Препарат “фруктофіт” для захисту плодів та ягід від збудників хвороб при зберіганні

Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Препарат для захисту плодів та ягід від збудників хвороб при зберіганні, що містить діючу речовину на основі Bacillus subtilis та наповнювач, який відрізняється тим, що як діючу речовину він містить біомасу бактерії Bacillus subtilis IMB В-7101, а як наповнювач – лактозу, за таким співвідношенням компонентів, мас. %:

спори та вегетативні клітини бактерії

Bacillus subtilis 1MB В-7101

90...95

лактоза

 5...10.

Текст

Препарат для захисту плодів та ягід від збудників хвороб при зберіганні, що містить діючу ре 3 Найбільш близьким технічним рішенням до проблеми, яка вирішується, пропонується спосіб, викладений у авторському свідоцтві СРСР "Штамм бактерий Bacillus subtilis для получения препарата против возбудителей гнилей яблок и винограда при хранении" [А.С. СССР №1706504, МКИ A01N63/00, C12N1/20 / А.М.Лапа, С.Р. Резник, С.В. Лапа, В.А. Фарафонов, И.Б. Сорокулова. Заявлено 30.01.90; Опубл. 23.01.92, Бюл. №3.], який вибрано за прототип. Суть способу прототипу полягає у тому, що пропонується препарат з діючою речовиною - штам бактерії Bacillus subtilis ВНИИСХМ 131. Штам виділений з природної еконіші - ґрунту, котрий проявляє антагоністичні властивості щодо фітопатогеннів. Штам Bacillus subtilis ВНИИСХМ 131 у сукупності з наповнювачами - сахарозою та желатином (у співвідношенні 4:1 до загального об'єму) являє собою препарат. Використання препарату (суспензія з титром 5-10млрд. спор) шляхом обробітку плодів дозволило досягнути зниження рівня ураження грон винограду (55,4%). Проте, відомий спосіб має такі недоліки: 1. Не досить широкий спектр культур, на яких показано антагоністичну активність (яблука та виноград). 2. Низька ефективність препарату по відношенню до винограду, якщо зважати на те, що ця культура характеризується високим рівнем уражуваності щодо фітопатогенних грибів, що є основною причиною того, що препарат не використовується на практиці. 3. Желатин, який пропонується у якості наповнювача, у воді утворює нерозчинні структури, що не технологічно внаслідок чого використання препарату обмежене. В основу корисної моделі поставлено завдання отримати суху форму препарату на основі високоактивного штаму природного гіперпаразиту основних збудників домінуючих популяцій фітопатогенних грибів, які уражують плоди та ягоди при зберіганні, що не поступаються або перевищують за ефективністю існуючим препаратам цього класу. Поставлене завдання досягається тим, що препарат „Фруктофіт” для захисту плодів та ягід від збудників хвороб при зберіганні, що містить діючу речовину на основі Bacillus subtilis та наповнювач, згідно корисної моделі, що в якості діючої речовини, він містить біомасу бактерії Bacillus subtilis ІMB В-7101 та наповнювач - лактозу за таким співвідношенням компонентів, в мас. %: спори та вегетативні клітини бактерії Bacillus subtilis ІMB В-7101 90...95; лактоза 5...10. У запропонованому способі використовується, встановлена нами, здатність природного штаму аеробної спороутворюючої бактерії Bacillus subtilis Bergie. активно пригнічувати ріст, розвиток та поширення, а отже шкідливість популяцій фітопатогенних грибів. Крім того, запропоновані оптимальні складові частини препарату „Фруктофіт”, до складу якого крім штаму бактерії Bacillus subtilis входить наповнювач - лактоза 5...10%. Додавання лактози дозволяє стабілізувати технологічні властивості препарату, покращити кон 15471 4 такт препарату та змочуваність поверхні плодів, що обробляються. Таким чином, запропонований препарат „Фруктофіт” містить таке співвідношення інгредієнтів, мас. %: спори та вегетативні клітини бактерії Bacillus subtilis ІMB В-7101 90...95; лактоза 5...10. Порівняльний аналіз суті технічного рішення, що пропонується, відрізняється від відомого тим, що у склад запропонованого препарату додають оригінальні компоненти, використання яких у сукупності дозволяє отримати значний позитивний результат та розширює спектр культур, на яких застосовується препарат „Фруктофіт” - зерняткові, ягідники, виноград. Не використовується такий дефіцитний живильний компонент, як молоко та желатин. Сукупність перерахованих суттєвих ознак способу, що пропонується, дозволяє отримати суху форму біологічного препарату „Фруктофіт” - екологічно безпечного, зручного та ефективного для захисту плодів та ягід від комплексу збудників хвороб при зберіганні. Приклади здійснення способу: Приклад 1 Препарат „Фруктофіт” для захисту плодів та ягід від збудників хвороб при зберіганні, який містить в якості основного інгредієнта активний штам бактерії Bacillus subtilis ІMB В-7101 з наповнювачем: лактоза в кількості 5...10 мас. %. Для препарату властива комплексна антимікробна та антифунгальна дія по відношенню до комплексу збудників хвороб, які уражують плоди та ягоди під час зберігання. Штам Bacillus subtilis депоновано в Депозитарії Інституту мікробіології і вірусології НАН України під реєстраційним номером ІMB В-7101. В процесі експериментального обґрунтування придатності препарату „Фруктофіт” для захисту плодів та ягід від збудників хвороб, було проведено дослідження щодо вивченняморфологокультувальних особливостей штаму Bacillus subtilis ІMB В-710. Встановлено, що штам Bacillus subtilis ІMB В-710 - це грампозитивні аеробні спороутворюючі палички, які продукують каталазу. На МПА, сусло-агарі, середовищі Громико, картопляному агарі відмічено значний ріст. На МПА утворює складчасті колонії в'язкої консистенції, бежевого кольору, краї неправильної форми. В мазках з колоній, які виросли на МПА через 18 годин можна побачити прямі паличкоподібні клітини 1,9х2,1мкм, які розташовані поодиноко, зрідка ланцюгом. Культура не росте в анаеробних умовах. При культивуванні штаму Bacillus subtilis ІMB В-7101 на агаризованому картопляному агарі утворюються колонії світло-бежевого кольору, блискучі, в'язкої консистенції, краї рівні. На середовищі Громико - колонії світло-сірого кольору, складчасті, з підвищеним центром, краї зрізані, консистенція в’язка. На м'ясо-пептонному бульйоні культура утворює плівку. Ферментує глюкозу, арабінозу, манніт, ксилозу з утворенням кислоти, дає позитивну реакцію Фогес-Проскауера, гідролізує крохмаль, же 5 латину, росте на поживному середовищі з вмістом 7% NaCI, утилізує цитрат. До унікальних особливостей штаму слід віднести його властивість проявляти антагоністичні властивості відносно фітопатогенних грибів при низькій температурі культивування (+4°С). Приклад 2 Технологічний процес виготовлення зразків препарату „Фруктофіт” складається з наступних етапів: Допоміжна робота: - підготовка посуду (миття, стерилізація); - підготовка розчину для технології (0,85% хлориду натрію, наповнювача); - стерилізація посуду і матеріалів; - приготування поживних середовищ (агаризоване сусло, м'ясо-пептонний агар, середовище Громико, середовище Гаузе) і дезинфікуючих розчинів (перекис водню в суміші з миючими засобами, хлорамін 4% розчин з активатором - 10% розчином нашатирного спирту, 70% етиловий спирт); - стерилізація поживних середовищ - підготовка приміщень для асептичних робіт. Підготовка штаму бактерії: - розчинення ампули ліофілізованої культури Bacillus subtilis у 1мл 0,85% NaCI; - посів мікроба на поживне середовище Громико в пробірки зі скошеним агаром; - пересів на середовище Громико в чашки Петрі через 18-22год, Т +37°С; - відбір типових колоній через 18-20год; - фарбування за Грамом; - відсівання культури на поживне середовище в пробірки зі скошеним агаром на 18-22год, Т +37°С. Приготування маточної суміші мікроба: - змив мікроба з пробірок зі скошеним агаризованим поживним середовищем і визначення концентрації (титру); - розведення змиву мікроба 0,85% NaCI до 13млрд/мл. Отримання біомаси: - засівання мікробіологічних матраців "маточною" сумішшю мікроба; - розміщення матраців в термальну кімнату (Т 37°С на 7-10 діб для вирощування спор); - контроль на мікробну чистоту; - змивання бактеріальної маси. Приготування препарату: - визначення концентрації (титру) мікроба в 1мл біомаси; - розчинення біомаси у фізіологічнрму розчині; - додавання наповнювача; - розливання біомаси в лабораторний посуд; - ліофілізація препарату; - ліофільне сушіння; - закупорювання посуду з препаратом. Контроль виготовленого препарату здійснюють за: - зовнішнім виглядом, кольором і запахом; - бактеріальною чистотою; - безпечністю для теплокровних; - специфічною активністю. Технологічний процес способу виготовлення препарату завершується його фасуванням. 15471 6 Досліджено, що штам Bacillus subtilis ІMB В7101, а також препарат „Фруктофіт” не патогенний для теплокровних тварин - мишей (таблиця 1). Приклад 3 Захист плодів та ягід від домінуючих та супутніх збудників хвороб здійснюється завдяки використанню запропонованого препарату „Фруктофіт”, до складу якого входить штам Bacillus subtilis ІMB В-7101 з властивими йому унікальними антагоністичними властивостями. Антагоністична активність дослідних серій препарату на основі штаму Bacillus subtilis ІMB В7101 показано в таблиці 2. Встановлено досить широкий спектр антагоністичної властивостей препарату по відношенню до домінуючих збудників хвороб. Фактично, препарат проявляв високий рівень антагоністичної активності по відношенню до усіх чотирьох домінуючих збудників фітопатогенних хвороб. Приклад 4 Для встановлення дієвості та величини позитивного результату препарат використовували перед закладанням плодів та ягід на зберігання у сховище (Т +2-8°С, відносна вологість 85-95%, при природному інфекційному фоні). Для цього готували робочу суспензію препарату „Фруктофіт” з концентрацією 5х106 та 1х107 спор та вегетативних клітин у 1мл з нормою витрати! л робочої суспензії препарату на 100кг продукції. Отриманий позитивний результат порівнювали зі способомпрототипом. Встановлено, що внаслідок використання запропонованого способу спостерігалось стримування розвитку плодових гнилей протягом усього терміну зберігання. Захист плодів за способом-прототипом був ефективний лише в термін, що не перевищував 2-3 місяці з наступним характерним осередковим росту та поширення збудників грибної інфекції. Таким чином, в рамках оптимального вмісту інгредієнтів у препараті „Фруктофіт” (5млр.кл./мл) підсумковий позитивний результат проявлявся у високій ефективності способу, його технологічності та безпечності. Спостерігалось значне перевищення способу над прототипом. Лише наприкінці терміну зберігання (березень-квітень) спостерігались поодинокі осередкові прояви незначного ураження плодів. Приклад 5 Сховище господарства радгоспа АФ "Бєлозерський", Херсонської області. Проведено обробіток грон винограду препаратом „Фруктофіт” на основі штаму Bacillus subtilis ІMB В-7101 з титром 1 та 5млрд. спор в 1г сухого ліофільно висушеного препарату. Встановлений високий рівень біологічної ефективності захисту винограду внаслідок використання запропонованого способу у порівнянні з прототипом. Характерно, що продукція зберігалась впродовж усього терміну зберігання без виражених ознак пошкодження збудниками хвороб. У прототипі після місячного терміну зберігання майже половина продукції була осередкове та суцільно уражена збудником сірої гнилі. 7 15471 Таким чином, в оптимальних межах запропонованого способу, зберігається гарантований захист винограду від збудників хвороб (Табл.3). Приклад 6 Дослідне господарство "Новосілки" Київської області, сховище плодів та ягід. Експериментальне обґрунтовували визначальні параметри та величину позитивного результату внаслідок використання запропонованого способу захисту ягід суниці сорту "Зенга Зенгана" шляхом використання препарату „Фруктофіт” на основі штаму Bacillus subtilis ІMB В-7101 з титром 1 та 5млрд. спор в 1г сухого ліофільне висушеного препарату. Норма витрати: 1г препарату на 1кг ягід суниці. 8 Встановлено, що і як у попередніх прикладах спостерігається високий рівень ефективності та універсальність дії препарату щодо збудників хвороб. Гарантований захист ягід тривав 15 діб, в той час як захист ягід суниці з використанням способупрототипу на 10 день спостерігались виражені осередки ураження ягід збудниками хвороб, котрі інтенсивно наростали. Таким чином, запропонований для захисту ягід від збудників хвороб при зберіганні препарат „Фруктофіт” проявив високий ступінь захисту та збереження врожаю з одночасним високим рівнем технологічності та безпечності його використання. Таблиця 1 Експертна оцінка безпечності препарату „Фруктофіт” на мишах Курс ведення Доза, КУО/мл* 1 1,0х109 1 5 5 2,0х109 1,0х109 2,0х1010 1 1,0х109 1 5 5 2,0х109 1,0х109 2,0х1010 1 1,0мл 1 5 5 2,0мл 1,0мл 2,0мл Контроль 1,0мл Кількість тварин в доЗахворіло Загинуло Вижило Безпечність сліді Результати дослідження вірулентності культури Внутрішньо чере10 0 0 10 Безпечний вне "-" 10 0 0 10 "-" Пероральне 10 0 0 10 "-" "-" 10 0 0 10 "-" Результати дослідження токсичності культури Внутрішньо чере10 0 0 10 "-" вне "-" 10 0 0 10 "-" Пероральне 10 0 0 10 "-" "-" 10 0 0 10 "-" Результати дослідження токсигенності культури Внутрішньо чере10 0 0 10 "-" вне "-" 10 0 0 10 "-" Пероральне 10 0 0 10 "-" "-" 10 0 0 10 "-" Внутрішньо чере10 0 0 10 "-" вне Шлях введення * КУО - колонієутворюючих організмів Таблиця 2 Експертна оцінка антагоністичної активності препарату „Фруктофіт” щодо фітопатогенних грибів Способи, що порівнюються Спосіб, що пропонується Прототип Контроль Антагоністична активність препарату щодо фітопатогенних грибів (зони затримки росту культур), мм Manilla fructigena Rfiizopus nigricans Penicillium claviforme Penicillium expansiim 21 19 20 19 11 0 9 0 7 0 5 0 9 15471 10 Таблиця 3 Експертна оцінка антагоністичної активності препарату „Фруктофіт” щодо гнилі винограду при зберіганні (Радгосп "Бєлозерський", Херсонська обл.) Способи, що оцінюються Спосіб, що пропонується Прототип Контроль НІРо5 Розвиток хвороб, % Комплекс збудників хвороб Біологічна активність, % 9,3 87,4 12,7 15,7 2,2 51,7 Комп’ютерна верстка А. Рябко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Preparation "fructophyt" to protect fruit and berries against disease pathogens while storing

Автори англійською

Lapa Svitlana Volodymyrivna, Lapa Oleksandr Mykhailovych, Drozda Valentyn Fedorovych

Назва патенту російською

Препарат "фруктофит" для защиты плодов и ягод от возбудителей болезней при хранении

Автори російською

Лапа Светлана Владимировна, Лапа Александр Михайлович, Дрозда Валентин Федорович

МПК / Мітки

МПК: A01P 15/00

Мітки: препарат, збудникiв, плодів, захисту, фруктофіт, хвороб, зберіганні, ягід

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/5-15471-preparat-fruktofit-dlya-zakhistu-plodiv-ta-yagid-vid-zbudnikiv-khvorob-pri-zberiganni.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Препарат “фруктофіт” для захисту плодів та ягід від збудників хвороб при зберіганні</a>

Подібні патенти