Кристалічна форма циклоспорину a, фармацевтична композиція та спосіб лікування

Реферат: Даний винахід у цілому стосується кристалічних форм циклоспорину А і, зокрема, нещодавно виявленої форми циклоспорину А. Крім того даний винахід стосується способу його одержання й способів лікування певних захворювань очей. UA 113627 C2 (12) UA 113627 C2 UA 113627 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 За даною заявкою витребовується пріоритет у відношенні попередньої патентної заявки США № 61/490 887, поданої 27 травня 2011 р., повний опис якої включений сюди як посилання. ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ Даний винахід у цілому відноситься до нової кристалічної форми циклоспорину A і, зокрема, до фармацевтичного застосування нещодавно виявленої форми циклоспорину A. Крім того, даний винахід відноситься до способу її одержання й до способів лікування певних захворювань очей. РІВЕНЬ ТЕХНІКИ Відкрита частина нормального ока покрита тонкою слізною плівкою. Наявність постійної слізної плівки має важливе значення для здоров'я епітелію кон'юнктиви й рогівки й забезпечує рогівку поверхнею з оптично високою якістю. Крім того, водна частина слізної плівки діє як змащення для повік під час їх моргання. Крім того, деякі ферменти, що містяться в слізній рідині, наприклад імуноглобулін А, лізоцим і бета-лізин, як відомо, володіють бактеріостатичними властивостями. Здорова слізна система функціонує для утворення й підтримки правильно структурованої постійної слізної плівки. Слізний апарат складається із секреторної системи (джерела), системи розподілення й видільної системи (відтоку). У секреторній системі водянисті сльози поставляються через головні й додаткові слізні залози. Більша частина слізної плівки виробляється з такої водянистої сльози. Безперервне виробництво й дренування водянистої сльози відіграє важливу роль у підтримці епітелію рогівки й кон'юнктиви у вологому стані, у забезпеченні живильними речовинами для епітеліального дихання, у забезпеченні бактеріостатичними речовинами й в очищенні поверхні ока шляхом промивної дії течії сліз. Для лікування сухого ока були запропоновані хірургічні процедури. Якщо мало місце значне руйнування кон'юнктиви, рекомендували трансплантати слизової мембрани. Крім того, припускали, що для лікування сухих очей може бути придатна трансплантація привушного (слинного) каналу. Однак, хірургічне втручання для боротьби зі станом сухого ока являє собою винятково сильний лікувальний засіб, і будь-яка перевага, одержана в результаті цих втручань, є сумнівною. Інші захворювання очей включають факоанафілактичний ендофтальміт, увеїт і сухий кератокон'юнктивіт (СКК). Ці захворювання можуть локалізуватися повсюди в оці, в обох задній і передній камерах ока, а також у склоподібному тілі. Увеїт, запалення судинної оболонки очного яблука, є причиною приблизно 10 % порушень зору в Сполучених Штатах. Факоанафілактичний ендофтальміт є аутоімунним захворюванням людини. Панувеїт відноситься до запалення всього увеального (судинного) шару ока. Задній увеїт звичайно відноситься до хоріоретиніту, а передній увеїт відноситься до іридоцикліту. Продукти запалення (тобто клітини, фібрин, надлишкові білки) із цих запалень звичайно виявляються в рідинних просторах ока, тобто в передній камері, задній камері й просторі склоподібного тіла, а також проникають у тканини, тісно залучені в запальний процес. Увеїт може виникнути після хірургічних або травматичних ушкоджень ока; як компонент аутоімунного захворювання, такого як ревматоїдний артрит, хвороба Бехчета, анкілозуючий спондиліт, саркоїдоз; як ізольований імуно-опосередкований очний розлад, тобто середній увеїт, іридоцикліт тощо, не пов'язаний з відомими етіологіями; і після певних системних захворювань, які викликають відкладання комплексів антиген-антитіло в увеальній тканині. Разом ці розлади представляють неінфекційні увеїти. Факоанафілаксія є тяжкою формою увеїту, при якій кришталик являє собою причинний антиген. Білки кришталика, як правило, відділені капсулою кришталика ще до народження. Коли ці білки вивільняються в око внаслідок травми або хірургічного втручання, або, іноді, під час розвитку катаракти, вони можуть стати надзвичайно антигенними й стимулювати аутоімунну відповідь. Якщо відповідь є помірною, вона спостерігається як хронічний увеїт. Якщо відповідь дуже швидко прогресує, око стає тяжко запаленим у всіх сегментах. Ця остання відповідь названа факоанафілаксією. Циклоспорини є групою неполярних циклічних олігопептидів з відомою імуносупресивною активністю. Були ідентифіковані циклоспорин А разом з декількома іншими незначними метаболітами, а також циклоспорини B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q, R, S, T, U, V, W, X, Y і Z. Застосування циклоспорину А і похідних циклоспорину А для лікування офтальмологічних станів, викладених вище, було предметом різних патентів, наприклад, Ding et al Патент США No. 5474979; Garst Патент США No. 6254860; і Garst Патент США No. 6350442, розкриття кожного з яких включено в його повноті в даний документ як посилання. Що 1 UA 113627 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 стосується його хімії твердого тіла, циклоспорин А (CsA), як відомо, існує в аморфній формі, рідкій кристалічній формі, тетрагональній кристалічній формі (Форма 1) і орторомбічній формі (Форма 3). СУТНІСТЬ ВИНАХОДУ Даний винахід представляє нову кристалічну форму CsA з унікальними й новими властивостям, що підходять для фармацевтичної розробки. В іншому варіанті здійснення даного винаходу представлені фармацевтичні композиції, що включають терапевтично ефективну кількість циклоспорину A у новій кристалічній формі в офтальмологічно прийнятному носії. В іншому варіанті здійснення представлені способи лікування стану сухого ока з водним дефіцитом, увеїту або факоанафілактичного ендофтальміту в оці. Такі способи можуть бути виконані, наприклад, шляхом введення суб'єкту, який потребує цього, циклоспорину A у кристалічній формі 2 в офтальмологічно прийнятному носії. КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР ФІГ. 1 зображує характерні зразки рентгенівської порошкової дифракції (РПД) CsA у новій кристалічній формі (у даному документі позначена як Форма 2), тетрагональній формі (у даному документі позначена як Форма 1) і орторомбічній формі (у даному документі позначена як Форма 3). ФІГ. 2 зображує дифрактограму РПД кристалічної Форми 2 CsA. ФІГ. 3 зображує профіль водної сорбції/десорбції Форми 2 CsA. ФІГ. 4 зображує МДСК аналіз Форми 2 CsA, відновленої з 0,04 % композиції з 1 % PS80. ФІГ. 5 зображує дифрактограми РПД для зразків, відібраних з водної суспензії, що містять 1 % мас./об. полісорбату 80 і надлишок Форми 2 CsA після зберігання протягом 24 місяців. ФІГ. 6 зображує дифрактограми РПД для зразків, відібраних з водної суспензії, що містять 5 % мас./об. гіалуронової кислоти й надлишок Форми 2 CsA після зберігання протягом 6 місяців. ФІГ 7 зображує модельований зразок РПД форм циклоспорину A. ДОКЛАДНИЙ ОПИС ДАНОГО ВИНАХОДУ Необхідно розуміти, що як вищевикладений загальний опис, так і наступний докладний опис є тільки показовими й пояснювальними й не обмежують заявлений даний винахід. При використанні в даному документі, однина включає множину, якщо спеціально не зазначене інше. При використанні в даному документі термін "або" означає "і/або", якщо не зазначене інше. Крім того використання терміна "такий, що включає", а також інших форм, таких як "включає" і "включене", не є обмежуючим. Заголовки розділів, використовувані в даному документі, призначені тільки для організаційних цілей і не повинні бути витлумачені як обмежуючі описаний предмет обговорення. Крім того, необхідно розуміти, що терміни "кристалічна форма" і "псевдоморфна форма" можуть бути використані взаємозамінно в усьому описі. "Кристалічну форму 1" або "кристалічну форму 2" можна також називати "Псевдоморф 1" або "Псевдоморф 2". Якщо не надані конкретні визначення, термінологія, використовувана у зв'язку з ними, лабораторні процедури й методики аналітичної хімії, синтетичної органічної й неорганічної хімії, описані в даному документі, є тими, які відомі в даній галузі техніки. Стандартні хімічні символи використовуються взаємозамінно з повними назвами, представленими такими символами. Так, наприклад, терміни "водень" і "Н" необхідно розуміти як такі, що мають однаковий зміст. Для хімічного синтезу, хімічних аналізів і композицій можуть бути використані стандартні способи. Даний винахід представляє нову кристалічну форму CsA, яка називається Форма 2 циклоспорину A. Зразки РПД цієї нової Форми 2 суттєво відрізняються від тетрагональної форми й орторомбічної форми (ФІГ. 1). Основні кристалічні піки для форми 2 CsA з'являються при (2θ) при скануванні за допомогою рентгенівського дифрактометра з таким джерелом рентгенівського випромінювання, як Cu Кα, λ = 1.54 Å, при 30 кВ /15 мА: 7,5, 8,8, 10,2, 11,3, 12,7, 13,8, 14,5, 15,6 і 17,5 (d-відстань в кристалічній ґратниці становить приблизно 11,8, 10,0, 8,7, 7,8, 7,0, 6,4, 6,1, 5,6 і 5,1Ǻ, відповідно, Фіг. 2). Ці основні піки визначаються як такі, що є унікальними для Форми 2 відносно орторомбічної або тетрагональної форм, а також піки, що володіють інтенсивністю в 5 разів більшою, ніж фонова. В одному варіанті здійснення нова кристалічна форма (Форма 2) CsA є нестехіометричним гідратом циклоспорину A. В іншому варіанті здійснення кристалічна Форма 2 представлена формулою: 2 UA 113627 C2 5 10 X H2O де X є кількістю молекул води й варіюється від 0-3. В одному варіанті здійснення, X у вищенаведеній формулі дорівнює 2. Форма 2 виступає кінетично стабільною формою CsA у водних суспензіях. Суспензії, що містять Форму 2, при зберіганні не демонструють перетворення на інші відомі поліморфні або псевдоморфні форми. Було виявлено, що Форма 1 і аморфна форма перетворюються на Форму 2 за присутності води. Була визначена монокристалічна структура нещодавно відкритої гідратної форми циклоспорину А (Форми 2) і параметри кристалічної структури наведені в Таблиці 2. Ці результати показують, що Форма 2 є унікальною в порівнянні з іншими відомими кристалічними формами циклоспорину А. Таблиця 1: Дані про кристал і параметри збору даних кристалічної структури розчину Форми 2 CsA. формула маса формули просторова група a (Å) b (Å) c (Å) 3 об'єм(Å ) Z -3 dрозрах г см розміри кристалів(мм) температура (К) випромінюв ання (довжина хвилі в Å) монохромат ор коефіцієнт лінійної C62H115N11O14 1238,67 P 21 21 21(№19) 12,6390(5) 19,7582(8) 29,568(2) 7383,8(7) 4 1,114 0,27 × 0,18 × 0,12 150 Cukα (1,54184 конфокальна оптика 0,640 3 UA 113627 C2 -1 абсорбції (мм ) застосовува на корекція абсорбції коефіцієнти передачі (хв, макс) дифрактоме тр h, k,l діапазон 2θ діапазон (град) мозаїчність (град) використані програми F000 зважування зібрані дані унікальні дані Rint дані, використовувані в уточненні відсічення, використовувані в розрахунках R-фактора дані з l >2,0s (l) кількість змінних найбільше зрушення / esd у заключному циклі R(Fo) 2 Rw (Fo ) ступінь згоди абсолютне визначення структури 5 10 емпірична a 0,80, 0,93 Rigaku RAPID-II від -13 до 13, від -21 до21, від-32 до21 5,38-115,00 1,31 SHELXTL 27,040 2 2 2 1/[σ (Fo )+(0,0845P) +0,00 2 2 00P] де P=(Fo +2Fc )/3 37360 9964 0,077 9964 2 2 Fo >2,0s (Fo ) 6597 834 0,00 0,061 0,145 1,037 параметр контейнера (0,0(3)) b Було встановлено, що асиметрична одиниця цієї Форми 2 CsA містить одну молекулу циклоспорину A й дві молекули води. Цілком можливо, що будь-яка маленька молекула, яка може зв'язуватися з воднем води, може відігравати роль просторового наповнювача, який дав би діапазон потенційних структур від орторомбічного дигідрату до деформованого моноклінного дигідрату. Зразок РПД, розрахований з монокристалічної структури показаний на Фігурі 7, і він відповідає експериментальному зразку, показаному на Фігурі 2. Ці зразки, що узгоджуються, додатково підтверджують, що Форма 2 є унікальною й чистою кристалічною формою циклоспорину А. Не бажаючи бути зв'язаними теорією, термогравіметричний аналіз у комбінації з титруванням КФ і аналізом сорбції десорбції парів (VSA) дають можливість припустити, що Форма 2 CsA є нестехіометричним гідратом CsA. Аналіз сорбції парів Форми 2 циклоспорину показує, що вміст води в новій кристалічній формі оборотно змінюється з відносною вологістю, 4 UA 113627 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 як показано на Фіг. 3. Як і в тетрагональній формі, нова форма CsA зазнає фазовий перехід до рідкої кристалічної або аморфної форми за температури 124,4 °C перед плавленням, як показано аналізом модульованої диференціальної скануючої калориметрії (МДСК) (Фігура 4). Нова фізична форма CsA має більш високу розчинність (130 мкг/мл), ніж орторомбічна форма (100 мкг/мл) в офтальмологічній композиції носіїв, що містить 1 % PS80. Це є бажаним для композицій розроблювального розчину або суспензії. Нова форма, як представляється, є стабільнішою формою у водному розчині ніж тетрагональна. Форма 2 пропонує декілька переваг у порівнянні з тетрагональною й орторомбічною формами в альтернативних композиціях, таких як очні імплантати, таблетки, капсули й напівтверді композиції, рідкі гелеві капсули, суспензії й мікроемульсії. Крім того, було виявлено, що Форма 2 більш придатна для подрібнювання, ніж Форми 1 або 3. Подрібнювання є дуже важливим, оскільки спостерігалося, що в суспензії із тривалим вивільненням циклоспорину А, великі частки (тобто більше 40 мкм) осідають у складі 2 % гіалуронової кислоти (гідрогель) і їх складно суспендувати знову. Форму 2 CsA легко подрібнити до 10 мкм або менше. Фізично стабільні суспензії цих кристалів були приготовлені в концентраціях до 10 % в 2,5 % гіалуроновій кислоті. На додаток до фізичної стабільності, передбачається, що частки меншого розміру будуть доставляти більше лікарського засобу в тканини через збільшену площу поверхні. Із цієї причини зменшення розміру часток може бути критичним, оскільки Форма 2, очевидно, має більш низькі характеристики розчинення, ніж аморфна форма й, отже, імовірно, буде мати більш низьку доставку в тканини, хоча менший розмір часток може послабити цю проблему. Дійсно, було виявлено, що легше приготувати наночастки Форми 2, ніж Форм 1 або 3. Таким чином, якщо потрібні нанорозмірні кристали для покращення доставки ліків у тканини й/або для покращення фізичної стабільності суспензії, Форма 2 забезпечує значну перевагу в порівнянні з іншими формами. Фармацевтичні композиції можуть бути приготовлені шляхом об'єднання терапевтично ефективної кількості Форми 2 CsA згідно із даним винаходом або її фармацевтично прийнятної солі як активного інгредієнта зі звичайними офтальмологічно прийнятними фармацевтичними допоміжними засобами, і шляхом приготування одиничних дозованих форм, придатних для місцевого очного застосування. Терапевтично ефективна кількість звичайно становить від приблизно 0,0001 до приблизно 5 % (мас./об.), краще від приблизно 0,001 до приблизно 1,0 % (мас./об.) у рідких композиціях. Розчини для офтальмологічного застосування краще готують використовуючи фізіологічний сольовий розчин як основний носій. Рівень pH таких офтальмологічних розчинів краще підтримувати між 4,5 і 8,0 з відповідною буферною системою, нейтральний рівень pH є кращим, але не обов'язковим. Композиції можуть також містити звичайні фармацевтично прийнятні консерванти, стабілізатори й поверхнево-активні речовини. Кращі консерванти, які можуть бути використані у фармацевтичних композиціях згідно з даним винаходом, включають, але не обмежуються ними, бензалконію хлорид, хлорбутанол, тимеросал, фенілртуті ацетат і фенілртуті нітрат. Кращою поверхнево-активною речовиною є, наприклад, Твін 80. Подібним чином, різні кращі носії можуть бути використані в офтальмологічних препаратах згідно з даним винаходом. Ці носії включають, але не обмежуються ними, полівініловий спирт, повідон, гідроксипропілметилцелюлозу, полоксамери, карбоксиметилцелюлозу, гідроксиетилцелюлози циклодекстрин і очищену воду. Регулятори тонічності можуть бути додані за необхідності або для зручності. Вони включають, але, не обмежуючись перерахованим, солі, зокрема хлорид натрію, хлорид калію, маніт і гліцерин, або будь-який інший придатний офтальмологічно прийнятний регулятор тонічності. Різні буфери й засоби для регулювання рівня рН можуть бути використані доти, поки одержаний у результаті препарат є офтальмологічно прийнятним. Відповідно, буфери включають ацетатні буфери, цитратні буфери, фосфатні буфери й боратні буфери. Кислоти або основи можуть бути використані для регулювання рівня рН цих композицій за необхідності. Аналогічним способом, офтальмологічно прийнятний антиоксидант для використання в даному винаході включає, але, не обмежуючись цим, метабісульфіт натрію, тіосульфат натрію, ацетилцистеїн, бутильований гідроксианізол і бутильований гідрокситолуол. Інші допоміжні компоненти, які можуть бути включені в офтальмологічні препарати, є хелатуючими речовинами. Кращою хелатуючою речовиною є едетат динатрію, хоча інші хелатуючі речовини також можуть бути використані замість нього або в комбінації з ним. Інгредієнти звичайно використовуються в наступних кількостях: 5 UA 113627 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Кількість інгредієнта (% мас/мас): активний інгредієнт приблизно 0,001-5, консервант 0-0,10, носій 0-40, регулятор тонічності 0-10, буфер 0,01-10, регулятор рівня pH q.s. для pH 4,5-7,5, антиоксидант за необхідності, поверхнево-активна речовина за необхідності, очищена вода за необхідності, щоб одержати 100 %. Фактична доза активних сполук даного винаходу залежить від конкретної сполуки й від стану, що підлягає лікуванню, вибір відповідної дози знаходиться в межах знань фахівця в даній галузі техніки. Фармацевтичні композиції, що містять Форму 2 CsA застосовні для лікування різних захворювань очей. Таким чином, в іншому варіанті здійснення даного винаходу забезпечуються способи лікування стану сухого ока з водним дефіцитом, увеїту, факоанафілактичного ендофтальміту або сухого кератокон'юнктивіту (СКК) в оці, що включають введення суб'єкту, який потребує цього, циклоспорину A у кристалічній формі 2 в офтальмологічно прийнятному носії. Один аспект даного винаходу відноситься до фармацевтичної композиції для полегшення симптомів, пов'язаних із сухим оком, наприклад, у пацієнтів, що мають імуно-опосередкований сухий кератокон'юнктивіт (СКК) або захворювання сухого ока або іншу аутоімунну дисфункцію слізної залози, а також симптоми сухих очей у пацієнтів, які носять контактні лінзи. Сухе око в цілому відноситься до будь-якої патології слізної плівки, звичайно, з епітеліальними патологіями. Специфічний дефіцит водного компонента слізної плівки відомий як сухий кератокон'юнктивіт (СКК), який вражає приблизно 30 мільйонів людей в усьому світі. Він звичайно включений як частина синдрому Шегрена. Буквально термін означає запалення рогівки й кон'юнктиви, вторинні щодо висушування. Якщо слізна плівка не виконує свої функції змащення, оксигенації й видалення залишків органічних речовин, то в результаті це призводить до симптомів відчуття стороннього предмета (зернистості, дряпання, почуття наявності піску), втоми й сухості. Пацієнт може зазнавати сильний біль, особливо за наявності ниткоподібної кератопатії. Втрата гладкої заломлюючої поверхні слізної плівки викликає затуманення зору, яке може варіюватися від моргання до моргання, що відповідає за мінливий прояв переломлення й за скарги на мінливий зір протягом дня. Висушування поверхні може призвести до рефлекторної сльозотечі й помилкових скарг на надлишкові сльози. Як правило, симптоми дефіциту сліз є сильнішими наприкінці дня, при тривалому використанні очей (наприклад, коли пацієнт читає, або дивиться телевізор) і в умовах жари, вітру й низької вологості (як на пляжі або на сніжних схилах). Симптоми, що сильніше проявляються ранком, означають зв'язаний хронічний блефарит, рецидивуючі ерозії епітелію рогівки або впливи кератопатії. Крім того, симптоми включають поверхневі точкові ерозії, філаменти рогівки, грубі слизові нальоти й дефекти епітелію. Як відзначено вище, більшість із цих симптомів з'являються в результаті нестабільної слізної плівки й патологічної очної поверхні, які зменшують здатність поверхні ока відповідати на зміни навколишнього середовища. Синдром сухого ока, якщо його не лікувати, може призвести до прогресивних патологічних змін епітелію кон'юнктиви й рогівки. Етіології сухого ока є різноманітними. Захворювання, яке звичайно називають "сухе око" може бути результатом вікового зменшення системної андрогенної підтримки слізних залоз або системних аутоімунних захворювань, таких як синдром Шегрена. Все більше досліджень показують, що сухе око є результатом опосередкованого цитокінами й рецептором запального процесу, що лежить в основі. Паліативні засоби, такі як заміщення сліз, збереження сліз і вегетативна стимуляція сліз, можуть забезпечити повне або часткове полегшення симптомів. Однак терапевтичні процедури, направлені на запальний процес, що лежить в основі, можуть виявитися корисним при корекції основного розладу. Слізна плівка в нормальному оці складається з тонкої (товщиною приблизно 6-45 мкм) плівки, що складається зі слизового шару, що лежить над епітелієм рогівки й водного шару, що покриває слизовий шар і епітелій, який у свою чергу покривається надзвичайно тонким (0,010,22 мкм) шаром ліпідних молекул. Наявність постійної слізної плівки має важливе значення для здоров'я епітелію кон'юнктиви й рогівки й забезпечує рогівку поверхнею з оптично високою якістю. Крім того, водна частина слізної плівки діє як змащення для повік під час їх моргання. Крім того, деякі ферменти, що містяться в слізній рідині, наприклад імуноглобулін А, лізоцим і бета-лізин, як відомо, володіють бактеріостатичними властивостями. Вважається, що ліпідний шар відповідає за вповільнення випаровування води з ока. Якщо ліпідний шар слізної плівки порушується, наприклад, через травму, захворювання, подразнення ока або носіння контактних лінз, то може виникнути надмірне випаровування води з ока, у 6 UA 113627 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 результаті чого поверхня ока залишається "сухою" (див., наприклад, Cedarstaff and Tomlinson, Am. J. Optometry & Physiol. Optics, 60:167-174, 1983 [tear film disruption in patients with keratoconjuctivitis sicca, or "dry eye"]). Нормальна слізна система функціонує для утворення й підтримки правильно структурованої, постійної слізної плівки. Слізна система складається із секреторної системи (джерела), системи розподілення й видільної системи (відтоку). У секреторній системі водянисті сльози поставляються через головні й додаткові слізні залози. Надмірне випаровування води зі слізної плівки в результаті призводить до дискомфорту в очах (часто відчувається людиною як сухість і втома ока або як інші симптоми дискомфорту, що реєструються рідше) і в остаточному підсумку може призвести до фізіологічних і патологічних змін у тканинах ока, особливо в рогівці. Для пацієнтів які носять контактні лінзи, такий дискомфорт є особливо гострим, тому що втрата води зі слізної плівки відбувається на межі між слізною плівкою й лінзою. Крім того, якщо лінза є гідрогелевою "м'якою" лінзою, надмірне випаровування води зі слізної плівки також може призвести до надмірного випаровування води з лінзи. Таким чином, з урахуванням цього випаровування, безперервне виробництво й дренування водянистої сльози відіграє важливу роль у підтримці епітелію рогівки й кон'юнктиви у вологому стані, у забезпеченні живильними речовинами для епітеліального дихання, у забезпеченні бактеріостатичними речовинами й в очищенні поверхні ока шляхом промивної дії течії сліз. У відносно легких випадках основним симптомом СКК є відчуття стороннього предмета або м'якого "дряпання". Це може прогресувати й стати постійним інтенсивним дратівним відчуттям печіння, яке може бути виснажливим для пацієнта. Більш тяжкі форми СКК прогресують у розвиток ниткоподібного кератиту, хворобливого стану, що характеризується появою численних ниток або волокон, прикріплених до поверхні рогівки. Останні дані свідчать про те, що ці нитки являють собою розриви в цілісності нормальних епітеліальних клітин рогівки. Зрушення, створювані рухом повік, тягне ці нитки, викликаючи біль. Лікування цієї стадії СКК є дуже складним. Частим ускладненням СКК є вторинна інфекція. Представляється, що відбуваються деякі порушення в нормальному механізмі захисту ока, очевидно такі, що відносяться до зниження концентрації антибактеріального лізоциму у водянистих сльозах пацієнта, що страждає від СКК. Як правило, стан сухого ока з водним дефіцитом, такий як, наприклад, СКК, лікують доповненням сліз зі штучними замінниками сліз. Однак, полегшення обмежене часом утримання введеного розчину штучної сльози в оці. Як правило, ефект від введення в око розчину штучної сльози зникає протягом від приблизно тридцяти до сорока п'яти хвилин. Ефект від таких продуктів, хоча спочатку є заспокійливим, триває досить недовго. Пацієнту завдає незручність необхідність повторного введення розчину штучної сльози в око за необхідності для доповнення нормальних сліз. Наступні приклади призначені тільки для демонстрації даного винаходу й жодним чином не повинні бути витлумачені як обмежуючі предмет даного винаходу. ПРИКЛАДИ Приклад 1 0,05 мас. % водяного розчину CsA, що містить 1 % мас./об. Твін 80 приготували й зберігали за температури 65 °C. Нова кристалічна форма циклоспорину утворюється шляхом осадження через 24 години зберігання. Приклад 2 Циклоспорин A (30,19 г) суспендували в 900 мл розчину 1 % мас./об. Твін 80 у воді за кімнатної температури. Суспензію нагрівали до температури 65 °C і вносили зародок 0,2 г Форми 2 циклоспорину A за температури 52 °C. Суспензію перемішували протягом 22-23 годин за температури 65-61 °C. Осаджену тверду речовину відновлювали вакуумною фільтрацією, промивали водою й сушили у вакуумі спочатку за температури 40 °C, потім за кімнатної температури. Вихід склав 30,3 г. Приклад 3 Водні суспензії, що містять 1 мас./об. % полісорбату 80 (PS80) і надлишок Форми 2 CsA приготували й зберігали за температури 25 °C і 40 °C. Зразки твердого залишку були зібрані протягом 24-місячного періоду й проаналізовані за допомогою рентгенівської порошкової дифракції. Фігура 5 демонструє РПД дифрактограми зразків, відібраних після 24 місяців. У порівнянні з еталонною дифрактограмою Форми 2, змін не спостерігається, що означає, що Форма 2 є фізично стабільною в умовах випробування. Приклад 4 7 UA 113627 C2 5 Суспензію Форми 2 циклоспорину в 5 % мас./об. гелю гіалуронової кислоти у воді приготували й зберігали за температури 25 °C. Зразки були зібрані протягом 6 -місячного періоду часу й проаналізовані за допомогою рентгенівської порошкової дифракції. Фігура 6 демонструє РПД дифрактограми зразків, відібраних після 6 місяців. У порівнянні з еталонною дифрактограмою Форми 2 змін не спостерігається, що означає, що Форма 2 є фізично стабільною в умовах випробування. Хоча даний винахід був описаний відносно цих конкретних прикладів, необхідно розуміти, що можливі інші модифікації й зміни, що не виходять за межі сутності даного винаходу. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 10 1. Циклоспорин А, який має формулу H3 C CH3 H3 C CH3 H3 C HO N N O CH3 H3 C CH3 CH O 3 H3 C O H N N H O O CH3 N CH3 H3 C O CH3 N H3 C O N O NH N O H3 C CH3 CH3 CH3 H N N O CH3 H3 C CH3 CH3 O CH3 , 15 20 25 30 35 у кристалічній формі 2, яка характеризується рентгенівською порошковою дифрактограмою з основними піками при (2): 7,5, 8,8, 10,2, 11,3, 12,7, 13,8, 14,5, 15,6 і 17,5. 2. Кристалічна форма циклоспорину А, яка характеризується рентгенівською дифрактограмою, по суті такою, як показана на Фіг. 2. 3. Кристалічна форма за п. 1, яка відрізняється тим, що містить ендотерму дегідратації за температури в діапазоні від 65 °C до 110 °C і фазовим переходом за температури 122-125 °C у її профілі модульованої диференціальної скануючої калориметрії. 4. Кристалічна форма за п. 1, яка відрізняється тим, що має профіль МДСК як показано на Фіг. 4. 5. Фармацевтична композиція, яка містить терапевтично ефективну кількість циклоспорину А у кристалічній формі 2 за п. 1 в офтальмологічно прийнятному носії. 6. Композиція за п. 5, яка відрізняється тим, що офтальмологічно прийнятний носій вибраний із групи, що складається з офтальмологічно прийнятних розріджувачів, буферів, соляної кислоти, гідроксиду натрію, консервантів, стабілізаторів, регуляторів тонічності, речовин, що підвищують в'язкість, хелатуючих речовин, поверхнево-активних речовин і/або солюбілізаторів і їхніх комбінацій. 7. Спосіб лікування стану сухого ока з водним дефіцитом, увеїту, факоанафілактичного ендофтальміту або сухого кератокон'юнктивіту (СКК) в оці, що включає введення суб'єкту, який потребує цього, циклоспорину А у кристалічній формі 2 за п. 1 в офтальмологічно прийнятному носії. 8. Нестехіометричний гідрат циклоспорину А, представлений кристалічною формою за п. 1. 9. Гідрат за п. 8, представлений формулою 8 UA 113627 C2 H3 C CH3 H3 C CH3 H3 C HO N N O H3 C CH3 CH3 CH 3 O NH N O H3 C CH3 O N O CH3 CH3 O N CH3 H3 C N O H3 C CH3 CH3 O H N N H O CH3 N O CH3 H N CH3 H3 C CH3 O CH3 X H2O, який відрізняється тим, що X є кількістю молекул води й варіюється від 0-3. 10. Гідрат за п. 9, який відрізняється тим, що X дорівнює 2. 5 9 UA 113627 C2 10 UA 113627 C2 11 UA 113627 C2 Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 12