Арил-заміщені піразоли, триазоли і тетразоли як блокатори натрієвого каналу, фармацевтична композиція на їх основі та спосіб лікування захворювань, пов’язаних з блокуванням натрієвих каналів

1. Сполука формули І: R5 R7 Het 2 (19) 1 3 75883 4 Het являє собою гетероарил, вибраний з групи, R7 Het яка складається з R1 N R1 N N N X R8 N R6 R2 , R2 R3 (i) у якій (ii) , , X являє собою O або S; R1 N R1 N Het являє собою гетероарил, вибраний з групи, N N яка складається з N R1 N N N R1 N N N R3 (iii) (iv) , , N де R2 R2 R1 являє собою C(O)R10, де R10 являє собою аміR3 (i) (ii) , , но, N-морфолініл, N-піролідиніл або N-піперазиніл, R1 N R1 усі з яких можуть бути необов'язково заміщеними; N N R2 та R3 незалежно являють собою водень, C1N N C6алкіл, C1-C6алкілтіо або N N C1-C6алкілсульфініл; R3 (iii) (iv) R5, R6, R7 та R8 незалежно вибрані з групи, яка , , складається з водню, гало, гало(C1-C6)алкілу, C1де C6алкілу, гідроксі(C1-C6)алкілу, аміно(C1-C6)алкілу, R1 являє собою C(O)R10, CH2C(O)R10 або SO2R10; карбоксі(C1-C6)алкілу, алкоксі(C1-C6)алкілу, нітро, R10 являє собою аміно, необов'язково заміщений аміно, C1-C6ациламіно, аміду, гідрокси, тіолу, C1C1-C6алкіл або гетероцикл, вибраний з групи, яка C6ацилокси, C1-C6алкокси, карбокси, карбоніламіскладається з N-морфолінілу, N-піролідинілу та Nдо та C1-C6алкілтіолу, піперазинілу; або її фармацевтично прийнятна сіль, проліки або R2 та R3 незалежно являють собою водень, C1сольват. C6алкіл, C1-C6алкілтіо або 11. Сполука за п. 10, яка відрізняється тим, що Х C1-C6алкілсульфініл, являє собою О. R5 та R6 незалежно вибрані з групи, яка склада12. Фармацевтична композиція, яка містить сполується з водню, галогену, галогеналкілу, алкілу, ку за будь-яким з пп. 1-11 та фармацевтично приалкенілу, алкінілу, гідроксіалкілу, аміноалкілу, карйнятний носій або розріджувач. боксіалкілу, алкоксіалкілу, нітро, аміно, уреїдо, 13. Спосіб лікування захворювань, пов’язаних з ціано, ациламіно, аміду, гідрокси, тіолу, ацилокси, блокуванням натрієвих каналів у ссавців, які страазидо, алкокси, карбокси, карбоніламідо та алкілждають від цих захворювань, який включає вветіолу; дення ссавцеві, який потребує такого лікування, R7 та R8 незалежно вибрані з групи, яка складаефективної кількості сполуки за будь-яким з пп. 1ється з водню, галогену, галоген(C1-C6)алкілу, C111. C6алкілу, гідроксі(C1-C6)алкілу, аміно(C1-C6)алкілу, 14. Спосіб лікування, профілактики або послабкарбоксі(С1-C6)алкілу, алкоксі(C1-C6)алкілу, нітро, лення нейрональних втрат внаслідок глобальної аміно, C1-C6ациламіно, аміду, гідрокси, тіолу, C1та фокальної ішемії; лікування, профілактики або C6ацилокси, C1-C6алкокси, карбокси, карбоніламіпослаблення нейродегенеративних станів; лікудо та C1-C6алкілтіолу, і вання, профілактики або послаблення болю або за умови, що якщо Het являє собою (ii), і X являє шуму у вухах; лікування, профілактики або посласобою O, то R10 не являє собою блення маніакальної депресії; забезпечення місC1-C6алкіл; цевої анестезії; або лікування аритмії, або лікуабо її фармацевтично прийнятна сіль, проліки або вання від конвульсій, що передбачає введення сольват. ссавцеві, який потребує такого лікування, ефекти8. Сполука за п. 7, яка відрізняється тим, що R5 вної кількості сполуки за будь-яким з пп. 1-11. та R6 обидва являють собою водень. 15. Спосіб за п. 14, який відрізняється тим, що це 9. Сполука Формули І: є спосіб лікування, профілактики або послаблення R5 R7 болю, включаючи невропатичний, хірургічний або Het хронічний біль. 16. Спосіб послаблення або профілактики судом у тварин, який включає введення ссавцеві, який поX R8 требує такого лікування, ефективної кількості споR6 , луки за будь-яким з пп. 1-11. у якій R5 X являє собою O або S, 5 Цей винахід належить до галузі медичної хімії. Зокрема, винахід стосується нових арилзаміщених піразолів, триазолів і тетразолів та виявлення того, що ці сполуки є антиконвульсантами + і діють як блокатори натрієвих (Na ) каналів. Було виявлено, що кілька класів терапевтично корисних ліків, включаючи місцеві анестетики, такі як лідокаїн та бупівакаїн; протиаритмічні засоби, такі як пропафенон та аміокларон; та антиконвульсанти, такі як ламотригін, фенітоїн та карбамазепін, виявляють подібний механізм дії, а саме шляхом блокування або модулювання активності Na+ каналів [Catterall, W.A., Trends Pharmacol. Sci. 8:57-65 (1987)]. Вважається, що дія кожного з цих агентів полягає у перешкоджанні швидкому припливу іонів Na+. Останнім часом було виявлено нейропротективну дію на тваринних моделях при глобальній та фокальній ішемії інших блокаторів Na+ каналів, таких як BW619C89 та ліфаризин, які на даний час проходять клінічні випробування [Graham et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 269:854-859 (1994); Brown et al., British J. Pharmacol. 775:1425-1432 (1995)]. Нейропротективна дія блокаторів Na+ каналів зумовлюється їхньою ефективністю у зниженні концентрації позаклітинного глутамату під час ішемії через інгібування вивільнення цього екситотоксичного амінокислотного нейротрансмітера. Дослідження показали, що на відміну від антагоністів глутаматних рецепторів, блокатори Na+ каналів запобігають гіпоксичному ушкодженню білої речовини ссавців [Stys et al., J. Neurosci. 72:430439 (1992)]. Таким чином, вони можуть забезпечити переваги у лікуванні певних типів нападів або нейронних травм, при яких є помітними ушкодження трактів білої речовини. Іншим прикладом клінічного застосування блокатора Na+ каналу є рилузол. Було виявлено, що цей медикамент забезпечує подовження життя у підгрупі пацієнтів з БАС [Bensimm et al., New Engl. J. Med. 530:585-591 (1994)], і згодом його було затверджено Управлінням з контролю за продуктами та ліками для лікування БАС. Крім вищезгаданого клінічного застосування, карбамазепін, лідокаїн та фенітоїн іноді застосовують для лікування невропатичного болю, наприклад, при тригемінальній невралгії, діабетичній невропатії та інших формах ушкодження нервів [Taylor and Meldrum, Trends Pharmacol. Sci. 7#309-316 (1995)], а карбамазепін та ламотригін застосовують для лікування маніакальної депресії [Denicott et al., J. Clin. Psychiatry 55:70-76 (1994)]. Крім того, зважаючи на виявлення численних подібних симптомів при хронічному болі та шумі у вухах [Moller, A. R. Am. J. Otol. 18: 577-585 (1997); Tonndorf, J. Hear. Res. 28:271-275 (1987)], було запропоновано вважати шум у вухах формою відчуття хронічного болю [Simpson, J. J. and Davies, E. W. Tip. 20:12-18 (1999)]. Було доведено що, лігнокаїн та карбамазепін виявили свою ефективність при лікуванні шуму у вухах [Majumdar, В. ef al. Clin. Otolaryngol. 8: 175-180 (1983); Donaldson, I. Laryngol. Otol. 95:947-951 (1981)]. Було виявлено, що існує принаймні від п'яти до шести ділянок на потенціалозалежних Na+ ка 75883 6 налах, які специфічно зв'язуються з нейротоксинами [Catterall, W.A., Science 242:50-61 (1988)]. Дослідження також виявили, що терапевтичні антиаритмічні засоби, антиконвульсанти та місцеві + анестетики, дія яких опосередковується Na каналами, справляють свою дію через взаємодію з внутрішньоклітинним боком Na+ каналу та алостеричне інгібування взаємодії з нейротоксиною рецепторною ділянкою 2 [Catterall, W.A., Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 70:15-43(1980)]. У роботі [Соссо, М. Т.; Maccioni, A.; Plumitallo, Α.; Farmaco Ed. Sci.; 40:1985; 272-284] описано такі дві сполуки: Інші арил-заміщен гетероцикли описано в роботі [Stefancich, G. et al. ArchPharm. (Weinheim Ger.) 323:273-280 (1990)] як протигрибкові агенти. Ці сполуки описано у Додатку А. Сполуки Формули І раніше застосовувалися для лікування захворювань, які реагують на блокування натрієвих каналів у ссавців. Даний винахід стосується відкриття, згідно з яким арил-заміщені піразоли, триазоли і тетразоли, представлені Формулою І, є антиконвульсан+ тами і діють як блокатори натрієвих (Na ) каналів. Винахід також можна застосовувати при лікуванні захворювань, на які впливають блокування натрієвих каналів у ссавців, які страждають від надмірної активності вищезгаданих каналів, через введення ефективної кількості описаної авторами сполуки Формули І. Інший аспект даного винаходу стосується забезпечення способу лікування, профілактики або послаблення нейронної втрати внаслідок глобальної та фокальної ішемії; лікування, профілактики або послаблення болю, включаючи гострий та хронічний біль та невропатичний біль; лікування, профілактики або послаблення конвульсій та нейродегенеративних станів; лікування, профілактики або послаблення маніакальної депресії; застосування як місцевих анестетиків та антиаритмічних засобів та лікування від шуму у вухах шляхом введення сполуки Формули І ссавцю, який потребує такого лікування або застосування. Інший аспект даного винаходу стосується застосування сполук Формули І як блокаторів натрієвих каналів. Даний винахід також стосується застосування сполуки Формули І при лікуванні нейронного ушкодження внаслідок глобальної та фокальної ішемії, при лікуванні або профілактики нейродегенеративних станів, таких як боковий аміотрофічний склероз (БАС), при лікуванні шуму у вухах, як антиманіакальних депресантів, як місцевих анестетиків, як антиаритмічних засобів, як антиконвульсантів та при лікуванні або профілактики діабетичної невропатії і при лікуванні болю, включаючи гострий та хронічний біль, а також мігрень. 7 75883 8 Інший аспект даного винаходу стосується закарбоніламіно, аралкілкарбоніламіно, алкілкарбобезпечення фармацевтичної композиції, корисної нілу, аміносульфонілу, алкіламіносульфонілу та при лікуванні захворювань, на які впливають блоалкілсульфонілу; кування каналів іонів натрію, яка містить ефективR5, R6, R7 та R8 незалежно є вибраними з груну кількість сполуки Формули І у суміші з одним пи, яка складається з водню, гало, галоалкілу, алабо кількома фармацевтично прийнятними носіякілу, алкенілу, алкінілу, гідроксіалкілу, аміноалкілу, ми або розріджувачами. карбоксіалкілу, алкоксіалкілу, нітро, аміно, уреїдо, Про багато сполук, застосованих у даному виціано, ациламіно, аміду, гідрокси, тіолу, ацилокси, наході, раніше не повідомлялося. Таким чином, азидо, алкокси, карбокси, карбоніламідо та алкілданий винахід також стосується нових арилтіолу; заміщених піразолів, триазолів і тетразолів ФорR10 є вибраним з групи, яка складається з амімули І. но, алкілу, алкенілу, алкінілу, OR11, алкіламіно, Крім того, даний винахід стосується 3Н та 14С діалкіламіно, алкеніламіно, діалкіламіноалкенілу, радіоактивно мічених сполук Формули І та їх зациклоалкілу, арилу, гетероциклу, гетероарилу, стосування як радіолігандів для виявлення місць їх аралкілу, арилалкенілу, арилалкінілу та циклоалкізв'язування на натрієвому каналі. лалкіламіно; Додаткові варіанти втілення та переваги винаR11 є вибраним з групи, яка складається з водходу викладено частково у нижчеподаному описі, ню, необов'язково заміщеного алкілу та лужного а частково стануть зрозумілими з опису або у прометалу. цесі практичного втілення винаходу. Варіанти втіТаким чином, даний винахід стосується ввелення та переваги винаходу стануть зрозумілими дення способу лікування, профілактики або посй досяжними завдяки конкретним елементам та лаблення нейронної втрати внаслідок глобальної комбінаціям, вказаним у формулі винаходу. та фокальної ішемії; лікування, профілактики або Слід розуміти, що і попередній загальний опис, послаблення болю, включаючи гострий та хронічі нижчеподаний детальний опис даються лише для ний біль та невропатичний біль; лікування, профіприкладу та пояснення і не обмежують обсяг вилактики або послаблення конвульсій та нейроденаходу. генеративних станів; лікування, профілактики або В основі даного винаходу лежить виявлення послаблення маніакальної депресії; застосування того, що арил-заміщені піразоли, триазоли і тетраяк місцевих анестетиків та антиаритмічних засобів золи Формули І є антиконвульсантами і діють як та лікування від шуму у вухах шляхом введення блокатори Na+ каналів. З огляду на це виявлення, сполуки Формули І ссавцеві, який потребує такого сполуки Формули І є корисними для лікування залікування. хворювань, на які впливають блокування каналів Даний винахід також стосується нових сполук, іонів натрію. які мають Формулу І, як описано вище; за умови, Сполуками, застосовуваними в цьому аспекті що: даного винаходу, є арил-заміщені піразоли, триа1) якщо Het є (іі), та X є О, то R10 не є алкілом, золи і тетразоли, представлені Формулою І: аралкілом, арилом або OR11; 2) якщо Het є (і) або (іі), то X не є NR9; 3) якщо Het є (ііі), то X не є СН2; і 4) якщо Het є (ііі), і X є О, то R10 не є OR11. Необов'язкові замісники на необов'язково заміщених групах, якщо не визначено іншого, включають одну або кілька груп, незалежно вибраних із групи, яка складається з вищезгаданих гало, гаабо їх фармацевтично прийнятні солі, проліки ло(С1-6)алкільних, арильних, піримідинових, цикабо сольвати, де лоалкільних, С1-6алкільних, С2-6алкенільних, С2X є одним з О, S, NR9, СН2, NR9C(O) або арил(С1-6)алкільних, арил(С26алкінільних, C(O)NR9, де R9 є воднем або C1-C10 алкілом; арил(С2-6)алкінільних, циклоал6)алкенільних, Het є гетероарилом, вибраним з групи, яка кіл(С1-6)алкільних, гідрокси(С1-6)алкільних, аміскладається з но(С1-6)алкільних, карбокси(С1-6)алкільних, алкокси(С1-6)алкільних, нітро, аміно, уреїдо, ціано, С16ациламіно, гідрокси, тіолу, С1-6ацилокси, азидо, С1-6алкокси, карбокси, амінокарбонільних, карбамоїлокси, С1-6алкілсульфоніламіно, С1-6ацильних та С1-6алкілтіольних груп, якщо одержана в результаті сполука є стійкою. До оптимальних неR1 є вибраним з групи, яка складається з водобов'язкових замісників належать: гало, гало(С1ню, необов'язково заміщеного алкілу, необов'язко6)алкіл, гідрокси(С1-6)алкіл, аміно(С1-6)алкіл, гідрокво заміщеного гетероарилу, C(O)R10, СН2С(О)R10, си, нітро, С1-6алкіл, С1-6алкокси, амінокарбоніл, S(O)R10 та SO2R10; карбамоїлокси, С1-6алкілсульфоніламіно, С1-6ацил R2 та R3 незалежно є вибраними з групи, яка та аміно. складається з водню, алкілу, алкенілу, алкінілу, В оптимальному варіанті R1 є вибраним з груарилу, ціано, аміноалкілу, гідроксіалкілу, алкоксіапи, яка складається з алкілу, необов'язково замілкілу, алкілтіо, алкілсульфінілу, алкілсульфонілу, щеного галогеном, гідрокси, карбамоїлокси, С1карбоксіалкілу, алкіламіно, діалкіламіно, амінокар6ацилом, С1-6алкілсульфоніламіно, арилом, краще бонілу, алкіламінокарбонілу, ариламінокарбонілу, - фенілом або амінокарбонілом; C(O)R10; аралкіламінокарбонілу, алкілкарбоніламіно, арил 9 75883 10 CH2C(O)R10; або SO2R10, де R10 є вибраним з групи, яка складається з пи, яка складається з С1-6алкілу, С2-6алкенілу, OR11, аміно, С1-6алкіламіно, ди(С1-6)алкіламіно, С26алкеніламіно, гетероциклу та моно- та ди-( С16)алкіламіноалкенілу, і де R11 є таким, як визначено вище. В оптимальному варіанті R10 є вибраним з групи, яка складається з С1-6алкілу, С2-6алкенілу, в оптимальному варіанті - (і) або (ііі); OR11, аміно, С1-6алкіламіно, ди(С1-6)алкіламіно, С2R1 є C(O)R10, CH2C(O)R10 або SO2R10, де R10 є моно- та ди-(С1-6)алкіламіно(С2аміно, алкілом, Ν-морфолінілом, N-піролідинілом 6алкеніламіно, або N-піперазинілом, краще - аміно, усі з яких мо6)алкенілу, N-морфолінілу, N-піролідинілу та Nпіперазинілу, усі з яких можуть бути необов'язково жуть бути необов'язково заміщеними. R1 в оптизаміщеними, де R11 є таким, як визначено вище. мальному варіанті є C(O)R10, де R10 є аміно, С1В оптимальному варіанті R2 та R3 незалежно є C6алкілом або гетероциклом, таким як Nвибраними з групи, яка складається з водню С1морфолініл, N-піролідиніл та N-піперазиніл; C6алкілу, С2-C6алкенілу, С2-C6алкінілу, аміно(С1R2 та R3 незалежно є воднем, С1-C6алкілом, C6)алкілу, аміно, ціано, С1-C6алкокси, С1С1-C6алкілтіо або С1-C6алкілсульфінілом, причому C6алкілтіо, С1-C6алкілсульфінілу, гідрокси(С1R2 та R3 в оптимальному варіанті є воднем; R5 та C6)алкілу, алкоксі(С1-C6)алкілу, карбоксі(С1R6 є такими, як визначено вище і в оптимальному C6)алкілу, амінокарбонілу, С 1варіанті є воднем; і R7 та R8 незалежно є вибраC6алкіламінокарбонілу, С6-С10ариламінокарбонілу, ними з групи, яка складається з водню, гало, гаС6-С10арил(С1-C6)алкіламінокарбонілу, С 1ло(С1-C6)алкілу, С1-C6алкілу, гідрокси(С1-C6)алкілу, C6алкілкарбоніламіно, С6-С10арилкарбоніламіно та аміно(С1-C6)алкілу, карбокси(С1-C6)алкілу, алкокС6-С10арил(С1-C6)алкілкарбоніламіно, краще - водси(С1-C6)алкілу, нітро, аміно, С1-C6ациламіно, амінем, С1-C6алкілом, С1-C6алкокси, аміно(С1ду, гідрокси, тіолу, С1-C6ацилокси, С1-C6алкокси, C6)алкілом, С1-C6алкілтіо та амінокарбонілом. карбокси, карбоніламідо та С1-C6алкілтіолу; Кожна з груп R5-R8 займає місце атома водню, за умови, що: який за інших умов був би присутній у будь-якій 1) якщо Het є (іі), і X є О, то R10 не є алкілом, позиції на арильному кільці, до якого приєднується аралкілом, арилом або OR11; R група. 2) якщо Het є (ііі), і X є О, то R10 не є OR11. В оптимальному варіанті R5, R6, R7 та R8 незаПрикладами оптимальних сполук, які можуть лежно є вибраними з групи, яка складається з вобути застосовані в цьому способі винаходу крім дню, гало (в оптимальному варіанті - хлоро або інших, є: фторо), гало(С1-C6)алкілу, С1-C6алкілу, гідрок1-[4-(4-нітрофенокси)феніл]-1 Н-[1,2,4]триазол; си(С1-C6)алкілу, аміно(С1-C6)алкілу, карбокси(С11-[4-(4-фторофенокси)феніл]-3-метилпіразол; C6)алкілу, алкокси(С1-C6)алкілу, нітро, аміно, С13-метил-1-(4-феноксифеніл)піразол; C6ациламіно, аміду, гідрокси, тіолу, С1-C6ацилокси, 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-3-карбоксамід; С1-C6алкокси, карбокси, карбоніламідо та С11-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-5-карбоксамід; C6алкілтіолу. 1-[4-(4-фторофенокси)феніл]-1Н-піразол-3До однієї групи оптимальних сполук, які охопкарбоксамід; люються Формулою І, належать сполуки, в яких R1 1-[4-(4-нітрофенокси)феніл]-1Н-[1,2,4]триазолє C(O)R10 або SO2R10, де R10 визначено вище, в 3-карбоксамід; і оптимальному варіанті - є аміно або С1-6алкілом. У 1-[4-(4-хлоро-2-фторофенокси)феніл]-1Нцій групі сполук X в оптимальному варіанті є О або піразол-3-карбоксамід. S, найкраще - О. До іншої групи прикладів оптимальних сполук, Особливу перевагу в цій групі віддають сполуякі можуть бути застосовані в цьому винаході, накам, у яких кожен із R5 та R6 є воднем; R2 та R3 лежать 1-[4-(4-фторофенокси)феніл]-5обидва є Н; і R7 та R8 є вибраним з групи, яка метилпіразол, 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-4складається з водню, гало, гало(С1-C6)алкілу, С1карбоксамід та 4-(4-фторофенокси)феніл-піразол. C6алкілу, гідрокси(С1-C6)алкілу, аміно(С1-C6)алкілу, Корисними арильними групами є С6-14арил, зокарбокси(С1-C6)алкілу, алкокси(С1-C6)алкілу, нітро, крема С6-10арил. До типових С6-14арильних груп аміно, С1-C6ациламіно, аміду, гідрокси, тіолу, С1належать фенільні, нафтильні, фенантрильні, анC6ацилокси, С1-C6алкокси, карбокси, карбоніламітрацильні, інденільні, азуленільнії, біфенільні, бідо та С1-C6алкілтіолу. феніленільні та флуоренільні групи. Корисними Інша група оптимальних сполук включає споциклоалкільними групами є С3-8циклоалкіл. До тилуки Формули І: пових циклоалкільних груп належать циклопропіл, циклобутил, циклопентил, циклогексил та циклогептил. Вжитий нами термін "гетероарил" стосується груп, які мають від 5 до 14 атомів кільця; 6, 10 або 14 електронів, розташованих у циклічному порядку; і містять атоми вуглецю та 1, 2 або 3 гетероатоми кисню, азоту та сірки (причому прикладами гетероарильних груп є: тіенільні, або їх фармацевтично прийнятні солі, проліки бензо[b]тіенільні, нафто[2,3-b]тієнільні, тіантреніабо сольвати, у яких X є О або S, в оптимальному льні, фурильні, бензофурильні, піранільні, ізобенваріанті - О; Het є гетероарилом, вибраним з гру 11 75883 12 зофуранільні, бензоксазонільні, хроменільні, ксанмами фтору, хлору, брому або йоду, наприклад, тенільні, феноксатіїнільні, 2Н-піролільні, піролільфторометильна, дифторометильна, трифторомені, імідазолільні, піразолільні, піридильні, піразинітильна, пентафтороетильна, 1,1-дифтороетильна льні, піримідинільні, піридазинільні, індолізинільні, та трихлорометильна групи. ізоіндолільні, 3Н-індолільні, індолільні, індазолільДо корисних гідроксіалкільних груп належать ні, пуринільні, 4Н-хінолізинільні, ізохінолільні, хіноС1-10алкільні групи, заміщені гідрокси, наприклад, ліл, фталазинільні, нафтирридинільні, хіназолінігідроксиметильна, гідроксиетильна, гідроксипропільні, цинолінільні, птеридинільні, 4аНльна та гідроксибутильна групи. До корисних алкоксигруп належить кисень, закарбазолільні, карбазолільні, -карболінільні, феміщен однією з вищезгаданих С1-10алкільних груп. нантридинільні, акридинільні, перимідинільні, феДо корисних алкілтіогруп належить сірка, занантролінільні, феназинільні, тіазолільні, ізотіазоміщена однією з вищезгаданих С1-10алкільних груп. лільні, фенотіазинільні, ізоксазолільні, До корисних ациламіногруп належить будьфуразанільні та феноксазинільні групи). який С1-6ацил (алканоїл) приєднаний до аміноазоДо корисних гало- або галогенових груп налету, наприклад, ацетамідо, пропіонамідо, бутаноїжать фтор, хлор, бром та йод. ламідо, пентаноїламідо, гексаноїламідо, а також До корисних алкільних груп належать лінійні арил-заміщені С2-6заміщені ацильні групи. або розгалужені С1-10алкільні групи, краще - С1Корисними ацилоксигрупами є будь-який С16алкільні групи. До типових С1-10алкільних груп належать метилові, етилові, пропілові, ізопропіло6ацил (алканоїл), приєднаний до окси (-О-) групи, наприклад, ацетокси, пропіоноїлокси, бутаноїлокві, бутилові, втор-бутилові, трет-бутил, 3си, пентаноїлокси, гексаноїлокси та подібні. пентилові, гексилові та октилові групи. РозглядаТермін "гетероцикл" вжито авторами як такий, ється також триметиленова група, заміщена у двох що означає насичену або повністю або частково суміжних позиціях на бензольному кільці сполук ненасичену 3-7-членну монооциклічну, або 7-10винаходу. членну біциклічну кільцеву систему, яка складаДо корисних алкенільних груп належать С2ється з атомів вуглецю та одного-чотирьох гетероалкенільні групи, в оптимальному варіанті С26 атомів, незалежно вибраних із групи, яка склада4алкеніл. До типових С2-4алкенільних груп налеється з О, N та S, де гетероатоми азоту та сірки жать етеніл, пропеніл, ізопропеніл, бутеніл та необов'язково можуть бути окисненими, азот невтор-бутеніл. обов'язково може бути кватернізований, і включає До корисних алкінільних груп належать С2будь-яку біциклічну групу, в якій будь-яке з визна6алкінільні групи, в оптимальному варіанті - С2чених вище гетероциклічних кілець є злитим з бе4алкініл. До типових С2-4алкінільних груп належать нзольним кільцем, і гетероциклічне кільце може етинільна, пропінільна, бутинільна та 2-бутинільна бути заміщеним на атомі вуглецю або на атомі групи. азоту, якщо одержана в результаті сполука є стійДо корисних арилалкільних груп належать кою. Прикладами, крім інших, є, піролідин, піперабудь-які з вищезгаданих С1-10алкільних груп, замізин, морфолін, імідазолін, піразолідин, бензодіащених будь-якою з вищезгаданих С6-14арильних зепіни та подібні. груп. Корисними значеннями є бензил, фенетил та До корисних гетероциклоалкільних груп наленафтилметил. жать будь-які з вищезгаданих С1-10алкільних груп, До корисних арилалкенільних груп належать заміщених будь-якими з вищезгаданих гетероцикбудь-які з вищезгаданих С2-4алкенільних груп, залічних груп. міщених будь-якими з вищезгаданих С6-14арильних Корисними алкіламіно- та діалкіламіногрупми є груп. —NHR20 та —NR20R21, де R20 та R21 є С1До корисних арилалкінільних груп належать будь-які з вищезгаданих С2-4алкінільних груп, за10алкільними групами. Амінокарбонільною групою є -C(O)NH2. міщених будь-якими з вищезгаданих С6-14арильних Корисними алкіламінокарбонільними групами груп. Корисними значеннями є фенілетиніл та феє карбонільні групи, заміщені -NHR20 тa -NR20R21, нілпропініл. де R20 та R21 є С1-10алкільними групами, як визнаДо корисних гетероарилалкільних груп налечено вище. жать будь-які з вищезгаданих С1-10алкільних груп, До корисних алкілтіольних груп належать заміщених будь-якими з вищезгаданих гетероарибудь-які з вищезгаданих С1-10алкільних груп, замільних груп. щених —SH групою. До корисних гетероарилалкенільних груп наДо корисних алкілсульфінільних груп належать лежать будь-які з вищезгаданих С2-4алкенільних будь-які з вищезгаданих С1-10алкільних груп, приєгруп, заміщених будь-якими з вищезгаданих гетеднаних до сульфінілу (-SO-). роарильних груп. До корисних алкілсульфонільних груп налеДо корисних гетероарилалкінільних груп належать будь-які з вищезгаданих С1-10алкільних груп, жать будь-які з вищезгаданих С2-4алкінільних груп, приєднаних до сульфонілу (-SO2-). заміщених будь-якими з вищезгаданих гетероариКарбамоїлоксигрупою є -O-C(O)-NH2. льних груп. Карбоксигрупою є -СООН. До корисних циклоалкілалкільних груп налеАзидогрупою є -N3. жать будь-які з вищезгаданих С1-10алкільних груп, Уреїдогрупою є -NH-C(O)-NH2. заміщених будь-якими з вищезгаданих циклоалкіАміногрупою є -NH2. льних груп. Амідною групою є органічний радикал, який До корисних галоалкільних груп належать С1має -NHC(O)- як функціональну групу. 10алкільні групи, заміщені одним або кількома ато 13 75883 14 Описаний авторами винахід охоплює всі фарякі відрізняються лише орієнтацією їхніх атомів у мацевтично прийнятні солі описаних сполук. До просторі. Він включає енантіомери та ізомери спофармацевтично прийнятних солей, крім інших, лук з кількома хіральними центрами, які не є дзерналежать солі металів, такі як солі натрію, калію, кальними відображеннями одне одного (діастерецезію і т. ін.; лужноземельних металів, такі як солі омерами). кальцію, магнію і т. ін.; солі органічних амінів, такі Термін "хіральний центр" стосується атома вуяк солі триетиламіну, піридину, піколіну, етанолаглецю, до якого приєднуються різні групи. міну, триетаноламіну, дициклогексиламіну, Ν,Ν'Термін "енантіомер" або "енантіомерний" стодибензилтилендіаміну і т. ін.; солі неорганічних сується молекули, яка не може бути накладеною кислот, такі як гідрохлориди, гідроброміди, сульна її дзеркальне відображення, а отже, є оптично фати, фосфати і т. ін.; солі органічних кислот, такі активною, причому енантіомер обертається у як формати, ацетати, трифтороацетати, малеати, площині поляризованого світла в одному напрямтартрати і т. ін.; сульфонати, такі як метансульфоку, а його дзеркальне відображення обертається у нат, бензолсульфонат, р-толуолсульфонат, і т. ін.; площині поляризованого світла у протилежному солі амінокислот, такі якаргінати, аспарагінати, напрямку. глутамати і т. ін. Термін "рацемічний" стосується суміші однаОписаний нами винахід також охоплює проліки кових частин енантіомерів, яка є оптично неактивописаних сполук. Проліками вважають будь-які ною. ковалентно зв'язані носії, які вивільнюють активТермін "розклад" стосується відокремлення ний основний медикамент in vivo. Прикладами або концентрації або збіднення однієї з двох енанпроліків є естери або аміди Формули І з R2-R11 як тіомерних форм молекули. Фраза "енантіомерний гідроксіалкілом або аміноалкілом, які можуть бути надлишок" стосується суміші, в якій один енантіоодержані шляхом реакції таких сполук з ангідример є присутнім у більшій концентрації, ніж моледами, такими, як бурштиновий ангідрид. кула, яка є його дзеркальним відображенням. Описаний авторами винахід також охоплює Оскільки сполуки Формули І є блокаторами напродукти in vivo метаболізму описаних сполук. Такі трієвих (Na+) каналів, застосування цих сполук дає продукти можуть бути одержані, наприклад, шлязмогу лікувати багато хвороб та станів, опосередхом окиснення, відновлення, гідролізу, амідування, кованих припливом іонів натрію. Отже, винахід естерифікації і т. ін. введеної сполуки, насампестосується способу лікування, профілактики або ред, через ферментний процес. Відповідним чипослаблення нейронної втрати, пов'язаної з інсуном, винахід охоплює сполуки, одержані способом, льтами, глобальною та фокальною ішемією, травякий включає контактування сполуки цього винамами ЦНС, гіпоглікемією та хірургічним втручанходу з організмом ссавця протягом часу, достатням, травмами спинного мозку; а також лікування нього для одержання продукту її метаболізму. Такі або послаблення нейродегенеративних захворюпродукти, як правило, визначаються одержанням вань, включаючи хворобу Альцгеймера, боковий радіоактивно міченої сполуки винаходу, їх паренаміотрофічний склероз, хворобу Паркінсона, лікутеральним введенням у дозі, яка піддається вияввання або послаблення страхів, конвульсій, глауленню, тварині, такій як щур, миша, морська свинкоми, мігрені тасудом м'язів. Сполуки Формули І ка, мавпа або людині, забезпеченням часу, також є корисними як засоби проти шуму у вухах, достатнього для того, щоб відбувся метаболізм, та протиманіакальні депресанти як місцеві анестетивиділення продуктів її перетворення з сечі, крові ки та як антиаритмічні засоби; а також для лікуабо інших біологічних проб. вання, профілактики або послаблення болю, Описаний нами винахід також охоплює описані включаючи хірургічний, хронічний та невропатичсполуки, ізотопічно мічені тим, що вони мають ний біль. У кожному випадку способи даного винаодин або кілька атомів, заміщених атомом, який ходу вимагають введення тварині, яка потребує має іншу атомну масу або масове число. Приклатакого лікування, ефективної кількості блокатора дами ізотопів, які можуть бути включені до описанатрієвих каналів згідно з даним винаходом або їх них сполук, є ізотопи водню, вуглецю, азоту, кисфармацевтично прийнятних солей або проліків. ню, фосфору, фтору та хлору, такі, як 2Н, 3Н, 13С, Винахід також стосується способу лікування 14 С, 15N, 18O,17O,31P, 32P, 35S, 18F та 36СІ відповідно. захворювань, які реагують на блокування натрієДеякі описані нами сполуки можуть містити вих каналів у тварин, які страждають від цих заодин або кілька асиметричних центрів і можуть, хворювань. Найбільш оптимальні варіанти втілентаким чином, утворювати енантіомери, діастереоня арил-заміщених гетероарильних сполук для мери та інші стереоізомерні форми. Даний винахід застосування згідно зі способом цього винаходу також охоплює їх рацемічні суміші, розчинені форпредставлено визначеною вище Формулою І. ми їх сумішей, а також окремі енантіомери, які моСполуки цього винаходу одержують, застосожуть бути відокремлені згідно зі способами, які є вуючи відомі спеціалістам способи. загальновідомими серед спеціалістів. У разі, коли Синтез піразолів Формули І здійснюють, як поописані нами сполуки містять олефінові подвійні казано на Схемах 1 та 2. З'єднання борної кислоти зв'язки або інші центри геометричної асиметрії, здійснювали, застосовуючи процедуру, описану в якщо спеціально не вказано іншого, передбачароботі [Lam, Y. S. et al. Tetrahedron Lett. 39: 2941ється включення Ε та Ζ геометричних ізомерів. 2944 (1998)]. Також передбачається, що даний винахід охоплює всі таутомери. Вжитий нами термін "стереоізомери" є загальним терміном для всіх ізомерів окремих молекул, 15 75883 16 лозалежним натрієвим каналом із застосуванням мембрани переднього мозку щурів та [3Н]ВТХ-В. Натрієві канали є великими трансмембранними білками, які експресуються у різних тканинах. Вони є потенціалозалежними каналами і відпові+ дають за швидке збільшення проникності Na у відповідь на деполяризацію, пов'язану з біопотенціалом у багатьох збудливих клітинах, включаючи клітини м'язів, нервів та серця. Один аспект даного винаходу стосується виявлення механізму дії описаних нами сполук як специфічних блокаторів Na+ каналів. На основі виявлення цього механізму ці сполуки розглядаються як корисні для лікування або профілактики нейронної втрати через фокальну або глобальну ішемію та лікування або профілактики нейродегенеративних захворювань, включаючи БАС, страхів та епілепсії. Очікується, що вони можуть бути ефективними для лікування, профілактики або послаблення невропатичного болю, хірургічного болю, хронічного болю та шуму у вухах. Очікується, що ці сполуки також можуть бути корисними як антиаритмічні засоби, анестетики та протиманіаТриазоли Формули І одержують, як показано кальні депресанти. на Схемі 3, застосовуючи 4-(1,2,4-триазол-1Даний винахід стосується сполук Формули І, іл)фенол серійного виробництва (Lancaster які є блокаторами потенціалозалежних натрієвих Synthesis). каналів. Згідно з даним винаходом, сполуки, які мають оптимальні властивості блокування натрієвих каналів, виявляють IC50 приблизно 100мкМ або менше в описаному нами електрофізіологічному аналізі. В оптимальному варіанті сполуки даного винаходу виявляють ІС55 10мкМ або менше. У найкращому варіанті сполуки даного винаходу виявляють IC50 приблизно 1,0мкМ або мен3 14 Винахід також стосується Н та С радіоактише. Заміщені гетероарильні сполуки даного вно мічених сполук Формули І та їх застосування винаходу випробують на активність щодо блокуяк радіолігандів для виявлення місць їх зв'язуванвання Na+ каналів шляхом описаних нижче електня на натрієвому каналі. Наприклад, в одному вирофізіологічних аналізів та аналізів зв'язування. падку мічені сполуки винаходу застосовують для Електрофізіологічний аналіз: характеристики специфічного рецепторного зв'яПідготування клітин: НЕК-293 (NallA-B2) лінію зування. В іншому випадку мічені сполуки винахоклітин, яка стабільно експересує rВІІА ізоформ Na+ ду застосовують як альтернативу випробуванню каналів, утворювали власними силами. Клітини на тваринах для оцінки зв'язку структури з активнікультивували, застосовуючи описані раніше станстю. Рецепторний аналіз здійснюють при незмінній дартні способи [Verdoorn, T.A, et al., Neuron 4:919концентрації міченої сполуки Формули І та при 928 (1990)]. Для електрофізіологічного аналізу підвищених концентраціях випробуваної сполуки у клітини наносили на попередньо вкриті полі-Dпаралельному аналізі. лізином 35мм чашки Петрі Cellware (BIOCOAT, Тритійовані сполуки Формули І одержують Becton Dickinson) при густині ~104 клітин/чашку у шляхом включення тритію до сполуки Формули І, день пересівання з конфлюентних культур. За наприклад, шляхом каталітичного дегалогенуванспостереженнями авторів, клітини є придатними ня тритієм. Цей спосіб включає реакцію відповіддля зняття показників протягом 2-3 днів після наної галоген-заміщеної попередньої сполуки Форнесення. мули І з газоподібним тритієм у присутності Зняття показників потенціалозалежних струмів відповідного каталізатора, наприклад, Pd/C, у приNa+ способом точкової фіксації потенціалів: зняття сутності або за відсутності основи. Інші підходящі показників потенціалу у цілих клітинах здійснюваспособи одержання тритійованих сполук можна ли, застосовуючи традиційний спосіб точкової фікзнайти у роботі [Filer, Isotopes in the Physical and сації потенціалів [НаmіІІ et al., Pfluegers Arch. Biomedical Sciences, Vol.1, Labeled Compounds 3Р7:85-100 (1981)] з підсилювачем Axopatch 200А 14 (Part A), Chapter 6]. С-мічені сполуки одержують, (Αxοn Instruments, Foster City, CA). Камеру зняття 14 застосовуючи вихідні матеріали, які мають С вугпоказників безперервно обливали зовнішнім розлець. чином (150мМ NaCI, 5,4мМ КСІ, 1,8мМ СаСІ2, 1мМ Сполуки даного винаходу піддавали електроМgСІ2, 10мМ HEPES, 10мМ глюкози, рН 7,4 регуфізіологічним аналізам у дисоційованих гіпокамлювали за допомогою NaOH, осмотичний тиск пальних нейронах на активність блокування натрі~320ммоль/кг) при швидкості приблизно 1мл/хв. євих каналів. Ці сполуки також можуть Піпетки для зняття показників витягували з товстооцінюватися на зв'язування з нейронним потенціастінних капілярів (WPI, Sarasota, FI) і полірували 17 75883 18 яка забезпечує половину максимального інгібунад вогнем. Опір піпеток становив від 1 до 3Μ , вання, і p є фактором нахилу. коли піпетки заповнювали внутрішнім розчином, In vitro аналіз зв'язування: який містив (у мМ): 130 CsF, 20 NaCI, 2 МgСІ2, 10 Здатність сполук даного винаходу до модулюEGTA, 10 HEPES, рН доводили до 7,4 за допомовання ділянки 1 або ділянки 2 Na+ каналу визначагою CsOH, осмотичний тиск ~310ммоль/кг. Медили за процедурами, повністю описаними у роботах каменти та проміжні промивальні рідини подавали [Yasushi, J. Biol. Chem. 261.6149-6152 (1986) та через лінію трубок (Drummond Microcaps, 2мкл, Creveling, Моl. Pharmacol. 23:350-358 (1983)] віддовжина 64мм). Сполуки розводять у диметилсуповідно. Мембрани переднього мозку щурів викольфоксиді (DMSO) для одержання 30мМ основнористовували як джерела білків Na+ каналів. Аналіго розчину, який потім розводять у зовнішньому зи зв'язування здійснювали у 130мкМ розчині до кінцевої концентрації 0,1-100мМ. При холінхлориду при 37°С протягом 60-хвилинної іннайвищій (1%) концентрації DMSO лише злегка кубації з [3Н] сакситоксином та [3Н] батрахотоксизнижував величину струму Na+. Значення струму ном як радіолігандами для ділянки 1 та ділянки 2 знімали при кімнатній температурі (22-25°С), фільвідповідно. трували при 3кГц за допомогою активного 8In vivo фармакологія: полюсного фільтра Бесселя (Frequency Devices, Сполуки даного винаходу можуть бути випроHaverhill, MA), перетворювали на цифрову форму бувані на антиконвульсантну активність in vivo з інтервалами 10-50мкс і зберігали, застосовуючи після внутрішньовенного, перорального або внутаналого-цифровий інтерфейс Digidata 1200 з прорішньочеревинного введення з застосуванням грамою Рсlаmр6/Clampex (Axon Instruments). Посрізних антиконвульсантних випробувань на мишах, лідовний опір, як правило, у разі необхідності сковключаючи судоми на максимальний електрошок рочували на ~75%. (MES). Судоми через максимальний електрошок Для оцінки потенціалу та кінетики інгібування викликали у самців мишей NSA масою 15-20г та Na+ каналів сполуками (Фіг.1) застосовували такі самців щурів Sprague-Dawley масою 200-225г протоколи імпульсів напруги. шляхом подачі струму (50мА, 60 імпульсів на сеФігура. Протоколи імпульсів напруги. А. IVкунду, тривалість імпульсу 0,8мсек, протягом 1сек, криві. С Стійка інактивація. В. Кінетика відновленпостійний струм, миші; 99мА, 125 імпульсів на сеня.D. Час зв'язування. кунду, тривалість імпульсу 0,8мсек, протягом 2сек, Вольт-амперне співвідношення (IV-крива), постійний струм, щури) з застосуванням пристрою протокол А, використовували для вказування наUgo Basile ЕСТ (модель 7801). Рухи мишей обмепруги, при якій досягається максимальний внутріжували через захоплення шкіри на дорсальній шній Na+ струм. Цю напругу використовували проповерхні і до двох рогівок підводили вкриті солятягом усього експерименту як випробувальну ним розчином електроди. Щурам давали вільно напругу, Vt. Криву стійкої інактивації (або готовносрухатись на робочій поверхні столу і застосовуваті), протокол С, використовували для отримання ли вушні електроди з затискачами. Подавали напруги, при якій відбувається майже повна струм і за тваринами спостерігали до 30 секунд на ( 95%) інактивація Na+ каналів; вона служила як наявність тонічної реакції розгинача задньої кінцівнапруга для попереднього імпульсу, Vc, протягом ки. Тонічний напад визначали як розгинання задусього експерименту. Протокол В показує, наскільньої кінцівки більше, ніж на 90 градусів від площики швидко канали відновлюються від інактивації ни тіла. Результати піддавали квантифікації. при гіперполяризованих напругах. Він дозволяє Сполуки можуть бути випробувані на їх протибовстановити тривалість інтервалу гіперполяризації, льову активність на формаліновій моделі, як опиякий використовують для вимірювання кінетики сано в роботі [Hunskaar, S., О. В. Fasmer, та К. зв'язування сполук з інактивованими Na+ каналами Hole, J. Neurosci. Methods 74:69-76(1985)]. В усіх (протокол D). Відновлення каналу за контрольних експериментах використовували самців мишей умов було швидким ( 90% відновлення за перші 5Swiss Webster NIH (20-30r; Harlan, San Diego, CA). 10хв). Якщо медикамент значною мірою затримує Їжу забирали у день експерименту. Мишей поміпроцес відновлення, то виникає можливість (прощали у плексигласові банки принаймні за 1 годину токол D) точного вимірювання кінетики зв'язування для акомодації до оточення. Після періоду акомоінгібітору з інактивованими каналами, а також стійдації тварин зважували і давали або випробувану кої спорідненості (k+ та Кi). Для визначення знасполуку, яку вводили внутрішньочеревинно або чень k+ будували графік залежності зниження пікоперорально, або відповідний об'єм наповнювача вих струмів у послідовних випробуваннях з різною (10% Tween-80). Через п'ятнадцять хвилин після тривалістю попереднього імпульсу від тривалості внутрішньочеревинного введення та 30 хвилин попереднього імпульсу та сталої часу ( ), виміряпісля перорального введення мишам робили ін'єкної наближенням моноекспонентою. Після цього цію формаліну (20мкл 5% розчину формальдегіду графік 1/ як функція концентрації антагоніста доу розсолі) у дорсальну поверхню правої задньої зволяв розрахувати макроскопічну інтенсивність лапи. Мишей переносили до плексигласових банок зв'язування антагоністів. Для визначення значень і спостерігали на кількість часу, витраченого на Кi криві часткового інгібування, виміряні за дробооблизування або кусання лапи, в яку було зроблевими характеристиками у стійкому стані, будували но ін'єкцію. Періоди облизування та кусання запиза допомогою логістичного рівняння: р сували з 5-хвилинними інтервалами протягом 1год І/Іконтрольн.=1/(1+([антагоніст]/Кi) ), Рівн. 2 після ін'єкції формаліну. Усі експерименти здійсде Іконтрольн. є максимальним Na+ струмом за нювали як сліпий тест під час світлового циклу. відсутності антагоніста, [антагоніст] є концентраціРанню фазу реакції на формалін вимірювали як єю медикаменту, К, є концентрацією антагоніста, 19 75883 20 облизування/кусання від 0 до 5 хвилин, а останню мальний час висмикування у десять секунд було фазу вимірювали 15-50 хвилин. Розбіжності між взято за граничний час. Час висмикування для групами, яким вводили наповнювач та медикачотирьох лап тварин вимірювали тричі у кожен мент, аналізували за допомогою одностороннього момент часу з п'ятихвилинним періодом відновлення між спробами. Три результати вимірювання аналізу варіантів (ANOVA). Значення Ρ 0,05 ввавикористовували для виведення середнього часу жали значущим. Маючи активність у блокуванні висмикування для кожного моменту часу. Випровикликаної формаліном гострої та другофазної бування тактильної алодинії та механічної гіпералактивності, яка полягала в облизуванні лап, сполугезії здійснюють паралельно. ки вважаються ефективними при гострому та хроСполуки можуть бути випробувані на їх нейронічному болі. протективну активність після фокальної та глобаСполуки можуть бути випробувані на їх потенльної ішемії у щурів або піщанок згідно з процедуціал щодо лікування хронічного болю (антиалодирами, описаними в роботах [Buchan et al. (Stroke, нічну та антигіпералгезичну активність) у моделі Suppl. 148-152 (1993)) та Sheardown et al. (Ear. J. (Chung model) периферичної нейропатії. Самців Pharmacol. 236:347-353 (1993)) і Graham et al. (J. щурів Sprague-Dawley масою 200-225г піддавали Pharmacol Exp. Therap. 276:7-4(1996))]. анестезії галотаном (1-3% у суміші 70% повітря та Сполуки можуть бути випробувані на їх нейро30% кисню) і температуру їх тіла контролювали протективну активність після травматичного пошпротягом анестезії через застосування гомеотеркодження спинного мозку згідно з процедурами, мічної ковдри. Потім робили дорсальний серединописаними в роботах [Wrathall et al. (Exp. ний розріз 2см на рівні L5 та L6 і з двох боків відNeurology 737:119-126 (1996)) та Iwasaki et al. (J. водили назад паравертебральні групи м'язів. Після NeuroSci. 734:21-25(1995))]. цього спинномозкові нерви L5 та L6 відкривали, До композицій, які охоплюються обсягом цього відокремлювали і міцно зшивали шовковим швом винаходу, належать усі композиції, в яких сполуки 6-0. Як негативний контроль, здійснювали неспраданого винаходу містяться у кількості, ефективній вжню операцію з відкриванням контралатеральних для досягнення заданої мети. Залежно від індивіспинномозкових нервів L5 та L6. дуальних потреб, визначення оптимальних меж Тактильна алодинія: Щурів переносили до підефективної кількості кожного компонента може нятої випробувальної клітки з підлогою з дротяної бути покладено на компетентність спеціаліста. Як сітки і давали на акліматизацію від п'яти до десяти правило, сполуки вводять ссавцям, наприклад, хвилин. Кілька моноволокон Semmes-Weinstein людині, перорально в дозах від 0,0025 до 50мг/кг застосовували до підошовної поверхні задньої або в еквівалентній кількості їх фармацевтично лапи для визначення порогової реакції тварин. прийнятних солей на день залежно від маси тіла Перше використане волокно мало критичну масу ссавця, якого піддають лікуванню від епілепсії, 9,1г (0,96 логарифмічного значення), і його застонейродегенеративних захворювань, аритмії, манісовували до п'яти разів для того, щоб перевірити, акальної депресії та болю. Для внутрішньом'язової чи викликає воно реакцію висмикування. Якщо ін'єкції доза, як правило, становить приблизно потварина виявляла реакцію висмикування, то до ловину пероральної дози. п'яти разів застосовували наступне, більш легке Згідно зі способом лікування або профілактики волокно з цієї групи, щоб визначити, чи викликає нейронної втрати при глобальній та фокальній воно реакцію. Цю процедуру повторювали, посліішемії, травмах головного та спинного мозку, гіпокдовно зменшуючи волокна до зникнення реакції, і сії, гіпоглікемії, епілептичному статусі та хірургічзаписували дані про найлегше волокно, яке виклиному втручанні, сполуки можуть вводитись шлякало реакцію. Якщо тварина не виявляла реакції хом внутрішньовенної ін'єкції в дозах від висмикування на перше волокно 9,1г, то застосоприблизно 0,025 до приблизно 10мг/кг. вували волокна, послідовно збільшуючи масу, до Одинична пероральна доза може включати від виявлення волокна, яке викликало реакцію, і запиприблизно 0,01 до приблизно 50мг, в оптимальносували дані цього волокна. Для кожної тварини му варіанті - від приблизно 0,1 до приблизно 10мг здійснювали три вимірювання у кожний момент сполуки. Одинична доза може вводитись один або часу для визначення середнього порогу висмикукілька разів на день у формі однієї або кількох вання. Випробування здійснювали до введення таблеток, кожна з яких містить від приблизно 0,1 медикаменту та через 1, 2, 4 та 24год після цього. до приблизно 10, краще - від приблизно 0,25 до Випробування тактильної алодинії та механічної 50мг сполуки або її сольватів. гіпералгезії здійснюють паралельно. Крім введення сполуки як необробленої хімічМеханічна гіпералгезія: Щурів переносили до ної речовини, сполуки винаходу можуть вводитись піднятої випробувальної клітки з підлогою з дротяяк частина фармацевтичної композиції, яка вклюної сітки і давали на акліматизацію від п'яти до чає відповідні фармацевтично прийнятні носії, десяти хвилин. Дещо затупленою голкою торкаливключаючи наповнювачі та допоміжні речовини, ся підошовної поверхні задньої лапи, викликаючи які сприяють переробці сполук на композиції, призаглиблення у шкірі без проникнення крізь шкіру. датні для фармацевтичного застосування. В оптиТоркання голкою до контрольної лапи, як правило, мальному варіанті композиції, зокрема ті, які мовикликало реакцію різкого здригання, яке було жуть вводитись перорально і можуть надто коротким, щоб бути зафіксованим за допозастосовуватися для оптимального типу введення, могою секундоміра, і час висмикування довільно наприклад, таблетки, драже та капсули, а також було оцінено у 0,5 секунди. Піддана маніпуляції композиції, які можуть вводитись ректально, налапа невропатичних тварин виявляла надмірну приклад, супозиторії, а також придатні розчини реакцію висмикування на затуплену голку. Макси 21 75883 22 для введення шляхом ін'єкції або перорально, самперед, регулятори витрати та мастила, напримістять від приблизно 0,01 до 99 відсотків, в оптиклад, кремнезем, тальк, стеаринова кислота або її мальному варіанті - від приблизно 0,25 до 75 відсолі, такі як стеарат магнію або стеарат кальцію, сотків активної(их) сполук(и) разом з наповнювата/або поліетиленгліколь. Ядра драже забезпечучем. ють відповідним покриттям, яке у разі необхідності Обсяг даного винаходу також охоплює нетокє стійким до шлункового соку. Для цього можуть сичні фармацевтично прийнятні солі сполук даного бути використані концентровані розчині сахаридів, винаходу. Кислі адиційні солі утворюють шляхом які необов'язково можуть містити гуміарабік, тальк, змішування розчину тієї чи іншої гетероарильної полівінілпіролідон, поліетиленгліколь та/або діоксполуки даного винаходу з розчином фармацевтисид титану, розчини глазурів та відповідні органічні чно прийнятної нетоксичної кислоти, такої як солярозчинники або суміші розчинників. Для створення на кислота, фумарова кислота, малеїнова кислота, покрить, стійких до шлункових соків, застосовують бурштинова кислота, оцтова кислота, лимонна розчини відповідних целюлозних композицій, таких кислота, винна кислота, вугільна кислота, фосфояк фталат ацетилцелюлози або фталат гідроксипрна кислота, щавлева кислота, дихлорооцтова ропілметилцелюлози. До покриття таблеток або кислота та подібні. Основні солі утворюють шлядраже додають барвники або пігменти, наприклад, хом змішування розчину гетероарильної сполуки для їх розрізнення або позначення комбінацій доз даного винаходу з розчином фармацевтично приактивної сполуки. йнятної нетоксичної основи, такої як гідроксид наІншими фармацевтичними композиціями, притрію, гідроксид калію, холінгідроксид, карбонат датними для перорального введення, є push-fit натрію та подібні. капсули з желатину, а також м'які геретичні капсуФармацевтичної композиції винаходу можуть ли з желатину та пластифікатора, такого як гліцевводитись будь-якій тварині, яка може відчути рин або сорбіт. Push-fit капсули можуть містити сприятливий вплив сполук винаходу. Насамперед, активні сполуки у формі гранул, які можуть бути до цих тварин належать ссавці, наприклад, людизмішані з наповнювачами, такими як лактоза, зв'яна, хоча винахід ними і не обмежується. зувальними речовинами, такими як крохмалі, Фармацевтичні композиції даного винаходу та/або мастилами, такими як тальк або стеарат можуть вводитись будь-яким способом, який замагнію, та (необов'язково) стабілізаторами. У м'ябезпечує досягнення мети. Наприклад, введення ких капсулах активні сполуки в оптимальному ваможе бути парентеральним, підшкірним, внутрішріанті є розчиненими або суспендованими у відпоньовенним, внутрішньом'язовим, внутрішньочеревідних рідинах, таких як олії жирних кислот або виним, крізьшкірним або букальним. В альтернарідкий парафін. Крім того, можуть бути використані тивному або рівноцінному варіанті введення може стабілізатори. відбуватись перорально. Доза, яка може бути ввеДо можливих фармацевтичних композицій, дена, залежить від віку, стану здоров'я та маси придатних для ректального застосування, налепацієнта, типу паралельного лікування, якщо таке жать, наприклад, супозиторії, які містять комбінапередбачено, частоти лікування та характеру потцію однієї або кількох активних сполук з основою рібного ефекту. для супозиторіїв. Придатними основами для супоФармацевтичні композиції даного винаходу зитроіїв є, наприклад, природні або синтетичні виробляються традиційними способами, напритригліцериди або насичені вуглеводні. Крім того, клад, шляхом традиційного змішування, гранулюзастосовують також желатинові ректальні капсули, вання, дражування, розчинення або ліофілізації. які складаються з комбінації активних сполук з Таким чином, фармацевтичні композиції для пероосновою. До можливих матеріалів основи налерального застосування одержують шляхом комбіжать, наприклад, рідкі тригліцериди, поліетиленгнування активних сполука з твердими наповнюваліколі, або насичені вуглеводні. чами, необов'язкового перемелювання одержаної До композицій, придатних для парентеральнов результаті суміші та обробки суміші гранул після го введення, належать водні розчини активних додавання відповідних допоміжних речовин у разі сполук у розчинній у воді формі, наприклад, розпотреби або необхідності, для одержання ядра чинні у воді солі та лужні розчини. Крім того, мотаблетки або драже. жуть вводитись суспензії активних сполук як приПридатними наповнювачами є, зокрема такі датні олійні суспензії для ін'єкцій. Придатними наповнювачі, як сахариди, наприклад, лактоза або ліпофільними розчинниками або наповнювачами є цукроза, маніт або сорбіт, целюлозні композиції жирні олії, наприклад, кунжутова олія або синтетита/або фосфати кальцію, наприклад, трикальційчні естери жирних кислот, наприклад, етилолеат, фосфат або гідрофосфат кальцію, а також зв'язуабо тригліцериди або поліетиленгліколь-400 (сповальні речовини, такі як крохмальна паста з виколуки є розчинними у PEG-400). Водні суспензії для ристанням, наприклад, кукурудзяного крохмалю, ін'єкцій можуть містити речовини, які збільшують пшеничного крохмалю, рисового крохмалю, картов'язкість суспензії, до яких належать, наприклад, пляного крохмалю, желатину, трагаканту, метилнатрійкарбоксиметилцелюлоза, сорбіт та/або декцелюлози, гідроксипропілметилцелюлози, натрійстран. Суспензія також необов'язково може містикарбоксиметилцелюлози та/або ти стабілізатори. полівінілпіролідону. Якщо потрібно, додають дисПредставлені нижче приклади є ілюстративпергатори, такі як вищезгадані крохмалі, а також ними і не обмежують спосіб та композиції даного карбоксиметил-крохмаль, зшитий полівінілпіролівинаходу. Суть та обсяг винаходу охоплюють тадон, агар або альгінова кислота або її сіль, така як кож інші підходящі модифікації та удосконалення альгінат натрію. Допоміжними речовинами є, наумов та параметрів, які зазвичай трапляються у 23 75883 24 клінічній терапії і які стануть зрозумілими спеціаліну реакцію, і розчин переносили до герметично стам у даній галузі. закритої пробірки і нагрівали при 70°С до наступ1-[4-(4-фторофенокси)феніл]-3-метилпіразол ного дня. Реакційну суміш концентрували і очищаа). 4-(4-фторофенокси)фенілгідразин гідрохли шляхом препаративної тонкошарової хроматоглорид. Суспензію подрібненого на тонкий порошок рафії з елюентом 50% ЕtOАс/гексан для 4-фторо-4'-амінодифенілового етеру (2,00г, одержання 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-39,84ммоль) у 10мл води охолоджували у ванні з карбоксаміду (Rf=0,26, 56мг, 52%), т. пл. 165льодяною водою і через лійку по краплях додава167°С. 1Н ЯМР (300МГц, DMSO-d6) 8,50 (d, ли 19,4мл конц. НСІ. Одержану в результаті суміш J=2,7Гц, 1Н, піразол), 7,92 (d, J=9,0Гц, 2H, феніл), охолоджували до -5°С у ванні з ацетоном та льо7,71 (br, 1H, NH2), 7,43 (m, 2H, фенокси), 7,39 (br, дом і до реакційної суміші по краплях додавали 1H, NH2), 7,18 (m, 1H, фенокси), 7,17 (d, J=9,0Гц, розчин нітриту натрію (кристалічний; 0,714г, 2H, феніл), 7,07 (m, 2H, фенокси), 6,87 (d, J=2,7Гц, 10,3ммоль) у 8мл холодної води з такою швидкіс1Н, піразол). тю, що температура залишалась у діапазоні від -5 Застосовуючи як вихідну сполуку 5до 0°С. Розчин SnCI2-2H2O (6,66г, 29,5ммоль) у етоксикарбоніл-1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразолом 20мл конц. НСІ при -20°С обробляли реакційною (50мг, 0,16ммоль), описаним вище способом одесумішшю, яку додавали порціями, підтримуючи ржували 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-5температуру на рівні нижче ніж -10°С. Відразу карбоксамід (25мг, 55%), т. пл. 142-144°С. 1Н ЯМР утворювався сірий осад, і одержану в результаті (300МГц, DMSO-d6) 8,03 (br s, 1H, NH2), 7,70 (d, суміш перемішували при -20°С протягом 90хв. J=1,8Гц, 1Н, піразол), 7,54 (brs, 1H, NH2), 7,42 (m, Тверду речовину відокремлювали шляхом фільт2H, фенокси), 7,39 (d, J=9,0Гц, 2H, феніл), 7,20 (m, рування і промивали холодним ЕtOН (2 10мкл). 1H, фенокси), 7,08 (m, 2H, фенокси), 7,06 (d, Необроблений гідразин, 2,36г, піддавали подальJ=9,0Гц, 2Н, феніл), 6,90 (d, J=1,8Гц, 1Н, піразол). шій обробці без очищення. 1-[4-(4-нітрофенокси)феніл]-1Н-[1,2,4]триазол б). 1-[4-(4-фторофенокси)феніл]-3Суміш 1-фторо-4-нітробензолу (0,17мл, метилпіразол. Суспензію гідразину (500мг, 1,6ммоль), 4-{[1,2,4]триазол-1-іл}фенолу (0,26г, 2,05ммоль) у 5,5мл 1:1 ЕtOН/води обробляли 1,58ммоль) та карбонату калію (1,69г, 12,2ммоль) 300мкл (299мг, 2,03ммоль) 90% ацетилацетальдеу DMF нагрівали з дефлегмацією до наступного гіддиметилацеталю і одержану в результаті суміш дня. Реакційну суміш охолоджували до кімнатної нагрівали за допомогою струменевої сушарки протемператури, а потім розподіляли між водою та тягом 2хв. Реакційній суміші давали охолонути і етилацетатом. Водний шар екстрагували етилацепісля цього екстрагували гексаном (4 10мл). Об'єтатом. Комбіновані органічні шари промивали водднані органічні шари промивали розсолом, висуним розчином гідроксиду натрію (2N), водою (двішували (Na2SO4) і концентрували. Залишок піддачі), висушували над сульфатом натрію, вали колонковій хроматографії (силікагель, 10% фільтрували і випарювали в умовах зниженого ЕtOАс/гексан), одержуючи 134мг (24%) названої тиску для одержання жовтої твердої речовини. сполуки сполука у вигляді білої твердої речовини, Очищення шляхом колонкової хроматографії (силікагель; 1:1 гексан/етилацетат) та рекристалізація т. пл. 80-81°С. 1Н ЯМР (CDCI3): 7,74 (s, 1H), 7,58 з хлороформу/гексану забезпечували 165мг (37%) (d, 2H, J=8,4Гц), 7,06-6,95 (m, 6Н), 6,23 (s, 1Н), 2,37 названої сполуки сполука у вигляді жовтої твердої (s, 3Н). речовини, т. пл. 131-132°С. 1Н-ЯМР (CDCI3): 8,55 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-3-карбоксамід та 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-5-карбоксамід (s, 1Н), 8,25 (d, J=9Гц, 2Н), 8,12 (s, 1Н), 7,75 (d, а). 3-етоксикарбоніл-(4-феноксифеніл)-1НJ=9Гц, 2H), 7,24 (d, J=9Гц, 2H), 7,08 (d, J=9Гц, 2Н). піразол та 5-етоксикарбоніл-1-(4-феноксифеніл)Антиконвульсантна активність сполук винахо1Н-піразол. До суспензії 4-феноксифенілборної ду кислоти (1,70г, 7,85ммоль), етил 3Здатність сполук даного винаходу до блокупіразолкарбоксилату (0,55г, 3,92ммоль), ацетату вання судом на максимальний електрошок (MES) міді(ІІ) (1,1г, 5,89ммоль) та 4Å молекулярних сит визначали описаним вище способом. (подрібнених на порошок і нагрітих при 200°С проСполуку даного винаходу перорально вводять тягом 2год перед використанням) у 30мл безводмиші за 30 хвилин до випробування. Сполука виного THF додавали 0,6мл піридину. Реакційну суявляє захисну дію від MES при ED50 (дозі, яка заміш перемішували з відкритою кришкою при хищає 50% тварин), яка в оптимальному варіанті кімнатній температурі протягом 2 днів, а потім фістановить менше ніж 10мг/кг. льтрували, і фільтрат концентрували до сухого Активність 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-3стану. Необроблений продукт очищали шляхом карбоксаміду як антиконвульсанту проти MES. При флеш-хроматографії з елюентом 15% внутрішньовенному введенні ED50 для миші ЕtOАс/гексан, одержуючи 5-етоксикарбоніл-1-(40,7мг/кг. ED50 1-[4-(4-нітрофенокси)феніл]-1Нфеноксифеніл)-1Н-піразолу (Rf=0,6, 55мг, 4,6%) та [1,2,4]триазолу проти MES при пероральному вве3-етоксикарбоніл-1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразолу денні 6,6мг/кг. ED50 1-(4-феноксифеніл)-1Н(Rf=0,5, 125мг, 10,3%). піразол-5-карбоксаміду проти MES при внутрішб). 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-3ньовенному введенні 10,0мг/кг. карбоксамід. Розчин 3-етоксикарбоніл-1-(4Активність сполуки винаходу як блокатора нафеноксифеніл)-1Н-піразолу (120мг, 0,39ммоль) у трієвих каналів 5мл 2N розчину аміаку в МеОН перемішували при Сполуки винаходу випробують шляхом електкімнатній температурі протягом 4 днів. Результати рофізіологічного аналізу та аналізу зв'язування, як тонкошарової хроматографії показали незавершеописано вище, і вони виявляють залежне від дози 25 75883 26 інгібування натрієвих струмів з регульованою навованих натрієвих каналів становить менше ніж пругою, яке фіксували у НЕК-293 клітинах, які ста400нМ. 1-(4-феноксифеніл)-1Н-піразол-3більно експресують rВІІА ізоформ Na+ каналів. карбоксамід випробували у rВІІА ізоформі натрієБлокуючий вплив оптимальних сполук на Na+ вого каналу, і він має Кі 0,35мкМ. струми був дуже чутливим до контрольної напруги, Тепер, після повного опису даного винаходу, вказуючи на те, що сполуки зв'язуються з потенціспеціалістам стане зрозуміло, що ті самі процедуалозалежними Na+ каналами в їх інактивованих ри можуть бути здійснені в широких межах рівностанах і є малоефективним щодо Na+ каналів у їх цінних умов, композицій та інших параметрів без спокійних станах [Ragsdale et al., Мої. Pharmacol. впливу на обсяг винаходу або будь-який варіант 40:756-7765(1991); Kuo and Bean, Моl. Pharmacol. його втілення. Усі згадані нами патенти та публі46:776-725(1994)]. Константа видимої дисоціації кації включено шляхом посилання в їх повному антагоніста (Kd) оптимальних сполуки для інактиобсязі. Комп’ютерна верстка О. Гапоненко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП ―Український інститут промислової власності‖, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601