Похідні триазолохіноліну як ліганди рецепторів аденозину

1. Сполуки загальної формули (І) X R6 R4 R5 N (I) N N R7 , де R1 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом; R2 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом; R3 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом або феніль UA (CR 1R 2)n (19) (21) 20040706067 (22) 17.12.2002 (24) 10.08.2007 (86) PCT/HU02/00143, 17.12.2002 (31) P 0105407 (32) 21.12.2001 (33) HU (46) 10.08.2007, Бюл. № 12, 2007 р. (72) Арані Петер , HU, Балаж Ласло , HU, Баторі Шандор , HU, Бенце Юдіт , HU, Боер Кінга , HU, Хайду Фелікс , HU, Капуі Зольтан , HU, Мікуш Ендре , HU, Сабо Тібор , HU, Т. Надь Лайош, HU, Тімарі Геза , HU, Урбан-Сабо Каталін , HU, Валс Ержебет , HU (73) САНОФІ-АВЕНТІС, FR (56) US5101028 A 31.03.1992 DD280109 A 27.06.1990 DD280110 A 27.06.1990 POTTS, K. T. ET AL: "1,2,4-Triazoles. XIII. Derivatives of the s-triazoloA1,5-aUpyridine ring system" J. ORG. CHEM. (1966), 31(1) DATABASE C A AOnlineU CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLU MBUS, OHIO, US; BROWN, ROGER F. C. ET AL: "N-Alkylation and electrophilic substitution reactions of 2-methylpyrazoloA1,5aUpyridin-5-ol and related compounds" retrieved from STN Database accession no. 121:134019 XP002239505 & AUSTRALIAN JOURNAL OF CHEMISTR Y (1994), 47(6) DATABASE C A AOnlineU CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLU MBUS, OHIO, US; BROWN, 2 (11) 1 3 79955 ну гр уп у, тієнільну груп у або фурильну гр упу, що необов’язково заміщені однією або декількома С 1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або атомами галогену, або означає 5- або 6-членне гетероароматичне кільце, що містить один, два або три атоми азоту, або 5членне гетероароматичне кільце, що містить один атом азоту та один атом кисню або один атом азоту та один атом сірки, які необов’язково заміщені однією або декількома С 1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або С 1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або атомами галогену; R4 і R5 утворюють разом 1,3-бутадієнільну групу, необов’язково заміщену метилендіоксигрупою або однією або декількома С1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксильними групами, трифторметильними групами, ціаногрупами або атомами галогену; R6 означає атом водню або ціаногрупу, амінокарбонільну групу, С1-4 алкоксикарбонільну групу або карбоксильну груп у; R7 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або С1-4 алкіленову групу, необов’язково заміщену фенільною групою, або фенільну гр упу, бензильну гр упу, тієнільну гр упу або фурильну гр упу, необов’язково заміщену метилендіоксигрупою або однією або декількома С1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксильними групами, трифторметильними групами, ціаногрупами або атомами галогену, аміно, моно- або діалкіламіногрупами, або означає 5- або 6-членне гетероароматичне кільце, що містить один, два або три атоми азоту, або 5-членне гетероароматичне кільце, що містить один атом азоту та один атом кисню або один атом азоту та один атом сірки, які необов’язково заміщені однією або декількома С1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або С 1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або атомами галогену; Х означає -СН2-групу, -NН-гр упу, -NR11-гр упу або атом сірки, або атом кисню, або сульфогрупу, або сульфоксигрупу, де R11 означає лінійну або розгалужену С 1-4-алкільну груп у або С 3-6 циклоалкільну груп у; n означає нуль, 1 або 2; та їх солі, сольвати і оптично активні ізомери та їх солі і сольвати. 2. Сполуки загальної формули (Іа) за п. 1, R3 (CR 1R2)n R8 X R9 R6 N R10 R 11 де N N R7 (Іа) 4 R1 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом; R2 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом; R3 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або фенільну групу, тієнільну групу або фурильну групу, що необов’язково заміщені однією або декількома С 1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або атомами галогену, або означає 5- або 6-членне гетероароматичне кільце, що містить один, два або три атоми азоту, або 5членне гетероароматичне кільце, що містить один атом азоту та один атом кисню або один атом азоту та один атом сірки, які необов’язково заміщені однією або декількома С 1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або С 1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або атомами галогену; R8, R9, R10 i R 11 означають, незалежно один від одного, атом водню, С1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4 алкоксигрупу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксигрупу або атом галогену, або R8 і R11 означають атом водню, а R9 і R10 утворюють разом метилендіоксигрупу, R6 означає атом водню або ціаногрупу, амінокарбонільну групу, С1-4 алкоксикарбонільну групу або карбоксильну груп у; R7 означає атом водню або С 1-4 алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або С1-4 алкіленову групу, необов’язково заміщену фенільною групою, або фенільну гр упу, бензильну гр упу, тієнільну гр упу або фурильну гр упу, необов’язково заміщену метилендіоксигрупою або однією або декількома С1-4 алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксигрупами, трифторметильними групами, ціаногрупами або атомами галогену, аміно, моно- або діалкіламіногрупами, або означає 5 або 6-членне гетероароматичне кільце, що містить один, два або три атоми азоту, або 5-членне гетероароматичне кільце, що містить один атом азоту та один атом кисню або один атом азоту та один атом сірки, які необов’язково заміщені однією або декількома С1-4алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або С1-4 алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або атомами галогену; Х означає -СН2-групу, -NН-гр упу, -NR12-гр упу або атом сірки, або атом кисню, або сульфогрупу, або сульфоксигрупу, де R12 означає С1-4 алкільну групу з лінійним або розгалуженим ланцюгом або С 3-6 циклоалкільну груп у; n означає нуль, 1 або 2, та їх солі, сольвати і оптично активні ізомери та їх солі і сольвати. 3. Сполуки загальної формули (Іa) за п. 2, де R1 означає атом водню або метильну гр упу; R2 означає атом водню або метильну гр упу; R3 означає фенільну групу, тієнільну групу або фурильну гр упу; R8, R9, R10 і R 11 означають, незалежно один від одного, атом водню, С1-4 алкільну гр упу з лінійним 5 79955 або розгалуженим ланцюгом, С1-4 алкоксигрупу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксильну гр уп у або атом галогену; або R8 і R11 означають атом водню, і R9 та R10 утворюють разом метилендіоксигрупу, R6 означає атом водню або ціаногрупу; R7 означає 4-метоксифенільну груп у, 3метилфенільну груп у, 3-метоксифенільну груп у, 3тієнільну гр упу, 3-піридильну гр упу, 3гідроксифенільну або 3-фурильну груп у; Х означає -NH-групу або атом кисню, і n означає 1, та їх солі і сольвати, оптично активні ізомери та їх солі і сольвати. 4. Сполуки за будь-яким з пп. 1-3, що наведені нижче: 2-(4-метоксифеніл)-9-бензиламіно-10-ціано-sтриазоло[1,5- a ]хінолін, 2-(2-фурил)-9-(2-фурилметиламіно)-10-ціано-sтриазоло[1,5- a ]хінолін, 2-(3,4-метилендіоксифеніл)-9-(2фурилметиламіно)-10-ціано-s-триазоло[1,5- a ]хінолін, 2-(3-піридил)-9-(2-тієнілметиламіно)-10-ціано-sтриазоло[1,5- a ]хінолін, 2-(3-гіроксифеніл)-9-(2-тієнілметиламіно)-10-ціано s-триазоло[1,5- a ]хінолін, та їх солі, сольвати, оптично активні ізомери та їх солі і сольвати. 5. Спосіб одержання сполуки загальної формули (І), її солей сольватів, оптично активних ізомерів та їх солей і сольватів, де в формулі R1, R2, R3 , R4, R5, R6, R7, R8, Х та n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 1, який полягає в замиканні кільця 1,2-діамінопіридинієвої солі загальної формули (II), R3 (CR 1R2)n X R6 R4 + N R5 NH2 NH 2 TsO 1 (II) де R , R , R3 , R4, R5, R6 , R7, X та n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 1, зі сполукою загальної формули (VII), O R 7 2 (VII) Y де R7 є таким, як визначено в п. 1, і, при необхідності, перетворенні замісників сполуки загальної формули (І), одержаної таким чином, одного в одний відомими способами та/або перетворенні сполуки загальної формули (І), одержаної таким чином, в її солі або сольвати, або вивільненні її із її солей або сольватів та/або розділенні її на її оптично активні ізомерні форми, або перетворенні оптично активних форм в рацемічну форму. 6 6. Спосіб за п. 5, який відрізняється тим, що замикання кільця проводять в диметилформаміді в присутності триетиламіну у випадку сполук формули (VII), де Y означає атом водню. 7. Спосіб за п. 5, який відрізняється тим, що замикання кільця проводять в піридині у випадку сполук формули (VII), де Y означає атом галогену. 8. Фармацевтична композиція, яка містить як активний інгредієнт одну або декілька сполук загальної формули (І), де R1, R2 , R3 , R4, R5, R 6, R7 , Х і n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 1, або їх солі, сольвати або оптично активні ізомери та їх солі і сольвати, в суміші з одним або декількома екципієнтами, використовуваними в фармацевтичній промисловості. 9. Фармацевтична композиція за п. 8, яка містить як активний інгредієнт одну або декілька сполук загальної формули (Iа), де R1 , R2 , R3 , R4, R5, R6, R7, X і n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 2, або їх солі, сольвати або оптично активні ізомери та їх солі і сольвати, в суміші з одним або декількома екципієнтами, використовуваними в фармацевтичній промиcловості. 10. Фармацевтична композиція за п. 9, яка містить як активний інгредієнт одну або декілька сполук за п. 4. 11. Застосування сполук загальної формули (І), де R1, R2, R3 , R4, R5, R6 , R7, Х і n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 1, для лікування захворювань в перебігу яких відіграють роль А3 рецептори. 12. Застосування сполук загальної формули (І), де R1, R2, R3 , R4, R5, R6 , R7, Х і n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 1, за п. 11 як А3 лігандів у випадку захворювань серця, нирок, органів дихання та центральної нервової системи, для інгібування захисту аденозину в ракових клітинах, які ростуть, запобігання дегрануляції тучних клітин, інгібування утворення цитокінів, зменшення інтраокулярного тиску, інгібування вивільнення TNF- a , інгібування міграції еозинофілів, нейтрофілів та інших клітин імунної системи, інгібування бронхоспазму та екстравазації плазми. 13. Застосування сполук загальної формули (І), де R1, R2, R3 , R4, R5, R6 , R7, Х і n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 1, за п. 11 або 12 як антагоністів А3 рецепторів у антизапальних, антиастматичних, антиішемічних, антидепресантних, антиаритмічних, ниркозахисних, антипухлинних, антипаркінсонічних та покращуючи х когнітивні властивості фармацевтичних композиціях та як активного інгредієнта в композиціях для лікування або профілактики міокардіальної реперфузії, хронічних обструктивних захворювань легень (COPD) та респіраторного дистрес-синдрому дорослих (ARDS), включаючи хронічні бронхіти, легеневу емфізему або задишку, алергійних реакцій (наприклад, ринітів, реакцій, викликаних отруєнням плющем, кропивниці, склеродермії, артриту), інших аутоімунних захворювань, запальних захворювань кишечнику, хвороби Едісона, хвороби Крона, псоріазу, ревматизму, гіпертензії, розладів неврологічної функції, гла укоми та діабетів. 14. Застосування сполук загальної формули (І), де R1, R2, R3 , R4, R5, R6 , R7, Х і n мають такі ж самі 7 79955 8 значення, які зазначені в п. 1, за будь-яким з пп. 11, 12 і 13 як антагоністів А3 рецепторів для лікування захворювань, таких як астма, COPD і ARDS, глаукоми, пухлин, алергійних та запальних захво рювань, ішемії, гіпоксії, аритмії та хвороб нирок, як активного інгредієнта. 15. Сполуки загальної формули (II), де R1, R2, R3, R4, R5, R6, Х і n мають такі ж самі значення, які зазначені в п. 1. Цей винахід стосується лігандів аденозинових А3 рецепторів загальної формули (І), переважно антагоністів, а також їх солей, сольватів та ізомерів, і фармацевтичних композицій, що їх містять; використання сполук загальної формули (І), а також їх солей, сольватів та ізомерів; та одержання сполук загальної формули (І), а також їх солей, сольватів та ізомерів; крім того, нових проміжних сполук загальних формул (II) та (III) та їх одержання. Аденозин є добре відомим компонентом декількох ендогенних молекул (АТР, N AD+, н уклеїнові кислоти). Крім того, він грає важливу регуляторну дію в багатьох фізіологічних процесах. Вплив аденозину на серцеву діяльність був [описаний ще в 1929 (Drury та Szentgyorg yi, J Ph ysiol 68: 213, 1929)]. Визначення збільшуваної кількості фізіологічних функцій, опосередкованих аденозином, та відкриття нових підтипів аденозинових рецепторів надає можливість терапевтичного застосування специфічних лігандів [Poulse, S. А. та Quinn, R. J. Bioorganic and Medicinal Chemistry 6: 619, 1998]. На сьогоднішній день рецептори аденозину підрозділяються на три головні класи: А1, А2 та А3. Підтип А1 є частково відповідальним за інгібування аденілатциклази шляхом приєднання до G1мембранного протеїну, деякою мірою впливає на інші системи передачі вторинної інформації. Рецептори А2 підтипу можуть підрозділятися на два додаткових підтипи - А2а та А2b, які стимулюють активність аденілатциклази. Нещодавно було ідентифіковано послідовність аденозинових А3 рецепторів з бібліотеки cDNA яєчок щурів. Пізніше було доведено, що вона відповідає новому функціональному аденозиновому рецептору. Активація А3 рецепторів пов'язана також з декількома системами передачі вторинної інформації: наприклад, інгібуванням аденілатциклази та стимулюванням фосфоліпази С і D. Було виявлено, що аденозинові рецептори знаходяться в певних органах та регулюють їх функції. Як Α1, так і А2а рецептори грають важливу роль в центральній нервовій системі та серцевосудинній системі. В ЦНС аденозин інгібує вивільнення синаптичних трансміттерів, чий вплив опосередковується Αι рецепторами. В серці також Αι рецептори опосередковують негативні інотропний, хронотропний та дромотропний ефекти аденозину. Аденозинові Ага рецептори, розташовані у відносно великій кількості в смугастому тілі, виявляють функціональну взаємодію з рецепторами допаміну в регулюванні синаптичної передачі сигналу. Аденозинові А2а рецептори ендотеліальних клітин та клітин гладкої мускулатури є відповідальними за аденозин-індуковану вазоділатацію. На основі ідентифікації мРНК аденозинові А2b рецептори широко розподіляються в різних тканинах. їх можна ідентифікувати майже в кожному типі клітин, але їх експресія є найбільшою в кишечнику та сечовому міхурі. Цей підтип, можливо, має також важливу регуляторну функцію в регуляції судинного тонусу та відіграє роль у функціонуванні тучних клітин. Всупереч Α1 та А2а рецепторам, розподілення яких в тканинах визначалось за рівнем білка, присутність А2b та А3 рецепторів визначалась на основі їх мДНК рівня. Рівні експресії аденозинових А3 рецепторів є скоріше низькими у порівнянні з іншими підтипами і сильно залежать від виду. Аденозинові А3 рецептори експресуються, головним чином, у центральній нервовій системі, яєчках, імунній системі і вважається, що вони повинні включатися в модуляцію вивільнення медіатора з тучних клітин в безпосередній реакції гіперчуттєвості. Опубліковані на даний час А3 антагоністи належать до груп флавоноїдів, похідних 1,4дигідропіридину, триазолохіназолінів, тіазолонафтиридинів та тіазолопіримідинів. Даний винахід стосується нового типу ефективних А3 антагоністів, які мають структур у триазолохіноліну. Для терапевтичного використання є важливим забезпечення того, щоб молекула не зв'язувалась або зв'язувалась лише у випадках дуже високих концентрацій з А1, А2a та А2b підтипами рецепторів аденозину. Даний винахід стосується сполук загальної формули (І), а також їх солей, сольватів та ізомерів, які мають значну селективність до А3 рецепторів аденозину. Нашею задачею було отримати А3 ліганди, перш за все, з імідазохіноліновою структурою і серед них, переважно, антагоністи, які мають сильну антагоністичну дію та проявляють високу селектвність до А3 рецепторів, тобто, вони інгібують А3 рецептори в значно нижчій концентрації, ніж вони інгібують А1, А2а та А2b рецептори. Подальшими цілями було отримати дані по стабільності, біодоступності, терапевтичному індексу та токсичності, які роблять можливим перетворення нових сполук в лікарські речовини та, завдяки їх сприятливому ентеральному поглинанню, сполуки можуть застосовуватися орально. Нами було виявлено, що сполуки загальної формули (І) 9 79955 (I) в якій R1 означає атом водню або С 1-4алкільну груп у з лінійним або розгалуженим ланцюгом; R2 означає атом водню або С 1-4алкільну груп у з лінійним або розгалуженим ланцюгом; R3 означає атом водню або С 1-4алкільну груп у з лінійним або розгалуженим ланцюгом або фенільну групу, тієнільну групу або фурильну групу, що необов'язково заміщені однією або декількома С 14алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або атомами галогену, або означає 5- або 6-членне гетероароматичне кільце, що містить один, два або три атоми азоту, або 5членне гетероароматичне кільце, що містить один атом азоту та один атом кисню або один атом азоту та один атом сірки, які необов'язково заміщені однією або декількома С 1-4алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або С 14алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або атомами галогену; R4 і R5 утворюють разом 1,3-бутадієнільну групу, необов'язково заміщену метилендіоксигрупою або однією або декількома С 1-4алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С14алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксильними групами, трифторметильними групами, ціаногрупами або атомами галогену; R6 означає атом водню або ціаногрупу, амінокарбонільну груп у, С1-4алкоксикарбонільну групу або карбоксильну групу; R7 означає атом водню або С 1-4алкільну груп у з лінійним або розгалуженим ланцюгом, або С14алкіленову груп у, необов'язково заміщену фенільною групою, або фенільну групу, бензильну групу, тієнільну груп у або фурильну гр упу, необов'язково заміщену метилендіоксигрупою або однією або декількома С 1-4алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксильними групами, трифторметильними групами, ціаногрупами або атомами галогену, аміно, моно- або діалкіламіногрупами, або означає 5- або 6-членне гетероароматичне кільце, що містить один, два або три атоми азоту, або 5-членне гетероароматичне кільце, що містить одинатом азоту та один атом кисню або один атом азоту та один атом сірки, які необов'язково заміщені однією або декількома С1-4алкільними групами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або С 1-4алкоксигрупами з лінійним або розгалуженим ланцюгом або атомами галогену; X означає -СН2-групу, -NH-гр упу, -NR11-гр упу, або атом сірки або атом кисню, або сульфогрупу або сульфоксигрупу, де R11 означає лінійну або 10 розгалужену С1-4алкільну групу або С 36циклоалкільну гр упу; n означає нуль, 1 або 2; та їх солі, сольвати, та їх оптично активні ізомери, солі та сольвати, що задовольняють вищенаведеним критеріям. Конкретними значеннями перерахованих вище замісників є наступні: Під лінійною або розгалуженою С 1-4алкільною групою ми розуміємо метильну, етильну, пропільну, ізопропільну, бутильну, ізобутильну, вторбутильну, трет-бутильну, переважно етильну або метильну груп у. Під лінійною або розгалуженою С 14алкоксигрупою ми розуміємо метокси-, етокси-, пропокси-, ізопропокси-, бутокси-, ізобутокси-, втор-бутокси-, трет-бутокси-, переважно етоксиабо метоксигрупу. Гетероароматичне кільце, що містить один, два або три атоми азоту, означає пірольне, імідазольне, піразольне, 1,2,3-триазольне, 1,2,4триазольне, піридинове, піримідинове, піридазинове, піразинове та 1,3,4-триазинове кільце. Кільце необов'язково заміщене С1-4алкільною групою. Гетероароматичне кільце, що містить один атом азоту та один атом кисню або атом сірки, означає оксазольне, ізоксазольне, тіазольне, ізотіазольне кільце. Кільце необов'язково заміщене С 14алкільною групою. Солі сполук загальної формули (І) означають солі, отримані з неорганічними та органічними кислотами та основами. Перевага надається солям, отриманим з фармацевтично прийнятними кислотами, наприклад, хлороводневою кислотою, сірчаною кислотою, етансульфоновою кислотою, винною кислотою, бурштиновою кислотою, фумаровою кислотою, яблочною кислотою, лимонною кислотою. Під сольватами розуміють сольвати, одержані з різними розчинниками, такими як, наприклад, вода або етанол. Сполуки загальної формули (І) проявляють геометричну та оптичну ізомерію, тому винахід також стосується сумішей геометричних ізомерів, рацемічних або оптично активних геометричних ізомерів, а також їх солей та сольватів. Переважною групою сполук загальної формули (І) є група, утворена сполуками загальної формули (ІА), в якій R1 означає атом водню або метильну гр упу; R2 означає атом водню або метильну гр упу; R3 означає фенільну груп у, тієнільну груп у або фурильну гр упу; R8, R9, R10 і R11 означають, незалежно один від іншого, атом водню, С1-4алкільну гр упу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, С1-4алкоксигрупу з лінійним або розгалуженим ланцюгом, гідроксильну гр уп у або атом галогену; або R8 і R11 означають атом водню, і R9 та R10 утворюють разом метилендіоксигрупу, R6 означає атом водню або ціаногрупу; R7 означає 4-метоксифенільну груп у, 3метилфенільну груп у, 3-метоксифенільну груп у, 3тієнільну гр упу, 3-піридильну гр упу, 3гідроксифенільну або 3-фурильну груп у; 11 79955 X означає -NH-групу або атом кисню, і n означає 1 та їх солі, сольвати, оптично активні ізомери та їх солі і сольвати. Особлива перевага надається наступним сполукам, що відповідають вищезазначеним критеріям: 2-(4-Метоксифеніл)-9-бензиламіно-10-ціано-sтриазоло[1,5-α]хінолін, 2-(2-Фурил)-9-(2-фурилметиламіно)-10-ціано-sтриазоло[1,5-α]хінолін, 2-(3,4-Метилендіоксифеніл)-9-(2фурилметиламіно)-10-ціано-s-триазоло[1,5α]хінолін, 2-(3-Піридил)-9-(2-тієнілметиламіно)-10-ціаноs-триазоло[1,5-α]хінолін, 2-(3-Гідроксифеніл)-9-(2-тієнілметиламіно)-10ціано-s-триазоло[1,5-α]хінолін, та їх солі, сольвати, оптично активні ізомери та їх солі і сольвати. Згідно з іншими аспектами даний винахід також стосується фармацевтичних композицій, що містять як активні компоненти сполуки загальної формули (І) або їх ізомери солі та сольвати, які є переважно оральними композиціями, але інгаляторні, парентеральні та трансдермальні композиції є також об'єктами винаходу. Зазначені вище фармацевтичні композиції можуть бути твердими або рідкими, такими як таблетки, пілюлі, капсули, пластирі, розчини, суспензії або емульсії. Серед фармацевтичних форм перевага надається твердим композиціям, перш за все, таблеткам та капсулам. Зазначені вище фармацевтичні композиції готують з використанням звичайних фармацевтичних екціпієнтів і стандартних методик. Сполуки загальної формули (І) можуть використовуватися для лікування патологій, в перебігу яких відіграють роль A3 рецептори. Сполуки даного винаходу, що мають селективну активність по відношенню до A3 рецепторів, можуть використовуватися в терапевтичному та/або профілактичному лікування порушення діяльності серця, нирок, дихальної системи, центральної нервової системи. Вони інгібують захисний вплив аденозину в пухлинних клітинах, які ростуть, попереджують дегрануляцію тучних клітин, інгібують утворення цитокінів, зменшують інтраокулярний тиск, інгібують вивільнення TNF-α, інгібують міграцію еозинофілів, нейтрофілів та інших імунних клітин, інгібують бронхоспазми та екстравазацію плазми. Засновуючись на цих е фектах, антагоністи аденозинових А3 рецепторів даного винаходу можуть бути терапевтично придатними як антизапальні, антиастматичні, антиішемічні, антидепресантні, антиаритмічні, ниркозахисні, антипухлинні, антипаркінсонічні та покращуючі когнітивні властивості лікарські засоби. Вони також можуть використовуватися в лікуванні або профілактиці порушень міокардіальної реперфузії, хронічних обструктивних захворювань легень (COPD) та респіраторного дистрес-синдрому дорослих (ARDS), включаючи хронічні бронхіти, легеневу емфізему або задишку, алергійні реакції (наприклад, риніти, реакція, викликана отруєнням плющем, кропивни 12 ця, склеродермія, артрит), інші аутоімунні захворювання, запальні захворювання кишечника, хвороба Едісона, хвороба Крона, псоріаз, ревматизм, гіпертензія, розлади неврологічної функції, глаукома та діабет [K. N. Klotz, Naunyn-Schmiedberg's Arch. Pharmacol. 362: 382, 2000; P.Г.Baraldi es P.A.Borea, TiPS 21: 456,2000]. Сполуки даного винаходу можуть переважно використовува тися для лікування захворювань, таких як астма, COPD та ARDS, глаукома, новоутворення, алергійні та запальні захворювання, ішемія, гіпоксія, аритмія та захворювання нирок. Згідно з іншими аспектами даний винахід стосується застосування сполук загальної формули (І) для лікування вищезгаданих патологій. Приблизна денна доза складає 0,1-1000мг активного інгредієнта в залежності від виду захворювання і серйозності стану та статі, ваги пацієнта і т.д. Подальшим об'єктом винаходу є одержання сполук загальної формули (І) та проміжних сполук загальних формул (II), (III) і (IV). Проміжні сполуки загальних формул (II) є новими. Замісники в загальних формулах (II), (ІІІ)і (IV) мають значення, наведені вище. В способі відповідно до запропонованого винаходу 1,2-діаміноазинієву сіль загальної формули (І) піддають взаємодії зі сполукою загальної формули (VII), в якій R7 і є таким, як визначено вище, а Υ означає атом водню, атом галогену або С 14алкоксигрупу, переважно з придатним галогенангідрідом або естером [D.W.Robertson, J.Med. Chem. , 28, 717, (1985)], і сполуку загальної формули (І), отриману таким чином, при необхідності, перетворюють в її сіль, сольват, або виділяють із її солі, сольвату та розділяють на її геометричні або оптичні ізомери. Замкнення кільця може бути здійснене в присутності триетиламіну в диметилформаміді або в присутності інших сполук, відомих як каталізатори замкнення кільця подібного типу. Замкнення кільця може бути здійснене в межах широкого температурного інтервалу, переважно в межах між 20°С і 150°С. Замісники сполук загальної формули (І) можуть бути перетворені один в інший за відомими методиками. Сполуки загальної формули (II), в яких значення R1, R2, R3, R4, R 5, R6, X та n є такими, як визначено вище, можуть бути о тримані декількома відомими способами, в тому числі способом, що демонструється на Схемі 1, шляхом N-амінування сполук формули (III), використовуючи методики Nамінування, відомі з органічної хімії [Е.Е. Glover, R.Т.Rowbotton, J.Chem. Soc. Perkin. Trans I., 376, (1976), G.Timari, Gy. Hajos, S.Batori та A.Messmer, Chem. Ber., 125, 929 (1992)]. Як N-амінувальний агент переважно застосовують Отозилгідроксиламін, але можуть також використовуватися й інші речовини, відомі в способах Nамінування. Сполуки загальної формули (III), в яких значення R1, R2, R3, R4, R 5, R6, X та n є такими, як визначено вище, можуть бути отримані із сполук формули (IV), використовуючи по суті відомі способи 13 79955 [Nan Zhang, Bioorg. and Med. Chem. Lett., 10, 2825, (2000)]. Сполуки загальної формули (IV), в яких значення R4, R5, R6 є такими, як визначено вище, можуть бути одержані із сполук формули (V), використовуючи по суті відомі способи [D.L.Leysen, J.Heterocyclic Chem., 24, 1611, (1987)]. Сполуки загальної формули (V), в яких значення R4, R5, R6 є такими, як визначено вище, можуть бути одержані з використанням по суті відомих способів [Pfizer (Inc), патент США №4 175 193]. Сполуки винаходу загальних формул (І), (II), (III) та (IV)), їх одержання та біологічна активність демонструються в наступних прикладах, без обмеження об'єму формули винаходу цими прикладами. Фіг.1 зображує сполуки формули (І), Фіг.2 зображує сполуки формули (Іа), Фіг.3 зображує сполуки формули (II), Фіг.4 зображує сполуки формули (III), Фіг.5 зображує сполуки формули (IV), Фіг.6 зображує сполуки формули (V), Фіг.7 зображує сполуки формули (VI), Фіг.8 зображує сполуки формули (VII). Приклади Приклад 1 2-(4-МетоксиФеніл)-9-бензиламіно10-ціано-8-триазоло[1,5-α]хінолін В загальній формулі (І) R1 та R2 означають атом водню, R3 означає фенільну групу, R4 та R5 утворюють разом 1,3-бутадіенільну групу, R6 означає ціаногрупу, R7 означає 4-метоксифенільну групу, X означає -NH групу, n дорівнює 1. а.) 2-Аміно-3-ціано-4-хлорхінолін: Суміш 10г 2-аміно-3-ціано-4-гідроксихіноліну та 15мл фосфорилхлориду нагрівають при перемішуванні при 110°С. Реакційну суміш охолоджують, виливають в 100мл льодяної води і нейтралізують 60мл 10% розчину гідроксиду натрію. Одержаний жовтий осад відфільтровують, промивають 50мл води. Після висушування одержують 7.5г вказаної в заголовку сполуки. Т.пл.: 210°С. ЯМР, δΗ (400МГц, D MSO-d6): 7,21млн.ч. (с, 2Н, NH2), 7,35-7,40млн.ч. (дд, 1Н, 6-Н), 7,53-7,57млн.ч. (д, 1Н, 5-Н, 7,70-7,75млн.ч. (дд, 1Н, 7-Н), 7,937,98млн.ч. (д, 1Н, 8-Н). b.) 2-Аміно-3-ціано-4-бензиламінохінолін 5г 2-Аміно-3-ціано-4-хлорхінолін та 11мл бензиламіну нагрівають при перемішуванні при температурі 130°С. Реакційну суміш виливають в 50мл води, одержаний осад відфільтровують, промивають 50мл води. Осад блідо-жовтого кольору перекристалізовують з диметилформаміду з одержанням 5,2г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 206°С. ЯМР, δΗ (400МГц, DMSO-d6): 5,02-5,03млн.ч. (д, 2Н, N-CH2), 6,22млн.ч. (с, 2Н, NH2), 7,147,16млн.ч. (дд, 1Н, 6-Н), 7,24-7,26млн.ч. (дд, 1Н, 5Н), 7,30млн.ч. (с, 5Н, Ph), 7,50-7,52млн.ч. (дд, 1Н, 7-Н), 8,16-8,19млн.ч. (д, 1Н, 8-Н), 8,30-8,33млн.ч. (т, 1Н, NH). с.) 1,2-Діаміно-3-ціано-4-бензиламінохінолінію тозилат До розчину 2,0г 2-аміно-3-ціано-4бензиламінохіноліну в 30мл диметилформаміду 14 краплями додають 1,78г О-тозилгідроксиламіну в 20мл дихлорметану при 20°С в межах 15 хвилин. Реакційну суміш перемішують протягом 5 годин, потім осад відфільтровують. Одержану білу кристалічну речовину перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 3,1г вказаної у заголовку сполуки, т.пл.: 207°С. d.) 2-(4-Метоксифеніл)-9-бензиламіно-10ціано-s-триазоло[1,5-α]хінолін До суміші 2,0г тозилату 1,2-діаміно-3-ціано-4бензиламінохінолінію та 15мл піридину додають 2г хлорангідриду анісової кислоти. Реакційну суміш перемішують протягом 8 годин при 100°С. Суміш виливають в 50мл води, осаджені кристали відфільтровують і перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 1,1г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 237°С. ЯМР, δΗ (400МГц, D MSO-d 6): 8,78млн.ч. (т, 1Н), 8,58 (д, 1Н), 8,38 (д, 1Н), 8,10 (д, 2Н), 7,98 (т, 1Н), 7,39 (м, 5Н), 7,07 (д, 2Н), 5,14 (д, 2Н), 3,82 (с, 3Н). Приклад 2 2-(2-Фурил)-9-(2-фурилметиламіно)-10-ціано-sтриазоло[1,5-α]хінолін В загальній формулі (І) R1 та R2 означають атом водню, R3 означає 2-фурильну групу, R4 та R5 утворюють разом 1,3-бутадієнільну груп у, R6 означає ціаногрупу, R7 означає 2-фурильну гр упу, X означає -NH-групу, n означає 1. а.) 2-Аміно-3-ціано-4-(2фурилметиламіно)хінолін 5г 2-Аміно-3-ціано-4-хлорхіноліну та 1мл фурилметиламіну (фурфуриламін) нагрівають при перемішуванні при 130°С. Реакційну суміш виливають в 50мл води, одержаний осад відфільтровують, промивають 50мл води. Осад блідожовтого кольору перекристалізовують з 20мл етанолу з одержанням 4,8г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 208°С. b.) 1,2-Діаміно-3-ціано-4-(2фурилметиламіно)хінолінію тозилат До розчину 2,0г 2-аміно-3-ціано-4-(2фурилметиламіно)хіноліну в 30мл диметилформаміду краплями додають 1,78г Отозилгідроксиламіну в 20мл дихлорметану при 20°С в межах 15 хвилин. Реакційну суміш перемішують протягом 5 годин, потім осаджену білу кристалічну речовину відфільтровують і перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 2,1г вказаної у заголовку сполуки, т.пл.: 211°С с.) 2-(2-Фурил)-9-(2-фурилметиламіно)-10ціано-s-триазоло[1,5-α]хінолін До суміші 2,0г тозилату 1,2-діаміно-3-ціано-4(2-фурилметиламіно)хінолінію та 15мл піридину додають 2г хлорангідриду фуран-2-карбонової кислоти. Реакційну суміш перемішують протягом 8 годин при температурі 100°С. Суміш виливають в 50мл води, осаджені кристали відфільтровують і перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 1,1г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 203°С. ЯМР, δΗ (400МГц, D MSO-d 6): 8.74млн.ч. (т, 1Н), 8.52 (д, 1Н), 8,32 (д, 1Н), 7.90 (м, ЗН), 7.63 (м, 2Н), 7.14 (м, 1Н), 6.68 (м, 1Н), 6.44 (м, 2Н), 5.11 (д, 2Н). Приклад 3 15 79955 2-(3,4-Метилендіоксифеніл)-9-(2фурилметиламіно)-10-ціано-s-триазоло[1,5α]хінолін В загальній формулі (І) R1 та R2 означають атом водню, R3 означає фурильну груп у, R4 та R5 утворюють разом 1,3-бутадієнільну групу, R6 означає ціаногрупу, R7 означає 3,4метилендіоксифенільну групу, X означає -NHгруп у, n означає 1. а.) 2-(3.4-Метилендіоксифеніл)-9-(2фурилметиламіно)-10-ціано-s-триазоло[1,5α]хінолін До суміші 2,0г тозилату 1,2-діаміно-3-ціано-4(2-фурилметиламіно)хінолінію та 15мл піридину додають 2г хлорангідриду 3,4метилендіоксибензойної кислоти. Реакційну суміш перемішують протягом 8 годин при температурі 100°С. Суміш виливають у 50мл води, осаджені кристали відфільтровують і перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 1,4г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 185°С. ЯМР, 5Н (400МГц, DMSO-d6): 8,55млн.ч. (м, 1Н), 8,51 (д, 1Н), 8,31 (д, 1Н), 7,93 (т, 1Н), 7,57-7,70 (м, 3Н), 7,05 (д, 1Н), 6,44 (м, 2Н), 6,11 (с, 2Н), 5,08 (д, 2Н). Приклад 4 2-(3-Піридил)-9-(2-тизнилметиламіно)-10ціано-s-триазоло[1,5-α]хінолін В загальній формулі (І) R1 та R2 означають атом водню, R3 означає 2-тієнільну груп у, R4 та R5 утворюють разом 1,3-бутадієнільну групу, R6 означає ціаногрупу, R7 означає 3-піридильну групу, X означає -NH-групу, n означає 1. а.) 2-Аміно-3-ціано-4-(2тієнілметиламіно)хінолін 5г 2-Аміно-3-ціано-4-хлорхіноліну та 11мл тієнілметиламіну нагрівають при перемішуванні при 130°С. Реакційну суміш виливають у 50мл води, одержаний осад відфільтровують, промивають 50мл води. Блідо-жовтий осад перекристалізовують з 25мл етанолу з одержанням 5,2г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 208°С. b.) Тозилат 1.2-діаміно-3-ціано-4-(2тієнілметиламіно)хінолінію До розчину 2,0г 2-аміно-3-ціано-4-(2тієнілметиламіно)хіноліну в 30мл диметилформаміду краплями додають 1,78г Отозилгідроксиламіну в 20мл дихлорметану при 20°С протягом 15 хвилин. Реакційну суміш перемішують протягом 5 годин, потім осаджену кристалічну речовину білого кольору відфільтровують і перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 2,1г вказаної у заголовку сполуки, т.пл.: 198°С. с.) 2-(3-Піридил)-9-(2-тієнілметиламіно)-10ціано-s-триазоло[1,5-α]хінолін До суміші 2,0г тозилату 1,2-діаміно-3-ціано-4(2-тієнілметиламіно)хінолінію та 20мл диметилфораміду додають 4мл триетиламіну та 4г піридин-3карбоксальдегіду. Реакційну суміш перемішують протягом 8 годин при температурі 100°С. Суміш виливають у 50мл води, осаджені кристали відфільтровують і перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 0,8г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 249°С. 16 ЯМР, δΗ (400МГц, D MSO-d6): 9,25млн.ч. (с, 1Н), 8,71 (м, 2Н), 8,35 (м, 3Н), 7,86 (м, 1Н), 7,51 (м, 3Н), 7,17 (м, 1Н), 6,98 (м, 1Н), 5,25 (д, 2Н). Приклад 5 2-(3-Гідроксифеніл)-9-(2тієнілметиламіно)-10-ціано-s-триазоло[1,5α]хінолін В загальній формулі (І) R1 та R2 означають атом водню, R3 означає 2-тієнільну груп у, R4 та R5 утворюють разом 1,3-бутадієнільну групу, R6 означає ціаногрупу, R7 означає 3-гідроксифенільну груп у, X означає -NH-групу, n означає 1. а.) 2-(3-Гідроксифеніл)-9-(2-тієнілметиламіно)10-ціано-s-триазоло[1,5-α]хінолін До суміші 2,0г тозилату 1,2-діаміно-3-ціано-4(2-тієнілметиламіно)хінолінію та 20мл диметилформаміду додають 4мл триетиламіну та 4г 3гідроксибензальдегіду. Реакційну суміш перемішують протягом 8 годин при температурі 100°С. Суміш виливають в 50мл води, осаджені кристали відфільтровують і перекристалізовують з ацетонітрилу з одержанням 0,9г вказаної у заголовку сполуки. Т.пл.: 248°С. ЯМР, δΗ (400МГц, D MSO-d6): 9,66млн.ч. (с, 1Н), 8,81 (м, 1Н), 8,52 (м, 1Н), 8,35 (м, 1Н), 7,96 (м, 1Н), 7,62 (м, 3Н), 7,44 (м, 1Н), 7,32 (м, 1Н), 7,18 (м, 1Н), 7,01 (м, 1Н), 6,88 (м, 1Н), 5,29 (д,2Н). Структура та фізичні властивості інших сполук загальної формули (І), одержаних за методикою, описаною в Прикладі 1, наведені в Таблиці І. 17 79955 18 тодикою, описаною в Прикладі 1, наведені в Таблиці (II) Структура та фізичні властивості проміжних сполук загальної формули (III), одержаних за ме 19 79955 Структура та фізичні властивості проміжних сполук загальної формули (IV), одержаних за методикою, описаною в Прикладі 1, наведені в Таблиці (III) 20 Приклад 53. Відомими способами, використовуваними в фармацевтичній промисловості, були зроблені таблетки з наступної композиції Активній інгредієнт 25мг Лактоза 50мг Авісел 21мг Кросповідон 3мг Стеарат магнію 1мг Біологія Методики Зв'язування аденозинових А3 рецепторів людини Одержання мембранної суспензії: збирають СНО клітини, що експресують hА3 рецептори, промиваючи тричі крижаним PBS, центрифугують при 1000´g 10 хвилин, гомогенізують протягом 15сек. В буфері (50мМ Тріс, рН7,4), центрифугують при 43000´g 10 хвилин (Sigma 3K30), суспендують мембранний препарат в буфері, згаданому вище, зберігають аліквоти при -80°С. Протокол зв'язування: інкубують CHO-hA3 мембранний препарат (містить 2мкг білка) в інкубаційному буфері (50мМ Тріс, 10мМ МgСІ2, 1мМ EDTA, 3Од./мл аденозину деамінази, рН8,0), в присутності 0,5нМ [125 І]АВ-МЕС А (памінобензилметилкарбоксамідо аденозин) (100,000імп./хвил.) та 100мкМ R-PIA (N6-[L-2фенілізопропіл]аденозин) для визначення неспецифічного зв'язування або досліджуваної сполуки в загальному об'ємі 50мкл протягом 1 години при кімнатній температурі. Фільтрують через фільтри із скляних волокон Whatman GF/B (попередньо занурені на 3 години в 0,5% поліетиленімін), промивають 4´1мл крижаного 50мМ Тріс, 10мМ МgСІ2, 1мМ EDTA (рН8,0) на 96-лунковий Brandel Cell планшет. Визначення активності: в гамалічильнику (1470 Wizard, Wallac). Інгібування [%]=100-((активність в присутності досліджуваної сполуки - неспецифічна активність)/(загальна активність - неспецифічна активність))·100. Зв'язування аденозинових A1 рецепторів людини Одержання мембранної суспензії: збирають СНО клітини, що експресують hА1 рецептори, промиваючи тричі крижаним PBS, центрифугують при 21 79955 1000´g 10 хвилин, гомогенізують протягом 15сек. В буфері (50мМ Тріс, 10мМ МgСІ2 , 1мМ EDTA, рН8,0), центрифугують при 43000´g 10 хвилин (Sigma 3K30), суспендують мембранний препарат в буфері, згаданому вище, зберігають аліквоти при -80°С. Протокол зв'язування: інкубують СНО-hА1 мембранний препарат (містить 50мкг білка) в інкубаційному буфері (50мМ Тріс, 3Од./мл аденозину деамінази, рН7,4), 10нМ [3Н]ССРА (2-хлор-NМ6циклопентиладенозин) (80.000розкл./хвил.) і 10мкМ R-PIA (N6-[L-2-фенілізопропіл] аденозину) для визначення неспецифічного зв'язування або досліджуваної сполуки в загальному об'ємі 100мкл протягом 3 годин при кімнатній температурі. Фільтрують через фільтри із скляних волокон Whatman GF/B (попередньо занурені на 3 години в 0,5% поліетиленімін), промивають 4´1мл крижаного буфера 50мМ Тріс (рН7,4) ) на 96-лунковий Brandel Cell планшет. Визначення активності: в 96лунковому планшеті в присутності HiSafe-3 коктейлю в бета-лічильнику (1450 Microbeta, Wallac). Інгібування [%]= 100-((активність в присутності досліджуваної сполуки - неспецифічна активність)/(загальна активність - неспецифічна активність))·100. Зв'язування аденозинових А2а рецепторів людини Протокол зв'язування: інкубують 7мкг мембран (аденозинових А2а рецепторів людини, заражених НЕК-293 клітинами, джерело: Receptor Biology, Inc.), буфер (50мМ Тріс-НСІ, 10мМ МgСІ2, 1мМ EDTA, 2Од./мл аденозиндіамінази, рН7,4), 20нМ [3H]CGS-21680 (2-[р-(2карбонілетил)фенілетиламіно]-5'-Nетилкарбоксамідадоенозин) (200 000розкл./хвил) та 50мкМ NECA (5'-N-етилкарбоксамідоаденозин) для визначення неспецифічного зв'язування або досліджуваної сполуки в загальному об'ємі 100мкл протягом 90 хвилин при кімнатній температурі. Фільтрують через фільтри із скляних волокон Whatman GF/B (попередньо занурені в 0,5% поліетиленімін), промивають 4´1мл крижаного 50мМ Тріс, 10мМ МgСІ2, 1мМ EDTA, 0,9% NaCI (рН7,4) на 96-лунковий Brandel Cell планшет. Визначення активності: в 96-лунковому планшеті в присутності HiSafe-3 коктейлю в бета-лічильнику (1450 Microbeta, Wallac). Інгібування [%]=100-((активність в присутності досліджуваної сполуки - неспецифічна активність)/(загальна активність - неспецифічна активність))·100. Зв'язування аденозинових А2b рецепторів людини Протокол зв'язування: інкубують 20,8мкг мембран (аденозинових А2b рецепторів людини, заражених НЕК-293 клітинами, джерело: Receptor Biology, Inc.), буфер (50мМ Тріс-НСІ, 10мМ МgСІ2, 1мМ EDTA, 0,1мМ бензамідину, 2Од/мл аденозин 22 діамінази, рН6,5), 32,4 нМ [3H]DPCPX (8циклопентил-1,3-дипропілксантин) (800.000розкл./хвил.) та 100мкМ NECA (5'-Nетилкарбоксамідоаденозин) для визначення неспецифічного зв'язування або досліджуваної сполуки в загальному об'ємі 100мкл протягом 30 хвилин при кімнатній температурі. Фільтрують через фільтри із скляних волокон Whatman GF/B (попередньо занурені в 0,5% поліетиленімін), промивають 4´1мл крижаного 50мМ Тріс (рН6,5) на 96лунковий Brandel Cell планшет. Визначення активності: в 96-лунковому планшеті в присутності HiSafe-3 коктейлю в бета-лічильнику (1450 Microbeta, Wallac). Інгібування [%]=100-((активність в присутності досліджуваної сполуки - неспецифічна активність)/(загальна активність - неспецифічна активність))·100. Результати Ми вважаємо сполуки біологічно активними, якщо вони інгібують зв'язування радіоліганда аденозинових А3 рецепторів людини з активністю вище 80% при 1мкМ в наших експериментальних умовах. Константа дисоціації (Kd) [125I]AB-MEC A на СНО-hА3 мембранному препараті визначається за дослідженнями ізотопного насичення за допомогою аналізу Scatchard [G. Scatchard, Ann. N. Υ. Acad. Sci. 51: 660, 1949]. ІС50 перетворюють в константу афінності (Ki), використовуючи рівняння Cheng-Prusoff [Υ. J. Cheng та W. Η. Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22: 3099, 1973]. Деякі сполуки загальної формули (І), (II), (III) і (IV) виявляють вражаючі біологічні ефекти. Сполуки загальної формули (ІА), визначені в п.2, як підгрупа загальної формули (І), визначеної в п.1, виявляють найбільш важливу активність. За винятком 9 сполук, чиї значення Ki не перевищують 20нМ. Сполуки, наведені в прикладах, є особливо переважними. їх значення Ki при дослідженні зв'язування аденозинових А3 рецепторів людини знаходяться в межах між 3,5 і 0,78нМ. Значення Ki найбільш переважних сполук складають 0,82 та 0,78нМ. Сполуки мають необхідну біодоступність і проявляють щонайменше 1,000-кратну селективність по відношенню до Α1, А2а та А2b підтипів рецепторі аденозину людини. Крім того, тривалість їхньої дії при внутрішньовенному та оральному уведенні є достатньо довгою, їх значення ED50 є низькими, їх токсикологічний профіль та вплив побічних ефектів є сприятливими. Дані, наведені вище, роблять сполуки загальної формули (І) придатними для терапевтичного використання. 23 79955 24 25 Комп’ютерна в ерстка Т. Чепелев а 79955 Підписне 26 Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601