Похідні бензоімідазолу як антипроліферативні агенти

1. Сполука, вибрана з групи, яка включає: (±)-1-{2-[5-(тетрагідрофуран-3-ілокси)бензоімідазол-1-іл]хінолін-8-іл}піперидин-4-іламін; (+)-1-{2-[5-(тетрагідрофуран-3ілокси)бензоімідазол-1-іл]хінолін-8-іл}піперидин-4іламін; (-)-1-{2-[5-(тетрагідрофуран-3ілокси)бензоімідазол-1-іл]хінолін-8-іл}піперидин-4іламін; 1-{2-[5-(3-метилоксетан-3ілметокси)бензоімідазол-1-іл]хінолін-8іл}піперидин-4-іламін; 1-{2-[5-(тетрагідропіран-4-ілокси)бензоімідазол-1іл]хінолін-8-іл}піперидин-4-іламін і фармацевтично прийнятні солі, проліки, гідрати і сольвати вищезазначених сполук. 2 (19) 1 3 81915 4 сольвату в кількості, ефективній для лікування форми, гідрату або сольвату, у комбінації з анормального росту клітини. протипухлинним агентом, вибраним з групи, яка включає інгібітори мітозу, алкілуючі агенти, 10. Спосіб лікування антиметаболіти, інтеркалюючі антибіотики, гіперпроліферативного розладу у ссавця, який інгібітори фактора росту, інгібітори клітинного включає введення згаданому ссавцю циклу, ензими, інгібітори топоізомерази, терапевтично ефективної кількості сполуки, як модифікатори біологічної відповіді, антигормони, визначено в будь-якому з пунктів 1-7, або її інгібітори ангіогенезису і антиандрогени. фармацевтично прийнятної солі, пролікарської Даний винахід стосується нових похідних бензімідазолу, придатних для лікування патологічного росту клітин, такого як рак, у ссавців. Даний винахід також стосується способу застосування таких сполук при лікуванні патологічного росту клітин у ссавців, особливо у людей, а також фармацевтичних сполук, які містять такі сполуки. Відомо, що клітини можуть стати раковими внаслідок трансформації частини їх ДНК в онкоген (тобто ген, який при його активації викликає утворення злоякісних пухлинних клітин). Багато онкогенів кодують білки, які є аберантними тирозинкіназами, здатними викликати таку трансформацію клітин. Альтернативно, надмірна експресія нормальної протоонкогенної тирозинкінази може також викликати проліферативні розлади, які інколи обумовлюють виникнення злоякісного фенотипу. Рецепторні тирозинкінази є ферментами, які пронизують клітину мембрану і мають зовнішньоклітинний домен, що зв'язує фактори росту, такі як епідермальний фактор росту, трансмембранний домен, а також внутрішньоклітинний домен, які виступає у функції кінази, що фосфорилює окремі тирозинові залишки у білках і, таким чином, впливає на проліферацію клітин. Іншими рецепторними тирозинкіназами є c-erbB-2, c-met, tie-2, PDGFr, FGFr і VEGFR. Відомо, що такі кінази часто аберантно експресуються при звичайних ракових станах у людей, таких як рак грудей, гастроінтестинальний рак, такий як рак товстої кишки, прямої кишки або рак шлунку, лейкемія, а також рак яєчників, бронхів або підшлункової залози. Також знайдено підтвердження тому, що рецептор епідермального фактора росту (EGFR), який має активність тирозинкінази, мутує та/або надмірно експресується при багатьох ракових захворюваннях у людей, таких як пухлини мозку, легень, сквамозних клітин, міхура, шлунку, гр удей, голови та шиї, стравоходу, гінекологічних пухлинах та щи товидної залози. Відповідно, було визнано, що інгібітори рецепторних тирозинкіназ є корисними у якості селективних інгібіторів росту клітин пухлин у ссавців. Наприклад, ербстатин, інгібітор тирозинкінази, у атимічних голих мишей селективно пригнічує ріст карциноми молочної залози людини, при якій експресується тирозинкіназний рецептор епідермального фактору росту (EGFR), але не впливає на ріст інших карцином, при яких не експресується рецептор EGF. Таким чином, сполуки згідно з даним винаходом, які є селективними інгібіторами деяких рецепторних тирозинкіназ, зокрема PDGFr, є корисними при лікуванні патологічного росту клітин, зокрема раку, у ссавців. Багато інших сполук, таких як похідні стиролу, також були представлені як такі, що здатні інгібувати тирозинкіназу. Нещодавно, у [п'ятьох публікаціях Європейських патентів, а саме ЕР 0566226 А1 (опублікованому 20 жовтня 1993), ЕР 0602851 А1 (опублікованому 22 червня 1994), ЕР 0635507 А1 (опублікованому 25 січня 1995), ЕР 0635498 А1 (опублікованому 25 січня 1995) і ЕР 0520722 А1 (опублікованому 30 грудня 1992)] були описані певні біциклічні похідні, зокрема похідні хіназоліну, які мають протиракові властивості, які обумовлені здатністю інгібувати тирозинкіназу. Також [патентна заявка WO 92/20642 (опублікована 26 листопада 1992)] стосується деяких біс-моно і дициклічних арильних і гетероарильних сполук у якості інгібіторів тирозинкінази, корисних при інгібуванні патологічної клітинної проліферації. Світові [патентні заявки WO96/16960 (опублікована 6 червня 1996), WO 96/09294 (опублікована 6 березня 1996), WO 97/30034 (опублікована 21 серпня 1997), WO 98/02434 (опублікована 22 січня 1998), WO 98/02437 (опублікована 22 січня 1998) і WO 98/02438 (опублікована 22 січня 1998)] також стосуються заміщених біциклічних гетероароматичних похідних у якості інгібіторів тирозинкінази, які є корисними у тих же цілях. Також [див. WO 99/16755, J. Med. Chem. 1998, 41, 5457-5465 і J. Med. Chem. 1999, 42, 2373-2382]. Даний винахід стосується сполуки формули 1 або її фармацевтично прийнятної солі, проліків, гідрату або сольвату, де кожний R1, R2, і R3, незалежно, вибраний з Н, С1-С6 алкілу, С3-С6 циклоалкілу, галогену, ціано, CF3, ди фторметокси, трифторметокси, ОС1-С6 алкілу, ОС3-С6 циклоалкілу і NR7RB; 5 81915 6 де R4 є -(CR5R6)nH, або -(CR5R6)m(4-10зазначена 5-членна гетероциклічна група, членний гетероцикл), де n є цілим числом у необов'язково, заміщена 1 R1 замісником. проміжку від 1 до 5, де m є цілим числом у У найбільш переважному втіленні винахід проміжку від 0 до 5, де зазначений 4-10-членний стосується сполук формули 1, де R4 є -(СН2)m(4гетероцикл, якщо є ароматичним, необов'язково членний гетероцикл), в якому m є 1 і в якому заміщений 1-3 R1 замісниками, і де зазначений 4зазначена 4-членна гетероциклічна група, 10-членний гетероцикл, якщо є неароматичним, необов'язково, заміщена 1 R1 замісником. необов'язково заміщений 1-3 R7 замісниками у В іншому втіленні даного винаходу R 4 є 5 6 будь-якому положенні і, необов'язково, заміщений (CR R )m(4-10-членний гетероцикл), де m є цілим 1-3 R9 замісниками у будь-якому положенні не числом у проміжку від 0 до 5 і де зазначена 4-10сусідньому до або безпосередньо приєднаному до членна гетероциклічна група, необов'язково, гетероатому; заміщена 1-3 R7 замісниками у будь-якому де кожний R5 і R6, незалежно, вибраний з Η положенні і, необов'язково, заміщена 1-3 R9 7 8 або С1-С6 алкілу; де кожний R і R , незалежно, замісниками у будь-якому положенні не сусідньому вибраний з Н, С1-С6 алкілу і С 3-С6 циклоалкілу; і де до або безпосередньо приєднаному до кожний R9, незалежно, вибраний з галогену, ціано, гетероатому. CF3, ди фторметокси, трифторметокси, ОС1-С6 В іншому втіленні даного винаходу R 4 є алкілу, ОС3-С6 циклоалкілу і NR7R8. (СН2)m(4-10-членний гетероцикл), де m є цілим В одному втіленні даного винаходу кожний R1, числом у проміжку від 0 до 3 і де зазначена 4-10R2 і R3, незалежно, вибраний з Н, С1-С6 алкілу, і членна гетероциклічна група, необов'язково, С3-С6 циклоалкілу, галогену і ціано. заміщена 1-3 R7 замісниками у будь-якому 4 В одному втіленні даного винаходу R є положенні і, необов'язково, заміщена 1-3 R9 5 6 (CR R )mH. замісниками у будь-якому положенні не сусідньому В іншому втіленні даного винаходу R 4 є до або безпосередньо приєднаному до (CR5R6)m(4-10-членний гетероцикл), де m є цілим гетероатому. числом у проміжку від 0 до 5 і де зазначена 4-10Винахід також стосується сполук формули 1, членна гетероциклічна група, необов'язково, де R4 є -(СН2)m(4-10-членний гетероцикл), де m є заміщена 1-3 R1 замісниками. цілим числом у проміжку від 0 до 3 і де зазначена В іншому втіленні даного винаходу R 4 є 4-10-членна гетероциклічна група, необов'язково, (СН2)m(4-10-членний гетероцикл), де m є цілим заміщена 1-2 R7 замісниками у будь-якому числом у проміжку від 0 до 3 і де зазначена 4-10положенні і, необов'язково, заміщена 1-2 R9 членна гетероциклічна група, необов'язково, замісниками у будь-якому положенні не сусідньому заміщена 1-3 R1 замісниками. до або безпосередньо приєднаному до Винахід також стосується сполук формули 1, гетероатому. де R4 є -(СН2)m(4-10-членний гетероцикл), де m є Винахід також стосується сполук формули 1, цілим числом у проміжку від 0 до 3 і де зазначена де R4 є -(СН2)m(4-10-членний гетероцикл), де m є 4-10-членна гетероциклічна група, необов'язково, цілим числом у проміжку від 0 до 2 і де зазначена заміщена 1-2 R1 замісниками. 4-10-членна гетероциклічна група, необов'язково, Винахід також стосується сполук формули 1, заміщена 1 R7 замісником у будь-якому положенні 4 де R є -(СН2)m(4-10-чпенний гетероцикл), де m є і, необов'язково, заміщена 1 R9 замісником у будьцілим числом у проміжку від 0 до 2 і де зазначена якому положенні не сусідньому до або 4-10-членна гетероциклічна група, необов'язково, безпосередньо приєднаному до гетероатому. заміщена 1 R1 замісником. Винахід також стосується сполук формули 1, Винахід також стосується сполук формули 1, де R4 є -(СН2) m(4-10-членний гетероцикл), в якому де R4 є -(СН2) m(4-10-членний гетероцикл), в якому m є 1 і де зазначена 4-10-членна гетероциклічна m є 1 і де зазначена 4-10-членна гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1 R7 замісником у група, необов'язково, заміщена 1 R1 замісником. будь-якому положенні і, необов'язково, заміщена 1 Винахід також стосується сполук формули 1, R9 замісником у будь-якому положенні не де R4 є -(СН2)m(4-8-членний гетероцикл), в якому сусідньому до або безпосередньо приєднаному до m є 1 і в якому зазначена 4-8-членна гетероатому. гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1 Винахід також стосується сполук формули 1, R1 замісником. де R4 є -(СН2)m(4-8-членний гетероцикл), в якому Винахід також стосується сполук формули 1, m є 1 і в якому зазначена 4-8-членна де R4 є -(СН2)m(4-6-членний гетероцикл), в якому гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1 m є 1 і в якому зазначена 4-6-членна R7 замісником у будь-якому положенні і, гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1 необов'язково, заміщена 1 R9 замісником у будь1 R замісником. якому положенні не сусідньому до або У переважному втіленні винахід стосується безпосередньо приєднаному до гетероатому. сполуки формули 1, де R4 є -(СН2)m(6-членний Винахід також стосується сполук формули 1, гетероцикл), в якому m є 1 і в якому зазначена 6де R4 є -(СН2)m(4-6-членний гетероцикл), в якому членна гетероциклічна група, необов'язково, m є 1, в якому зазначена 4-6-членна заміщена 1 R1 замісником. гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1 У більш переважному втіленні винахід R7 замісником у будь-якому положенні і, стосується сполук формули 1, де R4 є -(СН2)m(5необов'язково, заміщена 1 R9 замісником у будьчленний гетероцикл), в якому m є 1 і в якому якому положенні не сусідньому до або безпосередньо приєднаному до гетероатому. 7 81915 8 У переважному втіленні винахід стосується В іншому окремому втіленні даного винаходу сполуки формули 1, де R4 є -(СН2)m(6-членний R4 є -(CR5R6)m(5-членний гетероцикл), де m є гетероцикл), в якому m є 1 і в якому зазначена 6цілим числом у проміжку від 0 до 2 і в якому членна гетероциклічна група, необов'язково, зазначена 5-членна гетероциклічна група, заміщена 1 R7 замісником у будь-якому положенні необов'язково, заміщена 1-3 R1 замісниками. і, необов'язково, заміщена 1 R9 замісником у будьВ іншому окремому втіленні даного винаходу якому положенні не сусідньому до або R4 є -(CR5R6)m(4-членний гетероцикл), де m є безпосередньо приєднаному до гетероатому. цілим числом у проміжку від 0 до 2 і в якому У більш переважному втіленні винахід зазначена 4-членна гетероциклічна група, стосується сполук формули 1, де R4 є -(СН2)m(5необов'язково, заміщена 1-3 R1 замісниками. членний гетероцикл), в якому m є 1, в якому В іншому окремому втіленні даного винаходу зазначена 5-членна гетероциклічна група, гетероциклічна група R4 містить від одного до необов'язково, заміщена 1 R7 замісником у будьчотирьох гетероатомів, кожний вибраний з О, S і якому положенні і, необов'язково, заміщена 1 R 9 N, за умови, що 4-10-членне гетероциклічне кільце замісником у будь-якому положенні не сусідньому не містить два сусідніх атоми О або S. до або безпосередньо приєднаному до В іншому окремому втіленні даного винаходу гетероатому. гетероциклічна група R4 містить від одного до У найбільш переважному втіленні винахід чотирьох атомів О за умови, що кільце не містить стосується сполук формули 1, де R4 є -(СН2)m(4два сусідніх атоми О. членний гетероцикл), в якому m є 1, в якому В іншому окремому втіленні даного винаходу зазначена 4-членна гетероциклічна група, гетероциклічна група R4 містить від одного до необов'язково, заміщена 1 R7 замісником у будьчотирьох атомів О за умови, що кільце не містить якому положенні і, необов'язково, заміщена 1 R 9 два сусідніх атоми О. замісником у будь-якому положенні не сусідньому В іншому окремому втіленні даного винаходу до або безпосередньо приєднаному до гетероциклічна група R4 містить один атом О. гетероатому. В іншому окремому втіленні даного винаходу У переважному втіленні даний винахід гетероциклічна група R4 містить від одного до стосується сполук формули 1, де зазначений 4-10чотирьох атомів N. членний гетероцикл вибраний з групи, яка включає В іншому окремому втіленні даного винаходу піролідиніл, тетрагідрофураніл, тетрагідропіраніл, гетероциклічна група R4 містить від одного до двох тетрагідротіопіраніл, морфоліно і оксетаніл. атомів N. В одному втіленні даний винахід стосується В іншому окремому втіленні даного винаходу сполук формули 1, в яких R1 вибраний з групи, яка гетероциклічна група R4 містить один атом N. включає Н, С1-С6 алкіл, С3-С6 циклоалкіл, галоген і В іншому окремому втіленні даного винаходу ціано. R4 є -(CR5R6) m(4-10-членний неароматичний В одному втіленні даного винаходу стосується гетероцикл), де m є цілим числом у проміжку від 0 сполук формули 1, в яких R1 гр упа є С 1-С6 алкілом, до 1 і де зазначена 4-10-членна гетероциклічна вибраним з метилу, бутилу, етилу, пропілу і група, необов'язково, заміщена1-3 R7замісниками. пентилу. В іншому окремому втіленні даного винаходу В іншому втіленні даного винаходу С 1-С6 алкіл R4 є -(CR5R6)m(4-8-членний неароматичний вибраний з метилу, бутилу, етилу і пропілу. гетероцикл), де m є цілим числом у проміжку від 0 У переважному втіленні R1 група є С1-С6 до 1 і в якому зазначена 4-8-членна неароматична алкілом, вибраним з метилу, бутилу і етилу. У гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1-3 більш переважному втіленні R1 групою є метил. R7 замісниками. 5 В іншому втіленні даного винаходу кожний R і В іншому окремому втіленні даного винаходу R6 сполуки формули 1 незалежно вибраний з R4 є -(CR5R6)m(4-6-членний неароматичний метилу, етилу, пропілу і бутилу. гетероцикл), де m є цілим числом у проміжку від 0 У переважному втіленні кожний R5 і R6, до 1 і в якому зазначена 4-6-членна неароматична незалежно, вибраний з метилу і етилу. У більш гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1-3 переважному втіленні кожний R5 і R6 є метилом. R7 замісниками. В іншому окремому втіленні даного винаходу В іншому окремому втіленні даного винаходу R4 є -(CR5R6)m(4-8-членний гетероцикл), де m є R4 є -(CR5R6)m(6-членний неароматичний цілим числом у проміжку від 0 до 3 і в якому гетероцикл), де m є цілим числом у проміжку від 0 зазначена 4-8-членна гетероциклічна група, до 1 і в якому зазначена 6-членна неароматична необов'язково, заміщена 1-3 R1 замісниками. гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1-3 В іншому окремому втіленні даного винаходу R7 замісниками. 4 5 6 R є -(CR R )m(4-6-членний гетероцикл), де m є В іншому окремому втіленні даного винаходу цілим числом у проміжку від 0 до 3 і де зазначена R4 є -(CR5R6)m(5-членний неароматичний 4-10-членна гетероциклічна група, необов'язково, гетероцикл), де m є цілим числом у проміжку від 0 заміщена 1-З R1 замісниками. до 1 і в якому зазначена 5-членна неароматична В іншому окремому втіленні даного винаходу гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1-3 R4 є -(CR5R6)m(6-членний гетероцикл), де m є R7 замісниками. цілим числом у проміжку від 0 до 3 і в якому В іншому окремому втіленні даного винаходу зазначена 6-членна гетероциклічна група, R4 є -(СР5Р6)m(4-членний неароматичний 1 необов'язково, заміщена 1-3 R замісниками. гетероцикл), де m є цілим числом у проміжку від 0 до 1 і в якому зазначена 4-членна неароматична 9 81915 10 гетероциклічна група, необов'язково, заміщена 1-3 1-{2-[5-(3-морфолін-4-іл-пропокси)R7 замісниками. бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін; В іншому окремому втіленні даного винаходу (+)-1-{2-[5-(тетрагідро-фуран-3-ілокси)зазначений 4-10-членний гетероцикл вибраний з бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін; групи, яка включає азетидиніл, тіазоліл, хінолініл, (-)-1-{2-[5-(тетрагідро-фуран-3-ілокси)піролідиніл, тетрагідрофураніл, тетрагідротиєніл, бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін; тетрагідропіраніл, тетрагідротіопіраніл, і фармацевтично прийнятні солі, проліки, гідрати і піперидино, морфоліно, тіоморфоліно, сольвати вищезазначених сполук. піперазиніл, гомопіперазиніл, оксетаніл, В іншому переважному втіленні сполука гомопіперидиніл, індолініл, діоксаніл, 3вибрана з групи, яка включає 1-{2-[5-(3-морфоліназабіцикло[3.1.0]гексаніл, 34-іл-пропокси)-бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}азабіцикло[4.1.0]гептаніл, азабіцикло[2.2.2]гексаніл піперідин-4-іламін; і фармацевтично прийнятні і 2Н-індоліл. солі, проліки, гідрати і сольвати вищезазначеної В іншому окремому втіленні даного винаходу сполуки. 4-10-членний гетероцикл вибраний з групи, яка В іншому переважному втіленні сполука включає піридиніл, імідазоліл, піримідиніл, вибрана з групи, що включає 1-{2-[5-(3-метилпіразоліл, тріазоліл, піразиніл, тетразоліл, фурил, оксетан-3-ілметокси)-бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8тієніл, ізоксазоліл, тіазоліл, оксазоліл, ізотіазоліл, іл}-піперідин-4-іламін; і фармацевтично прийнятні піроліл, хінолініл, ізохінолініл, індоліл, солі, проліки, гідрати і сольвати вищезазначеної бензімідазоліл, бензофураніл, цинолініл, сполуки. індазоліл, індолізиніл, фталазиніл, піридазиніл, В іншому переважному втіленні сполука триазиніл, ізоіндоліл, птеридиніл, пуриніл, вибрана з групи, яка включає 1-[2-(5-ізобутоксиоксадіазоліл, тіадіазоліл, фуразаніл, бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4-іламін; бензофуразаніл, бензотіофеніл, бензотіазоліл, і фармацевтично прийнятні солі, проліки, гідрати і бензоксазоліл, хіназолініл, хіноксалініл, сольвати вищезазначеної сполуки. нафтиридиніл і фуропіридиніл. В іншому переважному втіленні сполука В іншому окремому втіленні даного винаходу вибрана з групи, яка включає 1-{2-[5-(тетрагідрозазначений 4-10-членний гетероцикл вибраний з піран-4-ілокси)-бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}групи, яка включає піролідиніл, тетрагідрофураніл, піперідин-4-іламін; і фармацевтично прийнятні тетрагідропіраніл, тетрагідротіопіраніл, солі, проліки, гідрати і сольвати вищезазначеної піперидино, морфоліно, піперазиніл, сполуки. гомопіперазиніл, азетидиніл, оксетаніл, В одному переважному втіленні сполука згідно гомопіперидиніл, 3-азабіцикло[3.1.0]гексаніл, 3з даним винаходом є бензолсульфонатною сіллю азабіцикло[4.1.0]гептаніл, будь-якої з вищезазначених сполук. азабіцикло[2.2.2]гексаніл, 3H-індоліл і хінолізиніл. Винахід також стосується способу лікування В іншому окремому втіленні даного винаходу патологічного росту клітин у ссавців, який включає зазначений 4-10-членний гетероцикл вибраний з введення ссавцю кількості сполуки формули 1, групи, яка включає піролідиніл, тетрагідрофураніл, ефективної для лікування патологічного росту тетрагідропіраніл, тетрагідротіопіраніл, морфоліно клітин. і оксетаніл. В одному переважному втіленні даного В іншому окремому втіленні даного винаходу винаходу патологічним ростом клітини є рак. зазначений 4-10-членний гетероцикл вибраний з В одному втіленні даного винаходу рак групи, яка включає тетрагідрофураніл, вибраний з раку легенів, раку кісток, раку тетрагідропіраніл, тетрагідротіопіраніл, морфоліно підшлункової залози, раку шлунку, шкіри, раку і оксетаніл. голови або шиї, шкірної або внутрішньоочної В іншому окремому втіленні даного винаходу меланоми, раку матки, раку яєчників, зазначений 4-10-членний гетероцикл вибраний з гінекологічного раку, раку прямої кишки, раку групи, яка включає тетрагідрофураніл, морфоліно, анальної зони, раку шлунку, раку то встої кишки, оксетаніл і 4Н-піраніл. раку грудей, раку матки, карциноми фаллопієвих Переважними сполуками є вибрані з групи, яка труб, карциноми ендометрію, цервікальної включає: карциноми, карциноми піхви, карциноми вульви, 1-{2-[5-(3-морфолін-4-іл-пропокси)хвороби Ходжкінса, раку стравоходу, раку тонкої бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін; кишки, раку ендокринних залоз, раку щитовидних (±)-1-{2-[5-(тетрагідро-фуран-3-ілокси)залоз, раку паращитовидних залоз, раку бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін; надниркових залоз, саркоми м'яких тканин, раку 1-{2-[5-(3-метил-оксетан-3-ілметокси)уретри, раку пенісу, сквамозних клітин, раку бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін; простати, хронічної або гострої лейкемії, 1-[2-(5-ізобутокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолінлімфоцитної лімфоми, раку міхура, раку нирок або 8-іл]-піперідин-4-іламін; сечоводу, гіпернефроїдного раку, карциноми 1-{2-[5-(тетрагідро-піран-4-ілокси)ниркової миски, неоплазм центральної нервової бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін; системи (ЦНС), первинних лімфом ЦНС, пухлини і фармацевтично прийнятні солі, проліки, гідрати і спинальних аксонів, мозку, аденоми гіпофізу, або сольвати вищезазначених сполук. комбінації одного або більшої кількості вище В одному переважному втіленні сполука перерахованих ракових станів. вибрана з групи, яка включає: У переважному втіленні даного винаходу рак вибраний з групи, яка включає рак мозку, 11 81915 12 сквамозних клітин, пухиря, шлунку, підшлункової або її фармацевтично прийнятної солі, залози, грудей, голови, шиї, страво ходу, простати, проліків, гідрату або сольвату, де кожний R1, R2, і прямої кишки, легень, нирок, яєчника, R3, незалежно, вибраний з Н, С1-С6 алкілу, С3-С6 гінекологічного раку і раку щитовидної залози. циклоалкілу, галогену, ціано, CF3, ди фторметокси, У переважному втіленні даного винаходу рак трифторметокси, ОС1-С6 алкілу, ОС3-С6 вибраний з групи, яка включає рак простати, циклоалкілу і NR7R8; грудей, легень, товстої кишки і яєчників. де R4 є -(CR5R6)nH, або -(CR5R6)m(4-10В іншому переважному втіленні даного членний гетероцикл), де n є цілим числом у винаходу рак вибраний з групи, яка включає рак проміжку від 1 до 5, де m є цілим числом у простати, грудей і легень. проміжку від 0 до 5, де зазначений 4-10-членний У більш переважному втіленні рак грудей є гетероцикл, якщо є ароматичним, необов'язково метастатичним раком грудей. У більш заміщений 1-3 R1замісниками, і де зазначений 4переважному втіленні рак легень є 10-членний гетероцикл, якщо є неароматичним, недрібноклітинним раком легень. В іншому необов'язково заміщений 1-3 R7 замісниками у втіленні даного винаходу патологічний ріст клітин будь-якому положенні і, необов'язково, заміщений не є раковим. 1-3 R9 замісниками у будь-якому положенні не В одному втіленні даного винаходу нераковий сусідньому до або безпосередньо приєднаному до патологічний ріст клітин є аденокарциномою гетероатому; простати або шкіри. де кожний R5 і R6, незалежно, вибраний з Η Винахід також стосується способу лікування або С1-С6 алкілу; васкулогенезису, рестенозу, атеросклерозу або де кожний R7 і R8, незалежно, вибраний з Н, ангіогенезису у ссавців, який включає введення С1-С6 алкілу і С 3-С6циклоалкілу; і ссавцю терапевтично ефективної кількості сполуки де кожний R9, незалежно, вибраний з галогену, формули 1, або фармацевтично прийнятної солі, ціано, CF3, дифторметокси, трифторметокси, ОС1проліків або гідратів сполуки формули 1, яка є С6 алкілу, ОС3-С6 циклоалкілу і NR7R8, ефективної при лікуванні васкулогенезису, який включає обробку сполуки формули 2 рестенозу, атеросклерозу або ангіогенезису. В одному переважному втіленні даний винахід стосується способу лікування захворювання, асоційованого з васкулогенезисом або ангіогенезисом. В одному втіленні даний винахід стосується способу лікування гіперпроліферативного розладу у ссавців, який включає введення ссавцю терапевтично ефективної кількості сполуки формули 1, або фармацевтично прийнятної солі, проліків або гідратів у комбінації з протипухлинним кислотою з одержанням сполуки формули 1. агентом, вибраним з групи, яка включає інгібітори Винахід також стосується фармацевтичної мітозу, алкілюючі агенти, антиметаболіти, композиції для лікування гіперпроліферативного інтеркалюючі антибіотики, інгібітори фактора розладу у ссавців, яка включає терапевтично росту, інгібітори клітинного циклу, ензими, ефективну кількість сполуки формули 1, або її інгібітори топоізомерази, модифікатори біологічної фармацевтично прийнятної солі, проліків або відповіді, антигормони, інгібітори ангіогенезису і гідратів, і фармацевтично прийнятний носій. В антиандрогени. одному втіленні, зазначена фармацевтична Винахід також стосується фармацевтичної композиція призначена для лікування раку, такого композиції для лікування патологічного росту як рак мозку, легень, сквамозних клітин, пухиря, клітин у ссавців, яка містить кількість сполуки шлунку, підшлункової залози, грудей, голови, шиї, формули 1, ефективної для лікування нирок, яєчників, простати, прямої кишки, патологічного росту клітин і фармацевтично стравоходу, яєчка, гінекологічного раку або раку прийнятний носій. щитовидної залози. В іншому втіленні, зазначена В одному втіленні даного винаходу фармацевтична композиція призначена для фармацевтична композиція, яка містить сполуку лікування неракового гіперпроліферативного формули 1, застосовується для лікування розладу, такого як аденокарцинома шкіри патологічного росту клітин, такого як рак. (наприклад псоріаз), рестеноз, або захворювань Винахід також стосується способу одержання простати, таких як, наприклад доброякісна сполуки формули 1 гіпертрофія простати (ДГП). Винахід також стосується фармацевтичної композиції для лікування панкреатиту або захворювань нирок (включаючи проліферативний гломерулонефрит і захворювання нирок, обумовлені діабетом) у ссавців, яка містить терапевтично ефективну кількість сполуки формули 1, або її фармацевтично прийнятної солі, проліків або гідратів, і фармацевтично прийнятний носій. 13 81915 14 Винахід також стосується фармацевтичної фармацевтично прийнятної солі, проліків або композиції для запобігання імплантації гідратів. бластоцитів у ссавців, яка містить терапевтично Винахід також стосується способу лікування ефективну кількість сполуки формули 1, або її захворювань, пов'язаних з васкулогенезисом або фармацевтично прийнятної солі, проліків або ангіогенезисом, у ссавців, який включає введення гідратів, і фармацевтично прийнятний носій. ссавцю ефективної кількості сполуки формули 1, Винахід також стосується фармацевтичної або її фармацевтично прийнятної солі, проліків композиції для лікування захворювання, або гідратів. В одному втіленні, такий спосіб пов'язаного з васкулогенезисом, рестенозом, призначений для лікування захворювання атеросклерозом або ангіогенезисом у ссавців, яка вибраного з групи, яка включає пухлинний включає терапевтично ефективну кількість ангіогенез, хронічні запальні захворювання, такі як сполуки формули 1, або її фармацевтично ревматоїдний артрит, атеросклероз, прийнятної солі, проліків або гідратів, і захворювання шкіри, такі як псоріаз, екзема і фармацевтично прийнятний носій. В одному склеродерма, діабет, діабетичну ретинопатію, втіленні, така фармацевтична композиція ретинопатію недоношених, вікову дегенерацію призначена для лікування захворювання сітківки, гемангіому, гліому, меланому, саркому вибраного з групи, яка включає пухлинний Капоші і рак яєчників, грудей, легень, підшлункової ангіогенезис, хронічні запальні захворювання, такі залози, простати, товстої кишки, і епідермоїдний як ревматоїдний артрит, атеросклероз, рак. захворювання шкіри, такі як псоріаз, екзема і Пацієнти, які підлягають лікуванню сполуками склеродерма, діабет, діабетичну ретинопатію, формули 1 і фармацевтично прийнятними солями, ретинопатію недоношених, вікову дегенерацію проліками і гідратами сполук відповідно до сітківки, гемангіому, гліому, меланому, саркому способу згідно з даним винаходом, є такими, яким Капоші і рак яєчників, грудей, легень, підшлункової поставлено такий діагноз як, наприклад, псоріаз, залози, простати, товстої кишки, епідермоїдний рестеноз, атеросклероз, ДГП, рак легень, рак рак. кісток, CMML, рак підшлункової залози, рак шкіри, Винахід також стосується способу лікування рак голови і шиї, шкірна або внутрішньоочна гіперпроліферативного розладу у ссавців, який меланома, рак матки, рак яєчників, рак прямої включає введення ссавцю терапевтично кишки, рак анальної області, рак шлунку, рак ефективної кількості сполуки формули 1, або її товстої кишки, рак грудей, яєчка, гінекологічні фармацевтично прийнятної солі, проліків або пухлини (наприклад, саркома матки, карцинома гідратів. В одному втіленні, такий спосіб фалопієвих труб, карцинома ендометрію, стосується лікування раку, такого як рак мозку, карцинома шийки матки, карцинома піхви або сквамозних клітин, пухиря, шлунку, підшлункової карцинома вульви), хвороба Ходжкіна, рак залози, грудей, голови, шиї, страво ходу, простати, стравоходу, рак тонкої кишки, рак ендокринної прямої кишки, легень, нирок, яєчників, яєчка, системи (наприклад, рак щитовидної, гінекологічного раку або раку щитовидної залози. паращитовидної або надниркової залоз), саркоми В іншому втіленні, такий спосіб стосується м'яких тканин, рак утретри, рак пенісу, рак лікування неракового гіперпроліферативного простати, хронічна або гостра лейкемія, солідні розладу, такого як аденокарцинома шкіри пухлини у дітей, лімфоцитні лімфоми, рак пухиря, (наприклад псоріаз), рестеноз або захворювання рак нирок або сечоводу (наприклад, карцинома простати такого як, наприклад, доброякісна нирки, карцинома ниркових мисок), або неоплазми гіпертрофія простати (ДГП). центральної нервової системи (наприклад, Винахід також стосується способу лікування первинна лімфома ЦНС, пухлини спинальних гіперпроліферативного розладу у ссавців, який аксонів, гліоми стовбура мозку або аденоми включає введення ссавцю терапевтично гіпофізу). ефективної кількості сполуки формули 1, або її Винахід також стосується фармацевтичної фармацевтично прийнятної солі, проліків або композиції для інгібування патологічного росту гідратів, у комбінації з терапевтично ефективною клітин у ссавців, яка містить сполуку формули 1, кількістю протипухлинного агента, вибраного з або її фармацевтично прийнятну сіль, сольват або групи, яка включає інгібітори мітозу, алкілюючі проліки, у комбінації з хіміотерапевтичним агенти, антиметаболіти, інтеркалюючі антибіотики, агентом, причому кількості сполуки, солі, сольвату інгібітори фактора росту, інгібітори клітинного або проліків, а також хіміотерапевтичного агента у циклу, ензими, інгібітори топоізомерази, поєднанні є достатніми для інгібування модифікатори біологічної відповіді, антигормони, патологічно росту клітин. Багато інгібітори ангіогенезису і антиандрогени. хіміотерапевтичних агентів є відомими у цій галузі. Винахід також стосується способу лікування В одному втіленні, хіміотерапевтичний агент панкреатиту або ниркових захворювань у ссавців, вибраний з групи, яка включає інгібітори мітозу, який включає введення ссавцю терапевтично алкілюючі агенти, антиметаболіти, інтеркалюючі ефективної кількості сполуки формули 1, або її антибіотики, інгібітори фактора росту, інгібітори фармацевтично прийнятної солі, проліків або клітинного циклу, ензими, інгібітори топоізомерази, гідратів. модифікатори біологічної відповіді, антигормони, Винахід також стосується способу запобігання наприклад антиандрогени. імплантації бластоцитів у ссавців, який включає Цей винахід також стосується способу введення ссавцю терапевтично ефективної інгібування патологічного росту клітин у ссавців кількості сполуки формули 1, або її або лікування гіперпроліферативного розладу, 15 81915 16 який включає введення ссавцю такої кількості 99/29667 (опублікованій 17 червня 1999), сполуки формули 1, або її фармацевтично Міжнародній заявці РСТ № РСТ/ІВ98/01113 прийнятної солі або сольвату, або проліків, у (поданій 21 липня 1998), Європейській патентній комбінації з радіаційною терапією, яка, у комбінації заявці №99302232.1 (поданій 25 березня 1999), з радіаційною терапією, є ефективною для патентній заявці Великобританії №9912961 1 інгібування патологічного росту клітин або (поданій 3 червня 1999), попередній заявці США лікування гіперпроліферативного розладу у №60/148,464 (поданій 12 серпня 1999), патенті ссавців. Методи проведення радіаційної терапії є США 5,863,949 (виданому 26 січня 1999), патенті відомими у цій галузі, і вони можуть США 5,861,510 (виданому 19 січня 1999) ι використовува тись у описаній тут комбінованій публікації Європейського патенту №780,386 терапії. Доцільність призначення сполуки згідно з (опублікованого 25 червня 1997)], які повністю даним винаходом при проведенні комбінованої включені у якості посилань до цього опису. терапії може визначати ґрунтуючись на Переважними інгібіторами ММР-2 i ММР-9 є ті, які наведеному нижче. не інгібують або майже не інгібують ММР-1. Більш Вважають, що сполуки формули 1 можуть переважно, це є інгібітори, які селективно інгібують робити патологічні клітини більш чутливими до ММР-2 ι/або ММР-9 відносно інших матричних впливу радіаційного опромінення, яке здійснюють металопротеїназ (тобто ММР-1, ММР-3, ММР-4, для їх знищення і/або інгібування росту таких ММР-5, ММР-6, ММР-7, ММР-8, ММР-10, ММР-11, клітин. Відповідно, даний винахід також стосується ММР-12 i ΜΜΡ-13). способу підвищення чутливості патологічних Окремими прикладами корисних згідно з клітин у ссавців до впливу радіаційного даним винаходом інгібіторів ММР є AG-3340, RO опромінення, який включає введення ссавцю такої 32-3555, RS 13-0830, а також сполуки, наведені у кількості формули 1 або її фармацевтично цьому переліку: прийнятної солі, проліків або сольвату, яка є 3-[[4-(4-фтор-фенокси)-бензолсульфоніл]-(1ефективною для підвищення чутливості гідроксикарбамоіл-циклопентил)-аміно]-пропюнова патологічних клітин до впливу радіаційного кислота; опромінення. Кількість сполуки, солі або сольвату гідроксамід 3-екзо-3-[4-(4-фтор-фенокси)у такому способі можна визначити за допомогою бензолсульфоніламіно]-8-окса-біцикло[3.2.1]октанописаних тут методів визначення ефективної 3-карбоновоі кислоти; кількості таких сполук. гідроксамід (2R, 3R) 1-[4-(2-хлор-4-фторЦей винахід також стосується способу і бензилокси)-бензолсульфоніл]-3-гідрокси-3-метилфармацевтичної композиції для інгібування піперідин-2-карбоновоі кислоти; патологічного росту клітин у ссавців, яка містить гідроксамід 4-[4-(4-фтор-фенокси)певну кількість сполуки формули 1, її бензолсульфоніламіно]-тетрагідро-піран-4фармацевтично прийнятної солі або сольвату, або карбоновоїкислоти; проліків, або її міченої ізотопом похідної, і певну 3-[[4-(4-фтор-фенокси)-бензолсульфоніл]-(1кількість однієї або більше речовин, вибраних з гідроксикарбамоїл-циклобутил)-аміно]-пропіонова антианпогенезних агентів, інгібіторів сигнальної кислота; трансдукції ι антипроліферативних агентів. гідроксамід 4-[4-(4-хлор-фенокси)Антианпогенезні агенти, такі як інгібітори ММРбензолсульфоніламіно]-тетрагідро-піран-42 (матрична металопротеїназа 2), інгібітори ММР-9 карбонової кислоти; (матрична металопротеїназа 9) ι інгібітори СОХ-ІІ гідроксамід (R) 3-[4-(4-хлор-фенокси)(циклооксигеназа II), можуть використовуватись у бензолсульфоніламіно]-тетрагідро-піран-3поєднанні із сполукою формули 1 ι карбонової кислоти; фармацевтичними композиціями, які описані тут. гідроксамід (2R, 3R) 1-[4-(4-фтор-2-метилПрикладами корисних інгібіторів СОХ-ІІ є бензилокси)-бензолсульфоніл]-3-гідрокси-3-метилпіперідин-2-карбонової кислоти; CELEBREXÔ (алекоксиб), вальдекоксиб ι рофекоксиб. Приклади придатних інгібіторів 3-[[4-(4-фтор-фенокси)-бензолсульфоніл]-(1гідроксикарбамоїл-1-метил-етил)-аміно]матричної металопротеїнази описані у [патентній пропіонова кислота; публікації WO 96/33172 (опублікованій 24 жовтня 3-[[4-(4-фтор-фенокси)-бензолсульфоніл]-(41996), WO 96/27583 (опублікованій 7 березня, гідроксикарбамот-тетрагідро-піран-4-іл)-аміно]1996), Європейській патентній заявці №97304971.1 (поданій 8 липня 1997), Європейській патентній пропіонова кислота; гідроксамід 3-екзо-3-[4-(4-хлор-фенокси)заявці №99308617.2 (поданій 29 жовтня 1999), WO бензолсульфоніламіно]-8-окса-біцикло[3.2.1]октан98/07697 (опублікованій 26 лютого 1998), WO 3-карбонової кислоти; 98/03516 (опублікованій 29 січня 1998), WO гідроксамід 3-ендо-3-[4-(4-фтор-фенокси)98/34918 (опублікованій 13 серпня 1998), WO 98/34915 (опублікованій 13 серпня 1998), WO бензолсульфоніламіно]-8-окса-біцикло[3.2.1]октан3-карбонової кислоти; і 98/33768 (опублікованій 6 серпня 1998), WO гідроксамід (R) 3-[4-(4-фтор-фенокси)98/30566 (опублікованій 16 липня 1998), публікації бензолсульфоніламіно]-тетрагідро-фуран-3Європейського патенту 606,046 (опублікованого 13 карбонової кислоти; липня 1994), публікації Європейського патенту 931,788 (опублікованого 28 липня 1999), заявці і фармацевтично прийнятні солі і сольвати вказаних сполук. WO 90/05719 (опублікованій 31 травня 1990), WO У даному винаході також можуть 99/52910 (опублікованій 21 жовтня 1999), WO використовува тись інші ангіогенезні агенти, 99/52889 (опублікованій 21 жовтня 1999), WO 17 81915 18 включаючи інші інгібітори СОХ-ІІ і інші інгібітори можуть використовуватись у даному винаході у ММР. описаний нижче спосіб. Сполуки формули 1 також можуть Інгібітори рецептора erbВ2, такі як GW-282974 використовува тись разом із інгібіторами (Glaxo Wellcome ріс), і моноклональні антитіла ARсигнальної трансдукції, такими як агенти, які 209 (Aronex Pharmaceuticals Inc., Вудлендс, Техас, можуть інгібувати відповіді EGFR (рецептор США) і 2В-1 (Chiron), також можна об'єднувати із епідермального фактора росту), такими як сполукою згідно з даним винаходом, наприклад ті, антитіла EGFR, антитіла EGF, а також молекули, які описані в [заявці WO 98/02434 (опублікованій які є інгібіторами EGFR; інгібітори VEGF 22 січня 1998), WO 99/35146 (опублікованій 15 (васкулярно-ендотеліальний фактор росту), такі як липня 1999), WO 99/35132 (опублікованій 15 липня рецептори VEGF і молекули, які можуть інгібувати 1999), WO 98/02437 (опублікованій 22 січня 1998), VEGF; а також інгібітори рецептора erbВ2, такі як WO 97/13760 (опублікованій 17 квітня 1997), WO органічні молекули або антитіла, які зв'язуються із 95/19970 (опублікованій 27 липня 1995), патенті США 5,587,458 (виданому 24 грудня 1996), і рецептором erbВ2, наприклад, HERCEPTINÔ патенті США 5,877,305 (виданому 2 березня (Genentech, Inc., Південний Сан-Франциско, 1999)], які повністю включені до цього опису у Каліфорнія, США). якості посилань. Інгібітори рецептора erbВ2, Інгібітори EGFR описані у, наприклад, [публікації WO 95/19970 (опублікованій 27 липня корисні у даному винаході, також описані у попередній [заявці США № 60/117,341, поданій 27 1995), WO 98/14451 (опублікованій 9 квітня 1998), січня 1999, і попередній заявці США № 60/117,346, WO 98/02434 (опублікованій 22 січня 1998), і поданій 27 січня 1999], обидві повністю включені патенті США 5,747,498 (виданому 5 травня 1998)], до цього опису у якості посилань. Сполуки і і такі сполуки можуть використовуватись як описано у цьому винаході. EGFR-інігібуючими речовини, які є інгібіторами рецептора erbВ2 і які описані у вищезазначених заявках РСТ, патентах агентами є, але не обмежуються цим, США, попередніх заявках США, а також інші моноклональні антитіла С225, анти-EGFR 22Mab сполуки і речовини, які є інгібіторами рецептора (ImClone Systems Incorporated, м. Нью-Йорк, НьюerbВ2, можна використовувати разом із сполукою Йорк, США), і ABX-EGF (Abgenix антитіло), сполуки ZD-1839 (AstraZeneca), BIBX-1382 (Boehringer згідно з даним винаходом відповідно до даного винаходу. Ingelheim), MDX-447 (Medarex Inc., Аннандейл, Сполуку згідно з даним винаходом можна Нью-Джерсі, США), і OLX-103 (Merck & Co., використовува ти з іншими агентами, які є Уайтхаус Стейшн, Нью-Джерсі, США), VRCTC-310 корисними при лікування патологічного росту (Ventech Research) і плавлячий токсин EGF (Seragen Inc., Хопкінтон, Масачусет). Ці і інші клітин або раку, якими є, але не обмежуються цим, агенти, здатні посилювати протипухлинну імунну EGFR-інгібуючі агенти можуть використовуватись відповідь, такі як антитіла CTLA4 (антиген у цьому винаході. цитотоксичного лімфоцита 4), і інші агенти, здатні Інгібітори VEGF, наприклад SU-5416 і SU-6668 блокувати CTLA4; і антипроліферативні агенти, (Sugen Inc., Південне Сан-Франциско, Каліфорнія, США) можна об'єднувати із сполукою згідно з такі як інгібітори фарнезилпротеїнтрансферази, і даним винаходом. Інгібітори VEGF описані, інгібітори aνb3, такі як антитіло aνb3 Vitaxin, і наприклад, в [заявці WO 99/24440 (опублікованій інгібітори aνb5, та інші. Конкретними антитілами 20 травня 1999), міжнародній заявці РСТ CTLA4, які можна використовувати у цьому РСТ/ІВ99/00797 (поданій 3 травня 1999), в заявці винаході, є такі, що описані у попередній [аявці WO 95/21613 (опублікованій 17 серпня 1995), WO США №60/113,647 (поданій 23 грудня 1998)] яка 99/61422 (опублікованій 2 грудня 1999), патенті повністю включена до цього опису у якості США 5,834,504 (виданому 10 листопада 1998), посилання, але у цьому винаході можуть заявці WO 98/50356 (опублікованій 12 листопада використовува тись і інші антитіла. 1998), патенті США 5,883,113 (виданому 16 Сполуки формули 1 і їх фармацевтично березня 1999), патенті США 5,886,020 (виданому прийнятні солі, проліки і сольвати можуть, кожна 23 березня 1999), патенті США 5,792,783 незалежно, також використовуватись в паліативній (виданому 11 серпня 1998), заявці WO 99/10349 неоад'ювантній/ад'ювантній терапії для (опублікованій 4 березня 1999), WO 97/32856 полегшення симптомів, пов'язаних із переліченими (опублікованій 12 вересня 1997), WO 97/22596 тут захворюваннями, а також симптомами, (опублікованій 26 червня 1997), WO 98/54093 пов'язаними із патологічним ростом клітин. Така (опублікованій 3 грудня 1998), WO 98/02438 терапія може бути проводитись окремо, або у (опублікованій 22 січня 1998), WO 99/16755 комбінації з хіміотерапією і/або імунотерапією. (опублікованій 8 квітня 1999) і WO 98/02437 Винахід також стосується способу одержання (опублікованій 22 січня 1998)], які всі повністю сполуки формули 1. Терміни "патологічний ріст включені до цього опису у якості посилань. Іншими клітин" і "гіперпроліферативний розлад" є прикладами окремих інгібіторів VEGF, які є еквівалентними у цій заявці. корисними відповідно до цього винаходу, є ІМ862 Термін "патологічний ріст клітин", як він (Cytran Inc., Кіркленд, Вашингтон, США); ІМС-1С11 вживається тут і якщо не обумовлено інше, Imclone антитіло, анти-VEGF моноклональне тіло означає ріст клітин, незалежний від нормальних компанії Genentech, Inc., Південне Сан-Франциско, регуляторних механізмів (наприклад, втрата Каліфорнія; і ангіозим, синтетичний рибозим контактного інгібування). Термін включає компанії Ribozyme (Боулдер, Колорадо) і Chiron патологічний ріст: (1) пухлинних клітин (пухлин), (Емервіль, Каліфорнія). Ці і інші інгібітори VEGF які проліферують через експресію мутованої 19 81915 20 тирозинкінази, або надмірну експресію циклічній системі, і за умови, що кільце такої групи рецепторної тирозинкінази; (2) доброякісні і не містить два сусідніх атоми О або S. злоякісні клітини інших проліферативних розладів, Неароматичними гетероциклічними групами є при яких спостерігається активування аберантної групи, які мають лише 4 атоми у циклічній системі, тирозинкінази; (4) будь-які пухлини, які в той час як ароматичні гетероциклічні групи проліферують через рецепторні тирозинкінази; (5) повинні мати принаймні 5 атомів у циклічній будь-які пухлини, які проліферують внаслідок системі. Гетероциклічні групи включають активації аберантної серин/трионін кінази; і (6) бензоконденсовані циклічні системи. Прикладом 4доброякісні і злоякісні клітини інших членної гетероциклічної групи є азетидиніл проліферативних розладів, при яких (походить від азетидину). Прикладом 5-членної спостерігається активування аберантної гетероциклічної групи є тіазоліл, і прикладом 10серин/трионін кінази. членної гетероциклічної фупи є хінолініл. Термін "лікування", як він вживається тут і Прикладами неароматичних гетероциклічних якщо не обумовлено інше, означає реверсію, груп є піролідиніл, тетрагідрофураніл, полегшення, інгібування розвитку, або дигідрофураніл, тетрагідротиєніл, профілактику розладу або стану, відносно якого тетрагідропіраніл, дигідропіраніл, цей термін застосовується, або одного або більше тетрагідротіопіраніл, піперидино, морфоліно, симптомів такого розладу або стану. Термін тіоморфоліно, тіоксаніл, піперазиніл, "терапія", як він вживається тут і якщо не гомопіперазиніл, азетидиніл, оксетаніл, тіетаніл, обумовлено інше, відповідає процесу лікування, гомопіперидиніл, оксепаніл, тіепаніл, оксазепініл, яке має наведене вище значення. діазепініл, тіазепініл, 2,3,6-тетрагідропіридиніл, 2Термін "Me" означає метил, "Et" означає етил, піролініл, 3-піролініл, індолініл, 2Н-піраніл, 4Ні "Ас" означає ацетил. Термін "галоген", як він піраніл, діоксаніл, 1,3-діоксоланіл, піразолініл, вживається тут і якщо не обумовлено інше, дитіаніл, дитіоланіл, дигідропіраніл, дигідротієніл, означає фтор, хлор, бром або йод. Переважними дигідрофураніл, піразолідинілімідазолініл, галогрупами є фтор, хлор і бром. імідазолідиніл, 3-азабіцикло[3.1.0]гексаніл, 3Термін "алкіл", як він вживається тут і якщо не азабіцикло[4.1.0]гептаніл, обумовлено інше, означає насичені одновалентні азабіцикло[2.2.2]гексаніл, 3H-індоліл і хінолізиніл. радикали вуглеводню, які мають нерозгалужені, Прикладами ароматичних гетероциклічних розгалужені, або циклічні функціональні групи груп є піридиніл, імідазоліл, піримідиніл, піразоліл, (включаючи конденсовані і місточкові біциклічні і тріазоліл, піразиніл, тетразоліл, фурил, тієніл, спіроциклічні замісники), або комбінацію ізоксазоліл, тіазоліл, оксазоліл, ізотіазоліл, піроліл, вищезазначених груп. Для того, щоб алкільна хінолініл, ізохінолініл, індоліл, бензімідазоліл, група мала циклічні групи, ця група повинна мати бензофураніл, цинолініл, індазоліл, індолізиніл, принаймні три атоми вуглецю. фталазиніл, піридазиніл, триазиніл, ізоіндолілу, Термін "циклоалкіл", як він вживається тут і птеридиніл, пуриніл, оксадіазоліл, тіадіазоліл, якщо не обумовлено інше, означає циклічні фуразаніл, бензофуразаніл, бензотіофеніл, алкільні групи, в яких ялкіл має вказане вище бензотіазоліл, бензоксазоліл, хіназолініл, значення. Використання терміну "циклоалкіл" не хіноксалініл, нафтиридиніл і фуропіридиніл. повинно розглядатися як таке, що звужує об'єм Спірозамісники також включені до об'єму цього терміна "алкіл" до нециклічних гр уп. визначення і включають 1-окса-6-аза-спіро[2.5]октТермін "алкеніл", як він вживається тут і якщо 6-ил. Вищезазначені групи, а також ті, що походять не обумовлено інше, означає алкільні групи, які від вищеперелічених груп, можуть бути Смають принаймні одним подвійний зв'язок вуглецьприєднаними або N-приєднаними, де це є вуглець, і в яких "алкіл" має вказане вище можливим. Наприклад, група, яка походить від значення, і також включає Ε і Ζ ізомери піролу, може бути пірол-1-ілом (N-приєднаним) алкенільної групи. або пірол-3-ілом (С-приєднаним). Окрім того, Термін "алкініл", як він вживається тут і якщо групами, які походять від імідазолу, можуть бути не обумовлено інше, означає алкільні групи, які імідазол-1-іл (N-приєднаний) або імідазол-3-іл (Смають принаймні один потрійний зв'язок вуглецьприєднаний). Прикладом гетероциклічної групи, де вуглець, і в яких "алкіл" має вказане вище 2 атоми вуглецю кільця заміщені оксо(=О) значення. групами, є 1,1-діоксо-тіоморфолініл. Термін "алкокси", як він вживається тут і якщо Словосполучення "фармацевтично не обумовлено інше, означає О-алкільні групи, в прийнятна(і) сіль(солі)", як воно вживається тут і яких "алкіл" має вказане вище значення. якщо не обумовлено інше, означає солі кислотних Термін "арил", як він вживається тут і якщо не або основних груп, які можуть бути присутні у обумовлено інше, означає органічний радикал, сполуках формули 1. Сполуки формули 1, які є одержаний з ароматичного вуглеводню шляхом основними за природою, здатні утворювати видалення одного водню, такий як феніл або різноманітні солі з різними неорганічними і нафтил. органічними кислотами. Кислотами, які можуть Термін "4-10-членний гетероцикл", як він використовува тись для одержання вживається тут і якщо не обумовлено інше, фармацевтично прийнятних кислотно-адитивних означає ароматичні і неароматичні гетероциклічні солей таких основних сполук формули 1 є такі, які групи, які містять від одного до чотирьох утворюють нетоксичні кислотно-адитивні солі, гетероатомів, кожний з яких вибраний з О, S і Ν, де тобто солі, які містять фармакологічно прийнятні кожна гетероциклічна група має 4-10 атомів у аніони: ацетат, бензолсульфонат, бензоат, 21 81915 22 бікарбонат, бісульфат, бітартрат, борат, бромід, рацемату, одної або більше енантіомерних форм, кальцію едетат, камзил, карбонат, хлорид, одної або більше діастереомерних форм, або їх клавуланат, цитрат, дигідрохлорид, едетат, сумішей. Сполуки формули 1 можуть існувати як едисилат, естолат, езилат, етилсукцинат, таутомери. Винахід стосується застосування усіх фумарат, глуцептат, глуконат, глутамат, таких та утомерів і їх сумішей. гліколіларзанілат, гексилнезорцинат, гідрабамін, Об'єктом даного винаходу також є мічені гідробромід, гідрохлорид, йодид, ізотіонат, лактат, ізотопами сполуки, які відповідають переліченим у лактобіонат, лаурат, малат, малеат, манделат, формулі 1, але в яких один або більше атомів мезилат, метилсульфат, мускат, напзилат, нітрат, заміщені атомом, маса якого або номер якого плеат, оксалат, памоат (ембонат), палмітат, відмінний від атомної маси або масового номера, пантотенат, фосфат/ди фосфат, полігалактуронат, який звичайно зустрічається в природі. саліцилат, стеарат, субацетат, сукцинат, танат, Прикладами ізотопів, які можуть розглядатись як тартрат, теоклат, тозилат і валерат. Через те, що сполуки згідно з даним винаходом включають окрема сполука згідно з даним винаходом може ізотопи водню, вуглецю, азоту, кисню, фосфору, мати більше, ніж одну кислоту або основну групи, фтор у і хлор у, такі як 2Н, 3Н, 13С, 14С, 15N, 18O, 17O, 31 сполуки згідно з даним винаходом можуть P, 32P, 35S, 18F і 36СІ, відповідно. Сполуки згідно з включати моно, ди-, або трисолі кожної сполуки. даним винаходом, їх проліки і фармацевтично Сполуки згідно з даним винаходом, які є прийнятні солі таких сполук або проліків, які кислотними за природою, здатні утворювати містять вищевказані ізотопи і/або інші ізотопи основні солі з різноманітними фармакологічно інших атомів, входять в об'єм даного винаходу. прийнятними катіонами. Прикладами таких солей Деякі мічені ізотопами сполуки згідно з даним є солі лужних металів, або лужноземельних винаходом, наприклад ті, які містять такі металів, і, зокрема, солі кальцію, магнію, натрію і радіоактивні ізотопи як 3Н і 14С, є корисними у калію сполук згідно з даним винаходом. дослідженнях лікарських засобів і/або Даний винахід також включає в свій об'єм дослідженнях розподілення субстрату в тканині. проліки наведених ви ще сполук формули 1. В Особливо переважними є ізотопи тритію, тобто 3Н, цілому, такі проліки є функціональними похідними і вуглецю-14, тобто 14С, зважаючи на легкість їх сполук формули 1, які легко трансформуються in одержання і виявлення. Крім того, заміщення vi vo у необхідну сполуку формули 1. Відомі важчими ізотопами, такими як дейтерій, 2Н, може методики відбору і одержання придатних похідних надати деякі терапевтичні переваги, які проліків описані, наприклад, у ["Design of обумовлюються вищою метаболічною Prodrugs", видавництво Η. Bundgaard, Elsevier, стабільністю, наприклад збільшення періоду напів1985]. життя in vivo і зменшення необхідних доз, що може Проліками можуть бути фармакологічно бути переважним у багатьох випадках. Мічені неактивні похідні біологічно активних речовин ізотопами сполуки формули 1 згідно з даним ("вихідна лікарська речовина", або "вихідна винаходом і їх проліки можуть в цілому бути молекула"), яким необхідно трансформуватись у одержані за допомогою способів, описаних на тілі для вивільнення лікарської речовини, і які Схемах та/або Прикладах і Препаративних мають покращенні властивості доставки, ніж прикладах, які наведені нижче, шляхом заміщення вихідна молекула/лікарська речовина. вже готового міченого ізотопом реагенту на Трансформація in vivo може бути обумовлена, немічений ізотопом реагент. наприклад, певними метаболічними процесами, Даний винахід також включає фармацевтичні такими як хімічний або ензимний гідроліз композиції, а також способи лікування карбонового, фосфорного або сульфатного проліферативних розладів, або патологічного естеру, або відновлення, або окислення росту клітин шляхом введення проліків сполук відповідної функціональної групи. формули 1. Сполуки формули 1, які мають вільні Сполуки згідно з даним винаходом мають один аміно, амідо, гідрокси або карбонові групи можна або два асиметричні центри і, тому, можуть перетворити у проліки. Проліками є сполуки, в існувати і як енантіомери, і як діастереоізомери. яких амінокислотний залишок, або поліпептидний Має усвідомлюватись, що всі ізомери і їх суміші ланцюг двох або більше (наприклад, двох, трьох включені в об'єм цього винаходу. або чотирьох) амінокислотних залишків У сполуках формули 1, в яких ковалентно приєднаний через амідний або використовуються такі позначення як (CR4R5)m або естерний зв'язок до вільної аміно, гідроксигрупи, (CR4R5)t, R4 і R5 можуть змінюватись при кожному або групи карбонової кислоти сполуки формули 1. повторі m або t вище 1. Наприклад, де m або t є 2, Амінокислотні залишки включають, але не позначення (CR4R5)m або (CR4R5)t можуть обмежуються наведеним переліком, 20 природних відповідати -СН2СН2-, або амінокислот, які звичайно позначаються трьома СН(СН3)С(СН2СН3)(СН2СН2СН3)-, або будь-якій літерами, і також включають 4-гідроксипролін, кількості відповідних груп, які входять до об'єму гідроксилізин, демозин, ізодемозин, 3визначень R4 і R5. метилгістидин, норвалін, бета-аланін, гаммаДеякі сполуки формули 1 можуть мати аміномасляну кислоту, гомоцистеїн цитруліну, асиметричні центри і, тому, існувати у різних гомозерин, орнітин і метонінсульфон. Також до енантіомерних формах. Всі оптичні ізомери і винаходу включені додаткові види проліків. стереоізомери сполук формули 1 і їх суміші Наприклад, вільні карбоксильні групи можуть входять до об'єму цього винаходу. Щодо сполук одержуватись як аміди або алкільні естери. Вільні формули 1, винахід включає застосування гідроксигрупи можна одержати за допомогою таких 23 81915 24 груп як, без обмежень, гемісукцинати, фосфатні піперидинілхінолін О, а наступним видаленням тестери, диметиламіноацетати і бутилоксикарбонільної групи одержували бажаний фосфорилоксиметилоксикарбоніли, як описано в продукт 1. [Ad vanced Drug Delivery Reviews, 1996, 19, 115]. Сполуки згідно з даним винаходом можуть Карбаматні проліки гідрокси і аміногруп також мати асиметричні атоми вуглецю. Діастереомерні включені до винаходу як карбонатні проліки, суміші можуть бути розділені на окремі сульфонатні естери і сульфатні естери діастереомери ґрунтуючись на розбіжностях їх гідроксигруп. До винаходу також включено фізико-хімічних властивостей способами, модифікування гідроксигруп як (ацилокси)метилові відомими фахівцям у цій галузі, наприклад шляхом і (ацилокси)етилові етери, в яких ацильна група хроматографії або фракційної кристалізації. може бути алкільним естером, необов'язково Енантіомери можна виділити шляхом заміщеним групами, які включають, без обмежень, перетворення енантіомерних сумішей у функціональні групи етеру, аміну і карбонової діастереомерну суміш шляхом реакції з оптично кислоти, або в яких ацильна група є естером активною сполукою (наприклад спиртом), амінокислоти як описано вище. розділенням діастереомерів і перетворенням Такі проліки описані в [J. Med. Сhеm. 1996, 39, (наприклад шляхом гідролізу) окремих 10]. Також можна модифікувати вільні аміни як діастереомерів у відповідні чисті енантіомери. Усі аміди, сульфонаміди або фосфонаміди. Групи всіх такі ізомери, включно з діастереомерними цих проліків можуть включати такі групи, без сумішами і чистими енатіомерами входять до обмежень, як функціональні групи етеру, аміну і об'єму цього винаходу. карбонової кислоти. Сполуки формули 1 є основними за природою і здатні утворювати різноманітні солі з різними Схема 1 неорганічними і органічними кислотами. Хоча такі солі мають бути фармацевтично прийнятними для введення тваринам, на практиці часто бажано спочатку відділити сполуку формули 1 з реакційної суміші у вигляді фармацевтично неприйнятної солі і потім просто повернути її у форму вільної основи шляхом обробки з лужним реагентом і з наступним перетворенням вільної основи в фармацевтично прийнятну кислотно-адитивну сіль. Кислотноадитивні солі основних сполук згідно з даним винаходом легко одержати шляхом обробки основної сполуки з в цілому еквівалентною кількістю вибраного матеріалу або органічної кислоти у середовищі водного розчинника, або у придатному органічному розчиннику, такому як метанол або етанол. При ретельному випарюванні розчинника легко одержують бажану сіль у твердій формі. Бажана сіль кислоти може також випасти в осад з розчину вільної основи у органічному розчиннику шля хом додавання до розчину придатної мінеральної або органічної кислоти. Активність усіх сполук формули 1 можна Загальні способи синтезу, за допомогою яких визначити за допомогою наступної методики. можна одержати сполуки згідно з даним Спосіб ELISA визначення загальної PGT кінази винаходом, наведені в [патенті США №5990146 Використовують наступні реагенти і розчини: (виданому 23 листопада 1999) (Warner-Lambert Co.) і опублікованих заявках РСТ № WO 99/16755 аденозинтрифомфат (АТФ) Sigma, кат. №А-238 (опублікованій 8 квітня 1999) (Merck & Co.) і WO Альбумін бичачої сироватки (BSA) Sigma, кат. №А-329 01/40217 (опублікованій 7 липня 2001) (Pfizer, Фосфатно-буферний розчин Gibco-BRL, кат. №1 Inc.)]. Ці патенти і патентні заявки повністю Дюльбекко (dPBS) Планшети Ma xiSorp Nunc, кат. №43945 включені до цього опису у якості посилань. MgCI2 Sigma, кат. №М-10 Сполуки згідно з даним винаходом можуть Poly-Glu-Tyr (PGT) Sigma, кат. №Р-027 бути альтернативно одержані за Схемою 1 з 2Субстрат ТМВ Micowell Kirkegaard & Perry, хлор-8-бензилоксихіноліну (І) і відповідного 2Tween 20 Sigma, кат. №Ρ-137 аміно-нітробензолу (J) описаним на Схемі 1 Антитіло HRP-PY54 OSI Pharmaceutica способом. Замісники R1, R2, R3 і R4 мають значення, визначені для сполук формули 1 у Буфер для фосфорилювання (РВ): 50мМ короткому описі суті винаходу. Шляхом HEPES, рН 7,3, 125мМ NaCI, 24мМ MgCI2; каталізованого платиною амінування сполук І і J Буфер для промивання (WB): dPBS+0,1% одержували хінолін K. Відновленням нітрогрупи і Tween 20 (поліоксиетиленсорбітан); і Блокуючий видаленням бензильної групи шляхом буфер: 3% BSA, 0,05% Tween 20 у dPBS. каталітичного гідрування одержували бензімідазол Методика проведення дослідження: L, який може бути потім перетворений у (a) Для покриття лунок планшети Nunc відповідний трифлат М. Другим каталізованним Ma xiSorp заповнювали 100мкл на лунку Poly-Gluпаладієм амінуванням з аміну N одержували 25 81915 26 Tyr (PGT), розведеним у dPBS (різні концентрації). і планшети промивали буфером для промивання Планшет потім інкубували протягом ночі при 37СС. (фосфа тно-буферний розчин із вмістом 0,1% Супернатант PGT зливали і планшет промивали Tween-20). Кількість фосфорильованого PGT тричі буфером для промивання. визначали шляхом інкубування з антитілом PY-54, (b) Ензим PDGF розводили у РВ до одержання кон'югованим з пероксидазою хріну (HRP) відповідної концентрації, і 25мл основного розчину (Transduction Labs), при додаванні ТМВ додавали у кожну лунку. пероксидази (ТМВ є 3,3',5,5'-тетраметилбензидин), (c) Потім розводили АТР (із готового 20мМ) до і визначенням на зчитувальному пристрої відповідної концентрації (0,5нМ-2мкМ) у РВ. BioRadÔ Microplate при 450нМ. Інгібування Реакцію форсфорилювання ініціювали шляхом ензимної активності кінази тестовою сполукою додавання 25мкл розчину АТР у кожну лунку виражали як зменшене поглинання, і концентрацію планшети для досліджень. Інкубування тривало сполуки, яке необхідна для інгібування сигналу на приблизно 10 хвилин із струшуванням при 50% (в умовах, в яких проходить дослідження) кімнатній температурі. визначали як значення ІС50 для тестової сполуки. (d) Реакцію зупиняли шляхом видалення Для визначення здатності сполук інгібувати реакційної суміші. Планшету потім промивали активність тирозинкінази PDGFRb для білка повної чотири рази WB. довжини, що існує у клітині, можуть (e) Антитіло HRP-PY54 розводили до використовува тись ендотеліальні клітини аорти відповідної концентрації у блокуючому буфері. свиней (РАЕ), трасфектовані PDGFRp людини Потім у кожну лунку додавали 50мкл цього [Westermark, Bengt, et. al., PN AS 87, стор.128-132, розчину із наступним інкубуванням 25-35 хвилин 1990]. Клітини розміщували на планшеті і при кімнатній температурі. Розчин, який містив залишали для приєднання на 96-лункових антитіло, видаляли аспірацією і планшету знову планшетах у тому ж середовищі (Ham's F12), що промивали чотири рази WB. містить 10% FBS (ембріональної бичачої (f) Протікання реакції визначали шляхом сироватки), протягом 6-8 годин. Клітини вимірювання поглинання світу при 450нм. промивали, повторно розміщували у виснаженому Спочатку шляхом додавання розчину ТМВ, 50мкл за сироваткою середовищі, залишали на лунку, проявляли колір, реакцію продовжували інкубувались протягом ночі. Одразу після до досягнення у лунках із позитивними сигналами введення дози сполуки клітини знову розміщували показників, що складали приблизно 0,6-1,2 OD450 у виснаженому за сироваткою середовищі. юнітів. Проявлення кольору зупиняли шляхом Розчинені у ДМСО тестові сполуки розводили у додавання 50мкл на лунку 0,09Μ H2SO4 . Фоновими середовищі (кінцева концентрація ДМСО складала контрольними лунками були ті, які не містили PGT, 0,5% (об./об.)). Після інкубування протягом 10 але в яких були всі інші компоненти. Як було хвилин додавали PDGF-BB (кінцева конц. вказано вище, переважно, щоб сигнали 100нг/мл) до середовища для інкубування знаходились у межах 0,6-1,2 OD юнітів, в цілому протягом 8 хвилин. Клітини промивали без фону. забуферованим Hepes розчином солі (HBSS) і Здатність сполук згідно з даним винаходом розчиняли в 50мкл буфера HNTG (20мМ Hepes, інгібувати рецептор ΡDGFb in vitro може pH 7,5, 150мМ NaCI, 0,2% TritonÔ X-100, 10% визначатись за допомогою наступної методики. гліцерину, плюс 0,2мМ PMSF Інгібування активності тирозинкінази може (фенілметилсульфонілфторид), 1мкг/мл вимірюватись шляхом використання пепстатину, 1мкг/мл лейпептину, 1мкг/мл рекомбінатного ензиму у дослідженні для апроптоніну, 2мМ пірофосфату натрію, 2мМ визначення здатності сполук інгібувати ортованадату натрію), потім розводили із 50мкл фосфорилювання екзогенного субстрату, буфера для розведення HG (20мМ Hepes, pH 7,5, polyGluTyr (PGT, SigmaÔ , 4:1). Цитоплазматичний 10% гліцерину, 0,2мМ PMSF (фенілметилсульфонілфторид), 1мкг/мл домен людського рецептора PDGFb (амінокислоти 559-1106) [Ishikawa, F., et al. Nature 338: 557-562, пепстатину, 1мкг/мл лейпептину, 1мкг/мл 1989] експресується у Sf9 клітинах комах як апротоніну, 2мМ пірофосфату натрію, 2мМ глутатіон-S-трансфераза (GST) злитого білка у ортованадату натрію). Рівень фосфорилювання системі експресії бакуловірусу. Білок потім PDGFRb визначали способом ELISA. Покриті очищують із лізату цих клітин із використанням білком А 96-лункові планшети блокували афінних колонок на основі глютатіон-агарози. Superblock (Pierce) і покривали 0,5мкг на лунку Ензимне дослідження проводять на планшеті анти-PDGFRb P20 антитіла (Santa Cruz, номер у із 96 лунками, покритими субстратом PGT каталозі SC-339). (0,625мкг PGT на лунку). Тестові сполуки Незв'язані антитіла вимивали з планшет перед розводили у диметилсульфоксиді (ДМСО) і потім додаванням лізату клітин. Після інкубування додавали до планшет PGT для одержання лізатів протягом 2 годин при кімнатній температурі кінцевої концентрації ДМСО у дослідженні 1,6% (50мкл) з антитілом PDGFRb, кількість (об./об.). Рекомбінантний ензим розводили у асоційованого з PDGFRb фосфотирозину буфері для фосфорилювання (50мМ Hepes, pH визначали при додаванні антитіла, кон'югованого 7,3, 125мМ NaCI, 24мМ МgСІ2). Реакцію ініціювали із HRP, і ТМВ, як було описано вище. Здатність шляхом додавання АТР до одержання кінцевої сполук інгібувати реакцію стимульованого PDGFконцентрації 10мкМ. Після інкубування протягом BB ауто фосфорилювання на 50% за визначених 10 хвилин при кімнатній температурі і при умов у порівнянні до стимульованих PDGF-BB струшуванні, реакційну суміш видаляли аспірацією контролів виражали як значення IC50 для тестової 27 81915 28 сполуки. Сполуки згідно з даним винаходом, 8 хвилин. Клітини промивали і розчиняли у HNTG включно із наведеними тут прикладами, за буфері (20мМ Hepes, рН 7,5, 150мМ NaCI, 0,2% вищеописаною методикою в цілому мають TritonÔ X-100, 10% гліцерину, 0,2мМ PMSF значення ІС50 У наступних межах: 1-1000нМ. (фенілметилсульфонілфторид), 1мкг/мл Здатність in vitro сполук згідно з даним пепстатину, 1мкг/мл лейпептину, 1мкг/мл винаходом інгібувати рецептор KDR/VEGF можна апротоніну, 2мМ пірофосфату натрію, 2мМ визначити наступною методикою. ортованадату натрію). Ступінь фосфорилювання Здатність сполук згідно з даним винаходом KDR визначали способом ELISA. 96-Луночні інгібувати активність тирозинкінази можна планшети покривали 1мкг на лунку козячими антивизначити використавши рекомбінатний ензим у кролячими антитілами. Незв'язані антитіла дослідженні, за допомогою якого визначають вимивали з планшети і сайти, які залишились, здатність сполук інгібувати фосфорилювання блокували буфером (Pierce) перед додаванням антитіл anti-flk-1 C-20 (0,5мкг на планшету, Santa екзогенного субстрата, polyGluTyr (PGT, SigmaÔ , 4:1). Кіназний домен людського рецептора Cruz). Всі незв'язані антитіла вимивали з планшет KDR/VEGF (амінокислоти 805-1350) експресується перед додаванням лізату клітин. Після 2 годин в Sf9 клітинах комах як глутатіон-S-трансфераза інкубування лізатів з антитілом flk-1, кількість (GST) злитого білка у системі експресії асоційованого з KDR фосфотирозину визначали бакуловірусу. Білок очищували з лізату цих клітин при додаванні кон'югованого з HRP PY-54 антитіла використовуючи а фінні колонки на основі і ТМВ, як описано вище. Здатність сполук глютатіон-агарози. Ензимне дослідження інгібувати реакцію стимульованого VEGF проводили на 96-лункових планшетах, покритих ауто фосфорилювання на 50% у порівнянні з субстратом PGT (0,625мкг PGT на лунку). Тестові стимульованими VEGF контролями виражали як сполуки розводили у диметилсульфоксиді (ДМСО) значення IC50 для тестової сполуки. і потім додавали до планшет із PGT, одержавши Інкубування цитозолю людської печінки кінцеву концентрацію ДМСО у дослідженні 1,6% проводили із застосуванням наявного у продажі (об./об.). Рекомбінантний ензим розводили у цитозолю, що зберігається при кріогенній буфері для фосфорилювання (50мМ Hepes, pH температурі (Tissue Transformation Technologies, 7,3, 125мМ NaCI, 24мМ МgСІ2). Реакцію ініціювали 20мг/мл протеїн, Lot #ННС-0255). Цитозоль шляхом додавання АТР до одержання кінцевої людської печінки повільно розморожували і концентрації 10мкМ. Після інкубування протягом розводили у 10мМ калійфосфатному буфері (рН 30 хвилин при кімнатній температурі при 7,4) до одержання кінцевої білкової концентрації струшуванні, реакційну суміш видаляли аспірацією 3,1мг/мл, після чого нагрівали до 37°С. і планшети промивали буфером для промивання Інкубування ініціювали шляхом додавання готової (фосфа тно-буферний розчин містив 0,1% Tweenсполуки, розчиненій у метанолі. Загальну 20). Кількість фосфорильованої PGT визначали концентрацію метанолу підтримували на рівні 1% шляхом інкубування з PY-54 антитілом, або нижче. Після початку реакції інкубаційну суміш кон'югованим з HRP (HRP - пероксидаза хріну) обережно перемішували і збирали аліквоту зразка (Transduction Labs), одержаним з ТМВ у проміжок часу 0хв., після чого її о холоджували у пероксидази (ТМВ є 3,3',5,5'-тетраметилбензидин), відповідному об'ємі ацетонітрилу, що містив внутрішній контроль. Збирання проводили на 5, і визначали на зчитувальному пристрої BioRadÔ 10, 15 і 30 хвилині і охолодження проводили таким Microplate при 450нМ. Інгібування ензимної же чином. Зразки центрифугували і супернатант активності кінази тестовою сполукою виражали як аналізували шляхом ВЕРХ/МС/МС зменшену абсорбцію, і концентрацію сполуки, використовуючи співвідношення області піку необхідну для інгібування сигналу на 50%, відповіді тестової речовини і контролю. Показники виражали як значення ІС 50 для тестової сполуки. відповідали лінійній регресії і тривалість напівДля визначення здатності сполук до життя вираховували по спаду кривої. Частину інгібування активності тирозинкіназного рецептора підрахунків, яка залишилась, здійснювали на KDR для білка повної довжини, що існ ує у клітині, основі напів-життя відповідних показників. можуть використовуватись ендотеліальні клітини Контрольне інкубування було включене для аорти свиней, трансфектовані людським KDR спостереження варіабельності протягом дня і [Waltenberger et al., J. Biol. Chem. 269:26988, 1994]. втрат за межами цитозолю. Сполуки згідно з Клітини розміщували у 96-луночні планшети і даним винаходом були стабільними у залишали для прикріплення в цьому середовищі вищеописаному цитозольному аналізу людської (Ham's F12) із вмістом 10% FBS (ембріональної печінки. бичачої сироватки). Клітини потім промивали, Сполуки згідно з даним винаходом (надалі знову додавали виснажене за сироваткою "активна(і) сполука(и)") можуть вводитись будьсередовище, що містило 0,1% (об./об.) альбуміну яким способом, який забезпечуватиме доставку бичачої сироватки (BSA), і залишали інкубуватись сполук до місця дії. Такі способи включають на 24 години. Одразу перед введенням дози пероральне введення, інтрадуоденальне, сполуки клітини знову розміщували у виснажене за парентеральні ін'єкції (включно із сироваткою середовище (без BSA). Розчинені у внутрішньовенними, підшкірними, ДМСО тесто ві сполуки розводили у цьому внутрішньом'язовими, а також інфузією), середовищі (кінцева концентрація ДМСО складала внутрішньоочне, інтраперітоніальне, 0,5% (об./об.)). Після інкубування протягом 2 годин інтравезикулярне, інтравагінальне, місцеве і до середовища додавали VEGF165 (кінцева ректальне введення. концентрація - 50нг/мл) для інкубування протягом 29 81915 30 Кількість активної сполуки, що вводиться, Придатними фармацевтичними носіями є залежить від пацієнта, стану захворювання або інертні розріджувачі або наповнювачі, вода і різні розладу, кількості введення, розміщення сполуки і органічні розчинники. При необхідності розсуду лікаря, що проводить лікування. Однак, фармацевтичні розчинники можуть містити ефективні дози знаходяться в межах від, додаткові інгредієнти, такі як ароматизатори, приблизно, 0,001 до, приблизно, 100мг на кілограм зв'язуючі агенти, екципієнти і т.п. Таким чином для ваги тіла на день, переважно від, приблизно, 1 до, перорального призначення можуть приблизно, 35мг/кг/день однією або розділеними використовува тись таблетки, які містять різні дозами. Для людини вагою 70кг доза становитиме екципієнти, такі як лимонна кислота, разом із від, приблизно, 0,05 до, приблизно, 7г/день, різними дезінтегрантами, такими як крохмаль, переважно від, приблизно, 0,2 до, приблизно, альгінова кислота і деякі складні силікати, а також 2,5г/день. У деяких випадках доза менша, ніж зв'язуючі агенти, такі як цукроза, желатин і вказані межі, може бути більше ніж достатньою, в гуміарабік. Крім того, для таблетування часто той час як в інших випадках можуть використовуються змащуючі агенти, такі як застосовуватись більші дози не спричиняючи стеарат магнію, лаурилсульфат натрію і тальк. шкідливої побічної дії за умови, що такі дози Подібні тверді композиції також можуть вживатись будуть розділені на декілька менших доз, які у твердих і м'яких желатинових капсулах. вводяться протягом дня. Переважними матеріалами у цих випадках є Активна сполука може призначатись як лактоза, молочний цукор, а також окремо, так і з одною або більшою кількістю поліетиленгліколі із високою молекулярною протипухлинних речовин, наприклад вибраних з, масою. Якщо для перорального призначення наприклад, інгібіторів мітозу, таких як вінбластин; активної сполуки є бажаними водні суспензії або алкілюючих агентів, наприклад цис-платин, еліксири, вона може бути в них об'єднана з карбоплатин і циклофосфамід; антиметаболітів, різними підсолоджувачами або ароматизаторами, наприклад 5-фторурацил, цитозинарабінозид і фарбниками і, якщо бажано, з емульсифікаторами гідроксисечовина, або, наприклад, одного з або суспендуючими агентами разом із такими переважних антиметаболітів, описаних у розчинниками як вода, етанол, пропіленгліколь, [Європейській патентній заявці №239362], таких як гліцерин або їх комбінації. N-(5-[N-(3,4-дигідро-2-метил-4-оксохіназолін-6Способи одержання різних фармацевтичних ілметил)-N-метиламіно]-2-теноїл)-L-глутамінова композицій з визначеною кількістю активної кислота; інгібіторів фактора росту; інгібіторів сполуки є відомими, або будуть очевидними клітинного циклу; інтеркалюючих антибіотиків, фа хівцям у цій галузі. Наприклад, [див. наприклад адріаміцин і блеоміцин; ензимів, Remington's Pharmaceutical Sciences. Mack наприклад інтерферон; і антигормонів, наприклад Publishing Company, Easter, Pa., 15th Edition (1975)]. антиестрогенів, таких як NolvadexÔ (тамоксифен) Наведені нижче приклади і препаративні або, наприклад антиандрогенів, таких як приклади додатково ілюструють і описують CasodexÔ (4'-ціано-3-(4-фторфенілсульфоніл)-2сполуки згідно з даним винаходом і способи гідрокси-2-метил-3'-(трифторметил)пропіонанілід). одержання таких сполук. Має усвідомлюватись, Така комбінована терапія може здійснюватись що об'єм даного винаходу ніяким чином не шляхом одночасного, послідовного або окремого обмежується об'ємом нижченаведених прикладів і введення доз окремих терапевтичних компонентів. препаративних прикладів. У наступних прикладах Фармацевтичні композиції можуть, наприклад, молекули з одним хіральним центром, якщо не бути у формі, придатній для перорального зазначено інше, існують у рацематній суміші. призначення, такій як таблетки, капсули, пігулки, Молекули із двома або більше хіральними порошки, рецептури тривалого вивільнення, центрами, якщо не вказано інше, існують як розчини, суспензії, для парентеральних ін'єкцій у рацематна суміш діастереомерів. Окремі вигляді стерильних розчинів, суспензій або ентантіомери/діастереомери можуть емульсій, для місцевого призначення у вигляді одержуватись способами, відомими фахівцям у цій мазей або кремів, або для ректального галузі. призначення у вигляді супозиторіїв. Одержання основних проміжних сполук: Фармацевтичні композиції можуть бути в 8-Бензилокси-2-хлор-хінолін одиничній дозованій формі, придатній для 2,8-Хіноліндіол (133,3г, 0,827моль) розчиняли одноразового введення певної дози. у 800мл безводного ДМФ у атмосфері сухого N2. Фармацевтичні композиції включатимуть відомий До цього розчину додавали карбонат калію (183г, фармацевтичний носій або екципієнт і сполуку 1,32моль) з наступним додаванням бензилброміду згідно з даним винаходом у якості активного (110мл, 0,909моль) і розчин потім нагрівали до компонента. Крім того, композиція може включати 65°С, реакція проходила при цій температурі інші медичні або фармацевтичні агенти, носії, протягом ночі. Реакційну суміш потім заливали у допоміжні речовини, і т.д. 9л води і одержаний розчин перемішували при Прикладами форм для парентерального температурі оточуючого середовища 5,5 годин введення є розчини або суспензії активних сполук після чого його фільтрували. Тверду речовину у стерильних водних розчинах, наприклад, водних промивали водою, збирали, суспендували в розчинах пропіленгліколю або декстрози. Такі толуолі і на завершення розчин концентрували у дозовані форми можуть при необхідності бути вакуумі з одержанням 142г 8-бензилокси-хінолін-2забуферованими. олу. Цей матеріал (142г, 0,565моль) розчиняли у 31 81915 32 500мл DCE у атмосфері сухого N2. Оксалілхлорид атмосфері сухого азоту (N2). До цього розчину (99мл, 1,13моль) додавали по краплях до цього додавали імідазол (20,3г, 298ммоль) з наступним розчину з наступним додаванням 1мл ДМФ. Після додаванням трет-бутилдиметилсилілхлориду закінчення додавання реакційну суміш (20,6г, 137ммоль) і 4-диметиламінопіридину (1,50г, перемішували при температурі оточуючого 12,4ммоль). Реакційну суміш перемішували середовища 30 хвилин після чого реакційну суміш протягом ночі при температурі оточуючого нагрівали до 84°С. Реакційну суміш перемішували середовища після чого її розділяли між ДХМ і 1% при цій температурі 10 годин і потім водним розчином бісульфату натрію (NaHSO4). концентрували у вакуумі. Одержаний залишок Шар ДХМ залишали і двічі промивали 1% водним розділяли між ДХМ і водним насиченим NaHCO3. NaHSO4, потім водним насиченим бікарбонатом Шар ДХМ знову промивали водним насиченим натрію (NaHCO3) і на завершення насиченим NaHCO3, сушили над Na2SO4, фільтр ували і розчином солі. Шар ДХМ сушили над сульфатом концентрували у вакуумі з одержанням коричневої натрію (Na2SO4), фільтрували і концентрували у твердої речовини. Тверду речовини вакуумі з одержанням неочищеного продукту (40г) перекристалізовували з толуолу з одержанням у вигляді білої твердої речовини. Тверду речовину двох порцій (68,3г і 38,3г) 8-бензилокси-2-хлоррозчиняли у 500мл безводного тетрагідрофурану хіноліну. (ТГФ) у атмосфері сухого N2. До цього розчину Tрет-бутиловий естер піперидин-4-ілдодавали N-феніл-біс(трифторметансульфонімід) карбамінової кислоти можна одержати способом, (48,7г, 136ммоль) і розчин охолоджували до 0°С. описаними у [Carling et. ΑΙ. J. Med. Chem. 42(14), До цього розчину повільно додавали (3,2г, (1999) стор.2706, або Mase et. Al. J. Org. Chem. 136ммоль) гідриду натрію (60% у маслі). Після 66(20), (2001) стор.6775]. закінчення додавання реакційну суміш нагрівали Сполуки формули 1 можна одержати з до температури оточуючого середовища. Через 1 проміжної сполуки Η (Приклад 1) способом, годину додавали додаткову кількість 1,00г гідриду представленим на Схемі 1 і ілюстрованим натрію (60% у маслі), суміш перемішували ще одержанням 1-[2-(5-циклопропілметоксидодаткові 30 хвилин. Суміш концентрували у бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4вакуумі і переносили у ДХМ. Повільно по краплях іламіну у Прикладі 2. додавали воду (1,0мл) для гасіння гідриду натрію, Приклад 1 що не прореагував, і потім реакційну суміш Одержання трет-бутилового естер у {1-[2-(5екстрагували двічі з 0,1N водного розчину гідрокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідингідроксиду натрію (NaOH), потім промивали 4-іл)-карбамінової кислоти (сполука Н) насиченим розчином солі. Шар ДХМ сушили над Проміжну сполуку Н, 5-гідрокси-бензімідазол, Na2SO4, фільтрували і концентрували у вакуумі з можна одержати способом, представленим на одержанням 57г неочищеного трифлату сполуки В Схемі 2. у вигляді жовтого масла. Одержання сполуки С, Схема 2 ([8-(трет-бутил-диметил-силанілокси)-хінолін2-іл1-(4-метокси-2-нітро-феніл)-аміну 8-(Tрет-бутил-диметил-силанілокси)-хінолін-2іловий естер трифтор-метансульфонової кислоти В (9,81г, 24,1ммоль) і 4-метокси-2-нітроанілін (4,86г, 28,9ммоль) розчиняли у 100мл діоксану у атмосфері сухого N2 . До цього розчину додавали карбонат цезію (Cs 2CO3) (11,0г, 33,7ммоль), рацемічний-2,2'-біс(дифенілфосфіно)-1,1'бінафтил (BINAP) (900мг, 1,45ммоль) і трис(дибензиліденацетон)дипаладій (0) (883мг, 0,964ммоль), реакційну суміш нагрівали до 100°С, реакція проходила при цій температурі 4 години. Суміш потім охолоджували до температури оточуючого середовища, концентрували у вакуумі, оброблювали ДХМ, фільтрували і концентрували у вакуумі з одержанням червоної твердої речовини. Тверду речовину хроматографували на флешсилікагелі елююючи сумішшю гексани/ДХМ (3:1) з одержанням 7,25г сполуки С у вигляді червоної твердої речовини. Одержання сполуки D, N1-[8-(трет-бутил-диметил-силанілокси)хінолін-2-іл]-4-метокси-бензол-1,2-діаміну Сполуку С, ([8-(трет-бутил-диметилОдержання сполуки В силанілокси)-хінолін-2-іл]-(4-метокси-2-нітро8-(Трет-бутил-диметил-силанілоски)-хінолін-2феніл)-амін, (21,9г, 51,3ммоль) розчиняли у 200мл іловий естер трифтор-метансульфонової кислоти етанолу (EtOH) і 70мл ТГФ у атмосфері сухого N2. 2,8-Хіноліндіол (А) (20,0г, 124ммоль) До цього розчину додавали 10% паладій на вугіллі суспендували в 500мл дихлорметану (ДХМ) у (2,18г) з наступним додаванням по краплях 10мл 33 81915 34 безводного розчину гідразину. Реакційну суміш (1,28г, 2,12ммоль) і перемішували при температурі оточуючого трис(трибензиліеднацетон)дипаладій (0) (1,29г, середовища 2 години після чого її фільтр ували 1,41ммоль), реакційну суміш нагрівали до 100°С і реакція проходила при цій температурі протягом через CeliteÔ і CeliteÔ промивали ДХМ. Об'єднані ночі. Суміш потім охолоджували до температури фільтрати концентрували у вакуумі і одержаний оточуючого середовища, фільтрували і залишок розділяли між ДХМ і водним насиченим концентрували у вакуумі з одержанням оранжевої NaHCO3. Шар ДХМ потім промивали знову насиченим розчином NaHCO3 і потім насиченим піни. Піну хроматографували на фле ш-силікагелі розчином солі, сушили над Na2SO4, фільтрували і елююючи градієнтом з суміші етилацетат концентрували у вакуумі з одержанням 18,3г (EtOAc)/ДХМ (1:5) до EtOAc/ДХМ (7:3) з золотаво-коричневої твердої речовини у вигляді одержанням 12,3г сполуки G у вигляді блідовказаної в заголовку сполуки D. Одержання сполуки Ε, жовтої твердої речовини. Одержання сполуки Н. 2-(5-метокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-олу трет-бутилового естеру {1-[2-(5-гідроксиN1-[8-(трет-бутил-диметил-силанілокси)бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл!-піперідин-4-іл}хінолін-2-іл]-4-метокси-бензол-1,2-діамін, сполуку карбамінової кислоти D, (18,3г, 46,1ммоль) розчиняли у 40мл 2метоксиетанолу у атмосфері сухого Ν 2. До цього Tрет-бутиловий естер {1-[2-(5-метоксибензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4-іл}розчину додавали формамідинацетат (5,28г, карбамінової кислоти, сполуку G, (8,40г, 50,7ммоль), реакційну суміш нагрівали до 125°С і 17,7ммоль) розчиняли у 50мл трифтороцтової реакція проходила при цій температурі 1,5 годин. кислоти (ТФО) у атмосфері сухого N2 . Реакційну Розчинник видаляли у вакуумі і одержану тверду речовину розтирали з етиловим етером (Et2O), суміш перемішували при температурі оточуючого середовища 15 хвилин після чого її концентрували сушили у вакуумі з одержанням 13,3г сполуки Ε у у вакуумі з одержанням жовтого масла. Масло вигляді рожевої твердої речовини. розділяли між ДХМ і 0,1N водним NaOH. Шар ДХМ Одержання сполуки F, знову промивали 0,1N водним NaOH. Шар ДХМ 2-(5-метокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8ілового естеру трифтор-метансульфонової сушили над Na2SO4, фільтрували і концентрували з одержанням 5,85г 1-[2-(5-метокси-бензоімідазолкислоти 1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4-іламіну у вигляді 2-(5-Метокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-ол, жовтої твердої речовини. C.I. m/z 374 [М+1]; 1Н сполуку Е, (13,9г, 47,8ммоль) розчиняли у 100мл безводного ТГФ у атмосфері сухого Ν 2 . До цього ЯМР (CDCI3) d 8,66 (с, 1 Η), 8,37 (д, J=8,9Гц, 1Η), розчину додавали Ν-феніл8,30 (д, J=8,7Гц, 1Η), 7,68 (д, J=8,9Гц, 1Η), 7,47 (м, біс(трифторметансульфонімід) (20,3г, 47,8ммоль) і 2 Η), 7,35 (д, J=2,3Гц, 1Η), 7,25 (м, 1Η), 7,06 (дд, потім розчин охолоджували до 0°С. До цього J=2,5, 8,9Гц, 1Η), 3,91 (с, 3Η), 3,88 (м, 2Η), 2,90 (м, розчину повільно додавали гідрид натрію (1,31г, 3Η), 2,05 (м, 2Η), 1,83 (м, 2Η), 1,50 (широкий с, 2Η). 54,9ммоль) (60% у маслі). Після закінчення 1-[2-(5-Метокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8додавання реакційну суміш нагрівали до іл]-піперідин-4-іламін (500мг, 1,10ммоль) температури оточуючого середовища. Через 30 розчиняли у 10мл ДХМ у атмосфері сухого Ν 2. До хвилин додавали ще 500 мг гідриду натрію (60% у цього розчину додавали трибромід бору (300мл, маслі) з наступним додаванням 3,50г N-феніл3,30ммоль) і суміш перемішували протягом ночі біс(трифторметансульфонімід), реакційну суміш при температурі оточуючого середовища. Потім перемішували при температурі оточуючого додавали додаткові 200мл триброміду бору і середовища 1 годину. Розчинник потім видаляли у суміш перемішували дві години. Реакційну суміш вакуумі і одержаний залишок переносили у ДХМ. потім заливали на подрібнений лід і рівень рН До цього розчину повільно додавали 1,0мл води одержаного розчину доводили до 9 повільним для розчинення гідриду натрію, який не додаванням карбонату натрію (Na2CO3). Суспензію прореагував. Суміш потім розділяли між ДХМ і фільтрували і тверді речовини промивали водою з 0,1N водним NaOH. Шар ДХМ потім промивали наступним промиванням Et2O, потім сушили у знову 0,1N водним NaOH, потім насиченим вакуумі з одержанням 1-[8-(4-аміно-піперідин-1-іл)розчином солі і потім сушили над сульфатом хінолін-2-іл]-1Н-бензоімідазол-5-олу у вигляді натрію (MgSO4), фільтрували і концентрували у жовтої твердої речовини. C.I. m/z 360 [М+1]; 1Н вакуумі з одержанням 20,7г неочищеної сполуки F ЯМР (ДМСО) d 9,07 (с, 1Η), 8,76 (д, J=8,9Гц, 1Η), у вигляді рожевої твердої речовини, яку одразу 8,48 (д, J=8,9Гц, 1Η), 8,10 (д, J=8,9Гц, 1Η), 7,56 (д, використовували у наступній реакції. J=7,4Гц, 1Η), 7,45 (м, 1Η), 7,26 (д, J=7,4Гц, 1Η), Одержання сполуки G 7,01 (д, J=2,2Гц, 1Η), 6,95 (дд, J=2,2, 8,9Гц, 1Η), трет-бутилового естеру (1-[2-(5-метокси3,72 (м, 2Η), 2,76 (м, 3Η), 1,88 (м, 2Η), 1,65 (м, 2Η). бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4-іл)1-[8-(4-Аміно-піперідин-1-іл)-хінолін-2-іл]-1Нкарбамінової кислоти бензоімідазол-5-ол (460мг, 1,30ммоль) розчиняли Сполуку F, 2-(5-метокси-бензоімідазол-1-іл)у 5мл безводного ДМФ у атмосфері сухого Ν 2. До хінолін-8-іловий естер трифтор-метансульфонової цього розчину додавали ди-трет-бутилдикарбонат кислоти, (15,0г, 35,4ммоль) і трет-бутиловий естер (279мг, 1,30ммоль) і реакційну суміш піперідин-4-іл-карбамінової кислоти (14,2г, перемішували при температурі оточуючого 70,9ммоль) розчиняли у 200мл діоксану у середовища протягом ночі. Реакційну суміш потім атмосфері сухого N2 . До цього розчину додавали концентрували у вакуумі і розділяли між ДХМ і Сs 2СО3 (16,2г, 49,6ммоль), рацематний-BINAP водним насиченим NaHCO3. Шар ДХМ сушили над 35 81915 36 Na2SO4, фільтрували і концентрували у вакуумі з Приклад 5 одержанням жовтої твердої речовини. Тверду Одержання 1 (+)-1-(2-[5-(тетрагідро-фуран-3речовину хроматографували на флеш-силікагелі ілокси)-бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл)-піперідинелююючи EtOAc з одержанням 273мг сполуки Η у 4-іламіну вигляді жовтої твердої речовини. (±)-1-{2-[5-(тетрагідро-фуран-3-ілокси)Приклад 2 бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін Одержання 1-[2-(5-циклопропілметоксиодержували у спосіб, описаний у Прикладі 2 і бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4визначали значення НЗМС (МН+), що дорівнювало іламіну 430,4. Рацемат 1-{2-[5-(тетрагідро-фуран-3Tрет-бутиловий естер {1-[2-(5-гідроксиілокси)-бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідинбензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4-іл}4-іламіну можна розділити на його енантіомери за карбамінової кислоти, сполуку Н, (200мг, допомогою методик, відомих фа хівцям у цій галузі. 0,435ммоль) розчиняли у 1,5мл безводного ДМФ у Приклад 6 атмосфері сухого Ν 2 . До цього розчину додавали Одержання 1-(2-[5-(3-метил-оксетан-3Cs 2CO3 (170мг, 0,520ммоль) з наступним ілметокси)-бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл)додаванням циклопропілметанброміду (46мл, піперідин-4-іламіну 0,48ммоль). Реакційну суміш потім нагрівали до 1-{2-[5-(3-Метил-оксетан-3-ілметокси)65°С і перемішували при цій температурі 4 години. бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін Реакційну суміш потім охолоджували до одержували у спосіб, описаний у Прикладі 2 і температури оточуючого середовища і розділяли визначали значення НЗМС (МН+), що дорівнювало між EtOAc і водою. Шар EtOAc промивали 4 рази 444,4. водою і потім насиченим розчином солі. EtOAc Приклад 7 потім сушили над Na2SO4, фільтр ували і Одержання 1-[2-(5-ізобутокси-бензоімідазол-1концентрували у вакуумі, одержане зелене масло іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4-іламіну хроматографували на фле ш-силікагелі елююючи 1-[2-(5-ізобутокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолінсумішшю МеОН/дихлорметан (ДХМ) (2:98) з 8-іл]-піперідин-4-іламін одержували у спосіб, одержанням зеленого масла. Масло розчиняли у описаний у Прикладі 2 і визначали значення НЗМС 1,5мл ТФО у атмосфері сухого N2. Реакційну суміш (МН+), що дорівнювало 410,0. перемішували при температурі оточуючого Приклад 8 середовища 10 хвилин після чого її концентрували Одержання 1-(2-[5-(тетрагідро-піран-4-ілокси)у вакуумі і одержаний залишок розділяли між ДХМ бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл)-піперідин-4і водним 0,1N NaOH. Шар ДХМ потім промивали іламіну основним насиченим розчином солі (рН=10), 1-{2-[5-(Тетрагідро-піран-4-ілокси)сушили над Na2SO4, фільтрували і концентрували бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін у вакуумі з одержанням 118мг 1-[2-(5одержували у спосіб, описаний у Прикладі 2 і циклопропілметокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8визначали значення НЗМС (МН+), що дорівнювало іл]-піперідин-4-іламіну у вигляді жовтої твердої 444,4. речовини. C.I. m/z 414 [М+1]; 1Н ЯМР (CDCI3) d 8,63 (с, 1Η), 8,37 (д, J=8,9Гц, 1Η), 8,27 (д, J=8,7Гц, 1Η), 7,65 (д, J=8,7Гц, 1Η), 7,44 (м, 2Η), 7,30 (д, J=2,5Гц, 1Η), 7,24 (м, 1Η), 7,09 (дд, J=2,5, 8,9Гц, 1Η), 3,87 (м, 4Η), 2,87 (м, 3Η), 2,03 (м, 2Η), 1,81 (м, 2Η), 1,56 (широкий с, 2Η), 1,32 (м, 1Η), 0,66 (м, 2Η), 0,39 (м, 2Η). Приклад 3 Одержання безплатної солі 1-[2-(5циклопропілметокси-бензоімідазол-1-іл)-хінолін-8іл]-піперідин-4-іламіну Безплатну сіль 1-[2-(5-циклопропілметоксибензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4іламіну одержували шляхом реакції одного еквівалента бензолсульфонової кислоти з одним еквівалентом 1-[2-(5-циклопропілметоксибензоімідазол-1-іл)-хінолін-8-іл]-піперідин-4іламіну. Продукт виділяли за допомогою будь-якої із відомих методик, які застосовуються при одержанні солей органічних сполук. Приклад 4 Одержання 1-(2-[5-(3-морфолін-4-іл-пропокси)бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4іламіну 1-{2-[5-(3-Морфолін-4-іл-пропокси)бензоімідазол-1-іл]-хінолін-8-іл}-піперідин-4-іламін одержували відповідно до способу, описаному у Прикладі 2 і визначали показник НЗМС (МН+), що відповідав 487,2.