Спосіб застосування оксирезвератролу як протипухлинного засобу

Спосіб застосування оксирезвератролу як протипухлинного засобу, що включає використання поліфенольних сполук рослинного походження класу стильбенів, який відрізняється тим, що водний розчин оксирезвератролу застосовують метрономно, перорально, в нецитотоксичних дозах. (19) (21) u200909557 (22) 18.09.2009 (24) 10.03.2010 (46) 10.03.2010, Бюл.№ 5, 2010 р. (72) СОЛЯНИК ГАЛИНА ІВАНІВНА, СЛАСТЯ ЄВГЕН АНАТОЛІЙОВИЧ, ФЕДОРЧУК ОЛЕКСАНДР ГРИГОРОВИЧ, ПЯСКОВСЬКА ОЛЬГА МИКОЛАЇВНА, ДАСЮКЕВИЧ ОЛЬГА ЙОСИПІВНА, ГОРБИК ГРИГОРІЙ ВАСИЛЬОВИЧ, КОЛЕСНИК ДЕНИС ЛЕОНІДОВИЧ 3 OXY отримують шляхом екстракції подрібненої деревини маклюри {Maclura pomifera) та білої шовковиці (Morus alba), вміст OXY в яких складає 2% від сухої ваги. В якості екстрагента використовують ацетонітрил, який дає найкращі результати. Подрібнену сировину мацерують в екстрагенті при 50°С протягом 24 годин та відділяють екстрагент. Упарений в вакуумі екстракт наносять на сілікагель для колоночної хроматографії та проводять розділення в градієнтній системі, яка складається з полярного розчинника (діетиловий ефір, етилацетат, тетрагідрофуран, етанол, ацетонітрил) та неполярного (гексан, бензол, толуол). Найкращі результати дає використання системи ацетонітрил-бензол (1:1). Така система розчинників відрізняється від описаних раніше та забезпечує більш високу ефективність розділення та дозволяє отримувати безводний кристалічний OXY за рахунок видалення слідів води за допомогою азеотропної відгонки з бензолом при концентруванні. Контроль чистоти отриманого OXY проводять методом високоефективної рідинної хроматографії на колонці Nucleosil C18 2*250мм із зернінням сорбента 5мкм у градієнтному режимі елюювання в системі вода - ацетонітрил. Пік OXY ідентифікують за характерним спектром в ультрафіолетовому діапазоні. Структура виділеного OXY підтверджується ЯМР-С13 та МАСС- спектрометрією. Ефективність протипухлинної та антиметастатичної дії OXY досліджується: - на мишах-самцях лінії С57/В16 з перещепленими внутрішньом'язово пухлинними клітинами двох варіантів карциноми легень Льюїс (вихідним варіантом LLC та ангіогенез-незалежним LLC/R9); - на білих безпородніх мишах з перещепленою асцитною формою карциноми Ерліха; - на щурах лінії Wistar з перещепленою інтрацеребрально гліомою. Миші віком 2-2.5міс. з вагою 18-23г. Щури віком 1-1.5 місяць вагою 95-105г. Терапія мишей та щурів з експериментальних груп включає щоденне перероральне введення (метрономне введення) OXY в сумарній дозі 0.2 мг/грам ваги тіла тварин в 0.4мл та 3мл дистильованої води (для мишей та щурів, відповідно). Контрольні тварини отримують по відповідній схемі дистильовану воду. Кількість введень - 15. Кожну третю добу росту пухлин LLC та LLC/R9 у кожної миші вимірюють об'єм пухлини. На 5-6 добу після закінчення терапії тварин з LLC та LLC/R9 декапітують під легким ефірним наркозом, видаляють легені та підраховують кількість метастазів (з урахуванням їх розміру). Для мишей з асцитною формою карциноми Ерліха та для щурів з гліомою щоденно фіксують виживаність тварин. Протипухлинну дію OXY оцінюють за відсотком гальмування росту первинної пухлини та по збільшенню середньої тривалості життя тварин. Антиметастатичну дію OXY оцінюють за відсотком гальмування метастазування (як по кількості метастазів, так і по об'єму метастатичного ураження). 48213 4 Антиметастатична активність OXY проявляється в значному зменшенні як кількості метастазів, так і об'єму метастатичного ураження легень. Так, у мишей з LLC кількість метастазів зменшується у середньому на 42%, а об'єм метастатичного ураження легень - на 70% (р