Похідні 5-арил-3-(8-азабіцикло[3.2.1]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(3н)-ону як ліганди рецептора 5-ht4, спосіб їх одержання, фармацевтична композиція та лікарський засіб на їх основі

1 4 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що R2 - 4[4-(диметиламшо)-1-піперидил]-4-оксобутил, 5-[4(диметиламшо)-1-піперидил]-5-оксопентил або 6[4-(диметиламшо)-1-піперидил]-6-оксогексил 5 Спосіб одержання сполуки за п 1, який відрізняється тим, що естер загальної формули (II) в якому R-і, Х-і, Х2 та Хз визначені за п 1, a R3 - метил чи етил, піддають взаємодії з гідратом гідразину з отриманням гідразиду загальної формули (III) ПОХІДНІ 5-арил-3-(8-азабіцикло[3 2 1]ОКТ-3 ІЛ)-1 ,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону у формі чистого геометричного чи оптичного ізомеру або суміші ізомерів загальної формули (І) h де Ri - (Сі-С4)алкіл або (Сз-С7)циклоалкілметил, Х і - атом гідрогену чи галогену або ( С г С^алкоксил, або інакше ORi та Х і разом утворюють групу формул -ОСН 2 О-, -О(СН 2 ) 2 -, -О(СН 2 )з-, -О(СН 2 ) 2 О- або О(СН 2 ) 3 О-, Х 2 - атом гідрогену чи аміногрупа, Хз - атом гідрогену чи галогену, а R2 - атом гідрогену, (Сі-Сє)алкіл, феніл(Сі-С^алкіл або група загальної формули -(CH 2 ) n CO-Z, в якій n=1-6, a Z - 1-піперидил чи 4-(диметиламіно)-1піперидил, у формі вільної основи або фармацевтично прийнятної кислотно-адитивної солі 2 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що R2 бутил 3 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що R2 - 2фе ніл етил О , (НІ) який циклізують в оксадіазол загальної формули (IV) о , (IV) з участю фосгену або фенілхлорформіату, після чого оксадіазол загальної формули (IV) піддають взаємодії зтропанолом загальної формули (V) в якій R2 визначено з огляду на загальну формулу (І), але він не є атомом гідрогену, або альтернативно є (1,1-диметилетокси)карбонільною захисною групою, у присутності трифенілфосфшу та етилазодикарбоксилату, після чого за необхідністю атом нітрогену тропанового кільця лишають захисної групи за допомогою трифлуороцтової кислоти з отриманням сполуки загальної формули (І), в якій R2 - атом гідрогену, а за бажанням, отриману сполуку обробляють похідним загальної формули R2 о ю З 57071 4 X, в якій X - здатна до відщеплення група, a R2 містить сполуку за одним з пп 1-4 визначено з огляду на загальну формулу (І), але 7 Фармацевтична композиція, яка відрізняється він не є атомом гідрогену тим, що включає сполуку за одним з пп 1-4 у спо6 Лікарський засіб, який відрізняється тим, що лученні з ексципієнтом Згідно З винаходом запропоновано сполуки формули (І) - (Сі-С4)алкіл або (Сз-С7)циклоалкілметил, Хі - атом гідрогену чи галогену або ( d С^алкоксил, або інакше ORi та Хі разом утворюють групу формул -ОСН2О-, -О(СН2)2-, -О(СН2)з-, -О(СН2)2О- або О(СН2)3О-, Х2 - атом гідрогену чи аміногрупа, Хз - атом гідрогену чи галогену, а R2 - атом гідрогену, (Сі-Сє)алкіл, феніл(Сг С^алкіл або група загальної формули -(СН2)ПСОZ, в якій п = 1-6, a Z - 1-піперидил чи 4(диметиламшо)-і-піперидил Коли R2 - алкіл, ним, переважно, є бутил Коли R2- феніл(Сі-Сз)алкіл, ним, переважно, є 2-фенілетил Коли R2 - група загальної формули -(СН2)ПСОZ, нею, переважно, є 4-[4-(диметиламшо)-1піперидил]-4-оксобутил, 5-[4-(диметиламшо)-1піперидил]-5-оксопентил або 6-[4-(диметиламшо)1-піперидил]-6-оксогексил Сполуки згідно з винаходом можуть існувати як ВІЛЬНІ основи або фармацевтично прийнятні кислотно-адитивні солі 3 огляду на тропанове кільце вони можуть бути ендо- чи екзоізомерами Крім того, деякі замісники R2 можуть мати асиметричні атоми карбону, а тому сполуки можуть існувати як різні чисті чи змішані геометричні та/або оптичні ізомери У патентній заявці ЕР-0554794 розкрито N-(8азабіцикло[3 21]окт-3-іл)бензаміди, що мають структуру, яка близька до будови сполук згідно з винаходом, та спорідненість до рецепторів 5-НТЗ та 5-НТ4 Згідно З винаходом сполуки загальної формули (І) можна отримати способом, який зображено на схемі, наведеній нижче Естер загальної формули (II), в якому Ri, X-i, Х2 та Хз визначені вище, a R3 - метил чи етил, реагує з гідратом гідразину у відсутності розчинника або в полярному протонному розчиннику, наприклад, етанолі, для одержання гідразиду загальної формули (III), який циклізують в оксадіазол загальної формули (IV) фосгеном в апротонному розчиннику, наприклад, діоксані, або феніл(хлорформіатом) в апротонному розчиннику, наприклад, толуолі Оксадіазол загальної формули (IV) далі реагує з тропанолом загальної формули (V), в якій R2 визначено для загальної формули (І), але він не є атомом гідрогену, або альтернативно є (1,1диметилетокси)карбонільною захисною групою, у присутності трифенілфосфшу та етил(азодикарбоксилату) в апротонному розчиннику, наприклад, тетрапдрофурані, після чого за необхідністю атом нітрогену тропанового кільця лишають захисної групи трифлуороцтовою кислотою з одержанням сполуки загальної формули (І), в якій R2 - атом гідрогену, а за бажанням, отриману сполуку обробляють похідним загальної формули R2-X, в якій X - здатна до відщеплення група, наприклад, атом галогену або метансульфонатна чи п-толуолсульфонатна, a R2 визначено для загальної формули (І), але він не є атомом гідрогену, у присутності тріетиламшу в апротонному розчиннику, наприклад, ацетонітрилу ВИХІДНІ естери загальної формули (II) та/або ВІДПОВІДНІ кислоти частково описані в патентних заявках ЕР-0231139, ЕР-0234872, WO-84/03281, WO-93/16072 та WO-94/19344 Тропаноли загальної формули (V) ВІДОМІ, або їх можна отримати відомими способами 8-[(1,1-диметилетокси)карбоніл]-8-азабіцикло[3 2 1]октан-3-ол може бути отриманий способом описаним у Drag Metabolism and Disposition (1992)20(4)596-602 Нижченаведені приклади детально ілюструють 57071 одержання деяких сполук згідно з винаходом Мікхлор-4-[4-(8-метил-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5роаналіз на елементи та спектри ІЧ та ЯМР підоксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-5-метокситверджують будову отриманих сполук Надані в феніл]карбамату} внесли в тригорлу кругло-донну скобках номери сполук відповідають представлеколбу, яка містить 17мл оцтової кислоти, додали ним в наведеній нижче таблиці В назвах сполук 3,12мл 33% пдробромідної кислоти в оцтовій киспозначка «-» є частиною слова, а «_» слугує для лоті (тобто, 7 еквівалентів пдробромідної кислоти) позначення переносу, и треба видаляти, коли пеі перемішували протягом 24 годин Додали 20мл реносів нема, і не слід заміщувати нормальною діетилового етеру і відфільтровували твердий рискою чи проміжком продукт, який промивали діетиловим етером, переносили у воду і додавали водний аміак до осноПриклад 1 (Сполука №1) 5-(4-амшо-5-хлор-2вного рН, отримавши дуже тонкий осад, який відметоксифеніл)-3-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-1,3,4фільтровували Після сушки виділили 0,45г сполуоксадіазол-2(ЗН)-он ки з т пл 208°С 1 1 Гідразид 4-амшо-5-хлор-2-метоксибензойноі кислоти Приклад 2 (Сполука №3) Гідрохлорид 5-(8аміно-7-хлор-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин-5-іл)-351,5г (0,239моль) метил (4-амшо-5-хлор-2(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіазолметоксибензоату), суспендованого в 460мл етано2(ЗН)-ону лу, внесли в реактор на 1л, додали протягом 15 хвилин 119г (2,39моль) гідрату гідразину і нагріва2 1 Феніл метил{[6-хлор-8-[4-(8-[(1,1-д иметилли під зворотним холодильником протягом 15 гоетокси)карбоніл]-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5дин, потім охолоджували на льодяній бані, осад оксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдровідфільтровували, промивали етанолом та сушили 1,4-бензодюксин-5-іл]карбамат} під зниженим тиском при 80°С протягом 2,5 годин 7,1г (ЗОммоль) феніл метил{ендо-8-[(1,1Отримали 47,5г продукту з т пл 211 °С диметилетокси)карбоніл]-8-азабіцикло[3 2 1]октан3-олу}, 10г (25ммоль) фенілметил{[6-хлор-8-(512 Феніл метил{[2-хлор-2-метокси-4-(5-оксооксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл)феніл]карбамат} 1,4-бензодюксин-5-іл]карбамату} (виготовленого з 461 мл (0,875моль) 1, 93М розчину фосгену в ВІДПОВІДНОГО метилбензоату згідно способу, опитолуолі краплями додавали протягом 1 години саному для етапів 1 1 та 1 2), 8,44г (32ммоль) перемішували магнітною мішалкою при кімнатній трифенілфосфшу, 5,6г (32ммоль) етил(азодикартемпературі до суспензії гідразиду 4-амшо-5-хлорбоксилату) та 400мл осушеного тетрапдрофурану 2-метоксибензойноі кислоти 37,7г (0,175моль) в внесли в тригорлу круглодонну колбу і перемішу1200мл діоксану в реакторі на Зл Перемішували вали суміш при кімнатній температурі протягом при кімнатній температурі протягом ночі, а потім ночі Розчинник випарювали під зниженим тиском, нагрівали при 80°С протягом години Надлишок залишок очищали хроматографією на силікагелі, фосгену вимивали струмом аргону при цій темпеелююючи сумішшю 50/50 етилацетату та гептану ратурі протягом 2 годин, додавали 72мл (0,7моль) Отримали 13г сполуки з т пл 210°С бензилового спирту та нагрівали ще годину при 100°С Суміш охолоджували та концентрували під 22 Фенілметил{[6-хлор-8-[4-(8-азабіцикзниженим тиском, залишок розтирали з ізопропіло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіаловим етером, отриманий твердий продукт відфізол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин-5-іл]карбальтровували та сушили Отримали 60,3г продукту мат} зт пл 214°С 13,75г (22ммоль) феніл метил{[6-хлор-8-[4-(8[(1,1-диметилетокси)карбоніл]-81 3 Гідрохлорид фенілметил{[2-хлор-4-[4-(8азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдро-1,3,4метил-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдоксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин-5ро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-5іл]карбамату} розчинили в 150мл хлороформу і метоксифеніл]карбамату} внесли в тригорлу круглодонну колбу на 500мл 1г (2,66ммоль) фенілметил{[2-хлор-5-метоксиповільно, протягом 20 хвилин, додали 17,05мл 4-(5-оксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл)фе(221ммоль) трифлуороцтової кислоти і перемішуніл]карбамату}, 0,47г (З.Зммоль) ендо-8-метил-8вали суміш протягом 19 годин, потім знов додали азабіцикло[3 21]октан-3-олу та 1,05г (4ммоль) 17,05мл (221ммоль) трифлуороцтової кислоти і трифенілфосфшу розчинили в 15мл тетрапдроперемішували суміш протягом 5 годин Суміш конфурану, внесли в тригорлу круглодонну колбу на центрували і залишок перекристалізовували з 50мл та охолодили до 0°С Додали 0,63мл, тобто ЗООмл діетилового етеру Твердий продукт пере0,70г (4ммоль) етил(азодикарбоксилату) та переносили в ЮОмл води, додавали Змл 30% гідроксимішували суміш при 40°С протягом 3,5 годин Розду натрію, екстрагували суміш хлороформом, зачинник випарювали під зниженим тиском, залишок лишок після випарювання розтирали в дизопропіпереносили в 15мл суміші діетилового та дмзопроловому етері Отримали 7,88г сполуки з т пл пілового етерів і відфільтровували твердий про140°С дукт Після промивки та сушки отримали 1,6г твердого продукту, гідрохлорид якого виготовили 2 3 Гідрохлорид 5-(8-амшо-7-хлор-2,3-дипдрозвичайним способом і після розтирання в ацетоні 1,4-бензодюксин-5-іл)-3-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3та перекристалізації з етанолу отримали 2,22г соіл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону лі Отримали 0,88г (1,72ммоль) суспензії фенілметил{[6-хлор-8-[4-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-514 5-(4-амшо-5-хлор-2-метоксифеніл)-3-(8оксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдрометил-8-азабіцикло[3 2 1 ]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіа1,4-бензодюксин-5-іл]карбамату} в Юмл оцтової зол-2(ЗН)-он кислоти, додали 2,2мл 33% пдробромідної кислоти 0,94г (1,76ммоль) пдрохлориду фенілметил{[2 57071 8 20мл ацетонітрилу і внесли в тригорлу круглодонв оцтовій КИСЛОТІ та перемішували протягом ночі ну колбу на ЮОмл, суміш нагрівали протягом 18 Додали діетилового етеру і відфільтровували годин при 60°С Додали ще 0,48г (2,бммоль) 2осад, який промивали діетиловим етером, переноброметилбензолу та нагрівали суміш ще 5 годин сили у воду Розчин промивали етилацетатом і Розчинник випарювали під зниженим тиском, задодавали 0,5мл водного 30% гідроксиду натрію, лишок переносили у воду і екстрагували хлорофосуміш 4 рази екстрагували хлороформом, органічрмом, органічну фазу промивали водою та сушину фазу промивали водою, сушили сульфатом ли, випарювали розчинник під зниженим тиском, натрію та фільтрували, випарювали розчинник під залишок очищали хроматографією на колонці з зниженим тиском Залишок розтирали в діетилосилікагелем, елююючи сумішшю 99/1/0,1 хлоровому етері, осушували, переносили в киплячий форму, метанолу та водного аміаку, отримавши етанол та обробляли етанолом з вмістом пдроген1,28г продукту, який перекристалізовували з дмзохлориду Виділили 0,45Г пдрохлориду з т пл пропілового етеру Отримали 1,18г чистої сполуки 210°С зт пл 118°С Приклад 3 (Сполука №5) Гідробромід 5-(8аміно-7-хлор-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин-5-іл)-3(8-бутил-8-азабіцикло[3 2 1 ]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону З 1 Феніл метил{[6-хлор-8-[4-(8-бутил-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин-5-іл]карбамат} 1,54г (Зммоль) фенілметил{[6-хлор-8-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин-5-іл]карбамату} та 1,2г (12ммоль) тріетиламшу розчинили в 20мл ацетонітрилу та внесли в тригорлу круглодонну колбу на ЮОмл, додали 0,82г (бммоль) 1бромбутану та нагрівали суміш протягом 20 годин при 60°С Розчинник випарювали, залишок переносили у воду та екстрагували етилацетатом, органічну фазу промивали водою та сушили, розчинник випарювали під зниженим тиском та залишок очищали хроматографією на силікагелі, елююючи сумішшю 95/5/0,5 хлороформу, метанолу та водного аміаку, отримавши 1,25г сполуки з т пл 142°С 3 2 Гідробромід 5-(8-амшо-7-хлор-2,3-дипдро1,4-бензодюксин-5-іл)-3-(8-бутил-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону 1,2г (2,11 ммоль) фенілметил{[6-хлор-8-[4-(8бутил-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4бензодюксин-5-іл]карбамату}, 12мл оцтової кислоти та Змл 33% пдробромідної кислоти в оцтовій кислоті внесли в тригорлу круглодонну колбу на 50мл Отриманий розчин перемішували протягом 18 годин при кімнатній температурі Додали діетиловий етер і відфільтровували твердий продукт, який промивали діетиловим етером, та перекристалізовували з 2-пропанолу Отримали 0,92г пдроброміду, який розтирали в етанолі, виділивши під кінець 0,79г чистої сполуки зт пл >260°С Приклад 4 (Сполука №4) 5-(8-амшо-7-хлор-2,3дипдро-1,4-бензодюксин-5-іл)-3-[8-(2-фенілетил)8-азабіцикло[3 2 1 ]окт-3-іл]-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)он 4 1 Феніл метил{[6-хлор-8-[4-[8-(2-фенілетил)8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл]-5-оксо-4,5-дипдро1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин5-іл]карбамат} 1,33г (2,бммоль) фенілметил{[6-хлор-8-[4-(8(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдро1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4-бензодюксин5-іл]карбамату}, 1,05г (1,04ммоль) тріетиламіну та 0,96г (5,2ммоль) 2-брометилбензолу розчинили в 4 2 5-(8-амшо-7-хлор-2,3-дипдро-1,4-бензодіоксин-5-іл)-3-[8-(2-фенілетил)-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл]-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-он 1,18г (1,91ммоль) фенілметил{[6-хлор-8-[4-[8(2-фенілетил)-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл]-5-оксо4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2-іл]-2,3-дипдро-1,4бензодюксин-5-іл]карбамату}, 12мл оцтової кислоти та 2,95мл пдробромідної кислоти в оцтовій кислоті внесли в тригорлу круглодонну колбу на 50мл та перемішували протягом 18 годин при кімнатній температурі Додали діетиловий етер та відфільтрували осад, який промивали діетиловим етером Одержаний сирий гідробромід переносили в 13мл води та 20мл хлороформу, додавали 0,5мл 30% гідроксиду натрію, екстрагували суміш хлороформом, випарювали розчинник під зниженим тиском та розтирали в дмзопропіловому етері Отримали 0,703г чистої сполуки як основу з т пл 227°С Приклад 5 (Сполука №7) Пдрохлорид 3-(8азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-(6-хлор-3,4-дипдро-2Н1 -бензопіран-8-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону 2,83г (11,2ммоль) 5-(6-хлор-3,4-дипдро-2Н-1бензопіран-8-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону (отриманого з ВІДПОВІДНОГО метилбензоату згідно способу, описаному для етапів 1 1 та 1 2), 2,54г (11,2ммоль) ендо-8-[(1,1 -диметилетокси)карбоніл]8-азабіцикпо[3 21]октан-3-олу та 4,11г (15,68ммоль) трифенілфосфшу внесли в ЮОмл тетрапдрофурану, суміш охолодили в атмосфері аргону до 0°С, додали 3,0мл етил(азодикарбоксилату) Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі Розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок переносили в ЮОмл дихлорметану, додавали 17,Змл трифлуороцтової кислоти і перемішували суміш протягом 12 годин Суміш концентрували досуха, залишок переносили в 1Н пдрогенхлоридну кислоту, суміш промивали діетиловим етером, а потім етилацетатом, до водної фази додавали карбонат калію і суміш екстрагували хлороформом Водну фазу промивали та сушили, розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок переносили в 1 еквівалент пдрогенхлориду в етанолі, суміш концентрували досуха і перекристалізовували залишок з суміші 9/1 води та 2-пропанолу Після фільтрації та сушки отримали 1,8г сполуки з т пл 254°С Приклад 6 (Сполука №9) Пдрохлорид 3-(8бутил-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-(6-хлор-3,4дипдро-2Н-1 -бензопіран-8-іл)-1,3,4-оксадіазол2(ЗН)-ону Суміш 0,96г (2,38ммоль) пдрохлориду 3-(8 57071 азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-(6-хлор-3,4-дипдро-2Н1 -бензопіран-8-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону, 0,28мл, тобто 0,36г (2,62ммоль) бромбутану, 0,72г (5,24ммоль) карбонату калію, та 40мл ацетонітрилу нагрівали протягом 24 годин при 60°С Розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок переносили у воду та екстрагували хлороформом Водну фазу промивали водою та сушили, розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок очищали хроматографією на колонці з силікагелем, елююючи дихлорметаном Основу перенесли в 1 еквівалент пдрогенхлориду в етанолі, розчин концентрували та сіль перекристалізовували з 2пропанолу Після фільтрації та сушки отримали 0,38г сполуки з т пл 242°С Приклад 7 (Сполука №10) Пдрохлорид 3-(8азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-(5-хлор-2,3-дипдробензофуран-7-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону 3,58г (15ммоль) 5-(5-хлор-2,3-дипдробензофуран-7-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону (отриманого з ВІДПОВІДНОГО метилбензоату згідно способу, описаному для етапів 1 1 та 1 2), 3,41г (15ммоль) ендо-8-[(1,1-диметилетокси)карбоніл]-8-азабіцикло[3 2 1]октан-3-олу та 5,51г (21ммоль) трифенілфосфіну внесли в 120мл тетрапдрофурану та охолодили суміш до 0°С в атмосфері аргону, додали 4,0мл, тобто 4,44г (25,5ммоль) етил(азодикарбоксилату) і перемішували суміш при кімнатній температурі протягом ночі Розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок переносили в 150мл дихлорметану, додавали 23,1мл трифлуороцтової кислоти та перемішували суміш протягом 12 годин Суміш концентрували досуха, залишок переносили в 1Н пдрогенхлоридну кислоту, суміш промивали діетиловим етером, а потім етилацетатом, до водної фази додавали карбонат калію до рН 10 та екстрагували суміш хлороформом Органічну фазу промивали та сушили, розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок переносили в 1 еквівалент пдрогенхлориду в етанолі, суміш концентрували досуха і перекристалізовували залишок з суміші 49/1 2пропанолу та води Після фільтрації та сушки отримали 1,7г сполуки з т пл >260°С Приклад 8 (Сполука №11) Пдрохлорид 3-[8-(2фенілетил)-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-(5-хлор2,3-дипдробензофуран-7-іл)-1,3,4-оксадіазол2(ЗН)-ону Суміш 0,80г (2,08ммоль) пдрохлориду 3-(8азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-(5-хлор-2,3-дипдробензофуран-7-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону, 0,31 мл, тобто 0,43г (2,29ммоль) (2-брометил)бензолу, 0,63г (4,58ммоль) карбонату калію, та ЗОмл ацетонітрилу нагрівали протягом 24 годин при 60°С Розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок переносили у воду і екстрагували хлороформом Органічну фазу промивали водою та сушили, випарювали розчинник під зниженим тиском, залишок очищали хроматографією на колонці з силікагелем, елююючи сумішшю 98/2 дихлорметану та етанолу Основу перенесли в 1 еквівалент пдрогенхлориду в етанолі, розчин концентрували і сіль перекристалізовували з етанолу, фільтрували, сушили і отримали 0,84г сполуки з т пл 266°С Приклад 9 (Сполука №15) Пдробромід 5-(4 10 амшо-5-хлор-2-метоксифеніл)-3-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону 91 Феніл метил{[2-хлор-4-[4-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдро-1,3,4оксадіазол-2-іл]-5-метоксифеніл]карбамат} 5,78г (15ммоль) феніл метил{[2-хлор-5метокси-4,5-дипдро-1,3,4-оксадіазол-2іл)феніл]карбамату}), 6,0г (23ммоль) трифенілфосфіну та 3,5г (15ммоль) 8-[(1,1-диметилетокси)карбоніл]-8-азабіцикло[3 2 1]октан-3-олу розчинили в 50мл тетрапдрофурану, внесли в тригорлу круглодонну колбу на ЮОмл, охолодили суміш до 0°С, додали краплями 3,64мл етил(азодикарбоксилату), дали нагрітися до 20°С і перемішували суміш протягом 3 годин Розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок переносили в 50мл дихлорметану, додавали 25мл трифлуороцтової кислоти і перемішували отриманий розчин при кімнатній температурі протягом 4 годин Випарювали розчинник під зниженим тиском, додавали 50мл води та ЮОмл діетилового етеру, осад відфільтровували, промивали діетиловим етером та сушили отримавши 5,0г білої твердої сполуки з т пл 156-157°С 9 2 Пдробромід 5-(4-амшо-5-хлор-2-метоксифеніл)-3-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону 5,0г (Ю.бммоль) фенілметил{[2-хлор-4-[4-(8азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-5-оксо-4,5-дипдро-1,3,4оксадіазол-2-іл]-5-метоксифеніл]карбамату} розчинили в Юмл 33% гідробромідної кислоти в оцтовій кислоті, внесли в круглодонну колбу на 25мл та перемішували протягом 24 годин при кімнатній температурі Додали діетиловий етер і відфільтрували осад, який кількаразово промивали діетиловим етером Отримали 4,2г сполуки з т пл 235 237°С Приклад 10 (Сполука №13) (-)-Бістартрат 5-(4амшо-5-хлор-2-метоксифеніл)-3-[8-[1-[5-[4-(диметиламшо)піперидин-1-іл]-5-оксопентил]-8-азабіцикло[3 2 1]окт-3-іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону 0,5г (1,16ммоль) пдроброміду 5-(4-амшо-5хлор-2-метоксифеніл)-3-(8-азабіцикло[3 2 1]окт-3іл)-1,3,4-оксадіазол-2(ЗН)-ону, 0,286г (1,16ммоль) 1-(5-хлор-1-оксопентил)-г\І,г\І-диметилпіперидин-4амінута 0,484мл (3,48ммоль) тріетиламшу, розчиненому у Юмл N.N-диметилформаміді, внесли в тригорлу круглодонну колбу на 25мл та кип'ятили суміш під зворотним холодильником протягом 18 годин Випарювали розчинник під зниженим тиском, додавали воду та екстрагували суміш дихлорметаном Розчинник випарювали під зниженим тиском, залишок очищали хроматографією на колонці з силікагелем, елююючи спочатку сумішшю 90/10 дихлорметану та метанолу, а потім сумішшю 80/20/2 дихлорметану, метанолу та водного аміаку Отримали масло, яке обробили двома еквівалентами винної кислоти і під кінець виділили 0,35г білої твердої сполуки з т пл 198-201 °С Наведена нижче таблиця ілюструє хімічну будову та фізичні властивості деяких сполук згідно з винаходом 11 57071 12 Таблиця O, R 0 № Хі СІЛЬ т пл (°С) ORi Хз R х2 1 СІ 208 ОСНз -СНз н NH2 2 -О(СН 2 ) 2 ОСІ 185 -СНгСбНб NH2 3 -О(СН 2 ) 2 ОСІ Н 210 неї NH2 4 -О(СН 2 ) 2 ОСІ 227 -СН2СН2С6Н5 NH2 5 -О(СН 2 ) 2 ОСІ НВг >260 -СН2СН2СН2СН3 NH2 6 -О(СН 2 ) 2 ОСІ 254 -СН(СНз) 2 NH2 7 СІ Н 254 -О(СН 2 )знеї H 8 СІ 261 -СН2СН2С6Н5 -О(СН 2 )знеї H 9 СІ 242 -СН2СН2СН2СН3 -О(СН 2 )знеї H 10 СІ >260 -О(СН 2 ) 2 неї H н 11 СІ 266 -СН2СН2С6Н5 -О(СН 2 ) 2 неї H 12 СІ 238 -CH2CH2CH2CH3 -О(СН 2 ) 2 неї H * 13 СІ тартр 198-201 -ОСНз н NH2 14 СІ 166 -ОСНз -CH2CH2CH2CH3 н NH2 15 СІ НВг 235 - 237 -ОСНз н NH2 н У колонці сіль - означає сполуку у формі основи, НСІ - пдрохлорид, НВг - пдробромід, а тартр - тартрат У сполуці №13 R2 - 5-[4-(диметиламшо)-1 -піперидил]-5-оксопентил 2 Сполуки згідно з винаходом пройшли тестування, яке продемонструвало їх ЦІННІСТЬ ЯК терапевтично активних речовин Так, сполуки згідно з винаходом вивчали з огляду на їх спорідненість з рецепторами 5-НТ4 смугастого тіла морської свинки згідно способу, описаному Grossman et al у Br J Pharmacol (1993) 109 618-624 Морських свинок (Hartley, Charles River, France) масою 300 - 400г обезголовлювали, видаляли їх мозок, смугасте тіло вирізали та зберігали при -80°С У день досліду тканину розморожували до 4°С в 33 об'ємах буферу ГЕПЕС-NaOH (50мМ, рН = 7,4 при 20°С), суміш гомогенізували на розмелювачі Polytron™ Гомогенат центрифугували 10 хвилин при 48000хд, осад після центрифугування видаляли та ресуспендували, суспензію знов центрифугували при тих же умовах і кінцевий осад після центрифугування ресуспендували в буфері ГЕПЕС-NaOH в пропорції ЗОмг тканини на мл ЮОмкл цієї мембранної суспензії шкубували при 0°С протягом 120 хвилин у присутності [3H]GR113808 (описаний у згаданому посиланні ліганд зі специфічною активністю 80 - 85Кі/ммоль) в кінцевому об'ємі 1 мл буферу ГЕПЕС-NaOH (50мМ, рН = 7,4), у присутності чи відсутності тестуємої сполуки Інкубування зупиняли фільтруванням через фільтр Whatman GF/B, оброблений попередньо 0,1% поліетиленіміном, кожну тубу промивали 4мл буферу при 0°С, потім фільтрували і радіоактивність залишку на фільтрі вимірювали рідинною сцинтиграфією Неспецифічне зв'язування визначали в присутності ЗОмкМ серотоніну Специфічне зв'язування складало 90% загальної радіоактивності залишку на фільтрі Для кожної концентрації тестуємої сполуки ви значали процент інгібування специфічного зв'язування [3H]GR113808, а потім IKso - концентрацію тестуємої сполуки, що інгібує специфічне зв'язування на 50% Величини ІК50 найактивніших сполук знаходяться в межах 1,3 - 340нМ Сполуки згідно з винаходом також досліджували з огляду на їх агоністичну або антагоністичну дію відносно рецепторів 5-НТ4 стравоходу щурів, способом описаним Baxter et al у Naunyn Schmied Arch Pharmacol (1991)343439 Використовували самців щурів Sprague Dawley масою 300 - 450г Швидко видаляли фрагмент приблизно у 1,5см кінцевої частини стравоходу, видаляли м'язовий прошарок, а внутрішню м'язову слизову оболонку відкривали у подовжньому напрямку, переносили у бак для відокремлених органів з вмістом розчину Кребса-Хенселейта при 32°С з оксигенацією струмом карбогену (95% Ог, 5% СОг), та приєднували до ізометричного перетворювача під базовою напругою 0,5г Скорочення тканини індукували додаванням 0,5мкМ карбахолу та, після витримки для стабілізації скорочення (15хв) препарат піддавали дії серотоніну (1мкМ) для визначення максимальної релаксації Тканину промивали, через 20 хвилин знов додавали 0,5мкМ карбахолу і препарат піддавали дії тестуємої сполуки зі збільшенням кумулятивної концентрації від 0,1 до 1мкМ Сполуки, які призводили до релаксації вважали агоністами 5-НТ4 Для сполук, які не призводили до релаксації, препарат витримували в серотоніні зі збільшенням кумулятивної концентрації від 0,1 нМ до концентрації, що викликає максимальну релаксацію і криву обумовленої серотоніном релаксації у присутності тестуємої сполуки порівнювали далі зі стандартною кривою, отриманою у відсутності вказаної сполуки Якщо її присутність зсуває криву право 57071 14 13 руч, тестуємі сполуки вважали антагоністами 5Нз-рецептори, зокрема, з огляду на центральну НТ4 нервову, шлунково-кишкову, нижчу сечовивідну та серцево-судинну системи Результати цих двох біологічних випробувань свідчать, що сполуки згідно з винаходом є потужЗ огляду на центральну нервову систему ці ними лігандами серотоншерпчних рецепторів типу розлади та нездужання конкретно включають такі 5-НЇ4, і вони діють на ці рецептори як агоністи або неврологічні та психіатричні розлади, як розумові антагоністи розлади, психози, нав'язливі та примусові характеристики поведінки, депресивні і тривожні стани Наприкінці, сполуки згідно з винаходом піддаРозумові розлади включають, наприклад, нестачу ли дослідженню in vitro з огляду на їх споріднепам'яті та уваги, слабоумство (такі сенільні деменність до пстамінерпчних Нз рецепторів мозку щуції, як хвороба Альцгеймера та пов'язані з віком рів, способом в основному описаним Korte A et al деменції), нестачі мозкового кровообігу та хворобу у Biocheb Phys Ryes Commun (1990) 160 979 Паркінсона Психози включають, наприклад, пара986, та West R E et al у Мої Pharmacol (1990)38 ною, мани та аутизм Нав'язливі та примусові ха610-613 рактеристики поведінки включають, наприклад, Обезголовлювали самців щурів Sprague такі розлади харчування, як булімію або втрату Dawley (OFA, Iffa Credo, France) масою 250 - 300г і апетиту Депресивні і тривожні стани включають, видаляли їх мозок Тканину гомогенізували на наприклад, стани тривожності очікування (перед розмелювачі Polytron™ (позиція 7, протягом 20 хірургічною операцією, лікуванням зубів тощо), секунд) в 20 об'ємах буферу ТРИС-НСІ (50мМ, викликаною залежністю від алкоголю чи ЛІКІВ ЧИ рН = 7,4 при 22°С) Гомогенат центрифугували 10 відвиканням від них тривожністю Наприкінці можхвилин при ЮООхд, а супернатант потім знов на згадати мани, епілепсію, розлади сну, сезонні центрифугували при 45000хд протягом 20 хвилин емоціональні розлади та мігрень при 4°С Далі осад після центрифугування промивали ресуспендуванням у буфері, гомогенізували З огляду на шлунково-кишкову систему ці розта центрифугували його Кінцевий осад після лади та нездужання включають поміж іншим прямі центрифугування ресуспендували у буфері в прочи непрямі розлади гастро рухом ості стравоходу, порції ЮОмг вихідної тканини на мл, а потім ділили шлунку чи кишечнику, нудоту, такі хворобливі стана аліквотні фракції по 11мл, які зберігали при ни, як диспепсію, виразки, шлунково-стравохідний 80°С Удень експерименту мембранну суспензію рефлюкс, метеоризм, синдром подразнення кише(ЮОмкл, 300 - 400мкг білку) шкубували при 30°С чнику, розлади кишкової секреції, діарею, що випротягом 60 хвилин у присутності 5нМ [ 3 H]N a кликана, наприклад, холерою або карциноідним метилпстамшу (зі специфічною активністю 75 синдромом, та розлади, що можуть бути чи не бу80Кі/ммоль, New England Nuclear, Du Pont de ти асоційованими з атмосферними забрудненняNemurs, Boston, USA) в кінцевому об'ємі 500мкл ми, як-то астма, риніти та труднощі дихання буферу ТРИС-НСІ, у присутності чи відсутності З огляду на нижчу сечовивідну систему ці розтестуємої сполуки Інкубування зупиняли фільтрулади та нездужання конкретно включають невтриванням через фільтр Whatman GF/B, оброблений мання сечі, дисурію та затримку сечовиводу попередньо 0,4% поліетиленіміном, кожну тубу З огляду на серцево-судинну систему ці розтричі промивали 4мл холодного буферу ТРИС-НСІ лади та нездужання конкретно включають патолопри 0°С Фільтри сушили в сушильній шафі при ги, прямо чи не прямо пов'язані з серцевою арит120°С протягом 5 хвилин, радіоактивність залишку мією, підвищеним тиском, ішемією, інфарктом міона фільтрі вимірювали рідинною сцинтиграфією карду або нестійкою стенокардією, проблемами Неспецифічне зв'язування визначали в присутносповторного закупорювання після реканалізацм, ті 10мкМ тюпераміду ^-циклогексил-4-(1 ннаприклад, після фібринолітичної або тромболітиімідазол-4-іл)піперидин-1-карботюамід) чної терапії, анпопластики або хірургічної операції на серці Глаукома також є розладом, який можна Для кожної концентрації тестуємої сполуки лікувати сполуками згідно з винаходом розраховували процент інгібування специфічного Сполуки згідно з винаходом можна представзв'язування [3Н]№-метилпстамшу, а потім визналяти у формі композицій, придатних для ентерачали ІК50 - концентрацію тестуємої сполуки, що льного та парентерального застосування, як-то інгібує специфічне зв'язування на 50% таблетки, покриті цукром чи ні, желатинові капсуНайактивніші сполуки згідно винаходу мають ли, облатки, придатні для пиття чи ІН'ЄКЦІЙ суспенІК50 приблизно 35нМ зій чи розчинів, як-то сиропи чи ампули тощо, які Результати різних біологічних тестів для спосполучені з придатними ексципієнтами та дозовані лук згідно з винаходом свідчать, що ці сполуки є так, щоб дозволити добове вживання в межах лігандами 5-НТ4-рецепторів та/або Нз-рецепторів 0,001 - 20мг/кг Ці результати свідчать, що сполуки можна ви користовувати для лікування та попередження розладів, в які включено 5-НТ4-рецептор и та/або Комп'ютерна верстка Е Гапоненко Підписано до друку 05 07 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна