні 1:1 з 5%-ю суспензією біоз. Отриманий симбіоз використовують як посівгелю бентоніту. ний матеріал при одержанні інокулята. Характеристика отриманого пробіотика «СимБіомасу клітин, відділену від культуральної рібітер-форте» наведена у табл. 6. дини, змішують з 5-10%-ною суспензією гелю бенПриклад 2. Одержання пробіотика «Симбітертоніту у співвідношенні 1:1-1:2. форте» у вигляді рідкого бактеріального концентДля одержання гелю бентоніту сухий бентоніт рату для орального застосування. диспергують у воді з додаванням вуглекислого Спосіб здійснюють відповідно до прикладу 1, натрію, центрифугують. Осад суспендують у воді, за винятком того, що біомасу пробіотичних клітин центрифугують для відділення забруднювальних змішують із 10%-ю суспензією гелю бентоніту в речовин і грубих часток бентоніту. Після 3співвідношенні 1:2. кратного фракціонування одержують дрібнодиспеХарактеристика отриманого пробіотика «Симрсну фракцію бентоніту, яку суспендують у бідисбітер-форте» наведена у табл. 6. тильованій воді до одержання 5-10%-ї суспензії Приклад 3. Одержання пробіотика «Симбітергелеподібної консистенції, а потім її стерилізують форте» у вигляді рідкого бактеріального концентпри температурі 121°С протягом 20 хвилин. рату для орального застосування. Корисна модель пояснюється прикладами. Спосіб здійснюють відповідно до прикладу 1, Приклад 1. Одержання пробіотика «Симбітерза винятком того, що біомасу пробіотичних клітин форте» у вигляді рідкого бактеріального концентзмішують із 7%-ю суспензією гелю бентоніту в рату для орального застосування. співвідношенні 1:1,5. Характеристика отриманого Для готування інокулята у 25л стерильного пробіотика «Симбітер-форте» наведена в табл. 6. знежиреного молока з вмістом 10% сухи х речовин Приклад 4. Одержання пробіотика «Симбітервносять 1,25л культури мультикомпонентного сифорте» у формі ректального супозиторія. мбіозу молочнокислих, пропіоновокислих і біфідоБіомасу пробіотичних бактерій і суспензію гебактерій такого штамового складу: лю бентоніту одержують відповідно до прикладу 1, Bifidobacterium bifidum 1MB В-7113 - 6 за винятком того, що отриману дрібнодисперсну Bifidobacterium longum 1MB B-7150 - 6 фракцію бентоніту суспендують у бідистильованій Bifidobacterium adolescentis 1MB B-7148 - 4 воді до одержання 8%-ї суспензії. Клітинну біомасу Bifidobacterium infantis 1MB B-7147 - 6 змішують зі стерильною суспензією гелю бентоніту Bifidobacterium breve 1MB B-7132 - 6 в співвідношенні 1:1. Отриманий пробіотик змішуLactobacillus fermentum 1MB B-7133 - 4 ють із розплавленою жировою основою у співвідLactobacillus salivarius 1MB B-7134 - 2 ношенні 1:4, установлюють рН 6,0-6,5 і формують Lactobacillus helveticus 1MB B-7115 - 2 супозиторії вагою 1,5-1,7г. Як жирову основу викоLactobacillus acidophilus ВКПМ B-5863 - 1 ристовують масло какао, суміш масла какао з лаLactobacillus casei ВКПМ B-5724 - 5 ноліном або інші жирові основи, що використовуLactobacillus brevis 1MB B-7114 - 4 ються для готування ректальних супозиторіїв, і Lactobacillus plantarum 1MB B-7116 - 6 температура плавлення яких не перевищує 42Lactobacillus gasseri 1MB B-7135 - 3 44°С. Lactococcus lactis ВКПМ В-5725 - 1 Характеристика отриманого пробіотика «СимStreptococcus salivarius ssp. thermophilus ВКПМ бітер-форте» наведена у табл. 7. B-5388 - 2 Приклад 5. Одержання пробіотика «Симбітерфорте» у формі вагіна-льного супозиторія. 9 34782 10 Спосіб здійснюють відповідно до прикладу 4, ржаних відомим і пропонованим способом. Як виза винятком того, що в супозиторній суміші встадно з даних таблиці, запропонований спосіб, новлюють рН 5,0-5,5 і формують супозиторії вагою порівняно з відомим, дає можливість поліпшити 1,0-1,2г. Характеристика отриманого пробіотика якість пробіотика за рахунок підвищення стійкості «Симбітер-форте» наведена в табл. 7. до природних інгібіторів травного тракту, гіпохолеПриклад 6. Одержання пробіотика «Симбітерстеринемічної і антивірусної здатності, а також форте» у формі мазі. підвищити його термін зберігання. Спосіб здійснюють відповідно до прикладу 1, У таблиці 7 наведена характеристика пробіоза винятком того, що отриману дрібнодисперсну тиків у формі супозиторіїв для ректального й інфракцію бентоніту суспендують у бідистильованій травагінального застосування й мазі для зовнішводі до одержання 6,5%-ї суспензії. Клітинну біонього використання. Пробіотики характеризуються масу змішують зі стерильною суспензією гелю бевисокою концентрацією життєдіяльних клітин фізінтоніту у співвідношенні 1,0:1,5. Отриманий проологічних бактерій та їхніх метаболітів, що доповбіотик змішують із будь-якою прийнятною мазевою нюють пробіотичний ефект (КЛЖК, лізоцим, екзоосновою у співвідношенні 1: 5, установлюють рН полісахариди). 6,5-7,0. Таким чином, пропонований спосіб дає змогу Характеристика отриманого пробіотика «Симодержувати ефективні пробіотики для орального, бітер-форте» наведена в табл. 7. ректального й вагінального використання. У таблиці 6 наведена порівняльна характеристика пробіотиків для орального застосування, одеТаблиця 1 Резистентність нових штамів лактобацил і біфідобактерій, що використовуються у складі пробіотика, до інгібіторів травного тракту Показник Збереження життєздатності в шлунковому соку (рН 2,0), % клітин, що вижили після 2-годинної витримки Збереження життєздатності в середовищі з 30% жовчі, % Збереження життєздатності в середовищі з 0,4% фенолу, % Збереження життєздатності в середовищі із рН 8,8, % Збереження життєздатності клітин у середовищі з 4 % NaCI, % Збереження життєздатності клітин у середовищі, що містить 1 мг/мл лізоциму, % L. L. L. fermentum salivarius helveticus 1MB В1MB B1MB B7133 7134 7115 В. bifldum 1MB B7113 B.longum В. infantis 1MB B1MB B7150 7147 В. breve B.adolescentis 1MB B1MB B-7148 7132 49,4±3,92 37,7±4,08 38,6±5,11 58,5±4,12 60,8±2,97 54,8±3,06 50,5±1,89 54,9±2,25 50,2±4,08 38,9±2,99 44,3±3,12 52,1±4,23 50,8±5,43 42,7±3,24 47,6±3,80 53,5±4,06 62,1±4,22 38,9±4,93 40,6±5,06 61,7±7,23 69,8±2,98 63,6±4,20 67,3±4,45 60,4±3,09 68,8±5,32 49,1±4,64 38,0±4,61 80,8±3,44 87,5±5,12 77,7±4,62 69,0±5,40 79,6±5,98 89,8±3,36 59,9±4,73 47,8±2,45 95,4±3,08 98,1±1,50 90,7±2,13 78,9±3,90 86,5±5,21 78,7± 5,43 66,5±5,50 50,7±3,91 76,2±5,56 80,4±4,11 88,7±5,05 79,8±2,33 90,1±2,06 11 34782 12 Продовження таблиці 1 Збереження життєздатності клітин у середо87,6±5,09 69,2±4,30 60,8±3,75 90,5±5,33 98,7±1,10 92,4±3,49 98,1±1,35 вищі, що містить 1 г/л панкреатину (рН 7,8), % Збереження життєздатності клітин у середо77,1±4,06 56,0±3,54 62,1±4,48 56,1±3,96 58,7±4,25 55,2±0,78 50,4±0,76 вищі, що містить 5 г/л пепсину (рН 2,0), % 93,0±3,56 52,3±2,06 Таблиця 2 Антагоністична активність окремих штамів і консорціуму біфідобактерій та лактобацил, що використовуються у складі пробіотика (зона затримки росту патогенних і умовно-патогенних мікроорганізмів, мм) Тесткультура S.aureus 209 P.mirabilis 403 P. vulgaris 52 K.pneumoniae 5055 С. albicons Ib S. sonnei 115 E. coli 055 E. coli 0111 P.aeruginosa 9027 E.cloaceae 16 С. freundu 39 S. typhimurium 156 У. enterocolitica 15 M. morganіі 76 E. aerogenes 312 E. faecalis 15 S. epidermidis 37 L. L. Z. В. В. В. B.longum fermentum salivarius helveticus bifidum infantis breve В.adolescentis Консорціум 1MB B1MB B1MB B1MBв1MB B1MB B- 1MB B- 1MBв-7148 7150 7133 7134 7115 7113 7147 7132 17 12 14 8 4 7 10 22 12 8 10 14 5 6 19 15 16 11 7 8 10 8 16 20 12 10 10 9 8 8 16 12 8 10 9 12 14 16 8 8 9 6 16 18 16 10 15 6 8 7 6 8 12 20 19 18 16 12 15 11 12 8 18 28 8 12 12 8 12 17 19 12 6 10 15 22 10 8 10 12 16 21 12 6 10 11 8 12 13 12 19 9 7 8 6 10 6 10 15 11 8 14 13 8 14 15 10 9 18 12 11 18 8 8 16 11 12 9 21 13 34782 14 Таблиця 3 Лізоцимсинтезуюча активність лактобацил, що використовуються у складі пробіотика, їхнього консорціуму й мультикомпонентного симбіозу Штам лактобацил Lactobacillus fermentum 1MB В-7133 Lactobacillus salivarius 1MB В-7134 Lactobacillus helveticus 1MB B-7115 Lactobacillus fermentum 1MB В-7133, Lactobacillus salivarius 1MB В-7134 і Lactobacillus helveticus 1MB B-7115 Мультисимбіоз Зона лізису тест-к ультури (Micrococcus luteus ATCC 4698), мм 4,2±0,2 3,5±0,3 2,8±0,1 5,4±0,3 8,9±0,5 Таблиця 4 Гіпохолестеринемічна здатність штамів лактобацил, їхнього консорціуму й мультисимбіозу, що використовуються у складі пробіотика Штам лактобацил Lactobacillus fermentum 1MB В-7133 Lactobacillus salivarius 1MB В-7134 Lactobacillus helveticus 1MB B-7115 Lactobacillus fermentum 1MB В-7133, Lactobacillus salivarius 1MB В-7134 і Lactobacillus helveticus 1MB B-7115 Мультисимбіоз Зниження концентрації холестерину в середовищі культивування, % 42,9±7,4 35,7±12,6 33,2±8,9 48,8±7,0 52,5±5,7 Таблиця 5 Вплив суспензії гелю бентоніту на пробіотичні властивості біомаси Показники Резистентність до шлункового соку, % клітин, що вижили після 2годинної витримки Резистентність до жовчі, збереження життєздатності в середовищі з 30% жовчі, % Зниження концентрації холестерину, % Зниження концентрації клітин через 3 місяця зберігання, % Ступінь адсорбції вірусних часток, % Співвідношення біомаси з 5-10 %-ю суспензією гелю бентоніту 1:0 1:1 1:1,5 1:2 1:3 55,8±6,2 69,1±5,5 71,3±4,7 73,0±5,3 72,8±5,9 52,4±3,9 68,9±3,3 72,0±4,5 72,8±5,1 72,2±4,9 53,5±5,1 71,2±6,4 73,0±5,5 73,3±7,3 73,0±6,7 43,9±5,5 21,7±3,3 23,2±4,1 20,5±2,3 23,4±3,1 5±0,5 99,8±0,2 99,9±0,1 99,9±0,1 99,9±0,1 Таблиця 6 Порівняльна характеристика пробіотиків для орального застосування, що одержані відомим і пропонованим способом Показники Кількість штамів, що використовуються у складі пробіотика Кількість живих клітин пробіотичної мікрофлори, КУО/см 3 Bifidobacterium Lactobacillus Propionibacterium Lactococcus Характеристика пробіотиків За прототипом За прикладом 1 За прикладом 2 За прикладом 3 24 17 17 17 1,0х1012 4,3х1012 5,0х1011 2,6х1012 1,2х1012 4,7 х1012 5,2х1011 3,2х1012 1,3х1012 4,5х1012 5,5х1011 2,7х1012 2,0х1012 4,4 х1012 5,2х1011 2,8 х1012 15 34782 16 Продовження таблиці 6 Збереження життєздатності в шлунковому соку (рН 2,0), % клітин, що вижили після 2-годинної витримки Збереження життєздатності в середовищі з 30% жовчі, % Зниження концентрації холестерину в середовищі культивування, % Ступінь адсорбції вірусних часток, % Лізоцимсинтезуюча активність, зона лізису тест-культури, мм Концентрація КЛЖК, %: молочна оцтова пропіонова Концентрація екзополісахаридів, % Зниження концентрації клітин через 3 місяця зберігання, %: Bifidobacterium Lactobacillus Propionibacterium Lactococcus 54,5±5,1 71,4±6,3 72,0±4,8 70,7±6,6 42,5±5,2 72,6±4,8 73,9±5,7 71,3±4,9 34,1±4,2 73,8±5,9 72,5±7,1 73,0±8,3 5±0,3 99,5±0,5 99,8±0,2 99,8±0,2 2,2±0,3 8,9±0,5 8,8±0,6 8,5±0,9 0,79±0,20 0,58±0,15 0,34±0,10 1,8-2,2 1,05±0,16 0,78±0,10 0,67±0,11 3,3±0,27 1,10±0,19 0,81±0,17 0,66±0,10 3,4±0,31 1,08±0,21 0,80±0,19 0,64±0,08 3,4±0,31 44,7±4,3 51,0±5,0 39,8±3,9 61,1±7,8 20,8±3,9 23,2±1,7 19,7±2,3 28,2±4,4 21,1±2,5 22,6±3,0 20,4±4,9 31,3±3,3 20,6±5,2 24,0±3,1 18,8±1,3 21,6±3,5 Таблиця 7 Характеристика пробіотиків у формі супозиторіїв для ректального й вагінального застосування та мазі Показники За прикладом 4 Концентрація клітин, КУО/г: Bifidobacterium Lactobacillus Propionibacterium Lactococcus Зниження концентрації клітин через 3 місяця зберігання, % Лізоцимсинтезуюча активність, зона лізису тесткультури, мм Концентрація екзополісахаридів, % Концентрація КЛЖК, %: молочна оцтова пропіонова Комп’ютерна в ерстка Г. Паяльніков Характеристика пробіотиків За прикладом 5 За прикладом 6 3,3х109 5,6 х108 1,5 х109 2,7 х108 2,8 х109 6,2х108 1,8 х109 3,0 х108 1,2х109 2,6 х108 7,1 х108 1,3 х108 19,4±2,0 21,2±3,4 24,6±4,1 8,0±0,7 8,3±0,5 8,1±0,4 3,0±0,21 2,9±0,25 2,7±0,31 0,80±0,18 0,59±0,12 0,36±0,10 0,82±0,22 0,61±0,17 0,33±0,13 0,76±0,14 0,53±0,09 0,30±0,05 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601