Спосіб одержання соняшникової рослини стійкої до вовчка

1. Спосіб одержання соняшникової рослини, стійкої до сортів вовчка (Orobanche сumana) поряд із сортами А-Е, який містить рослину, одержану методом, що включає: схрещення першої вихідної соняшникової рослини з другою вихідною соняшниковою рослиною та збір урожаю отриманого потомства насіння, в яко C2 2 (19) 1 3 86569 4 вих культур в уражених країнах. Зменшення вроагрономічні та якісні характеристики зерна та/або жайності культур може досягнути 95% на інвазонасіння. ваних полях. Основні види Orobanche, що уражає Якщо не вказано інше, всі технічні та наукові соняшник, переважно включають Orobanche терміни, що використовуються в описі, мають знаaegyptiaca Pers., О. ramosa L., О. minor Sm., чення, що є зрозумілим для будь-якої особи, що O.cumana Wallr. and O. cernua Loefl. має звичайні знання в галузі техніки, до якої відноO.cumana Wallr. and O. cernua Loefl. (альтерситься даний винахід. Якщо не вказано інше, вжинативна назва для однакових видів) - паразит совані або розглянуті в описі технологічні методи є няшнику в східній Європі, розповсюджена в півстандартною методологією, добре відомою спеціденній Європі. Понад декілька останніх років була алісту в даній галузі техніки. Матеріали, способи загально помічена прогресія цих паразитичних та приклади лише пояснені і не обмежені. Нижчерослин, їх поява в нових країнах, а також розвиток наведене стосується пояснення і не має наміру нових, більш небезпечних сортів. Orobanche предобмежувати об'єму винаходу. ставляють всесвітній ризик, а деякі види, такі як О. В контексті даного відкриття використовуватиminor, з'явилися як екзотичні в Сполучених Штамуться ряд термінів. Для того, щоб забезпечити тах. чіткість та послідовність розуміння подробиць та Починаючи з 1996 року, поява 3 нових сортів формули винаходу, включаючи рамки, надані цивовчаку була помічена на полях Туреччини, Іспанії ми термінами, приведені наступні визначення. та Болгарії. Біля 2000 року кількість уражених поТерміни «вовчак», «Orobanche cumana», лів на цих територіях значно зросла. Деякі вироб«Orobanche cumana Wallr», «О. cernua Loefl.» та ники припинили вирощувати соняшник через до«О. Cumana» використовуються альтернативно по свід значного зменшення врожайності. відношенню до описаного паразитичного бур'яну Ці бур'яни викликані кореневими голопаразита його сортів. тами. Види Orobanche дуже тяжко викорінити, то«Схрещення» (або «перехресне запилення») му що за виключенням квітів, вони живуть в грунті; стосується перенесення пилку з однієї рослини на їх насіння миттєво та ефективно продукується, іншу. легко поширюється та дуже довго живе. Таким «Цитоплазматична чоловіча стерильність» або чином, гербіциди, що використовують на сьогодні («ЦЧС» ): лінія соняшнику, яка не продукує життєдля соняшнику, в загальному забезпечують недоздатний пилок, називається чоловічою стерильстатню боротьбу. ною. Цитоплазматична чоловіча стерильність усІнші засоби боротьби з Orobanche включають падковується по материнській лінії, тобто чоловіча біологічні контролюючі агенти, усунення генів, що стерильна рослина використовується як жіноча відповідають за стійкість Orobanche в соняшнику, і вихідна рослина в схрещенні з пилком від іншого вирощування стійких ліній соняшнику. соняшнику. ЦЧС лінії одержують шляхом схреБуло повідомлено, що Fusarium oxysporum f. щення вміщуючої лінії з соняшниковою рослиною з Sp. Orthoceras може бути потенційним агентом у ознакою цитоплазматичної чоловічої стерильністі і біологічній боротьбі з Orobanche cumana [Thomasпотім зворотнього схрещення до вміщуючої лінії, Heiko et al., Biological Control., Sept., 1998; 13(l):41поки не почне розвиватись чоловіча стерильна 48]. Однак, застосовувані методи та постійні дози лінія, гомологічна вміщуючій лінії в усіх інших віддля польових умов все ще повинні бути визначені. ношеннях. ЦЧС лінії також вказані як жіночі лінії. Ген Or3 забезпечує стійкість до нападів «Лінія» означає групу рослин, яка проявляє Orobanche, але відомо, що він є ефективним лише менше відхилень від індивідуальних рослин, як по відношенню до сорту С. Малоймовірні докази правило, в результаті декількох поколінь самозадещо більшої ефективності до п'яти сортів пилення. Також лінія може включати групу рослин, Orobanche надані в [Antonova, Т. S. et al, Weed вегетативно поширених від однієї вихідної рослиResearch., 1996, 36(2):113-121]. ни, використовуючи методи культури клітин або Ідентифікація додаткових джерел стійкості до клітин тканин. Orobanche, особливо до нових сортів, корисна при «Рослина або частини рослин» стосуються керуванні змінами сортів та виробничими втратаклітин рослин, рослинних протопласт, тканин кліми. тин, з яких соняшникові рослини можуть бути відВинахід стосується композицій та способів новлені, рослинних каллі, груп пагонів рослин та одержання соняшникових рослин та соняшникових клітин рослин, які непошкоджені в рослинах або ліній, стійких до нових сортів Orobanche cumana, частинах рослин, такі як зародки, пилок, насінний що включають схрещення першої вихідної соняшзачаток, квіти, листя, оболочка, стебло, коріння, никової рослини з другою вихідною соняшниковою верхівки коріння, пильник, насіння або мука і тому рослиною та збір урожаю з отриманого насіння, в подібне. яких першою вихідною рослиною є будь-яка лінія В цілях даного винаходу «стійкість до вовчаку соняшнику, представлена АТСС депозитними но(або Orobanche)» визначено як генетично контромерами РТА-3792, РТА-3793 або РТА-3791. льовану властивість соняшникових рослин переДаний винахід стосується композицій та спошкоджати вовчаку прикріплюватися до соняшнику собів одержання соняшникових рослин та соняшта заповнювати його життєвий цикл під час репроникових ліній, що мають риси високоспадкової дуктивного (насіннєносного) періоду. Стійкість мостійкості до Orobanche, отримані добором та сележе бути результатом декількох відгуків на паразикцією. Ці лінії корисні при вирощуванні комерційтів, включаючи, але не обмежуючись: (1) них культурних рослин соняшнику, що мають цінні запобігання достатнього проростання насіння вовчаку, стимульованого соняшниковою рослиною 5 86569 6 (прийнято, як хімічний кореневий екструдат); (2) сліджуваних соняшникових рослин. Фенотипні хаблокування проникнення відростку вовчаку на порактеристики найчастіше перевіряють на ознаки, верхню соняшникової рослини або (3) блокування пов'язані з врожайністю насіння, вмістом олії в зв'язку відростку вовчаку з судинною системою насінні, вмістом протешу в насінні, жирнокислотсоняшникової рослини. ною композицією в олії, вмістом глюкозінолату в «Нові» сорти Orobanche cumana визначені як муці, характером росту, стійкістю до полягання, сорти, що не відносяться до сортів А-Е. висотою рослини, стійкістю до опадання і т.д. Як «Відновлююча лінія»: лінія, що володіє геном правило, досліджують інші фенотипні характерисабо генами для відновлення чоловічої родючості тики, включаючи стійкість до хвороб, комах та або життєздатного пилку у гібридного соняшнику стійкість до гербіцидів. або в отриманій від інбредних осіб лінії та потомсБуло виявлено,, що завдяки композиціям та тва з материнською цитоплазмою, яка обумовила способам даного винаходу можна створити сонячоловічу стерильність. шникові рослини через поєднання генетичних деЦей термін також розглянутий в літературі. термінантів соняшнику, які до того не були визнані Наприклад, Fick, «Breeding and Genetics», в можливими формувати нові лінії соняшників, стійкі Sunflower Science and Technology 279-338 (J. F. до нових сортів Orobanche cumana. Carter ed. 1978), зміст якого включений в опис Декілька нових сортів Orobanche були ідентипосиланням. фіковані на виробничих полях Туреччини. Набір «Селекція» означає вибір бажаного фенотипу гермплазм соняшнику був відібраний на полях з широкої, генетично гетерогенної добірної групи, Туреччині з наступних причин. Два типи стійких як правило, названої популяцією. Індивідуальні реакцій були ідентифіковані в джерелах диких сорослини -з популяції відбираються за ознаками, ртів, схрещених з гермплазмою Піонера. Обидва пов'язаними з морфологією рослин, морфологією виявили стійкість до нових сортів. квітки; стійкістю до комах та хвороб, стиглістю та Одне джерело стійкості (Система 1), очевидврожайністю. но, діє шляхом перешкоджання проникнення від«Різновид» або «культурний сорт рослин» ростків Orobanche в кореневу систему рослини. Ця стосується групи рослин з сортів (наприклад форма стійкості представлена в соняшниковій лінії Helianthus annuus), які мають певні постійні U00S9LM та АТСС Accession # РТА-3793. характеристики, що відрізняють їх від інших Друге джерело стійкості, очевидно, діє шляхом типових форм та від інших можливих різновидів затримання розвитку паразитичних паростків, які цього сорту. Не дивлячись на притаманну їм розвиваються на кореневій системі рослини, але принаймні одну відмітну ознаку, «різновид» також до появи їх на рівні грунту. Ця форма стійкості характеризується значною кількістю всебічних представлена в соняшниковій лінії 8556UG та варіацій серед індивідуумів з різновиду, що АТСС Accession # РТА-3792. базується в основному на менделівському Третій механізм поєднує джерела стійкості виділенні ознак серед потомства вдалого обох систем для створення більшої стійкості. Ця покоління. культури виводять методами, що пеПольові форма стійкості представлена в соняшниковій лінії реважають серед способів запилення рослин. Ро01UL2365 та АТСС Accession # РТА-3791. слина є самозапиленою, якщо пилок з однієї квітки Композиції та способи даного винаходу мопереноситься на цю ж або іншу квітку цієї рослини. жуть репродуктивно створити соняшникові лінії, які Рослина є перехреснозапиленою у випадку, коли виявляють ознаки стійкості до О. Cumana (вовчапилок переноситься з квітки на іншу рослину. Таку) по відношенню до фенотипних основ високої ким чином, термін «само» в програмі добору стоврожайності насіння, прискореного дозрівання, сується самозапилення і термін «схрещена» ознастійкості до засухи, стійкості до холоду, збільшеночає рослину, запилену з іншої рослини. го вмісту протеїну в насінні, модифікації складу Соняшники мають суцвіття корзинки зі стериамінокислотної композиції в насінні, карликовості, льними променевими квітками і довершеними (що стійкості до опадання, стійкості до комах або хвомають тичинку і маточку) в формі диску квітками. В роб, викликаних бактеріями, грибами або вірусадиких умовах соняшник самостерильний або не ми, або стійкість при гербіцидній обробці, які є доздатний до самозапилення, тому це перехреснодатньо стійкими при комерційному застосування. З запилена культура, запилення якої здебільшого протилежного боку, вихідні культурні сорти рослин залежить від медоносної бджоли. Більшість вировиявляють значну мінливість в виявленні таких бничих площ не мають достатньої популяції бджіл, характеристик. здатних в достатній мірі запилити -культуру. Це Для полегшення включення об'єднаних бажамає значення для селекціонерів при доборі для них рис в програму добору ознака стійкості до самосумісності або самозапиленні, що збільшує Orobanche повинна бути високоспадковою, тобто врожайність насіння, коли присутні декілька бджіл. домінантною або напівдомінантною. Це підтверСоняшникова добірна популяція повинна бути джується в даних заявлених композиціях та спов основному гомогенна та відтворювана як для собах (див. Приклад 3). наступного добору, так і для розвитку комерційних Гібридне соняшникове насіння типово продукультурних сортів рослин. Існує ряд аналітичних кується чоловічою стерильною системою, що методів, придатних для визначення генотипної включає генетичні або цитоплазматичні чоловічі стабільності соняшникової популяції. стерильні (ЦЧС) спадкові риси. Рослини ЦЧС спаНайдавнішим та самим традиційним методом дковості є чоловічо стерильними як результат фааналізу є дослідження на фенотипні ознаки. Дані кторів, що випливають з цитоплазматичності, як зазвичай збирають на полях напротязі життя допротивага , ядру, геному. Таким чином, ця харак 7 86569 8 теристика успадковується виключно через жіночу АТСС Accession # РТА-3792; або лінії U00S9LM, форму в соняшникових рослинах, оскільки лише представленої АТСС Accession # РТА-3793. жіноча форма надає цитоплазму заплідненому Даний винахід також стосується рослин, одернасінню. ЦЧС рослини запліднюються з пилку від жаних з F1 гібридного насіння, та клітин та інших інших спадкових форм, які не є чоловічо стерильчастин цих рослин. ними. Пилок з другої спадкової форми може чи не Використання чоловічих стерильних інбредних здатний внести гени, що зроблять гібридні рослиознак - єдиний фактор при вирощуванні соняшнини чоловічо стерильними. кових гібридів. Розвиток соняшникових гібридів Цитоплазматичні чоловічі стерильні лінії трапотребує в основному розвитку гомозиготних індиційно виводять методом зворотнього схрещенбредних ліній, схрещення цих ліній та оцінку ня, в якому бажані лінії, які піддавали добору та схрещень. Методи селекції на основі родоводу та селекції в декількох поколіннях, схрещують спочаперіодично повторюваної селекції використовують тку з рослиною з цитоплазматичною чоловічою, для розвитку інбредних ліній з популяцій добору. стерильністю. Після цього перетворювану інбредПрограми добору об'єднують генетичні середовину лінію використовують як, періодично повторюща від двох чи більше інбредних ліній або різновану форму в способі зворотнього схрещення. манітних інших широкоосновних джерел в селекКінцеве потомство, крім того, що буде стерильним, ційних об'єднаннях, з яких розвиваються нові буде генетично подібне до періодично повторюваінбредні лінії шляхом самозапилення або селекції ної форми. бажаних фенотипів. Нові інбредні форми схрещуОтриманий початковий матеріал даного винають з іншими інбредними лініями, а гібриди від цих ходу може бути перетворений в цитоплазматичний схрещень оцінюють, щоб визначити, які з них мачоловічий стерильний шляхом схрещення відібрають комерційний потенціал. ного насіння з соняшниковими лініями, добре віСелекцію на основі родоводу загально викодомими з рівня техніки та загально доступними, ристовують для удосконалених культур. Селекцію такими як CMS HA89 (USDA), що включають цитона основі родоводу починають зі схрещення двох плазматичну детермінанту для чоловічої стерильфенотипів, кожен з яких може мати один або більності. Основи CMS HA89 (USDA) є в матеріалі ше бажаних характеристик, які відсутні в інших або Leclercq, «Цитоплазматична стерильність які доповнюють інші. Якщо дві первісні вихідні фосоняшнику», Ann. Amelior Plant 19:99-106 (1969). рми не забезпечують усіх бажаних характеристик, Фертильні відновлюючі лінії виводять шляхом додаткові вихідні форми можуть бути включені в перенесення домінантного відновлюючого гену до схему схрещення. встановленої інбредної лінії зі звичайною цитоплаЦі вихідні форми схрещують простим або змою зворотнім схрещенням. Якщо використовускладним методом для одержання F1. F2 популявати цей метод, відібрані рослини повинні бути цію одержують, шляхом самозапилення однієї або схрещені з цитоплазматичною чоловічою стерильдекількох F1 або перехресним запиленням двох ною лінією після кожного покоління, для того, щоб F1 (наприклад, схрещенням сибсів). Селекція найвизначити, чи присутні фертильні відновлюючі кращих індивідуумів може починатися з F2 попугени. Більш загальний метод -самозапилення та ляції та, починаючи з F3 популяції, відбираються добір чоловічих фертильних рослин з комерційних найкращі індивідууми з найкращих сімейств. Погібридів або заплановане схрещення вихідних вторні дослідження сімейств (ліній) можуть почиформ, які мають відновлюючі гени в чоловічій стенатися з F4 покоління для покращення ефективнорильній цитоплазмі. Цей метод не потребує тестості селекції за ознаками з низькою спадковістю. вого схрещення з чоловічою стерильною лінією Покращена стадія інбрідингу (наприклад, F6 та при селекції, оскільки рослини будуть повністю F7), найкращі лінії або суміші фенотипно подібних чоловічо фертильними, якщо присутні необхідні ліній, як правило, досліджуються на потенційне відновлюючі гени. виділення як нові культурні сорти рослин. Необхідна відновлююча лінія може бути одерПокращені різновиди можуть також бути вивежана шляхом схрещення гермплазми згідно данодені перідично повторюваною селекцією. Генетичго винаходу з будь-якою загальнодоступною відно різноманітні популяції гетерозиготних індивідуновлюючою лінією, такою як RHA274, RHA271, та умів як ідентифікують, так і одержують RHA273 (USDA) або іншими лініями, що містять перехресним схрещенням декількох, різних вихідгени для відновлення чоловічої фертильності. Лінії них форм. Найкращі рослини відбираються на та різновиди, отримані таким чином, з яких одероснові їх індивідуальних переваг, чудового потомжують насіння, що має стійкість до вовчаку, та які ства або гарної поєднуючої здатності. Відібрані справжньо-виведене за, принаймні, фертильні рослини перехресно запилюють для виведення відновлюючі гени, можуть надалі бути усунені тринової популяції, з якої продовжують наступні цикли валим самозапиленням та схрещенням зі стійкими селекції. до ЦЧС лініями, які попередньо були описані. Метою програми розвитку комерційних соняшДаний винахід також стосується способів никових гібридних ліній є розвиток нових інбред.одержання F1 гібридного насіння схрещенням них ліній, з яких одержують гібриди, що поєднують першої вихідної соняшникової рослини з другою високу врожайність та високоякісну агрономічну вихідною соняшниковою рослиною, де перша випродуктивність. Основний показник, необхідний хідна соняшникова рослина вирощена з будь-якого селекціонерам - це врожайність. Крім того, багато насіння: лінії 01UL2365, представленої АТСС інших агрономічних показників є важливими в гібAccession # РТА-3791; лінії 8556UG, представленої ридних комбінаціях та мають вплив на врожайність або, в іншому випадку, забезпечують високоякісну 9 86569 10 продуктивність в гібридних комбінаціях. Основні далі одержуватимуть насіння наступним самозанаміри при виведенні соняшнику включають попиленням. кращену врожайність насіння, покращений проСоняшникові рослини також можуть бути регецент олії в насінні або якість олії, прискорене донеровані, використовуючи культуру тканин та резрівання, менша висота рослин, однотипність генерацію. Культура різних клітин та тканин сонярослин або стійкість до хвороб або комах. В допошнику та регенерація рослин з них відома внення до цього, лінії переважно мають прийнятну спеціалісту в даній галузі техніки. Наприклад, випродуктивність для таких вихідних ознак, як вроведення соняшнику з культури тканин описано в жайність насіння та продуктивність пилку, усі з наступних посиланнях: Henderson et al, «Культура яких впливають на здатність забезпечувати вихідзвичайного напливу на стеблі соняшнику» (1952), ним лініям необхідну кількість та якість гібридизаAm. J. Bot.39:444-451; Levine, M, «Реакція волокції. Було показано, що ці риси знаходяться під коннистого коріння культури тканин соняшнику та татролюванням і багато, якщо не всі з цих ознак, баку на сполуки для вирощування рослин» (1951), викликані безліччю генами. Bot. Gaz. 112:281-289; Henrickson, C.E., «Цвітіння Не дивлячись на те, що технологічні прийоми соняшникового експлантату в асептичній культурі» стерилізації, включаючи використання ЦЧС дете(1954), Plant Physiol. 29:536-538; Sadhu, М. К.5 «Дія рмінантів, можуть сприятливо застосовуватися при різних ауксинів на ріст та диференціацію в тканині одержанні вихідних ліній та різновидів, стійких до напливу серцевини стебла соняшнику» (1974), вовчаку, а також гібридів згідно даного винаходу, Indian J. Exp. Biol. 12:110-111. застосування таких прийомів не є передумовою Насіння рослин даного винаходу може викоривиконання винаходу. Вихідні лінії та різновиди, стовуватися для одержання рослинної олії та мувикористовуючи способи винаходу, можуть бути ки. Насіння цих різновидів, рослини, вирощені з одержані маніпулюванням вихідних соняшникових такого насіння, гібридні соняшникові рослини, виматеріалів, використовуючи інші звичайні методи, рощені шляхом схрещення цих різновидів з іншиосновані на вдалій селекції та добору, або новороми видами, отримане гібридне насіння та різні часзвинуті молекулярні наближення до змін генетичтини гібридної соняшникової рослини можуть бути ного вмісту рослин. В будь-якому випадку, одервикористані при одержанні їстівної рослинної олії жання придатних вихідних ліній та різновидів або інших харчових продуктів відповідно до відозгідно даного винаходу веде за собою усунення мих методів. певної кількості мінливісті, принаймні до величини Насіння соняшнику упаковане в захисну лушзначної кількості потомства, отриманих самозапипайку, яку необхідно облущити перед екстракцією ленням принаймні однєї вихідної форми насіння, олії та наступною обробкою. Більшість сучасних що має ознаки стійкості до вовчаку. заводів обладнані для переробки соняшнику спеЗавдяки методам добору, покращена стійкість ціальним обладнанням для лущення, хоча насіння до Orobance cumana може поєднуватися або може бути подрібнене менш ефективно в своїй «укладатися» з будь-якої іншою бажаною насіннємасі з лушпайкою. Більшість заводів Сполучених вою, агрономічною ознакою або стійкістю до комах Штатів по переробці соняшнику використовують або хвороб. Приклади бажаних ознак включають, поєднання гвинтового пресу та розчинника екстраале не обмежуються, видозмінений профіль або кції при виділенні олії. Виявлено дуже ефективний віст олії в насінні, висока врожайність насіння, моспосіб видалення олії з насіння, який залишає все, дифікація композиції амінокислотного складу в крім близько 1% олії в отриманому рослинному насінні, карликовість, стійкість до осипання, стійматеріалі. кість до комах або хвороб, викликаних бактеріями, Неочищена соняшникова олія надалі обробгрибами, вірусами або стійкість до обробки гербіляється для застосування її в харчових продуктах. цидами. Очистка зменшує вміст вільних жирних кислот та Способи даного винаходу знаходять особливе зменшує побічні включення. Процес відбілювання застосування в програмах добору соняшникових забезпечує видалення пігментів, що призводять до ліній, стійких до сульфонілсечовинних гербіцидів. проблем. Пристосування до зимових умов заклюБуло виявлено, що сульфонілсечовинні гербіциди чається в поступовому заморожуванні олії таким є ефективними проти паразитичних бур'янів сонячином, що як салатна олія, вона може витримувашнику, таких як повитиця та сортів Orobance [L. ти зберігання в холодильнику без потемніння. ДеGarci-Torres et al. Weed Research, 1994, 34:395зодорування видаляє залишки включень для дося402]. гнення смаку та запаху олії. Коли їстівна олія Даний винахід також стосується частин описавказана як RBD, її піддавали при обробці операціних тут рослин, включаючи клітини рослин, росям очистки, відбілення та дезодорування. линні протопласти, культури тканини клітин росОтриманий твердий помелений компонент з лин, з яких соняшникові рослини можуть бути насіння може бути використаний як поживний корм регенеровані, каллі рослин, групи, пагонів рослин для великої рогатої худоби. Соняшникова мука та клітини рослин, які непошкоджені в рослинах побічний продукт обробки соняшникової олії з виабо частинах рослин, такі як зародки, пилок, насоким вмістом протешу. її використовують в осносінний зачаток, квіти, листя, оболочка, стебло, вному додатково до корму для великої рогатої коріння; верхівки коріння, пильник, насіння або худоби для підвищення рівня протеїну та як замінмука і тому подібне. ник соєвої муки. Немає жодних токсичних факторів Рослини, одержані відповідно до даного вината дуже низький рівень антипоживних факторів ходу, можуть бути регенеровані з частин рослин, (таких як інгібітори трипсіну), які потребують додавикористовуючи відомі методи. З цих рослин наткової обробки. Це четверте найбільше джерело 11 86569 12 муки з насіння масляної культури. Якість протешу зії досліджуваних ділянок. Зі стійких F1 рослин був в муці з насіння соняшнику висока: вона має значзібраний врожай, а їх насіння висаджували як F2 ний амінокислотний індекс 68, який сприятливо насіння в зимових розсадниках. порівнюється з соєвою мукою і має обмеження а) Гібридні комбінації: лише в лізині. З цього F2 потомства 20 головок були відібраНаступні Приклади представлені як специфічні за припущеною стійкістю та були проведені інна ілюстрація заявленого винаходу. Крім того, слід дивідуальні схрещення (головка да головки) з 4 розуміти, що винахід не обмежується особливосрізними чутливими жіночими вихідними лініями з тями, що містяться надалі в Прикладах. метою створення досліджуваних гібридів: Примітка: Добір досліджуваних схрещень та нових гібри1) Літнім місцезнаходженням розсаднику були дів для досягнення стійкості до нових сортів вовАхметбей, Люлебургаз, Кіркларлі, Туреччина. Дочаку проводився напротязі декількох років в Ахмеслідження на цих розсадниках проводилися в умотбеї, Люлебургаз-Кірклабі, Туреччина, на полях, вах масової штучної інвазії насінням нового(-их) природньо та масово інвазованих заново помічесорту(-ів) Orobance cumana, зібраним на природними сортами вовчаку. Це були поля, на яких поних масово інвазованих полях. передня врожайність соняшникових культур була 2) «Масова інвазія» або «масово інвазований» зменшена до приблизно 80-100% внаслідок напаозначає ураження новим(-и) сортом(-ами) дів нових сортів вовчаку. Відсіювання проводиOrobance cumana, здатним (-и) зменшити лись, використовуючи рандомізований блочний врожайність чутливих соняшникових ліній до 80пристрій з 2 копіями на кожен гібрид. Стійкість до 100%. Зимові місцезнаходження соняшнику були 3) вовчаку визначали безпосередньо перед збором Ката, Каліобія, Єгипет, на полях, повністю вільних врожаю, рахуючи кількість соняшникових рослин, від інвазії Orobance cumana. вільних від інвазії вовчаку в радіусі 50см навколо 4) Природньо та масово інвазовані поля були кожної рослини. Стійкі рослини були видалені з локалізовані в Текке кой, Малкарі, Текірдазі, Туреземлі для підтвердження відсутності будь-яких ччина. паростків вовчаку, які могли прикріпитися до коре5) Стійкість до вовчаку визначають (при доборі невої системи під поверхнею грунту. в полі) безпосередньо перед збором врожаю, раСелекція для досягнення стійкості та тестові хуючи кількість соняшникових рослин, вільних від схрещення продовжувалися в масово природньо інвазії вовчаком в радіусі 50см навколо кожної інвазованих полях до F1 покоління. З цієї точки рослини. зору було визначено, що F1 лініям притаманні 6) Чутливі індивідууми мали багато виниклих стійкість, родючість, постійний вміст олії та відсутта/або прикріплених паростків вовчаку. Ніяких ність осипання насіння. проміжних видів стійкості не було винайдено. Чутб) Інбредні лінії та добірні гермплазми: ливі рослини показали різну ступінь інтенсивності З F2 селекцій F3 насіння висаджують в літніх нападу. розсадниках. Приклад 1: Добір нових джерел добору гермплазм та інДобір за стійкістю Системи 1 в камерах виробредних ліній для досягнення стійкості до нових щування. сортів вовчаку проводився напротязі декількох 165 проб соняшникового насіння (165 індивіроків в Ахметбеї, Люлебургаз-Кірклабі, Туреччина. дуальних головок) з припущеною стійкістю до ноЛітні добірні розсадники були штучно, уражені навих сортів О. Сumana були зібрані на інвазійних сінням нових сортів О. Сumana, яке було зібране полях в Трейсі, Туреччина. Насіння, отримане вина природньо масово інвазованих полях. Інвазію падковими схрещеннями в диких умовах гермплагрунту розсадників повторювали кожен рік. Відсіюзми Піонера, вирощували в Вудланді, Канада. вання здійснювали, висаджуючи 15 рослин в 4Соняшникове насіння було посаджене в 5 гометрові ряди для кожної селекції добірної гермпрщиках в суміші піску та грунту (1:1), які були уралазми та інбредних ліній. Стійкість до вовчаку вижені насінням нових сортів O. cumana, в концентзначали безпосередньо перед збором врожаю, рації 100г/1кг. Соняшникове насіння було рахуючи кількість соняшникових рослин, вільних посаджене в розрахунку 10 соняшникових насівід інвазії вовчаку в радіусі 50 см навколо кожної нин/горщик. Рослини вирощували в камері виророслини. Стійкі рослини були видалені з землі для підтвердження відсутності будь-яких паростків щування при 25°С при постійному освітленні. NPKвовчаку, які могли прикріпитися до кореневої сисвмісне добриво додавали один раз напротязі ростеми під поверхнею грунту. ту. Через 75 днів півля посіву рослини видаляли з Ця лінія представлена АТСС номером РТАгорщиків, кореневу систему промивали та запису3793. вали кількість стійких рослин на горщик. Отримане Приклад 3 насіння цих проб використовували в дослідженнях Дослідження спадковості Системи 1 при польовому доборі. Гібриди були створені між стійкими та чутлиПриклад 2: вими інбредними лініями з метою одержання поСелекція рослин за стійкістю Системи 2 пуляцій для дослідження їх спадковості. Ці дві поВ результаті відсіювання в вирощувальній капуляції були наступними: мері, насіння головок, яке показало розділення за а) U9605LF (чутлива)/U00T3LM (стійка). стійкістю, було посаджено як F1 насіння в наступних літніх розсадниках. Насіння нових сортів О. б) U9612LM (чутлива)/U00Z0LM (стійка). Сumana, зібрані з природньо інвазованих соняшF2 популяція U9605LF/U00T3LM та її F1 звоникових полів, використовували для штучної інваротньо схрещенний гібрид були розсаджені на 13 86569 14 масово та природньо інвазованих насінням; нових Селекція та польовий добір рослин зі стійкістю сортів вовчаку полях. 5 реплікацій кожної з 250 Системи 2 рослин були розсаджені в Текке кой; Малькарі, Стійкість Системи 2 була винайдена з гермпТекірдагу, Туреччина. лазми колекції Фрімана Джонсона (купленої ПіонеF2 популяція U9612LM/U00Z0LM була розсаром). Це джерело було використане для розведжена на тих самих полях Туреччини в 4 реплікадення з інбредних ліній Піонера. ціях (250 рослин кожна) та інші 526 рослин тієї ж Матеріали були отримані з Вудланду, Канада. популяції були висаджені на природньо інвазоваВони були позсаджені як F3 насіння на літніх розних полях Ла Карлоти, Кордори, Іспанія. садниках (Ахметбей, Люлебургаз, Кіркларлі, ТуреЯк показано нижче в таблиці, F2 рослини двох ччина). Стійкі рослини були відібрані, зібраний популяцій розподілили З:1 стійкість-до -чутливості, врожай, а їх насіння позсаджене в зимових розсав той час як F1 зворотньо схрещені гібриди розподниках. З F4 рослин близько 20 головок було відіділили 1:1 стійкість-до-чутливості., демонструючи, брані та схрещені головка до головки з U9605LF що стійкість до нових сортів за Системою 1 конт(чутлива жіноча інбредна лінія) для одержання ролюється одним домінантним геном. досліджуваних гібридів. Дані, зібрані при дослідженні спадковості: а) Гібридні комбінації: I. F2 популяція U9505LF/U00T3LM та її F1BC1 Добір досліджуваних схрещень та нових гібридів для досягнення стійкості до нових сортів вовF2 чаку провдився напротязі декілька років в Текке кой, Малькарі, Текірдагу, Туреччина, на полях, № Стійкі росл. Чутл. Росл. природньо та масово інвазованих заново поміче1 180 61 ними сортами вовчаку. Це були поля, на яких по2 179 57 передня врожайність соняшникових культур була 3 176 65 зменшена до приблизно 80-100% внаслідок напа4 178 61 ду нових сортів вовчаку. Добір був виконаний, ви5 184 60 користовуючи рандомізований блочний пристрій з 2 копіями на кожен гібрид. Стійкість до вовчаку Сума 897 304, визначали безпосередньо перед збором врожаю, Віднош. 2,95 1 рахуючи кількість соняшникових рослин, вільних від інвазії вовчаку в радіусі 50см навколо кожної F1BC1 рослини. Стійкі рослини були видалені з землі для № Стійкі росл. Чутл. Росл. підтвердження відсутності будь-яких паростків 1 110 115 вовчаку, які могли прикріпитися до кореневої сис2 101 112 теми під поверхнею ґрунту. 3 116 112 Чутливі індивідууми мали багато виниклих 4 112 113 та/або прикріплених паростків вовчаку та показали 5 100 115 різну ступінь інтенсивності нападу. б) Інбредні лінії та добір гермплазм: 539 569 Добір нових джерел добору гермплазм та ін0,95 1 бредних ліній для досягнення стійкості до нових сортів вовчаку проводився протягом декількох ІІ. F2 популяція U9612LM/U00Z0LM років в літніх розсадниках в Ахметбеї, ЛюлебургазКірклабі, Туреччина. Розсадники були штучно заТуреччина ражені насінням нових сортів О. Cumana, яке було зібране на природно масово інвазованих полях. № Стійкі росл. Чутл. Росл. Інвазію ґрунту розсадників повторювали кожен рік. 1 171 55 Відсіювання здійснювали, висаджуючи 15 рослин в 2 168 70 4-метрові ряди для кожної селекції добірної герм3 163 56 плазми та інбредних ліній. Стійкість до вовчаку 4 188 60 визначали безпосередньо перед збором врожаю, рахуючи кількість соняшникових рослин, вільних Сума 690 241 від інвазії вовчаку в радіусі 50 см навколо кожної Віднош. 2,86 1 рослини. Стійкі рослини були видалені з землі для підтвердження відсутності будь-яких паростків Іспанія вовчаку, які могли прикріпитися до кореневої сис№ Стійкі росл Чутл. Росл теми під поверхнею ґрунту. Чутливі індивідууми мали багато виниклих паростків вовчаку. Чутливі рослини показали різну ступінь інтенсивності нападу. Приклад 5: Польовий Добір та Селекція Гібридних Рослин 393 133 з поєднанням стійкості за Системою 1 та Систе2,95 1 мою 2 Гібридні комбінації Системи 1 та Системи 2 Приклад 4: були створені для збільшення стійкості проти будь-яких виниклих в майбутньому сортів вовчаку. 15 86569 16 Схрещення (01UL2365, представлене АТСС номещення. Стійкість до вовчаку визначали безпосерером РТА-3791) було здійснено між U0170LF (Сисдньо перед збором врожаю, рахуючи кількість тема 2, жіноча) та U00S9LM (Система 1, чоловіча). соняшникових рослин, вільних від інвазії вовчаку в Гібриди були відібрані на полях Текке кой, Мальрадіусі 50см навколо кожної рослини. Жодної чуткари, Текірдагу, Туреччина, природно та масово ливої рослини цієї гібридної комбінації не було інвазованих новими сортами вовчаку. Це були помічено. До близько 1-3% із цих стійких рослин поля, на яких попередня врожайність соняшникобули прикріплені мертві паростки вовчаку під земвих культур була зменшена до приблизно 80-100% лею, підтверджуючи прояву стійкості за Системою внаслідок нападів нових сортів вовчаку. Добір був 2. Чутливі контрольовані рослини вмирали перед виконаний, використовуючи рандомізований блочстадією цвітіння завдяки суровим нападам нових ний пристрій з 2 копіями на кожне гібридне схресортів вовчаку. Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601