Синтетичні полісахариди, спосіб їх виготовлення та фармацевтичні композиції, які їх містять

1 Синтетичний полісахарид, що включає домен, який зв'язує антитромбін III, утворений ПОСЛІДОВНІСТЮ з п'яти моносахаридів, що містять у цілому дві карбоксильні функції, принаймні чотири сульфогрупи, причому цей домен своїм невідновлюваним кінцем безпосередньо з'єднаний із доменом зв'язування з тромбіном, що включає ПОСЛІДОВНІСТЬ ІЗ 10-25 моносахарид них залишків, які вибираються серед гексоз, пентоз або дезоксисахарів, гідроксильні групи яких, незалежно одна від одної, перетворені в етерні групи за допомогою (Сі-Сє)-алкільноі групи або етерифіковані до етерних сульфогруп, а також його солі, зокрема, фармацевтично прийнятні солі означає полісахарид Ро, що містить п однакових або різних моносахаридних залишків, зв'язаний своїм аномерним вуглецем із Ре, являє собою схематичне зображення моносахаридного залишку з піранозною структурою, що вибирається серед гексоз, пентоз і ВІДПОВІДНИХ дезоксисахарів, причому цей залишок зв'язаний своїм аномерним вуглецем з іншим моносахаридним залишком і гідроксильні групи цього залишку заміщені однаковими або різними групами X, що вибираються, серед (Сі-Сє)-алкільних груп і сульфогруп, - п означає ціле число від 10 до 25, - Ре означає пентасахарид структури 2 Полісахарид за п 1, формули (І) В ЯКІЙ - хвиляста ЛІНІЯ означає зв'язок, розміщений або вище, або нижче площини піранозного циклу, О (О в якому - Ri означає (Сі-Сє)-алкільну групу або сульфогрупу, - R-ia має зазначене для Ri значення, або з атомом кисню, із яким він зв'язаний, і з атомом вуглецю, що містить карбоксильну функцію в тому самому циклі, утворить групу С-СН2-О, - R означає (Сі-Сє)-алкільну групу, - W означає атом кисню або метиленову групу, або одна з його солей, зокрема, фармацевтично прийнятна сіль З 61921 3 Сіль полісахариду за п 2, у якій катіон вибирають серед катіонів лужних металів, зокрема, серед натрію і калію 4 Полісахарид і сіль за будь-яким з пп 2 або З формули (І А) означає особливе сімейство полісахаридів Ро, зв'язаних своїм аномерним вуглецем із Ре, таким, як зазначено у формулі (І), має зазначене для формули (І) значення, - ОХ мають зазначене для формули (І) значення і, у випадку того самого моносахариду, можуть бути однаковими або різними, - моносахариди, що містяться в [ ] т , утворять повторюваний m разів дисахарид, моносахариди, що містяться в [ ]t, утворять повторюваний t разів дисахарид, - m змінюється від 1 до 8, t змінюється від 0 до 5 і р змінюється від 0 до 1, за умови, що 5 < m + t < 12, і його солі, зокрема, фармацевтично прийнятні солі 5 Полісахарид і сіль за будь-яким з пп 2 або З формули (II А) має зазначене для формули (І) значення, - ОХ мають зазначене для формули (І) значення і, у випадку того самого моносахариду, можуть бути однаковими або різними, - моносахарид, що міститься в [ ] т повторюється гтї разів, моносахарид, що міститься в [ ]t, повторюється Ґ разів, моносахарид, що міститься в [ ] р , повторюється р' разів, - гтї змінюється від 1 до 5, Ґ змінюється від 0 до 24 і р' змінюється від 0 до 24, за умови, що 10 < m' + t' + p' 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо-р -Оглюкопіранозил)(1 -» 4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил)(1 _> 4)] 6 -О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-О-(2,3-ди-О-метил- р -Dглюкопіранозилуронова кислота)(1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-О-(2,3-ди-О-метил- a -Lідопіранозилуронова кислота)(1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(2,3-ди-О-метил-4,6-ди-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-[О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 -»4)]іі-О-(2,3-ди-О-метил-р-0глюкопіранозилуронова кислота) (1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-О-(2,3-ди-О-метил- a -Lідопіранозилуронова кислота)(1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(2,3-ди-О-метил-4,6-ди-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 -> 4)-[О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)]із-О-(2,3-ди-О-метил- р -Dглюкопіранозилуронова кислота) (1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)-О-(2,3-ди-О-метил- a -Lідопіранозилуронова кислота)(1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(2,3-ди-О-метил-4,6-ди-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)-[О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил) (1 _> 4)]і5-(2,3-ди-О-метил- р -Оглюкопіранозилуронова кислота) (1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)-О-(2,3-ди-О-метил- a -Lідопіранозилуронова кислота)(1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 -> 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил) (1 _^ 4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил) (1 _^ 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил) (1 _» 4)] 2 -[О-(2,3,6-три-О-метил- a -Dглюкопіранозил) (1 _^ 4)-О-(2,3,6-три-О-метил- р -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)] 2 -О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 _» 4)-О-(2,3-ди-О-метил- р -Dглюкопіранозилуронова кислота)(1 _^ 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 -^ 4)-(2,3-ди-О-метил- а -L-ідопіранозилуронова кислота) (1 -^ 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)] 2 -[О-(2,3,6-три-О-метил- a -Dглюкопіранозил)(1 _» 4)-О-(2,3,6-три-О-метил- р -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)] 3 -О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)-О-(2,3-ди-О-метил- р -Dглюкопіранозилуронова кислота)(1 _^ 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил)(1 -^ 4)-(2,3-ди-О-метил- а -L-ідопіранозилуронова кислота) (1 -^ 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил, (1 _^ 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил) (1 _» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 _^ 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил)(1 _^ 4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- a -Dглюкопіранозил) (1 -^ 4)-О-(2,3,6-три-О-метил- р -D-глюкопіранозил) (1 _^ 4)] 4 -О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 _^ 4)-О-(2,3-ди-О-метил- р -Dглюкопіранозилуронова кислота) (1 _» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 -^ 4)-(2,3-ди-О-метил- а -L-ідопіранозилуронова кислота) 61921 (1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо-а -Dгликопіранозил) (1 -» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 -» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- a -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)-О-(2,3,6-три-О-метил- р -D-глюкопіранозил) (1 _> 4)] 3 -О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфоглюкопіранозил) (1 -» 4)-О-(2,3-ди-О-метил- р -D a -D глюкопіранозилуронова кислота) (1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)-(2,3-ди-О-метил- а -L-ідопіранозилуронова кислота) (1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил) (1 -» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил) (1 -» 4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- a -Dглюкопіранозил) (1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-метил- р -Dглюкопіранозил)(1 -» 4)] 4 -О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфоглюкопіранозил) (1 -» 4)-О-(2,3-ди-О-метил- р -D люваному КІНЦІ захищеним попередником сульфатованого полісахариду Ро, потім, на другій стадії, вводять і/або видаляють негативно заряджені групи 11 Сполука формули (II 1) ЛІН) в якій Ті і Тп, однакові або різні, означають тимчасовий, напівпостійний або постійний замісник, Z означає захисну групу гідроксильної функції 12 Сполука формули (III 1) a -D глюкопіранозилуронова кислота) (1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил)(1 -> 4)-(2,3-ди-О-метил- а -L-ідопіранозилуронова кислота) (1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі, метил О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо-а -Dглюкопіранозил) (1 -» 4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- р -Dглюкопіранозил) (1 -» 4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- a -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)-О-(2,3,6-три-О-метил- р -О-глюкопіранозил) (1 _> 4)] 5 -О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфоглюкопіранозил) (1 -» 4)-О-(2,3-ди-О-метил- р -Оглюкопіранозилуронова кислота) 8 (1 -» 4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- a -Dглюкопіранозил) (1 -> 4)-(2,3-ди-О-метил- а -L-ідопіранозилуронова кислота) (1 -> 4)-2,3,6-три-О-сульфо-а -D-глюкопіранозид у виді натрієвої солі 10 Спосіб одержання сполук формули (І), який полягає в тому, що на першій стадії синтезують цілком захищений попередник цільового полісахариду формули (І) , що містить захищений попередник домена Ре, подовжений на своєму невіднов a -D Цей винахід стосується нових синтетичних полісахаридів, що мають антикоагулянтну і антитромботичну фармакологічні активності гепарину ,(N11) в якій Ті і Тп, однакові або різні, означають тимчасовий, напівпостійний або постійний замісник, Z означає захисну групу гідроксильної функції 13 Фармацевтична композиція, що містить як активну речовину полісахарид або сіль за будь-яким з пп 1-9, у виді солі з фармацевтично прийнятною основою або в кислотній формі, у сполученні або в суміші з інертним, нетоксичним, фармацевтично прийнятним екціпієнтом 14 Фармацевтична композиція за п 13, у виді разових доз, в якій активна речовина змішана принаймні з одним фармацевтичним екціпієнтом 15 Композиція за п 14, в якій кожна разова доза містить 0,1-100 мг активної речовини 16 Композиція за п 15, в якій кожна разова доза містить 0,5-50 мг активної речовини 17 Полісахарид або солі за пп 1-9 для одержання лікарського засобу, придатного на випадок паталопй, залежних від дисфункції коагуляції Гепарин відноситься до сімейства глікозамшогліканів (GAGs), які є природними гетерогенними сульфатованими полісахаридами 61921 Гепаринові препарати являють собою суміші ланцюгів, що включають число моносахаридних залишків від 10 до 100 і більше До цієї гетерогенності розміру додається гетерогенність структури на рівні природи конститутивних моносахаридів, а також на рівні замісників, які в них є (L Roden "Бюхимія глікопротешів і глікозамшогліканів", вид Lennarz W J , Plenum Press, Нью-Йорк і Лондон, 267-371, 1980) Кожне сімейство природних GAGs звичайно має спектр фармакологічних активностей Всі вони знаходяться в препаратах, які можна одержати з природних продуктів Так, наприклад, сульфатовані гепарини і гепарани мають антитромботичну активність, яка зв'язана з одночасною дією на декілька факторів коагуляції Гепарин каталізує, особливо через антитромбін III (AT III), інгібування двох ферментів, які приймають участь в каскаді коагуляції крові, а саме фактора Ха і фактора Па (або тромбіну) Гепаринові препарати з низькою молекулярною масою (НВРМ) містять ланцюги з 4-30 моносахаридів і мають властивість більш селективно діяти на фактор Ха, ніж на тромбін Деякі синтетичні олігосахариди, зокрема, ті які описані в европейскому патенті 84999, мають властивість селективно інгібувати, через антитромбін III, фактор Ха без будь-якої дії на тромбін Відомо, ЩО інгібування фактора Ха потребує фіксації гепарину на AT III через домен зв'язування з антитромбіном (DLA) і що інгібування фактора Па (тромбіну) викликає необхідність фіксації на AT III через DLA, а також на тромбіні через менш визначений домен зв'язування (DLT) Синтетичні олігосахариди, що відповідають домену DLA гепарину, ВІДОМІ І проявляють антитромботичну активність при венозному тромбозі Ці сполуки описуються в європейських патентах 529715 і 621282 і в патенті Канади 2 040 905 Ефективність цих олігосахаридів у відношенні попередження артеріального тромбозу однак обмежена їх нездатністю інгібувати тромбін Синтез глікозамшогліканів гепаринового типу, здатних інгібувати тромбін через активатор АТІІІ, зв'язаний з великими труднощами і, фактично, він ніколи не був здійснений З метою виявлення активності продуктів, які є інгібіторами тромбіну і фактора Ха, було запропоновано зв'язувати два олігосахариди невеликого разміру (DLA і DLT) за допомогою залишку ("спейсера"), що не бере участі в біологічній активності В даний час знайдено, що нові полісахаридні ПОХІДНІ можуть бути синтезовані відносно простим чином і при цьому вони є біологічно активними Зокрема, вони мають антикоагулянтні і антитромботичні властивості Більш того, в зв'язку з одержанням синтетичним шляхом цих полісахаридів, можна селективно модифікувати їх структуру і, особливо, видаляти небажані сульфатні замісники, що приймають участь у взаємодії з деякими протеїнами Таким чином, можна одержувати полісахариди, які є ефективними антитромботичними і антикоагулянтними агентами і, крім того, можуть m vivo не піддаватися дії протеїнів, таких, яктромбоцитарний фактор 4 (FP4), які нейтралізують дію гепарину, зокрема, на тромбін 10 Таким чином, раптово знайдено, що сульфатовані і алкильовані полісахариди можуть бути ефективними антитромботичними агентами і антикоагулянтами в залежності від положення алкильних груп і сульфатних груп, що є в гліцидному скелеті Таким чином, знайдено, що з допомогою синтезу полісахаридних послідовностей можна з точністю модулюватиь активність типу GAGs і одержати дуже активні продукти, що мають властивості гепарину Таким чином, згідно з одним з його аспектів, цей винахід стосується нового синтетичного полісахариду, що включає домен зв'язування з антитромбіном Ш, який утворений ПОСЛІДОВНІСТЮ з п'яти моносахаридів, що містять в цілому дві карбоксильні функції і принаймні чотири сульфатні групи, причому цей домен своїм невідновлюючим кінцем безпосередньо зв'язаний з доменом зв'язування з тромбіном, що включає ПОСЛІДОВНІСТЬ з 1025 моносахаридних залишків, які обираються з гексоз, пентоз і дезоксисахарів, всі гідроксильні групи яких, незалежно одна від другої, перетворені в прості ефірні групи з допомогою (Сі-Сє)-алкільноі групи або етерифіковані до скпадноефірних груп в сульфатній формі, а також до його солей, зокрема, фармацевтично прийнятних солей Переважно, винахід стосується полісахариду, вказаному вище, який відрізняється тим, що всі його гідроксильні групи метильовані або етерифіковані до складноефірних груп в сульфатній формі, і його солей, зокрема, до фармацевтично прийнятних солей Продуктами цього винаходу є, зокрема, полісахариди, представлені наступною формулою (І) (0 В ЯКІЙ хвиляста ЛІНІЯ показує зв'язок, що розміщений або вище або нижче площини піранозного циклу, означає полісахарид Ро, що містить п однакових або різних моносахаридних залишків, зв'язаний своїм аномерним вуглецем з Ре, Q являє собою схематичне зображення моносахаридного залишку з піранозною структурою, що обирається серед гексоз, пентоз і ВІДПОВІДНИХ дезоксисахарів, причому цей залишок зв'язаний своїм аномерним вуглецем з іншим моносахаридним залишком і гідроксильні групи цього залишку заміщені однаковими або різними групами X, що оби 61921 12 11 раються серед (Сі-Сє)-алкильних груп і сульфогПолісахаридна частина Ро може бути утворена 10-25 алкільованими і моно- або дисульфатоРУП, ваними моносахаридними залишками п означає ціле число від 10 до 25, Ре означає пентасахарид структури Полісахаридна частина Ро може бути утворена 10-25 алкільованими, незаміщеними і/або частково заміщеними і/або повністю заміщеними моносахаридними залишками Заміщені або незаміщені залишки можуть розміщатися вздовж всього ланцюга або, навпаки, вони можуть бути згруповані в заміщених або незаміщених сахаридних доменах означає (Сі-Сє)-алкильну групу або сульфоЗв'язки можуть бути типу 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, і групу, типу а або р R-ia має вказане для Ri значення або з атомом В цьому описі подається позначення конфоркисню, з яким він зв'язаний, і атомом вуглецю, що мацією містить карбоксильну функцію, в одному і тому ж 1 С4 для L-ідуроновоі кислоти, 1С4 для Dциклі утворює групу С-СН2-О, глюкуронової кислоти, однак, слід ВІДМІТИТИ, ЩО R означає (Сі-Сє)-алкильну групу, звичайно конформація в розчині моносахаридних W означає атом кисню або метиленову групу, залишків являється змінною або одна з їх солей, зокрема, фармацевтично Так, L-ідуронова кислота може мати конфорпридатна сіль мацію 1С4 2So або 4 Сі Слід ВІДМІТИТИ, ЩО В цьому описі хвиляста ЛІКращими за винаходом сполуками є сполуки НІЯ позначає звичайно зв'язок, розміщений або формули (І А) нижче, або вище площини піранозного циклу Моносахариди, що містяться в Ро, можуть бу,ОХ -OX ти однаковими або різними одні по відношенню до інших, МІЖГЛІКОЗИДНІ зв'язки можуть бути типу а |OX) (QXh, або р Ці моносахариди краще обирають серед Dабо L-гексоз, як алоза, альтроза, глюкоза, маноза, (І А) галоза, ідоза, галактоза, талоза (в цьому віпадку h=2), або серед D-або L-пентоз, як рибоза, арабіноза, ксилоза, ліксоза (в цьому випадку п=2) Можуть бути також використані ІНШІ моносахариди, такі як, наприклад, дезоксицукри (п=1 і/або СН2ОХ=СН3) Коли в пентасахаридах Ре залишок W означає атом кисню і R-ia має вказане для R значення, ці Jm означає особливе сімейство полісахаридів Ро, пентасахариди є відомими сполуками, що описані, зокрема, в європейських патентах 300099, 529715, що зв'язані своїм аномерним вуглецем з Ре, вка621282 і 649854, а також в літературі їх одержують заним в формулі (І), із синтонів, також описаних в літературі (за С Van ох Boeckel, M Petitou, Angew Chem Int Ed Engi , 32 1671-1690(1993)) оКоли в пентасахаридах Ре, R-ia має інше від R значення і/або W є атомом вуглецю, ці пентасахамає вказане для формули (І) значення, риди одержують за допомогою нових синтонів, які ОХ мають вказане для формули (І) значення і, становлять подальший аспект винаходу у випадку одного і того ж моносахариду, можуть Коли в пентасахаридах Ре залишок типу Lбути однаковими або різними, ідуронової кислоти замінений залишком, конформоносахариди, що містяться в [ ] т , утворюють мація якого блокована містком, ці пентасахариди дисахарид, що повторюється m разів, одержують за допомогою нових синтонів, які скламоносахариди, що містяться в [ ]t, утворюють дають подальший аспект винаходу дисахарид, що повторюється t разів, Таким чином, за другим з його аспектів, даний m змінюється від 1 до 8, t змінюється від 0 до 5 винахід стосується нових проміжних продуктів, що і р змінюється від 0 до 1, при умові, що 5