Стійка ліофілізована лікарська форма з активованим білком с (варіанти) та виріб, який її містить

Номер патенту: 55448

Опубліковано: 15.04.2003

Автор: Карлсон Ендрю Дейвід

Є ще 1 сторінка.

Дивитися все сторінки або завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

1. Стійка ліофілізована лікарська форма, яка містить

 активований білок С;

 наповнювач, вибраний з групи, до якої входять маніт, трегалоза, рафіноза, цукроза та їхні суміші;

буферна система, яка забезпечує для лікарської форми, що її одержують після відновлення, значення рН від 5,5 до 6,3.

2. Лікарська форма за п. 1, яка відрізняється тим, що зазначена буферна система містить цитрат натрію.

3. Лікарська форма за будь-яким з попередніх пунктів, яка відрізняється  тим, що згаданим наповнювачем є цукроза, трегалоза або рафіноза.

4. Лікарська форма за п. 3, яка відрізняється тим, що згаданим наповнювачем є цукроза.

5. Лікарська форма за будь-яким з попередніх пунктів, яка додатково містить фармацевтично прийнятну сіль.

6. Лікарська форма за п. 5, яка містить, у масовому відношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, від 7 до 8 частин солі та від 5 частин до 7 частин наповнювача.

7. Лікарська форма за п. 5, яка містить, у масовому відношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, приблизно 7,6 частин солі та приблизно 6 частин наповнювача.

8. Лікарська форма за п. 7, яка відрізняється тим, що згаданою сіллю є  NaCl і згаданим наповнювачем є цукроза.

9. Лікарська форма за будь-яким з пп. 1-8, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові.

10. Лікарська форма за будь-яким з пп. 1-8, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару.

11.  Ліофілізована лікарська форма, яка містить активований білок С і наповнювач, вибраний з групи, до якої входять маніт, трегалоза, рафіноза та цукроза, причому співвідношення маси активованого білка С до маси наповнювача становить від 1:5 до 1:7.

12. Лікарська форма за п. 11, яка відрізняється тим, що згаданим наповнювачем є цукроза, трегалоза або рафіноза.

 13. Лікарська форма за п. 12, яка відрізняється тим, що згаданим наповнювачем є цукроза.

14. Лікарська форма за будь-яким з пп.11-13, яка додатково містить фармацетично прийнятну сіль.

15. Лікарська форма за п. 14, яка містить, у масовому співвідношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, від 7 до 8 частин солі та від 5 до 7 частин наповювача.

 16. Лікарська форма за п. 14, яка містить, у масовому співвідношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, приблизно 7,6 частин солі та приблизно 6 частин наповювача.

17. Лікарська форма за п. 16. яка відрізняється тим, що згаданою сіллю є NaCl  і згаданим наповнювачем є цукроза.

18. Лікарська форма за будь-яким з пп. 11-17, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові.

19. Лікарська форма за будь-яким з пп. 11-17, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару.

20. Стійка ліофілізована лікарська форма,  яка містить приблизно 5 мг активованого білка С, приблизно 30 мг цукрози та приблизно 38 мг NaCl.

21. Лікарська форма за п. 20, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові.

22. Лікарська форма за п. 20, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару.

23. Стійка ліофілізована лікарська форма, яка містить приблизно 20 мг активованого білка С, приблизно 120 мг цукрози та приблизно 152 мг NaCl.

24. Лікарська форма за  п. 23, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові.

25. Лікарська форма за п. 23, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару.

26. Виріб, який включає в себе однодозове вмістище, в якому міститься лікарська форма за будь-яким з пп. 1-25.

Текст

1 Стійка люфілізована лікарська форма, яка містить активований білок С, наповнювач, вибраний з групи, до якої входять маніт, трегалоза, рафіноза, цукроза та їхні суміші, буферна система, яка забезпечує для лікарської форми, що її одержують після відновлення, значення рН від 5,5 до 6,3 2 Лікарська форма за п 1, яка відрізняється тим, що зазначена буферна система містить цитрат натрію 3 Лікарська форма за будь-яким з попередніх пунктів, яка відрізняється тим, що згаданим наповнювачем є цукроза, трегалоза або рафіноза 4 Лікарська форма за п 3, яка відрізняється тим, що згаданим наповнювачем є цукроза 5 Лікарська форма за будь-яким з попередніх пунктів, яка додатково містить фармацевтично прийнятну сіль 6 Лікарська форма за п 5, яка містить, у масовому відношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, від 7 до 8 частин солі та від 5 частин до 7 частин наповнювача 7 Лікарська форма за п 5, яка містить, у масовому відношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, приблизно 7,6 частин солі та приблизно 6 частин наповнювача 8 Лікарська форма за п 7, яка відрізняється тим, що згаданою сіллю є NaCI і згаданим наповнювачем є цукроза 9 Лікарська форма за будь-яким з пп 1-8, призна чена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові 10 Лікарська форма за будь-яким з пп 1-8, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару 11 Люфілізована лікарська форма, яка містить активований білок С і наповнювач, вибраний з групи, до якої входять маніт, трегалоза, рафіноза та цукроза, причому співвідношення маси активованого білка С до маси наповнювача становить від 1 5 до 1 7 12 Лікарська форма за п 11, яка відрізняється тим, що згаданим наповнювачем є цукроза, трегалоза або рафіноза 13 Лікарська форма за п 12, яка відрізняється тим, що згаданим наповнювачем є цукроза 14 Лікарська форма за будь-яким з пп 11-13, яка додатково містить фармацетично прийнятну сіль 15 Лікарська форма за п 14, яка містить, у масовому співвідношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, від 7 до 8 частин солі та від 5 до 7 частин наповювача 16 Лікарська форма за п 14, яка містить, у масовому співвідношенні, приблизно 1 частину активованого білка С, приблизно 7,6 частин солі та приблизно 6 частин наповювача 17 Лікарська форма за п 16 яка відрізняється тим, що згаданою сіллю є NaCI і згаданим наповнювачем є цукроза 18 Лікарська форма за будь-яким з пп 11-17, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові 19 Лікарська форма за будь-яким з пп 11-17, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару 20 Стійка люфілізована лікарська форма, яка містить приблизно 5 мг активованого білка С, приблизно ЗО мг цукрози та приблизно 38 мг NaCI 21 Лікарська форма за п 20, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові 22 Лікарська форма за п 20, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару О 00 ю ю 55448 23 Стійка люфілізована лікарська форма, яка містить приблизно 20 мг активованого білка С, приблизно 120 мг цукрози та приблизно 152 мг NaCI 24 Лікарська форма за п 23, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні хворобливих станів, які характеризуються внутрішньосудинним згортанням крові 25 Лікарська форма за п 23, призначена для застосування як лікарський засіб при лікуванні тромбозного удару 26 Виріб, який включає в себе однодозове вмістище, в якому міститься лікарська форма за будьяким з пп 1-25 Ця заявка претендує на права, що витікають з Тимчасової Заявки США № 60/045255, яку було подано 28 квітня 1997 року Галузь, до якої належить винахід Цей винахід належить до галузі медицини, зокрема, до лікування судинних захворювань за допомогою активованого білку С Зокрема, цей винахід належить до лікарських форм з активованим людським білком С Передумови створення винаходу Білок С є сериновою протеазою та природним антикоагулянтом, який відіграє роль у регулюванні гомеостазу шляхом інактивації Факторів Va та Vlll a у системі згортання крові Людський білок С утворюється in vivo, головним чином, у печінці у вигляді одноланцюгового поліпептиду, який складається з 461 амінокислоти Ця одноланцюгова молекулапопередник піддається численним посттрансляційним модифікаціям, до яких належить 1) гідроліз 42-амшокислотноі сигнальної ПОСЛІДОВНОСТІ, 2) протеолітичне видалення з одноланцюгового зимогену залишку лізину у положенні 156 та залишку аргініну у положенні 157 з одержанням 2ланцюгової зимогенової форми молекули (тобто, легкого ланцюгу з 155 амінокислотних залишків, приєднаного через дисульфіднии місток до важкого ланцюгу з 262 амінокислотних залишків, до складу якого входить серинова протеаза), 3) залежне від вітаміну К карбоксилювання дев'яти залишків глутамшової кислоти, згрупованих у перших 42 амінокислотах згаданого легкого ланцюгу, наслідком чого є одержання дев'яти залишків гаммакарбоксиглутамшової кислоти, та 4) приєднання вуглеводу у 4 місцях (одне у згаданому легкому ланцюзі та три у згаданому важкому ланцюзі) До складу згаданого важкого ланцюгу входить добре відома серинпротеазна триада Asp 257, His 211 та Ser 360 1, нарешті, циркулюючий 2-ланцюговий зимоген активується in vivo тромбіном на поверхні фосфоліпіду у присутності юну кальцію Активація є наслідком видалення додекапептиду на Nкінцевій ДІЛЯНЦІ згаданого важкого ланцюгу з утворенням активованого білку С (аРС), який має ферментну активність дуктів 1) дез (1-9) активованого білку С, у якого було видалено перші дев'ять N-кшцевих залишків згаданого легкого ланцюгу, та 2) дез (1-10) активованого білку С, у якого було видалено перші десять N-кінцевих залишків згаданого легкого ланцюгу Цей шлях розкладу, про який раніше не повідомлялось, веде до втрати антикоагуляційної активності внаслідок видалення критичних залишків карбрксиглутамінової кислоти у положеннях 6 та 7 Таким чином, зменшення до мінімуму рівня продуктів саморозкладу дез (1-9) та дез (10) активованого білку С є важливою умовою для одержання активної фармацевтичної лікарської форми активованого білку С високого рівня чистоти Ці варіанти були раніше невідомими продуктами розкладу і їх надзвичайно важко, якщо взагалі можливо, видалити за допомогою традиційних способів очистки На додаток до цього, заявники відкрили, що розчинність у твердому стані значно поліпшується у присутності певної групи наповнювачів На додаток до згаданої ферментної активності аРС у системі згортання крові, активований білок С може також саморозкладатись, наслідком чого є зниження його функціональності, як антикоагулянта Заявники відкрили важливий шлях саморозкладу Наслідком саморозкладу N-кінцевоі ділянки згаданого легкого ланцюгу може бути вирізка на будь-якій стороні згаданого пстидинового залишку у положенні 10 Таким чином, згаданий шлях розкладу веде до утворення двох шактивованих про Цілком зрозумілою є потреба зведення до мінімального рівня згаданого розкладу активованого білку С як у розчиненому, так і у люфілізованому станах ВІДПОВІДНО, згадані відкриття успроможнюють одержання активних лікарських форм активованого білку С високого рівня чистоти, які є похватними з фармацевтичної точки зору для медичного персоналу Цей винахід надає поліпшені лікарські форми активованого білку С, які, по суті, є позбавленими таких продуктів саморозкладу, зокрема, як дез (19) та дез (1-10) форми згаданого легкого ланцюгу активованого білку С Таким чином, згадані лікарські форми є придатними для введення пацієнту, який цього потребує Коротке викладення СУТІ винаходу Цей винахід надає стійку люфілізовану лікарську форму, до складу якої входять активований білок С та наповнювач, який вибирають з групи, до складу якої входять маніт, трегалоза, рафіноза, цукроза та їхні суміші Цей винахід надає також стійку люфілізовану лікарську форму, до складу якої входять приблизно 2,5мг/мл активованого білку С, приблизно 15мг/мл "цукрози та приблизно 20мг/мл NaCI Крім того, цей винахід надає стійку люфілізовану лікарську форму, до складу якої входять приблизно, 5мг/мл активованого білку С, приблизно 30мг/мл цукрози та приблизно 38мг/мл NaCI Цей винахід надає також спосіб одержання лікарської форми, до складу якої входять активований білок С та наповнювач, який вибирають з групи, до складу якої входять маніт, трегалоза, рафіноза, цукроза та їхні суміші 55448 Цей винахід надає також стандартну лікарську форму, яка включає стандартний поємник, у якому розміщується згадана лікарська форма, масове співвідношення якої включає приблизно 1 частину активованого білку С, приблизно 7,6 частин солі та приблизно 6 частин наповнювача Цей винахід додатково включає спосіб лікування хворобливих станів, які залучають внутрішньосудинне згортання крові, який включає введення лікарської форми активованого білку С, опис якої наведено Докладний опис винаходу Для цілей цього винаходу, які розкрито та заявлено у цьому описі, використано наведені терміни, визначення яких наведено далі Термін аРС або активований білок С означає активований білок С, будь то рекомбінантний або одержаний з плазми аРС є переважно людським активованим білком С та включає його, хоча аРС може включати також білок інших видів або ПОХІДНІ, ЯКІ мають протеолітичну, амідолітичну, ефіролітичнута біологічну (антикоагулянту або профібринолітичну) активність Приклади похідних білку С наведено у патенті США № 5,453,373, який було видано на ім'я Герліцу (Gerhtz) та інших, та у патенті США № 5,516,650, який було видано на ім'я Фостеру (Foster) та інших, описи до згаданих патентів включено до цього опису у повному об'ємі як посилання АРТТ - тромбопластиновий час (час утворення згустку плазми при доданні частково активованого тром бо пласти ну), r-hPC - зимоген рекомбінантного людського білку С г-аРС - рекомбінантний активований білок С, який було одержано шляхом активування зимогену білку С in vitro або in vivo або шляхом безпосереднього секретування активованої форми білку С прокарютичними клітинами, еукарютичними клітинами або трансгенними тваринами, у тому числі, наприклад, секретуванням ЛІНІЄЮ КЛІТИН 293 нирок людини у вигляді зимогену, з подальшим очищенням та активуванням за методами, добре відомими досвідченому фахівцю та наведеними у патенті США № 4,981,952, який було видано на ім'я Яна (Yan), та WO 97/20043 на ім'я Коттінхема (Cottmgham), описи до згаданих патентів включено до цього опису у повному об'ємі як посилання Безперервне впорскування - по суті, безперервне продовження введення розчину до кровоносної судини впродовж певного періоду часу Впорскування ударної дози речовини - впорскування певної КІЛЬКОСТІ лікарського засобу (яка носить назву ударної) ураз Придатний для введення - люфілізована лікарська форма або розчин, який є ВІДПОВІДНИМ ДО введення, як терапевтичний засіб Зимоген - термін "зимоген білку С", який використано у цьому описі, означає секретовані неактивні форми, одно- або дволанцюгові, білку С Фармацевтичне прийнятний буфер - фармацевтичне прийнятний буфер є відомим у цій галузі До фармацевтичне прийнятних буферів належить фосфат натрію, цитрат натрію, ацетат натрію або трис-буфер Активований білок С є антитромботичним аге нтом з більш широким терапевтичним індексом, аніж доступні антикоагулянти, наприклад, гепарин та пероральні антикоагулянти пдроксикумаринового типу Як протитромботичний агент, аРС справляє глибокий вплив на різноманітні набуті хворобливі стани, які залучають внутрішньосудинне згортання крові, у тому числі, тромбозний напад, глибокий тромбоз вен, емболію легеневої артерії, периферичний артеріальний тромбоз, емболії внаслідок оклюзм серцевих або периферичних артерій, гострий інфаркт міокарду, генералізований тромбогеморапчний синдром та гострі передабо посткапілярні оклюзм, у тому числі, трансплантаційні, та тромбоз СІТКІВКИ ока Цей винахід має відношення до лікарських форм активованого білку С Бажаною лікарською формою була б така, що представляє собою стійкий люфілізований продукт високої чистоти, до складу якого входять активований білок С та наповнювач, який вибирають з групи, до складу якої входять маніт, трегалоза, рафіноза та цукроза Згаданий люфілізований продукт відновлюють за допомогою ВІДПОВІДНОГО розріджувача, наприклад, стерильної води або стерильного фізіологічного розчину рН одержаного розчину, за переважним варіантом, становить від приблизно 5,5 до приблизно 6,5 Молекулярні взаємодії у лікарській формі між активованим білком С, буфером, концентрацією солі, рН, температурою та наповнювачами є складними, і роль, яку відіграє кожен зі згаданих факторів у СТІЙКОСТІ згаданої лікарської форми, є непередбачуваною Люфілізовані лікарські форми за цим винаходом, у разі ресуспендування, надають стійкий, ферментне активний активований білок С завдяки зниженому рівню саморозкладу Цей винахід забезпечує особливо знижені рівні дез (1-9) аРС та дез (1-10) аРС Взагалі, рівні дез (1-9) та дез (1-10) аРС становлять менше 10% згаданого продукту саморозкладу За переважним варіантом, рівні дез (1-9) та дез (1-10) аРС становлять менше 8% згаданого продукту саморозкладу За ще більш переважним варіантом, рівні дез (1-9) та дез (1-10) аРС становлять менше 5% і, за найпереважнішим варіантом, менше 3% згаданого продукту саморозкладу Згадана СТІЙКІСТЬ забезпечується завдяки ретельному контролюванню умов обробки та шляхом додання цукрози, трегалози, рафінози або маніту Цікаво те, що ІНШІ наповнювачі, наприклад, пдроксиетильований крохмаль та гліцин, не забезпечують необхідної СТІЙКОСТІ або фармацевтичної похватності Згадані наповнювачі за цим винаходом забезпечують одержання фармацевтичне похватної лікарської форми, яка має однорідний ЗОВНІШНІЙ вигляд та легко розчиняється у разі ресуспендування за допомогою ВІДПОВІДНОГО розчиннику Після відновлення згадана лікарська форма залишається стійкою впродовж 24-48 годин при кімнатній температурі Наслідком цього є попередньо недосяжна СТІЙКІСТЬ Переважними наповнювачами у згаданій лікарській формі активованого білку С є цукроза, трегалоза та рафіноза Більш переважними наповнювачами є цукроза та рафіноза, та найпереважнішим наповнювачем є цукроза КІЛЬКІСТЬ згадано 55448 го наповнювача у згаданій лікарській формі у масовому відношенні складає від 1 до 10 частин на 1 частину аРС Більше того, концентрація згаданого наповнювача лікарської форми є важливою змінною способу люфілізацм Оптимальна концентрація наповнювача залежить від КІЛЬКОСТІ аРС та вибраного різновиду наповнювача Переважна концентрація цукрози у згаданому охолоджувальному розчині складає від 10мг/мл до 40мг/мл Більш переважна концентрація цукрози становить від 15мг/мл до 30мг/мл Найпереважніша концентрація цукрози у згаданому охолоджувальному розчині складає 15мг/мл у лікарській формі з вмістом аРС, який дорівнює 2,5мг/мл Найпереважніша концентрація цукрози у згаданому охолоджувальному розчині складає 30мг/мл у лікарській формі з вмістом аРС, який дорівнює 5,0мг/мл Присутність заявленого наповнювача у лікарській формі активованого білку С забезпечує підвищену хімічну та фізичну СТІЙКІСТЬ Перед люфілізацією та після відновлення перевага надається підтримці рН у діапазоні від 5,5 до 6,5 для зведення саморозкладу одержаного розчину до мінімального рівня Переважним рН згаданої лікарської форми є рН у межах від приблизно рН 5,6 до приблизно рН 6,4 Більш переважним є рН у межах від приблизно 5,7 до приблизно 6,3 Ще більш переважним є рН у межах від приблизно 5,8 до приблизно 6,2 Ще більш переважним є рН у межах від приблизно 5,9 до приблизно 6,1 Найпереважніший рН становить приблизно 6,0 Для підтримки ефективного контролювання рівня рН до складу згаданого розчину аРС повинен входити фармацевтичне прийнятний буфер ВІДПОВІДНО, ПІСЛЯ люфілізацм, згадана лікарська форма факультативно та переважно включає фармацевтичне прийнятний буфер До репрезентативних буферних систем належать трис-буфер-ацетат, цитрат натрію та фосфат натрію До більш переважних буферних систем належать цитрат натрію та фосфат натрію Найпереважнішим буфером є цитрат натрію Переважна молярність згаданої буферної системи складає від ЮмМ до 50мМ Більш переважна молярність згаданої буферної системи складає від ЮмМ до 20мМ Найпереважніша молярність становить 40мМ Досвідченому фахівцю зрозуміла доступність багатьох інших буферних систем, які також можуть бути використані у згаданих лікарських формах за цим винаходом Подібним же чином, під час люфілізацм та після відновлення іонна сила є критичною змінною для забезпечення СТІЙКОСТІ одержаного розчину Згадана іонна сила, взагалі, визначається концентрацією солі у згаданому розчині До фармацевтичне прийнятних солей, які, як правило, застосовують для утворення іонної сили, належать, але ними не обмежуються, хлорид калію (КСІ) та хлорид натрію (NaCI) Переважною сіллю у цьому винаході є хлорид натрію Концентрація солі під час люфілізацм повинна бути достатньо високою для забезпечення кристалізації згаданої солі на етапі заморожування згаданого люфілізаційного циклу За переважним варіантом, згадана концентрація хлориду натрію 8 перевищує 150мМ За більш переважним варіантом, згадана концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині становить від 150мМ до 10ООмМ Для лікарської форми, до складу якої входить 2,5мг/мл аРС, більш переважна концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині становить від 150мМ до 650мМ За ще більш переважним варіантом, концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині становить від 250мМ до 450мМ За ще більш переважним варіантом, концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині становить від ЗООмМ до 400мМ Найпереважніша концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині дорівнює 325мМ для лікарської форми, до складу якої входить 2,5мг/мл аРС Подібним же чином, для лікарської форми, до складу якої входить 5,0мг/мл аРС, більш переважна концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині становить від 150мМ до ЮООмМ За ще більш переважним варіантом, концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині становить від 250мМ до 750мМ За ще більш переважним варіантом, концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині становить від 400мМ до 700мМ Найпереважніша концентрація хлориду натрію у згаданому охолоджувальному розчині дорівнює 650мМ для лікарської форми, до складу якої входить 5,0мг/мл аРС Співвідношення аРС сіль наповнювач (у масовому відношенні) є важливим фактором у лікарській формі, придатній для люфілізацм Згадане співвідношення змінюється у залежності від концентрації аРС, вибору та концентрації солі та вибору та концентрації наповнювача Досвідчений фахівець у цій галузі легко визначить переважне співвідношення аРС сіль наповнювач за допомогою способів, які використовуються у цій галузі та опис яких наведено, наприклад, у Прикладі 1 Зокрема, перевага надається масовому співвідношенню, яке складає одну частину активованого білку С до приблизно 7 - 8 частин солі та до приблизно 5 - 7 частин наповнювача, Більш переважним є масове співвідношення, яке складає одну частину активованого білку С до приблизно 7,5 - 8 частин солі та до приблизно 5,5 - 6,5 частин наповнювача Найпереважнішим є масове співвідношення, яке складає одну частину активованого білку С до приблизно 7,6 частин солі та до приблизно б частин наповнювача Переважною сіллю є хлорид натрію у концентрації 325мМ (для лікарської форми, до складу якої входить 2,5мг/мл аРС) та 650мМ (для лікарської форми, до складу якої входить 5,0мг/мл аРС), та у співвідношенні приблизно 1,3 1 з цукрозою (у масовому відношенні) Згадана концентрація є достатньо високою для забезпечення кристалізації згаданої солі під час заморожування, наслідком чого, найімовірніше, є одержання аморфної суміші аРС, цукрози та цитрату, яка може піддаватись люфілізацм Таким чином, згадана іонна сила NaCI при переважних концентраціях 325мМ та 650мМ забезпечує СТІЙКІСТЬ згаданої лікарської форми під час люфілізацм 55448 Цей винахід додатково надає спосіб одержання стійкої люфілізованої лікарської форми, який включає люфілізацію розчину, до складу якого входять активований'білок С та наповнювач, який вибирають з групи, до складу якої входять маніт, трегалоза, рафіноза, цукроза та їхні суміші Цей винахід надає також спосіб одержання стійкої люфілізованої лікарської форми, який включає люфілізацію розчину, до складу якого входять приблизно 2,5мг/мл активованого білку С, приблизно 15мг/мл цукрози, приблизно 19мг/мл NaCI та натрійцитратний буфер, який має рН більше, ніж 5,5, але менше, ніж 6,5 Крім того, цей винахід надає способі одержання стійкої люфілізованої лікарської форми, який включає люфілізацію розчину, до складу якого входять приблизно 5мг/мл активованого білку С, приблизно 30мг/мл цукрози, приблизно 38мг/мл NaCI та цитратний буфер, який має рН більше, ніж 5,5, але менше, ніж 6,5 Цей винахід надає стандартну лікарську форму, яка включає стандартний поємник, у якому розміщується згадана стійка люфілізована лікарська форма, яка включає активований білок С та наповнювач, який вибирають з групи, до складу якої входять маніт, трегалоза, рафіноза, цукроза та їхні суміші Цей винахід додатково надає спосіб лікування хворобливих станів, які залучають внутрішньосудинне згортання крові, який включає введення згаданої лікарської форми аРС, за переважним варіантом, вводиться парентерально для забезпечення його потрапляння до кровотоку у ефективній формі шляхом впорскування відповідної дози безперервною інфузією впродовж від приблизно однієї до приблизно сорока восьми годин КІЛЬКІСТЬ введеного аРС складає від приблизно 0,01 мг/кг/год до приблизно 0,05мг/кг/год За альтернативним варіантом, аРС буде вводитись шляхом впорскування частини відповідної дози на годину у вигляді ударної дози впродовж періоду часу, який становить від приблизно 5 хвилин до приблизно ЗО хвилин, з подальшою безперервною інфузією відповідної дози впродовж від приблизно двадцяти чотирьох годин до приблизно 47 годин, наслідком чого буде введення відповідної дози впродовж 24 - 48 годин Наведені далі приклади допоможуть описати спосіб практичного здійснення цього винаходу та будуть ілюструвати цей винахід Об'єм цього винаходу не повинен розглядатись, як такий, що обмежуться лише наведеними далі прикладами Препарат 1 Одержання людського білку С Рекомбінантний людський білок С (r-hPC) було одержано з лінії клітин 293 людських нирок за способами, добре відомими досвідченому фахівцю, наприклад, за способами, які викладено у патенті США № 4,981,952, який було видано на ім'я Яна (Yan), опис якого у повному об'ємі включено до цього опису як посилання Ген, який кодує людський білок С, розкрито та заявлено у патенті США № 4,775,624, який було видано на ім'я Бенга (Bang) та інших, опис якого у повному об'ємі включено до цього опису як посилання Плазмідою, яку було використано для експресування людського білку С у лінії клітин 293, була плазміда pLPC, яку розкрито у патенті США № 4,992,373, який було 10 видано на ім'я Бенга (Bang) та інших, опис якого у повному об'ємі включено до цього опису як посилання Опис конструкції плазміди pLPC наведено також у публікації Європейського патенту № 0445939 та у роботі Гріннелла (Grmnell) та інших, 1987, Bio/Technology 5 1 1 8 9 - 1 1 9 2 , які також включено у повному об'ємі до цього опису як посилання Стисло, згаданою плазмідою було трансфектовано ЛІНІЮ КЛІТИН 293, після чого СТІЙКІ трансформанти було виявлено, субкультивовано та вирощено у безсироваткових живильних середовищах Після зброджування безклітинне живильне середовище було відокремлено шляхом мікрофільтрування Згаданий людський білок С було відокремлено від культуральної рідини за способом Яна (Yan), патент США № 4,981,952 Освітлене живильне середовище розводили до 4мМ у етилендіамштетраоцтовій кислоті (EDTA) перед тим, як його було абсорбовано аніонообмінною смолою (Fast-Flow Q, компанія Pharmacia) Після промивання 4 об'ємами колонки 20мМ Трис-буфером, 200мМ NaCI, рН 7,4, та 2 об'ємами колонки 20мМ Трис-буферу, 150мМ NaCI, рН 7,4, зв'язаний зимоген рекомбінантного людського білку С елюювали 20мМ Трисбуферу, 150мМ NaCI, ЮмМ СаСІ2, рН 7,4 Чистота одержаного елюйованого білку, за даними електрофорезу у поліакриламідному гелі у присутності додецилсульфату натрію, перевищувала 95% Додаткове очищення згаданого білку здійснювали шляхом його розчинення (З М) у NaCI, з подальшим адсорбуванням на гідрофобну інтерактивну смолу (Toyopearl Phenyl 650M, компанія TosoHaas), яку було урівноважено за допомогою 20мМ Трис-буферу, З М NaCI, ЮмМ СаСІ2, рН 7,4 Після промивання 2 об'ємами колонки урівноважувального буферу без СаСЬ, одержаний рекомбінантний людський білок С елюювали за допомогою 20мМ Трис-буферу, рН 7,4 Одержаний елюйований білок готували до активування шляхом видалення залишкового кальцію Згаданий рекомбінантний людський білок С пропускали через металеву афінну колонку (Chelex-100, компанія Bio-Rad) з метою видалення кальцію та поновно зв'язували з аніонообмінною смолою (Fast Flow Q, компанія Pharmacia) Обидві згадані колонки розміщували послідовно та урівноважували 20мМ Трис-буферу, 150мМ NaCI, 5мМ EDTA, рН 7,4 Після завантаження згаданого білку, колонку Chelex-100 промивали одним об'ємом колонки того ж самого буферу перед и відокремленням від згаданої ПОСЛІДОВНОСТІ Згадану аніонообмінну колонку промивали 3 об'ємами колонки урівноважувального буферу перед елююванням білку 0,4М NaCI, 20мМ суміші Трис-буферуацетату, рН 6,5 Концентрацію білку у розчинах рекомбінантного людського білку С та рекомбінантного активованого білку С вимірювали шляхом визначення екстинкції ультрафіолетового випромінювання на 280нм Е° % = 1,81 або 1,85, ВІДПОВІДНО Препарат 2 Активація рекомбінантного людського білку С Тромбін великої рогатої худоби сполучали з активованою сефарозою (Activated CH-Sepharose 4В (компанія Pharmacia)) у присутності 50мМ ГЕ 12 11 55448 ПЕС-буферу, рН 7,5 при температурі 4°С Згадану елюйовано зі згаданої колонки, зберігали у вигляді реакцію сполучення здійснювали на смолі, якою замороженого розчину (при температурі -20°С) вже було заповнено колонку, з використанням або у вигляді люфілізованого порошку приблизно 5000 одиниць тромбіну/мл смоли ЗгаАнтикоагулянтну активність активованого білку даний розчин тромбіну циркулював через колонку С визначали вимірюванням подовження часу згорвпродовж приблизно 3 годин перед доданням 2тання у аналізі коагулювальної активності крові аміно-етанолу (МЕА) до концентрації 0,6мл/л цирпри доданні частково активованого тромбопластикулюючого розчину, Одержаний розчин, який вміну (АРТТ) Стандартну криву було одержано у бущував МЕА, додатково піддавали циркуляції впрофері для розбавлення (1мг/мл сироваткового альдовж 1 0 - 1 2 годин для забезпечення повного буміну великої рогатої худоби [BSA] (чистого для блокування амінів, які не прореагували, на смолі радюімунолопчних проб), 20мМ Трис-буфер, рН Після блокування тромбін, зв'язаний зі смолою, 7,4, 150мМ NaCI, 0,02% NaN3) з концентрацією промивали 10 об'ємами колонки 1 М NaCI, 20мМ білку С у межах 125 - 1000нг/мл, у той час, як проТрис-буфером, рН 6,5 для видалення усього неби було виготовлено у декількох розведеннях у специфічне зв'язаного білку, та використовували у згаданому діапазоні концентрацій До кожноїкювереакціях активування після урівноваження у актити з пробою додавали 50мкл холодної конячої плаваційному буфері зми та 50мкл відновленого АРТТ реактиву (АРТТ Reagent, компанія Sigma), та шкубували при темОчищений r-hPC розчиняли (5мМ) у EDTA (для пературі 37°С впродовж 5 хвилин Після інкубуутворення хелатних сполучень з будь-яким залишвання до кожної кювети додавали 50мкл відповідковим кальцієм) та розбавляли до концентрації ної проби або стандарту Для визначення 2мг/мл за допомогою 20мМ Трис-буферу, рН 7,4 основного часу згортання крові замість проби або або 20мМ суміші Трис-буферу-ацетату, рН 6,5 стандарту було використано буфер до розбавленЦей матеріал пропускали через тромбінову колоння Таймер фіброметру (CoA Screener Hemostasis ку, урівноважену при температурі 37°С 50мМ NaCI Analyzer, компанія American Labor) запускали нета 20мМ Трис-буферу, рН 7,4, або 20мМ сумішшю гайно після додання до кожної проби або стандарТрис-буферу-ацетату, рН 6,5 Швидкість потоку ту 50мкл ЗОмМ СаСЬ (температура 37°С) Конценрегулювали таким чином, щоб забезпечити притрацію активованого білку С у пробах близно 20-хвилинну тривалість контактування гвираховували за допомогою ЛІНІЙНОГО рівняння пРС та тромбіну на смолі Потік, який витікав, збирегресії зі стандартної кривої Час згортання, який рали та негайно перевіряли на амідолітичну актинаведено у цьому описі, представляє собою серевність У разі, якщо одержаний матеріал не мав днє, як мінімум, трьох повторів, у тому числі, зразспецифічної активності (амідолітичної), порівняно ків стандартних кривих до встановленого стандарту аРС, його поновно пропускали через згадану тромбінову колонку для завершення активування r-hPC Після цього одержаний матеріал розбавляли 1 1 за допомогою 20мМ буферу, як згадувалось перед тим, з доведенням рН до рівня 7,4 або 6,0 з метою підтримання найнижчих концентрацій аРС до наступного етапу його обробки Видалення вилуженого тромбіну з одержаного аРС здійснювали шляхом зв'язування згаданого аРС з аніонообмінною смолою (Fast Flow Q, компанія Pharmacia), яку було урівноважено у активаційному буфері (або у 20мМ Трис-буферу, рН 7,4, або у 20мМ суміші Трис-буферу-ацетату, рН 6,5) 150мМ NaCI Тромбін не взаємодіє зі згаданою аніонообмінною смолою за цих обставин, а проходить через колонку до розчину, що витікає, який представляє собою зразок до застосування Після внесення аРС до згаданої колонки, II промивали 2 - 6 об'ємами колонки 20мМ урівноважувального буферу перед елююванням зв'язаного аРС ступінчастим градієнтом з застосуванням 0,4 М NaCI у 5мМ суміші Трис-буферу-ацетату, рН 6,5 або 20мМ Трис-буферу, рН 7,4 Промивання колонки більшими об'ємами полегшувало більш повне видалення додекапептиду Матеріал, який було Приклад 1 Лікарська форма активованого білку С Людський активований білок С було одержано, як описано у Препаратах 1 та 2 Згадані лікарські форми активованого білку С було аналізовано для обробки у традиційній ліофільній сушарці Ліофільне мікроскопування та диференційну сканувальну калоріметрію (DSC) було застосовано з метою визначення того, як можна лікарську форму обробляти у традиційній ліофільній сушарці Ліофільне мікроскопування є придатним способом визначення температури зливання заморожених розчинів, які призначено для люфілізацм DSC є придатним способом визначення температури склування (Тд') згаданого замороженого розчину Згадані температури зливання та склування є особливо придатними для прогнозування верхньої температурної межі, яку можна безпечно застосовувати під час люфілізацм Результати ліофільного мікроскопування є додатковими до значень температури склування Тд', які було одержано за допомогою DSC Температура зливання вище -40°С є оптимальною для зразка, який призначено для обробки на традиційній ліофільній сушарці 13 14 55448 Таблиця 1 Люфілізація матриць лікарських форм аРС Матриця лікарської форми Концентрація цукрози Концентрація NaCI 15мг/мл 50мМ 15мг/мл 150мМ 15мг/мл 325мМ 30мг/мл 50мМ 30мг/мл 150мМ 30мг/мл 325мМ 30мг/мл 650мМ Концентрація аРС 2,5мг/мл 2,5мг/мл 2,5мг/мл 5,0мг/мл 5,0мг/мл 5,0мг/мл 5,0мг/мл Співвідношення між аРС, цукрозою та хлоридом натрію (у 10 або 20мМ цитратному буфері) є важливою змінною лікарської форми, яка впливає на температури зливання та склування Для обробки у традиційній ліофільній сушарці, згадана концентрація хлориду натрію повинна бути достатньо високою (за переважним варіантом, 325мМ для лікарської форми з 2,5мг/мл аРС та 650мМ для лікарської форми з 5мг/мл аРС) для забезпечення кристалізування хлориду натрію на етапі заморожування під час люфілізацм Лікарські форми аРС можуть оброблятись у традиційній ліофільній сушарці з одержанням люфілізованих продуктів, до складу яких входять 1 частина аРС, 6 частин цукрози та 7,6 частин хлориду натрію у масовому відношенні Приклад 2 СТІЙКІСТЬ аРС у лікарських-формах, до складу яких входять різні наповнювачі Для дослідження впливу різних наповнювачів на СТІЙКІСТЬ молекули було виготовлено лікарські форми аРС До розчину аРС у фосфатному буфері, до складу якого не входила сіль, було додано, загалом, шість наповнювачів Згаданими наповнювачами були гліцин, маніт, цукроза, трегалоза, рафіноза та пдроксиетильований крохмаль (HES) СТІЙКІСТЬ аРС у згаданому фосфатному буфері без солі та без наповнювача ("контроль") порівнювали зі СТІЙКІСТЮ у лікарських формах з наповнювачем Зразки зберігали при температурі 50°С, 40°С та Температура зливання -59°С -60°С -37°С від -50°С до -45°С від -60°С до -55°С -64°С від -32°С до -28°С 25°С впродовж різних періодів часу Дані аналізів цих зразків порівнювали з вихідними значеннями (час=0) Для оцінки фізичної та хімічної СТІЙКОСТІ згаданих лікарських форм було застосовано визначення активності АРТТ, високороздільну гельхроматографію за розміром молекул (SE-HPLC), імуноелектрофорез у поліакриламідному гелі у присутності додецилсульфату натрію (SDS-PAGE) та визначення вмісту білку Лікарські форми аРС було одержано шляхом розчинення аРС у фосфатному буфері до концентрації 5мг/мл аРС До порцій згаданого розчину аРС додавали наповнювачі у співвідношенні 6 1 (наповнювач аРС) або 30мг/мл Згадані зразки люфілізували до 5мг аРС/пробірку Перевірку СТІЙКОСТІ згаданих лікарських форм здійснювали при температурі 50°С впродовж 14 та 28 днів, при температурі 40°С впродовж 28 днів, 48 днів та 6 МІСЯЦІВ, та при температурі 25°С впродовж 6 та 12 МІСЯЦІВ Д Л Я кожної часової точки незалежно, як окремі зразки, аналізували по дві пробірки кожної лікарської форми і ВІДПОВІДНІ данні для цих зразків порівнювали з вихідними даними (час=0) Аналіз включав визначення активності аРС (АРТТ), застосування імуноелектрофорезу у поліакриламідному гелі у присутності додецилсульфату натрію (SDS-PAGE), визначення відсоткового вмісту мономеру аРС та визначення вмісту білку Таблиця 2 Контроль 50°С 25°С Вихідний Пробірка рівень Активність АРТТ (одиниць/ мг) Мономер Вміст (%) 6 МІСЯЦІВ ЦІВ 12 Вихідний рівень 14 днів МІСЯ 40°С Вихідний 28 днів 28 днів 84 днів рівень 6 МІСЯЦІВ 1 321 294 236 321 248 248 321 248 221 215 2 1 2 321 99,3 99,2 251 242 98,3 96,5 96,4 245 97,5 97,3 227 97,0 97,1 321 99,3 99,2 279 97,7 97,7 233 96,2 96,1 95,1 95,8 321 99,3 99,2 176 95,4 Таблиця 3 Гліцин 50°С 25°С Пробірка Активність АРТТ Вихідний рівень 6 МІСЯЦІВ 1 282 233 12 ЦІВ Вихідний рівень 14 днів 28 днів 142 282 164 97 МІСЯ 40°С Вихідний 28 днів 84 днів рівень 282 191 155 6 МІСЯЦІВ 158 15 16 55448 Продовження таблиці З Гліцин 50°С 25°С Пробірка (одиниць/ мг) Мономер Вміст (%) 2 1 2 Вихідний рівень 321 99,1 99,1 6 МІСЯЦІВ 12 МІСЯЦІВ 239 191 98,4 93,3 98,4 96,3 Вихідний рівень 321 99,1 99,1 14 днів 28 днів 161 97,4 97,3 142 97,2 97,1 40°С Вихідний 28 днів 84 днів рівень 321 215 152 99,1 97,8 96,4 99,1 97,7 96,4 6 МІСЯЦІВ 79 95,8 95,7 Таблиця 4 маніт 50°С 25°С Вихідний Пробірка рівень Активність АРТТ (одиниць/ мг) Мономер Вміст (%) 6 МІСЯЦІВ 40°С Зихідний 28днв 28 днів 84 дні рівень ЦІВ Вихідний рівень 14 днів 255 12 309 270 245 309 273 270 282 321 99,2 99,2 239 98,2 98,2 242 98,1 98,0 321 99,2 99,2 300 98,4 98,4 251 97,6 97,6 97,8 МІСЯ 1 309 227 2 1 2 321 99,2 99,2 321 267 98,8 97,4 98,7 97,6 6 МІСЯЦІВ 191 97,8 Таблиця 5 цукроза 50°С 25°С Вихідний Пробірка рівень Активність АРТТ (одиниць/ мг) Мономер Вміст (%) 6 МІСЯЦІВ 40°С Зихідний 28 днів 28 днів 84 дні рівень ЦІВ Вихідний рівень 14 днів 288 12 327 300 288 327 267 306 285 297 99,2 99,2 291 98,7 98,7 291 98,9 98,9 297 99,2 99,2 321 98,8 98,8 242 98,5 98,5 98,9 МІСЯ 1 327 300 2 1 2 297 99,2 99,2 300 306 99,0 98,5 99,0 98,5 6 МІСЯЦІВ 294 98,9 Таблиця 6 трегалоза 50°С 25°С Вихідний Пробірка рівень Активність АРТТ (одиниць/ мг) Мономер Вміст (%) 6 МІСЯЦІВ ЦІВ 12 Вихідний рівень 14 днів МІСЯ 40°С Вихідний 28 днів 28 днів 84 дні рівень 6 МІСЯЦІВ 1 312 291 282 312 258 282 312 273 276 276 2 1 2 309 99,2 99,2 315 282 99,0 98,4 98,4 270 98,6 98,6 215 98,8 98,8 309 99,2 99,2 303 98,8 98,7 245 98,4 98,4 98,7 98,8 309 99,2 99,2 255 98,7 Таблиця 7 рафшоза 50°С 25°С Вихідний Пробірка рівень Активність АРТТ (одиниць/ мг) Мономер Вміст (%) 6 МІСЯЦІВ 40°С Вихідний 28 днів 28 днів 84 дні рівень ЦІВ Вихідний рівень 14 днів 255 12 321 261 258 321 276 273 279 288 99,1 99,1 255 98,6 98,6 264 98,7 98,7 288 99,1 99,1 270 98,7 98,7 239 98,4 98,4 255 МІСЯ 1 321 270 2 1 2 288 99,1 99,1 285 306 99,0 97,0 99,0 98,2 6 МІСЯЦІВ 98,6 98,6 Таблиця 8 плрокситильовний крохмаль 50°С 25°С Пробірка Активність АРТТ Вихідний рівень 6 МІСЯЦІВ 1 282 188 12 ЦІВ Вихідний рівень 14 днів 28 днів 176 282 182 164 МІСЯ 40°С Вихідний 28 днів 84 дні рівень 282 194 185 6 МІСЯЦІВ 145 55448 17 18 Продовження таблиці 8 Пробірка (одиниць/ мг) Мономер Вміст (%) 2 1 2 25°С Вихідний 6 МІСЯЦІВ рівень 285 245 97,8 , 95,6 97,8 95,3 плрокситильовний крохмаль 50°С 12 М І С Я ЦІВ 215 92,2 91,8 Вихідний рівень 285 97,8 97,8 У жодного зразка впродовж однорічного періоду випробування СТІЙКОСТІ не спостерігалось сут тєвих змін рН, кольору, характеристик пакування та фізичного вигляду За данними аналізу АРТТта SE-HPLC, лікарські форми з пдроксиетильованим крохмалем та гліцином мали меншу фізичну СТІЙКІСТЬ (внаслідок агрегування) та хімічну СТІЙКІСТЬ (активність) порівняно до контролю Лікарська форма з манітом мала дещо кращу фізичну та хімічну СТІЙКІСТЬ, аніж контроль Усі ІНШІ лікарські форми з цукрозою, трегалозою та рафінозою демонстрували навіть кращу фізичну та хімічну СТІЙКІСТЬ, у разі порівняння до контролю Таким чином, манітол, цукроза, трегалоза та рафіноза, як наповнювачі у лікарських формах аРС, забезпечують підвищену хімічну та фізичну СТІЙКІСТЬ, у разі порівняння з лікарською формою аРС без наповнювача або з лікарськими формами, у яких наповнювачем є гліцин або пдроксиетильований крохмаль Приклад З СІЙКІСТЬ рекомбінантного людського активованого білку С Дві партії люфілізованої лікарської форми рекомбінантного людського активованого білку С (аРС) зберігали впродовж 1 місяця при температурі 40°С та ВІДНОСНІЙ вологості 75%, після чого аналізували на можливий розклад Контролювали також СТІЙКІСТЬ аРС після відновлення за допомогою стерильної води та зберігання впродовж 72 годин при температурі довколишнього середовища До складу люфілізованого аРС продукту входило 10 мг аРС, 60 мг цукрози, 76 мг хлориду на 14 днів 28 днів 188 93,0 92,9 161 91,8 91,0 40°С Вихідний 28 днів 84 дні рівень 285 176 152 97,8 93,7 90,6 97,8 92,9 90,5 6 МІСЯЦІВ 103 88,7 88,5 трію та 15,1 г цитрату/пробірку аРС у цій лікарській формі зберігав СТІЙКІСТЬ у сухому стані впродовж, як мінімум, одного місяця у разі зберігання при температурі 40°С та ВІДНОСНІЙ ВОЛОГОСТІ 75%, та у розчині впродовж 24 годин, у разі зберігання при температурі довколишнього середовища Обидві партії було одержано за одним прописом, який включав 10 мг аРС, 1мг цукрози, 76мг хлориду натрію та 15,1мг цитрату на пробірку Обидві люфілізовані партії аРС зберігали впродовж 1 місяця при температурі 40°С та ВІДНОСНІЙ ВОЛОГОСТІ 75%, СТІЙКІСТЬ аРС контролювали за до помогою визначення активності АРТТ, високороздільної рідинної хроматографії з утворенням іонних пар для КІЛЬКІСНОГО визначення пептидів аРС та мас-спектрометри для КІЛЬКІСНОГО визначення варіантних форм білку Одну партію було також відновлено за допомогою стерильної води до концентрації 1мг/мл аРС з подальшим зберіганням при температурі довколишнього середовища СТІЙКІСТЬ аРС у розчині контролювали через 0 годин, 1 годину, 4 години, 8 годин, 24 години, 48 годин та 72 години шляхом визначення АРТТ та за допомогою мас-спектрометри Після зберігання у сухому стані впродовж одного місяця при температурі 40°С та ВІДНОСНІЙ ВОЛОГОСТІ 75% не спостерігалось втрати активності аРСта реєструвався незначний рівень структурного розкладу аРС у цій лікарській формі є стійким впродовж періоду часу до 24 годин у концентрації 1мг/мл після відновлення Підписано до друку 05 05 2003 р Тираж 39 прим ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Pharmaceutical formulations of activated protein с

Назва патенту російською

Лекарственные формы с активированным белком с

МПК / Мітки

МПК: A61P 7/02, A61K 38/48, A61K 31/715

Мітки: активованим, ліофілізована, форма, варіанти, стійка, виріб, лікарська, містить, білком

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/9-55448-stijjka-liofilizovana-likarska-forma-z-aktivovanim-bilkom-s-varianti-ta-virib-yakijj-mistit.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Стійка ліофілізована лікарська форма з активованим білком с (варіанти) та виріб, який її містить</a>

Подібні патенти