Хінолінові і хіноксалінові сполуки як інгібітори тфр-р і/або lck тирозинкінази

1 Сполука формули І ний гетероарилокси, ціано, R5R6N або ацил-RsN, або один з R-іа і Rib представляє водень або галоген, а інший представляє необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений арил, необов'язково заміщений гетероарил, гідрокси, ацилокси, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси, необов'язково заміщений гетероциклілокси, необов'язково заміщений гетероциклілкарбонілокси, необов'язково заміщений арилокси, необов'язково заміщений гетероарилокси, ціано, R5R6N або ацил-RsN, Ric представляє водень, необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений арил, необов'язково заміщений гетероарил, гідрокси, ацилокси, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси, необов'язково заміщений гетероциклілокси, необов'язково заміщений гетероциклілкарбонілокси, необов'язково заміщений арилокси, необов'язково заміщений гетероарилокси, галоген, ціано, R5R6N або ацил-RsN, де X представляє І_іОН або L2Z2, Li представляє (CR3aR3b)r або день або алкіл, R4 представляє водень, алкіл або ацил, і R5, R6, незалежно, представляють водень або алкіл, або Rs і R6, узяті разом з атомом азоту, з яким зв'язані Rs і R6, утворюють азагетероцикліл, або и N-оксид, и гідрат, и сольват, и проліки або и фармацевтично прийнятна сіль 2 Сполука за п 1, де Li представляє (CR3aR3b)m-Z3-( CR3aR3b)n, І_2 представляє (CR3aR3b)P-Z4- (CR 3 a R 3 b ) q , Z2 представляє необов'язково заміщений пдроксициклоалкіл або необов'язково заміщений пдроксигетероцикліл, Т&, являє собою О і NR4, m дорівнює 0, п дорівнює 2 або З, р + q = 0 або 1, R3a, R3b, R3a I R3b , НЄЗЗЛЄЖНО, ПреДСТЭВЛЯЮТЬ ВО (CR3aR3b)rn-Z3 І_2 представляє (CR3aR3b)p-Z4- (CR 3 a R3b) q або етеНІЛ, Zi представляє СН або N, Z2 представляє необов'язково заміщений пдроксициклоалкіл, необов'язково заміщений пдроксициклоалкеніл, необов'язково заміщений пдроксигетероцикліл або необов'язково заміщений пдроксигетероцикленіл, Z3 представляє О, NR4, S, SO або SO2, Т&, представляє О, NR4, S, SO, SO2 або зв'язок, m дорівнює 0 або 1, п дорівнює 2 або 3, і n + m = 2 або З, р і q дорівнюють, незалежно, 0, 1, 2, 3 або 4, р + q=0, 1, 2, 3 або 4, коли Т&, є зв'язком, і р + q = 0, 1,2 або 3, коли Т&, представляє інше, чим зв'язок, R дорівнює 2, 3 або 4, Ria і Rib представляють, незалежно, необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений арил, необов'язково заміщений гетероарил, гідрокси, ацилокси, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси, необов'язково заміщений гетероциклілокси, необов'язково заміщений гетероциклілкарбонілокси, необов'язково заміщений арилокси, необов'язково заміще Ria і Rib, незалежно, представляють необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси, необов'язково заміщений гетероциклілокси або RsReN, або один з R-іа і Rib представляє водень або галоген, а інший з Ri a і R-іь представляє необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси, необов'язково заміщений гетероциклілокси або R5R6N, О о 00 ю 59480 Ric представляє водень, необов'язково заміщений алкіл або необов'язково заміщений алкокси, R3a, R3b, R3a I R3b , НЄЗЗЛЄЖНО, ПреДСТЭВЛЯЮТЬ ВО день або нижчий алкіл, R4 представляє водень, і Rs і R6, узяті разом з атомом азоту, з яким зв'язані Rs і R6, утворюють азагетероцикліл, або її N-оксид, и гідрат, и сольват, її проліки або и фармацевтично прийнятна сіль 3 Сполука за п 1, де X представляє L2Z2, І_2 ПреДСТаВЛЯЄ (CR 3 aR3b)p-Z 4 (CR3aR3b)q, Z2 представляє необов'язково заміщений пдроксициклоалкіл, Z4 представляє О і NR4, р дорівнює 0, q дорівнює 0 або 1, Ria і Rib, незалежно, представляють необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси або необов'язково заміщений гетероциклілокси, або один з R-іа і Rib представляє водень або галоген, а інший з R-іа і Rib представляє необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси або необов'язково заміщений гетероциклілокси, Ric представляє водень, R3a і R3b, незалежно, представляють водень, і R4 представляє водень, або и N-оксид, и гідрат, и сольват, и проліки або и фармацевтично прийнятна сіль 4 Сполука за п 1, де Zi представляє СН 5 Сполука за п 1, де Zi представляє N 6 Сполука за п 1, де Z2 представляє необов'язково заміщений пдроксициклоалкіл 7 Сполука за п 1, де р і q дорівнюють 0 8 Сполука зап 1, де р + q = 1 9 Сполука за п 1, де Z4 представляє О 10 Сполука за п 1, де Z4 представляє 0, і р і q дорівнюють 0 11 Сполука за п 1, де Z4 представляє 0, а р + q = 1 12 Сполука за п 1, де Z4 представляє NR4 13 Сполука за п 1, де Z4 представляє NR4, і р і q дорівнюють 0 14 Сполука за п 1, де Z4 представляє NR4, a p + q =1 15 Сполука за п 1, де Z4 представляє S 16 Сполука за п 1, де Z4 представляє S, і р і q дорівнюють 0 17 Сполука за п 1, де Z4 представляє S, і р + q = 1 18 Сполука за п 1, де Ri a і R-іь, незалежно, представляють необов'язково заміщений гідрокси нижчий алкіл, гідрокси, нижчий алкокси, циклоалкілокси, гетероциклілокси, або один з Ri a і R-іь представляє водень або галоген, а інший з Ri a і Rib представляє необов'язково заміщений гідрокси нижчий алкіл, гідрокси, нижчий алкокси, циклоалкілокси, гетероциклілокси 19 Сполука за п 1, де Ri a і R-іь, незалежно, представляють необов'язково заміщений гетероциклілкарбонілокси або необов'язково заміщений нижчий алкокси 20 Сполука за п 19, де нижчий алкокси являє собою метокси або етокси 21 Сполука за п 1, де Ri a і R-іь представляють нижчий алкіл 22 Сполука за п 21, де нижчий алкіл являє собою метил або етил 23 Сполука за п 1, де один з Ri a і R-іь представляє нижчий алкокси, а інший з Ri a і R-іь є галогеном 24 Сполука за п 23, де нижчий алкокси являє собою метокси або етокси, а галоген є хлором або бромом 25 Сполука за п 1, де один з Ri a і R-іь представляє нижчий алкіл, а інший з Ri a і R-іь є нижчим алкокси 26 Сполука за п 25, де нижчий алкокси являє собою метокси або етокси, а нижчий алкіл є метилом або етилом 27 Сполука за п 1, де один з Ri a і R-іь представляє нижчий алкокси, а інший з Ri a і R-іь є циклоалкілокси 28 Сполука за п 27, де нижчий алкокси являє собою метокси або етокси, і циклоалкілокси є циклопентилокси або циклогексилокси 29 Сполука за п 1, де один з Ri a і R-іь представляє водень, а інший з Ri a і R-іь представляє нижчий алкокси, циклоалкілокси або гетероциклілокси 30 Сполука за п 29, де нижчий алкокси представляє метокси або етокси, і циклоалкілокси є циклопентилокси або циклогексилокси, а гетероциклілокси є фуранілокси 31 Сполука за п 1, де Ri c представляє водень 32 Сполука за п 31, де нижчий алкіл являє собою метил або етил, і нижчий алкокси представляє метокси або етокси 33 Сполука за п 1, де Z2 представляє пдроксициклоалкіл, необов'язково заміщений гідрокси або алкілом 34 Сполука за п 33, де Z2 представляє пдроксициклоалкіл, необов'язково заміщений нижчим алкілом 35 Сполука за п 19, де нижчий алкокси є необов'язково заміщеним алкокси, гетероциклілом, карбокси, алкоксикарбонілом або карбамоілом 36 Сполука за п 35, де один з Ri a і R-іь представляє незаміщений нижчий алкокси, а інший з Ri a і Rib представляє необов'язково заміщений гетероциклілкарбонілокси або нижчий алкокси, заміщений алкокси, гетероцикліл, карбокси, алкоксикарбоніл або карбамоїл 37 Сполука за п 36, де один з Ri a і R-іь представляє метокси, а інший з Ri a і R-іь представляє [1,4']біпіперадин-1'-ілкарбонілокси, 2(етокси)етокси, 2-(4-морфолшіл)етокси, 2-(4метилпіперазин-1-іл)етокси, карбоксиметокси, метоксикарбоніл-метокси, амінокарбонілметокси, NN ' Nметиламшокарбонілметокси або диметиламшокарбоніл метокси 38 Сполука за п 1, що являє собою транс-4-(7хлор-6-метоксихіноксалш-2-іламіно)циклогексанол, транс-4-(6-хлор-7-метоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол, транс-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол, цис-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол, (2-ендо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-ол, 59480 40 Сполука за п 1, що являє собою цис-4-(6,7диметоксихіноксалін-2-іламшо)циклогексанол або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль 41 Сполука за п 1, що являє собою 4-(6,7диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанол або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль 42 Сполука за п 1, що являє собою (2екзо,5екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-ол або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль 43 Сполука за п 1, що являє собою транс-4-(7хлор-6-метоксихіноксалш-2-іламіно)циклогексанол або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль 44 Сполука за п 1, що являє собою 4-(6,7диметоксихіноксалін-3-іламшо)циклогексанол або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль 45 Сполука за п 1, що представляє (-)-(2-транс,4транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2-іламіно)-2метилциклогексанол або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль 46 Сполука за п 1, що представляє (1S,2R,4S,5R)-5-(6,7-flHMeTOKcnxiHOKcaniH-2іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-ол або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль 47 Фармацевтична композиція, що містить сполуку за п 1 і фармацевтично прийнятний носій транс-4-(6,7-диметокси-4-оксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол, 48 Спосіб придушення активності тирозинкінази транс^^б^-диметоксихшоксалін^ТФР, що включає контактування сполуки за п 1 з іламшо)циклогексиловий ефір оцтової кислоти, композицією, що містить тирозинкіназу ТФР (2-екзо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-249 Спосіб придушення активності тирозинкінази іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-ол, Lck, що включає контактування сполуки за п 1 з (2-ендо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшолш-2композицією, що містить тирозинкіназу Lck іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-ол, 50 Спосіб придушення клітинної проліферації, (2-екзо,6-екзо)-6-(6,7-диметоксихшолш-2диференціації або виділення медіатора у пацієнта, іламшо)біцикло[2,2,1 ]гептан-2-ол, що страждає від захворювання, що характеризу4-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іламшо)-2ється такою проліферацією і/або диференціацією, метилциклогексанол, і/або виділенням медіатора, що включає введення пацієнту фармацевтично ефективної КІЛЬКОСТІ (2-транс,4-транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2сполуки за п 1 іламшо)-2-метилциклогексанол, (+)-(2-транс,4-транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-251 Спосіб лікування патологи, зв'язаної з пперіламшо)-2-метилциклогексанол, проліферативним порушенням, причому зазначе(-)-(2-транс,4-транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ний спосіб включає введення пацієнту, що потреіламшо)-2-метилциклогексанол, бує такого лікування, фармацевтично ефективної (2-транс,4-цис)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2КІЛЬКОСТІ сполуки за п 1 іламшо)-2-метилциклогексанол, 52 Спосіб за п 51, в якому вказана патологія є (2-цис,4-цис)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2рестенозом іламшо)-2-метилциклогексанол, 53 Спосіб лікування рестенозу, що включає вве(2-цис,4-транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2дення пацієнту, що потребує такого лікування, іламшо)-2-метилциклогексанол, 4-(6,7фармацевтично ефективної КІЛЬКОСТІ сполуки за п 1 у попередньо визначене місце диметилхіноксалін-2-іламшо)циклогексанол або (1S,2R,4S,5R)-5-(6,7диметоксихіноксалш-254 Спосіб за п 53, в якому зазначеним місцем є іламшо)біцикло[2,2,1 ]гептан-2-ол, місце механічного втручання на СТІНЦІ артерії, виїх N-оксиди, їх гідрати, їх сольвати, проліки з них конаного при лікуванні атеросклеротичного ураабо їх фармацевтично прийнятні солі ження шляхом анпопластики 39 Сполука за п 1, що являє собою транс-4-(6,755 Спосіб за п 53, в якому сполуку за п 1 уводять диметоксихіноксалін-2-іламшо)циклогексанол або за допомогою кулі для анпопластики, покритої його N-оксид, його гідрат, його сольват, його прогідрофільною плівкою, насиченою сполукою за п ліки або його фармацевтично прийнятну сіль 1 (2-екзо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-ол, (2-ендо,3-екзо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихіноксалш2-іламіно)біцикло[2,2,1]гептан-2,3-дюл, цис-2-(6-метоксихшоксалш-2іламшо)циклопентанол, транс-2-(6-метоксихшоксалш-2іламшо)циклопентанол, транс-4-(6-метоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол, етиламід [3aR,4S,6R,6aS]-6-(6,7диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2,2диметилтетрапдроциклопента[1,3]дюксол-4карбонової кислоти, 2-(1,4-дюксаспіро[4,5]дец-8-ілокси)-6,7диметоксихшоксалін, 4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілоксиметил)циклогексанол, 3-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексанол, 4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексанол, 5-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)біцикло[2,2,1]гептан-2,3-дюл, (2-екзо,3-екзо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш2-іламіно)біцикло[2,2,1]гептан-2,3-дюл, цис-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексиловий ефір оцтової кислоти, цис-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексанол, 4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексиловий ефір диметилкарбамшової кислоти, 56 Спосіб за п 53, в якому сполуку за п 1 уводять за допомогою катетера, що має інфузійну камеру, що містить розчин сполуки за п 1 57 Спосіб за п 53, в якому сполуку за п 1 уводять за допомогою покриття стентового пристрою, причому покриття містить сполуку за п 1 58 Спосіб за п 51, в якому патологія, зв'язана з пперпроліферативним захворюванням, є раком, чутливим до лікування шляхом придушення тирозинкінази ТФР Ця заявка є продовженням патентної заявки США №09/198720, поданої 24 листопада 1998, що, у свою чергу, є частковим продовженням міжнародної патентної заявки № PCT/US98/11000, поданої 28 травня 1998, що, у свою чергу, є частковим продовженням US сер, №08/972614, поданої 18 листопада 1997, у даний час відкликаної, яка, у свою чергу, є частковим продовженням US сер №08/864455, поданої 18 травня 1997, у даний час відкликаної Передумови створення винаходу 1 Область винаходу Даний винахід відноситься до придушення клітинної проліферації і/або продукції клітинного матрикса, і/або руху клітин (хемотаксис), і/або активації і проліферації Т-клітин з використанням хінолінових/хшоксалінових сполук, що придатні як інгібітори тирозинкінази (ІТК) Клітинна сигналізація опосередковується системою взаємодій, що включає контакт клітина або контакт клітина-матрикс, або контакт позаклітинний рецептор-субстрат Екстраклітинний сигнал часто передається в ІНШІ частини клітини за допомогою акта опосередковуваного тирозинкіназою фосфорилювання, що діє на субстратні білки нижче сигнального комплексу границі клітинної мембрани Специфічний набір рецепторів-ферментів, таких як інсулінові рецептори, рецептори епідермального фактора росту (ЕФР-Р) або рецептор отриманого з тромбоцитів фактора росту (ТФР-Р) є прикладами тирозинкіназних ферментів, що беруть участь у КЛІТИННІЙ сигналізації Автофосфорилювання ферменту необхідно для ефективного опосередковуваного ферментом фосфорилювання субстратних білків, що містять тирозинові залишки Ці субстрати, як відомо, відповідальні за багато подій у КЛІТИНІ, включаючи клітинну проліферацію, продукцію клітинного матрикса, клітинної міграції й апоптоз, не говорячи про ІНШІ Зрозуміло, що причиною великого числа хворобливих станів є або неконтрольована репродукція клітин, або надмірна продукція матрикса, або погано регульована програмована загибель клітин (апоптоз) У цих хворобливих станах бере участь ряд типів клітин, і ці стани включають такі захворювання, як лейкемія, рак, глюбластома, псоріаз, запальні захворювання, хвороби кісток, фіброзні захворювання, атеросклероз і рестеноз, що відбуваються після анпопластики коронарних, стегнових і ниркових артерій або фібропроліферативного захворювання, такого як при артриті, фіброзі леге 59480 8 59 Спосіб за п 58, в якому зазначений рак є раком мозку, раком яєчників, раком товстого кишечнику, раком простати, раком легенів, саркомою Капоша або злоякісною меланомою 60 Спосіб лікування запалення в пацієнта, що страждає таким захворюванням, що включає введення зазначеному пацієнту фармацевтично ефективної КІЛЬКОСТІ сполуки за п І нів, нирок і печінки Крім того, стану розрегульованоі клітинної проліферації випливають після операцій коронарного шунтування Придушення активності тирозинкінази, як думають, має корисну дію по обмеженню нерегульованої репродукції клітин або надмірної продукції матрикса чи погано регульованої програмованої загибелі клітин (апоптоза) Мається на увазі також, що деякі інгібітори тирозинкінази можуть взаємодіяти з більш ніж одним типом тирозинкіназних ферментів Деякі тирозинкіназні ферменти є вирішальними для нормальних функцій організму Наприклад, було б небажано придушувати дію інсуліну в більшості випадків при нормальних умовах Тому сполуки, що інгібують тирозинкіназну активність ТФР-Р при концентраціях менших від концентрацій, ефективних для придушення кінази інсулінових рецепторів, могли б представляти ЦІННІ засоби для селективного лікування захворювань, що характеризуються клітинною проліферацією і/або продукцією клітинного матрикса, і/або рухом клітин (хемотаксисом), таких як рестеноз Даний винахід відноситься до модуляції і/або придушенню передачі сигналів клітин, проліферації клітин, продукції позаклітинного матрикса, хемотаксису, регуляції ненормального росту клітин і запальної реакції клітин Більш конкретно, даний винахід відноситься до застосування заміщених хіноксалінових сполук, що виявляють селективне придушення диференціації, проліферації або виділення медіатора шляхом ефективного придушення тирозинкіназної активності рецепторів отриманого з тромбоцитів фактора росту (ТФР-Р) і LCK тирозинкіназної активності Опубліковані розробки У ряді публікацій наукової літератури описані інгібітори тирозинкінази, що є селективними у відношенні ферментів тирозинкіназних рецепторів, таких як ФРЕ-Р (рецептори фактора росту епідермісу) або ТФР-Р, чи нерецепторними цитозольними тирозинкіназними ферментами, такими як v-abi, p561ck або c-src У недавніх оглядах Spada and Myers (Exp Opm Ther Patents, 1995, 5(8), 805) і Bridges (Exp Opm Ther Patents, 1995,5(12), 1245) узагальнена література по тирозинкіназних інгібіторах і селективних інгібіторах ФРЕ-Р, ВІДПОВІДНО Крім того, Law і Lydon узагальнили інформацію про протираковий потенціал інгібіторів тирозинкінази (Emerging Drugs The Prospect for Improved Medicines, 1996, 241-260) 59480 ВІДОМІ інгібітори активності тирозинкінази ТФРР включають інгібітори на основі хіноліну, повідомлене Maguire, et al, (J Med Chem , 1994, 37, 2129) і Dolle, el ai (J Med Chem , 1994, 37, 2627) Недавно повідомлено про клас інгібіторів на основі феніламшопіримідину Тгахіег, et al В ЕР 564409 і Zimmerman J and Тгахіег Р , et al (Biorg & Med Chem Lett, 1996, 6(11), 1221-1226) і Buchdunger E, et al (Proc Nat Acad Sci , 1995, 92, 2558) Незважаючи на прогрес у даній області, не існує засобів у цих класах сполук, що були схвалені для застосування при лікуванні проліферативних захворювань у людей Кореляція між багатофакторним захворюванням рестенозом і ТФР і ТФР-Р цілком підтверджена в науковій літературі Однак недавні розробки в області фіброзних захворювань легенів (Antomades H N , et al J Clin Invest, 1990, 86, 1055), нирок і печінки (Peterson T C , Hepatology, 1993, 17, 486) указують нате, що ТФР і ТФР-Р відіграють визначену роль Наприклад, гломерулонефрит є основною причиною ниркової недостатності, а ТФР, як встановлено, являє собою сильний мітоген для клітин мезанпю in vitro, що показано Shultz, et al (Am J PhysioL, 1988,255, F674) і Floege, et al (Clin Exp Immun , 1991, 86, 334) Thornton S С , et al (Clin Exp bnmun , 1991, 86, 79) повідомили, що ФНО (фактор некрозу пухлин) альфа і ТФР (отриманий від людей - пацієнтів з ревматоїдним артритом) є основними цитокшами, що беруть участь у проліферації синовіальних клітин Крім того, були встановлені специфічні види пухлинних клітин (див , Silver В J , BioFactors, 1992, 3, 217), такі як глюбластома і саркома Капоті, що відрізняються надмірною експресією або протеїну ТФР або рецептора, приводячи в такий спосіб до неконтрольованого росту ракових клітин шляхом аутокринного або паракринного механізму Тому прогнозується, що інгібітор тирозинкінази ТФР був би корисним при лікуванні множини зовні незв'язаних хворобливих станів людини, що можуть бути охарактеризовані, участю ТФР і/або ТФР-Р по їхній етіології Роль різних нерецепторних' тирозинкіназ, таких як р56 с к (тут далі «І_ск») при зв'язаних із запаленням станах, що припускають активацію Т клітин і проліферацію, була розглянута Hanke, et al (Inflamm Res , 1995, 44, 357) і Bolen and Brugge (Ann Rev Immunol, 1997, 15 371) Ці запальні стани включають алергію, аутоімунні захворювання, ревматоїдний артрит і відторгнення трансплантата В іншому недавньому огляді розглянуті різні класи інгібіторів тирозинкінази, включаючи сполуки, що володіють активністю придушення Lck (Groundwater, et al Progress in Medicinal Chemistry, 1996, 33, 233) Інгібітори активності тирозинкінази Lck включають деякі природні продукти, що звичайно є неселективними інгібіторами тирозинкінази, такими як стауроспорин, геністеїн, деякі флавони і ербстатин Недавно було повідомлено, що дамнакатол є низько нМ інгібітором Lck (Faltmek et al , Biochemistry, 1995, 34,12404) Приклади синтетичних інгібіторів Lck включають серії дипдроксмзохінолінових інгібіторів, у відношенні яких повідомлялося, як про такі, що мають активність від низькомікромолярної до субмікромолярної (Burke et al J Med 10 Chem 1993, 36,425), і хінолінове похідне, котре, як виявлено, набагато менш активно, володіючи ICso для Lck, рівним 610 мікромолям Дослідники відкрили також серії 4-заміщених хіназолінів, що придушують Lck при інтервалі активності від нізькомікромолярної до субмікромолярної (Myers et al , WO 95/15758 і Myers et al, Bioorg Med Chem Lett 1997, 7, 417) Дослідники в Pfizer (Hanke etal J Biol Chem 1996, 271, 695) відкрили два специфічних піразолопіримідинових інгібітори, відомих як РР1 і РР2, що володіють низькою наномолярною активністю проти Lck і Fyn (інша кіназа сімейства Src) He повідомлялося про жодне придушення Lck у відношенні сполук на основі хіноліну або хіноксаліну Тому, прогнозується, що інгібітор тирозинкіназної активності Lck на основі хіноліну або хіноксаліну міг би бути корисним при лікуванні ряду зовні незв'язаних хворобливих станів людини, що можуть бути охарактеризовані залученням тирозинкіназної Lck передачі сигналів в їхню етіологію Короткий виклад винаходу Даний винахід спрямований на сполуку формули І де X представляє LiOH або L2Z2 Li представляє (CR3aR3b)r або (CR3aR3b)rn-Z3(cR3aR3b)n, L2 представляє (CR3aR3b)p-Z4-(CR3aR3b)q або етеніл, Zi представляє СН або N, Z2 представляє необов'язково заміщений пдроксициклоалкіл, необов'язково заміщений пдроксициклоалкеніл, необов'язково заміщений пдроксигетероцикліл або необов'язково заміщений пдроксигетероцикленіл, Z3 представляє О, NR4, S, SO або SO2, Т&, представляє О, NR4, S, SO, SO2 або зв'язок, m рівно 0 або 1, п рівно 2 або 3, і n+m=2 або З, р і q рівні, незалежно, 0,1,2, 3 або 4, p+q=0,1,2,3 або 4, коли Т&, є зв'язком, ip+q =0,1,2 або 3, коли Т&, представляє інше, чим зв'язок г дорівнює 2, 3 або 4, Ria і Rib представляють, незалежно, необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений арил, необов'язково заміщений гетероарил, гідрокси, ацилокси, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси, необов'язково заміщений гетероциклілокси, необов'язково заміщений гетероциклілкарбонілокси, необов'язково заміщений арилокси, необов'язково заміщений гетероарилокси, ціано, R5R6N- або ацил- R5N-, або один з Ri a і R-іь являє собою водень або галоген, а ІНШІЙ представляє необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений арил, необов'язково заміщений гетероарил, гідрокси, ацилокси, необов'язково заміщений алкокси, 12 11 59480 необов'язково заміщений циклоалкілокси, необоний зв'язок, і яка може бути'з прямим або розгалув'язково заміщений гетероциклілокси, необов'язженим ланцюгом, що має від 2 до 10 атомів ково заміщений гетероциклілкарбонілокси, необовуглецю в ланцюзі Кращі алкенільні групи мають в'язково заміщений арилокси, необов'язково від 2 до приблизно б атомів вуглецю, і більш перезаміщений гетероарилокси, піано, R5R6N- або важно, від приблизно 2 до приблизно 4 атомів вугацил-RsN-, лецю в ланцюзі Розгалужена означає, що одна нижча алкільна група або більше, така як метил, Ric представляє водень, необов'язково заміетил або пропіл, зв'язаний з ЛІНІЙНИМ алкенільним щений алкіл, необов'язково заміщений арил, неланцюгом «Нижчий алкеніл» означає від приблизобов'язково заміщений гетероарил, гідрокси, ацино 2 до приблизно 4 атомів вуглецю в ланцюзі, що локси, необов'язково заміщений алкокси, може бути прямим або розгалуженим Алкенільна необов'язково заміщений циклоалкілокси, необогрупа може бути заміщеною карбалкокси Приклав'язково заміщений гетероциклілокси, необов'язди алкенільних груп включають етеніл, пропеніл, ково заміщений гетероциклілкарбонілокси, необон-бутеніл, ізобутеніл, З-метилбут-2-еніл, нв'язково заміщений арилокси, необов'язково пентеніл, гептеніл, октеніл, циклогексилбутеніл і заміщений гетероарилокси, галоген, ціано, R5R6Nдеценіл або ацил-RsN-, "Етиленіл" означає -CHNCH- групу R3a, R3b, R3a I R3b, НЄЗЗЛЄЖНО, ПреДСТЭВЛЯЮТЬ водень або алкіл, "Циклоалкіл" означає неароматичну моно- або поліциклічні кільцеві системи з приблизно від 3 до R4 представляє водень, алкіл або ацил, і приблизно 10 атомів вуглецю Циклоалкільна груRs і R6, незалежно, представляють водень або па може бути заміщеною одним або більше, переалкіл, або Rs і R6, узяті разом з атомом азоту, з важно від одного до трьох, більш переважно, від яким зв'язані Rs і R6, утворять азагетероцикліл, одного до двох, з наступних "заступників циклоалабо на кілу", алкільного, гідрокси, ацилокси, алкокси, гайого N-оксид, його гідрат, його сольват, його логенового, RsReN-, aцилR5N-, карбокси або проліки або його фармацевтичне прийнятну сіль RsReNCO-sacTynHHKiB, більш кращими заступникаВ іншому аспекті даний винахід звернений до ми є алкіл, гідрокси, ацилокси, алкокси і R5R6NCOфармацевтичної композиції, що містить фармацеКрім того, коли циклоалкільна група заміщена, втично ефективну КІЛЬКІСТЬ сполуки формули І і щонайменше, двома гідроксильними заступникафармацевтичне прийнятний носій Даний винахід ми, то, щонайменше, два з гідроксильних заступтакож спрямований на проміжні сполуки, придатні ників можуть бути кетальованими або ацетальодля одержання сполук формули І, способи одерваними альдегідом або кетоном з від одного до жання проміжних сполук і сполук формули І і зашести атомів вуглецю з утворенням ВІДПОВІДНИХ стосування сполуки формули І для лікування пацікеталю або ацеталю єнтів, що страждають від розлад їв/станів, що включають клітинну диференціацію, проліфера«Гідроксициклоалкіл» означає НО-циклоалкіл, цію, продукцію позаклітинного матрикса або видіпричому циклоалкіл може бути заміщеним, як залення медіатора значено Коли пдроксициклоалкільна група отримана з циклоалкільної групи, що також заміщена Докладний опис винаходу гідрокси, два з гідрокси заступників можуть бути Як використано вище й в описі даного винахокетальовані або аттетальовані альдегідом або ду наступні терміни, якщо не зазначено інакше, кетоном з від одного до шести атомів вуглецю з потрібно розуміти як такі, що як мають наступні утворюванням ВІДПОВІДНИХ кеталю або ацеталю значення Кеталізація з gem-дюлу приводить до утворення Визначення спіроконденсованої системи кілець Кращим спі«Пацієнт» включає як людину, так і інших ссароциклоалкільним кільцем є 1,4вців дюксаспіро[4,5]дец-8-іл Кращі незаміщені або за«Ефективна КІЛЬКІСТЬ» означає КІЛЬКІСТЬ сполуміщені моноциклічні циклоалкільні кільця включаки даного винаходу, ефективну для придушення ють циклопентил, пдроксициклопентил, фторцикактивності тирозинкінази ТФР-Р і/або активності лопентил, циклогексил, пдроксициклогексил, тирозинкінази Lck, і таким чином, що дає бажаний пдроксиметилциклогексил і циклогептил, більш терапевтичний ефект переважні пдроксициклогексил і пдроксициклопен«Алкіл» означає аліфатичну вуглеводневу тил Приклади поліциклічних циклоалкільних кігрупу, що може бути з прямим або розгалуженим лець включають 1-декалін, адамант-(1- або 2-)іл, ланцюгом, що має приблизно від 1 до приблизно [2,2,1]біциклогептаніл (норборніл), пдро10 атомів вуглецю кси[2,2,1]біциклогептаніл (пдроксинорборніл), Кращий алкіл є «нижчим алкілом», що має [2,2,2] біциклооктаніл і пдроприблизно від 1 до приблизно 6 атомів вуглецю Розгалужений означає, що одна нижча алкільна кси[2,2,2]біциклооктаніл, більш кращі пдрогрупа або більше, така як метил, етил або пропіл, кси[2,2,1]біциклогептанш (пдроксинорборніл) і пдзв'язаний з ЛІНІЙНИМ алкільним ланцюгом Алкільна рокси[2,2,2]біциклооктаніл група також необов'язково заміщена алкокси, гало«Циклоалкеніл» означає неароматичну моногеном, карбокси, гідрокси або RsReN- Приклади циклічну або поліциклічну систему кілець, що місалкілу включають метил, фторметил, дифторметить подвійний вуглець-вуглецевий зв'язок, і, що тил, трифторметил, етил, н-пропіл, ізопропіл, бумає від приблизно 3 до приблизно 10 атомів вугтил, вторинний бутил, трет-бутил аміл і гексил лецю Циклоалкенільна група може бути заміщеною одним або більше, переважно від одного до «Алкеніл» означає аліфатичну вуглеводтрьох, більш переважно, від одного до двох, з цикневу групу, що містить вуглець-вуглецевий подвій 14 13 59480 лоалкільних заступників, що описані вище «Гідрощонайменше, один подвійний зв'язок вуглець або ксициклоалкеніл» означає НО-циклоалкеніл, привуглець-азот Гетероцикленільна група може бути чому циклоалкіл може бути заміщеним, як зазназаміщеною одним або більше, переважно від одчено Кращі незаміщені або заміщені моноциклічні ного до трьох, більш переважно від одного до циклоалкенільні кільця включають циклопентеніл, двох, із заступників циклоалкілу, що описані вище циклогексеніл, пдроксициклопентеніл, пдрокси«Гідроксигетероцикленіл» означає НОциклогексеніл і циклогептеніл, більш переважними гетероцикленіл, причому гетероцикленіл може є пдроксициклопентеніл і пдроксициклогексеніл бути заміщеним, як зазначено вище «АзагетероПереважнії пол іцикл ІЧНІ циклоалкенільні кільця цикленіл» означає гетероцикленіл, що визначений включають [2,2,1]біциклогептеніл (норборненіл) і вище, причому, щонайменше, один з атомів у КІЛЬ[2,2,2] біциклооктеніл ЦІ є азотом Представники моноциклічних гетероцикленільних груп включають 1,2,3,4«Арил» означає ароматичний карбоциклічний тетрапдропдропіридин, 1,2-дипдропіридил, 1,4радикал, що містить приблизно від 6 до приблизно дипдропіридил, 1,2,3,6-тетрапдропіридин, 1,4,5,610 атомів вуглецю Приклади арилу включають тетрапдропіримідин, 3,4-дипдро-2Н-піран, 2феніл або нафтил, або феніл або нафтил, заміпіролініл, 3-піролініл, 2-імідазолшш, 2-піразолшіл,щені одним або більше із заступників арильної тетрапдротюфеніл, тетрапдротюпіраніл тощо групи, що можуть бути однаковими або різними, де «заступники арильної групи» включають водень, «Ацил» означає Н-СО- або алкіл-СО-групу, в гідрокси, галоген, алкіл, алкокси, карбокси, алкокякій алкільна група, така як описано вище Кращі сикарбоніл або Y1Y2NCO-, де Y1 і Y2, незалежно, ацили містять нижчий алкіл Приклади ацильних представляють водень або алкіл Кращі заступнигруп включають форміл, ацетил, пропаноїл, 2ки арильної групи включають водень, галоген і метилпропаноїл, бутаноїл і пальмітоїл алкокси «Ароїл» означає арил-СО-групу, в якій алкіль«Гетероарил» означає, приблизно від 5- до на група, така як описано вище Приклади груп приблизно 10-членну, ароматичну моноциклічну включають бензоїл і 1-1 2-нафтоіл або поліциклічну вуглеводневу систему кілець, в «Алкокси» означає алкіл-О-групу, в якій алкіякій один атом вуглецю або більше у кільцевій льна група, така як описано вище Кращий алкокси системі є/є ІНШИМ(І) елементами, ВІДМІННИМИ ВІД є "нижчим алкокси", що має від приблизно 1 до вуглецю, наприклад, азотом, киснем або сіркою приблизно 6 атомів вуглецю Алкокси може бути «Гетероарил» може бути також заміщеним одним необов'язково заміщеним однією або більше з або більше з вищезгаданих "заступників арильної аміно, алкокси, карбокси, алкоксикарбонільною, групи" Приклади гетероарильних груп включають карбоксіарильною, карбамоільною або гетероцикзаміщений пиразиніл, фураніл, ТІЄНІЛ, піридил, лільною груп Приклади алкоксигруп включають піримідиніл, ізоксазоліл, ізотіазоліл, оксазоліл, метокси, етокси, н-пропокси, ізопропокси, нтіазоліл, піразоліл, імідазо[2,1-Ь]тіазоліл, бензофубутокси, гептокси, 2-(морфолш-4-іл)етокси, 2разаніл, ІНДОЛІЛ, азаіндоліл, бензімідазоліл, бензо(етокси)етокси, 2-(4-метилпіперазин-1-іл)етокси, ТІЄНІЛ, ХІНОЛІНІЛ, амідазоліл і ІЗОХІНОЛІНІЛ карбамоїл, N-метилкарбамоіл, N,N«Гетероцикліл» означає, приблизно від 4- до диметилкарбамоїл, карбоксиметокси і метоксикарприблизно 10-членну, моноциклічну або поліциклібонілметокси чну кільцеву систему, в якій один або більше ато«Циклоалкілокси» означає циклоалкіл-0-групу, мів кільця є іншим елементом, ВІДМІННИМ від вугв якій циклоалкільна група, така як описано вище лецю, обраним з азоту, кисню або сірки Приклади циклоалкілоксигруп включають циклоГетероциклічна група може бути заміщеною одним пентилокси, циклогексилокси, пдроциклопентилокабо більше, переважно від одного до трьох, більш си і пдроксициклогексилокси переважно від одного до двох, із заступників цик«Гетеродиклілокси» означає гетероцикліл-Олоалкілу, що описані вище «Гідроксигетероцикгрупу, в якій гетероциклільна група, така як описаліл» означає НО-гетероцикліл, де гетероцикліл но вище Приклади гетероциклілоксигруп включаможе бути заміщений, як зазначено вище «Азагеють хінуклідилокси, пентаметиленсульфідокси, тероцикліл» означає гетероцикліл, як зазначено тетрапдропіранілокси, тетрапдротюфенілокеи, вище, в якого, щонайменше, один з атомів у КІЛЬЦІ пірол ід инілокси, тетрапдрофуранілокси або 7є азотом Приклади гетероциклільних фрагментів оксабііщкло[2,2,1]гептанілокси, пдрокситетрапдровключають хінуклідин, пентаметиленсульфід, тетпіранілокси і пдрокси-7рапдропіраніл, тетрапдротюфеніл, пірол ідинш, оксабіцикло[2,2,1]гептанілокси тетрапдрофураніл або 7-оксабіцикло «Арилокси» означає арил-О-групу, в якій арильна група, така як описано вище [2,2,1] гептан іл «Гетероциклілкарбонілокси» означає гетеро«Гетероарилокси» означає гетероарил-Оциклільну групу, що визначена вище, і яка зв'язана групу, в якій гетероарильна група, така як описано з основною частиною молекули через карбонілоквище си (-С(О)О-)групу Гетероциклільна частина не«Ацилокси» означає ацил-О-групу, в якій ациобов'язково заміщена одним або більше, перевальна група, така як описано вище жно від одного до трьох, більш переважно одним, «Карбокси» означає НО(О)С-(карбоновоі із заступників циклоалкілу, що визначені вище кислоти) групу Представником Гетероциклілкарбонілокси є [1,4']«RsReN-» означає заміщену або незаміщену біпіперидин-Г-іл карбонілокси аміногрупу, де Rs і R6, такі як описано вище Приклади груп включають аміно (H2N-), метиламшо, «Гетероцикленіл» означає гетероциклільну кіетилметиламшо, диметиламіне і діетиламшо льцеву систему, що визначена вище, що містить, 15 -» означає заміщену або незаміщену карбамоільну групу, в якій RS і Re, такі як описано вище Прикладами груп є карбамоїл (H2NCC1), N-метилкарбамоіл (MeNHCO-) і N Nдиметиламшокарбамоїл (Me2NCO-) «AцилR5N-» означає ациламшо групу, в якій Rs і ацил визначені вище «Галоген» означає фтор, хлор, бром або йод Кращими є фтор, хлор або бром, і більш кращими є фтор або хлор «Проліки» означає форму сполуки формули І, що підходить для введення пацієнту без надмірної токсичності, роздратування, алерпйної реакції тощо, і ефективну при призначеному їй використанні, включаючи кеталь, складний ефір або цвіттерюнні форми Проліки трансформуються in vivo з одержанням вихідної сполуки вищевказаної формули, наприклад, шляхом гідролізу в крові Повне обговорення представлене в Т Higuchi and V Stella, Prodrugs as Novel Delivery Systems Vol 14 of the A-C-S- Symposium Series і у Edward В Roche, ed , Bioreversible Carriers In Drug Design, American Pharmciutical Assosiation and Pergamon Press, 1987, обоє з який включені сюди у виді посилання «Сольват» означає фізичний зв'язок сполуки даного винаходу з однією молекулою розчинника або більше Цей фізичний зв'язок має на увазі різні ступені іонного або ковалентного зв'язування, включаючи водневі зв'язки У деяких випадках сольват можна буде виділити, наприклад, коли одна молекула розчинника або більше включаються в кристалічні ґрати твердої кристалічної речовини «Сольват» охоплює як фазу розчину, так і виділювані сольвати Представники сольватів включають етаноляти, метаноляти тощо «Гідрат» являє собою сольват, в якому молекулою(ами) розчинника(ів) є ЬЬО Переважні здійснення Переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де L i ПреДСТаВЛЯЄ (CR 3 aR3b)rn-Z 3 -(CR3aR3b)n, І_2 ПреДСТаВЛЯЄ (CR 3 a R 3 b)p-Z 4 -( C R 3 a R 3 b ) q , Z2 представляє необов'язково заміщений пдроксицикло-алкіл або необов'язково заміщений пдроксигетероцикліл, Z4 представляє О і NR4, m дорівнює 0, п дорівнює 2 або З, p+q=O або 1, Ria і Rib, незалежно, представляють необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси, необов'язково заміщений гетероциклілокси або RsReN, або один з R-іа і Rib являє собою водень або галоген, R-ic представляє водень, необов'язково заміщений алкіл або необов'язково заміщений алкокси, R3a, R3b, R3a I R3b НЄЗЗЛЄЖНО, ПреДСТЭВЛЯЮТЬ водень або нижчий алкіл, R4 представляє водень, і Rs і R6, узяті разом з атомом азоту, з яким зв'язані Rs і R6, утворять азагетероцикліл, або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятна сіль Іншою переважною сполукою в аспекті даного 59480 16 винаходу є сполука формули І, де X представляє L2Z2, І_2 представляє (CR3aR3b)P-Z4-(CR3aR3b)q, Z2 представляє необов'язково заміщений пдрокси-циклоалкіл, Т&, представляє О і NR4, р дорівнює 0 q дорівнює 0 або 1, Ria і Rib, незалежно, представляють необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси або необов'язково заміщений гетероциклілокси, або один з R-іа і Rib являє собою водень або галоген, а ІНШІЙ з R-іа і Rib представляє необов'язково заміщений алкіл, необов'язково заміщений алкокси, необов'язково заміщений циклоалкілокси або необов'язково заміщений гетероциклілокси, Ric представляє водень, R3a і R3b, незалежно, представляють водень, і R4 представляє водень, або його N-оксид, його гідрат, його сольват, його проліки або його фармацевтично прийнятну сіль Ще однією переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де Ri a і R-іь, незалежно, представляють необов'язково заміщений гідрокси нижчий алкіл, гідрокси, нижчий алкокси, циклоалкілокси, гетероциклілокси або один з Ria і Rib представляє водень або галоген, а ІНШІЙ З Ria і Rib представляє необов'язково заміщений гідрокси нижчий алкіл, гідрокси, нижчий алкокси, циклоалкілокси, гетероциклілокси Ще однією переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де Ri a і R-іь, незалежно, представляють гетероциклілкарбонілокси або необов'язково заміщений нижчий алкокси, більш переважно, коли нижчий алкокси являє собою метокси або етокси Іншою переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де Ri a і R-іь представляють нижчий алкіл, більш переважно, якщо нижчий алкіл являє собою метил або етил Ще однією переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де один з Ria і Rib представляє нижчий алкокси, а ІНШІЙ З Ri a і Rib представляє галоген, більш переважно, якщо нижчий алкокси являє собою метокси або етокси, а галоген є хлором або бромом Ще однією переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де один з Ria і Rib представляє нижчий алкіл, а ІНШІЙ З Ri a і Rib представляє нижчий алкокси, більш переважно, коли нижчий алкокси являє собою метокси або етокси а нижчий алкіл є метилом або етилом Ще однією переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де один з Ria і Rib представляє нижчий алкокси, а ІНШІЙ З Ri a і Rib представляє циклоалкілокси, більш переважно, коли нижчий алкокси являє собою метокси або етокси, а циклоалкілокси являє сабою циклопентилокси або циклогексилокси Ще однією переважною сполукою в аспекті данного винаходу є сполука формули І, де один з Ria і Rib представляє водень, а ІНШІЙ З Ri a і R-іь представляє нижчий алкокси, циклоалкілокси або гетероциклілокси, більш переважно, коли нижчий алкокси являє собою метокси або етокси, а цикло 59480 18 17 алкілокси являє собою циклопентилокси або цикданого винаходу є сполука формули І, де Т&, предлогексилокси, і гетероциклілокси є фуранілокси ставляє S, і р і q рівні 0 Іншою переважною сполукою в аспекті даного Ще однією переважною сполукою в аспекті винаходу є сполука формули І, де Ri a і R-іь предданого винаходу є сполука формули І, де Т&, представляють нижчий алкокси, причому нижчий алкоставляє S, і p+q=1 кси є необов'язково заміщеним алкокси, гетероциЩе однією переважною сполукою в аспекті клілом, карбокси, алкоксикарбонілом або даного винаходу є сполука формули І, де Tj предкарбамоілом ставляє заміщений (гідрокси або алкілом) пдроксициклоалкіл, більш переважним є (нижчий алЩе однією переважною сполукою в аспекті кіл) гід рокси цикл оал кіл даного винаходу є сполука формули І, де один з Ria і Rib представляє незаміщений нижчий алкокПереважні сполуки згідно з даним винаходом си, а інший з R-іа і Rib представляє необов'язково вибираються з наступних заміщений гетероциклілкарбонілокси або є нижчим транс-4-( 7-хлор-6-метоксихшоксалін-2алкокси, заміщеним алкокси, гетероциклилом, каіламшо)циклогексанолу, рбокси, алкоксикарбонілом або карбамоілом транс-4-(6-хлор-7-метоксихшоксалш-2Ще однією переважною сполукою в аспекті іламшо)циклогексанолу, даного винаходу є сполука формули І, де один з транс-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2Ria і Rib представляє метокси, а інший з Ri a і R-іь іламшо)циклогексанолу, представляє [1,4']біпіперадин-Г-ілкарбонілокси, 2цис-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2(етокси)етокси, 2-(4-морфолшіл)етокси, 2-(4іламшо)циклогексанолу, метилпіперазин-1-іл)етокси, карбоксиметокси, ме(2-ендо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-2токсикарбонілметокси, амінокарбонілметокси, Nіламшо)біцикло[2,2Л]гептан-2-олу, метиламшокарбоніл метокси або N,N(2-екзо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-2диметиламшокарбоніл-метокси іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-олу, Ще однією переважною сполукою в аспекті (2-ендо, 3-екзо, 5-екзо)-5-(6,7- диметоксихшокданого винаходу є сполука формули І, де Ri c салін-2-іламіно) біцикло [2,2,1] гептан-2,3-дюлу, представляє водень, нижчий алкіл або нижчий цис-2-(6-метоксихшоксалш-2алкокси, більш переважно, коли нижчий алкокси іламшо)циклопентанолу, являє собою метокси або етокси транс-2-(6-метоксихшоксалш-2іламшо)циклопентанола, Ще однією переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де Zi предтранс-4-(6-метоксихшоксалш-2ставляє СН іламшо)циклогексанолу, Іншою переважною сполукою в аспекті даного e™-iaMifla[3a,4S,6R,6aS]-6-(6,7винаходу є сполука формули І, де Zi представляє диметоксихіноксалш-2-іламшо)-2,2N диметилтетрапдроциклопента[1,3]дюксол-4карбонової кислоти, Ще однією переважною сполукою в аспекті даного винаходу є сполука формули І, де Tj пред2-(1,4-дюксаспіро[4,5]дец-8-ілокси)-6,7ставляє необов'язково заміщений гід рокси цикл оадиметоксихшоксаліну, лкіл 4- (6, 7-диметоксихшоксалш-2-ілоксиметил) Ще однією переважною сполукою в аспекті циклогексанолу, даного винаходу є сполука формули І, де р і q рівні 3-(6,7-диметоксихшоксалш-20 ілокси)циклогексанолу, Ще однією переважною сполукою в аспекті 4-(6,7-диметоксихшоксалш-2даного винаходу є сполука формули І, де p+q=1 ілокси)циклогексанолу, Іншою переважною сполукою в аспекті даного 5-(6,7-диметоксихшоксалш-2винаходу є сполука формули І, де Т&, представляє ілокси)біцикло[2,2,1]гептан-2,3-дюлу О (2-екзо,3-екзо,5-екзо)-5-(6,7Ще однією переважною сполукою в аспекті диметоксихшоксалін-2даного винаходу є сполука формули І, де Т&, преділаміно)біцикло[2,2,1]гептан-2,3-дюлу, ставляє О, і р і q рівні 0 цис-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексилового ефіру оцтової кислоти, Ще однією переважною сполукою в аспекті цис-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2даного винаходу є сполука формули І, де Т&, преділокси)циклогексанолу, ставляє О,іp+q=1 Іншою переважною сполукою в аспекті даного 4-(6,7-диметоксихшоксалш-2винаходу є сполука формули І, де Т&, представляє ілокси)циклогексилового ефіру диметилкарбамшоNR4 ВОІ КИСЛОТИ, Ще однією переважною сполукою в аспекті транс-4-(6,7-диметокси-4-оксихшоксалш-2даного винаходу є сполука формули 1, іламшо)циклогексанолу, де Т&, представляє NR4 і р і q рівні 0 транс-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2Ще однією переважною сполукою в аспекті іламшо)циклогексилового ефіру оцтової кислоти, даного винаходу є сполука формули І, де Т&, пред(2-екзо, 5-екзо)-5-(6,7-д иметоксихіноксалш-2ставляє NR4, і m+n=1 іламшо)біцикло [2,2,1]гептан-2-олу, Іншою переважною сполукою в аспекті даного (2-ендо,5-екзо)-5-(6,7-д иметоксихінолш-2винаходу є сполука формули І, де Т&, представляє іламшо)біцикло [2,2,1]гептан-2-олу, S (2-екзо,6-екзо)-6-(6,7-д иметоксихінолш-2іламшо)біцикло [2,2,1]гептан-2-олу, Ще однією переважною сполукою в аспекті 19 59480 20 4-(6,7-диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанолу, (2-транс,4-транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш2-іламшо)-2-метилциклогексанолу, (+)-(2-транс,4-транс)-4-(6,7диметоксихшоксалш-2-іламшо)-2метилциклогексанолу, (-)-(2-транс,4-транс)-4-(6,7Схема II диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанолу, (2-транс,4-транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш2-іламшо)-2-метилциклогексанолу, (2-цис,4-цис)-4(6,7-диметоксихшоксалін-2їламіно) -2-метил-циклогексанолу, (2-цис,4-транс) -4-(6,7-диметоксихшоксалін-2їламіно) -2-метилциклогексанолу, 4-(6,7-диметилхшоксалш-2іламшо)циклогексанолу і (1S,2R,4S,5R)-5-(6,7-flHMeTOKCHxmoKcaniH-2іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-олу Більш переважними сполуками є наступні транс^^б^-диметоксихшоксалін^іламшо)циклогексанол, цис-4-(6,7-диметоксихіноксалш-2Схема IV іламшо)циклогексанол, 4-(6,7-диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2чиз аде метилциклогексанол, ЖОі-Ю.НСІ, нагр ааиня (-)-(2-транс,4-транс)-4-(6,73) Р Р.ДЕдД Н диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанол, (2екзо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-2(AS іламшо)біцикло-[2,2,1]гептан-2-ол, Схема V транс-4-(7-хлор-б-метоксихшоксалін-2іламшо)циклогексанол, 4-(6,7-диметоксихшолш-3іламшо)циклогексанол і (1S,2R,4S,5R)-5-(6,7-flHMeTOKCHXiHOKcaniH-21 NS ) BB іламшо)біцикло [2,2,1]гептан-2-ол 2 ) Повинно бути зрозуміло, що даний винахід охоплює всі придатні комбінації конкретних і пере> X sI,O« або L,Z, важних угруповань, названих тут Сполуки даного винаходу можуть бути отриСхе/из V / мані шляхом використання методик, відомих з ліУ схемах VI, VII і VIII R представляє поперетератури, виходячи з відомих сполук або легко дню групу для R-ia, Rib або Ri c , яким дане визнаодержуванихпроміжних сполук Приклади загальчення вище, так що реакція RBr, ROH або RCOC1 них методик слідують нижче з ароматичною гідроксильною групою в умовах, Крім того, сполуки формули І одержують ВІДописаних на схемах VI, VII і VIII, приводить до ПОВІДНО до наступних схем 1-Х, нижче, зі змінами, утворення R-ia, Rib або Ri c що описані вище, за винятком тих змін, що, як поПредставники RBr включають бромоцтову кивинний зрозуміти фахівець у даній області, були б слоту і метил-1 етил б ром ацетат невідповідними описаному методу Представники ROH включають 2-етоксіетанол, 2-(4-морфолшіл)етанол і 3-(4H,N метилпіперазиніл)пропанол Представником RCOC1 є [1,4']-біпіперидин-1'ілкарбонілхлорид, H. O Схема щ. 1 HjiVC ) 8>ЭТ 2). -.„™ 3 PC ) OI j ї M e O M . -"I e O J 59480 22 w-^OH шо^^И C e a VII xw N. H Vv N O j 2) ежіп» 4} ДА ,СЇ 1)Н г РФС ™ i 1 Загальні методики 1 Сполучення 2-хлор-заміщеного хіноксаліну й амінів і анілінів Суміш 2-хлор-6,7диметоксихшоксаліну (1екв ) і аміну (приблизно від 1 до приблизно 5екв) нагрівають при приблизно від 160 до приблизно 180°С протягом від приблизно трьох годин до протягом ночі Темнокоричневий залишок розчиняють у суміші метанол/дихлорметан (0%-10%) і піддають хроматографії на силікагелі, який елююють сумішшю гексан/етилацетат або метанол/метиленхлорид (0%100%) з одержанням цільового продукту Цільовий продукт може бути далі очищений перекристалізацією з метанолу, дихлорметану або суміші метанол/вода МйС MeO N. „X™ Схема \ ІП 1 ( О! і - і ) де 2 Сполучення 2-хлор-заміщеного хіноксаліну і спиртів або фенолів Суспензію спирту або меркаптану (1екв) і гідриду натрію (приблизно від 1 до приблизно Зекв) у безводному ДМФ/ТГФ (0%-50%) кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 1 години перед додаванням 2-хлор-6,7-диметоксихшоксалшу (1екв) Отриману суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом від приблизно однієї до приблизно чотирьох годин Суспензію нейтралізують до приблизно рН 5-8 і розподіляють між метиленхлоридом і насиченим розчином солі Залишок після концентрування з метиленхлориду піддають хроматографії на силікагелі, який елююють сумішшю гексан/етилацетат або метанол/метиленхлорид (0%-100%) з одержанням цільового продукту 3 Реакція відновлювального амінування з амінохшолінами і альдегідами або кетонами ВІДПОВІДНО заміщений 3-амінохінолш (1екв) перемішують з одним еквівалентом придатного альдегіду або кетону в метанолі (або інший придатний суміші розчинників) доти, поки ТШХ не покаже, що утворення іміну довершене Додають надлишок NaCNBbU або NaBP4 або іншої придатної речовини, що відновлює, і суміш перемішують доти, поки ТШХ не покаже повне вичерпання проміжного іміну Суміш концентрують і залишок піддають хроматографії на силікагелі із сумішшю гексан/етилацетат (0-100%) або хлоро 23 форм/метанол (0-20%) з одержанням цільового продуїсгу 4 Реакція сполучення 3-амінозаміщених ХІНОЛІНІВ І бром-фенільних сполук ВІДПОВІДНО заміщений 3-амінохінолш (1екв) перемішують з ~ 1,4екв сильної основи, такої як трет-бутоксид натрію, 1 екв відповідної бромфенільної сполуки і каталітичних кількостей 2,2'-біс (дифенілфосфшо)1,1'бшафтилу (S-BINAP^S-БІНАФ) і біс(дибензилліденацетон)паладій (Pd(dba)2)=(Pd(fl6a)2) змішують в інертному органічному розчиннику, такому як толуол, в інертній атмосфері, такий як аргон, і нагрівають до приблизно 80°С протягом ночі Суміш прохолоджують, розбавляють розчинником, таким як ефір, фільтрують, концентрують і хроматографують із сумішшю 50% ЕЮАс/гексан з одержанням цільового продукту 5 Утворення простого ефіру з 3пдроксизаміщених ХІНОЛІНІВ В умовах Мітсунобу ТГФ розчин ВІДПОВІДНО заміщеного пдроксихшоксаліну (при приблизно від 0 до приблизно 25°С) обробляють 1 екв кожного з необхідних спирту, трифенілфосфшу і, наприкінці, діетилазодикарбоксилату (ДЕАД) або придатного еквівалента За розвитком реакції стежать за допомогою ТШХ і по завершенні реакції (приблизно від 1 до приблизно 24 годин) суміш концентрують, і залишок хроматографують на силікагелі з одержанням цільового продукту 6 Деалкілування заміщеного нижчим алкокси хіноліну або хіноксаліну і наступне алкілування Відновлений заміщений нижчим алкокси ХІНОЛІН або хіноксалін (1екв) ДМФ обробляють надлишком етантюляту натрію (звичайно приблизно 2 або більше екв), і реакційну суміш перемішують при нагріванні протягом від приблизно 1 до приблизно 24 година Суміш розподіляють між водою і етилацетатом Обробка екстрагуванням з 20 наступною хроматографією, якщо необхідно, дає ВІДПОВІДНИЙ цільовий пдроксизаміщений ХІНО ЛІНОВИЙ або хіноксаліновий продукт Гідроксизаміщений ХІНОЛІНОВИЙ або хіноксаліновий продукт може бути алкілований із застосуванням умов для реакції Мітсунобу, що деталізовані вище Альтернативно, просте алкілування з використанням методів, добре відомих фахівцям, з реактивним алкіл- або бензилгалогенідом і використанням Na або іншої придатної основи в придатному розчиннику дає цільовий алкілований продукт 7 Окислювання азоту в ХІНОЛІНІ або хіноксаліні до ВІДПОВІДНОГО N-оксиду Іміновий (=N-) фрагмент у ХІНОЛІНОВІЙ або хіноксаліновій сполуці формули (І) може бути перетворений у відповідну сполуку, причому Іміновий фрагмент окисляється до N-оксиду, переважно шляхом реакції з перкислотою, наприклад, пероцтовою кислотою в оцтовій кислоті або мхлорпероксибензойною кислотою в інертному розчиннику, такому як дихлорметан, при температурі від приблизно кімнатної температури до температури кипіння, переважно при підвищеній температурі Сполуки даного винаходу застосовуються у 59480 24 виді вільної основи або вільної кислоти, або у виді їх фармацевтично прийнятних солей Усі форми входять в обсяг цього винаходу Коли сполуку даного винаходу заміщено основним фрагментом, утворяться адитивні солі кислоти, і вони просто є більш зручної для використання формою і на практиці використання сольової форми власне кажучи рівносильне використанню форми вільної основи Кислоти, що можуть використовуватися для одержання адитивних солей кислоти включають, переважно, ті, котрі дають при поєднанні з вільною основою фармацевтично прийнятні солі, тобто солі, аніони яких нетоксичні для пацієнта у фармацевтичних дозах солей, так що сприятливі ГНІТЮЧІ ДМ на ТФР (PDGF), властиві ВІЛЬНІЙ ОСНОВІ, не послаблялися побічною дією, що відноситься до аніонів Хоча фармацевтично прийнятні солі зазначених основних сполук кращі, всі адитивні солі кислоти придатні як джерела форми вільної основи, навіть якщо конкретна сіль, сама по собі, бажана тільки як проміжний продукт, як наприклад, коли сіль утвориться тільки з метою очищення й ідентифікації, або коли вона використовується як проміжна сполука при одержанні фармацевтично прийнятної солі методами іонного обміну Фармацевтично прийнятними соттями в обсязі даного винаходу є ті, котрі одержують з наступними кислотами мінеральними кислотами, такими як соляна кислота, сірчана кислота, фосфорна кислота, сульфамова кислота, і органічними кислотами, такими як оцтова кислота, лимонна кислота, молочна кислота, винна кислота, малонова кислота, метансульфонова кислота, етансульфонова кислота, бензолсульфонова кислота, п-толуолсульфонова кислота, циклогексилсульфамова кислота, хінна кислота тощо ВІДПОВІДНІ адитивні солі кислоти включають наступні пдрогалогеніди, наприклад, пдрохлорид і пдробромід, сульфат, фосфат, нітрат, сульфамат, ацетат, цитрат, лактат, тартрат, малонат, оксалат, саліцилат, пропюнат, сукцинат, фумарат, малеат, метилен-бис-р-пдроксинафтоати, гентизати, мезилати, ізотюнати і ди-п-толуоілтартрати, метансульфонат, етан сул ьфонат, бензолсульфонат, птолуолсульфонат, циклогексилсульфамат і хіннат, ВІДПОВІДНО ВІДПОВІДНО ДО додаткової ознаки даного винаходу адитивні солі кислоти сполук даного винаходу одержують реакцією вільної основи з придатною кислотою шляхом застосування або адаптації відомих методів Наприклад, адитивні солі кислоти сполук даного винаходу одержують або розчиненням вільної основи у водяному, або водноспиртовому або розчині інших придатних розчинниках, що містять придатну кислоту, і виділенням солі випарюванням розчину, або реакцією вільної основи і кислоти в органічному розчиннику, у випадку якщо сіль виділяється безпосередньо, або вона може бути виділена концентруванням розчину Сполуки даного винаходу можна регенерувати з адитивних солей кислоти шляхом застосування й адаптації відомих методів Наприклад, споріднені сполуки даного винаходу можна регенерувати з їх адитивних солей кислоти шляхом взаємодії з лугом, наприклад, з водяним розчином бікарбонату 25 натрію або водяним розчином аміаку Коли сполуку даного винаходу заміщено кислотним заступником, можуть утворюватися адитивні солі основи, і вони є просто більш зручною для використання формою, і на практиці використання сольової форми власне кажучи рівноцінно використанню форми вільної кислоти Основи, що можуть використовуватися для одержання адитивних солей основи переважно включають ті, котрі утворять при поєднанні з вільною кислотою фармацевтичне прийнятні солі, тобто солі, катіони яких нетоксичні для організму тварини у фармацевтичних дозах солей, так що сприятливі шпбіторні дії на ТФР, властивій ВІЛЬНІЙ КИСЛОТІ, не послабля ються побічними діями, що зв'язуються з катіонами Фармацевтично прийнятними солями, що включають, наприклад, солі лужних і лужноземельних металів, у рамках даного винаходу є ті, котрі виходять з наступними основами гідридом натрію, гідроксидом натрію, гідроксидом калію, гідроксидом кальцію, гідроксидом алюмінію, гідроксидом ЛІТІЮ, гідроксидом магнію, гідроксидом цинку, аміаком, триметиламонієм, етилендіаміном, нметилглікаміном, лізином, аргініном, орні тином, холіном, г\І,г\Г-дибензилетилендіамшом, хлорпрокаїном, діетаноламіном, про каїном, нбензилфенетиламіном,діетиламіном, піперазином, трис(пдроксиметил)аміном етаном, гідроксидом тетраметиламонію тощо Солі металів сполук даного винаходу можуть бути отримані шляхом приведення в контакт гідриду, гідроксиду, або карбонату подібної реакційної сполуки обраного металу у водяному або органічному розчиннику зі сполукою у формі вільної кислоти Використовуваний водяний розчинник може бути водою, або він може бути сумішшю води з органічним розчинником, переважно спиртом, таким як або метанол етанол, кетон, такий як ацетон, аліфатичний простий ефір, такий як тетрапдрофуран, або складний ефір, такий як етилацетат Такі реакції звичайно проводяться при кімнатній температурі, але вони, якщо бажано, можуть проводитися з нагріванням Солі З амінами сполук даного винаходу можуть бути отримані шляхом приведення в контакт аміну у водяному або органічному розчиннику зі сполукою у формі вільної кислоти Придатні водяні розчинники включають воду і суміш води зі спиртами, такими як метанол або етанол, простими ефірами, такими як тетрапдрофуран, нітрили, такі як ацетонітрил, або кетони, такі як ацетон Солі амінокислот можуть бути отримані подібним же чином Сполуки даного винаходу можуть бути регенеровані із солей із приєднанням основи шляхом застосування або адаптації відомих методів Наприклад, родоначальні сполуки даної сполуки можуть бути регенеровані з їхніх солей із приєднанням основи шляхом приведення у взаємодію з кислотою, наприклад, соляною кислотою Будучи також корисними самі по собі, як і активні сполуки, солі сполук даного винаходу є корисними для цілей очищення сполук, наприклад, шляхом використання різниці в розчинності солей і їхніх родоначальних сполук, побічних продуктів і/або вихідних матеріалів за допомогою методик, 26 добре відомих фахівцям у даній області Сполуки даного винаходу можуть містити асиметричні центри Ці асиметричні центри можуть незалежно бути R або S конфігурації Для фахівців буде також очевидно, що деякі сполуки формули І можуть виявляти геометричний ізомеризм Геометричні ізомери включають цис і транс форми сполук даного винаходу, тобто сполуки, що мають алкенільні складові або заступники в кільцевих системах Крім того, біциклічні системи кілець включають єн до- і екзоізомери Даний винахід включає окремі геометричні ізомери, стереоізомери, енантюмери і їхні суміші Такі ізомери можуть бути розділені з їхніх сумішей шляхом застосування або адаптації відомих методів, наприклад, хроматографічних методик і методик перекристалізації, або їх одержують окремо з ВІДПОВІДНИХ ізомерів їхніх проміжних сполук, наприклад, за допомогою застосування й адаптації описаних тут методів ВИХІДНІ матеріали і проміжні сполуки одержують шляхом застосування адаптації або відомих методів, наприклад, методів, що описані в довідкових прикладах, або їхніх ХІМІЧНИХ еквівалентів, або способами, представленими в даному описі ВІДПОВІДНО до даного винаходу Даний винахід далі пояснюється прикладами, але не обмежується наступними ілюстративними прикладами, в у яких описане одержання сполук по даному винаходу Крім того, наступні приклади є типовими зразками процесів, використовуваних для синтезу сполук даного винаходу Приклад 1 З-циклогексилокси-6,7диметоксихшолін До ТГФ розчину (ЗОмл) при 0°С додають 3пдрокси-6,7-диметоксихінолш (0,237м, 1,15 ммоль), циклогексанол (0,347м, 3,46 ммоль), РпзР (0,908м, 3,46 ммоль) Порціями додають діетилазодикарбоксилат доти, поки розчин не стане зберігати глибокий червоний колір (0,663м, 3,81 ммоль) Через 4 години розчин концентрують і залишок хроматографують (50% ЕЮАс у гексанах) Продукт перекристалізовують із суміші ізопропанол/гексани як НС1 сіль у виді білої твердої речовини (т пл 229-232°С, розкл ) Приклад 2 Гідрохлорид 2-ашлшо-6ізопропоксихшоліну До NaH (0,033м, 0,84 ммоль) в атмосфері аргону додають 1мл ДМФ Порціями додають 2аніліно-6-хіноксалшол (0,1м, 0,42 ммоль) у 1,5мл ДМФ Через ЗОхв по краплях додають 2бромпропан і розчин нагрівають до 50°С протягом 1,5 години Охолоджену реакційну суміш гасять водою і розподіляють між ЕЮАс і Ь^О, промивають НгО (3 х), насиченим розчином солі, сушать (MgSO4) і концентрують Отриманий залишок хроматографують (30% ЕЮАс/гексани) з одержанням 0,05м діалкілованого продукту і 0,1г сполуки, названої в заголовку Аналітичний зразок НСІ солі одержують додаванням ІПА (ізопропанол)/НСІ до Etz/ІПА розчину вільної основи з одержанням НСІ соли (т пл 205-210°С, розкл) Анал Обчислено для C17H17N3O НСІ С 64,65, Н 5,74, N 13,31, знайдено С 64,51, Н 5,90, N 13,09 59480 Приклад 3 Гідрохлорид 2-анілшо-6 27 метоксихшоксаліну До 2-хлор-6-метоксихіноксалшу (0,93м, 4,8 ммоль) в атмосфері аргону додають анілін (1,3мл, 14,3 ммоль) Реакційну суміш нагрівають при 120°С протягом 2 годин, потім при 150°С протягом 1,5 години Суміш прохолоджують і додають СН2СІ2 Отриману суспензію перемішують і тверду жовтогарячу речовину відфільтровують, промивають СНгСЬ/ЕігО, потім енергійно перемішують із НгО протягом 40хв , фільтрують і промивають Et20 з одержанням яскраво-жовтої твердої речовини Приклад 4 2-Аніліно-6-хшоксалінол По методу Feutnll G І , Mirnngton R N , Tet Lett 1970, 1327, арилметиловий простий ефір перетворюють у фенольне похідне До розчину 2-анілшо6-метоксихіноксалшу (0,27г, 1,07 ммоль) в атмосфері аргону в ДМФ додають натрієву сіль етантюлу (0,19г, 2 ммоль) Реакційну суміш нагрівають до 110°С протягом ночі Суміш концентрують і розподіляють між ЕЮ Ас і Н20/5% винною кислотою, так що рН водяного шару дорівнює приблизно 4 Органічний шар промивають Ь^О (4 х), потім 2,5% NaOH (4 х) Шари з основною реакцією поєднують, промивають ЕЮАс (2 х), знову підкисляють 5% винною кислотою і промивають багатьма порціями ЕЮАс Органічні шари поєднують, промивають насиченим розчином соли, сушать Na2SO4 і концентрують Отриману тверду речовину хроматографують (50% ЕЮАс/гексани) Аналітичний зразок одержують розтиранням продукту з Et20 з одержанням жовтого порошку (т пл 211-213°С) Анал Обчислено для C14H11N3O С 70,88, Н 4,67, N 17,71, знайдено С 70,64, Н 4,85, N 17,58 Приклад 5 Феніл-[6-(тетрапдрофуран-3-(Р)ілокси)хіноксалін-2-іл]амш До ТГФ розчину при 0°С в атмосфері аргону додають 2-аніліно-6-хшоксалшол (0,23г, 0,97 ммоль), (3)-(+)-3-пдрокситетрапдрофуран (0 086мл, 1,3 ммоль) і трифенілфосфш (0,31г, 1,2 ммоль) Порціями додають ДЕАД (0,18мл, 1,2 ммоль) Реакційної суміші дають нагрітися до кімнатної температури і перемішують протягом 1,5 години Суміш концентрують і розподіляють між ЕЮАс і НгО Органічний шар промивають Ь^О, насиченим розчином солі, сушать (MgSO4) і концентрують Отримане жовте масло хроматографують (50% ЕЮАс/гексани) і збирають в Et2O/inA По краплях додають HCI/Et2O розчин і отриманий червоно-жовтогарячий порошок сушать у вакуумі Порошок перетворюють у вільну основу розтиранням у МеОН із промитої (3 х Ь^О, 5 х МеОН) основною юнобмінною смолою Суміш перемішують протягом ЗОхв , фільтрують, концентрують і перекристалізовують із суміші ЕЮАс/гексани з одержанням, у два виходи, продукту (т пл 173-175°С) Анал Обчислено для C18H17N3O2 С 70,35, Н 5,57, N 13,67, знайдено С 70,19, Н 5,60, N 13,66 Приклад 6 2,7-Біс-циклогексилокси-6метоксихшоксалін До ДМФ розчину (5мл) NaH (0,32г, 8 ммоль) в атмосфері аргону по краплях подають циклогексанол (0 7мл 6,7 ммоль) Суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 25хв , потім додають 2-хлор-6,7-диметоксихшоксалін Реакційну суміш перемішують протягом 15хв при кімнатній температурі, при 90°С протягом 2 години і при 59480 28 110°С протягом 1 години Суміш прохолоджують, гасять НгО і насиченим розчином соли і розподіляють між ЕЮАс/НгО Органічний шар промивають НгО і насиченим розчином соли, сушать (MgSO4) і хроматографують (10% ЕЮАс/гексани) з одержанням воскоподібної білої твердої речовини (т пл 75-78°С) Анал Обчислено для C21H28N2O С 70,76, Н 7,92, N 7,86, знайдено С 70,81, Н 7,79, N7,70 Приклад 7 Циклогексил (6,7-диметоксихшоксалін-2ілметил)амш До 0 067М розчину 6,7-диметокси-2хіноксалінкарбоксальдепду в суміші МеОН/1,2дихлоретан 2 1 (7,5мл, 0,5 ммоль) додають циклогексиламін (0,11мл, 0,9 ммоль) Реакційну суміш залишають перемішуватися при кімнатній температурі протягом ночі, потім додають NaBbU (0,038г, 1 ммоль) і реакційну суміш перемішують протягом ночі Суміш потім концентрують і хроматографують (50% ЕЮАс/гексани - примерно 5% МеОН у 50% ЕЮАс/гексани) Масло розчиняють у суміші ЕЮАс/гексани й обробляють НС1 в ЕЮН Отриманий розчин концентрують і тверді речовини розтирають з ізопропанолом з одержанням білої' твердої речовини після сушіння у вакуумі при 60°С (т пл 185-190°С, розкл) Анал Обчислено для C17H23N3O2-HCI С 60,44, Н 7,16, N 12,44, знайдено С 60,48, Н6.88, N12,07 Приклад 8 (6 7-диметоксихшолш-3-іл)-транс(3(Р)-метилциклогексил)аміні(6,7-диметоксихінолшРеакцію здійснюють подібно викладеному вище одержанню з використанням вільної основи 3аміно-6,7-диметоксихінолшу (0,32м, 1,6 ммоль) і (Р)-(+)-3-метилциклогексанону (0,23мл, 1,9 ммоль) Отриману суміш продуктів хроматографують (70% ЕЮАс/гексани) і перекристалізовують із суміші ЕЮАс/гексани з одержанням білої твердої речовини (суміш 1 1 цис і транс ізомерів) (т пл 153-160°С) Анал Обчислено для С і 8 Н 2 4 ^ О 2 С 71,97, Н 8,05, N 9,33, знайдено С 72,12, Н 7,85, N 9,29 Приклад 9 3-( 6,7-Диметоксихінолш-З-іламіно)2,2-диметилпропан-1 -ол Реакцію проводять подібно одержанню в прикладі 7 До Меон розчину 4А порошку молекулярного сита (0,35г) в атмосфері аргону додають 3аміно-6,7-диметоксихінолш (0,32г, 1,6 ммоль) і 2,2диметил-3-пдроксипропиональдегид (0,19г, 1,9 ммоль) Отриману суміш хроматографують (3% МеОН/СНСІз) з одержанням 0,10г матеріалу, що розподіляють між СН2СЬ/10% NaOH Органічний шар промивають 10% NaOH, H2O і насиченим розчином солі, потім сушать (MgSO4) і перекристалізовують із суміші ЕЮАс/гексани з одержанням світло-жовтогарячої твердої речовини (т пл 170-1 73, 5°С) Анал Обчислено для C16H22N2O3 -C 66,18, Н 7,64, N 9,65, знайдено С 66,11, Н 7,49, N 9,33 Приклад 10 Циклогексил (6-метокси-7-морфолш-4ілхіноксалін-2-іл)амш Це одержання засноване на адаптації способу, описаного Buchwald, et al J Am Chem Soc , 1996, 118, 7215 До толуольного розчину 2циклогексиламіно-б-метокси-7-бромхіноксалшу 29 (0,1г, 0,3 ммол'ь) в атмосфері аргону додають морфолін (0,1г, 0,3 ммоль), трет-бутоксид натрію (0,04м, 0,42 ммоль), 3-(-)-БІНАФ (кат, 0,001 г) і біс(дибензіліден-ацетон)паладій (кат 0,001г) Реакційну суміш нагрівають до 80°С протягом ночі Суміш прохолоджують, розбавляють ЕігОз, фільтрують, концентрують і хроматографують (50% ЕЮАс/гексани) Продукт перекристалізовують із суміші ЕЮАс/гексани з одержанням у два прийоми жовтої твердої речовини (т пл 194-196°С) Анал Обчислено для C19H26N4O2 С 66,64, Н 7,65, N 16,36, знайдено С 66,60, Н 7,60, N 16,51 Приклад 11 транс-4-(7-Хлор-6-метоксихшоксалш-2амшо)циклогексанол і транс-4-(6-хлор-7метоксихіноксалін-2-іламшо)циклогексанол У реакційну колбу в атмосфері аргону, обладнану пасткою Діна-Старка і конденсатором, додають 6 1 2,7-дихлор-6-метоксихіноксалш 2, 6дихлор-7-метоксихіноксалш (0,30г, 1,3 ммоль) і транс-4-аміноциклогексанол (0,35г, 3 ммоль) Реакційну суміш нагрівають до 170°С протягом приблизно 10 годин, потім концентрують і ДВІЧІ хроматографують (7% МеОН/СНСІз, потім 5% МеОН/СНСІз) Продукт перекристалізовують з ЕЮАс/гексанів з одержанням ясно-жовтої твердої речовини, (т пл 144-147°С) Анал Обчислено для Ci9H24N4O2-0,4H2O С 57,20, Н 6 02, N 13,34, знайдено С 57,21, Н 5,97, N 13,08 ]Н ЯМР аналіз виявив, що продукт є сумішшю 2 1 транс-4-(7-хлор-6метоксихіноксалін-2-амшо)циклогексанол транс4-(6-хлор-7-метоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол Приклад 12 транс-4-(6,7-Диметоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол Транс-4-аміноциклогексанол (0,11г, 2екв) і 2хлор-6,7-диметоксихшоксалш (0,1г, 1екв) з'єднують і нагрівають до 160-180°С за термін, рівний 4-8 годинам Темно-коричневу суспензію фільтрують і концентрують Залишок очищають на флешколонці, елююють сумішшю 3% метанол/дихлорметан з одержанням продукту у виді жовтого порошку з т пл 119-123°С Анал Обчислено для C16H21N3O3, С 62,33, Н 7,05, N 13,63, знайдено С 62,35, Н 7,09, N 13,18 Сполуку можна була б перекристалізувати наступним методом Виходячи з 0,2г жовтого порошку в суміші 2,5мл води і 1,25мл метанолу одержують прозорий пофарбований у жовтогарячий колір розчин після кип'ятіння ЗІ зворотним холодильником Гарячий розчин залишають стояти і поступово прохолоджуватися Голкоподібні жовтогарячого кольору кристали збирають фільтруванням і сушать під високим вакуумом з одержанням жовтої твердої речовини (т пл 119-120°С) Альтернативно, НСІ сіль сполуки, названої в заголовку, одержують у такий спосіб До розчину транс-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанолу в ізопропанолі додають розчин НСІ при 0°С Суміш перемішують протягом 15хв перед фільтруванням Зібрану тверду речовину сушать під високим вакуумом з одержанням пдрохлоридної солі транс-4-(6,7диметоксихіноксалін-2-іламшо)циклогексанолу Анал Обчислено для СібН22СІІ\ІзОз-1,2Н2О С 59480 ЗО 53,19, Н 6,80, N 11,63, СІ 9,81, знайдено С 53,14, Н6.85, N 11,24, СІ 10,28 Альтернативно, сульфатну сіль сполуки, названої в заголовку, одержують у такий спосіб за типовою методикою транс-4-(6,7диметоксихіноксалін-2-іламшо)циклогексанол розчиняють в ацетоні або іншому придатному органічному розчиннику з нагріванням до 45°С, коли необхідно До отриманого розчину обережно додають водяний розчин H2SO4 (1екв, 1М р-ра) при швидкому перемішуванні Утворену в такий спосіб сіль збирають і сушать з одержанням сульфату з >80% виходом Наступні сполуки одержують подібним же чином, виходячи з ВІДПОВІДНОГО вихідного матеріалу 3-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іламшо)пропан-1ол (т пл 154,5-156°С) Анал Обчислено для C13H17N3O3 С 59,30, Н 6,51, N 15,96, знайдено С 59,30, Н6.46, N 15,87 3-(6,7-Диметоксихіноксалін-2-іламшо)-2,2диметилпропан-1-ол (т пл 174-176,5°С) Анал Обчислено для C15H21N3O3 С 61,84, Н 7,27, N 14,42, знайдено С 61,67, Н 7,22, N 14,22 4-(6,7-Диметилхшоксалш-2іламшо)циклогексанол (т пл 168-171 °С) Анал Обчислено для Ci 6 H 2 iN 3 O С 70,82, Н 7,80, N 15,48, знайдено С 70,76, Н 7,90, N 15,20 Приклад 13 Цис-4-(6,7-Диметоксихшоксалш24ламшо)циклогексанол Суміш цис-4-аміноциклогексанолу (400мг, 3,48 ммоль) і 2-хлор-6,7-диметоксихшоксалшу (450мг, 2 ммоль) у 5мл етанолу поміщають у запаяну трубку і ПОТІЛІ ттягліватотт, при 180°С протягом 3 годин Темно-коричневу суміш хроматографують на силікагелі і елююють етилацетатом з одержанням цільового продукту (т пл 65-67°С) Обчислено для C16H21N3O3 0 6Н20 С 61,17, Н 7,12, N 13,37, знайдено С 61,22, Н7.19, N 12,19 Приклад 14 (±)-Біцикло[2,2,1]гепт-2-іл-(6,7диметоксихшоксалін-2-іл)амш Процедура А Суміш 2-хлор-6,7диметоксихшоксаліну (5м, 22,3 ммоль) і (±)-екзонорборніл-2-амшу (10г, 90 ммоль) нагрівають при 160-180°С протягом ночі Темно-коричневий залишок розчиняють у 200мл метиленхлориду і промивають 1н NaOH (50мл) Органічний шар сушать над сульфатом магнію і потім фільтрують Залишок після концентрування піддають хроматографії на силікагелі, який елююють сумішшю гексан/етилацетат (80%) з одержанням цільового продукту у виді жовтої твердої речовини, що перекристалізовують з метанолу Процедура В Суміш 2-хлор-6,7диметоксихшоксаліну (9г, 40,1 ммоль) і (±)-екзонорборніл-2-амшу (5,77г, 52 ммоль), третбутоксиду натрію (4,22г, 44 ммоль), 2,2'-біс (дифенілфосфшо)-1,1'-бшафтилу (БІНАФ, 120мг) і біс(дибензиліденацетон)паладію Pd(fl6a)2, 40мг у 80мл толуолу нагрівають до 80°С протягом восьми годин Додають іншу порцію БІНАФ (60мг) і Pd(fl6a)2 (20мг) і суміш нагрівають до 100°С протягом ночі Після розведення 200мл дихлорметану реакційну суміш промивають 1н NaOH (100мл) Органічний шар сушать над сульфатом магнію і фільтрують Залишок після концентрування під 31 59480 32 дають хроматографії на силікагелі, який елююють 2-(Біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2-ілокси)-6,7сумішшю гексан/етилацетат (80%) з одержанням диметоксихшоксалін (т пл 93-95°С) Анал Обчисцільового продукту у виді ясно-жовтої твердої релено для Ci7Hi8N2O3 С 68,44, Н 6,08, N 9,39, човини (т пл 188-189°С) Анал Обчислено для знайдено С 68,32, Н 5,98, N 9,25 C17H21N3O3 С 68,20, Н 7,07, N 14,04, знайдено С 2-(1,4-Дюксаспіро[4,5]дек-8-ілокси)-6,768,18, Н7.03, N 14,03 диметоксихшоксалін (т пл 124-125°С) Анал Обчислено для C18H22N2O5 С 62,42, Н 6,40, N 8,09, Наступні сполуки одержують подібним же чизнайдено С 62,63, Н 6,46, N 7,79 ном, починаючи з ВІДПОВІДНОГО ВИХІДНОГО матеріалу (процедура А) Приклад 16 екзо-Біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2-іл-(6 7диметоксихшоксалін-2-іл)амш (т пл 175-177°С) ілокси)циклогексан-карбонова кислота Анал Обчислено для Сі 7 Ні9^О2-0,4Н 2 О С 60,94, Суміш Н 6,56, N 13,78, знайдено С 66,98, Н 6,62, N 12,73 пдроксициклогексанкарбонової кислоти (144мг, 1 ммоль) і NaH (60%, 160мг, 4 ммоль) у безводному (2-ендо,5-екзо)-5-(6,7-Диметоксихшоксалш-2ТГФ/ДМФ (10мл/2мл) кип'ятять зі зворотним холоїламіно) біцикло[2,2,1]гептан-2-ол (т пл 90-93°С) дильником протягом однієї години перед додаван(2-екзо,5-екзо)-5-(6,7-Диметоксихшоксалш-2ням 2-хлор-6,7-диметоксихшоксалшу (225мг 1 їламіно) біцикло[2,2,1]гептан-2-ол (т пл 97-100°С) ммоль) Отриману суміш продовжують нагрівати зі (2-ендо,3-екзо,5-екзо)-5-(6,7зворотним холодильником протягом чотирьох гоДиметоксихшоксалш-2дин Реакційну суміш нейтралізують до рН 5 і ексіламіно)біцикло[2,2,1]гептан-2,3-дюл (т пл 220трагують етилацетатом (2х50мл) Об'єднані орга222°QC Анал Обчислено для C17H21N3O4-O 2Н2О нічні розчини сушать над сульфатом магнію і С 60 96 Н 6 44, N 12,54, знайдено С 60,93, Н фільтрують Залишок після концентрування хро6.06.N 11,50/ матографують на силікагелі (етилацетат, з наступЦиклогексил(6,8-диметилхіноксалш-2-іл)амін ним метанолом) з одержанням цільового продукту [МС m/z 255 (М+)] Анал Обчислено для Ci 6 H2iN 3 у вищі білої твердої речовини (т пл 90-93°С) С 75,26, Н 8,29, N 16,46, знайдено С 75,08, Н 8,28, Анал Обчислено для Ci7H2oN205-0,5H20 C 59,89, N 15,86 Н6.19, N8,22, знайдено С 59,91, Н 6,62, N7,90 іламшо)циклопентанол (т пл 137-139°С) Анал Обчислено для C14H17N3O2 С 64,85, Н 6,61, N 16,20, знайдено С 64,87, Н 6,45, N 16,22 транс-4-(6-Метоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанол (т пл 70-75 °С) Анал Обчислено для Сі5Ні9МзО2-0,ЗН2О С 64,64, Н 7,09, N 15,08, знайдено С 64,68, Н 7,06, N 14,77 [3aR,4S,6R,6aS]-6-(6,7-flHMeTOKcnxiHOKcaniH-2іламіно)-2,2-диметилтетрапдроциклопента [1,3] дюксол-4-карбоновий етиламід (т пл 94-97°С) Анал Обчислено для С2іН28^О5-0,ЗН2О С 59,79, Н 6,83, N 13,28, знайдено С 59,80, Н 6,89, N 12,03 (6,7-диметоксихшоксалш-2-іл)-(4метоксициклогексил)амш (т пл 58-68°С) Анал Обчислено для Сі7Н2зМзОз-0,5Н2О С 62,56, Н 7,41, N 12,87, знайдено С 62,53, Н 7,22, N 12,22 Приклад 15 екзо-2-(Біцикло[2,2, 1 ]гепт-2ілокси)-6,7-диметоксихшоксалш Суміш екзо-2-норборнеолу (223мг, 2 ммоль) і NaH (60%, 100мг, 2,5 ммоль) у Юмл безводного ТГФ кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 0,5 години перед додаванням 2-хлор-6,7диметоксихшоксаліну (ЗЗбмг, 1,5 ммоль) Отриману суміш продовжують кип'ятити зі зворотним холодильником протягом двох годин Залишок після фільтрування і концентрації хроматографують на силікагелі (50% ефір/гексан) з одержанням цільового продукту у виді білої твердої речовини (т пл 135-137°С) Анал Обчислено для C17H20N2O3 C 67,98, Н 6,71, N 9,33, знайдено С 67,96, Н 6,762, N 9,19 Наступні сполуки одержують подібним же чином, починаючи з ВІДПОВІДНОГО ВИХІДНОГО матеріа лу екзо-2-(Біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2-ілокси)-6,7диметокси-хшоксалін (т пл 1 08-110°С) Анал Обчислено для Ci7Hi8N2O3 С 68,44, Н 6,08, N 9,39, знайдено С 68,54, Н 6,23, N 9,27 Наступні сполуки одержують подібним же чином, починаючи з ВІДПОВІДНОГО ВИХІДНОГО матеріа лу 4-(6,7-Диметоксихшоксалін-2ілоксиметил)циклогексанол (т пл 11 8-121 °С) Анал Обчислено для Ci7H22N2O4-0,3H2O C 63,15, Н 7,03, N 8,66, знайдено С 63,13, Н 6,65, N 9,01 3-(6,7-Диметоксихшоксалін-2ілокси)циклогексанол (т пл 151-153°С) Анал Обчислено для Ci6H2oN204 С 63,14, Н 6,62, N 9,20, знайдено С 62,56, Н 6,58, N 8,67 4-(6,7-Диметоксихшоксалін-2ілокси)циклогексанол (т пл 162-164°С) Анал Обчислено для C16H20N2O4 С 63,14, Н 6,62, N 9,20, знайдено С 62,52, Н 6,80, N 8,88 Приклад 17 До розчину 2-(біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2-ілокси)6,7-диметоксихшоксалін (149мг, 0,5 ммоль) і 4метилморфолін-г4-оксиду (234мг, 2 ммоль) при кімнатній температурі в 5мл ТГФ додають розчин OsO4 у трет-бутанолі (2,5% по вазі, 0,2мл) Коричневий розчин енергійно перемішують протягом двох годин перед тим, як погасити насиченим NaHS2O3 (2мл) Для екстрагування використовують ефір (3 х ЮОмл) і потім сушать над сульфатом магнію Залишок після фільтрування і концентрації піддають хроматографії на силікагелі (50% етил ацетат/гексан) з одержанням цільового продукту (т пл 85-88°С) Анал Обчислено для Ci7H2oN205-0,9H20 С 58,73, Н 6,29, N 8,06, знайдено С 58 74, Н5.91, N7,53 Подібним же чином отриманий (2-екзо,3екзо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламіно)біцикло[2,2,1]гептан-2,3-дюл (т пл 150153°С) Приклад 18 цис-4-(6,7-Диметоксихшоксалін-2ілокси)циклогексиловий ефір оцтової кислоти і 33 цис-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексанол Суміш цис^-ацетоксициклогексанолу (632мг, 4 ммоль) і NaH (60%, 220мг, 5,5 ммоль) у 15мл безводного ТГФ кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 0,5 годин перед додаванням 2-хлор6,7-диметоксихшоксаліну (674мг, 3 ммоль) Отриману суміш продовжують кип'ятити зі зворотним холодильником протягом двох годин Залишок після фільтрування і концентрування хроматографують на силікагелі (ефір) з одержанням цис-4(6,7-диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексилового ефіру оцтової кислоти (т пл 150-152°С) , анал обчислено для C16H22N2O5 С 62,42, Н 6,40, N 8,09, знайдено С 62,39, Н 6,55, N 7,82, і цис-4-(6,7диметоксихшоксалш-2-ілокси)циклогексанолу (т пл 148-150°С), анал обчислено для C16H20N2O4 С 63,14, Н 6,62 N 9,20, знайдено С 62,80, Н 6,76, N8,67 транс-4-(6,7-Диметоксихшоксалш-2ілокси)циклогексанол [MS m/z 304 (М+)] отриманий аналогічно Приклад 19 4-(6,7-Диметоксихшоксалін-2ілокси)циклогексиловий ефір диметилкарбамшової кислоти Суміш 4-(6,7-диметоксихшоксалін-2ілокси)циклогексанолу (ЮОмг, 0,33 ммоль), диметилкарбамілхлорид (90мкл, 1,2 ммоль) і NaH (60%, 19,6мг, 0,49 ммоль) у 5мл ТГФ перемішують при кімнатній температурі протягом трьох днів з одержанням білої твердої речовини (т пл 152-155°С), виділеної за допомогою хроматографії (50% етилацетат/гексан) Анал обчислено для C19H21N3O5 С 60,79, Н6.71, N 11,19, знайдено С 60,38, Н 6,54, N 10,43 Приклад 20 3-циклогексилокси-6,7-диметоксихіноксалш-1оксид Суміш 2-циклогексилокси-6,7диметоксихшоксалін (110мг, 0,38 ммоль) і метахлорбензойной перкислоти (70%, 113мг, 0,46 ммоль) у Юмл дихлорметана перемішують при кімнатній температурі протягом одного дня Розчин після фільтрування концентрують і залишок хроматографують на силікагелі (20% етилацетат/гексан) з одержанням цільового продукту (т пл 167-169°С) транс-4-(6,7-Диметокси-4-оксихшоксалш-2іламшо)цикло-гексанол (т пл 220-222°С) одержують подібним же чином Анал Обчислено для Ci6H2iN3O4-0,2H2O С 59,42, Н 6,69, N 12,99, знайдено С 59,43, Н6.64, N 12,95 Приклад 21 транс-4-(6,7-Диметоксихшоксалш-2іламшо)циклогексиловий ефір оцтової кислоти Суміш транс-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)цикло-гексанолу (ЗОЗмг, 1 ммоль), оцтового ангідриду (2мл) і піридину (2мл) у Юмл дихлорметану перемішують при кімнатній температурі протягом ночі Суміш гасять водою (5мл) і екстрагують дихлорметаном (2 х ЗОмл) Після сушіння над сульфатом магнію і фільтрування розчин концентрують на роторному випарнику Залишок хроматографують на силікагелі (етилацетат) з одер 59480 34 жанням цільового ацетату у виді ясно-жовтої твердої речовини (т пл 176-177°С) Анал Обчислено для CI8H23N3O4 С 62,59, Н 6,71, N 12,17, знайдено С 62,89, Н 6,67, N 11,95 Приклад 22 (2-екзо, 5-екзо) -5- (6, 7-Диметоксихшоксалін-2їламіно) біцикло [2,21]гептан-2-ол Суміш (2-екзо, 5-екзо)-5амшобіцикло[2,2,1]гептан-2-ацетати (127мг, 0,75 ммоль) і 2-хлор-6,7-диметоксихшоксалшу (224мг, 1 ммоль) нагрівають до 180°С протягом шести годин Після ЦЬОГО терміну суміш прохолоджують до кімнатної температури, розчиняють у дихлорметані й очищають на флеш-колонці Виділений продукт (20мг, 7,5% вихід) розчиняють у метанолі (2мл) і додають свіжий розчин 1н метоксиду натрію (0,063мл, 0,063 ммоль) Реакційну суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом дев'яноста хвилин Неочищену суміш очищають препаративною тонкошаровою хроматографією з одержанням продукту у виді твердої жовтої речовини з т п л 97-100°С Ci7H2iN3O3(m/z) 315 Наступні сполуки одержують подібним же чином, починаючи з ВІДПОВІДНОГО ВИХІДНОГО матеріа лу (2-ендо,5-екзо)-5-(6,7-диметоксихшолш-2іламшо)біцикло [2,2,1]гептан-2-ол у виді жовтої твердої речовини C17H21N3O3 (m/z) 315 (2-екзо,6екзо)-6-(6,7-диметоксихінолін-2-іламшо) біцикло[2,2,1]гептан-2-ол у виді жовтої твердої речовини (ЗОмг, всього 21%) C17H21N3O3 (m/z) 315 Анал Обчислено для C17H23N3O3 С 64,74, Н 6,71, N 13,32, знайдено С 58,42, Н 6,26, N 11,56 Приклад 23 (2-транс,4-цис)-4-(6,7-Диметоксихшоксалш-2іламшо)-2-метилциклогексанол і (2-транс 4-транс)4-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанол Суміш 2-хлор-6,7-диметоксихшоксаліну (1,08м, 4,81 ммоль) і (2-транс)-4-амшо-2метилциклогексанолу (620мг, 4,81 ммоль) нагрівають до 180°С протягом шести годин Реакція дає два діастереомери Основний ізомер виділяють у виді жовтої твердої речовини, ідентифікованої як (2-транс,4транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш-2-іламіно)-2метилциклогексанол (240мг, 0,76 ммоль) C17H23N3O3 (m/z) 317 Анал Обчислено для C17H23N3O3 -2Н2О С 58,00, Н 7,69, N 11,94, знайдено С 58,0, Н6.58, N 11,24 Мінорний ізомер також являє собою тверду жовту речовину, ідентифіковану як (2-транс,4-цис)4-(6,7-диметоксихшоксалІн-2-ІламиІо)-2меіилциклогексанол, (m/z) 317 Анал Обчислено для C17H23N3O3 Н2О С 60,08, Н 6,94, N 12,53, знайдено С 61,21, Н 6,94, N 11,56 (2-транс,4-транс)-4-(6,7-диметоксихшоксалш2-іламшо)-2-метилциклогексанол далі розділяють за допомогою хіральної ВЕРХ на його окремі енантюмери Перший енантюмер володіє (н-)обертанням (порядок елюювання на Chiracel OJ) Другий енантюмер володіє (-)-обертанням (порядок елюювання на Chiracel OJ) Аналітичні умови з використанням колонки Chiracel OD приводили до елюювання (+)-енантюмера другим (-)-Енантюмер 35 59480 виявляє кращу активність ТФР-Р при імуноферментному аналізі ELISA Приклад 24 (2-цис,4-цис)-4-(6,7-Диметоксихшоксалш-2іламшо)-2-метилциклогексанол і (2-цис,4-транс)-4(6,7-диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанол До розчину суміші 2 1 (2-транс,4-транс)-4(6,7-диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанолу і (2-транс,4-цис)-4-(6,7диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанолу (120мг, 0,38 ммоль) у ТГФ (7мл) додають трифенілфосфш (110мг, 0,42 ммоль) і діетилазодикарбоксилат (0,066мл, 0,42 ммоль) і бензойну кислоту (46,4мг, 0,38 ммоль) Суміш перемішують при кімнатній температурі протягом ночі і залишок після обробки розділяють на силікагелі (30% етил ацетат/гексан) з одержанням суміші бензоатів До розчину переважного бензоата (50мг, 0,12 ммоль) у метанолі (2мл) додають 1н гідроксид натрію (0,12мл, 0,12 ммоль) Чистий продукт (13мг, 32% вихід) ВИДІЛЯЮТЬ за допомогою препаративної тонкошарової хроматографії у виді твердої жовтої речовини (т пл 85-88°С), ідентифікований як (2цис,4-цис)-4-(6,7-диметоксихшоксалін-2-іламшо)-2метилциклогексанол C17H23N3O3 (m/z) 317 Подібним же чином мінорний бензоат (4,4мг) пдролізують і цільовий продукт (3,3мг, 100%) також виділяють препаративною тонкошаровою хроматографією у виді твердої жовтої речовини, ідентифікований як (2-цис,4-транс)-4-(6,7диметокси-хіноксалш-2-іламшо)~2метилциклогексанол C17H23N3O3 (m/z) 317 Приклад 25 (1R,2R,4S)-(+)-Bi4Hmo[2,2,1]renT-2-in-(6,7диметоксихіноксалін-2-іл)амш (+)-Біцикло[2,2,1]гепт-2-іл-(6,7диметоксихшоксалін-2-іл)амш із приклада 14 розділяють на хіральній колонці для ВЕРХ (Chiralpac AD, 25x2 см , 60% гептан/40% етанол з 10мм (18)(+)-камфорсулъфонова кислота, 12 мл/хв) і названий вище в заголовку продукт одержують у якості першого елюента Зібрані фракції поєднують і промивають 50мл 1н NaOH перед сушінням (MgSC^) Розчин після фільтрування концентрують на роторному випарнику І потім сушать шд високим вакуумом Одержуюіь жовту тверду речовину [a]d20+19,5° (с=0,20, СН2СІ2) т пл 184-186°С Анал Обчислено для Сі7Н2зМзОз-0,ЗН2О С 66,90, Н 7,15, N 13,77, знайдено С 66,86, Н 7,01, N 13,86 Приклад 26 Бютрансформаційне одержання (1S,2R,4S,5R)-5-(6,7-flHMeTOKCH-xiHOKcanm-2іламшо)біцикло[2,2,1]гептан-2-ол Штам грибків F2052 (Mortierella isabellma) закуплений у Nothern Utilisation Research and Development Division (NRRL) Грибок зберігали при -25°С 250мл КОНІЧНІ колби, кожна з який містить 50мл посівного культурального середовища (середовище 216) висівали 2 мл суспензії грибка і шкубували на роторному шейкері (200об/хв) при 23°С протягом 3 днів 250мл КОНІЧНІ колби, кожна з який містить 50мл того ж середовища висівають 2мл ПОСІВНІ культури і шкубують на роторному шейкері (200об/хв) при 36 23°С Через 24 години (1 R,2R,43)-(+)біцикло[2,2,1]гепт-2-іл-(6,7-диметоксихіноксалш-2іл)амш із приклада 25 розчиняють у МеОН і додають у колби до кінцевої концентрації, рівної 300мг/л Культури збирають після 24 годин інкубації (Середовище 216 глюкози 0,4%, дріжджовий екстракт 0,05%, соєве борошно 0,05%, NaCI 0,05%, КН2РО4 0,05) Екстрагування здійснюють, використовуючи 2 об'єми ацетонітрилу, 1 об'єм трет-бутилметилового ефіру і 1 об'єм н-гептану, що додають до 1 об'єму бульйону Після перемішування з магнітною мішалкою при 22°С екстракт розділяється на 3 шари Проміжний шар збирають і випарюють досуха, і розчиняють в етилацетаті Етилацетатний екстракт розділяють на силікагелі (0,04-0,063мм), застосовуючи етилацетат як елюент Фракції, що містять продукт бютрансформацм розділяють на С18 дюксиду кремнію, використовуючи градієнт Н2О/МеОН як елюент Ця хроматографія дає чисту сполуку, названу в заголовку, у виді аморфного жовтого порошку, т пл 190-192°С Приклад 27 транс-4-[7-метокси-6-(2-морфолш-4ілетокси)хіноксалін-2-іламшо]циклогексанолітранс4-[6-метокси-7-(2-морфолш-4-ілетокси)хшоксалін2-іламшо]циклогексанол Сполуку, названу в заголовку одержують шляхом сполучення Мітсунобу 6-пдрокси-7-метокси-2хлорхшоксаліну 7-(2-морфолш-4-ілетокси)-6метокси-2-хлорхіноксалшу і 2-(морфолш-4іл)етанолу, використовуючи методику з приклада 1, і реакції отриманого 6-(2-морфолш-4-ілетокси)7-метокси-2-хлор-хшоксалшу 7-(2-морфолш-4ілетокси)-6-метокси-2-хлор-хшоксалшу і транс-4аміноциклогексанолу, використовуючи методику з Приклад 28 2-[2-(транс-4-пдроксициклогексиламіно)-7метоксихшоксалш-6-ілокси]-1 -оцтова кислота і 2[2-(транс-4-пдрокси-циклогексиламшо)-6метоксихшоксалш-7-ілокси]-1-оцтова кислота Сполуку, названу в заголовку, одержують деалкілуванням 4-(6,7-диметоксихшоксалш-2іламшо)циклогексанолу, використовуючи натрієву сіль етантюлу в ДМФ, як описано в прикладі 4, з наступним алкілуванням за допомогою бромоцтовоі кислоти в присутності основи, як описано в загальній методиці 6 Пиклад 29 2-[2-(транс-4-Гідроксициклогексиламшо)-7MeTOKCHXiHOKcanm-6-inoKCHn]-N,Nдиметилацетамід і 2-[2-(транс-4-пдроксициклогексиламіно)-6-метоксихшоксалш-7-ілоксил] -N,Nдиметилацетамід Сполуку, названу в заголовку, одержують амінолізом сполуки з приклада 28, використовуючи диметиламін Приклад проміжної сполуки 1 Дипдрохлорид 4-бром-5-метоксибензол-1 ,2діаміну До розчину ЕЮАс (50мл) і 5-бром-4-метокси-2нітрофеніламіну (2,5г, 10 ммоль) в атмосфері аргону додають 5% Pd/C (0,5 г) Реакційну суміш гідрують при 50 фунт/дюйм протягом 1 години Суміш фільтрують через целіт у розчин НСІ/ІПА/ЕЮАс і шар промивають додатковою КІЛЬКІСТЮ ЕЮАС Отриманий осад відфільтровують з одержанням 37 59480 білої твердої речовини Приклад проміжної сполуки 2 7-бром-5-метоксихшоксалш-2-ол і 6-бром-7метоксихіноксалш-2-ол До розчину Меон (15мл) в атмосфері аргону додають здрібнені в порошок гранули NaOH (0,86м, 21 ммоль) і дипдрохлорид 4-бром-5метоксибензол-1,2-діамшу (2,7г, 9,3 ммоль) Суміш перемішують протягом Юхв, потім по краплях додають розчин 45% етилглюксилату в толуолі (2,7г, 12 ммоль) Реакційну суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 1 години, потім прохолоджують Додають воду, потім суспензію фільтрують Отриману тверду речовину послідовно промивають НгО, МеОН, ІПА і Et20 з одержанням жовтого порошку Приклад проміжної сполуки З 7-Бром-2-хлор-6-метоксихшоксапші 6-бром-2хлор-7-метокси-хіноксалш До суміші 7-бром-6-метоксихшоксалін-2-олу і 6-бром-7-метоксихшоксалш-2-олу (1г, 3,9 ммоль) додають РОСІз (5мл) Реакційну суміш кип'ятять зі зворотним холодильником 1 годину, виливають у крижану воду, фільтрують, потім промивають водою з одержанням ясно-коричневої твердої речовини Відношення 7-ором-2-хлор-6метоксихшоксаліну 6-бром-2-хлор-7-метоксихіноксалін складає приблизно 7 1 за 1Н ЯМР Приклад проміжної сполуки 4 5-Хлор-4-метокси-2-нитроанілін До розчину К-(5-хлор-4-метокси-2нитрофеніл)ацетаміду (2г, 8,2 ммоль) у 5N НСІ (20мл) додають 1,4-дюксан (Юмл) і суміш перемішують при 60°С протягом 1,5 година Реакційну суміш концентрують і розподіляють між EtOAc/2N NaOH Водяні шари промивають ЕЮАс (3 х), насиченим розчином соли, сушать (MgSO4) , адсорбують на силікагелі і хроматографують (70% ЕЮАс/гексани) з одержанням жовтогарячого порошку Приклад проміжної сполуки 5 Дипдрохлорид 4-хлор-5-мегроксибензол-1,2діаміну До розчину ЕЮАс (25мл) і 5-хлор-4-метокси-2нитрофеніламшу (1,6г, 7,9 ммоль) в атмосфері аргону додають 5% Pd/C (0 5г) Реакційну суміш гідрують при 50 фунт/дюйм протягом 1 години Суміш фільтрують в атмосфері N2 через целіт у розчин 1н HCI/Et2O у ЕЮАс і осад промивають додатковою КІЛЬКІСТЮ Е Ю А С Отриманий осад від фільтровують з одержанням білої твердої речовини Приклад проміжної сполуки 6 7-хлор-6-метоксихшоксалш-2-ол і 6-хлор-7метокси-хіноксалш-2-ол До розчину дипдрохлориду 4-хлор-5метоксибензол-1,2-діамшу (1,8г, 7,2 ммоль) у ЕЮН (15мл) в атмосфері аргону додають TEA (2,5мл, 18 ммоль) при 0°С Суміш перемішують протягом 20хв , потім порціями додають 45% розчин етилглюксилату в толуолі (2,1г, 9,3 ммоль) Реакційну суміш нагрівають до кімнатної температури, кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 1,5 годин, потім прохолоджують, додають воду, потім суспензію фільтрують і послідовно промивають НгО, ІПА і Et20 з одержанням ясно-жовтого поро 38 шку Продукт декілька разів піддають азеотропній перегонці з толуолом і сушать у вакуумі перед використанням Приклад проміжної сполуки 7 2,7-Дихлор-6-метоксихіноксалш і 2,6-дихлор-7метоксихшоксалін До суміші 7-хлор-6-метоксихшоксалш-2-олу і 6хлор-7-метоксихшоксалш-2-олу (1г, 4,7 ммоль) у трубці при осушенні СаСЬ додають РОСІз (5мл) Реакційну суміш нагрівають зі зворотним холодильником ЗОхв , виливають у холодний насичений розчин ІЧаНСОз, фільтрують, потім промивають водою з одержанням твердої речовини Відношення 2,7-дихлор-6-метоксихіноксалш 2,6-дихлор-7-метоксихіноксалш складає приблизно 6 1 за^НЯМР Приклад проміжної сполуки 8 цис-4-Аміноциклогексанол цис-4-аміноциклогексанол одержують за літературною методикою з незначною модифікацією [J, Med Chem 18(6) 634, 1975] Приклад проміжної сполуки 9 екзо-Біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2-амш екзо-Біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2-амш одержують по тій же процедурі, що й у прикладі проміжної сполуки 15 з 5-норборнен-2-олу через нестійку проміжну сполуку екзо-2-біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2ІЛІЗОІНДОЛ-1.3-ДІОН Приклад проміжної сполуки 10 (2-екзо,6-зкзо)-2-(6-Гідроксибіцикло[2,2,1]гепт2-ІЛІЗОІНДОЛ-1,3-ДІОНІ (2-екзо,5-екзо)-2-(5пдроксибіцикло [2,2,1]ГЄПТ-2-ІЛІЗОІНДОЛ-1,3-ДІОН До суміші екзо-2-біцикло[2,2,1]гепт-5-ен-2ІЛІЗОІНДОЛ-1 ,3-дюну (320мг, 1,34 ммоль) у 5мл ТГФ при 0°С додають розчин ВН3ЛТФ (1М, 2мл, 2 ммоль) Суміш перемішують при кімнатній температурі протягом двох годин перед додаванням води (2мл) і І\ІаВОз-4ЬІ2О (900мг) Отриману суспензію перемішують протягом ночі Для екстрагування використовують ефір (3 х 50мл) і сушать над сульфатом магнію Залишок після фільтрування і концентрації хроматографують на силікагелі (ефір) з одержанням цільових продуктів, що можуть бути додатково розділені Приклад проміжної сполуки 11 (2-екзо,5-ендоУ2-(5-Гідроксибіцикло[2,2,1]гепт2-ІЛІЗОШДОЛ-13-дюн (a) Суміш (2-екзо,6-екзо)-2-(6пдроксибіцикло[2,2,1]гепт-2-ілізоіндол-1,3-дюну і (2-екзо,5-екзо)-2-(5-пдроксибіцикло-[2,2,1]гепт-2ілізоіндол-1,3-дюна (800мг, 3,3 ммоль) і хлорхромату піридинію (2г) у Юмл метиленхлориду перемішують при кімнатній температурі протягом вихідних днів Після розведення ефіром (100 мл) суспензію фільтрують і розчин концентрують Залишок хроматографують на силікагелі (ефір) з одержанням 750мг (95%) ВІДПОВІДНИХ кетонів Кетони додатково розділяють ВЕРХ зі зверненою фазою (CH3CN/H2O, 10-70%) з одержанням екзо-2(5-оксибіцикло[2,2,1]гепт-2-ілізоіндол-1,3-дюну (b) До розчину екзо-2-(5-оксибіцикло[2,2,1]гепт2-ілізондол-1,3-дюну (250мг, 0,98 ммоль) у Юмл метанолу при 0°С додають ІЧаВЬЦ (38мг, 1 ммоль) Суміш перемішують протягом ще півгодини і гасять 1н НСІ (1мл) Після концентрації залишок екстрагують метиленхлоридом (2 х 50мл) Випа 39 59480 рювання метиленхлориду дає цільовий продую" використовуваний безпосередньо, без додаткового очищення Приклад проміжної сполуки 12 (2-ендо,5-зкзо)-5-Амшобіцикло[2,2,1]гептан-2ол, (7-екзо,5-екзо)-5-амшобіцикло[2,2,1]гептан-2ол, і 2-ендо,6-екзо)-6-амшобіцикло[2,2,1]гептан-2ол і (2-екзо,6-екзо)-6-амшо-бщикло[2,2,1 ]гептан-2ол Сполуки, названі в заголовку, одержують з ВІДПОВІДНОГО вихідного матеріалу по викладеній вище методиці приклада проміжної сполуки 11 Приклад проміжної сполуки 13 2-метил-6,7-диметоксихшоксалш Сполуку, названу в заголовку, одержують, використовуючи адаптацію опублікованого методу Tamao, et al Tetrahedron, 1982, 38, 3347-3354 До розчину ТГФ в атмосфері аргону додають 2-хлор6,7-диметоксихшоксалін (5м, 26 ммоль) і NiCb (dppp) (0,14г, 0,26 ммоль) Реакційну суміш прохолоджують до 0°С і порціями додають ЗМ розчин MeMgBr у Et20 (13мл, 39 ммоль) Реакційної суміші дають нагрітися до кімнатної температури, перемішують протягом 1 години, потім нагрівають зі зворотним холодильником протягом 1,5 годин Суміш прохолоджують, гасять 10% НСІ, перемішують Юхв, потім роблять основний 5% NaOH До реакційної суміші додають СН2СІ2 і НгО і суміш перемішують протягом ночі Потім додатково додають СН2СІ2, НгО і NaCI і суміш фільтрують Отриманий розчин виливають у розділову лійку і водяні шари промивають Зх СН2СІ2 Органічні шари поєднують, промивають насиченим розчином соли, сушать (MgSO4), концентрують на силікагелі і хроматографують (50-80% ЕЮ Ас/гексани) з одержанням жовтогарячої твердої речовини (49% вихід) Приклад проміжної сполуки 14 6,7-Диметокси-2-хшоксалшкарбоксальдепд У реакційну колбу в атмосфері аргону додають 1,4-дюксан (20мл), 2-метил-6,7диметоксихшоксалін (1,09м, 5,3 ммоль) і SeO2 (1,8г, 16 ммоль) Суміш нагрівають до 100°С протягом 2 годин 45хв , прохолоджують і фільтрують через целіт Осад промивають порціями ЕЮАс і СН2СІ2 Отриманий розчин концентрують, збирають у МеОН/СНгСЬ, завантажують на колонку силікагелю і хроматографують (30% ЕЮАС/СН2СІ2) з одержанням не зовсім білої твердої речовини (73% вихід) Приклад проміжної сполуки 15 (2-екзо, 5-екзо)-5-Фмшобіцикло[2,21]гептан-2ацетат екзо-5-Ацетоксибіцикло[2,2,1]гептан-2-вш і екзо-6-ацетоксибіциюто[2,2,1]гептан-2- він одержують з біцикло[2,2,1] гепта-2,5-дієну за методикою R Gagnon (J Chem Soc Perkintrans 1,1505,1995) з незначними змінами До розчину екзо-5ацетоксибіцикло[2,2,1]гептан-2-он (350мг, 2,08 ммоль) у 10мл ТГФ при кімнатній температурі додають 1М боранЛТФ розчин (1,2мл, 1,2 ммоль) Суміш перемішують протягом 0,5 години перед тим, як гасять при 0°С метанолом (Змл) і 1н НСІ (1,5мл) Для екстрагування використовують етилацетат (3 х ЗОмл), висушений над сульфатом 40 магнію Залишок після фільтрування і концентрування хроматографують на силікагелі з одержанням (2-ендо,5-екзо)-5ацетоксибіцикло[2,2,1]гептан-2-олу До розчину (2-ендо,5-екзо)-5ацетоксибіцикло[2,2,1]гептан-2-олу (350мг, 2,06 ммоль) у ТГФ (Юмл) додають фталімід (454мг, 3,09 ммоль), трифенілфосфін (810мг, 3,09 ммоль) і діетилазодикарбоксилат (0,49мл, 3,09 ммоль) при 0°С Реакційну суміш залишають перемішуватися протягом ночі і потім конденсують на роторному випарнику і залишок очищають колонковою хроматографією (20% етил ацетат/гексан) з одержанням цільового продукту у виді твердої жовтої речовини Суміш вищевказаної твердої речовини (ЗООмг, 1 ммоль) і гідразину (0,126мл, 2,2 ммоль) у 5мл метанолу нагрівають зі зворотним холодильником протягом шести годин Після видалення метанолу, для екстрагування залишку використовують дихлорметан (3 х ЗОмл) Концентрація розчинника дає (екзо,екзо)-5-амшобіцикло[2,2,1]гептан-2-ацетат (127мг, 75%), що використовують у реакції сполучення без додаткового очищення Подібним же чином одержують (2-ендо,5екзо)-5-амшобіцикло[2,2,1]гептан-2-ацетат, (2ендо,6-екзо)-6-амшо-біцикло[2,2,1]гептан-2-ацетат і (2-екзо,6-екзо)-6-амшобіцикло [2,2,1]гептан-2ацетат з ВІДПОВІДНОГО ВИХІДНОГО матеріалу Приклад проміжної сполуки 16 (2-транс)-4-Амшо-2-метилциклогексанол Суміш З-метил-2-циклогексенону (4м, 36,36 ммоль), толуолсульфонової кислоти (ЮОмг) і етиленгліколю (7мл) у ЮОмл толуолу нагрівають зі зворотним холодильником протягом ночі і воду, що утворилася, видаляють за допомогою пастки Діна Старка Залишок після концентрації хроматографують на силікагелі (10% етил ацетат/гексан) з одержанням 3,36м (62%) 7-метил-1,4дюксаспіро[4,5]дец-7-ен До розчину, що перемішується, 7-метил-1,4дюксаспіро [4,5]дец-7-ену (3,36г, 22,47 ммоль) у тетрапдрофурані (ТГФ) (125мл) додають 1М розчин борану в ТГФ (22,47мл, 22,47 ммоль) при кімнатній температурі, Суміш перемішують протягом однієї години, і реакцію гасять додаванням Ь^О (10мл) при 0°С с наступним додаванням тетрапдрату перборату натрію (10,0г, 66 ммоль) Суміш залишають перемішуватися протягом ночі Два шари розділяють і водяний шар кілька разів промивають етилацетатом (4 х 150мл) Цільовий спирт одержують у виді прозорої рідини після колонкової флеш-хроматографм Вищевказаний спирт (1,8г, 10,5 ммоль) розчиняють у метанолі (50мл) і 1н НСІ (16мл) Реакційну суміш залишають перемішуватися на ніч Кислий розчин нейтралізують 1н розчином гідроксиду натрію (18мл) і потім випливає звичайна обробка водою Неочищену суміш очищають на флешколонці (50% етилацетат) з одержанням транс-4пдрокси-3-метилциклогексанону До розчину транс-4-пдрокси-Зметилциклогексанону (780мг, 6,1 ммоль) у воді (Змл) додають пдрохлорид пдроксиламіну (550мг, 7,92 ммоль), з наступним повільним додаванням насиченого розчину карбонату натрію (326мг, 3,8 ммоль) у воді (1,02мл) Після перемішування про 41 тягом тридцяти хвилин до реакційної суміші додають ефір і два шари розділяють Органічний шар конденсують і розчиняють в етанолі (Юмл) До киплячого зі зворотним холодильником етанольного розчину додають натрій (1,8г, 78,3 ммоль) протягом однієї години й отриману суміш нагрівають протягом ще 2,5 годин Після видалення етанолу додають н-пропанол (10 мл), ефір (25мл) і воду (Змл) Органічний шар сушать над сульфатом магнію і фільтрують Концентрація розчинників дає суміш (2-транс)-4-амшо-2-метилциклогексанолу у виді білої твердої речовини Приклад проміжної сполуки 17 Дипдрохлорид 2-метокси-4,5-діамінофенолу Сполуку, названа в заголовку, одержують гідруванням 2-метокси-4,5-динітрофенолу за методикою Ehrhch etal , J Org Chem , 1947,12, 522 Приклад проміжної сполуки 18 7-пдрокси-6-метоксихіноксалін~2-ол і 6пдрокси-7-метоксихіноксалш-2-ол Сполуки, названі в заголовку, одержують з дипдрохлориду 4-метокси-5-пдроксибензол-1,2діаміну взаємодією з NaOH і етилглюксалатом, використовуючи методику приклада проміжної сполуки 2 Приклад проміжної сполуки 19 7-пдрокси-6-метокси-2-хлорхіноксалші 6пдрокси-7-метокси-2-хлорхшоксалін Сполуку, названі в заголовку, одержують з 7гідрокси-б-метоксихіноксалін-2-олу і 6-пдрокси-7метоксихіноксалш-2-олу шляхом реакції з РОСІз, використовуючи методику приклада проміжної сполуки З Сполуки формули І, що описані тут інгібують придушення проліферації клітин і/або продукцію клітинного матрикса і/або рух клітин (хемотаксис) шляхом придушення тирозинкіназної активності ТФР-Р Велике число хворобливих станів викликається або неконтрольованою репродукцією клітин, або надмірною продукцією матрикса, або погано регульованим запрограмованим відмиранням клітин (апоптоз) Ці хворобливі стани охоплюють ряд типів клітин і включають такі захворювання, як лейкемія, рак, глюбластома, псоріаз, запальні захворювання, захворювання кісток, фіброзні захворювання, атеросклероз і відбуваються після анпопластики коронарних, стегнових артерій і артерій нирок, або фібропроліферативні захворювання, такі як артрит, фіброз легенів, нирок і печінки Зокрема, ТФР і ТФР-Р, як повідомляється, зв'язані зі специфічними типами раку і пухлин, такими як рак головного мозку, рак яєчників, рак товстого кишечнику, рак простати, рак легенів, саркома Капоши і злоякісна меланома Крім того, стани розрегульованої клітинної проліферації настають після операцій коронарного шунтування Придушення активності тирозинкінази, як думають, корисно для боротьби з нерегульованою репродукцією клітин або надмірною продукцією матрикса або погано регульованою запрограмованою загибеллю клітин (апоптоз) Даний винахід відноситься до модуляції і/або придушенню сигналів клітин, клітинної проліферації і/або продукції клітинного матрикса, і/або руху клітин (хемотаксису), боротьбі з ненормальним ростом клітин і регуляції запальної ВІДПОВІДІ КЛІТИН 59480 42 Більш конкретно, даний винахід відноситься до застосування заміщених ХІНОЛІНОВИХ І хіноксалінових сполук, що виявляють селективне придушення диференціації, проліферації, продукції матрикса, або хемотаксису виділення медіатора шляхом ефективного інгібування тирозинкіназної активності рецепторів отриманого з тромбоцитів фактора росту (ТФР-Р) Ініціалізація аутофосфорилювання, тобто фосфорилювання самих рецепторів фактора росту, і фосфорилювання господаря внутрішньоклітинних субстратів є деякими з біохімічних процесів, що беруть участь у сигналах клітин, КЛІТИННІЙ проліферації, продукції матрикса, хемотаксисі і виділенні медіатора Завдяки ефективному придушенню активності Lck тирозинкінази сполуки даного винаходу корисні також при лікуванні опірності трансплантації й аутоімунних захворювань, таких як ревматоїдний артрит, розсіяний склероз і системний червоний вовчак, при відторгненні трансплантата, при реакції трансплантата-проти-господаря, при захворюваннях з пперпроліферацією, таких як пухлини і псоріаз, і при захворюваннях, при яких клітини одержують ттро-запальні сигнали, таких як астма, запальне захворювання кишечнику і панкреатит При лікуванні опірності трансплантації, сполука даного винаходу може або використовуватися або профілактично у ВІДПОВІДЬ на антагоністичну реакцію людського організму на трансплантований орган або тканину При профілактичному використанні сполуку даного винаходу вводять пацієнту або в тканину в або орган, що будуть трансплантовані, перед операцією трансплантації Профілактичне лікування може також включати застосування лікарського лікування після операції трансплантації, але до того, як з'являться ознаки реакції антагонізму до трансплантата При застосуванні у ВІДПОВІДЬ на реакцію антагонізму сполуку даного винаходу вводять безпосередньо пацієнту, щоб впливати на опірність трансплантації після того, як проявилися видимі ознаки несприйнятливості до трансплантації ВІДПОВІДНО ДО додаткової ознаки даного винаходу представлений спосіб придушення тирозинкіназної активності ТФР, що включає контактування сполуки за п 1 зі структурою, що містить тирозинкіназу ТФР ВІДПОВІДНО ДО наступної ознаки даного винаходу представлений спосіб придушення тирозинкіназноїактивності Lck, що включає контактування сполуки за п 1 з композицією, що містить тирозинкіназу Lck ВІДПОВІДНО ДО наступної ознаки даного винаходу представлений спосіб лікування пацієнта, що страждає від патологічних станів, які можуть бути полегшені або відвернені введенням інгібітору активності тирозинкінази N ТФР-Р і/або тирозинкіназної активності Lck, або підданих їм, наприклад, таких станів, що описані тут раніше, що включає введення пацієнту ефективної КІЛЬКОСТІ сполуки формули І або композиції, що містить сполуку формули І, або його фармацевтичне прийнятної солі Згадування тут лікування потрібно розуміти так, що воно включає профілактичну терапію, а також лікування встановлених станів 43 Даний винахід включає також у свій обсяг фармацевтичні композиції, що містять фармацевтичне прийнятну КІЛЬКІСТЬ, щонайменше, однієї з сполук формули І у сполученні з фармацевтичне прийнятним носієм, наприклад, допоміжною речовиною, розріджувачем (розчинником), покриттям і наповнювачем (основою) На практиці, сполуки або композиції для лікування згідно з даним винаходом можна вводити в будь-якому виді з розмаїтості придатних лікарських форм, наприклад, шляхом інгаляції, місцеве, парентерально, ректальне або перорально, більш переважно, перорально Більш конкретні шляхи введення включають внутрішньовенний, внутрішньомгязовий, підшкірний, внутрішньоочний, внутрішньосуглобний, у товстий кишечник, перитонеальний, трансепітеліальний, включаючи трансдермальний, в очі, під'язикове, защічно, дермальний, назальною інгаляцією за допомогою вдмухування й у виді аерозолю Сполуки формули І можуть бути представлені у формі, що дозволяє введення багатьма придатними шляхами, і даний винахід відноситься також до фармацевтичних композицій, що містять, щонайменше, одну спонуку згідно з даним винаходом, що придатні для використання як лікарський засіб для пацієнта Ці композиції можуть бути отримані звичайними методами з використанням одного або більше з фармацевтичне прийнятних допоміжних речовин або наповнювачів ДОПОМІЖНІ речовини включають, серед іншого, стерильні водяні середовища і різні нетоксичні органічні розчинники Дані композиції можуть бути представлені у виді таблеток, пігулок, гранул, порошків, водяних розчинів або суспензій, ІН'ЄКЦІЙНИХ розчинів, еліксирів або сиропів і можуть містити один або більше із засобів, обраних із групи, що складається з підсолоджувачів, таких як сахароза, лактоза, фруктоза, або сахарин Nutrasweet®, що поліпшують смак і запах добавок, таких як масло перцевої м'яти, гаультеріеве масло або вишнева або апельсинова смакові й ароматизуючі добавки, барвники або стабілізатори, такі як метил- або пропілпарабен, для одержання фармацевтично прийнятних препаратів Вибір носія і вміст активної речовини в носи звичайно визначаються ВІДПОВІДНО до розчинності і ХІМІЧНИХ властивостей продукту, конкретним способом введення й умовами, що повинні дотримуватися у фармацевтичній практиці Наприклад, наповнювачі, такі як лактоза, цитрат натрію, карбонат кальцію, двозаміщений фосфат кальцію, і дезштегруючі речовини, такі як крохмаль, альгинові кислоти і деякі складні силікагелі, у сполученні з поліпшуючими ковзання речовинами, такими як стеарат магнію, лаурилсульфат натрію і тальк, можуть використовуватися для виготовлення таблеток, коржів, пігулок, капсул і тому подібного Для одержання капсул сприятливе використання лактози і рідкого носія, такого як поліетиленгліколи з високою молекулярною вагою РІЗНІ ІНШІ матеріали можуть бути присутнім як покриття або, в іншому випадку, для модифікації фізичної форми дозованого елемента Наприклад, таблетки, пігулки або капсули можуть бути покриті шелаком, цукром або ними обома Коли використовуються водяні су 59480 44 спензм, вони можуть містити емульгуючі речовини, або речовини, що полегшують суспендування Розріджувачі, такі як сахароза, етанол, полюли, такі як поліетиленгліколь, пропілен гліколь і гліцерин, і хлороформ, або їхні суміші, також можуть використовуватися Крім того, активна сполука може бути включена в препарати і лікарські форми з уповільненим вивільненням Для перорального введення активна сполука може застосовуватися, наприклад, з інертним розріджувачем або із засвоюваним харчовим носієм, або вона може бути укладена у тверді або м'які тонкі желатинові капсули, або и можна пресувати в таблетки, або вона може бути включена безпосередньо в харчовий продукт раціону, або може бути перемішана з наповнювачем і використана у виді проковтуваних таблеток, защічних таблеток, пастилок, капсул, еліксирів, суспензій, сиропів, облаток і тому подібного Для парентерального введення використовуються емульсії суспензії або розчини сполук згідно з даним винаходом в рослинній олії, наприклад, кунжутній олії, арахісовому маслі або маслиновій олії, або у водно-органічних розчинах, таких як вода і пропіленгліколь, ІН'ЄКЦІЙНІ органічні складні ефіри, такі як етилолеат, а також стерильні водяні розчини фармацевтично прийнятних солей ІН'ЄКЦІЙНІ форми повинні бути рідкими до такого ступеня, щоб їх можна було легко вводити через шприц, і відповідна плинність могла зберігатися, наприклад, застосуванням покриття, такого як лецитин, шляхом збереження необхідного розміру часток у випадку дисперсії, і шляхом використання поверхово-активних речовин Пролонговане усмоктування ІН'ЄКЦІЙНИХ КОМПОЗИЦІЙ може бути додано використанням речовин, що уповільнюють всмоктування, наприклад, моностеарату алюмінію і желатину Розчини солей продуктів згідно з даним винаходом особливо придатні для введення шляхом внутрішньом'язової або підшкірної ін'єкції Розчини активної сполуки у виді вільної основи або фармакологічно прийнятної солі можуть бути приготовлені у воді ВІДПОВІДНИМ чином змішаної з поверхнево-активною речовиною, таким як гідрокси пропіл целюлоза Дисперсія може бути виготовлена з гліцерином, рідкими поліетиленгліколями і їх сумішами, і в оліях Водяні розчини, що містять також розчини солей у чистій дистильованій воді, можуть використовуватися для внутрішньовенного введення за умови, що їх рН відрегульовано ВІДПОВІДНИМ чином, що вони розумно забуферені і зроблені ІЗОТОНІЧНИМИ за допомогою достатньої КІЛЬКОСТІ глюкози або хлориду натрію, і що вони стерилізуються нагріванням, опроміненням, мікрофільтрацією і/або за допомогою різних антибактеріальних і протигрибкових засобів, наприклад, парабенів, хлорбутанолу, фенолу, сорбінової кислоти, тимеросалу і тому подібного Стерильні ІН'ЄКЦІЙНІ розчини одержують шляхом включення активної сполуки в необхідній КІЛЬКОСТІ в придатний розчинник з різними іншими інгредієнтами з перерахованих вище, якщо необхідно, з наступною стерилізацією фільтруванням Звичайно дисперсії одержують шляхом включення різних стерильних активних інгредієнтів у стерильний носій, що містить основне дисперсійне 45 Альтернативний ПІДХІД ДЛЯ зведення до мінімуму вибування сполуки згідно з даним винаходом під час крізьшкірної, судинної доставки включає використання недифундируючіх мікрочастинок, що виділяють лікарську речовину Мікрочастинки можуть бути складені з ряду синтетичних полімерів, таких як полілактид, наприклад, або природними речовинами, включаючи білки або полісахариди Такі мікрочастинки уможливлюють стратегічну маніпуляцію перемінних, включаючи загальну дозу лікарської речовини і кінетику його вивільнення Мікрочастинки можуть бути ефективно введені ІН'ЄКЦІЄЮ В артеріальну або венозну стінку через пористий кульовий катетер або кулю на стенті і зберігаються в судинній СТІНЦІ І періадвентиціальній тканини протягом, щонайменше, приблизно двох тижнів Готові форми і методології для місцевої, внутрішньом'язової сайт-специфічної доставки терапевтичних засобів обговорюються Reissen et al (J Am Coil Cardiol 1994, 23 1234-1244), повний вміст яких включено в даний опис у виді посилання Композиція ЗГІДНО З даним винаходом може 46 також містити пдрогель, що готують з будь-якого біосумісного або нецитотоксичного (гомо або гетеро)полімеру, такого як гідрофільний полімер поліакрилової кислоти, що може діяти як абсорбуюча лікарську речовину губка Подібні полімери були описані, наприклад, у заявці W093/08845, повний зміст якої включено в даний опис у виді посилання Деякі з них такі як зокрема отримані з етилені/або пропіленоксиду є комерційно доступними При використанні сполук згідно з даним винаходом для лікування патолопй, що зв'язані з пперпроліферативними захворюваннями, сполуки згідно з даним винаходом можна вводити різними шляхами Для лікування рестенозу сполуки даного винаходу вводять безпосередньо в стінку кровоносної судини за допомогою кулі для анпопластики, що покрита гідрофільною плівкою (наприклад, пдрогелем), що насичується даною сполукою, або за допомогою якого-небудь іншого катетера, утримуючого інфузійну камеру для даної сполуки, що, таким чином, може бути точно застосований у МІСЦІ, що вимагає лікування, і дозволяє сполуці звільнятися локально й ефективно в МІСЦІ розташування клітин, що вимагають лікування Цей спосіб уведення переважно дає можливість сполуці швидко проконтактувати із клітинами, що потребують лікування 59480 середовище і необхідні ІНШІ інгредієнти з перерахованих вище У випадку стерильних порошків для виготовлення стерильних ІН'ЄКЦІЙНИХ розчинів кращими методами одержання є вакуумне сушіння і метод сушіння із замороженого стану, що дають порошок активного інгредієнта плюс будь-який додатковий бажаний інгредієнт, їхнього розчину попередньо стерилізованого фільтруванням Місцеве застосування можуть використовуватися гелі (на основі води або спиртів), креми або мазі, що містять сполуки даного винаходу Сполуки даного винаходу можуть бути також включені в гель або матриксну основу дня застосування в пластирі, що забезпечив би можливість контрольованого вивільнення сполуки через трансдермальнии бар'єр Для введення шляхом інгаляції сполуки даного винаходу можуть бути розчинені або суспендовані в придатному носи для використання в інгаляторі або в суспензії або розчині для одержання аерозолів, або можуть бути абсорбовані або адсорбовані на придатному твердому носи для використання в інгаляторі для сухого порошку Тверді композиції для ректального уведення включають супозиторії, сформовані відомими способами й утримуючі, щонайменше, одну сполуку формули І Композиції згідно з даним винаходом можуть бути створені способом, що протидіє швидкому виведенню із судинної (артеріальної або венозної) стінки шляхом конвекції і/або дифузії, підвищуючи тим самим час присутності вірусних часток у бажаному МІСЦІ дії Періадвентиціальне депо, що містить сполуку згідно з даним винаходом, може використовуватися для тривалого вивільнення Одним з таких депо, придатних для введення сполуки згідно з даним винаходом , може бути матриця із співполімеру, такого як етиленвшілацетат, або гель з ПОЛІВІНІЛОВОГО спирту, оточений оболонкою із силастику Альтернативно, сполука згідно з даним винаходом може доставлятися місцево із силіконового полімеру, імплантованого в адвентицій Спосіб лікування даного винаходу, переважно, складається у введенні сполуки згідно з даним винаходом в місце, де необхідне лікування Наприклад, пдрогель, що містить композицію, може бути поміщений безпосередньо на поверхню тканини, що має потребу в лікуванні, наприклад, під час хірургічного втручання Переважно, пдрогель вводять у бажане місце усередині судини за допомогою покриття катетера, наприклад, кульового катетера, і доставки в судинну стінку, переважно під час анпопластики При особливо переважному способі насичений пдрогель вводиться в місце, що вимагає лікування, за допомогою кульового катетера Куля може бути покрита захисною оболонкою, коли катетер просувається до цільової судини, щоб звести до мінімуму вимивання лікарської речовини після введення катетера в кров'яне русло Інше втілення даного винаходу представляє сполука згідно з даним винаходом , яку потрібно вводити за допомогою перфузійних куль Ці перфузійні кулі, що уможливлюють збереження кровотоку і, таким чином, знижують ризик ішемії міокарда після надування кулі, також дають можливість локальної доставки сполуки при нормальному тиску протягом відносно тривалого часу, протягом більш, ніж двадцяти хвилин, що може бути необхідно для її оптимальної дії Альтернативно, може використовуватися канальний кульовий катетер («канальний кульовий катетер для анпопластики», Mansfield Medical, Boston Scientific Corp , Watertown, MA) Останній складається зі звичайної кулі, покритої шаром з 24 перфорованих каналів, що перфузуються через незалежний просвіт крізь додаткові інфузійні отвори РІЗНІ ТИПИ кульових катетерів, таких як з подвійною кулею, пористою кулею, мікропористою кулею, кулею з каналом, кулею поверх стінта і пдрогелевим катетером, усі з яких можуть використовуватися при практичному 47 59480 здійсненні винаходу, розкриті в Reissen et al (1994), повний вміст якої включено сюди у вигляді посилання Застосування перфузійного кульового катетера особливо сприятливо, тому що її переваги, що куля може залишатися надутою протягом більш тривалого періоду часу при збереженні властивостей полегшеного ковзання, і сайт-специфічність пдрогелю, досягаються одночасно Інший аспект даного винаходу відноситься до фармацевтичної композиції, що містить сполуку згідно з даним винаходом і полоксамер, такий як полоксамер 407, що є нетоксичним бюсумісним полюлом, що є комерційне доступним (BASF, Parsippany, NJ) Полоксамер, просочений сполукою згідно з даним винаходом, може бути поміщений безпосередньо на поверхні тканини, що має потребу в лікуванні, наприклад, під час хірургічного втручання Полоксамер володіє власне кажучи тими ж перевагами, що і пдрогель, і в той же час має меншу в'язкість Застосування кульового катетера з каналом з полоксамером, просоченим сполукою згідно з даним винаходом, особливо сприятливо У цьому випадку ті переваги, що куля як може підтримуватися надутою протягом тривалого періоду часу при збереженні властивостей полегшеного ковзання, так і наявність сайт-специфічності полоксамера, досягаються одночасно Процентний вміст активного інгредієнта в композиціях даного винаходу може мінятися, необхідно, щоб він складав би таку частину, що виходила б відповідна доза Безумовно, кілька дозованих форм можуть застосовуватися одночасно Застосовувана доза може визначатися лікарем або кваліфікованим медичним персоналом і залежить від бажаного терапевтичного ефекту, шляху введення і тривалості лікування, і стану пацієнта Для дорослі дози звичайно рівні від приблизно 0,001 до приблизно 50, переважно, від приблизно 0,001 до приблизно 5мг/кг вага тіла на добу при інгаляції, від приблизно 0,01 до приблизно 100, переважно від 0,1 до 70, більш конкретно від 0,5 до 10мг/кг ваги тіла на добу при пероральному прийомі і від приблизно 0,001 до приблизно 10, переважно від 0,01 до 10мг/кг ваги тіла на добу при внутрішньовенному введенні У кожному конкретному випадку дози визначаються ВІДПОВІДНО ДО факторів, обумовлених для пацієнта, якого потрібно лікувати, такими як вік, вага, загальний стан здоров'я й ІНШІ характеристики, що можуть впливати на ефективність сполуки згідно з даним винаходом Сполуки/композиції згідно з даним винаходом можна вводити так часто, як необхідно, щоб одержати бажаний терапевтичний ефект Деякі пацієнти можуть швидко реагувати на більш високу або більш низьку дозу, і може виявитися, що адекватні значно більш слабкі підтримуючі дози Для інших пацієнтів може бути необхідно одержувати довгострокове лікування при частоті введення дози від 1 до 4 разів на добу ВІДПОВІДНО ДО фізіологічних потреб кожного конкретного пацієнта Звичайно активний продукт може прийматися перорально від 1 до 4 разів на добу Природно, для інших пацієнтів буде необхідно прописувати не більш одні 48 єі або двох доз на добу Сполуки даного винаходу також можуть бути виготовлені для застосування в сполученні з іншими терапевтичними засобами, такими засобами або в сполученні з застосуванням таких терапевтичних методик, щоб направити сили на фармакологічні умови, які можна поліпшити за допомогою застосування сполуки формули І, таких, котрі представлені в наступному нижче Сполуки даного винаходу можуть використовуватися при лікуванні рестенозу після анпопластики з застосуванням будь-якого пристрою, такого як балон, методи видалення або лікування лазером Сполуки даного винаходу можуть використовуватися при лікуванні рестенозу після вміщення стенту в судинну або систему як 1) первинного лікування блокади судин, або 2) у випадку, коли анпопластика з використанням будь-якого пристрою не здатна забезпечити відкриту артерію Сполуки даного винаходу можуть застосовуватися або перорально, парентеральним уведенням, або сполука могла б застосовуватися місцево за допомогою введення спеціального пристрою або у виді ВІДПОВІДНО виготовленого покриття на стентовому пристрої Полімерні матеріали, що підходять для включення сполуки даного винаходу включають полімери, що мають відносно низькі температури переробки, такі як полікапролуктон, полі(етилен-співвіншацетат) або полівінілацетат або силіконовий каучук і полімери, що мають подібні відносно низькі температури переробки Інші придатні полімери включають полімери, що не руйнуються, здатні нести і доставляти терапевтичні лікарські засоби, такі як латекси, уретани, полісилоксани, стиролетилен/бутиленстирольні блокспівполімери (СЕБС) і біорозкладальні, бюабсорбовані полімери, здатні нести і доставляти терапевтичні лікарські засоби, такі як полі-ОІ_-молочна кислота (DL-ПМК) і полі-Ьмолочна кислота (L-ПМК), полюртоефіри, ПОЛІМІнокарбонати, аліфатичні полікарбонати і поліфосфазени Порозиген може бути також включений у' полімер, навантажений лікарською речовиною, шляхом додавання порозигену до полімеру разом з терапевтичним лікарським засобом з утворенням пористої, навантаженої лікарською речовиною полімерної мембрани "Порозиген" означає будь-який компонент, такий як мікрогранули хлориду, натрію, або лактози гепарину натрію, наприклад, що будуть розчинятися або ж руйнуватися при зануренні в рідини організму, залишаючи після себе пористу мережу в полімерному матеріалі Пори, що залишаються такими порозигенами, можуть звичайно бути такого великого розміру, як 10 мікрон Пори утворені порозигенами, такі як у поліетиленгліколі (ПЕГ), поліетиленоксид/поліпропіленоксидних (ПЕО/ППО) співполімерах, наприклад, можуть бути також і менш одного мікрона, хоча ІНШІ подібні матеріали, що утворять фазові розділи з безупинною полімерною матрицею, навантаженою лікарською речовиною, і можуть пізніше вимиватися рідинами організму, також можуть бути придатними для утворення пір менш одного мікрона Полімерний матеріал може наноситися на стент, при 49 59480 чому терапевтична лікарська речовина і матеріал порозигену містяться в полімерному матеріалі, що дає можливість порозигену бути розчиненим або зруйнованим рідинами організму, коли стент поміщають у кровоносну судину, або альтернативно, порозиген може бути розчинений і вилучений з полімерного матеріалу з утворенням пір у полімерному матеріалі перед вміщенням полімерного матеріалу, з'єднаного зі стентом у кровоносну судину Якщо бажано, може також застосовуватися регулююча швидкість вивільнення мембрана поверх навантаженого лікарською речовиною полімеру, щоб обмежити швидкість вивільнення сполуки даного винаходу Регулююча швидкість вивільнення мембрана може бути також додана шляхом нанесення покриваючої форми, розчину або ламінування Регулююча швидкість вивільнення мембрана, що наноситься на полімерний матеріал, може формуватися так, що вона включає рівномірну дисперсію порозигену в регулюючій швидкість вивільнення мембрані, і порозиген у регулюючій швидкість вивільнення мембрані може розчинятися, залишаючи пори в регулюючій швидкість вивільнення мембрані, звичайно такі великі, як 10 мікрон, або такі малі, як 1 мікрон, наприклад, хоча пори можуть бути також менш 1 мікрона Порозигеном в регулюючій швидкість звільнення мембрані може бути, наприклад, хлорид натрію, лактоза, гепариннатрій, поліетиленгліколь, поліетиленоксид/поліпропіленоксидні співполімери і їхні суміші В іншому аспекті, покриття на стентовому пристрої може бути утворено нанесенням сполуки даного винаходу на, щонайменше, одну поверхню стентового пристрою з утворенням бюактивного шару, а потім нанесенням одного шару або більше з пористого полімерного матеріалу на бюактивний шар, так що пористий полімерний матеріал має товщину, достатню для забезпечення регульованого вивільнення сполуки В одному з аспектів пористий полімерний матеріал складається з поліаміду, парилену або похідного парилену, що наносяться безкаталізаторним осадженням з парової фази "Париленом" називається полімер на основі п-ксилену і виготовлений полімеризацією в газовій фазі, як описано в патенті США №5824049, включеному сюди у виді посилання Альтернативно пористий полімерний матеріал наноситься плазменним напилюванням Приклади полімерів, придатних для плазменного напилювання включають поліетиленоксид, поліетиленгліколь, поліпропіленоксид і полімери з метану, силікону, тетрафторетилентетраметилдисилоксану і тому подібного Інші системи придатних полімерів включають полімери, вироблені з фотополімеризованих мономерів, таких як рідкі мономери, переважно, що мають, щонайменше, два перехресно зв'язувальні С-С (вуглець-вуглець) ПОДВІЙНІ зв'язки, і які є негазоподібною полімеризованою нарощуванням етиленовоненасиченою сполукою, що має температуру кипіння вище 100°С при атмосферному тиску, молекулярну вагу, рівну приблизно 100-1500, і здатні до легкого утворення високомолекулярних 50 полімерів шляхом приєднання Більш переважно, коли мономер, переважно, є фотополімеризованим приєднанням поліетиленовоненасиченим складним ефіром акрилової або метакрилової кислоти, що містить дві акрилові або метакрилові групи або більше на молекулу або їхніми сумішами Типовими прикладами таких поліфункцюнальних акрилатів є етиленглікольдіакрилат, етиленгліколь-диметакрилат, триметилпропантриакрилат, триметилпропан-триметакрилат, пентаеритритолтетраакрилат або пентаеритритолтетраметакрилат, 1,6-гександюлдиметакрилат і діетиленгліколь-диметакрилат Також у деяких особливих випадках придатні моноакрилати, такі як н-бутилакрилат, нбутилметакрилат, 2-етилгексил-акрилат, лаурилакрилат і 2-пдроксипропілакрилат Також придатні невеликі КІЛЬКОСТІ амідів метакрилової кислоти, таких як бутиловий ефір N-метилолметакриламіду, N-ВЩІЛОВІ сполуки, такі як N-винілпіролідон, складні ВІНІЛОВІ ефіри аліфатичних монокарбонових кислот, такі як вшілолеат, прості ВІНІЛОВІ ефіри дюлів, такі як бутандюл-1,4-дившіловий простий ефір і аліловий простий ефір, і аліловий складний ефір Включаються також і ІНШІ мономери, такі як продукти реакції ди- або поліепоксидів, таких як бутандіол-1, 4-дигліцидиловий ефір або біс-фенол-Адигліцидиловий простий ефір з метакриловою кислотою Характеристики фотополімеризованого рідкого диспергованого середовища можуть бути модифіковані з конкретною метою шляхом ВІДПОВІДНОГО вибору мономерів і їхніх сумішей Інші придатні полімерні системи включають полімер, що є бюсумісним і дає мінімальне роздратування судинної стінки, коли імплантується стент Полімер може або бути бюстабільним або бюабсорбованим полімером у залежності від бажаної швидкості звільнення або бажаного ступеня стабільності полімеру Бюабсорбовані полімери, що могли б використовуватися, включають полі(Ьмолочну кислоту), полікапролуктон, полі(лактидспівгліколід), полі(пдроксибутират), полі(пдроксибутиратспіввалерат), полідюксанон, полюртоефір, поліанпдрид, полігліколеву кислоту, полі(О,І_-молочну кислоту), полі(гліколеву кислотаспівтриметилен-карбонат), поліфосфоефір, поліфосфоефіруретан, поліамшокислоти, ціаноакрилати, політриметиленкарбонат, полімшокарбонат, співполі(простий ефір-складні ефіри) (наприклад, ПЕО/ПЛК), поліалкіленоксалати, поліфосфазени і бюмолекули, такі як фібрин, фібриноген, целюлоза, крохмаль, колаген і палуронова кислота До того ж могли б використовуватися бюстабильні полімери з відносно низькою хронічною реакцією тканини, такі як поліуретани, силікони, поліефіри, і також могли б використовуватися ІНШІ полімери, якщо вони можуть бути розчинені і вулканізовані або полімеризовані на стенте, такі як полюлефіни, поліізобутилен і етилен-штьфаолефінові співполімери, акрилові полімери і співполімери, вшілгалогенідні полімери і співполімери, такі як полівінілхлорид, ПОЛІВІНІЛОВІ прості ефіри, такі як полівшілметиловий ефір, полівшіліден-галогеніди, такі як полівшіліденфторид і полівшіліденхлорид, поліакрилонітрил, полівінілкетони, полівшілароматичні сполуки, такі як полістирол, ПОЛІВІНІЛОВІ 51 59480 складні ефіри, такі як полівшілацетат, співполімери ВІНІЛОВИХ мономерів один з одним і олефінами, такі ж етиленметилметакрилатні співполімери, акрилонітрил-стирольні співполімери, смоли АБС (ABS) і етиленвшілацетатні співполімери, поліаміди, такі як найлон 66 і полікапролуктам, алкільні смоли, полікарбонати, полюксиметилени, ПОЛІМІди, поліефіри, епоксисмоли, поліуретани, целюлозний шовк, триацетатний шовк, целюлоза, ацетатцелюлоза, бутиратцелюлоза, бутиратацетатцелюлоза, целофан, нітратцелюлоза, пропюнатцелюлоза, прості ефіри целюлози і карбоксиметилцелюлоза На додаток до плазменного напилювання і напилювання з газоподібної фази, для нанесення різних покрить на поверхні стешу можуть застосовуватися ІНШІ методики Наприклад, полімерний розчин може бути нанесений на стент, і розчиннику дають випаруватися, у результаті чого на поверхні стента залишається покриття з полімеру і терапевтичної речовини Звичайно розчин може наноситися на стент або напилюванням розчину на стент або зануренням стента в розчин Сполуки даного винаходу можуть використовуватися при лікуванні рестенозу в сполученні з антикоагулянтом, анти-тромбоцитним, антитромбозним або профібринолітичним засобом Часто паралельно лікують перед, під час і після процедури втручання або для запобігання пагубних ефектів тромбоутворення Деякі приклади класів засобів, відомих як антикоагулянти, антитромбоцитні, антитромбозні і профібринолітичні засоби, включають будь-які препарати гепарину, гепарини з низькою молекулярною вагою, пентасахариди, антагоністи фібриногенових рецепторів, інгібітори тромбіну, інгібітори фактора Ха або інгібітори фактора Vila Сполуки даного винаходу можуть використовуватися в сполученні з будь-яким антиппертензивним засобом або засобом, що регулює рівень холестерину і ЛІПІДІВ, при лікуванні рестенозу або атеросклерозу одночасно з лікуванням високого тиску крові або атеросклерозу Деякі приклади засобів, що придатні для лікування тиску крові, включають сполуки наступних груп бетаблокатори, інгібітори АПФ, блокатори кальцієвих каналів і антагоністи альфа-адренорецепторів Деякі приклади засобів, що придатні для лікування підвищених рівнів холестерину або порушеної регуляції рівнів ЛІПІДІВ, включають сполуки, ВІДОМІ ЯК інгібітори Гмг-КоА, сполуки фібратної групи Сполуки даного винаходу можуть використовуватися при лікуванні різних форм рака або окремо, або в сполученні зі сполуками, відомими як придатні для лікування раку Зрозуміло, що даний винахід включає сполучення сполук даного винаходу з одним з вищезгаданих засобів груп терапевтичних препаратів або більше, Сполуки, що входять в обсяг даного винаходу, виявляють явну фармакологічну активність в іспитах, описаних у літературі, результати яких, як думають, корелюють з фармакологічною активністю в людей і інших ссавців Приведені далі результати ІСПИТІВ in vitro і in vivo є типовими для характеристики сполук даного винаходу 52 Розділ виготовлення фармацевтичних композицій і фармакологічних ІСПИТІВ Сполуки, що входять в обсяг даного винаходу, виявляють значну активність як інгібітори протеїну тирозинкінази і мають терапевтичне значення як засоби проти клітинної проліферації для лікування деяких патологічних станів, включаючи поразки при псоріазі, атеросклерозі і рестенозі Сполуки, що входять в обсяг даного винаходу, здійснює модуляцію і/або придушення сигналів клітин і/або проліферації клітин, і/або продукції матрикса, і/або хемотаксису, і/або запальної реакції клітин і можуть використовуватися для профілактики або затримки прояву або повторної появи таких патологічних станів, або ж лікування зазначених патологічних станів Щоб визначити ефективність сполук даного винаходу, використовують фармакологічні іспити, описані нижче, що прийняті в даній області і, як встановлено, корелюють з фармакологічною активністю в ссавців Сполуки, що входять в обсяг даного винаходу, піддавалися цим різним іспитам, і отримані результати, як думають, корелюють з корисною активністю медіаторів клітинної диференціації Результати цих ІСПИТІВ, ЯК думають, подають достатню інформацію фахівцям в області фармакологічної і медичної хімії для визначення параметрів для використання досліджуваних сполук при одному або більш з видів терапії, тут зазначених 1 Твердофазний імуноферментний аналіз (ELISA) аутофосфорилювання тирозинкінази ТФРР Зазначене в заголовку дослідження виконується, як описано в Dolle, et al (J Med Chem 1994, 37, 2627) що включена сюди у виді посипання, з виключенням використання лізатів клітин, отриманих із клітин гладких мя'зів людської аорти (КТМЛА == HAMSC), як описано нижче 2 Загальна методика вивчення мітогенеза а Клітинна культура Клітини гладких м'язів людської аорти (пасажі 4-9) засівають на 96 лункові планшети в підтримуюче ріст середовище при ЩІЛЬНОСТІ 6000 клітин на лунку і дають рости 2-3 дні При приблизно 85% злитті ріст клітин зупиняють за допомогою без сироваткового середовища (БСС = SFM) Ь Дослідження мітогенеза Через 24 години після видалення сироватки середовище видаляють і заміняють випробуваною сполукою/носієм у БСС (200мкл/мл) Сполуки солюбілізують у КЛІТИННІЙ культурі ДМСО при концентрації 10 мм і роблять додаткові розведення в БСС Через ЗОхв попередньої інкубації зі сполукою клітини стимулюють ТФР при 10нг/мл Визначення роблять у двох повторюваностях осередків зі стимульованими і не стимульованими клітинами для кожної концентрації сполуки Через чотири години додають 1 мкКи3 Нтимідину/лунка Культури термінують через 24 години після додавання фактора росту Клітини знімають трипсином і збирають на пластину фільтра, застосовуючи автоматизований колектор клітин (Wallac MaспІІ96) 3 пластинки фільтра роблять підрахунок 53 59480 на сцинтиляційному лічильнику (Wallac Betaplate) для визначення включеної в ДНК мітки 3 Іспит на хемотаксис Клітини гладких м'язів людської аорти (КГМЛА) з більш ранніх пасажів отримані з АТСС Клітини вирощують у Clonetics SmGM 2 SmgleQuots (використовуються середовище і клітини з пасажів 410) Коли клітини зливаються до 80%, у середовище додають флуоресцентну пробу, кальцеїн ДМ (5мМ, Molecular Probe) і клітини інкубують протягом ЗОхв Після промивання буферним розчином солі з ГЕПЕС клітини знімають за допомогою трипсину і нейтралізують за допомогою буфера MCDB 131 (Gibco) з 0,1% БСА, ЮмМ глютаміну і 10% плідної бичачої сироватки Після центрифугування клітини промивають ще один раз і знову суспендують у тім же буфері без плідної бичачої сироватки до ЩІЛЬНОСТІ 30000 клітин/50 мл Клітини інкубують з різними концентраціями сполуки формули І (кінцева концентрація ДМСО = 1%) протягом ЗОхв при 37°С Для ІСПИТІВ хемотаксису використовують 96-лункові модифіковані камери Boyden (Neuroprobe, Inc) і полікарбонатну мембрану з розмірами пір 8 MM (Poretics, CA) Мембрану покривають колагеном (Sigma C3657, 0,1мг/мл) ТФР-рр (PDGF-pp) (Знг/мл) у буфері зі сполукою формули І або без неї поміщають у нижчу камеру Клітини (30000) з інгібітором або без інгібітору поміщають у верхню камеру Клітини інкубують протягом 4 годин Фільтрувальну мембрану видаляють і клітини з верхньої сторони мембрани видаляють Після висушування вимірюють флуоресценцію на мембрані, використовуючи Cytofluor II (Milhpore) при довжинах хвиль порушення випромінювання 485/530нм У кожнім експерименті середню клітинну міграцію одержують із шести повторюваностей Відсоток придушення визначають за значеннями контролю з обробкою ДМСО По п'ятьох крапках залежного від концентрації придушення розраховують значення ІС50 Результати представлені як середнє ± СКО по п'ятьох таких експериментах 4 Очищення ЕФР-рецепторів Очищення ЕФР-рецепторів засноване на методиці Yarden and Schlessmger Клітини А431 вирощують у 80см2 суліях до зливального росту (2 х 107 клітин на сулію) Клітини промивають ДВІЧІ ФБФР (PBS) і збирають ФБФР, що містить 11,0 ммоль ЕДТУ (1 година при 37°С, і центрифугують при 600д протягом Юхв Клітини солюбілізують у 1мл на 2 х 107 клітин холодного буфера для солюбілізацм (50 ммоль буфер ГЕПЕС, рН 7,6, 1% тритон Х-100, 150 ммоль NaCI, 5 ммоль ЕГТУ, 1 ммоль ФМСФ, 50мг/мл апротиніну, 25 ммоль бенамідину, 5мг/мл лейпептину і 10мг/мл інгібітору трипсину соєвих бобів) протягом 20хв при 4°С Після центрифугування при ЮООООд протягом ЗОхв , супернатант завантажують на колонку агарози WGA (ЮОмл упакованої смоли на 2 х 107 клітин) і струшують протягом 2 годин при 4°С Неабсорбований матеріал видаляють і смолу ДВІЧІ промивають буфером ГТН (HTN) (50 ммоль ГЕПЕС, рН 7,6, 0,1% тритон XI 00, 150 ммоль NaCI), ДВІЧІ буфером ГТН, що містить 1М NaCI і ДВІЧІ буфером ГТНГ (HTNG) (50 ммоль ГЕПЕС, рН 7,6, 0,1% тритон Х-100, 150 ммоль NaCI і 10% гліцери 54 ну) Рецептори ЕФР елююють партіями буфером ГТНГ, що містить 0,5М N-ацетил-О-глюкозамш (200мл на 2 х 107 клітин) Елюйований матеріал зберігають в аліквотних зразках при -70°С і розбавляють перед використанням буфером ТМТНГ (TMTNG) (50 ммольтрис-мес буфера, рН 7,6, 0,1% тритон Х-100,150 ммоль NaCI, 10% гліцерину) 5 Придушення аутофосфорилювання ЕФР-Р Клітини Д431 вирощують до'Зливального росту на покритих фібронектином чашках для культур тканин Після промивання 2 рази крижаним ФБФР клітини лізують додаванням 500мл/чашку буфера для лізису (50 ммоль ГЕПЕС, рН 7,5, 150 ммоль NaCI, 1,5 ммоль МдСІ2, 1 ммоль ЕГТУ, 10% гліцерин, 1% тритон Х-100, 1 ммоль ФМСФ, 1мг/мл апротиніну, 1мг/мл лейпептину) і інкубації протягом 5хв при 4°С Після стимуляції ЕФР (500мг/мл, Юхв при 37°С) виконується імунопреципітація з анти-ЕФР-Р (АЬ 108) і зразок реакції аутофосфорилювання (50мл аліквотні проби, ЗмКи [д2 Р]АТФ) проводиться в присутності від 2 до ЮмМ сполуки даного винаходу протягом 2хв при 4°С Реакцію зупиняють додаванням гарячого буфера для зразка для електрофорезу За аналізом ЕПАГДСН (SDA-PAGE) (7,5% els) слідує ауторадюграфія, і реакцію оцінюють КІЛЬКІСНО за допомогою денситометричного сканування рентгенівських плівок, а Культура клітин Клітини, названі HER 14 і К721 А, одержують трансфікуванням клітин NIH3T3 (клон 2 2) (від С Frylmg, NCI, NIHJs у яких відсутні ендогенні рецептори рецепторів ЕФР, з конструкціями кДНК рецепторів ЕФР дикого типу або мутантних рецепторів ЕФР, в яких відсутня тирозинкіназна активність (в якій Lys 721 в сайті зв'язування АТФ замінений на Ala залишок, ВІДПОВІДНО) УСІ КЛІТИНИ вирощують на МДСІ (DMEM) з 10% телячої сироватки (Нусіоп, Logan, Utah) 6 Селективність у порівнянні з РКА і РКС визначають, використовуючи набори, що є у продажу а Колориметричний набір, що проколюється для визначення РКА, формату Spmzyme (Pierce colonmetric РКА Assay Kit, Spmzyme Format) Короткий виклад методики РКА фермент (серця бика) 1Е/пробірку для визначення Пептидний субстрат кемптид (мічений барвником) 45 хвилин при 30°С Поглинання при 570нм b Колориметричний набір, що проколюється для визначення РКС, формату Spmzyme (Pierce colonmetric РКА Assay Kit, Spmzyme Format) Короткий виклад методики Фермент РКС (головний мозок пацюка) 0,025Е/пробірку для визначення Пептидний субстрат нейрогранин (мічений барвником) ЗО хвилин при 30°С Поглинання при 570нм 7 Визначення придушення активності тирозинкінази р56 1ск Придушення активності тирозинкінази р56 1ск визначають за методикою, описаною в патенті США №5714493, включеного сюди в виді посилай 55 59480 ня Як альтернативу придушення активності тирозинкінази визначають наступним методом Субстрат (утримуючий тирозин субстрат, Biot- ((ЗАІа) 3Lys-Val-Glu-Lys-lle-Gly-Glu-Gly-Thr-Tyr-Glu-Val-ValTyr-Lys-(NH2), який розпізнається по р56 1ск , 1мкМ) спочатку фосфорилюють у присутності або у відсутності даної концентрації випробуваної сполуки даною КІЛЬКІСТЮ ферменту (фермент одержують експресією гена р56 1ск у конструкції з дріжджів) виділеного й очищеного з тонованих дріжджів (очищення ферменту здійснюється класичними методами) у присутності АТФ (1 Омкм), МдСЬ (2,5мм), МпСІ2 (2,5мм), NaCI (25мм), ДТТ (0,4мм) у ГЕПЕС 50мм, рн 7,5 протягом Юхв при кімнатній температурі Загальний обсяг реакції складає 50мкл, і реакцію виконують у чорному 96лунковому флюоропланшеті Реакцію зупиняють додаванням 150мкл буфера, що зупиняє, (100мм ГЕПЕС рн 7,5, КФ 400мм, ЕДТУ 133мм, БСД 1г/л), що містить обрані антитирозинові антитіла, мічені криптатом європію (PY20-K) при 0,8мкг/мл і мічений нином стрептавідин (XL665) при 4мкг/мл Мічення стрептавідину й антитирозинових антитіл виконували в Cis-Bio International (France) Випромінювання суміші підраховують, використовуючи лічильник Packard Discovery, що здатний забезпечити визначення гомогенної передачі, що руйнується з часом, флуоресценції (порушення при 337нм, реєстрація при 620 нм і 665нм) Відношення сигналу при 665нм/сигналу при 620нм є мірою концентрації фосфорильованого тирозину, Порожній зразок одержують заміною ферменту буфером Специфічний сигнал являє собою різницю між відношенням, отриманим без інгібітору, і відношенням до порожнього зразка Відсоток специфічного сигналу вираховують ICso розраховують по 10 концентраціям інгібітору в двох повторюваностях, використовуючи програму Xlfit Сполукою для порівняння є стауроспорин (Sigma) і вона дає ІС50 рівну 30±6нм (т=20) 8 Визначення придушення пухлини in vitro Придушення росту пухлини in vitro сполуками даного винаходу визначають у такий спосіб ЛІНІЮ КЛІТИН ГЛІОМИ пацюків 36 (отриману з Комп'ютерна верстка О В Кураєв 56 АТСС) вирощують у виді моношарів у модифікованому Дульбекко середовищі Ігла, що містить 2мМ L-глютамшу, 200Ед/мл пеніциліну, 200мкг/мл стрептоміцину і доповненому 10% (об) прогрітої шактивованої плідної телячої сироватки Клітини в експонентній фазі росту обробляють трипсином, промивають ФБФР (PBS) і розбавляють до кінцевої концентрації 6500клітин/мл у повному середовищі Лікарська речовина, яку потрібно випробувати, або контрольний розчинник додають до суспензії клітин (2,5мл) в обсязі до 50мкл і додають 0,4мл 2,4% агару Noble Difco, що витримується при 45°С, і перемішують Суміш відразу ж виливають у чашки Петрі і залишають стояти протягом 5 хв при 4°С Число клітинних клонів (>60 клітин) підраховують через 12 днів інкубації при 37°С в атмосфері 5% СОг Кожну лікарську речовину випробують при концентрації 10, 1, 0,1 і 0,01мкг/мл (кінцева концентрація в агарі) у двох повторюваностях Результати виражають у відсотках придушення клоногенності стосовно контролів без впливу ЛІКІВ ІС50 визначають графічно по графіках у напівлогарифмічному масштабі середнього значення, обумовленого для кожної концентрації лікарської речовини 9 Визначення придушення пухлин in vivo Придушення росту пухлини in vivo сполуками даного винаходу визначають, використовуючи модель підшкірного ксенотрансплантату, як описано в патентах США №№5700823 і 5760066, при якій мишам імплантують клітини гліоми 36 і ріст пухлини вимірюють, використовуючи циркулів веньє Результати, отримані за допомогою вищенаведених експериментальних методів, свідчать, що сполуки, які входять в обсяг даного винаходу, мають корисні властивості придушення протеїну тирозинкінази рецепторів ТФР або властивостями придушення тирозинкінази Р561ск, і в такий спосіб мають терапевтичне значення Приведені вище результати фармакологічного іспиту можуть використовуватися для визначення дозування і способу введення для конкретного підбора терапії Даний винахід може бути втілений в інших конкретних формах без відходу від його сутності або істотних ознак Підписано до друку 06 10 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна