Спосіб формування поживного середовища для впливу на гриби роду candida в експерименті

УКРАЇНА (19) UA (11) 17718 (13) U (51) МПК (2006) A61K 36/06 МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ ДЕРЖАВНИЙ ДЕПАРТАМЕНТ ІНТЕЛЕКТУАЛЬНОЇ ВЛАСНОСТІ ОПИС видається під відповідальність власника патенту ДО ПАТЕНТУ НА КОРИСНУ МОДЕЛЬ (54) СПОСІБ ФОРМУВАННЯ ПОЖИВНОГО СЕРЕДОВИЩА ДЛЯ ВПЛИВУ НА ГРИБИ РОДУ CANDIDA В ЕКСПЕРИМЕНТІ 1 2 (13) 17718 (11) лізму селекціонованих штамів лактобактерій Lactobacillus murinus (№ІВМ В-7037) та Lactobacillus rhamnosus (№IBM B-7038) з протигрибковими препаратами. Поставлена задача досягається тим, що у способі формування поживного середовища для впливу на гриби роду Candida, де середовище містить один шар агару Сабуро з засіяними грибами роду Candida та розташованими на ньому паперовими дисками з антимікотиками, згідно корисної моделі додатково формується нижній шар поживного середовища агару МРС, на який засіваються лактобактерії, Lactobacillus murinus (№ІВМ В-7037) та Lactobacillus rhamnosus (№IBM В-7038) в концентрації 1 105кл/мл. Корисна модель вирішує задачу посилення антимікотичної дії протигрибкових препаратів за допомогою використання продуктів метаболізму лактобактерій, які дифундують продукти метаболізму в поживне середовище агар Сабуро і таким чином синергійно з антимікотиками впливають на гриби. Методика здіснюється таким чином: - лактобактерії в концентрації 1 105кл/мл засівали у нижній шар агара МРС; - на верхній шар утворений агаром Сабуро засівали гриби роду Candida в концентрації 1 107кл/мл; - на поверхні агару розміщували диски з анти UA Корисна модель відноситься до медицини, зокрема до біотехнології і може бути використана для підвищення антимікотичної активності протигрибкових препаратів. У зв'язку з ростом грибкової патології в структурі Лор-захворюваності [Чеснокова М.Г., Соловьева Т.Д., Карпова О.И. Анализ высеваемости грибов рода Candida из различного клинического материала //Современная микология в России /материалы I съезда микологов России, Заболотный Д.И., Зарицкая И.С., Вольская О.Г. Особенности состава микобиоты при заболеваниях верхних дыхательных путей] доцільним є пошук найбільш безпечних способів лікування кандидозів, що відповідають основним сучасним вимогам. Найбільш близьким способом до того що заявляється, є спосіб визначення чутливості грибів до протигрибкових препаратів. За даним способом середовище формується згідно стандартному методу паперових дисків [МОЗ приказ №535 від 22.04.85]. Готують зваж культури грибів на розчині хлориду натрію концентрацією 500 106 по оптичному стандарту мутності та 3-4мл зважу виливають на поверхню поживного середовища агару Сабуро, дають підсохнути та викладають диски з протигрибковими препаратами. Інкубують 24 години при 37°С. Задача що вирішується способом, полягає в можливості отримати синергійний протигрибковий ефект за рахунок використання продуктів метабо U собі один шар поживного середовища агару Сабуро з засіяними грибами роду Candida та розташованими на ньому паперовими дисками з антимікотиками, який відрізняється тим, що додатково формують другий нижній шар поживного середовища агару МРС та засівають його лактобактеріями Lactobacillus murinus (№ ІВМ В-7037) та Lactobacillus rhamnosus (№ IBM В-7038) в концентрації 1*105 кл/мл. (19) (21) u200603351 (22) 28.03.2006 (24) 16.10.2006 (46) 16.10.2006, Бюл. № 10, 2006 р. (72) Вольська Оксана Гергіївна, Шинкаренко Любов Миколаївна, Зарицька Ірина Станіславівна, Заболотна Діана Дмитрівна (73) ІНСТИТУТ ОТОЛАРИНГОЛОГІЇ ІМ. ПРОФ. О.С.КОЛОМІЙЧЕНКА АКАДЕМІЇ МЕДИЧНИХ НАУК УКРАЇНИ (57) Спосіб формування поживного середовища для впливу на гриби роду Candida, яке містить в 3 17718 4 мікотиками за стандартною загальноприйнятою (10мкг/диск), виробник НИЦФ м. Санкт-Петербург. методикою; Для досліджень використовували види грибів: - контролем слугували варіанти досліду в яких С. albicans, C.tropicalis та С. krusei, які найчастіше нижній шар агара не містив лактобактерій. виділяються від хворих в отоларингології. Були використані диски з наступними антиміЗони затримки росту грибів під впливом прокотичними препаратами: ністатин (80мкг/диск), дуктів метаболізму в досліді наведені у таблицях 1 ітраконазол (10мкг/диск), флуконазол (40мкг/диск), та 2. амфотерицин (40мкг/диск) та клотримазол Таблиця 1 Вплив продуктів метаболізму лактобактерій Lactobacillus rhamnosus LB3 на чутливість грибів роду Candida до антимікотичних препаратів Антимікотик, Мкг/диск Ністатин 80 Ітраконазол 10 Флуконазол 40 Амфотерицин 40 Клотримазол 10 C.albicans Дослід Контроль 27±1 21±2 19±2 10±2 20±2 12±1 20±2 13±2 25±2 22±2 Зони затримки росту, мм C.tropicalis Дослід Контроль 25±2 23±2 16±1 15±2 32±1 32±1 24±2 20±2 26±2 24±2 С. krusei Дослід Контроль 23±1 23±1 15±2 18±2 0 0 18±2 20±2 28±2 25±2 Дослідження показали, що під впливом продуктів метаболізму лактобактерій зони затримки росту грибів протигрибковими препаратами збільшуються від 5 до 20мм в залежності від виду досліджуємих лактобактерій. Таблиця 2 Вплив продуктів метаболізму лактобактерій Lactobacillus murinus LE на чутливість грибів роду Candida до антимікотичних препаратів Антимікотик,мкг/диск Ністатин 80 Ітраконазол 10 Флуконазол 40 Амфотерицин 40 Клотримазол 10 C.albicans Дослід Контроль 12±2 21±2 15±2 10±2 10±1 12±1 9±1 13±1 42±2 22±2 Враховуючи відносну простоту способу підвищення антимікотичної активності протигрибкових препаратів та їх високу комерційну вартість, спосіб Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Зони затримки росту, мм C.tropicalis Дослід Контроль 12±1 23±2 36±2 15±2 38±1 32±1 9d=2 20±2 44±2 24±2 Дослід 19±1 20±2 0 16±1,5 34±1 C.krusei Контроль 23±1 18±2 0 20±2 25±2 можна застосовувати як для лікування мікозів використовуючи значно меншу кількість атимікотиків, так і для створення нових лікарських засобів. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601