Противірусний лікарський засіб

1. Фармацевтична композиція для профілактики або лікування вірусних інфекційних захворювань, що містить сполуку, що представлена наступною загальною формулою (І): 2 3 80742 4 Е представляє простий зв’язок або подвійний заміщений -ОХ в положенні 4, X представляє атом зв’язок; водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену кожен представляє атом водню, гідроксильну алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю або груп у, аміногрупу (яка може бути моно- або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має дизаміщеною лінійною або розгалуженою 2-8 атомів вуглецю, В представляє оксогрупу, алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю), гідроксильну групу або =N-OR6, і R1, R2 і R3 можуть OZ, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що бути однаковими або різними і кожен представляє має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену гідроксильну гр упу або -OZ (де Z представляє алкенільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 4 атоми вуглецю). 2-4 атоми вуглецю; і 7. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 6, Z представляє лінійну або розгалужену алкільну що містить сполуку формули (І), її пролікарську груп у, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в розгалужену алкенільну групу, що має 2-4 атоми якій X представляє лінійну або розгалужену вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну алкільну гр упу, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю), або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 її пролікарську форму або її фармацевтично атомів вуглецю або лінійну або розгалужену прийнятну сіль. алкінільну групу, що має 2-8 атомів вуглецю, В 2. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 1, представляє оксогрупу або гідроксильну групу, і що містить сполуку формули (І) згідно з пунктом 1, R1, R2 і R3 кожен представляє гідроксильну груп у. що представлена наступною загальною формулою 8. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 1 (I’), її пролікарську форму або її фармацевтично або 2, що містить сполуку формули (І), її прийнятну сіль: пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій А представляє 3-індоліл. 9. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 8, R2 що містить сполуку формули (І), її пролікарську O B форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в HO O якій В представляє оксогрупу або гідроксильну E R1 груп у, і R1, R2 і R3 кожен представляє гідроксильну груп у. D 10. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 1 O NH або 2, що містить сполуку формули (І), її A R3 пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, яку вибирають зі сполук, O приведених нижче: (в якій А, В, D, зв’язок Е, R1, R2 і R3 є такими ж, як визначено в пункті 1). 3. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій А представляє феніл, заміщений -ОХ в положенні 4, X представляє атом водню, лінійний або розгалужений алкіл, що має 18 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну групу, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю. 4. Фармацевтична композиція згідно з будь-яким з пунктів 1-3, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій В представляє оксогрупу, атом водню, гідроксильну груп у або =N-OR 6. 5. Фармацевтична композиція згідно з будь-яким з пунктів 1-4, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє гідроксильну гр упу, аміногрупу або -OZ (де Z представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-4 атоми вуглецю). 6. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій А представляє феніл, O HO HO O O HO O NH O HO O No.1, O HO HO O O H3CO O NH HO O No.2, O 5 O HO 80742 HO 6 O O O HO H3CO HO OH O HO O O NH O H 3CO NH O HO O O No.3, No.8, O HO HO O O O HO HO O O O HO OH NH HO OH O HO NH OH HO O O No.4, No.9, O HO HO O O O HO HO HO O O HO O NH HO O O No.5, No.10, O HO HO O O HO O NH O HO OH O H 2N O O H 2N O HO NH O H 2N O O No.6, No.11, O HO HO O O HO O NH O O HO HO O O HO O HO NH HO O No.7, OH HO N H O NH O No.12, O 7 O HO 80742 HO HO HO2C O HO O NH 8 O O HO No.13, HO NO O HO O O NH NH NH 2 26. 11. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, яку вибирають зі сполук, приведених нижче: O HO O HO O No.14, O HO O HO 2C O O HO CO2 H HO O O HO HO NOCH 3 O O HO O NH O NH HO O O HO No.1, O No.15, CO2H HO HO2C HO2C NH O O O HO HO O O H3CO O HO 2C O NH HO 21, CO2H HO HO2C O NH HO 2C O OMe O HO OMe 22, HO O O O NH O No.3, 23, CO2H O O NH H 3CO O HO 2C HO HO2C O O H3CO CO2H HO HO2C O No.2, NH O O HO O HO O O HO HO 2C 24, O HO 2C 25, O CO2 H HO HO2C NH O NH HO O O No.5, N H 9 80742 10 O HO O HO HO HO NH 2 HO O O O HO O NH O NH O HO OH O No.14, HO O HO O HO NOCH 3 O HO No.6, O O HO NO O NH O HO HO O O HO O NH O No.15, CO2H HO HO2C O HO HO2C NH O O HO 2C O No.7, 21, O HO HO OH O CO2H HO HO2C O HO O NH O NH HO 2C O OMe OMe 22, HO CO2H HO HO2C O No.8, O NH O O HO 2C O HO HO O O HO O NH 23, CO2H HO HO2C OH O NH 24, CO2 H HO HO2C O No.9, O HO O O HO O NH O NH O O O HO 2C 25, CO2 H HO HO2C O HO No.12, O HO 2C HO O HO O NH O O HO 2C 26. 12. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її 11 80742 пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, яку вибирають зі сполук, приведених нижче: O HO 12 R2 O HO R1 HO O O O HO O NH B O E A R3 O D NH O HO O No.1, O HO HO O O HO O NH OH O HO O No.6, O HO HO O O HO O NH O HO O No.7, O HO HO OH O HO O NH O HO O No.8. 13. Фармацевтична композиція згідно з будь-яким з пунктів 1-12, де вірусним інфекційним захворюванням є ВГС. 14. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 13, де ВГС є вірус гепатиту С. 15. Сполука, що представлена наступною загальною формулою (І): (в якій А представляє феніл, заміщений -ОХ; X представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю; В представляє атом водню, гідроксильну групу, оксогрупу, -N(R4)(R5), =N-OH, =N-OR 6 або атом галогену; R4 і R5 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-6 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або R4 і R5 разом представляють 3-8 членне кільце; R6 представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю (яка може бути заміщена аміногрупою, яка може бути моно- або дизаміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю); D представляє атом водню або гідроксильну груп у; зв’язок Е представляє простий зв’язок або подвійний зв’язок; R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє атом водню, гідроксильну груп у, аміногрупу (яка може бути моно- або дизаміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю), OZ, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю; і Z представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю, за умови, що виключений випадок, в якому А є феніл, заміщений -ОХ в п-положенні, X є 2ізопентенільною групою або атом водню, В є оксогрупою, D є атомом водню, Е представляє подвійний зв’язок, і всі з R1-R3 є гідроксильними групами, і випадок, в якому А є феніл, заміщений ОХ в п-положенні, X є 2-ізопентенільною групою, В є оксогрупою, D є атомом водню, зв’язок Е представляє подвійний зв’язок, і всі з R1-R3 є метоксигрупами), 13 80742 14 її пролікарська форма або її фармацевтично її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль. прийнятна сіль. 16. Сполука, що представлена наступною 17. Сполука формули (І) згідно з пунктом 15 або загальною формулою (І): 16, що представлена наступною загальною формулою (I’), її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль: 2 R O B HO O R2 E O R1 B HO O E D R1 O NH A R3 O O (в якій А представляє феніл, заміщений -ОХ; X представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю; В представляє атом водню, гідроксильну групу, оксогрупу, -N(R4)(R5), =N-OH, =N-OR 6 або атом галогену; R4 і R5 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-6 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або R4 і R5 разом представляють 3-8членне кільце; R6 представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю (яка може бути заміщена аміногрупою, яка може бути моно- або дизаміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю); D представляє атом водню або гідроксильну груп у; зв’язок Е представляє простий зв’язок або подвійний зв’язок; R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє атом водню, гідроксильну груп у, аміногрупу (яка може бути моно- або дизаміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю), OZ, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю; і Z представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю, за умови, що виключений випадок, в якому А є феніл, заміщений -ОХ в п-положенні, і X є атомом водню, і випадок, в якому А є феніл, заміщений -ОХ в пположенні, X є 2-ізопентенільною групою, В є оксогрупою, D є атомом водню, зв’язок Е означає подвійний зв’язок, і всі з R-R3 є гідроксильними групами або метоксигрупами), D NH A R3 O (в якій А, В, D, зв’язок Е, R1, R2 і R3 є такими ж, як описано в пункті 15). 18. Сполука формули (І) згідно з пунктами 15-17, її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль, в якій X представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, і В представляє гідроксильну гр упу, оксогрупу або =N-OR6. 19. Сполука формули (І) згідно з будь-яким з пунктів 15-18, що представлена наступною формулою, її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль: O HO HO O O HO O NH OH OH HO O No.4, O HO HO O O HO O NH HO O No.6, O OH 15 80742 16 O HO O HO HO HO NO O NH 2 HO OH O O HO O NH HO O O NH O No.14, HO O HO O HO HO No.8, O O HO NOCH 3 O O NH HO HO O O HO O O No.15, OH NH CO2H HO HO2C HO HO2C O O NH HO 2C O No.10, 21, O HO H 2N O O CO2H HO HO2C O H 2N O O NH O OMe NH HO 2C 22, H 2N OMe CO 2H O HO O O O No.11, O NH O O O HO O HO O O HO O O NH n. 20. Сполука формули (І) згідно з будь-яким з пунктів 15-18, що представлена наступною формулою, її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль: HO O HO O No.12, O HO HO HO HO O HO O O NH O NH HO HO O No.13, O O O No.6, O OH 17 O HO 80742 18 CO2H HO HO2C HO OH O O HO O OMe NH HO 2C O O NH O HO2C NH NH O O CO2H HO HO2C O O O No.8, CO 2H O HO HO OMe 22, O O HO 2C 21, Представлений винахід стосується фармацевтичної композиції для профілактики і лікування захворювань викликаних вірусними інфекціями, і зокрема ВГС. У світі 100-200 мільйонів осіб інфіковано вірусом гепатиту С (ВГС) і як припускають більше ніж 2 мільйони інфікованих проживає в Японії. У приблизно 50% з цих пацієнтів розвивається хронічний гепатит, у приблизно 20% з цих пацієнтів розвивається цироз і рак печінки протягом тридцяти років або більше після інфікування. У приблизно 90% випадків рак печінки викликається згаданим гепатитом С. В Японії, більше ніж 20000 пацієнтів кожен рік помирають від раку печінки, що є наслідком інфікування ВГС. ВГС був відкритий у 1989 як первинний каузальний вірус не-А, не-В гепатиту після переливання. ВГС є РНК вірусом, що має оболонку, і його геном складається з однониткової (+) РНК. Він класифікується як гепацивірус що належить до родини Flavivirus. Оскільки ВГС ігнорується імунною системою хазяїна по причині, які досі ще не зрозумілі, відомо багато випадків, в яких інфікування відбувалось навіть коли інфікування вірусом відбувалося у дорослих з розвиненою імунною системою. Він потім розвивається у хронічний гепатит, цироз і рак печінки, і відома велика кількість пацієнтів, у яких рак печінки рецидивував внаслідок запалення, що мало місце в не-ракових місцях навіть, якщо рак видалявся хірургічно. Відповідно, бажаним є розвиток ефективних методів лікування гепатиту С і окремо від носотропічних методів, які пригнічують запалення шляхом використання протизапальних лікарських O n. 21. Фармацевтична композиція, що містить сполуку формули (І) згідно з будь-яким з пунктів 15-20, її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль. 22. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 21 для профілактики або лікування вірусних інфекційних захворювань. 23. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 22, де вірусним інфекційним захворюванням є ВГС. 24. Фармацевтична композиція згідно з пунктом 23, де ВГС є вірус гепатиту С. засобів, і особливо сильним суспільним бажанням є розробка лікарського засобу, що здатен зменшувати або викорінювати ВГС в уражених місцях печінки. На сьогоднішній день, тільки лікування інтерфероном є відомим способом лікування, що є ефективним при викоріненні ВГС. Однак, інтерферон є ефективним тільки у третьої частини всіх пацієнтів. Ефективність інтерферону, зокрема, проти ВГС генотипу 1b є надзвичайно низькою. Таким чином, дуже бажаною є розробка проти-ВГС лікарського засобу, що можу бути використаний замість або в комбінації з інтерфероном. В останні роки, хоча рібавірин (1-b-Dрібофуранозил-1Н-1,2,4-триазол-3-карбоксиамід) є комерційно доступним як терапевтичний лікарський засіб для лікування гепатиту С з суп утнім використання з інтерфероном, його ефективність залишається низькою, і ведеться пошук нових терапевтичних лікарських засобів для лікування гепатиту С. Крім того, хоча робляться спроби знищити вірус шляхом підвищення імунітету пацієнта через використання агоністів інтерферону, агоністів інтерлейкіну-12 і т.і., ефективних засобів не знайдено досі. З моменту клонування гену ВГС, хоча молекулярно біологічні методи аналізу розвиваються дуже швидко, механізми ι функціонування генів вірусів і функціонування різних вірусних протеїнів, механізми, що включають реплікацію вірусу з клітині хазяїні, тривале інфікування, патогенність і т.і., ще не повністю висвітлені. На даний час, не розроблені надійні системи тестування інфікування ВГС, що використовують культивовані клітини. Таким 19 80742 20 чином, все ще існує необхідність використання розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів методів дослідження з заміною вірусу, що вуглецю; використовують інші подібні віруси, при оцінці В представляє атом водню, гідроксильну анти-ВГС лікарських засобів. груп у, оксогрупу, -N(R 4)(R5), =N-OH, =N-OR6 або Однак, в останні роки стало можливим атом галогену; спостерігати реплікацію ВГС in vitro R4 і R5 можуть бути однаковими або різними і використовуючи не-стр уктурні частини домену кожен представляє атом водню, лінійну або ВГС. Як наслідок, анти-ВГС лікарські засоби зараз розгалужену алкільну груп у, що має 1-6 атомів можна легше оцінити за допомогою методу вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну реплікаційного дослідження [Непатентний груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або лінійну або документ 1]. Механізм реплікації РНК ВГС в цій розгалужену алкінільну груп у, що має 2-6 атомів системі є таким же самим як реплікація вуглецю, або R4 і R5 разом представляють 3-8 повнодовжинного геному РНК ВГС, що викликає членне кільце (наприклад, піперазинове, інфікування гепатоцитів. Таким чином, ця система піролідинове, піперидинове, морфолінове або може бути згадана як система дослідження, що гексаметиленімінове кільце); базується на клітинах корисних для R6 представляє лінійну або розгалужену ідентифікування сполук, що інгібують реплікацію алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю (яка ВГС. може бути заміщена аміногрупою, яка може бути Сполуки заявлені в представленому винаході моноабо ди-заміщеною лінійною або є сполуками, які інгібують реплікацію ВГС, що було розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 встановлено використовуючи згаданий вище атоми вуглецю); метод дослідження реплікону. Ці інгібітори D представляє атом водню або гідроксильну розглядаються як високоймовірні безпечні груп у; лікарські засоби для лікування ВГС. Ε представляє простий зв'язок або подвійний Непатентний документ 1: зв'язок; [V. Lohmann, et al., ed,( Science, 1999, Vol. 285, R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або p.110-113] різними і кожен представляє атом водню, Предметом представленого винаходу є гідроксильну груп у, аміногрупу (яка може бути забезпечення фармацевтичної композиції для моноабо ди-заміщеною лінійною або профілактики і лікування захворювань печінки розгалуженою алкільною групою, що має 1 - 4 викликах вірусними інфекціями і, зокрема, ВГС. атоми вуглецю),. -ΟΖ, лінійну або розгалужену Завдяки раніше проведеним дослідженням по алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну вирішенню згаданої вище проблеми, винахідники або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 даного винаходу встановили, що сполуки атоми вуглецю або лінійну або розгалужену представленого винаходу мають надзвичайно алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю; і, сильну анти-ВГС реплікаційну активність Ζ представляє лінійну або розгалужену результатом якої є інгібування проліферації ВГС, алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну наявність тільки помірної цитотоксичності in vitro і або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 надзвичайна користь як анти-ВГС атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену проофілактичного/терапевтичного агенту, що алкінільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю), її таким чином є об'єктом представленого винаходу. пролікарську форму або її фармацевтично Тобто, представлений винахід забезпечує прийнятну сіль. наступне (1)-(3). (2) Сполуку представлену приведеною вище (1) Фармацевтичну композицію для загальною формулою (І) (в якій кожен з символів у профілактики або лікування вірусних інфекційних формулі має ті ж самі значення як показано в захворювань, таких як ВГС, що містить сполуку згаданій вище загальній формулі (І), за умови, що представлену наступною загальною формулою (І): виключаються випадок, в якому А є 3-індоліл, випадок, в якому А є феніл заміщений -ОХ в пположенні, X є 2-ізопентенільною групою або атом водню, В є оксогрупою, D є атомом водню, зв'язок Ε представляє подвійний зв'язок, і всі з R1-R3 є гідроксильними групами, і випадок, в якому А є феніл заміщений -ОХ в п-положенні, X є 2ізопентенільною групою, В є оксогрупою, D є атомом водню, Ε представляє подвійний зв'язок, і всі з R1-R3 є метоксигрупами), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль. (3) Сполуку представлену приведеною вище (в якій загальною формулою (І) (в якій кожен з символів у А представляє феніл заміщений -ОХ або 3формулі має ті ж самі значення як показано в індоліл; згаданій вище загальній формулі (І), за умови, що X представляє атом водню, лінійну або виключаються випадок, в якому А є 3-індоліл, розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів випадок, в якому А є феніл заміщений -ОХ в пвуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну положенні і X є атомом водню, і випадок, в якому А груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або є феніл заміщений -ОХ в п-положенні, X є 2ізопентенільною групою, В є оксогрупою, D є 21 80742 22 атомом водню, зв'язок Ε представляє подвійний В представляє атом водню, гідроксильну зв'язок, і всі з R1-R3 є гідроксильними групами або груп у, оксогрупу, -N(R 4)(R5), =N-OH, =N-OR6 або метоксигрупами), її пролікарську форму або її атом галогену; фармацевтично прийнятну сіль. R4 і R5 можуть бути однаковими або різними і Далі приводиться більш детальне розкриття кожен представляє атом водню, лінійну або фармацевичної композиції для профілактики і/або розгалужену алкільну груп у, що має 1-6 атомів лікування захворювань викликаних вірусними вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну інфекціями, такими як ВГС, представленого груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або лінійну або винаходу. розгалужену алкінільну груп у, що має 2-6 атомів Слід відзначити, що термін "лікування", який вуглецю, або R4 і R5 разом представляють 3-8 використовується в представленому описі включає членне кільце; викорінення або зменшення ВГС шляхом R6 представляє лінійну або розгалужену введення фармацевтичної композиції алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю (яка представленого винаходу суб'єктові, що може бути заміщена аміногрупою, яка може бути тестується, супресії подальшої проліферації ВГС і моноабо ди-заміщеною лінійною або полегшення симптомів викликаних інфікуванням розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 ВГС. Прикладами симптомів викликаних атоми вуглецю); інфікуванням ВГС є гепатит С, цироз, фіброз D представляє атом водню або гідроксильну печінки і рак печінки, і переважно гепатит С груп у; Крім того, вираз - лінійні або розгалужені зв'язок Ε представляє простий зв'язок або алкенільні групи, що мають 2-8 атомів вуглецю, що подвійний зв'язок; використовується в представленому описі R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або стосується лінійних або розгалужених різними і кожен представляє атом водню, вуглеводневих груп, що мають 2-8 атомів вуглецю гідроксильну груп у, аміногрупу (яка може бути і які містять, принаймні, один подвійний зв'язок. моноабо ди-заміщеною лінійною або Крім того, вираз - лінійні або розгалужені алкінільні розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 групи, що мають 2-8 атомів вуглецю, що атоми вуглецю), -ΟΖ, лінійну або розгалужену використовується в представленому описі алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну стосується лінійних або розгалужених або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 вуглеводневих груп, що мають 2-8 атомів вуглецю атоми вуглецю або лінійну або розгалужену і які містять, принаймні, один потрійний зв'язок. алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю; і, "Пролікарська форма" представленого Ζ представляє лінійну або розгалужену винаходу стосується похідної сполуки формули (І), алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну що перетворюється у сполуку формули (І) або її або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 фармацевтично прийнятну сіль під дією атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену фізіологічних умов або завдяки сольволізу. Хоча алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю), пролікарська форма може бути інертною, коли її пролікарську форму або її фармацевтично вводиться пацієнтові, після попадання в тіло вона прийнятну сіль. перетворюється у активну сполук у формули (І). 2. Фармацевтична композиція згідно із Представленим винаходом є те що вищезгаданим в 1, що містить сполуку формули (І) розкривається далі. згідно із вищезгаданим в 1, що представлена 1. Фармацевтична композиція для наступною загальною формулою (I), її профілактики або лікування вірусних інфекційних пролікарську форму або її фармацевтично захворювань, що містить сполуку представлену прийнятну сіль: наступною загальною формулою (І): (в якій А представляє феніл заміщений -ОХ або 3індоліл; X представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю; (в якій А, В, D, зв'язок Е, R1, R2 і R3 є такими ж як описано у ви щезгаданому 1). 3. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій А представляє феніл заміщений -ОХ в положенні 4, X представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю або лінійну або 23 80742 розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю. 4. Фармацевтична композиція згідно з будьяким з вищезгаданих в 1-3, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій В представляє оксогрупу, атом водню, гідроксильну груп у або =N-OR 6. 5. Фармацевтична композиція згідно з будьяким з вищезгаданих в 1-4, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє гідроксильну груп у, аміногрупу, або OZ (де Ζ представляє лінійну або розгалужену алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю). 6. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій А представляє феніл заміщений -ОХ в положенні 4, X представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, В представляє оксогрупу, гідроксильну груп у або =Ν-OR6, і R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє гідроксильну гр упу або -OZ (де Ζ представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 14 атоми вуглецю). 7. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 6, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій X представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, В представляє оксогрупу або гідроксильну груп у, і R1, R2 і R3 кожен представляє гідроксильну гр упу. 8. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій А представляє 3-індоліл. 9. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 8, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, в якій В представляє оксогрупу або гідроксильну групу, і R1, R2 і R3 кожен представляє гідроксильну груп у. 10. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, яку вибирають з сполуки приведеної нижче. 24 25 80742 26 11. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 1 або 2, що містить сполуку формули (І), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, яку вибирають з сполуки приведеної нижче. 27 80742 28 12. Фармацевтична композиція згідно із вищезгаданим в 1 або 2, що містить сполуку формули (і), її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль, яку вибирають з сполуки приведеної нижче. 29 80742 13. Фармацевтична композиція згідно з будьяким вищеприведеним 1-12, де вірусним інфекційним захворюванням є ВГС. 14. Фармацевтична композиція згідно з вищеприведеним в 13, де ВГС є вірус гепатиту С. 15. Сполука, що представлена наступною загальною формулою (І): (в якій А представляє феніл заміщений -ОХ; X представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю; В представляє атом водню, гідроксильну груп у, оксогрупу, -N(R 4)(R5), =N-OH, =N-OR6 або атом галогену; 30 R4 і R5 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-6 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або R4 і R5 разом представляють 3-8 членне кільце; R6 представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю (яка може бути заміщена аміногрупою, яка може бути моноабо ди-заміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю); D представляє атом водню або гідроксильну груп у; зв'язок Ε представляє простий зв'язок або подвійний зв'язок; R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє атом водню, гідроксильну груп у, аміногрупу (яка може бути моноабо ди-заміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю), -ΟΖ, лінійну або розгалужену алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю; і, Ζ представляє лінійну або розгалужену алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю, за умови, що виключений випадок, в якому А є феніл заміщений -ОХ в п-положенні, X є 2ізопентенільною групою або атом водню, В є оксогрупою, D є атомом водню, Ε представляє подвійний зв'язок, і всі з R1-R3 є гідроксильними групами, і випадок, в якому А є феніл заміщений ОХ в п-положенні, X є 2-ізопентенільною групою, В є оксогрупою, D є атомом водню, зв'язок Ε представляє подвійний зв'язок, і всі з R1-R3 є метоксигрупами) її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль. 16. Сполука, що представлена наступною загальною формулою (І): (в якій А представляє феніл заміщений -ОХ; X представляє атом водню, лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-8 атомів вуглецю; 31 80742 32 В представляє атом водню, гідроксильну представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, оксогрупу, -N(R 4)(R5), =N-OH, =N-OR6 або груп у, що має 1-8 атомів вуглецю, лінійну або атом галогену; розгалужену алкенільну гр упу, що має 2-8 атомів R4 і R5 можуть бути однаковими або різними і вуглецю або лінійну або розгалужену алкінільну кожен представляє атом водню, лінійну або груп у, що має 2-8 атомів вуглецю, і В представляє розгалужену алкільну груп у, що має 1-6 атомів гідроксильну гр упу, оксогрупу або =N-OR6. вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну 19. Сполука формули (І) згідно з будь-яким із груп у, що має 2-6 атомів вуглецю, або лінійну або вищезгаданим в 15-18, що представляє сполуку розгалужену алкінільну груп у, що має 2-6 атомів наступної формули, її пролікарську форму або її вуглецю, або R4 і R5 разом представляють 3-8 фармацевтично прийнятну сіль. членне кільце; R6 представляє лінійну або розгалужену алкільну груп у, що має 1-8 атомів вуглецю (яка може бути заміщена аміногрупою, яка може бути моноабо ди-заміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю); D представляє атом водню або гідроксильну груп у; зв'язок Ε представляє простий зв'язок або подвійний зв'язок; R1, R2 і R3 можуть бути однаковими або різними і кожен представляє атом водню, гідроксильну груп у, аміногрупу (яка може бути моноабо ди-заміщеною лінійною або розгалуженою алкільною групою, що має 1-4 атоми вуглецю), -ΟΖ, лінійну або розгалужену алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю або лінійну або розгалужену алкінільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю; і, Ζ представляє лінійну або розгалужену алкільну гр упу, що має 1-4 атоми вуглецю, лінійну або розгалужену алкенільну груп у, що має 2-4 атоми вуглецю, або лінійну або розгалужену алкінільну групу, що має 2-4 атоми вуглецю, за умови, що виключений випадок, в якому А є феніл заміщений -ОХ в п-положенні і X є атомом водню, і випадок, в якому А є феніл заміщений -ОХ в пположенні, X є 2-ізопентенільною групою, В є оксогрупою, D є атомом водню, зв'язок Ε означає подвійний зв'язок, і всі з R1-R3 є гідроксильними групами або метоксигрупами), її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль. 17. Сполука формули (І) згідно із вищезгаданим в 15 або 16, що представлена наступною загальною формулою (l'), її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль: 20. Сполука формули (І) згідно з будь-яким із вищезгаданим в 15-18, що представляє сполуку наступної формули, її пролікарську форму або її фармацевтично прийнятну сіль. (в якій А, В, D, зв'язок Е, R1, R2 і R3 є такими ж як описано у ви щезгаданому 15). 18. Сполука формули (І) згідно із вищезгаданим в 15-17, її пролікарська форма або її фармацевтично прийнятна сіль, в якій X 33 80742 34 вуглецю" включає, наприклад, етиніл, 1-пропініл, 2-пропініл, 1-бутиніл, 2-бутиніл, 3-бутиніл і т.і. В представленому винаході, "лінійна або розгалужена алкільна група, що має 1-4 атомів вуглецю" включає, наприклад, метил, етил, нпропіл, і-пропіл, н-бутил, в-бутил, і-бутил, т-бутил і т.і. В представленому винаході, "лінійна або розгалужена алкенільна група, що має 2-4 атомів вуглецю" включає, наприклад, етеніл (вініл), 1пропеніл, 2-пропеніл (аліл), пропен-2-іл, 3-бутеніл (гомоаліл) і т.і. В представленому винаході, "лінійна або розгалужена алкінільна група, що має 2-4 атомів вуглецю" включає, наприклад, 1-пропініл, 1бутиніл, 2-бутиніл і т.і. Вищезгадана Сполука №1 описується в [Міжнародній викладеній заявці опублікованій під № WO 98/56755], і відома як така, що 21. Фармацевтична композиція, що містить продукується мікроорганізмами, що належать до сполуку формули (І) згідно з будь-яким з роду Aureobasidium, що має протимікробну вищезгаданим в 15-20, її пролікарську форму або активність проти патогенних грибків, таких як її фармацевтично прийнятну сіль. Candida albicans і Cryptococcus neoformans, і діє як 22. Фармацевтична композиція згідно із інгібітор імунних реакцій. Вищезгадана Сполука вищезгаданим в 21 для профілактики або №9 описується в [Міжнародній викладеній заявці лікування вірусних інфекційних захворювань. опублікованій під № WO 94/18157], і відома як 23. Фармацевтична композиція згідно із інгібітор синтезу сквалену і протигрибковий агент. вищезгаданим в 22, де вірусним інфекційним Спосіб одержання сполук представленого захворюванням є ВГС. винаходу: Цю Сполуку №1 можна одержати 24. Фармацевтична композиція згідно із шляхом культивування штаму нитковидного вищезгаданим в 23, де ВГС є вірус гепатиту С. грибка, що належить до роду Fusarium або В представленому винаході, вираз "лінійна Aureobasidium і тому може продукувати або розгалужена алкільна група, що має 1-8 вищезгадану сполуку, з наступним виділенням з атомів вуглецю" включає, наприклад, метил, етил, культури згаданого вище штаму. н-пропіл, і-пропіл, н-бутил, в-бутил, і-бутил, тОднак, сполуки представлені загальними бутил, н-пентил, 3-метилбутил, 2-метилбутил, 1формулами (І) і (l') можна одержати за допомогою метилбутил, 1-етилпропіл, н-гексил, 4способів описаних нижче використовуючи метилпентил, 3-метилпентил, 2-метилпентил, 1вищезгадану Сполуку № 1як вихідну сполуку. метилпентил, 3-етилбутил, 2-етилбутил і т.і. Спосіб одержання 1: Дигідро форму (Е = В представленому винаході, "лінійна або простий зв'язок, наприклад, Сполука №7) можна розгалужена алкенільна група, що має 2-8 атомів одержати шляхом гідрування вищезгаданої вуглецю" включає, наприклад, 1-пропеніл, 2Сполуки №1 в розчиннику, такому як метанол, пропеніл (аліл), пропен-2-іл, 3-бутеніл (гомоаліл), етанол, етилацетат або тетрагідрофуран, в 2-ізопентеніл і т.і. присутності каталізатору, такого як паладій на В представленому винаході, "лінійна або вугіллі, гідроксид паладію або нікель Ренея, при розгалужена алкінільна група, що має 2 -8 атомів кімнатній температурі або при нагріванні. вуглецю" включає, наприклад, 1-пропініл, 1Спосіб одержання 2: Спиртову форму (В = бутиніл, 2-бутиніл і т.і. гідроксильна група, наприклад, Сполука №8) В представленому винаході, "атом галогену" можна одержати шляхом відновлення означає атом фтору, атом хлору, атом брому або вищезгаданої Сполуки №1 в розчиннику, такому як атом йоду. метанол, етанол, пропанол або тетрагідрофуран, В представленому винаході, "лінійна або в присутності відновлюючого агенту, такого як розгалужена алкільна група, що має 1-6 атомів боргідрид натрію, триметоксиборгідрид натрію, вуглецю" включає, наприклад, метил, етил, нціаноборгідрид натрію, боргідрид літію, пропіл, і-пропіл, н-бутил, в-бутил, і-бутил, т-бутил, діетилалюмогідрид натрію або алюмогідрид літію, н-пентил, 3-метилбутил, 2-метилбутил, 1при кімнатній температурі або при охолодженні. метилбутил, 1-етилпропіл, н-гексил, 4Спосіб одержання 3: Деалкіловану форму (X = метилпентил, 3-метилпентил, 2-метилпентил, 1водень, наприклад, Сполука №9) можна одержати метилпентил, 3-етилбутил, 2-етилбутил і т.і. шляхом обробки вищезгаданої Сполуки №1 в В представленому винаході, "лінійна або розчиннику, такому як метанол, діоксан, розгалужена алкенільна група, що має 2-6 атомів тетрагідрофуран або вода, в присутності вуглецю" включає, наприклад, етеніл (вініл), 1хлорводневої кислоти, сірчаної кислоти, пропеніл, 2-пропеніл (аліл), пропен-2-іл, 3-бутеніл метансульфонової кислоти, трифтороцтової (гомоаліл), 2-ізопентеніл і т.і. кислоти або їм подібних, при кімнатній температурі В представленому винаході, "лінійна або або при охолодженні. Однак, дигідроформу (Е = розгалужена алкінільна група, що має 2-6 атомів простий зв'язок і X = водень, наприклад, Сполука 35 80742 36 №10) можна одержати шляхом гідрування бутанол при кімнатній температурі або при вищезгаданої Сполуки №9 в розчиннику, такому як нагріванні з одержанням відповідної гідразидної метанол, етанол, етилацетат або форми, і потім обробити цю гідразидну форму тетрагідрофуран, в присутності каталізатору, відновлюючим агентом, таким як катехолборан з такого як паладій на вугіллі, гідроксид паладію, наступною обробкою основою, такої як гідрокси нікель Ренея або оксид платини, при кімнатній літію, гідроксид натрію або гідроксид калію в температурі або при нагріванні. розчиннику, такому як етанол, метанол або вода Спосіб одержання 4: Тетраалкільну, при кімнатній температурі або при нагріванні. тетраалкінільну або тетраалкенільну форму (X = Ζ Спосіб одержання 9: Вищезгадану Сполука = алкіл, алкініл або алкеніл) можна синтезувати №1 і гідроксиламін або різні О-заміщені шляхом обробки вищезгаданої Сполуки №9 гідроксиламіни піддають взаємодії в присутності алкілувальним агентом, таким як алкілгалоїд, піридину, триетиламіну або діізопропілетиламіну алілгалоїд або алкінілгалоїд в присутності основи, при кімнатній температурі або при нагріванні такої як гідроксид натрію, гідроксид калію, одержуючи відповідні форми оксимового етеру і карбонат кальцію або карбонат калію, в оксиму (В = N-OR6 і N-OH, наприклад, Сполуки № розчиннику, такому як диметилформамід (ДМФА) 14 і 15). або тетрагідрофуран при кімнатній температурі Спосіб одержання 10: Галідну форму (В = або при нагріванні. Крім того, алкільну, алкінільну фтор) можна одержати шляхом обробки або алкенільну форму (X = алкіл, алкініл або вищезгаданої Сполуки №1 алкеніл, наприклад, Сполука 16, 17, 18, 19 або 20) діетиламінотрифторидомсірки (DAST) в можна одержати шляхом обробки цієї сполуки в розчиннику, такому як тетрагідрофуран, присутності основи, такої як гідроксид натрію, дихлорметан або хлороформ. гідроксид калію, карбонат кальцію або карбонат Спосіб одержання 11: Вищезгадану Сполуку калію, в розчиннику, такому як метанол, діоксан, №1 і різні аміни піддають відновному амінуванню тетрагідрофуран або вода, при кімнатній шляхом обробки відновлюючим агентом, таким як температурі або при нагріванні. ціаноборгідрид натрію або триацетоксиборгідрид Спосіб одержання 5: Вищезгадану Сполуку натрію в розчиннику, такому як етанол, метанол №1 і різні аміни обробляють конденсувальним або тетрагідрофуран, в нейтральному або агентом, таким як дициклогексилкарбодіімід слобокислому середовищі, при кімнатній (DCC), водорозчинний гідрохлорид карбодііміду температурі або при нагріванні одержуючи (WSC·HCI) або 1-гідроксибензотриазол (HOBt) в відповідну аміноформу (В = -N(R4)(R5)). розчиннику, такому як диметилформамід (ДМФА) Спосіб одержання сполук представленого або тетрагідрофуран, в присутності основи, такої винаходу як діізопропілетиламін або триетиламін, при Відсутні будь-які обмеження стосовно штамів кімнатній температурі або при нагріванні з мікробів, що можуть бути використані для утворенням відповідної триамідної форми (R1 = R2 одержання Сполуки №1, наприклад, за умови, що = R3 = аміногрупа, наприклад, Сполука №11). вони належать до нитковидних грибків, таких як Спосіб одержання 6: Тетрагідроформу (Е = родини Fusarium і Aureobasidium, і здатні простий зв'язок і X = розгалужений алкіл, продукувати ви щезгадану сполуку, прикладами наприклад, Сполука №12) можна одержати яких є Fusarium sp. штам F1476 (тут далі шляхом гідрування вищезгаданої Сполуки №1 в згадується як "штам F1476") і Aureobasidium sp. розчиннику, такому як метанол, етанол, штам TKR2449 [Міжнародна викладена заявка етилацетат або тетрагідрофуран, в присутності опублікована під № WO 98/56755]. каталізатору, такого як паладій на вугіллі, Штам F1476 характеризується переважним гідроксид паладію, нікель Ренея або оксид продукуванням вищезгаданої Сполуки №1. платини, при кімнатній температурі або при Фізіологічні властивості згаданого вище штаму нагріванні. F1476 є наступними: температура росту: 10-30°С, і Спосіб одержання 7: Вищезгадана Сполука переважно 20-30°С; рН прийнятна для росту: 3-11, №1 взаємодіє з різними спиртами (ΒΟΗ) при і переважно 5-7. використанні конденсувального агенту, такого як Штам F1476 також згадується як Fusarium sp. дициклогексилкарбодіімід (DCC) в розчиннику, F1476, і був депонований під номером FERM ВРтакому як тетрагідрофуран, ДМФА або 8290 у [Міжнародний патентний депозитарій дихлорметан при кімнатній температурі або при організмів Національного інституту сучасної нагріванні з утворенням відповідного триестеру (R1 промислової науки і технології, 4 лютого 2003]. = R2 = R3 = R). Альтернативно, триметиловий В представленому винаході, на додаток до естер (R1 = R2 = R3 = СН3) можна одержати вищезгаданого штаму F1476, можуть бути шляхом обробки вищезгаданої Сполуки №1 використані дикі або штучні мутанти штаму F1476 амідодигідроформою триметилсиліл-діазометану або інших грибків, що належать до нитковидних (TMSCHN2) і в змішаному розчиннику, такому як грибків, таких як види Fusarium або Aureobasidium, метанол і дихлорметан. що мають продукційну здатність, таку ж як і штам Спосіб одержання 8: Декетоформу (В = F1476. водень, наприклад, Сполука №13) можна В представленому винаході, вищезгадану одержати шляхом обробки триметилового естеру Сполука №1 можна одержати в культурі шляхом одержаного в Способі одержання 7 похідним інокулювання штаму F1476 в середовище, що гідразину, таким як 4-толуолсульфонілгідразид в містить джерело поживних речовин необхідних розчиннику, такому як метанол, етанол або для культивування. Прикладами джерел поживних 37 80742 38 речовин є джерело вуглецю, таке як глюкоза, також може використовуватись спосіб, в якому фр уктоза, цукроза, крохмаль, декстрин, гліцерин, культуральна рідина контактує з абсорбентом і меляса, крохмальний сироп, олії і жири і органічні Сполука №1 присутня в культуральній рідині кислоти. адсорбується на абсорбенті з наступним Серед вищезгаданих джерел поживних використанням як елюенту розчинника. речовин, прикладами джерел азоту є органічні і Прикладами вищезгаданих абсорбентів є неорганічні сполуки азоту, такі як соєве борошно, активоване вугілля, подрібнена целюлоза і борошно насіння бавовнику, кукурудзяний адсорбтивні смоли. Вищезгадані розчинники екстракт, казеїн, пептони, дріжджовий екстракт, можуть бути використані окремо або як комбінація м'ясний екстракт, зародки пшениці, сечовина, двох або декількох типів згідно з типом, амінокислоти і солі амонію. властивостями і т.і. абсорбенту. Наприклад, водні Серед вищезгаданих джерел поживних розчини водорозчинних органічних розчинників, речовин, прикладами солей є неорганічні солі, такі такі як водний ацетон і водний спирт, можуть бути як солі натрію, солі калію, солі кальцію, солі магнію придатно об'єднанами для використання як і фосфатні солі. Вони можуть бути використані розчинника. окремо або в придатних комбінаціях. Також може бути використаний спосіб Вищезгадані джерела поживних речовин виділення вищезгаданої Сполуки №1 з можуть бути використані окремо або в придатних відокремленого міцелію, як описано вище, в якому комбінаціях. сполуку екстрагують гідрофільним органічним Якщо необхідно, солі важких металів, такі як розчинником, таким як ацетон. солі заліза, солі міді, солі цинку або солі кобальту, В представленому винаході, неочищений вітаміни, такі як біотин і вітамін В1, і органічні і екстракт вищезгаданої Сполуки №1, що виділили з неорганічні речовини, що допомагають росту культури способом описаним вище, можна мікроорганізмів і промотують продукування використати на стадії, в якій його очищають якщо вищезгаданої Сполуки №1 можуть бути необхідно. придатними для додавання до вищезгаданого Вищезгадане очищення можна провести за середовища, що містить джерело поживних способами добре відомими середньому речовин. спеціалісту в цій галузі використовуючи розділення На додаток до вищезгаданих джерел і очищення ліпофільних біологічно активних поживних речовин, до середовищ, що містить речовин, і прикладами таких методів є колонкова поживні речовини, можуть бути додані, якщо хроматографія і високоефективна рідинна необхідно, протипінні агенти, поверхнево-активні хроматографія, використовуючи носії такі як агенти і т.і., такі як силіконова олія і силікагель, активований оксид алюмінію, поліалкіленгіліколевий етер. активоване вугілля або адсорбтивні смоли. У Коли культивуємі мікробні штами, що випадку використання колонкової хроматографії як продукують вищезгадану Сполуку №1 у носій використовують силікагель, прикладами вищезгаданому середовищі, що містить джерела розчинників для елюювання є хлороформ, поживних речовин, може бути використаний метод етилацетат, метанол, ацетон і вода. Також можуть культивування, такий як культивування твердої бути використані комбінації двох або більше речовини або культивування рідина типово розчинників. використовуються, коли продукування біологічно У випадку використання вищезгаданої активних речовин за допомогою культивування високоефективної рідинної хроматографії, мікроорганізмів. прикладами носія є силікагель хімічно зв'язаний з Згідно із згаданими вище методами октадецильними групами, октильними групами або культивування, вищезгадана Сполука №1 фенілами і ті, і пористий полістироловий акумулюється в культурі. В представленому полімерний гель. Прикладами рухомої фази є винаході, Сполука №1, що акумулюється в водні розчини водорозчинних органічних культурі може бути відокремлена від культури розчинників, таких як водний метанол і водний використовуючи відомі методи культивування, з ацетонітрил. подальшим наступним очищенням, якщо Вищезгадана Сполука №1 представленого необхідно. винаходу може бути використана в лікарському Вищезгадане розділення можна провести засобі або як така або у формі її фармацевтично шляхом екстрагування цільної культури прийнятної солі. Відсутні особливі обмеження на негідрофільним органічним розчинником, таким як фармакологічно прийнятну сіль і прикладами є етилацетат, бутилацетат, хлороформ, бутанол або солі мінеральних кислот, таких як хловрводнева метилізобутиловий кетон. Крім того, Сполуку №1 кислота, сірчана кислота, азотна кислота, також можна відокремити шляхом розділення фосфорна кислота і бромводнева кислота, солі культури на культуральну рідину і міцелій органічних кислот, таких як оцтова кислота, винна фільтруванням або центрифугуванням, з кислота, молочна кислота, лимонна кислота, наступним виділенням Сполуки №1 з фумарова кислота, малеїнова кислота, культуральної рідини і міцелію, відповідно. бурштинова кислота, метансульфонова кислота, Для того щоб виділити вищезгадану Сполуку етансульфонова кислота, бензолсульфонова №1 з відокремленої культуральної рідини вище, кислота, толуолсульфонова кислота, може бути використаний спосіб, в якому нафталінсульфонова кислота, і культуральну рідину екстрагують негідрофільним камфорсульфонова кислота, і солі лужних металів органічним розчинником згаданим вище. Крім того, 39 80742 40 або лужноземельних металів, таких як натрій, використані всі матеріали, що зазвичай калій і кальцій. використовуються, як розріджувачи в цій галузі, Недивлячись на те, що кількість активного прикладами яких є вода, етанол, пропіленгліколь, інгредієнту, що міститься у вищезгаданій етоксиізостеариловий спирт, фармацевтичній композиції, не піддається будьполіоксиізостеариловий спирт і естери якому особливому обмеженню і придатна для поліоксиетиленсорбіту і жирної кислоти. Крім того, вибору в широкому інтервалі, вона становить від в цьому випадку, в фармацевтичній рецептурі 0,1 до 99,5ваг.%, і переважно 0,5 -90ваг.%. можуть міститись адекватні кількості солі, глюкози Сполука представленого винаходу може бути або гліцерину для забезпечення ізотонічного сформована використовуючи відомі допоміжні розчину, і також можуть бути додані звичайні агенти, такі як розчинник, зв'язувальний агент, агенти, що сприяють розчиненню, буфери, дезінтегруючий агент, змащувальний агент, анальгетики і т.і.. Крім того, як необхідно, також до коректор, агент, що сприяє розчиненню, складу рецептур можуть входити барвники, суспендувальний агент і агент покриття, який може консерванти, ароматизатори, смакові агенти, звичайно використовува тись в технології підсолоджувачи і інші фармацевтичні речовини. формування лікарського засобу, згідно з Вищезгадана фармацевтична композиція звичайними методами. Коли формується у формі переважно вводиться у одиничній дозованій формі таблеток, а може бути використаний широкий і може бути введена перорально, через тканину перелік відомих носіїв, прикладами яких є (підшкірне введення, внутрішньом'язове введення, розчинники, такі як лактоза, цукроза, хлорид внутрішньовенне введення і т.і.), місцево натрію, глюкоза, сечовина, крохмаль, карбонат (підшкірно і т.і.) або ректально. Вищезгадана кальцію, каолін, кристалічна целюлоза і кремнієва фармацевтична композиція зазвичай вводиться в кислота; зв'язувальні агенти, такі як вода, етанол, дозованій формі, що є придатною для цих пропанол, простий сироп, рідка глюкоза, рідкий способів введення. крохмаль, рідкий желатин, У випадку введення сполуки представленого карбоксиметилцелюлоза, шелак, метилцелюлоза, винаходу або її фармацевтично прийнятної солі у фосфа т калію і полівінілпіролідон; дезінтегратори, формі медикаменту, хоча переважно він такі як сухий крохмаль, алгінат натрію, пристосований беручи до уваги фактори, що порошкоподібний агар, порошкоподібний залежать від статусу пацієнта, такого як вік і вага ламінаран, гідрокарбонат натрію, карбонат тіла, шлях введення, природа і складність кальцію, поліоксиетиленсорбітовий естер жирної захворювання і ті, дозування для дорослої кислоти, лаурилсульфат натрію, людини, коли використовується як противірусний моногліцеридстеарат, крохмаль і лактоза; лікарський засіб, зазвичай знаходиться в межах інгібітори дезінтеграції, такі як цукроза, стеарин, від 1 до 2000мг на день, як кількість активного масло какао і глікогеновані олії; промотори інгредієнту представленого винаходу. Хоча абсорбції, такі як четвертинні амонієві солі і адекватними можуть бути випадки, в яких доза лаурилсульфат натрію; агенти, що утримують менша ніж згадана вище, і навпаки також можливі вологу, такі як гліцерин і крохмаль; абсорбенти, випадки, в яких до за вища за вищезгаданий такі як крохмаль, лактоза, каолін, бентоніт і інтервал. Коли вводиться в більших дозах, колоїдна кремнієва кислота; і змащувальні агенти, переважно для введення розділити дозу на ряд такі як очищений тальк, солі стеаринової кислоти, введень протягом дня. порошок борної кислоти і поліетиленгліколь. Вищезгадане пероральне введення можна Однак, таблетки можуть бут у формі таблеток здійснити за допомогою твердих, порошкоподібних покритих з звичайним покриттям, як необхідно, або рідких дозованих одиниць і можна здійснити у прикладом яких є таблетки покриті цукром, формі порошку, гранул, таблеток, рецептур желатинінкапсульовані таблетки, таблетки з покритих цукром, капсул, крапель, сублінгвальних кишковим покриттям, таблетки покриті плівкою або рецептур і інши х дозованих форм. таблетки з подвійним покриттям і багатошарові Вищезгадане введення через тканину можна таблетки. Коли формуються у формі пігулок, як здійснити використовуючи рідку одиничну носій може бути використаний широкий перелік дозовану форму для підшкірного, матеріалів, що є загальновідомими в цій галузі, внутрішньом'язового або внутрішньовенного прикладами яких є розчинники, такі як глюкоза, ін'єктування розчину або суспензії і т.і. Їх лактоза, масло какао, отверджена рослинна олія, одержують шляхом суспендування або каолін і тальк; зв'язувальні агенти, такі як порошок розчинення попередньо визначеної кількості арабської камеді, порошок трагаканту, желатин і сполуки представленого винаходу або її етанол; і дезінтегратори, такі як ламінарієвий агар. фармацевтично прийнятної солі в нетоксичному Коли формуються у формі супозиторію, як носій рідкому носії сумісного з ціллю ін'єктування, може бути використаний широкий перелік такому як водне або масляне середовище, з матеріалів, що є загальновідомими в цій галузі, наступною стерилізацією вищезгаданої суспензії прикладами яких є поліетиленгліколь, масло або розчину. какао, вищі спирти, естери вищих спиртів, желатин Вищезгадана місцеве введення (підшкірне і напівсинтетичні гліцериди. У випадку одержання введення і т.і.) можна здійснити використовуючи у формі рецептури для ін'єкції, рідину і форму зовнішньої рецептури, такої як рідина, суспендований агент переважно стерилізують і крем, порошок, паста, гель або мазь. Це можна роблять ізотонічним з кров'ю, і коли формують у здійснити шляхом комбінування попередньо формі рідин, емульсій або суспензій, можуть бути визначеної кількості сполуки представленого 41 80742 42 винаходу або її фармацевтично прийнятної солі з сірувато-коричневого (золотий, золотистоодним або декількома типами ароматизаторів, охровий, світло-сірува то-коричневий, блондин, барвників, наповнювачів, поверхнево-активних Мунселл 10YR5/4-8, Метуен 5Е5-8). В цьому речовин, агентів, що утримують вологу, випадку, колір зворотного боку є темно-жовтува топом'якшувачами шкіри, желатинізуючими коричневим (каштановий, темно-жовтува тозасобами, носіями, консервантами або коричневий, жжена умбра, Мунселл 10YR3/6). стабілізаторами і т.і., що придатні для цілей Ріст на агарі мальтозного екстракту (МА) є зовнішньої рецептури. повільним, організми збільшуються в діаметрі до Вищезгадана ректальне введення можна 11м після 11 днів опромінення ближнім здійснити використовуючи супозиторій і т.і., що ультрафіолетовим світлом, швидкість росту містить попередньо визначену кількість сполуки 1,0мм/день, формується густа міцеліальна флора, представленого винаходу або її фармацевтично поверхня є рельєфною і проявляться прийнятної солі в низькоплавкій твердій речовині, вовоноподібна або войлокоподібна текстура, колір що складається з, наприклад, вищого естеру, є світло-оранжевим (світло-оранжевий, світлотакого як пальмітиновомуристиловий естер, абрикосовий, Мунселл 5 YR8/6, Метуен 6А6), і поліетиленгліколь, масло какао або їх суміш. колір зворотного боку є яскраво-оранжевим Вищезгадане введення можна здійснити (яскраво-оранжевий, оранжева настурція, Мунселл використовуючи рідку дозовану одиничну форму 5YR7/12, Ме туен 6А7). Колір тускніє в темноті. для підшкірної, внутрішньом'язової або Ріст на агарі вівсяного екстракту (ВА) є внутрішньовенної ін'єкції розчину або суспензії і т.і. швидким, організми збільшуються в діаметрі до Їх одержують шляхом суспендування або 21мм після 10 днів опромінення ближнім розчинення попередньо визначеної кількості ультрафіолетовим світлом, швидкість росту 3,7мм сполуки представленого винаходу або її на день, організми є пласкими і велика кількість фармацевтично прийнятної солі в нетоксичному конідіоспорних баз густо концентрується в центрі рідкому носії сумісного з ціллю ін'єктування, утворюючи гранули. Колір є світло-жовтува тотакому як водне або масляне середовище, з оранжевим (світло-жовтувато-оранжевий, блідонаступною стерилізацією вищезгаданої суспензії жовтий, Мунселл 5YR7/8, Метуен 6В6), і колір або розчину. зворотного боку є таким самим. Колір тускніє в Приклади темноті. Хоча далі приводиться детальний опис Ріст на агарі синтетичних поживних речовин представленого винаходу за допомогою прикладів, (SNA) є повільним, організми збільшуються в представлений винахід не обмежується цими діаметрі до 13мм після 7 днів опромінення прикладами. ближнім ультрафіолетовим світлом, швидкість Приклад 1 росту 1,6мм на день, організми утворюють пласкі Штам F1476, що використовується в тонкі колонії, що мають войлоко або вовноподібну представленому винаході, є нитевидним грибком, структур у, вологі конідіоспорні бази нерегулярно що був виділений шляхом промивання і присутні в центрі, колір бежевий (блідо-бежевий, фільтрування 29 лютого 2000 з опалого листя слонова-кістка, Мунселл 10YR9/2, Ме туен 4А3), і зібраного на південному схилі Камакураяма в колір зворотного боку є таким самим. Подібний Камакура, Японія 24 січня 2000. ріст спостерігається і в темноті. Особливості культивування Ріст на середовищі Міура (LCA) є швидким, Ріст на агарі декстрози картоплі (ДАК) є організми збільшуються в діаметрі до 25мм після повільним, організмі збільшились в діаметрі на 10 днів опромінення ближнім ультрафіолетовим 12мм після 10 днів опромінення ближнім світлом, швидкість росту 3,4мм на день, організми ультрафіолетовим світлом при 25°С, швидкість утворюють пласкі тонкі колонії, що мають росту становить 1,5-1,6мм на день, організми гранулярну або вовноподібну текстуру, вологі формують густу міцелярну флор у, поверхні є конідіоспорні бази нерегулярно присутні в центрі, хвилеподібними і рельєфними, вологі конідіоспори колір бежевий (блідо-бежевий, слонова-кістка, в основному збираються у центрі, рельєфно Мунселл 10YR9/2, Метуен 4А3), і колір зворотного флокульовані агрегати гіфа іноді утворюються на боку є таким самим. Подібний ріст спостерігається периферії, колір є світло оранжевим (абрикосовий, і в темноті. світло-оранжевий, від світло-абрикосового до Температура росту знаходиться в інтервалі від абрикосового, Мунселл 5 YR7/6 до 7/10, Метуен 10 до 30°С і оптимальна температура для росту 6А6 до 6В8), і колір зворотного боку змінюється від від 20 до 30°С. світло-оранжевого до оранжевого (світлорН росту знаходиться в інтервалі від 3 до 11, і оранжевий, яскраво-червонувато-оранжевий, оптимальний рН становить 5-7. тигрово-ліловий, Мунселл 5-10YR7/10, Метуен 6В8 Морфологічні властивості до 8А6). На SNA, стебла конідіоспор ростуть Швидкість росту є несуттєво меншою в вертикально з переносимого повітрям міцелію, темноті, будучи 0,9-1,1мм на день, колір є вони є розгалуженими і фіаліди вертикально світлішим і бежевим (блідо-бежевий, колір безпосередньо на відгалуженнях або стеблах слонової кістки, Мунселл 10YR9/2, Метуен 4А3), і конідіоспор, що призводить до утворення колір зворотного боку є світло-червонува токомплексу структур конідіоспор. Фіаліди іноді жовтим (світло-червонувато-жовтий, ростуть незалежно на переносимих повітрям неаполітанський жовтий). Однак, колір гіфи є іноді гіфа х. Стр уктура конідіоспор формується з гіф, що темнішим, в інтервалі від кольору охри до лежать на поверхні агару, і деякі з них не 43 80742 44 піднімаються в повітря. Стебла конідіоспор мають етилацетатом. Етилацетатний екстракт (2л) довжину від 10 до 30мкм. Фіаліди є циліндричними одержаний таким чином потім сушили над і зазвичай мають випуклу стр уктуру на їх кінці, сульфатом натрію після чого концентрували і сушили одержуючи 567мг неочищеного екстракту. розмір цієї структури становить від 4,0 до 20,0´2,5 Його потім розчиняли в метанолі і повторно до 3,0мкм. Фіалоконідіоспори утворюються піддавали препаративній високоефективній агрегованими, що злипаються з в'язкою рідиною рідинній хроматографії за Умов 1 приведених на кінцях фіалід, вони зазвичай мають місяцеподібну форму, і мають добре визначені нижче одержуючи фракцію що містить Сполуку 1 (Фракція 1), фракцію, що містить Сполуки 2 і 3 подоцити в основі. Апікальні клітини є довгими і (Фракція 2) і фракцію, що містить Сполуки 4, 5 і 6 вузькими або іноді мають закруглений кінець. Вони (Фракція 3). Фракцію 1 концентрували при зазвичай є закругленими і іноді мають еліптичну пониженому тиску одержуючи 380мг Сполуки 1 у форму або циліндричну форму, 1-3(4) семикутник, формі білого порошку. і розміри 6,8-30,0´1,9-4,9мкм, Д/Ш 3,7-8,1 Умови 1 високоефективної рідинної (середня: 19,3´3,8мкм), Д/Ш 5,2). Хламідоспори не хроматографії спостерігались. Прилад: CCPP-D, MCPD-3600 System (Tosoh) Ідентифікація Колонка: CAPCELL РАК С18 (UG 80, Комплекс, кластероподібної конідіоспорної 20мм´250мм) (Shiseido) структури утворювався з світлозабарвленої гіфа Рухома фаза: Елюювали градієнтом іноді утворюючи конідіоспорні бази, і конідіоспори розчинників використовуючи воду, що містить мають фіалотип, що росте ендогенно з кінців 0,01% трифтороцтової кислоти і ацетонітрил, що циліндричних фіалід, є світло-забарвленими і містить 0,01% трифтороцтової кислоти (15% складаються з 2-5 клітин, що мають ацетонітрилу до 98% ацетонітрилу, постадійно) характеристичну форму або місяцеподібну форму. Фізико-хімічні властивості Сполуки 1 На основі вищезгаданих морфологічних Молекулярна вага: 659 характеристик, цей штам F1476 віднесли до БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) родини Fusarium, недосконалі грибки. Тому, ці 660 (М+Н+) грибки ідентифікували як Fusarium sp. штам БША-МС (негативний метод, матрикс m-NBA) F1476. 658 (М-Н-) Приклад 2 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного Одну петлю мікроорганізмів одержаної з зсуву d 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,40 (14Н, м), 1,53 пристосованої культури штаму F1476 інокулювали в 25 500мл колб Ерленмейєра з перегородками, (4Н, м), 1,73 (3Н, с), 1,77 (3Н, с), 1,96 (2Н, м), 2,42 (4Н, м), 2,57 (1Н, д, J=16,5Гц), 2,89 (1Н, д, що містить 100мл рідкого середовища (2% J=16,5Гц), 2,91 (1Н, дд, J=14, 9Гц), 3,15 (1Н, дд, глюкози, 1,5% гліцерину, 1% картопляного J=14, 4,5Гц), 3,20 (1Н, д, J=8Гц), 4,47 (2Н, д, крохмалю, 0,25% поліпептону, 0,35% дріжджового J=6Гц), 4,63 (1Н, дд, J=9, 4,5Гц), 5,43 (1Н, м), 5,52 екстракту, 0,5% карбонату кальцію, 0,3% хлориду натрію, 0,005% гептагідрату сульфату цинку, (2Н, м), 6,78 (2Н, J=9Гц), 7,10 (2Η, J=9Гц) Приклад 3 0,0005% гептагідрату суль фату міді, 0,0005% Одну з фракцій одержаних в Прикладі 2 тетрагідрату сульфату марганцю і 1% висушеної (Фракція 2, 345мг) піддавали препаративній сої), після чого культивували при збовтуванні при високоефективній рідинній хроматографії за Умов 25°С протягом 3 днів (швидкість збовтування: 220об/хв) одержуючи інокульовану затравку 2 приведених нижче для відокремлення фракції, що містить Сполуку 2 (Фракція 2-1, 41,4мг) і культури. 16мл цієї інокульованої затравки фракції, що містить Сполуку 3 (Фракція 2-2, 4,9мг). культури інокулювали в 125 500мл колб Фракцію 2-1 піддавали препаративній Ерленмейєра з перегородками, що містять тверде високоефективній рідинній хроматографії за Умов середовище (40г пресованого ячменю, 24мл розчину SF1 (0,1% дріжджового екстракту, 0,05% 3, показані нижче, з одержанням фракції, що містить Сполуку 2. Одержану фракцію тартрату натрію, 0,05% дигідрофосфату калію)), концентрували при пониженому тиску одержуючи після чого стаціонарно культивували при 25°С 29,5мг Сполуки 2 у формі білого порошку. протягом 11 днів. Потім додавали 12,5л нАналогічно, Фракцію 2-2 піддавали препаративній бутанолу до культури культурованої за цих умов і залишали стояти протягом ночі і потім високоефективній рідинній хроматографії за Умов 4 з одержанням 3мг Сполуки 3 у формі білого фільтрували одержуючи н-бутанольний екстракт. порошку. Після концентрації екстракту одержаного таким Умови 2 високоефективної рідинної чином, його суспендували в 1л воді і після хроматографії доведення рН до 2 хлорводневою кислотою, його екстрагували 1,1л етилацетату. Водний шар знову Прилад: CCPP-D, MCPD-3600 System (Tosoh) Колонка: CAPCELL PAR C18 (UG 80, екстрагували 1,1л етилацетату і об'єднували з першим екстрактом. Потім до цього етил 20мм´250мм) (Shiseido) ацетатного екстракту (2,2л) додавали 0,9л води і Рухома фаза: Елюювали градієнтом потім розділяли після доведення рН до 10 розчинників використовуючи воду, що містить використовуючи водний розчин гідроксид натрію. 0,01% трифтороцтової кислоти і ацетонітрил, що Знову додавали 1л етилацетату до одержаного містить 0,01% трифтороцтової кислоти (65% водного шару і потім екстрагували після ацетонітрилу до 98% ацетонітрилу, постадійно) доведення рН до 3 хлорводневою кислотою. Умови 3 високоефективної рідинної Одержаний водний шар знову екстрагували 1л хроматографії 45 80742 46 Прилад: CCPP-D, MCPD-3600 System (Tosoh) Рухома фаза: Елюювали градієнтом Колонка: CAPCELL РАК Speriorex ODS розчинників використовуючи воду, що містить 0,01% трифтороцтової кислоти і ацетонітрил, що (20мм´250мм) (Shiseido) містить 0,01% трифтороцтової кислоти (50% Рухома фаза: Елюювали градієнтом ацетонітрилу до 98% ацетонітрилу, постадійно) розчинників використовуючи воду, що містить Фізико-хімічні властивості Сполуки 4 0,01% трифтороцтової кислоти і ацетонітрил, що Молекулярна вага: 607 містить 0,01% трифтороцтової кислоти (65% ацетонітрилу до 98% ацетонітрилу, постадійно) ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 608 (М+Н+) 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного Умови 4 високоефективної рідинної хроматографії зсуву d 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,40 (14Н, м), 1,58 Прилад: CCPP-D, MCPD-3600 System (Tosoh) (4Н, м), 2,00 (2Н, м), 2,52 (2Н, м), 2,56 (1Н, д, Колонка: CAPCELL РАК С8 (SG 120, J=16Гц), 2,88 (1Н, дд, J=14, 8Гц), 2,90 (1Н, д, J=16Гц), 3,10 (1Н, дд, J=14, 4Гц), 3,20 (1Н, д, 20мм´250мм) (Shiseido) J=8Гц), 4,05 (1Н, дд, J=8, 4,5Гц) 4,60 (1Η, дд, Рухома фаза: Елюювали градієнтом J=8,4,5Гц), 5,53 (2Н, м), 6,67 (2Н, д, J=8Гц), 7,02 розчинників використовуючи воду, що містить (2Н, д, J=8Гц) 0,01% трифтороцтової кислоти і ацетонітрил, що Фізико-хімічні властивості Сполуки 5 містить 0,01% трифтороцтової кислоти (65% Молекулярна вага: 614 ацетонітрилу до 98% ацетонітрилу, постадійно) ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 615 (М+Н+) Фізико-хімічні властивості Сполуки 2 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного Молекулярна вага: 673 + ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 674 (М+Н ) зсуву d 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,40 (14Н, м), 1,53 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного (4Н, м), 1,93 (2Н, м), 2,27 (4Н, м), 2,58 (1Н, д, J=16Гц), 2,86 (1Н, д, J=16Гц), 3,22 (2Н, м), 3,65 зсуву d 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,40 (14Н, м), 1,53 (1Н, Д, J=9Гц), 4,73 (1Н, дд, J=8, 5Гц), 5,50 (2Н, м), (4Н, м), 1,73 (3Н, с), 1,77 (3Н, с), 1,96 (2Н, м), 2,42 6,96 (1Н, т, J=7Гц), 7,06 (1Н, т, J=7Гц), 7,10 (1Н, с), (4Н, м), 2,59 (1Н, д, J=16,5Гц), 2,89 (1Н, д, 7,29 (1Н, д, J=7Гц) 7,55 (1Н, д, J=7Гц) J=16,5Гц), 2,91 (1Н, дд, J=14, 9Гц), 3,15 (1Н, дд, J=14, 4,5Гц), 3,20 (1Н, д, J=8Гц), 3,63 (3Н, с), 4,47 Фізико-хімічні властивості Сполуки 6 Молекулярна вага: 675 (2Н, д, J=6Гц), 4,63 (1Н, дд, J=9, 4,5Гц), 5,43 (1Н, ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 676 (М+Н+) м), 5,54 (2Н, м), 6,78 (2Н, д, J=9Гц), 7,10 (2Н, д, 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного J=9Гц) Фізико-хімічні властивості Сполуки 3 зсуву d 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,40 (14Н, М), 1,53 Молекулярна вага: 687 (4Н, м), 1,72 (3Н, с), 1,77 (3Н, с), 1,92 (2Н, м), 2,42 ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 688 (М+Н+) (2Н, м), 2,57 (1Н, д, J=16Гц), 2,89 (1Н, д, J=16Гц), 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного 2,91 (1Н, дд, J=14, 9Гц), 3,15 (1Н, дд, J=14, 4,5Гц), 3,20 (1Н, д. J=7Гц), 4,05 (1Н, дд, J=8, 4Гц), 4,47 зсуву d 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,40 (14Н, м), 1,53 (2Н, д, J=6Гц), 4,62 (1Н, дд, J=9, 4,5Гц), 5,43 (1Н, (4Н, м), 1,73 (3Н, с), 1,77 (3Н, с), 1,96 (2Н, м), 2,42 м), 5,52 (2Н, м), 6,78 (2Н, д, J=9Гц), 7,10 (2Н, д, (4Н, м), 2,56 (1Н, д, J=16,5Гц), 2,89 (1Н, д, J=9Гц) J=16,5Гц), 2,91 (1Н, дд, J=14Гц, 9Гц), 3,11 (1Н, дд, Приклад 5 J=14, 4,5Гц), 3,20 (1Н, д, J=8Гц), 3,63 (3Н, с), 3,71 Синтез Сполуки 7 (3Н, с), 4,47 (2Н, д, J=6Гц), 4,64 (1Н, дд, J=9, 10% Pd-C (1мг) додавали до розчину метанолу 4,5Гц), 5,43 (1Н, м), 5,54 (2Н, м), 6,79 (2Н, д, (2мл) Сполуки 1 (5мг, 0,0075ммоль) і J=9Гц), 7,08 (2Н, д, J=9Гц) перемішували при кімнатній температурі протягом Приклад 4 24 годин в атмосфері водню. Паладієвий Одну з фракцій одержаних в Прикладі 2 каталізатор потім відфільтровували після чого (Фракція 3, 453мг) піддавали препаративній концентрували фільтрат при пониженому тиску. високоефективній рідинній хроматографії за Одержаний залишок очищали за допомогою вищезгаданих Умов 2 для відокремлення фракції, препаративної рідинної хроматографії за умов що містить Сполуку 4 (Фракція 3-1), фракції, що приведених нижче одержуючи Сполуку 7 (1,7мг, містить Сполуку 5 (Фракція 3-2, 16,4мг) і фракції, 34%) у формі безбарвної маслоподібної речовини. що містить Сполуку 6 (Фракція 3-3, 26,5мг). Умови високоефективної рідинної Фракцію 3-1 концентрували при пониженому тиску хроматографії одержуючи 2мг Сполуки 4 у формі білого порошку. Прилад: CCPS, MCPD-3600 System (Tosoh) Фракцію 3-2 піддавали препаративній Колонка: CAPCELL РАК С18 (UG, високоефективній рідинній хроматографії за Умов 5, показані нижче, одержуючи фракцію, що містить 4,6мм´150мм) (Shiseido) Сполуку 5. Одержану фракцію концентрували при Рухома фаза: Елюювали градієнтом пониженому тиску виділяючи 4мг Сполуки 5 у розчинників використовуючи воду, що містить формі білого порошку. Аналогічно, Фракцію 3-3 0,005% трифтороцтової кислоти і ацетонітрил, що піддавали препаративній високоефективній містить 0,005% трифтороцтової кислоти (65% рідинній хроматографії за Умов 5 одержуючи 6мг ацетонітрилу до 98% ацетонітрилу, постадійно) Сполуки 6 у формі білого порошку. Фізико-хімічні властивості Сполуки 7 Умови 5 високоефективної рідинної Молекулярна вага: 661 хроматографії ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 662 (М+Н+) * 1 Прилад: CCPP-D, MCPD-3600 System (Tosoh) Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного Колонка: CAPCELL РАК CIS (UG 80, зсуву d: 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 0,96 (6Н, д, J=6,5Гц), 1,20-1,35 (14Н, м), 1,46-1,58 (4Н, м), 1,64 (2Н, к, 20мм´250мм) (Shiseido) 47 80742 48 J=6,5Гц), 1,83 (1Н, квінтет, J=6,5Гц), 1,93-2,01 (2Н, потім очищали за допомогою розгортаючої м), 2,43 (4Н, т, J=7,5Гц), 2,58 (1Н, д, J=16Гц), 2,89 тонкошарової хроматографії (DIOL F254s, Merck, (1Н, д, J=16Гц), 2,91 (1Н, дд, J=14, 9Гц), 3,16 (1Н, розчинник розгортання: дихлорметан/метанол дд, J=14, 5Гц), 3,19. (1Н, д, J=8,5Гц), 3,95 (2Н, т, (10:1), значення Rf: 0,4) одержуючи Сполуку 10 J=6,5Гц), 4,64 (1Н, дд, J=9, 5Гц), 5,50-5,56 (2Н, м), (3мг, 25%) у формі білого порошку. 6,79 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,11 (2Н, д, J=8,5ГЦ) Фізико-хімічні властивості Сполуки 10 Приклад 6 Молекулярна вага: 593 Синтез Сполуки 8 ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 594 (М+Н+) 1 Боргідрид натрію (13мг, 0,33ммоль) додавали Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного до метанольного розчину (1,5мл) Сполуки 1 (22мг, зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 1,03-1,40 (20Н, м), 0,033ммоль) і перемішували при кімнатній 1,45-1,60 (4Н, м), 2,40-2,47 (4Н, м), 2,54-2,64 (1Н, температурі протягом 4 годин. Реакційний розчин м), 2,65 (1Н, д, J=17Гц), 2,75-2,88 (2Н, м), 3,20 (1Н, потім нейтралізували 1N водною хлорводневою дд, J=14,5, 4,5Гц) 4,65 (1Н, дд, J=10, 4,5Гц), 6,69 кислотою i розчинник відганяли при пониженому (2Н, д, J=8,5Гц), 7,08 (2Н, д, J=8,5Гц) тиску. До одержаного залишку додавали Приклад 9 дихлорметан (10мл) і нерозчинну речовину Синтез Сполуки 11 відфільтровували. Фільтрат потім піддавали Хлорид амонію (7,3мг, 0,136ммоль), обробці Mega Bond Elute Diol (500мг, Varian) водорозчинний гідрохлорид карбодііміду (WSC одержуючи Сполуку 8 (11мг, 51%) у формі білого НСІ, 28мг, 0,145ммоль), 1-гідроксибензотриазол порошку при елююванні дихлорметан/метанол (HOBt, 22мг, 0,145ммоль) і N.N(30:1). діізопропілетиламін (DIPEA, 174мкл, 0,145ммоль) Фізико-хімічні властивості Сполуки 8 до ДМФА розчину (1мл) Сполуки 1 (20мг, 0,030мм) Молекулярна вага: 661 і перемішували при кімнатній температурі ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 662 (М+Н+) протягом 17 годин. Після відгонки розчинника при 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного пониженому тиску, залишок розчиняли в зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,48 (22Н, м), 1,73 етилацетаті (20мл) і потім промивали насиченим (3Н, с), 1,77 (3Н, с), 1,93-2,04 (2Н, м), 2,58 (1Н, д, водним хлоридом амонію (20мл) і насиченим J=16Гц), 2,89 (1Н, д, J=16Гц), 2,91 (1Н, дд, J=14, водним розчином NaCI (20мл). Після дегідратації і 9Гц), 3,16 (1Н, дд, J=14, 4,5Гц), 3,20 (1Н, д, J=8Гц), висушування органічного шару над безводним 3,44-3,53 (1Н, м), 4,48 (2Н, д, J=6,5Гц), 4,64 (1Н, сульфатом натрію, розчинник відганяли при дд, J=9, 4,5Гц), 5,41-5,47 (1Н, м), 5,51-5,56 (2Н, м), пониженому тиску. Одержаний залишок очищали 6,79 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,11 (2Н, д, J=8,5Гц) за допомогою препаративної високоефективної Приклад 7 рідинної хроматографії за умов приведених нижче Синтез Сполуки 9 одержуючи Сполуку 11 (4,4мг, 22%) у формі білого Сполуку 1 (30мг, 0,045ммоль) додавали до порошку. розчину 1,4-діоксану (1мл) і 6N водної Умови високоефективної рідинної хлорводневої кислоти (0,5мл) і потім хроматографії перемішували при 50°С протягом 5 хвилин і потім Прилад: CCPS, MCPD-3600 System (Tosoh) перемішували при кімнатній температурі протягом Колонка: CAPCELL РАК С18 (UG, 4 годин. Потім до реакційного розчину додавали 4,6мм´150мм) (Shiseido) воду (15мл) і екстрагували етилацетатом (15мл). Рухома фаза: Елюювали градієнтом Після промивання насиченим водним розчином розчинників використовуючи воду, що містить NaCI (15мл), органічний шар дегідратували і 0,005% трифтороцтової кислоти і ацетонітрил, що сушили над безводним сульфатом натрію. містить 0,005% трифтороцтової кислоти (65% Розчинник потім відганяли при пониженому тиску ацетонітрилу до 98% ацетонітрилу, постадійно) одержуючи Сполуку 9 (24мг, 91%) у формі білого Фізико-хімічні властивості Сполуки 11 порошку. Молекулярна вага: 656 Фізико-хімічні властивості Сполуки 9 ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 657 (М+Н+) 1 Молекулярна вага: 591 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 592 (М+Н+) зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 1,19-1,39 (14Н, м), 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного 1,46-1,59 (4Н, м), 1,73 (3Н, с), 1,77 (3Н, с), 1,88зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,40 (14Н, м), 1,98 (2Н, м), 2,28 (1Н, д, J=15Гц), 2,43 (4Н, т, 1,46-1,59 (4Н, м), 1,93-2,03 (2Н, м), 2,43 (4Н, т, J=7,5Гц), 2,74 (1Н, д, J=15Гц), 2,79 (1Н, дд, J=14, J=7Гц), 2,62 (1Н, д, J=16Гц), 2,89 (1Н, дд, J=14, 10Гц), 3,15 (1Н, дд, J=14, 4,5Гц), 3,18 (1Н, д, 9Гц), 2,91 (1Н, д, J=16Гц), 3,11 (1Н, дд, J=14, 5Гц), J=8Гц), 4,47 (2Н, д, J=6,5Гц), 4,59 (1Н, дд, J=10, 3,21 (1Н, д, J=8Гц), 4,61 (1 Η, дд, J=9, 5Гц), 5,464,5Гц), 5,39-5,49 (3Н, м), 6,79 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,13 5,57 (2Н, м), 6,67 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,02 (2Н, д, (2Н, д, J=8,5Гц) J=8,5Гц) Приклад 10 Приклад 8 Синтез Сполуки 12 Синтез Сполуки 10 10% Pd-C (10мг) додавали до метанольного 10% Pd-C (3мг) додавали до метанольного розчину (10мл) Сполуки 1 (80мг, 0,12ммоль) і розчину (1мл) Сполуки 9 (12мг, 0,020ммоль) і перемішували при кімнатній температурі протягом перемішували при кімнатній температурі протягом 20 годин в атмосфері водню. Паладієвий 3 годин в атмосфері водню. Паладієвий каталізатор відфільтровували використовуючи каталізатор відфільтровували і фільтрат Целіт і фільтрат концентрували при пониженому концентрували при пониженому тиску. Залишок тиску. Залишок потім очищали за допомогою 49 80742 50 розгортаючої тонкошарової хроматографії (DIOL шари об'єднували, промивали насичений водним F254s, Merck, розчинник розгортання: розчином NaCI (20мл) і потім дегідратували і дихлорметан/метанол (10:1), значення Rf: 0,8) сушили над безводним сульфатом натрію після одержуючи Сполуку 12 (41мг, 51%) у формі білого чого відганяли розчинник при пониженому тиску. порошку. Залишок потім очищали за допомогою Фізико-хімічні властивості Сполуки 12 розгортаючої тонкошарової хроматографії (Silica Молекулярна вага: 663 Gel F254, Merck, розчинник розгортання: ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 664 (М+Н+) гексан/етилацетат (3:1), Значення Rf: 0,3) 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного одержуючи гідразидну форму (11мг, 54%) у формі білого порошку. зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 0,96 (6Н, д, J=6,5Гц), Фізико-хімічні властивості Гідразидного 1,07-1,35 (20Н, м), 1,46-1,56 (4Н, м), 1,64 (2Н, κ, похідного J=6,5Гц), 1,81 (1Н, секстет, J=6,5Гц), 2,43 (4Н, т, J=7,5Гц), 2,50-2,58 (1Н, м), 2,61 (1Н, д, J=16,5Гц), Молекулярна вага: 687 БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) 2,84 (1Н, дд, J=14,5, 10,5Гц), 2,92 (1Н, д, 688 (М+Н+) J=16,5Гц), 3,22 (1Н, дд, J=14,5, 4Гц), 3,95 (2Н, т, 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення J=6,5Гц), 4,71 (1Н, дд, J=10,5, 4Гц), 6,81 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,16 (2Н, д, J=8,5Гц) хімічного зсуву d: 0,88 (3Н, т, J=6,5Гц), 1,15-1,37 Приклад 11 (24Н, м), 1,74 (3Н, с), 1,80 (3Н, с), 1,94-2,04 (2Н, м), Синтез Сполуки 13 2,62 (1Н, д, J=16Гц), 2,87 (1Н, д, J=16Гц), 3,00 (1Н, а) Синтез триметилестерного похідного дц, J=14, 7Гц), 3,10 (1Н, дд, J=14, 5,5Гц), 3,16 (1Н, Сполуки 1 д, J=9Гц), 3,67 (3Н, с), 3,72 (3Н, с), 3,76 (3Н, с), 10об/об% гексановий розчин (4,3мл) 4,47 (2Н, д, J=7Гц), 4,76-4,83 (1Н, м), 5,41-5,69 (3Н, триметилсилілдіазометану додавали до розчину м), 6,76 (1Н, д, J=8Гц), 6,80 (2Н, д, J=9Гц), 7,03 метанолу (15мл) і дихлорметану (15мл) Сполуки 1 (2Н, д, J=9Гц) (260мг, 0,39ммоль) і перемішували при кімнатній в) Синтез Сполуки 13 температурі протягом 3 годин. Реакційну суміш 1Μ водний розчин гідроксиду літію (0,15мл, потім концентрували при пониженому тиску і 0,15мм) додавали до етанольного розчину (1мл) одержаний залишок очищали використовуючи вищезгаданої гідразидної форми (10мг, Mega Bond Elute Silica Gel (2г, Varian). 0,015ммоль) і перемішували при кімнатній Триметилестерну форму Сполуки 1 (230мг, 83%) температурі протягом 16 годин. Реакційну суміш одержували у формі білого порошку потім нейтралізували 1N водним розчином використовуючи як елюент гексан/етилацетат хлорводневої кислоти і розчинник концентрували (1:1). при пониженому тиску. Залишок потім очищали за Фізико-хімічні властивості триметил естерної допомогою розгортаючої тонкошарової форми Сполуки 1 хроматографії (DIOL F254s, Merck, розчинник Молекулярна вага: 701 розгортання: дихлорметан/метанол (10:1), БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) Значення Rf: 0,5) одержуючи Сполуку 13 (3мг, 702 (М+Н+) 35%) у формі білого порошку. Слід відзначити, що 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного Сполуку 13 в цьому прикладі одержували у формі сполуки, в якій конфігурація тирозинової чистини є зсуву d: 0,89 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,37 (14Н, м), рацемерною. 1,46-1,59 (4Н, м), 1,73 (3Н, с), 1,77 (3Н, с), 1,93Фізико-хімічні властивості Сполуки 13 2,03 (2Н, м), 2,43 (4Н, т, J=7,5Гц), 2,60 (1Н, д, Молекулярна вага: 645 J=16Гц), 2,89 (1Н, дд, J=14, 9Гц), 2,93 (1Н, д, ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 646 (М+Н+) J=16Гц), 3,11 (1Н, дд, J=14, 5Гц), 3,19 (1Н, д, 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного J=8,5Гц), 3,63 (3Н, с), 3,71 (3Н, с), 3,72 (3Н, с), 4,48 (2Н, д, J=6,5Гц), 4,63 (1Н, дд, J=9, 5Гц), 5,40-5,58 зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 1,18-1,44 (24Н, м), 1,73 (3Н, м), 6,79 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,07 (2Н, д, J=8,5Гц) (3Н, с). 1,77 (3Н, с), 1,90-2,04 (2Н, м), 2,57-2,68 б) Синтез гідразидного похідного (1Н, м), 2,86-3,22 (4Н, м), 4,47 (2Н, д, J=6,5Гц), 4-Толуолсуль фонілгідразид (6,7мг, 4,56-4,67 (1Н, м), 5,39-5,65 (3Н, м), 6,78-6,84 (2Н, 0,036ммоль) додавали до метанольного розчину м), 7,09-7,16 (2Н, м) (2мл) вищезгаданої триметилестерної форми Приклад 12 Сполуки 1 (21мг, 0,030ммоль) і потім кип'ятили Синтез Сполуки 14 протягом 1,5 годин. Розчинник відганяли при Сполуку 1 (10мг, 0,015ммоль) і дигідрохлорид пониженому тиску, і одержаний залишок сушили О-(2-аміноетил)гідроксиламіну (4,5мг, 0,030ммоль) при пониженому тиску протягом 24 годин. Залишок розчиняли в піридині (0,2мл) і перемішували при потім розчиняли в безводному хлороформі (2мл) і кімнатній температурі протягом 16 годин. Після потім при 0°С додавали 1Μ тетрагідрофурановий відгонки розчинника при пониженому тиску, розчин катехолборану (75мкл, 0,075ммоль) і залишок очищали за допомогою розгортаючої перемішували при цій температурі протягом 3 тонкошарової хроматографії (DIOL F254s, Merck, годин. До реакційної суміші додавали метанол розчинник розгортання: дихлорметан/метанол (20мкл) і перемішували при кімнатній температурі (5:1), Значення Rf: 0,5) одержуючи Сполуку 14 (Ro протягом 10 хвилин. Крім того, додавали ацетат 4575919) (7,7мг, 71%) у формі безбарвної натрію (8мг, 0,060ммоль) і диметилсульфоксид маслоподібної речовини. (32мкл) і кип'ятили протягом 1 години. Потім до Фізико-хімічні властивості Сполуки 14 реакційної суміші додавали воду (20мл) і потім Молекулярна вага: 717 двічі екстаргували етилацетатом (20мл). Органічні ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 718 (М+Н+) 51 80742 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 1,21-1,40 (14Н, м), 1,42-1,56 (4Н, м), 1,74 (3Н, с), 1,78 (3Н, с), 1,882,04 (2Н, м), 2,18 (2Н, т, J=7,5Гц), 2,30-2,37 (2Н, м), 2,63 (1Н, д, J=15Гц), 2,84-2,97 (2Н, м), 3,12-3,25 (4Н, м), 4,18 (2Н, т, J=5Гц), 4,48 (2Н, д, J=6,5Гц), 4,63 (1Н, дд, J=9, 4Гц), 5,40-5,62 (3Н, м), 6,80 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,11 (2Н, д, J=8,5Гц) Приклад 13 Синтез Сполуки 15 Сполуку 1 (10мг, 0,015ммоль) і гідрохлорид Ометилгідроксиламіну (2,5мг, 0,030ммоль) розчиняли в піридині (0,2мл) і перемішували при кімнатній температурі протягом 15 годин. Після відгонки розчинника при пониженому тиску, залишок очищали використовуючи Mega Bond Bute Diol (500мг, Varian). Сполуку 15 (9,6мг, 92%) одержували у формі у формі безбарвної маслоподібної речовини викорстовуючи як елюент дихлорметан/метанол (25:1). Фізико-хімічні властивості Сполуки 15 Молекулярна вага: 688 ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 689 (М+Н+) 1 Н-ЯМР (в метанолі d-4) значення хімічного зсуву d: 0,90 (3Н, т, J=7Гц), 1,20-1,36 (14Н, м), 1,40-1,50 (4Н, м), 1,74 (3Н, с), 1,78 (3Н, с), 1,912,00 (2Н, м), 2,14 (2Н, т, J=7,5Гц), 2,27 (2Н, т, J=7,5Гц), 2,59 (1Н, д, J=16Гц), 2,90 (1Н, д, J=16Гц), 2,91 (1Н, дд, J=14, 9Гц), 3,16 (1Н, дд, J=14, 4,5Гц), 3,20 (1Н, д, J=8,5Гц), 3,75 (3Н, с), 4,48 (2Н, д, J=6,5Гц), 4,64 (1Н, дд, J=9, 4,5Гц), 5,41-5,49 (1Н, м), 5,52-5,60 (2Н, м), 6,80 (2Н, д, J=8,5Гц), 7,11 (2Н, д, J=8,5Гц). Крім того, наступні сполуки можуть бути синтезовані згідно з методиками подібними тим, що описані вище. 52 1 Крім того, за допомогою прикладів описується спосіб одержання сполуки формули (І) представленого винаходу і фармакологічно активної сполуки формули (І). Приклад 14 1-1 (Стадія 1-1) 53 80742 Згідно з способом описаним в літературі [J. Org. Chem. 1989,45, 5522, В.Е. Marron, et al.], синтезували сполуку а (70,1г) формули: і розчин цієї сполуки в безводному діетиловому етері (700мл) охолоджували до 0°С, і до нього повільно додавали біс(2метоксиетокси)алюмогідриднатрію (414ммоль, 121мл, 70% толуольний розчин). Баню з льодом прибирали через 5 хвилин після завершення додавання реагенту і перемішування продовжували при кімнатній температурі протягом однієї години. Реакційну суміш охолоджували до 0°С і до неї повільно додавали безводний етилацетат (19,8мл, 203ммоль). Потім суміш перемішували при цій температурі протягом 10 хвилин, охолоджували до -78°С, після чого додавали йод (76,1г, 300ммоль). Температуру суміші поступово піднімали до кімнатної температури протягом 2 годин до завершення реакції. До реакційної суміші додавали водний розчин гідросульфіту натрію і потім етилацетат. Потім реакційний розчин піддавали фільтруванню крізь целіт, органічний шар відокремлювали і водний шар знову екстрагували етилацетатом. Об'єднані органічні шари сушили над безводним сульфатом натрію, їх концентрували при пониженому тиску одержуючи неочищену вказану в заголовку сполуку (100г) як світло-коричневе масло. Одержаний таким чином неочищений продукт використовували в наступній реакції. Фізико-хімічні властивості Сполуки b Молекулярна вага 466 БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) 467 (М+Н+) 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення хімічного зсуву d: 1,04 (9Н, с), 1,44(1Н, т, J=5Гц), 2,73 (2Н, т, J=6Гц), 3,80 (2Н, т, J=6Гц), 4,18 (2Н, т, J=5Гц), 5,91 (1Н, т, J=5Гц), 7,35-7,46 (6Н, м), 7,657,69 (4Н, м) 1-2 (стадія 1-2) Розчин (300мл) сполуки b одержаної у згаданій вище реакції в дихлорметані охолоджували до 0°С і до нього додавали дигідропіран (22,7мл, 248ммоль). До цього розчину додавали паратолуолсульфонат піридинію (260мг, 1ммоль). Через одну годину, до суміш додавали водний розчин бікарбонату натрію до припинення реакції. Відокремлений органічний шар промивали насиченим водним розчином NaCI і сушили над безводним сульфатом натрію, потім концентрували при пониженому тиску. Одержану неочищену сполуку с (108г) використовували без очищення для наступної реакції. 54 Фізико-хімічні властивості Сполуки с Молекулярна вага 550 БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) 551 (М+Н+) 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення хімічного зсуву d: 1,04 (9Н, с), 1,49-1,91 (6Н, м), 2,74 (2Н, т, J=6Гц), 3,46-3,58 (2Н, м), 3,76 (2Н, т, J=6Гц), 3,82-3,93 (1Η, м), 4,06 (1Η, дд, J=13, 6Гц), 4,27 (1Η, дд, J=13,6Гц), 4,65 (1 Η, т, J=3Гц), 5,91 (1H, т, J=5Гц), 7,35-7,43 (6H, м), 7,65-7,69 (4Н, м) 1-3 (стадія 1-3) Неочищену сполуку с (4,73г) розчиняли в безводному діетиловому етері (30мл) і охолоджували до -78°С. Повільно додавали третбутиллітій (17,2ммоль, 10,7мл, 1,6N пентановий розчин). Суміш перемішували при цій температурі протягом однієї години, додавали параформальдегід (18,9ммоль, 570мг) і суміш перемішували при цій температурі протягом 30 хвилин. Температуру суміші піднімали до 0°С і перемішували протягом години. Додавали водний хлорид амонію до припинення реакції і екстрагували етилацетатом Водний шар екстрагували малою кількістю етилацетату і об'єднаний органічний шар промивали насиченим водним розчином NaCI, і потім сушили над безводним сульфатом натрію. Неочищений продукт одержаний концетруванням при пониженому тиску очищали за допомогою колонкової хроматографії (силікагель, гексанетилацетат 9:1-4:1) одержуючи сполуку d (1,635г) як безбарвне масло. Фізико-хімічні властивості Сполуки d Молекулярна вага 454 БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) 455 (М+Н+) 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення хімічного зсуву d: 1,04 (9Н, с), 1,49-1,89 (6Н, м), 2,41 (2Н, т, J=6Гц), 3,03 (1Н, т, J=6Гц), 3,47-3,58 (2Н, м), 3,75-3,92 (3Н, м), 4,08-4,26 (4Н, м), 4,68 (1Н, т, J=3Гц), 5,53 (1Н, т, J=7Гц), 7,35-7,47 (6Н, м), 7,64-7,68 (4Н, м) 1-4 (стадія 1-4) Розчин (2мл) сполуки d (344мг, 0,76ммоль) і імідазолу (77мг, 1,14ммоль) в безводному Ν,Νдиметилформаміді охолоджували до 0°С і додавали трет-бутилдифенілхлорсилан (0,2мл, 0,76ммоль) і перемішували суміш протягом 2 годин. Додавали водний розчин хлориду амонію до припинення реакції і реакційну суміш екстрагували гексаном. Органічний шар двічі промивали водою, потім насиченим водним розчином NaCI і сушили над безводним 55 80742 56 сульфатом натрію. Концентрували при додавання, суміш перемішували при -20°С пониженому тиску одержуючи неочищену сполуку протягом 2 годин і додавали диметилсульфід є (554мг) як безбарвне масло. (1,1мл) і перемішували суміш при цій температурі Фізико-хімічні властивості Сполуки є протягом ще години. Потім до реакційної суміш Молекулярна вага 692 додавали 10% водний розчин винної кислоти і БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) суміш перемішували протягом 30 хвилин, і 715 (M+Na+) перемішували при кімнатній температурі протягом 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення однієї години. Органічний шар відокремлювали і водний шар екстрагували малою кількістю хімічного зсуву d: 1,00 (9Н, с),1,04 (9Н, с), 1,38-1,82 дихлорметану. Об'єднаний органічний шар сушили (6Н, м), 2,49 (2Н, т, J=7Гц), 3,29-3,42 (1Н, м), 3,63над безводним сульфат натрію. Неочищений 3,85 (4Н, м), 4,00-4,09 (1Н, м), 4,14 (2Н, с), 4,46 продукт одержаний концентруванням при (1Н, т, J=3Гц), 5,43 (1Н, т, J=7Гц), 7,29-7,48 (12Н, м), 7,57-7,78 (8Н, м) пониженому тиску очищали за допомогою колонкової хроматографії (силікагель, гексан1-5 (Стадія 1-5) етилацетат 9:1) одержуючи сполуку g (4,78г, 97%) як безбарвне масло. Асиметричний вихід (>95%ее) визначали за допомогою ЯМР аналізу відповідного МТРА естеру. Фізико-хімічні властивості Сполуки g Молекулярна вага 624 БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) Пара-толуолсульфонат піридинію (90мг, 647 (M+Na+) 0,36ммоль) додавали до розчину (6мл) сполуки е 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення (1,16г, 1,67ммоль) в етанолі і суміш перемішували хімічного зсуву d: 1,02 (9H, с), 1,03 (9Н, с), 1,72 при 60°С протягом 3,5 годин. Розчин (1Н, т, J=6Гц), 1,82 (1Н, дт, J=14, 7Гц), 2,23 (1Н, дт, охолоджували до кімнатної температури, J=14, 6Гц), 3,17 (1Н, дд, J=6, 5Гц), 3,55-3,79 (6Н, додавали водний насичений розчин бікарбонату м), 7,32-7,45 (12Н, м), 7,60-7,65 (8Н, м) натрію і екстрагували етилацетатом. Органічний 1-7 (стадія 1-7) шар промивали послідовно водою і насиченим водним розчином NaCI і сушили над безводним сульфатом натрію. Концентрували при пониженому тиску і неочищений продукт одержаний таким чином очищали за допомогою колонкової хроматографії (силікагель, гексанетилацетат 20:1) одержуючи сполуку f (825мг, 81%) як безбарвне масло. В атмосфері азоту, Фізико-хімічні властивості Сполуки f бісциклопентадієнілцирконійгідрохлорид (10,11г, Молекулярна вага 608 37,2ммоль) додавали до розчину (100мл) сполуки БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) + а (10,45г, 37,2ммоль) одержаної на Стадії 2-3 631 (M+Na ) 1 прикладу 1 приготування описаному ви ще в Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення безводному тетрагідрофурані при кімнатній хімічного зсуву d: 1,01 (9Н, с), 1,01 (9Н, с), 1,23 температурі і суміш перемішували протягом 30 (1Н, т, J=6Гц), 2,41 (2Н, т, J=7Гц), 3,75 (2Н, т, хвилин. Розчин одержаний таким чином J=7Гц), 3,90 (2Н, т, J=6Гц), 4,14 (2Н, с), 5,47 (1Н, т, охолоджували до -78°С і додавали J=7Гц), 7,29-7,47 (12Н, м), 7,57-7,75 (8Н, м) метилмагнійхлорид (24,7мл, 74ммоль, 3N 1-6 (стадія 1-6) тетрагідрофурановий розчин) і перемішували суміш протягом 5 хвилин. До цього розчину додавали йодид міді (500мг, 7,2ммоль) і температуру суміші поступово піднімали до -30°С. Протягом 20 хвилин додавали розчин (70мл) сполуки g (4,49г) в безводному тетрагідрофурані і після завершення додавання суміш перемішували при -25°С протягом ночі. Повільно додавали Круглодонну колбу, в яку поміщений, ротор насичений водний розчин хлориду амонію до нагрівали і сушили при пониженому тиску і потім припинення реакції і температуру суміші поступово поміщали в атмосферу азоту і в неї вносили піднімали до кімнатної температури. Суміш безводний дихлорметан (60мл) і потім перемішували при кімнатній температурі протягом охолоджували до -20°С. Послідовно додавали 10 годин і білу твер. речовину, що випала в осад, тетра-ізопропоксид титану (2,33мл, 7,88ммоль) і видаляли фільтруванням крізь целіт. Целіт добре діетил L-(+)-тартрат (1,62мл, 9,46ммоль) і потім промивали етилацетатом до видалення перемішували суміш протягом 15 хвилин, органічного шару. Водний шар екстрагували додавали розчин (30мл) сполуки f (4,80г, малою кількістю етилацетату і об'єднаний 7,88ммоль) в дихлорметані і перемішували суміш органічний шар промивали насиченим водним протягом 15 хвилин. Суміш охолоджували до розчином хлориду амонію, потім сушили над 25°С і по вільно по краплям додавали третбезводним сульфатом натрію. Концентрували при бутилгідропероксид (5,25мл, 15,8ммоль, 3N пониженому тиску і неочищений продукт дихлорметановий розчин). Після завершення 57 80742 58 одержаний таким чином очищали за допомогою чином очищали за допомогою колонкової колонкової хроматографії (силікагель, гексанхроматографії (силікагель, гексан:етилацетат 9:1етилацетат 20:1-9:1) одержуючи сполуку h (5,96г, 3:2) одержуючи сполуку j (1,73г, 81%) як блідо91%) як блідо-жовте масло. жовте масло. Фізико-хімічні властивості Сполуки h Фізико-хімічні властивості Сполуки j Молекулярна вага 907 Молекулярна вага 470 БША-МС (негативний метод, матрикс m-NBA) БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) 906 (М-Н+) 493 (M+Na+) 1 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення хімічного зсуву d: 0,88 (3Н, т, J=7Гц), 0,99 (9Н, с), хімічного зсуву d :0,88 (3Н, т, J=6Гц), 1,17-1,73 1,04 (9Н, с), 1,18-1,63 (22Н, м), 1,78-2,01 (4Н, м), (26Н, м), 1,91-2,16 (4Н, м), 2,44 (1Н, шс), 2,73 (1Н, 2,44-2,57 (1Н, м), 3,00 (1Н, т, J=6Гц), 3,59-3,92 дт, J=6,10Гц), 2,95 (1Н, шс), 3,48 (1Н, д, J=11Гц), (10Н, м), 4,28 (1Н, с), 5,37-5,55 (2Н, м), 7,29-7,65 3,63-4,01 (м, 10Н), 5,15 (1Н, дд, J=15,9Гц), 5,55 (20Н, м) (1Η, дт, J=15,7Гц) 1-8 (стадія 1-8) 1-10 (стадія 1-10) Сполуку h (5,30г, 5,84ммоль) розчиняли в дихпорметані (200мл) і 2,2-додавали диметоксипропан (150мл) і пара-толуолсульфонат піридинію (15мг, 0,058ммоль) і перемішували суміш при кімнатній температурі протягом ночі. Додавали насичений водний розчин бікарбонату натрію до припинення реакції і суміш двічі екстрагували дихлорметаном. Сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували при пониженому тиску. Неочищений продукт одержаний таким чином очищали за допомогою колонкової хроматографії (силікагель, гексанетилацетат 20:1) одержуючи сполуку і (4,69г, 86%) як блідо-жовте масло. Фізико-хімічні властивості Сполуки і Молекулярна вага 947 БША-МС (негативний метод, матрикс m-NBA) 946 (М-Н+) 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення хімічного зсуву d: 0,88 (3Н, т, J=6Гц), 1,02 (9Н, с), 1,05 (9Н, с), 1,14-1,63 (28Н, м), 1,78-2,16 (4Н, м), 2,41-2,51 (1Н, м), 3,47 (1Н, д, J=10Гц), 3,64-3,86 (6Н, м), 3,92 (с, 4Н), 5,36-5,42 (2Н, м), 7,28-7,47 (12Н, м), 7,61-7,69 (8Н, м) 1-9 (стадія 1-9) Розчин (50мл) сполуки і (4,39г, 4,64ммоль) в тетрагідрофурані охолоджували до 0°С і додавали фторид тетрабутиламонію (10,2мл, 10,2ммоль, 1М тетрагідрофурановий розчин) і оцтову кислоту (0,53мл, 9,27ммоль). Температуру суміші поступово збільшували до кімнатної температури і суміш перемішували протягом 2 днів. Додавали насичений водний хлорид амонію і суміш двічі екстрагували дихлорметаном. Об'єднаний органічний шар промивали водним розчином бікарбонату натрію і сушили над безводним сульфат натрію. Концентрували при пониженому тиску і неочищений продукт одержаний таким В атмосфері азоту, розчин (17мл) оксалілхлориду (0,575мл, 6,6ммоль) безводного дихлорметану охолоджували до -78°С і по краплям додавали розчин (1мл) диметилсульфоксиду (0,936мл, 13,2ммоль) в дихлорметані і перемішували суміш протягом 15 хвилин. По краплям повільно додавали розчин (5мл) сполуки j (388мг, 0,824ммоль) в дихлорметані. Суміш перемішували при цій температурі протягом однієї години, додавали триетиламін (3мл, 21,4ммоль) і перемішували суміш ще 30 хвилин. Охолоджувальну баню прибирали і крізь розчин пропускали струм азоту для видалення низькокиплячих сполук і потім сушили при пониженому тиску. До залишку додавали діетиловий етер (15мл) і нерозчинні речовини видаляли фільтруванням, потім концентрували. Цю методику повторювали двічі і залишок одержаний таким чином негайно використовували для наступної реакції. Згаданий вище діальдегід розчиняли в 2метил-2-пропанолі (24мл) і 2-метил-2-бутені (6мл) і суміш охолоджували до приблизно 5-7°С. До цього розчину повільно по краплям додавали водний розчин (7,45мл) хлориту натрію (745мг, 8,24ммоль) і дигідрофосфату натрію (745мг, 6,21ммоль). Через 2 години, суміш охолоджували до 0°С і додавали водний розчин дигідрофосфату натрію доводячи рН до приблизно 5. Суміш екстрагували три рази дихлорметаном і об'єднаний органічний шар промивали водним насиченим розчином NaCI, сушили над безводним сульфатом натрію. Після фільтрування, блідо-жовте масло одержане концентруванням при пониженому тиску використовували для наступної реакції без подальшого очищення. Неочищену дикарбонову кислоту розчиняли в ди-трет-бутилацеталі N.N-диметилформаміду (4,5мл) і суміш перемішували при 70°С протягом однієї години. Низькокиплячу речовину відганяли при пониженому тиску. Залишок очищали за допомогою колонкової хроматографії (силікагель, 59 80742 60 гексан-етилацетат 20:1) одержуючи сполуку k ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) (М+Н+) 542 1 (340мг, 60%) як блідо-жовте масло. Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення Фізико-хімічні властивості Сполуки k хімічного зсуву d: 0,88 (3Н, т, J=6Гц), 1,16-1,67 Молекулярна вага 610 (36Н, м), 1,99 (2Н, к, J=6Гц), 2,35 (4Н, т, J=8Гц), БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) 2,70 (1Н, д, J=16Гц), 2,90 (1Н, д, J=16Гц), 3,28 (1Н, (M+H+) 611, (M+Na +) 633 д, J=9Гц), 5(52 (1Н, дд, J=9, 15Гц), 5,68 (1Н, дт, 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення J=15,5Гц) 1-13 (стадія 1-13) хімічного зсуву d: 0,88 (3Н, т, J=6Гц), 1,18-1,64 (46Н, м), 1,99 (2Н, к, J=7Гц), 2,69 (2Н, ABq, J=15, 18Гц), 2,93 (1Н, к, J=7Гц), 3,82-3,88 (2Н, м), 3,92 (4Н, с), 5,51-5,69 (2Н, м) 1-11 (стадія 1-11) Сполуку k (340мг, 0,556ммоль) розчиняли в тетрагідрофурані (1мл) і додавали 80% водний розчин оцтової кислоти (10мл) і перемішували суміш при кімнатній температурі протягом 3,5 годин. Потім суміш повільно додавали до насиченого розчину бікарбонату натрію до нейтралізації оцтової кислоти, суміш двічі екстрагували етилацетатом. Сушили над безводним сульфатом натрію, фільтрували і концентрували при пониженому тиску одержуючи сполуку 1 (290мг, 99%) як блідо-жовте масло. Фізико-хімічні властивості Сполуки І Молекулярна вага 526 БША-МС (позитивний метод, матрикс m-NBA) (M+H+) 527, (M+Na +) 549 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення хімічного зсуву d: 0,88 (3Н, т, J=7Гц), 1,18-1,68 (36Н, м), 2,01 (2Н, к, J=7Гц), 2,25-2,41 (5Н, м), 1,99 (1Н, д, J=7Гц), 2,04 (1Н, д, J=7Гц), 3,62-3,82 (2Н, м), 3,99 (1Н, с), 5,42 (1Н, дд, J=9,15Гц), 5,58(1H, дт, J=16,6Гц) 1-12 (стадія 1-12) Ацетон (45мл) охолоджували до 0°С і додавали реагент Джоунеса (0,48мл, 0,9ммоль, 1,89N). До цієї суміш повільно по краплям додавали розчин (3мл) сполуки 1 (216мг, 0,41ммоль) в ацетоні. Потім суміш перемішували при цій температурі протягом однієї години, додавали водний розчин гідросульфіту натрію до зникнення жовтого кольору реакційного розчину і появи темно-зеленого осаду і потім реакцію зупинялась. Додавали насичений водний розчин NaCI (20мл) і суміш двічі екстрагували дихлорметаном. Об'єднаний органічний шар сушили над безводним сульфат натрію. Його концентрували при пониженому тиску і залишок очищали за допомогою колонкової хроматографії на силікагелі (дихлорметан-метанол 50:1-20:1) одержуючи сполуку m (198мг, 89%) як блідо-жовте масло. Фізико-хімічні властивості Сполуки m Молекулярна вага 541 Розчин (1мл) сполуки m (6,4мг, 0,012ммоль) і гідрохлорид т-бутилового естеру (S)-4-(2бутинілокси)фенілаланіну (4,6мг, 0,014ммоль) в Ν,Ν-диметилформаміді охолоджували до -10°С і послідовно додавали Ν,Ν-діізопропілетиламін (0,005мл, 0,026ммоль) і О-(7-азабензотiазол-1-іл)N,N,N',N'-тетраметилуронiю гексафторфосфат (7,0мг, 0,017ммоль). Температуру суміші повільно піднімали до кімнатної температури і суміш перемішували протягом ночі. Додавали водний розчин хлориду амонію до зупинки реакції і суміш екстрагували етилацетатом. Потім органічний шар промивали послідовно двічі водою і насиченим водним розчином NaCI, сушили над безводним сульфат натрію. Після фільтрування і концентрування при пониженому тиску, залишок очищали за допомогою тонкошарової хроматографії на силікагелі (гексан-етилацетат 7:3) одержуючи сполуку n (8,4мг, 88%) як безбарвну тверду речовину. Фізико-хімічні властивості Сполуки n ЕСІ (РХ/МС позитивний метод) 834 (M+Na +) 1 Н-ЯМР (в дейтерохлороформі) значення хімічного зсуву d: 0,86 (3Н, т, J=6Гц), 1,12-1,68 (45Н, м), 1,85 (3Н, т, J=1,9Гц), 1,90-2,03 (2Н, м), 2,29-2,43 (4Н, м), 2,59 (1Н, д, J=16,5Гц), 2,76 (1Н, д, J=16,5Гц), 2,97-3,14 (3Н, м), 4,22 (1Н, с), 4,574,74 (3Н, м), 5,46 (1Н, дд, J=9,2, 15,2Гц), 5,64 (1Н, дт, J=6,6, 15,2Гц), 6,86 (2Н, д, J=8,6Гц) 7,01 (1Н, д, J=7,9Гц), 7,13 (2Н, д, J=8,6Гц) 1-14 (стадія 1-14) Розчин (3мл) сполуки n (8,4мг) в дихлорметані охолоджували до 0°С і послідовно додавали анізол (0,01мл) і трифтороцтову кислоту (1мл). Температуру суміші повільно піднімали до кімнатної температури і суміш перемішували протягом ночі. Потім реакційний розчин концентрували при пониженому тиску, його двічі азеотропували з бензолом. Залишок очищали використовуючи Megabond Elute Diol (500мг,