Флавоноїдні сполуки та їх використання

1. Спосіб збільшення врожаю і/або поліпшення проростання насіння, і/або збільшення щільності врожаю на корені, і/або прискорення схожості, і/або підвищення міцності рослин, і/або поліпшення росту рослин, і/або збільшення біомаси, і/або прискорення плодоношення у небобової рослини або її культури, шляхом нанесення ізофлавоноїдної сполуки на згадану рослину або культуру щонайменше за 30 днів перед висаджуванням згаданої рослини або культури у ґрунт, що містить бульбочкову бактерію Rhizobia. 2 (19) 1 3 95599 4 13. Спосіб за будь-яким із пп. 9-12, який відрізня22. Спосіб за будь-яким із пп. 16-21, який відрізється тим, що ізофлавоноїдну сполуку наносять з няється тим, що ґрунт був попередньо оброблеводою, речовинами для обробки насіння, інокуляний однією або більше симбіотичними бульбочконтами, гербіцидами, фунгіцидами, інсектицидами, вими бактеріями Rhizobia. 23. Спосіб за будь-яким із пп. 16-22, який відріздобривами, стимуляторами росту, садівничими няється тим, що рослина або культура була обсередовищами або їх комбінацією. 14. Спосіб за будь-яким із пп. 9-13, який відрізняроблена однією або більше специфічними симбіоється тим, що ґрунт був попередньо оброблений тичними бульбочковими бактеріями Rhizobia. однією або більше симбіотичними бульбочковими 24. Спосіб збільшення врожаю і/або поліпшення бактеріями Rhizobia. проростання насіння, і/або збільшення щільності 15. Спосіб за будь-яким із пп. 9-14, який відрізняврожаю на корені, і/або прискорення схожості, ється тим, що небобова рослина або культура і/або підвищення міцності рослин, і/або поліпшенбула оброблена однією або більше симбіотичними ня росту рослин, і/або збільшення кількості бульбульбочковими бактеріями Rhizobia. бочок, і/або зростання ваги бульбочок, і/або збі16. Спосіб збільшення врожаю і/або поліпшення льшення біомаси, і/або прискорення проростання насіння, і/або збільшення щільності плодоношення у бобової рослини або культури, врожаю на корені, і/або збільшення біомаси, і/або який полягає у внесенні ізофлавоноїдної сполуки у прискорення схожості, і/або прискорення плодоґрунт, який буде висаджений разом зі згаданою ношення, і/або підвищення міцності рослин, і/або рослиною або культурою, щонайменше за 30 днів поліпшення росту рослин, і/або збільшення кількоперед висаджуванням. 25. Спосіб за п. 24, який відрізняється тим, що сті бульбочок, і/або зростання ваги бульбочок у бобової рослини або її культури шляхом нанесенбобові вирощують для використання у сільському ня ізофлавоноїдної сполуки на згадану рослину господарстві, городництві, лісівництві або садівниабо культуру щонайменше за 30 днів перед висацтві. 26. Спосіб за п. 24 або 25, який відрізняється джуванням згаданої рослини або культури у ґрунт, що містить бульбочкову бактерію Rhizobia. тим, що ґрунт має місцеву популяцію бульбочко17. Спосіб за п. 16, який відрізняється тим, що вих бактерій Rhizobia. 27. Спосіб за п. 24 або 25, який відрізняється бобовими є насіння, бульба, саджанець або вегетативний живець. тим, що у ґрунті раніше не вирощувалась бобова 18. Спосіб за п. 16 або 17, який відрізняється культура. 28. Спосіб за будь-яким із пп. 24-27, який відрізтим, що бобові вирощують для використання у няється тим, що ізофлавоноїдну сполуку наносять сільському господарстві, городництві, лісівництві або садівництві. з водою, речовинами для обробки насіння, іноку19. Спосіб за будь-яким із пп. 16-18, який відрізлянтами, гербіцидами, фунгіцидами, інсектициданяється тим, що ґрунт має місцеву популяцію буми, добривами, стимуляторами росту, садівничильбочкових бактерій Rhizobia. ми середовищами або їх комбінацією. 20. Спосіб за будь-яким із пп. 16-18, який відріз29. Спосіб за будь-яким із пп. 24-28, який відрізняється тим, що у ґрунті раніше не вирощувалась няється тим, що ґрунт був попередньо оброблебобова культура. ний однією або більше симбіотичними бульбочко21. Спосіб за будь-яким із пп. 16-20, який відрізвими бактеріями Rhizobia. няється тим, що ізофлавоноїдну сполуку наносять 30. Спосіб за будь-яким із пп. 24-29, який відрізняється тим, що рослина або культура була обз водою, речовинами для обробки насіння, інокулянтами, гербіцидами, фунгіцидами, інсектицидароблена однією або більше симбіотичними бульми, добривами, стимуляторами росту, садівничибочковими бактеріями Rhizobia. ми середовищами або їх комбінацією. Винахід стосується використання однієї або більшої кількості флавоноїдних сполук -"сигналів", що можуть бути із сільськогосподарсько прийнятним носієм, які застосовуються перед посадкою за 365 днів або більше, безпосередньо щодо насіння або до трансплантів небобових або бобових культур, або застосовуються до фунту, де буде висаджено небобові або бобові культури, з метою збільшення врожаю і/або поліпшення раннього проростання насіння і/або поліпшення утворення бульбочок і/або збільшення щільності врожаю на корені і/або поліпшення енергії рослин і/або поліпшення росту рослин, і/або збільшення біомаси, і/або більш раннього плодоношення, за умови, що все стосується сіянців та рослин-трансплантів. Сільськогосподарське застосування Сільське господарство у світі, що розвивається, часто використовує у практиці проміжні культу ри, щоб максимізувати продуктивність землі. Ця практика часто передбачає використання бобових культур, які висаджують рядами між іншими видами рослин, що мають регіональне значення. Давно відомо, що врожай небобових культур здебільшого покращується при їх тісній взаємодії на кореневому рівні з бобовими. Традиційно вважають, що це відбувається завдяки здатності бобових повертати зв'язаний азот, який використовується рослинами, у ґрунт за рахунок їх симбіотичних зв'язків з азотфіксуючими бактеріями. Вважають, що використання цього азоту сприяє росту проміжних культур. В країнах, що розвиваються, використання проміжних бобових культур з іншими сільськогосподарськими культурами, незважаючи на те що є загальновідомим і очевидним, є просто нереальним. На практиці це вимагає застосування ручної праці при обробітку землі для отримання кращих 5 95599 6 результатів, і в масштабах сільського господарстються коренями бобових рослин, їх також називава використання обладнання є неприйнятним чеють сигналами, що переключають гени на виробрез невідповідність між висотою і розмірами росництво цих ЛХО. Сигнальні сполуки - це фенольні лин, наприклад, соя (з родини бобових) істотно сполуки, флавони, ізофлавони та флаванони, які відрізняється від кукурудзи. виділяються коренями бобових, що діють як хемоПрактика вирощування сільськогосподарських атрактанти на бульбочкові бактерії та активатори культур у Північній Америці генів бульбочкоутворення. Застосування проміжних культур (сівозміни) в Далі було враховано в даних дослідженнях та країнах, що розвиваються, в розвинених країнах патентах, що ЛХО мають здатність впливати на інтерпретується як практика ротації сільськогоспоріст рослин, який не обмежений лише бобовими. дарських культур, коли одна сільськогосподарська Це було підтверджено тим, що насіння як небобокультура вирощується на землі протягом одного вих, так і бобових культур проростає раніше у при-7 -12 року, а інша культура вирощується у наступному сутності мізерних (10 -10 М) рівнів ЛХО у розчироці. Така зміна культур застосовується, для того ні. щоб забезпечити найкращий обробіток землі та Далі було показано, що обробка листків багазменшити втрати поживних речовин, і може вклютьох рослин за допомогою ЛХО (кукурудзи, сої, чати дві, три або чотири культури для регулярної гороху, помідорів) обумовлювала їх раннє цвітіння ротації культур (сівозміни) рік за роком. та підвищувала врожай. Механізм цих явищ потОдними з цих культур можуть бути бобові росребує подальших досліджень. лин, вид яких залежить від типу ґрунту, кон'юнктуДослідження взаємозв'язку та взаємодії Факри ринку, регіону тощо та може включати сою, готорів бульбочкоутворення, сигналів, з ЛХО, що рох, боби, люцерну, конюшину тощо - всі бобові продукуються бульбочковими бактеріями, були культури з їх власними симбіотичними зв'язками з основною метою важливого дослідження. Напривидами бульбочкових бактерій Rhizobium - і кожклад, в Патенті США № 5,141,745 Modulation ний вид бактерій утворює специфічну ЛХО речоInducing Factors, головною метою цього винаходу вину для конкретного виду рослини-господаря. є ідентифікація структурно спорідненого класу Тривалий час вважали, що сівозміна повинна молекул, заміщених флавонів, що стимулюють включати бобові культури, завдяки їх здатності експресію гена бульбочкоутворення і сприяють залишати рештки азоту в доступній для наступних швидшому утворенню бульбочок у бобових. Це культур формі - цей залишок здебільшого вирахоробота описує виділення та ідентифікацію заміщевують як фунт азоту на кожен бушель (міра об'єму них флавонів, які є ген-індукуючими утворення - 36,3 л) врожаю насіння бобових, тобто для сої бульбочок факторами. Винахід відноситься, зага40-50 фунтів азоту на акр, що є доступним для лом, до галузі симбіозу бобові - Rhizobium і, зокнаступної, як правило, небобової культури. рема, до ідентифікації флавоноїдних сполук, що В Північній Америці головними культурами в стимулюють експресію генів бульбочкоутворення сівозміні є (1) кукурудза-соя, що використовується та викликають швидше утворення бульбочок у в головних сільськогосподарських штатах США бобових за допомогою бульбочкових бактерій. Ці Іллінойсі, Огайо, Айові, Небрасці - і (2) пшеницясполуки, загалом, можуть бути використані для горох в західній Канаді. селективного контролю генної експресії і, зокрема, Наукова розробка для оптимізації композицій для інокуляції бобових. В наш час особливості симбіозу бобових росВ Патенті США № 5,229,113, "Bradyrhizobium лин з бульбочковими бактеріями досліджені значJaponicum Modulation Inducing Factor", описано но краще, хоча і не отримали остаточного поясідентифікацію хімічних сполук, що викликають екснення. Він включає і потребує цілої низки рослин пресію генів бульбочкоутворення у Bradyrhizobium та сигналів, що надходять від мікробних клітин, japonicum. для ініціації змін в тканинах рослин, що будуть Основна мета цього винаходу - ідентифікація захищати та підтримувати бульбочкові бактерії молекул, що стимулюють експресію гена, який всередині коренів, де бактерії можуть перетворювідповідає за утворення бульбочок в штамах В. вати газоподібний атмосферний азот на азот, який japonicum. може засвоюватись рослиною, за допомогою енеВ канадському Патенті № 2,179,879, ргії рослини. Наукова та патентна література дос"Composition for Enhancing Grain Yield and Protein тупна для кваліфікованої людини, узагальнений Yield of Legumes Grown Under Environmental сучасний рівень знань відображено в Міжнародній Conditions that Inhibit or Delay Nodulation (КомпозиЗаявці на Патент за номером WO 00/04778, опубція для збільшення врожаю зернових та вмісту лікованій 3 лютого, 2000 та WO 01/26465, опублібілка у бобових, які вирощуються за умов оточуюкований 19 квітня, 2001, обидві Smith et al, та чого середовища, що перешкоджають або затриCanadian Serial Number 2,439,421, всі включені у мують бульбочкоутворення", цей патент конкретно даному описі як посилання. пов'язаний з використанням факторів бульбочкоуЗараз відомо з наукової точки зору, що сигнал, творення генестеїну або даїдзеїну разом зі штаякий надходить до бобових рослин від бульбочкомом В. japonicum на бобових, а саме на сої, яка вих бактерій, для того щоб викликати зміни в ткавирощується під дією умов оточуючого середовининах кореня, являє собою Ліпо-хіто-олігосахарид ща, що інгібують або уповільнюють утворення бу(ЛХО), і в даній заявці називається Фактором бульбочок, особливо при низьких температурах в льбочкоутворення. Його утворення є результатом прикореневій зоні - між 17°С та 25°С. Тому не редіяльності суміжних бульбочкових бактерій, які комендується використовувати один фактор, що отримують ізофлавоноїдні речовини, що виділястимулює утворення бульбочок, або в будь-якому 7 95599 8 іншому середовищі. Не рекомендується викорисде небобові були висіяні в землю, в яку перед товувати один фактор бульбочкоутворення або з ними не були висіяні бобові культури; будь-яким носієм при вирощуванні бобових за ноде "сигнал" застосовують з сільськогосподаррмальних умов. Це не передбачає використання сько прийнятним носієм, таким як, але не обмежуфактора бульбочкоутворення одного або з носієм ючись ними, вода, розчини для обробки насіння, для використання на небобових культурах. інокуляти, гербіциди, фунгіциди, інсектициди, добНезважаючи на те, що зв'язок між сигналами рива, стимулятори росту або садівничі середовита ЛХО та їх вплив на рослини були описані за ща; певних умов, особливості впливу сигналів та їх де ґрунт для висадки бобових культур був покомпозицій поодинці на ріст небобових та бобових передньо оброблений певними симбіотичними культур ще мають бути з'ясовані. бульбочковими бактеріями Rhizobium або Мета даного винаходу включає застосування Rhizobia, або містив місцеву популяцію Rhizobia; та використання одного або більше "сигналів" та їх де насіння було оброблене певними симбіотикомпозицій на небобові культури, включаючи начними бульбочковими бактеріями Rhizobium або сіння, що призводить до підвищення врожаю і/або Rhizobia. покращення проростання насіння, і/або покращенНаступна мета даного винаходу включає один ня появи сходів, і/або зростання щільності врожаю або більше "сигналів" та їх композиції, а також їх на корені, і/або зростання біомаси, і/або посилення застосування щодо бобових, включаючи насіння, енергії рослин, і/або поліпшення росту рослини що призводить до зростання врожаю і/або поліпі/або прискорення плодоношення; включаючи, але шення проростання насіння, і/або поліпшення не обмежуючись цим, наступне: схожості, і/або зростання щільності врожаю на де небобові включають, але не обмежені цим, корені, і/або зростання кількості бульбочок, і/або насіння, бульби, трансплантати, або вегетативні зростання ваги бульбочок, і/або зростання біомаживці; си, і/або поліпшення енергії рослин, і/або поліпде небобові вирощуються для використання в шення росту рослин; і/або прискорення плодоносільському господарстві, квітникарстві, лісівництві шення, включаючи, але не обмежуючись ними, або садівництві; випадки: де небобові висіваються в землю, в яку до де бобові включають, але не обмежуються цього висівались бобові культури, або яка мала ними, насіння, бульби, трансплантати або живці; природню популяцію бульбочкових бактерій де бобові вирощуються для використання в Rhizobia; сільському господарстві, квітникарстві, лісівництві де небобові були висіяні в землю, в яку перед або садівництві; ними не були висіяні бобові культури; де бобові були висіяні в землю, в яку перед де "сигнал" застосовується щодо небобової ними були висіяні бобові культури, або де була культури за 365 днів або більше перед висадкою; місцева популяція бульбочкових бактерій Rhizobia; де "сигнал" застосовують з сільськогосподарде бобові були висіяні в землю, в яку перед сько прийнятним носієм, таким як, але не обмежуними не були висіяні бобові культури; ючись ними, вода, розчини для обробки насіння, де "сигнал" застосовується щодо бобових куінокуляти, гербіциди, фунгіциди, інсектициди, добльтур за 365 днів або більше перед посадкою; рива, стимулятори росту або садівничі середовиде "сигнал" застосовують з сільськогосподарща (субстрати); сько прийнятним носієм, таким як, але не обмежуде ґрунт, в який висаджували небобові культуючись ними, вода, розчин для обробки насіння, ри, попередньо був оброблений певними симбіоінокуляти, гербіциди, фунгіциди, інсектициди, добтичними Rhizobia або Rhizobium або містив місцерива, стимулятори росту, або садівничі середовиву природню популяцію бульбочкових бактерій ща; Rhizobia; де ґрунт, призначений для висадки бобових де насіння було оброблене певними симбіотикультур, був попередньо оброблений певними чними Rhizobium або Rhizobia. симбіотичними бактеріями Rhizobium або Rhizobia Наступна мета даного винаходу включає один або містив місцеву популяцію Rhizobia; або більше "сигналів" та їх композиції, та їх викоде насіння було оброблене певними бульбочристання з метою застосування щодо ґрунту, приковими симбіотичними бактеріями Rhizobium або значеного для висадки небобових культур, що Rhizobia. призводить до зростання врожаю і/або поліпшення Ще одна мета даного винаходу включає один проростання насіння, і/або поліпшення схожості, або більше "сигналів" та їх композиції, а також їх і/або зростання щільності врожаю на корені, і/або застосування щодо ґрунту, призначеного для визростання біомаси, і/або підвищення енергії россадки бобових культур, що призводить до зрослин, і/або поліпшення росту рослин; і/або прискотання врожаю і/або поліпшення проростання нарення плодоношення, включаючи, але не обмесіння, і/або зростання щільності врожаю на корені, жуючись ними, випадки: і/або прискорення появи всходів і/або поліпшення де небобові вирощуються для використання в рослинної енергії, і/або поліпшення росту рослин, сільському господарстві, квітникарстві, лісівництві включаючи, але не обмежуючись, таке: або садівництві; де бобові вирощуються для використання у де небобові висіваються в землю, в яку перед сільському господарстві, квітникарстві, лісівництві ними були висіяні бобові культури, або де була або садівництві; місцева популяція Rhizobia; де бобові були висіяні в землю, в яку перед ними були висіяні бобові культури, або де була 9 95599 10 місцева природня популяція бульбочкових бактебільш контрольованих умов, таких як в умовах рій Rhizobia; захищеного ґрунту. де бобові були висіяні в землю, в яку попередСтимулятори росту сіянців ньо не висівались бобові культури; Обробка насіння сої ізофлавоноїдними "сигнаде "сигнал" застосовують з сільськогосподарлами" сько прийнятним носієм, таким як, але не обмежуПри застосуванні проміжних культур, відповідючись ними, вода, рідкі цукрові розчини, розчини ну реакцію небобових культур можна пояснити для обробки насіння, інокуляти, домішки, наповтим, що ЛХО, утворені бобовими рослинами, мігнювачі, гербіциди, фунгіциди, інсектициди, добрирують до коренів небобових культур та ініціюють ва, стимулятори росту, або садівничі середовища; ростову реакцію у цих культур. Це - прийнятне де ґрунт, призначений для висадки бобових пояснення, що відповідає рівню сучасних знань. культур, був попередньо оброблений певними Беручи до уваги рівень знань сільськогоспосимбіотичними бактеріями Rhizobium або Rhizobia дарської науки, особливості сівозміни сої з кукуруабо містив місцеву популяцію Rhizobia; дзою і гороху - з пшеницею, ізофлавоноїдні "сигде насіння було оброблене певними симбіотинальні сполуки" бобових, які викликають зростання чними бульбочковими бактеріями Rhizobium або бульбочкоутворення завдяки зростанню утворення Rhizobia. клітинами бульбочкових бактерій ЛХО, виробництТаким чином, даний винахід спрямований на во та застосування інокульованого ризобіумними один або більше "сигналів" та їх композиції, приклітинами насіння сої та гороху та виживання буйнятні для використання у сільському господарстльбочкових бактерій Rhizobia в ґрунті, дані винахіві, та їх застосування щодо бобових та небобових дники вважають, що застосування сої та інших культур за 365 днів або більше перед посадкою ізофлавоноїдних "сигналів" в сільськогосподарсько рослин за допомогою способів, що передбачають ефективних та прийнятних кількостях щодо насінабо безпосереднє застосування щодо рослини чи ня кукурудзи та інших бобових та небобових видів, сільськогосподарської культури, або опосередковключаючи сільськогосподарські культури та садівано щодо ґрунту, в який буде висаджено росливничі різновиди, включаючи пересадку, для того ни, для того щоб підвищити врожай і/або поліпшищоб викликати утворення ЛХО завдяки місцевій ти проростання насіння, і/або поліпшити схожість, природній популяції бульбочкової бактерії в фунті, і/або забезпечити щільність врожаю на корені, і що ці ЛХО можуть призвести до посилення росту і/або зростання біомаси, і/або поліпшення рослинна стадії сіянців, коли молоді рослини укорінюютьної енергії, і/або в поліпшення росту рослин; і/або ся, та інших бажаних ефектів на процеси, які було призводить до прискорення плодоношення, і/або вказано вище. зростання ваги бульбочок, і/або зростання кількосЦя концепція була поширена на садівничі куті бульбочок; все зазначене стосується висіву нальтури, де сіянці та суміші для висадки рослин сіння, пересадки сіянця або рослини (розсади), були інокульовані певним рівнем Bradyrhizobium або появи пагонів на бульбах та розвитку нових (для сої) або інших видів Rhizobium, за умови, що рослин з новоутворених структур вищих рослин. вони здатні індукувати за допомогою їхніх відповіНеочікувано вчені встановили, що "сигнальні дних ізофлавоноїдних "сигнальних" сполук утвосполуки" та їх композиції можуть бути використані рення істотних рівнів ЛХО в коренях сіянців, де у вищевказаний спосіб щодо представників як ровони можуть діяти як стимулятори росту по віднодини бобових, так і небобових рослин, та у спосошенню до небобових рослин, висаджених у ґрунт, бах, пов'язаних із вдосконаленням та збільшенням та садівничих культур. вищезазначених показників, включаючи як умови, Це було перевірено на таких прикладах. що обмежують ріст, так і умови, що є оптимальни(1) Стимуляція росту кукурудзи. ми для росту. Композиції та способи даного винаҐрунт для висадки було інокульовано достатходу можуть знайти застосування за умов, що ліньою кількістю Bradyrhizobium japonicum комерціймітують ріст рослин, включаючи умови, пов'язані з ного соєвого інокуляту, щоб досягти 100,000 актирН-стресом, водним стресом та температурами, вних клітин на грам ґрунту, рівня середньої точки, що знаходяться у проміжку нижче або вище оптищо відповідає значенню бактерій в ґрунті, на якому муму, для росту рослини або культури, проростанпідтримується сівозміна кукурудза-боби, де рівень ня, появи сходів тощо. популяції в ґрунті повинен знаходитись у проміжку Відповідно до даного винаходу терміни "сільвід 10,000 до 1,000,000 активних бактеріальних ськогосподарська композиція" та "сільськогоспоклітин на грам ґрунту. дарсько ефективна кількість композиції" стосуютьНасіння кукурудзи, вкрите різними рівнями ся кількості одного або кількох "сигналів", яка є ізофлавоноїдного індукора, геністеїну, було висадостатньою для того щоб призвести до статистичджене в ґрунт в горщики в теплиці таким чином, но достовірного посилення, покращення або збіщо проростання можна було визначати за різнильшення у порівнянні з контролем, зазначених цею висоти у порівнянні з необробленим контровище показників, не завдаючи при цьому шкоди лем через місяць після висіву. Були перевірені рослині, ґрунту або сільськогосподарській культурі. рівні 0, 50, 100, 200, 300 та 400 мкМ розчину генісТермін "поява сходів" означає помітний ріст над теїну, що застосовували при нормі 0.3 мл (300 поверхнею середовища для укорінення рослини. мкл) на 100 насінин кукурудзи, нормальної конценТермін "проростання" означає помітний розвиток трації, що застосовується у сільському господарскоренів із зародка та термін "польовий ріст" ознатві. чає ріст в польових умовах на противагу росту за Потім партії такого обробленого насіння утримували в сухій прохолодній (22°С) кімнаті протя 11 95599 12 гом до 6 місяців. Репрезентативні проби відбирали ростання. Потім молоді сіянці були оцінені щодо щомісяця для перевірки проростання та росту, росту шляхом вимірювання висоти протягом ряду таким чином визначаючи дієвість концепції щодо тижнів, доки сіянці знаходились у посівних кювепопередньої обробки насіння попереднього вротах. жаю під час збору врожаю. Ці дослідження триваРіст розсади ють; а методологічні підходи, що застосовуються в Сіянці помідорів сорту Cherry (у віці 5 тижнів) цих дослідженнях, вдосконалюються по мірі їх робули пересаджені в 5-дюймові горщики, інокульозвитку. вані бульбочковими бактеріями у концентрації 1е6 (2) Стимуляція росту висаджених у ґрунт росклітин/мл (2 та 20 мкМ речовини для нанесення на лин. насіння - Seed Coater) або без бульбочкових бакЗемлесуміш була інокульована Bradyrhizobium терій (контроль та обробки ЛХО). Розчини Seed japonicum в концентрації 500,000 та 5,000,000 акCoater та ЛХО були приготовлені з водою та зативних клітин на мл суміші. Насіння висаджених у стосовані до рослин після пересадки в концентрагрунт рослин 8 різновидів було висіяно в інокульоції 50 мл/рослину. Зрілі плоди (оранжеві або червану землесуміш, а генестеїновий ізофлавоноїдвоні) були зібрані через 8 місяців після пересадки. ний індуктор був застосований до Rhizobia декільРезюме: (1) Використання ґрунту з Seed кома шляхами - від нанесення на насіння до Coater щодо пересаджених помідорів сорту Cherry розчинення з "сигнальним" індуктором. може збільшувати кількість ранніх плодів. (2) "СигПотім було оцінено здатність насіння до прональні" функції Seed Coater більш ефективні, ніж ростання, що полягало або у збільшенні кількості "сигнальні" функції ЛХО, коли він застосовується пророслого насіння або у зростанні швидкості продо ґрунту навколо пересаджених коренів. 13 95599 14 15 95599 16 17 95599 На ФІГ. 1 зображена швидкість проростання насіння сої, обробленого SeedCoater. На ФІГ. 2 зображено проростання насіння сої через місяць після обробки SeedCoater. На ФІГ. 3 зображено вплив SeedCoater на висоту рослин сої. На ФІГ. 4 зображено вплив SeedCoater на схожість насіння кукурудзи. На ФІГ. 5 та 6 зображено вплив SeedCoater на висоту рослин кукурудзи. 18 На ФІГ. 7 зображено вплив композиції SeedCoater для розсади на кількість ранніх плодів помідорів сорту cherry. На ФІГ. 8 показано стимулювання росту бульб картоплі за допомогою "сигнальних" сполук у польових умовах. На ФІГ. 9 показано стимулювання росту бульб картоплі за допомогою "сигнальних" сполук в теплиці. Таблиця 1 Вплив дози SeedCoater на бульбочко утворення у сої, при обробці насіння сої та негайному висіванні Загальна вага та кількість бульбочок у 16 рослин через 24 дні Загальна кількість Обробка "Сигналом" Вага бульбочок (г) 16 Бульбочки # у порів- Вага бульбочок у побульбочок на 16 ро(мкМ) рослин нянні з контролем рівнянні з контролем слинах 0 253 0.119 0 0 50 315 0.147 24.50% 23.84% 100 260 0.135 2.70% 13.65% 200 281 0.121 11.20% 1.50% 300 306 0.127 20.94% 6.99% 400 313 0.125 23.70% 5.64% Примітка: Дослідження в теплиці проводилося в 4дюймових горщиках, інокульованих Apex при кон5 центрації 10 клітин/грам тепличного ґрунту перед посадкою, 8 горщиків на обробку. 100 грамів насіння сої було оброблено 0.3 мл кожного розчину в пластиковому пакеті. Оброблене насіння було висаджено в горщики негайно. Висновки: 1. Всі концентрації SeedCoater при обробці насіння та його негайному висіві викликали зростання кількості та ваги бульбочок. 2. Концентрація 50 мкМ була найкращою дозою як щодо кількості бульбочок, так і їхньої ваги, коли обробка та висадка проводилися негайно. Таблиця 2 Вплив дози SeedCoater на бульбочко утворення у сої, коли насіння сої висівали через 1 місяць після обробки Загальна вага та кількість бульбочок у 16 рослин через 23 дні Загальна кількість Обробка "Сигналом" Вага бульбочок (г) 16 Бульбочки # у порів- Вага бульбочок у побульбочок на 16 ро(мкМ) рослин нянні з контролем рівнянні з контролем слинах 0 336 0.18 0 0 50 373 0.19 11.01% 7.22% 100 365 0.19 8.63% 3.33% 200 369 0.20 9.82% 11.67% 300 410 0.24 22.02% 33.89% 400 382 0.20 13.69% 13.33% Примітка: Дослідження в теплиці проводилося в 4дюймових горщиках, інокульованих при концент5 рації 10 клітин/грам тепличного ґрунту перед посадкою, 8 горщиків на обробку. 100 грамів насіння сої було оброблено 0.3 мл кожного розчину в пластиковому пакеті. Оброблене насіння утримували при кімнатній температурі протягом 30 днів. Висновки: 1. Всі концентрації SeedCoater збільшили кількість бульбочок та вагу бульбочок при попередній (за 30 днів до посіву) обробці. 2. Концентрація 300 мкМ була найкращою дозою як щодо кількості бульбочок, так і їхньої ваги, при попередній (за 30 днів до посіву) обробці. 16 3. Застосування SeedCoater за 30 днів перед посівом вимагає застосування вищої дози (300 мкМ), ніж у тому випадку, коли обробку та посів проводять негайно (50 мкМ -Таблиця 1). 19 95599 Таблиця 3 Вплив дози SeedCoater на суху вагу рослин кукурудзи в умовах теплиці (висадили негайно після обробки) Обробка 0.0 мкМ 50 мкМ 100 мкМ 200 мкМ 300 мкМ 400 мкМ Суха вага (грам) /рослину 0.8367 0.9024 0.8987 0.9501 0.9672 0.9299 Зростання над контролем, % 7.8% 7.4% 13.5% 15.6% 11.1% Примітка: 1. Інокулювали Bradyrhizobium japonicum в 5 концентрації 10 клітин/мл в ґрунті. 2. Рослина при негайній висадці (Таблиця 3) або через 1 місяць після обробки (Таблиця 4) 3. 2 рослини/горщик та 8 горщиків/обробка 4. Температура в теплиці була понад 30° С протягом декількох днів у квітні, що викликало ріст рослин в теплиці (Таблиця 4), таким чином, що рослини стали більшими порівняно з рослинами, представленими в Таблиці 3. 5. Рослини зрізали для встановлення біомаси через 31 день (Таблиця 3) та через 32 дні (Таблиця 4) після висіву. 20 Висновки: Не було виявлено різниці щодо висоти рослин, але суха маса зростала після всіх обробок (715.6% у порівнянні з контролем) через 31 день після висіву. Таблиця 4 Вплив дози SeedCoater на суху вагу рослин кукурудзи в умовах теплиці (висадили через 1 місяць після обробки) Обробка 0.0 мкМ 50мкМ 100 мкМ 200 мкМ 300 мкМ 400 мкМ Зростання у поСуха вага (грам) рівнянні з конт/рослина ролем, % 3.0056 3.2844 8.5% 3.0650 1.8% 3.6975 21.1% 3.2456 7.3% 3.3781 11.3% Висновок: Всі обробки SeedCoater збільшили як висоту рослин, так і суху вагу через 32 дні після посіву, але суха вага зростала до 21% при використанні концентрації 200 мкМ. Таблиця 5 Вплив дози SeedCoater на врожай зерна кукурудзи Зібране сире зерно Врожай сирого зер- Врожай зерна (кг/2 Врожай зерна (кг/га) (кг/2 ряди) на (кг/га) ряди) 250 мкМ 8.05 b 5963.0 b 6.53 b 4840.1 b 400 мкМ 9.63 а 7133.3 а 7.71 а 5713.6 а Необроблений 8.17 b 6051.9 b 6.50 b 4817.0 b контроль 7.63 b 5244.4 b 6.14 b 4546.4 b Статистична достовіртак так так так ність при 5% Обробка Примітки: 1. Оброблене насіння утримували при кімнатній температурі (20°С) протягом одного місяця перед посадкою. 2. Ґрунт перед посадкою був інокульований в 5 концентрації 10 клітин/грам ґрунту. 3. Врожай сіянців "на корені" досліджували через 1 місяць після посадки та дані (не наведені) показали, що SeedCoater не впливає на появу сходів, коли посадка була проведена через 1 місяць після обробки. 4. Кукурудзу скошували з 2 середніх рядів ко2 жної ділянки (13.5 М ) на МАС фермі (Дата збирання врожаю: 30 жовтня, 2003, Посів: 23 травня, 2003). 5. Врожай зерна корегували по відношенню до сухої ваги шляхом висушування приблизно 500 грамів/ділянку при 60°С протягом кількох днів. Висновки: 1. Всі обробки SeedCoater викликали збільшення врожаю зерна кукурудзи на 6%-25.6% у порівнянні з контролем. 2. Концентрація 400 мкМ значно збільшувала врожай як сирої, так і сухої маси зерна. Таблиця 6 Вплив дози SeedCoater на проростання насіння сої та кінцевий врожай зерна Проростання, % 200 мкМ один місяць 46.00 а 300 мкМ один місяць 37.75 b 400 мкМ один місяць 42.00 ab Необроблений конт39.25 b роль Статистична достовітак рність при 5% Обробка Врожай (кг/га) 2102.19 а 1970.14 b 2040.86 а 1530.57 с так 21 95599 22 Таблиця 7 Вплив дози SeedCoater на бульбочкоутворення та біомасу сої Стадії росту V3 Квітуючий Обробки Кількість бу- Суха вага бу- Суха вага Кількість буль- Суха вага бу- Суха вага льбочок на 5 льбочок (г) з 5 пагонів (г) з 5 бочок на 5 ро- льбочок (г) з 5 пагонів (г) з 5 рослинах рослин рослин слинах рослин рослин 200 мкМ, один мі122.8 0.2281 7.9 184 0.4994 21.70 сяць 300 мкМ, один мі96.5 0.2629 7.4 186 0.4994 23.56 сяць 400 мкМ, один мі121.8 0.2689 6.77 161 0.4304 19.64 сяць Необроблений 104.0 0.2012 5.21 164 0.4329 15.31 контроль Статистична досні ні ні ні ні ні товірність при 5% Примітки: 1. Дослідження проводилося на фермі Е. Lods в McGill Університеті в 2003. 2. Насіння, попередньо оброблене SeedCoater 4 Квітня, 2003, зберігали при кімнатній температурі (20°С), та висіяли 30 травня (5 тижнів). 3. Проростання або врожай на корені у % встановили 2 липня, підраховуючи сіянці у 2метрових рядах з двох середніх рядків кожної ділянки. 4. Ґрунт був інокульований бульбочковими ба5 ктеріями Rhizobia в концентрації 10 клітин/грам 30 травня безпосередньо перед висадкою. 5. Врожай насіння сої на всій ділянці був зібраний (скошений) комбайном 17 жовтня, 2003. Висновки: Встановлено: 1. Зростання схожості насіння при обробці при концентраціях 200 та 400 мкМ, та статистична значущість концентрації 200 мкМ. 2. Значне зростання врожаю насіння при всіх обробках. 3. Зростання бульбочкоутворення та біомаси при всіх обробках, яке, однак, не є статистично достовірним. Таблиця 8 Вплив SeedCoater на схожість насіння гороху, бульбочкоутворення та врожай в польових умовах Кількість Вага буль- Середня бульбочок Суха вага (г) Зростання в Обробки Врожай, % бочок (г) з 5 вага бульБушель/акp на 5 росли5 пагонів бушель/акp рослин бочки (мг) нах Контроль 95 217.75 0.2227 1.04b 8.81 26.5b 0 50 мкМ 93 265.75 0.2633 1.13ab 10.17 29.8а 3.3 100 мкМ 98 287.75 0.2991 1.24ab 8.61 28 0ab 1.5 200 мкМ 91.25 196.25 0.2931 1.52a 10.14 29.6а 3.1 400 мкМ 87.5 216.5 0.2585 1.20ab 9.01 29.4а 2.9 600 мкМ 93 245.75 0.2970 1.33ab 9.02 28.3ab 1.8 Статистична досСН СН СН СД СН СД товірність при 5% *СН - статистично недостовірна; СД - статистично достовірна Примітки: 1. Дослідження проводили на Е. Lods фермі McGill Університету в 2003. 2. Робили маточний розчин нарингеніну (70 мм) та гесперетину (30 мм) з DMSO та розводили водою до концентрацій, що необхідні для кожної обробки насіння. 3. Насіння гороху (різновидність Delta) обробляли та висаджували негайно на ділянки, що були інокульовані бульбочковими бактеріями Rhizobia в 5 концентрації 10 клітин/грам ґрунту. 4. Проростання насіння, висіяного 16 травня 2003, перевіряли 9 червня, 2003. 5. Вивчення бульбочкоутворення проводили 27 червня, 2003, шляхом взяття зразків - по 5 рослин з ділянки. 23 95599 24 6. Горох був скошений комбайном 6 серпня Значної відмінності у порівнянні з контролем не 2003 та висушений при температурі 60°С протягом було виявлено. 3 днів. 3. SeedCoater неістотно збільшив бульбочкоуВисновки: творення та біомасу. Однак, вага бульбочок знач1. Відсутня різниця щодо швидкості проросно збільшилася при 200 мкМ. тання гороху при різних обробках. 4. Більшість обробок значно збільшили врожай 2. Обробка насіння SeedCoater в концентрації насіння гороху, до 3 бушелів/акр. 100 мкМ викликала максимальне проростання. Таблиця 9 Відповідна реакція у врожаю сої (бушель/акр) у 5 місцях Обробки Локалізація Брукстон, Індіана Толоно, Іллінойс Уолбаш, Індіана Уолкотт, Індіана Mt. Hope, Вісконсін Середній врожай для 5 місць % у порівнянні з контролем % у порівнянні з обробкою W-RTA Статистична достовірність при 5% Необроблений контроль 32.97 36.43 43.78 31.03 32.90 35.42 0.00 -2.29 В Примітки: 1. Насіння було оброблене при концентрації 300 мкМ та висіяне негайно в землю після сої в 5 місцях. 2. В цьому дослідженні було використано насіння сої вищої якості, комерційно оброблене фунгіцидом (Warden RTA). Warden RTA (W-RTA) W-RTA + SeedCoater 31.50 33.80 44.85 36.70 34.39 36.25 2.34 0.00 В 40.03 37.73 45.14 35.83 38.13 39.37 11.15 8.61 А Висновок: 1. SeedCoater значно збільшував врожай насіння сої порівняно з необробленим насінням та насінням, обробленим Warden RTA. Таблиця 10 Вплив дози SeedCoater на сходи насіння ярої пшениці (%) у польовому досліді. Процент обробленого насіння, що проросло протягом 4 тижнів Варіант обробки Контроль 100 мкМ 200 мкМ 400 мкМ 600 мкМ Повторність 1 56 68 60 60 80 2 64 72 72 68 60 Примітки: 1. 100 оброблених насінин пшениці було висаджено на кожну ділянку поля негайно після обробки. 2. Насіння пшениці було оброблене хімікатами навесні. 3. Сходи досліджували через 4 тижні після посіву в польових умовах. 3 52 60 80 68 80 4 36 64 64 76 48 Середнє значення 52 b 66 ab 69 а 68 а 67 ab 4. Польовий дослід був закінчений, тому що ділянки були пошкоджені тваринами. Даних щодо врожаю в цьому досліді немає. Висновок: SeedCoater в концентрації 200-400 мкМ значно покращував схожість насіння пшениці. Таблиця 11 Вплив обробки SeedCoater на схожість насіння кукурудзи, обробленого фунгіцидом (Maxim XL), в 5 місцях США, 2003 Обробки MaximXL MaximXL + SeedCoater Індіана 86.88 85.63 (% Польової схожості) Іллінойс Айова (1) 86.07 76.79 85 79.29 Айова (2) 58.21 77.5 Небраска 84.29 91.07 Середнє 78.448Ь 83.698а 25 95599 Примітки: 1. 250 мкМ (рідина) SeedCoater безпосередньо застосовували до насіння кукурудзи (гібрид) при концентрації 3 мл/кг насіння перед висівом. 2. Насіння, оброблене SeedCoater, було висіяне негайно після обробки в 5 місцях. 3. В цьому досліді було використане насіння, оброблене хімічно (фунгіцидом). 26 4. Обумовлені польові досліди були невдалими та орендатор не надав ніяких даних щодо врожаю. Висновки: SeedCoater значно поліпшив схожість насіння пшениці. Таблиця 12 Вплив SeedCoater на врожай сої на корені та врожай зерна у польових дослідах 2 Рослини/м Варіант обробки Необроблений контроль SeedCoater Інокулят 2 Інокулят 1 Значущість Врожай зернових (кг/га) Ridgetown Примітки: 1. Оброблене SeedCoater насіння негайно висадили в землю, де раніше зростала соя. 2. Насіння сої було оброблене 300 мкМ SeedCoater при концентрації Змл/кг насіння. Висновки: 1. Загалом, SeedCoater не мав негативного впливу на схожість насіння сої у польових умовах. Huron Park Ridgetown 56 49 53 47 NS Huron Park 21.2 ab 22.23 а 19.8 ab 13.88 b LSD0.05 1926 a 2026 a 1992 a 1842 b LSD0.1 3177 ab 3227 a 2967 c 3056 be LSD0.1 2. SeedCoater викликав збільшення врожаю сої на корені порівняно з обробками іншими інокулятами та з контролем. Однак, значущість проявлялася тільки порівняно до контролю (в 0.1 alpha). Значущість не була значною в порівнянні з обробками іншими інокулятами. Таблиця 13 Стимулювання раннього росту шляхом попередньої обробки SeedCoater насіння сої та кукурудзи в теплиці Культура та варіанти обробки Дні попередньої обробки перед висадкою День 0 День 10 День 30 День 60 Бульбочки Висота Бульбочки Висота Бульбочки Висота Бульбочки Висота (мг) рослин (см) (мг) рослин (см) (мг) рослин (см) (мг) рослин (см) 300 мкМ 195.9 41.1 264.4 53.5 222.7 72.0 183.6 67.0 Контроль 188.2 39.8 246.4 51.1 201.5 69.9 171.1 62.8 Біомаса Біомаса Біомаса Біомаса Кукурудза Висота (см) Висота (см) Висота (см) Висота (см) (мг) (мг) (мг) (мг) 400 мкМ Ν/Α 7.25 108.5 10.28 127.3 12.98 139.2 12.64 Контроль Ν/Α 6.71 105.0 9.25 124.3 12.03 133.4 12.48 Соя *Ν/Α - інформація відсутня Примітки: В цьому досліді була використана хімічна обробка насіння сої (Apron Maxx RTA) та кукурудзи (Maxim XL). Один кг насіння було оброблено 3 мл розчину Signal, SeedCoater в пластиковій ємності; оброблене насіння утримували при 17°С. П'ять насінин було висаджено в 5-дюймові горщики через 0, 10, 30 та 60 днів після обробки, по 10 горщиків для кожної обробки. Суміш Sunshine Mix® та Turfase (1:1) як середовище для росту рослин була інокульована соєвим інокулятом В. japonicum в 5 концентрації 10 клітин/г. Схожість насіння та врожай на корені обчислювали через 7 днів після по сіву, та з кожного горщика вибирали два найкращих сіянці. Повністю збирали врожай рослин приблизно через 30 днів та вимірювали висоту рослини, біомасу та бульбочкоутворення (соя). Висновки: 1. Обробка "Сигналом" збільшила біомасу та бульбочкоутворення сої через 4-5 тижнів після обробки. Ефективність зберігалась протягом 60 днів після обробки. 2. SeedCoater збільшував біомасу рослин сої, висоту та бульбочкоутворення до 60 днів після обробки. 27 95599 28 3. SeedCoater збільшував біомасу та висоту бці насіння кукурудзи та сої в порівнянні з необрокукурудзи до 60 днів після обробки. бленим насінням (контролем). 4. SeedCoater не виявляв негативного впливу на схожість насіння та врожай на корені при оброТаблиця 14 Стимулювання врожаю насіння сої шляхом обробки SeedCoater в польових дослідах Обробка 300 мкМ 400 мкМ 500 мкМ 600 мкМ 800 мкМ Контроль Дні попередньої обробки 0 30 0 30 0 30 0 30 30 N/A* Розташування VARS МАС 57.89 38.24 51.70 48.34 59.89 43.15 51.70 37.86 63.69 30.22 62.44 40.36 67.40 41.34 52.56 33.03 52.25 37.85 39.58 39.28 Середнє 48.1 50.0 51.5 44.8 47.0 51.4 54.4 42.8 45.1 39.4 Збільшення, % у порівнянні з контролем 21.9 26.9 30.7 13.6 19.1 30.4 37.9 8.5 14.3 0 *N/A - інформація відсутня Примітки: Дослідження за тією ж схемою були проведені в сільськогосподарському коледжі Макдональда (Macdonald Agricultural College (MAC) McGill Університету, Квебек та Сільськогосподарській Науково-дослідній Службі (Vaughn Agricultural Research Service Ltd. (VARS), Кембридж, Онтаріо. Перед посадкою ґрунт був інокульований соєвим 5 інокулятом в концентрації 10 клітин/грам, що був перемішаний з верхнім шаром (20 см) фунту. Голе насіння сої було оброблене різними композиціями SeedCoater за 30 днів перед висадкою або безпосередньо в день висадки. Висновок: Використання SeedCoater в концентрації від 300 до 600 мкМ збільшило середній врожай насіння сої в обох локалітетах. Таблиця 15 Порівняння дії наявності в SeedCoater одного активного інгредієнта (генестеїну) з двома (генестеїну та дедзеїну) на врожай сої в польових дослідах в VARS та МАС Концентрація та компоненти 300 мкМ (Г) 400 мкМ (Г/Д) Контроль Дні попередньої обробки 30 30 N/A* Розташування VARS МАС 62.2 34.5 67.1 38.0 58.7 34.4 Середнє 48.35 52.58 46.54 Збільшення % понад контролем 3.9 13.0 0.0 *N/A - інформація відсутня Примітки: Дослідження за тією ж схемою були проведені в сільськогосподарському коледжі Макдональда (Macdonald Agricultural College (MAC) McGill Університету, Квебек та Сільськогосподарській Науково-дослідній Службі (Vaughn Agricultural Research Service Ltd. (VARS), Кембридж, Онтаріо. Перед посадкою ґрунт було інокульовано соєвим 5 інокулятом в концентрації 10 клітин/грам, що був перемішаний з верхнім шаром (20 см) ґрунту. Голе насіння сої було оброблене двома компози ціями SeedCoater за 30 днів перед висадкою або безпосередньо в день висадки. Висновки: 1. Результати досліджень з двох місцезнаходжень показали, що наявність у формулі SeedCoater двох активних інгредієнтів ("Г/Д") при обробці насіння сої збільшила врожай значно більше, ніж при наявності одного інгредієнта ("Г") при тій же концентрації, що становила 400 мкМ. 2. SeedCoater "Г" був, однак, ефективним щодо збільшення врожаю порівняно з контролем. 29 95599 30 Таблиця 16 Врожай насіння різних сортів сої після їх обробки SeedCoater в польових дослідах в Syngenta Seeds (NK) Канада Врожай насіння (бушель/акр) Сорти сої Необроблені 40.6 45.4 48.8 54.7 57.7 52.8 50 Стиглість (дні після посадки) Оброблені Необроблені Оброблені 44.8 48.6 51.2 56.1 60.7 51.6 52.2 0.6 114 115 117 122 121 122 118.5 113 114 117 121 122 123 118.3 S00-F8 S02-M9 S04-Z9 S08-C3 (X309R) S08-V7 (X408R) S10-T1 Середній врожай LSD0.05 *N/А - інформація відсутня Примітки: SeedCoater в концентрації 300 мкМ, що містить 3% метанолу як органічного розчинника, був використаний в цьому експерименті. Насіння було оброблене за 30 днів перед посадкою. Висновки: 1. П'ять із 6 сортів сої, оброблених SeedCoater, дали кращий врожай при використанні концентрації 300 мкМ SeedCoater 2 Обробка SeedCoater значно збільшила врожай сої - до 2.2 бушель/акр у порівнянні з відповідним необробленим контролем. Таблиця 17 Обробка SeedCoater сої з використанням комерційної попередньої обробки насіння Дні попередньої обробки 30 30+0 N/A Обробка 300 мкМ 300 мкМ + інокулят Контроль Обробка насіння Warden RTA 67.0 66.0 64.0 Примітки: 1. SeedCoater (300 мкМ), що містить 3% метанолу як розчинника, був використаний в цьому дослідженні. 2. Насіння сої було попередньо оброблене комерційною обробкою насіння The Tryon Group Inc., США, а потім оброблене вдруге SeedCoater за 30 днів перед посадкою, потім оброблене втретє комерційним соєвим інокулятом, який застосовували безпосередньо перед посадкою (300 мкМ + інокулянт). Обробка насіння Yield Shield 67.7 67.9 65.3 3. Оброблене насіння було висаджено в землю в Вудстоці, штат Іллінойс, на якій раніше росла соя. Висновки: 1. SeedCoater, застосований послідовно з хімікатами або без них, збільшив врожай насіння сої до 2.5 бушель/акр у порівнянні з контролем. 2. Хімічна обробка насіння сої не вплинула на ефективність SeedCoater щодо врожаю. 3. Використання інокулятів щодо обробленого насіння не викликало ніякого додаткового підвищення врожаю у порівнянні з SeedCoater. Таблиця 18 Вплив SeedCoater на врожай, при його застосуванні щодо польового гороху, ярої пшениці та білих бобів у Східній Канаді Обробка 400 мкМ Контроль Дні перед обробкою 0 30 N/A Польовий горох Врожай (бу% понад шель/акр) контролем 45.57 7.0 50.00** 17.5 42.60 0 Культури Яра пшениця Врожай (бу% понад шель/акр) контролем 26.78** 18.1 22.67 **статистична достовірність при 5% N/A - дані відсутні 0 Білі боби Врожай (бу% понад шель/акр) контролем 41.06 8.9 37.71 0 31 95599 Примітки: 1. Досліди з горохом та ярою пшеницею проводилося на фермі МАС, де землю з гороховим 5 інокулятом в концентрації 10 клитин/грам змішували з верхнім шаром (20 см) фунту. Тестування білих бобів проводили на ділянці, де вже раніше вирощувались білі боби, на дослідній станції Риджтаунського коледжу в Гуроні, Ексетер, Онтаріо. Насіння гороху було оброблене SeedCoater за 30 днів перед посадкою або безпосередньо під час висіву (день 0), в той час як насіння ярої пшениці та білих бобів було оброблене в день посадки. 2. Насіння білих бобів було попередньо оброблене за допомогою хімічної обробки (Apron Maxx), в той час як було використане насіння гороху, на яке не було нанесено покриття. 32 3. Норма застосування SeedCoater становила 10 г/кг для насіння пшениці та 3 мг/кг для насіння бобів та гороху. Висновки: 1. SeedCoater в концентрації 400 мкМ збільшив врожай польового гороху, білих бобів та ярої пшениці до 4 бушелів/акр у порівнянні з контролем. 2. SeedCoater значно збільшив врожай польового гороху при рівні статистичної достовірності 5% при застосуванні за 30 днів перед посадкою. 3. SeedCoater значно збільшив врожай ярої пшениці при рівні статистичної достовірності 5%. Таблиця 19 Порівняння врожаїв кукурудзи (на зерно та на силос) при використанні двох композицій Sed Coater в польових дослідах, що проводилися в VARS та МАС Концентрація та інгредієнт 400 мкМ (Г) 400 мкМ (Г/Д) Контроль Дні перед обробкою 0 30 30 N/A VARS МАК Збільшення Врожай си- Збільшення Врожай на- Збільшення понад конт- лосу (т/га) понад конт- сіння (бу% понад Врожай наролем ролем шель/акр) контролем сіння (бушель/акp) 154.59** 19.8 145.73 1.9 16.61 11.4 159.04 11.2 15.94 6.9 142.99 0 14.91 0 128.0 0 **Статистична значущість порівняно з відповідним контролем N/A - дані відсутні Примітки: Насіння кукурудзи було попередньо оброблене Maxim XL, а потім оброблене SeedCoater. Оброблене насіння було висаджене в ґрунт, іно5 кульований соєвим інокулятом в концентрації 10 клітини/г, змішаним з верхнім (20 см) шаром ґрунту. У другому досліді в МАС, "голе" (не оброблене) насіння кукурудзи було оброблене SeedCoater та висаджене в поле, де перед цим вирощували сою, без додаткової інокуляції ґрунту, в день 0. Висновки: 1. Композиція (400 мкМ) з двома ізофлавоноїдами показує кращі результати, ніж з одним ізо флавоноїдом в композиції тієї ж концентрації на врожай насіння у тому випадку, коли кукурудза була посаджена через 30 днів після обробки. 2. У цьому дослідженні SeedCoater збільшив врожай як зерна, так і силосу кукурудзи. 3. Насіння кукурудзи, оброблене SeedCoater, що містить генестеїн в концентрації 400 мкМ та висаджене в соєву землю (після сої) без додаткового інокуляту безпосередньо в день обробки, може значно збільшити врожай кукурудзи - до 19.8% у порівнянні з контролем. 4. Використання обох композицій SeedCoater призводить до підвищення врожаю. Таблиця 20 Вивчення дії SeedCoater на кукурудзу при використанні різних рівнів інокуляції фунту Головний фактор (рівні інокуляту в ґрунті) 0 3 10 4 10 5 10 LSD0.05 Врожай (бушель/акр) 68.62 68.66 69.56 67.99 6.59 Допоміжний фактор (рівень "сигнальних сполук") 0 400 мкМ 500 мкМ 600 мкМ Врожай (бушель/акр) 67.51 70.97 70.58 66.60 3.28 33 95599 Примітки: Оброблене SeedCoater насіння було висаджене в звичайну зорану землю біля Роквуду, Онтаріо на полі, на якому перед цим соя не вирощувалась і яке не мало популяції Bradyrhizobium japonicum. Дослід щодо кукурудзи був спланований як ділянка з 4 повторностями, головний фактор (рівні інокуляту в ґрунті) та допоміжний фактор (рівні сигнальних сполук). Кожна ділянка мала 15 м завдовжки та 3 м завширшки з 4 рядами на кожній ділянці та відстанню 75 см між рядами. Ділянки у верхньому (20 см) шарі ґрунту були інокульовані В. japonicum в наступ3 4 5 них концентраціях - 10 , 10 та 10 клітин/г. Голе насіння кукурудзи (гібрид Direct Seed D46) було 34 оброблене SeedCoater в Agribiotics Inc. більш ніж за 30 днів перед посадкою. Висновки: 1. SeedCoater в концентрації 400 мкМ була найкращою обробкою та збільшила врожай зерна кукурудзи у порівнянні з контролем при 5% статистичного рівня. 2. Обробка SeedCoater в концентрації 400500 мкМ може збільшити врожай зерна кукурудзи до 5% понад контроль, коли соєвий інокулят був висіяний у ґрунт. 3. Обробка SeedCoater показала кращий результат при рівні інокуляції ґрунту, що становив 3 10 клітин/г. Таблиця 21 Вплив SeedCoater на врожай кукурудзи при його застосуванні за один рік перед посадкою Посадка через декілька днів після обробки* Енергія % Врожай (бушель/акр) Maxim XL 78.4 224.85 MaximXL + 250 мкМ 83.7 239.03 SeedCoater Обробка Посадка через рік після обробки ** Енергія % Врожай (бушель/акр) 91.95 100 93.00 119.3 Примітки: * процент схожості визначався як середнє з 5 місць (ті ж самі дані в Таблиці 11) та врожай кукурудзи з штату Небраска, США. ** дані щодо сходів та врожаю, отримані з двох місць штату Іллінойс. Примітки: Дослідження проводилося багаторазово в польових умовах в США. Дані щодо появи сходів були отримані з 5 місць та дані щодо врожаю були отримані з штату Небраска. В дослідженні було використано насіння кукурудзи, оброблене за рік перед висівом, що було висаджене в двох місцях в Іллінойсі The Tryon Group Inc. в 2004. У цьому дослідженні було використано насіння ку курудзи, попередньо оброблене Maxim XL (хімічна обробка насіння). Висновки: 1. У насіння, обробленого SeedCoater, процент схожості не зменшується через рік після обробки при зберіганні при кімнатній температурі. 2. Обробка насіння SeedCoater призводить до зростання врожаю кукурудзи на 19% у порівнянні з контролем (хімічно оброблене насіння). Таблиця 22 Польові досліди щодо впливу SeedCoater на сою, проведені в багатьох місцях в США Обробка Apron-Maxim Apron-Maxim-SeedCoater Apron-Maxim-Cruiser-SeedCoater Час посадки* Ранній Нормальний Г/рослина** Врожай (бушель/акр) Г/рослина** Врожай (бушель/акр) 71.18 63.5 165.00 50 73.66 64.6 163.75 52 78.24 65.6 177.25 52 Примітки: * Рання посадка з 24 квітня по 7 травня 2004, та нормальна посадка 20 травня ** грами - суха вага рослини Примітки: Дані щодо середньої біомаси (грам/рослина) були отримані на стадії цвітіння сої, що відрізняється в кожному місці. Дані щодо врожаю в таблиці були середніми з 4 місцезнаходжень (Міссурі, Вісконсін, південний схід Айови, та Міннесота) для ранньої посадки та одне місце (Айова) - для нормальної. У цьому дослідженні було використане насіння сої, попередньо оброблене хімічними препаратами. Висновок: SeedCoater разом з обробкою насіння збільшив біомасу сої та врожай насіння на 1-2 бушелі/акр у порівнянні з контролем. 35 95599 36 Таблиця 23 Польові досліди щодо впливу SeedCoater на кукурудзу, проведені в багатьох місцях в США Обробка Maxim XL Час посадки* Рання Нормальна 180 196 128 170 Вищий рівень Cruiser Нижчий рівень Cruiser Вищий рівень Cruiser Нижчий рівень Cruiser Maxim XL + Cruiser + SeedCoater 184 205 169 172 Примітки: * Насіння кукурудзи було висаджене в середині квітня як "рання" посадка та з 28 квітня по 3 травня як "нормальна" посадка; дані щодо врожаю кукурудзи представлені в таблиці в бушелях/акр. Примітки: Польові досліди проводили в Стентоні, Гемптоні, Блумінгтоні, Іллінойсі, Айові, Женеві Міннесота та Вісконсіні для вивчення впливу строків ранньої посадки; в Стентоні, в двох місцях в Гемптоні, та в двох місцях в Блумінгтоні для вивчення впливу строків нормальної посадки Висновок: SeedCoater разом з Maxim XL + Cruiser збільшили врожай кукурудзи від 2 до 41 бушелів/акр у порівнянні з обробкою лише одним Maxim XL в середньому в багатьох місцях в США. Таблиця 24 Обробка "Сигналом" коренів сіянців помідорів, що пересаджені в землю, інокульовану бульбочковими бактеріями сої Обробки 100 мл води як контроль / рослину 100 мл генестеїну в 1 мкМ / рослину 100 мл генестеїну в 10 мкМ / рослину 100 мл генестеїну в 50 мкМ / рослину Ранній врожай Загальний врожай % у порів% у порів% у порів% у порівПлід/ділянка нянні з Кг/ділянка нянні з Плід/ділянка нянні з Кг/ділянка нянні з конконтролем контролем контролем тролем 58 0 10.41 0 219 0 25.60 0 67.75 16.81 12.02 15.47 241.5 10.27 27.10 5.86 66.25 14.22 11.64 11.82 217.75 -0.57 25.91 1.21 71 22.41 12.85 23.44 198.5 -9.36 25.77 0.66 Примітки: 1. Верхній шар ґрунту (20 см) був інокульований бульбочковими бактеріями сої в концентрації 6 10 клітин/г. 2. Сіянці помідорів у стадії 6-7 листків були пересаджені в поле, по 6 рослин на ділянку розміром 4.5 м на 1.5 м, було по 4 повторності для кожного варіанту обробки. 3. Кореневу систему пересаджених помідорів обробляли 100 мл розчину "Сигналу" кожної концентрації або водою. 4. "Сигнал" індукував утворення ЛХО in situ навколо кореневої системи, що сприяло росту рослини. 5. Досліди проводили в Макдональд Коледжі (MacDonald College), Університету Макджил (McGill University), Монреаль. Висновки: 1. У всіх варіантах обробки було відмічено збільшення ваги плодів у порівнянні з контролем. 2. Ранній врожай за кількістю плодів при всіх обробках був вищий; рівень статистичної достовірності при 50 мкМ був вищим, ніж в контролі. 3. Ранній врожай за вагою плодів при всіх обробках був вищий; рівень статистичної достовірності при 50 мкМ був вищим, ніж в контролі. 4. Аналогічне дослідження було проведене на помідорах сорту cherry в теплицях (див. Фіг. 7). Стимулювання росту бульб картоплі за допомогою "Сигналів" при вирощуванні у польових умовах. Примітки: 1. Мікробульби (культивар Bintje, розмір бульби 0.5-0.7г) були занурені в кожний розчин, 37 95599 38 який підлягав тестуванню, протягом ночі при те4. Були використані добрива пролонгованої мпературі 25°С в інкубаторі. Норма обробки стадії (20-20-20) по 50г/горщик. новила 50 мл/обробку, та 50 мл води було вико5. Дата висадки: 1 вересня, 2004. Дата збору ристано як контроль. врожаю: 9 листопада, 2004. 2. У верхній шар ґрунту (20 см) перед посадВисновки: кою був висіяний соєвий інокулят в концентрації 1 Всі обробки статистично достовірно збіль6 10 клітин/г. шили врожай бульб картоплі; обробка 300 мкМ 3. Оброблені бульби картоплі були висаджені виявила найкращий результат щодо стимулюв ґрунт на глибину 10-15 см на ділянці площею 10 вання росту. Див. Фіг. 9. 2 м ; кожну бульбу після посадки полили 500 мл 2. Оброблене насіння картоплі показало зроводи. стання кількості паростків на кожній бульбі; роз4. Дата посадки: 20 серпня, 2004 та дата збочин з концентрацією 300 мкМ виявився найкрару врожаю: 15 жовтня, 2004. щим щодо стимуляції кількості пагонів. Див. Фіг. Висновки: 9. 1. Обробка мікробульб картоплі шляхом заВисновок нурення в розчин 300 мкМ генестеїну протягом Даний винахід свідчить про те, що одна або ночі, збільшила врожай бульб картоплі до 17.7% більше флавоноїдних сполук-"сигналів", які моу порівнянні з контролем Див. Фіг. 8. жуть бути з сільськогосподарсько прийнятним 2. Обробки розчинами вищої концентрації носієм, застосовуються перед посадкою до 365 (300-500 мкМ) призвели до утворення бульб біднів або більше, як безпосередньо щодо небобольшого розміру. Див. Фіг. 8. вих культур, так і щодо бобових культур, або заСтимулювання росту бульб за допомогою стосовують до ґрунту, в який будуть висаджені як "Сигналу" при вирощуванні в теплицях небобові культури, так і бобові культури, можуть Примітки: бути застосовані з метою збільшення врожаю 1. Мікробульби картоплі (культивар Norland, і/або поліпшення проростання насіння і/або порозмір від 10-15 г) були занурені в кожний розчин ліпшення ранньої схожості насіння і/або поліпгенестеїну протягом ночі (24 години) при кімнатшення бульбочкоутворення і/або збільшення ній температурі та висаджені в 10-дюймові горщільності врожаю на корені і/або поліпшення рощики, що містять суміш Sunshine Mix, засіяну слинної енергії і/або поліпшення росту рослин, 6 соєвим інокулятом в концентрації 10 клітин/г. і/або збільшення біомаси, і/або прискорення пло2. Температура в теплиці становила 20/25°С доношення, все, що стосується сіянців та переніч/день. садки рослин (рослин-трансплантатів). 3. В кожний горщик було висаджено по 1 буХоча цей винахід описаний на прикладі однольбі; 8 повторностей для кожної обробки були го або більшого числа кращих втілень, досвідчеповністю рандомізовані на двох стелажах в тепний фахівець зрозуміє, що він може бути модіфілиці. кований без зміни ідеї та природи винаходу, як визначено у формулі винаходу, що додається. 39 95599 40 41 95599 42 43 95599 44 45 Комп’ютерна верстка Т. Чепелєва 95599 Підписне 46 Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601