Штам гриба penicillium sclerotiorum 8н – продуцент пектинестерази та біотину

Штам гриба Penicillium sclerotiorum ν. Beyma 8Н – продуцент пектинестерази та біотину, депонований у Депозитарії мікроорганізмів Інституту мікробіології і вірусології НАН України під реєстраційним номером ІMB F-100042. (19) (21) 20041210946 (22) 29.12.2004 (24) 15.01.2007 (46) 15.01.2007, Бюл. №1, 2007р. (72) Айзенберг Вікторія Леонідівна, Захарченко Валентина Олексіївна, Супрун Світлана Михайлівна, Шинкаренко Любов Миколаївна, Капічон Ганна Павлівна, Твердохліб Ірина Олексіївна, Стойко Вікторія Іштванівна 3 77820 ни під реєстраційним номером Реnicillium sclerotiorum ν. Be yma 8H UMB F-100042. Штам гриба Реnicillium sclerotiorum 8H виділений зі зразка ґрунту, відібраного Н.М.Ждановой поблизу метрополітену в м. Ташкенті (Узбекистан) у 1991 році й ідентифікований В.О.За харченко з використанням визначників вітчизняних і закордонних авторів [5-8]. Штам отриманий методом ґрунтових розведень. Штам гриба Реnicillium sclerotiorum 8H відібраний по ознаці позаклітинного синтезу ПЕ і біотину. Культурально-морфологічні властивості гриба Реnicillium sclerotiorum ν. Be yma 8H Штам Реnicillium sclerotiorum v. Beyma 8H добре росте і спороносить на агаризованих живильних середовищах. На агаризованому середовищі Чапека колонії на 10 день росту войлочно-пухнасті, з піднятим центром, радіально- і концентрично-зональні, з рівним краєм, спочатку світло-жовтуваті, потім золотаво-жовті до жовтогарячих і блакитнуватозелених в окремих секторах, з мінливим фарбуванням залежно від кількісного співвідношення конідіальних структур і склероціїв, на зворотній стороні від незабарвлених до жовтих і жовтогарячих у різних секторах склероції утворюють добре виражені коростинки, оточені інкрустованими гіфами стерильного оранжево-червоного міцелію. Ексудат рясний, у краплях червоно-жовтогарячого кольору. Запах слабкий, грибний. При 37°С гриб не росте. Конідієносці відходять від субстрату і від гіф повітряного міцелію, (120-300)x(2,5-3,0)мкм, з верхівкою, розширений до 4,0-6,0мкм, гладкі. Кісточки одномутовчасті, що несуть у щільних пучках від 6 до 12 фіалід, (8,0-12,5)x(2,0-2,6)мкм. Конідії еліптичні, (2,4-3,3)x(1,8-3,00мкм, гладкі, у пухких колонках до 200мкм довжини. Склероції еліптичні, округлі, тверді, (170-400)x(150-300)мкм, незабарвлені, при дозріванні темнувато-бурі. Штам добре росте і утворює подібне спороносіння на штучни х живильних середовищах (сусловий агар, картопляно-глюкозний агар), синтетичних (середовище Сабуро, середовище Ролена), на живильних субстратах з пектинвмісною сировиною (буряковий жом, яблучні вижимки); слабкіше спороносить на середовищі Чапека. Діаметр колоній при 26±2°С на агаризованих живильних середовищах по днях: Агаризоване пивне сусло: 5 день - 20мм; 10 день - 58,0мм. Агаризоване середовище Чапека: 5 день 17,5мм; 10 день - 48,0мм. Картопляно-глюкозний агар: 5 день - 22,0мм; 10 день - 47,0мм. Середовище Сабуро: 5 день - 19,0мм; 10 день - 56,0мм. Середовище Ролена: 5 день -18,0мм; 10 день - 48,0мм. Колонії пігментовані. Пігмент червоножовтогарячого кольору. Фізіолого-біохімічні властивості гриба Реnicillium sclerotiorum v. Be yma 8H Гриб засвоює глюкозу, лактозу, галактозу, сахарозу, крохмаль, сорбіт, маніт, інулін, яблучну 4 кислоту. Засвоює амонійний, нітритний, нітратний азот. Асимілює кукурудзяний екстракт, мелясу, солодові паростки. Аероб. У процесі росту підкисляє середовище до величини рН 3,5. Оптимальна температура росту 28-30°С. Максимум утворення ферменту пектинестерази в культуральній рідини (КР) при глибинному культивуванні гриба на рідкому живильному середовищі з мінеральними солями і буряковим жомом у якості пектинвмісного індуктора спостерігається в період з 60 по 72год. росту одночасно з максимумом утворення біотину. ПЕ-активність визначають по тестованій методиці в стандартних умовах [9], кількість біотину по [10]. Найбільша кількість біомаси накопичується до 24год. росту мікромїцету. Найбільше значення активності ПЕ супроводжується підкисленням середовища, рН якого досягає самої низької величини за весь період культивування (рН 3,5) і корелює з показниками пектинестерази, що дає можливість контролювати процес одержання цільового продукту при промисловому виробництві пектолітичного ферментного препарату пектосклеротіорину. Штам Реnicillium sclerotiorum v. Beyma 8H стабільно зберігає високий рівень ферментативної активності в процесі зберігання і пересівів. Гриб Реnicillium sclerotiorum v. Beyma 8Н синтезує полігалактуроназу (ПГ) у незначних кількостях. При культивуванні на рідкому живильному середовищі з пектинвмісним індуктором штам Реnicillium sclerotiorum v. Beyma 8H синтезує переважно пектинестеразу (ПЕ) і біотин. Приклад 1 Посівний матеріал вирощують при 28±2°С в колбах ємністю 750мл на круговій качалці з 220 об./хв. протягом 60год. з 150мл середовища, що на 100мл дистильованої води містить, %: буряковий жом 2,00; калій фосфорнокислий однозаміщений 0,10; магній сірчанокислий 0,05; азотнокислий амоній 0,30. Джерела інформації 1. RU, 2022013, 1994. 2. Ленинджер А. Биохимия. – М.:Изд-во "Мир", 1976. 3. Фёдоров М.В. Микробиология. – М.: Изд-во сельскохозяйственной литературы, 1963. 4. SU, 1047956, 1983. 5. Пидопличко Н.М. Пеницилии. – К.: "Наукова думка", 1972. - C. 31. 6. Ramirez С. Manual and atlas of the Penicillia. – Amsterdam, New-York, Oxford: Elsevier Biomedical Press, 1982. - P. 34-36. 7. Raper K.B., Thorn С. A manual of the Penicillia. - Baltimor, Md USA: The Williams and Wilkins Co, 1949. - P. 160-163. 8. Sakaquchi Kin-Ichiro, Abe S. Atlas of microorganismus the PeniciJlia. - Kanehara Shuppan Co., Tokyo ltd, 1957. - P. 48-49. 9. Препараты ферментные: Методы определения пектолитической активности: ГОСТ 2028389. 10. Одинцова Е.Н. Микробиологические методы определения витаминов. – М., 1959. 5 Комп’ютерна в ерстка В. Сердюк 77820 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601