Похідні мигдалевої кислоти та їх застосування як інгібіторів тромбіну, фармацевтична композиція на їх основі

1. Сполука, вибрана з Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe); Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH) або Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab, або їх фармацевтично прийнятних солей. 2. Сполука Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePab(OMe) за п. 1 або її фармацевтично прийнятна сіль. (13) ЯК 78195 (21) 2003054395 (22) 30.11.2001 (24) 15.03.2007 (86) PCT/SE01/02657, 30.11.2001 (31) 0004458-6 (32) 01.12.2000 (33) SE (31) 0100965-3 (32) 19.03.2001 (33) SE (31) 0101239-2 (32) 06.04.2001 (33) SE (31) 0102921-4 (32) 30.08.2001 (33) SE (46) 15.03.2007, Бюл. № 3, 2007 р. ЗАСТОСУВАННЯ (11) ДО ПАТЕНТУ НА ВИНАХІД (54) ПОХІДНІ МИГДАЛЕВОЇ КИСЛОТИ ТА ЇХ ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ НА ЇХ ОСНОВІ 1 C2 ОПИС UA ДЕРЖАВНИЙ Д ЕПАРТАМЕНТ ІНТЕЛ ЕКТУАЛЬНОЇ ВЛАСНОСТІ (19) МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ 3 78195 4 3. Сполука за п. 1 або 2 для застосування при лі10. Фармацевтична композиція за п. 7 або 8, яка куванні стану, де є необхідним інгібування тромбіадаптована для перорального застосування. ну. 11. Фармацевтична композиція за п. 9 або 10, яка 4. Сполука за п. 1 або 2 для застосування при лімає форму желеутворюючої матриці системи мокуванні стану, який потребує антикоагулянтної дифікованого вивільнення, що містить гідрофільтерапії. ний желеутворюючий компонент та активний інг5. Сполука за п. 1 або 2 для застосування при ліредієнт. куванні тромбозу. 12. Застосування сполуки, яку визначено у п. 1 або 6. Сполука за п. 1 або 2 для застосування як анти2, як активного інгредієнта коагулянту. для виробництва медикаменту для лікування ста7. Фармацевтична композиція для інгібування трону, де є потрібним інгібування тромбіну. мбіну, яка містить будь-яку сполуку, визначену у п. 13. Застосування сполуки, яку визначено у п. 1 або 1, або її фармацевтично прийнятну сіль у суміші з 2, як активного інгредієнта для виробництва медифармацевтично прийнятним ад'ювантом, розрікаменту для лікування стану, який потребує антиджувачем або носієм. коагулянтної терапії. 8. Фармацевтична композиція за п. 7, яка містить 14. Застосування за п. 12 або п. 13, в якому стасполуку за п. 2 або її фармацевтично прийнятну ном є тромбоз. сіль у суміші з фармацевтично прийнятним ад'ю15. Застосування за п. 12 або п. 13, в якому ставантом, розріджувачем або носієм. ном є гіперкоагулянтність у крові та/або тканинах. 9. Фармацевтична композиція за п. 7 або 8, в якій 16. Застосування сполуки, яку визначено у п. 1 або ад'ювант, розріджувач та/або носій викликають 2, як активного інгредієнта для виробництва антимодифіковане вивільнення сполуки. коагулянту. Цей винахід стосується нових фармацевтично корисних сполук, зокрема, сполук, які є конкурентними інгібіторами трипсино-подібних серинових протеаз, особливо тромбіну, та/або сполук що метаболізують до сполук конкурентних інгібіторів трипсино-подібних серинових протеаз, особливо тромбіну, їх застосування як медикаментів, фармацевтичних композицій, що їх містять, та шляхів синтезу для їх продукування. Коагуляція крові є ключовим процесом, залученим у гемостаз (тобто попередження втрати крові з пошкоджених судин) та тромбоз (тобто утворення згустк у крові у кров'яній судині, іноді призводячи до закупорки судини). Коагуляція є результатом комплексу ферментних реакції. Одним із завершальних етапів у цій серії реакцій є перетворення проферменту протромбіну у активний фермент тромбін. Тромбін, як відомо, грає центральну роль у коагуляції. Він активує тромбоцити, призводячи до агрегації тромбоцитів, перетворює фібриноген у мономери фібрину, які полімерізуються спонтанно у полімери фібрину, та активує фактор XIII, який у свою чергу перехресно зв'язує полімери з утворенням нерозчинного фібрину. Крім того, тромбін активує фактор V та фактор VIII, призводячи до "позитивного зворотного зв'язку" утворення тромбіну з протромбіну. Інгібуванням агрегації тромбоцитів та утворення та перехресного зв'язування фібрину ефективні інгібітори тромбіну, можна чекати, виявляють антитромботичну активність. На додаток, антитромботична активність, можна чекати, посилюватиметься ефективним інгібуванням механізму позитивного зворотного зв'язку. Початкову розробку інгібіторів тромбіну низької молекулярної маси описано [Claesson у Blood Coagul. Fibrinol. (1994) 5, 411]. Blomback et al. [y J. Clin. Lab. Invest. 24, suppl. 107, 59, (1969)] описали інгібітори тромбіну на основі амінокислотної послідовності, розташованої навкруги ділянки відщеплення ланцюгу фібриногену Аa. З обговорених амінокислотних послідовностей ці автори запропонували трипептидну послідовність Phe-Val-Arg (P9-P2-P1, позначену далі як послідовність Р3-Р2-Р1), що могла б бути найефективнішим інгібітором. Інгібітори тромбіну на основі дипептидильних похідних з a,w-аміноалкілгуанідином у позиції Р1 відомі з патенту США №4346078 та міжнародної патентної заявки WO 93/11152. Подібно, структурно споріднені дипептидильні похідні описані також . Наприклад, міжнародна патентна заявка WO 94/29336 розкриває сполуки, наприклад, з амінометилбензамідинами, циклічними аміноалкіламідинами та циклічними аміноалкілгуанідинами у позиції Р1 (міжнародна патентна заявка WO 97/23499 розкриває проліки деяких цих сполуки); Європейсська патентна заявка 0648780, розкриває сполуки, наприклад, з циклічними аміноалкілгуанідинами у позиції Р1. Інгібітори тромбіну на основі пептидильних похідних, що також мають циклічні аміноалкілгуанідини (наприклад, 3- або 4-амінометил-1-амідинопіперидин) у позиції Р1 відомі з Європейських патентних заявок 046823, 0559046 та 0641779. Інгібітори тромбіну на основі трипептидильних похідних з аргінінальдегідом у позиції Р1 були спершу розкриті у Європейській патентній заявці 0185390. Нещодавно описані пептидильні похідні на основі аргінінальдегідів, модифікованих у позиції Р3. Наприклад, міжнародна патентна заявка WO 93/18060 розкриває гідроксикислоти, Європейська патентна заявка 0526877 дез-амінокислоти, а Європейська патентна заявка 0542525 Ометилмигдальні кислоти у позиції Р3. Інгібітори серинових протеаз (наприклад, тро 5 78195 6 мбін) на основі електрофільних кетонів у позиції де Р1 є також відомими. Наприклад, Європейська R4 представляє Η або один або більше флуорпатентна заявка 0195212 розкриває пептидильні замісники; а один або два з Х1, Х2, Х3 та Х4 представляють a-кетоестери та аміди, Європейська патентна заΝ-, а інші представляють групу -СН-, явка 0362002 флуоралкіламідкетони, Європейська або фармацевтично прийнятне її похідне. патентна заявка 0364344 a,b,d-трикетосполуки, а Термін "фармацевтично прийнятні похідні" Європейська патентна заявка 0530167 aвключає фармацевтично прийнятні солі (наприалкоксикетонні похідні аргініну у позиції Р1. клад, кислотно-адитивні солі). Інші структурно відмінні інгібітори трипсиноСкорочення наведені у кінці цього опису. Хвиподібних серинових протеаз на основі Слясті лінії на зв'язках у фрагментах формул І(і) та термінальних бороново-кислотних аналогів похідІ(іі) показують позиції зв'язку фрагментів. них аргініну та ізотіоуронію відомі з Європейської Галоген-групи, які R1 може включати, предстапатентної заявки 0293881. вляють флуор, хлор, бром та йод. Для запобігання Нещодавно інгібітори тромбіну на основі пепневизначеності у репрезентуванні щонайменше тидильних похідних розкриті у Європейсьій патенодної, як варіант, галоген-групи, R1 може не предтній заявці 0669317 та міжнародних патентних ставляти (а тому бути заміщеним Η так, щоб додезаявках WO 95/35309, WO 95/23609, WO 96/25426, ржуватися правил валентності), або можуть предWO 97/02284, WO 97/46577, WO 96/32110, WO ставляти один або більше атомів галогену. 96/31504, WO 96/03374, WO 98/06740, WO Коли R3 представляє структурний фрагмент 97/49404, WO 98/57932, WO 99/29664, WO формули І(і), в якому R4 представляє один або 00/35869 та WO 00/42059. більше флуор-замісників, переважні сполуки форЗокрема, WO 97/02284 та WO 00/42059 розмули І включають сполуки, в яких R 4 представляє кривають інгібітори тромбіну із заміщеними мигдаодиничний флуор-замісник у 2- або 3-позиції, або льними кислотами у позиції Р3. два флуор-замісники у 2- та 5-позиціях або, більш Однак, залишається необхідність у ефективпереважно, 2- та 6-позиціях (де позиції заміснику них інгібіторах трипсино-подібних серинових провизначають стосовно місця приєднання структуртеаз, як-то тромбін. Існує також необхідність споного фрагменту формули І(і) до залишку молекули лук, які мають сприятливий фармакокінетичний (тобто до гр упи -NHCH2-)). профіль та є селективними при інгібуванні тромбіКоли R3 представляє структурний фрагмент ну зверх інших серинових протеаз, зокрема, залуформули І(іі), переважні сполуки формули І включених у гемостаз. Сполуки, які виявляють конкуречають сполуки, в яких: нтну інгібіторну активність стосовно тромбіну, (a) один з Х1, Х2, Х3 та Х4 представляє -N-, а можна чекати, будуть особливо корисними як анінші представляють -СН-; або тикоагулянти, а тому при терапевтичному лікуван(b) Х1 та Х3, чи Х2 та Х4, представляють -N-, а ні тромбозу та споріднених розладів. інші два (за прийнятністю) представляють -СН-. Згідно з винаходом запропоновано сполуку Переважні сполуки формули І включають споформули І луки, в яких: R1 представляє як замісник одиничний флуор, хлор або бром; R2 представляє С 1-2алкоксил, заміщений одним або більше флуор-замісниками, як-то -OCHF2, -OCF3, -OCH2CF3, -OCH 2CHF2 , -OCH 2CH2F або OCH(CH2F)2; R3 представляє структурний фрагмент формули І(і); де R4 представляє Н. a R представляє -ОН або -СН2ОН; Більш переважні сполуки формули І включаR1 представляє, як варіант, щонайменше один ють сполуки, в яких: галогеновий замісник; Ra представляє ОН; 2 R представляє один або два С1-3алкоксиR1 представляє одиничний хлор-замісник; замісники, алкільні частини яких самі заміщені R2 представляє -OCF3, переважно -OCH2CHF2, одним або більше флуор-замісниками (тобто R або більш переважно -OCHF2, або -OCH 2CH2F. представляє одну або дві флуоралкокси(С 1-3) груПереважні точки заміщення R1 та R2 на релепи); вантній феніл-групі сполуки формули І включають Υ представляє гр упи -СН2- або -(СН2)2-; а дві мета-позиції стосовно місця приєднання цієї R3 представляє структурний фрагмент формуфеніл-групи до залишкової частини молекули ли І(і) або І(іі): (тобто у 3- та/або 5-позиції (переважно 3,5заміщення) стосовно атому карбону, що несе aабо b-гідроксикислотну гр упу). Сполуки формули І, що можуть бути згаданими включають сполуки, в яких: R2 представляє один або два С 1-2алкокси-замісники, алкільні частини цих замісників самі заміщені одним або більше флуор-замісниками; або 7 78195 8 R2 представляє один або два С 3алкоксиреакцією етилімідоатного інтермедіату (отриманозамісники, алкільні частини цих замісників самі го реакцією сполуки формули XVIA або XVIB з НСІ заміщені одним або більше флуор-замісниками. (g) в етанолі) з газуватим аміаком в етанолі, або в Сполуки формули І можна отримувати згідно зі умовах, описаних у [Tetrahedron Lett. 40, 7067 способами, добре відомими фахівцям, наприклад, (1999)], цей документ вміщено як посилання, (наяк описано далі. приклад, для отримання сполук формули І, в яких Згідно з наступним аспектом винаходу запроR3 представляє структурний фрагмент формули поновано спосіб отримання сполуки формули І, І(іі), в якому Х2 або Х4 представляє N, реакцією спосіб включає: відповідної сполуки формули XVIB з ацетатом (і) сполучення сполуки формули II, амонію (наприклад, 1-30 еквівалентами ацетату амонію) у присутності N-ацетилцистеїну (наприклад, 1-30 еквівалентів N-ацетилцистеїну) та прийнятного розчиннику (наприклад, нижчого (наприклад, С1-6) алкілспирту, як-то метанол)). Сполуки формули II доступні з використанням відомих та/або стандартних способів. Наприклад, сполуки формули II, в яких Ra представляє ОН, можна отримувати реакцією альдегіду формули VI, де Ra, R1 та R2 визначено вище, зі сполукою формули III, де Υ та R3 визначено вище, наприклад, у присутності засобу сполучення (наприклад, оксалілхлориду у ДМФ, ЕДК, ДЦК, ГБТУ, Г АТУ, ПіБОФ або ТБТУ), прийнятної основи (наприклад, піридин, ДМАП, TEA, 2,4,6-колідин або ДІПЕА) та придатного органічного розчиннику (наприклад, дихлорметану, ацетонітрилу, ЕtOАс. або ДМФ); (іі) сполучення сполуки формули IV, де Ra, R1, R2 та Υ визначено вище, зі сполукою формули V, R3CH2-NH2 V де R3 визначено вище, наприклад, в умовах, які описані у способі (і) вище; (ііі) для сполук формули І, в яких R1 не представлено, відновлення відповідної сполуки формули 1а, яку визначено далі, в якій R5 представляє OR6, де R5 та R6 визначені далі, наприклад, гідруванням у присутності придатного каталізатору (наприклад, метало-каталізатору на підкладці, як-то Pd/C (наприклад, 10% (за масою) Pd/C)) та прийнятного розчиннику (наприклад, нижчого (наприклад, С1-6) алкілового спирту, як-то етанолу), та, як варіант, у присутності придатної кислоти (наприклад, оцтової кислоти) та/або як описано у [Synth. Comm. (1998) 4351]; або (iv) реакцію відповідної сполуки формули XVIA або XVIB, які визначено далі, з придатним джерелом аміаку (наприклад, ацетатом амонію або газуватим аміаком) в умовах, відомих фахівцям, як-то де R1 та R2 визначені вище з: (a) сполукою формули VII, R"CN VII де R" представляє Η або (CH 3)3Si, наприклад, при кімнатній температурі, або підвищеній, температурі (наприклад, нижче 100°С) у присутності придатного органічного розчиннику (наприклад, хлороформ або метилен хлорид) та, за необхідністю, у присутності придатної основи (наприклад, TEA), та/або придатного каталізатору (наприклад, хлориду бензиламонію або йодиду цинку, або використовуючи хіральний каталізатор, наприклад, як описано у [Chem. Rev., (1999) 99, 3649]), а потім гідролізом в умовах, що добре відомі фахівцям (наприклад, як описано далі); (b) NaCN або KCN, наприклад, у присутності NaHSO3 та води, а потім гідролізом; (c) хлороформом, наприклад, при підвищеній температурі (наприклад, вище кімнатної температури, але нижче 100°С) у присутності придатного органічного, розчиннику (наприклад, хлороформ) та, за необхідністю, у присутності придатного каталізатору систем (наприклад, хлорид бензиламонію), а потім гідролізом; d) сполукою формули VIII де М представляє Mg або Li, а потім оксидативним відщепленням (наприклад, озонолізом або каталізованим осмієм або рутенієм) в умовах, які добре відомі фахівцям; або (e) трис(метилтіо)метаном в умовах, які добре відомі фахівцям, а потім гідролізом у присутності, наприклад, НgО та HBF4. Сполуки формули II, в яких Ra представляє СН2ОН, можна отримувати відновленням сполуки формули IX, 9 78195 10 придатного ферменту (наприклад, Lipase PS Amano), прийнятного естеру (наприклад, вінілацетату) та придатного розчиннику (наприклад, метил-трет-бутилового етеру), дериватизований ізомер може далі бути відділеним від непрореагувавшого ізомеру звичайними способами розділення (наприклад, хроматографією). Групи, додані до сполуки формули II на такому етапі дериватизації, можна видалити перед будьде R представляє С 1-6алкіл або С1-3алкілфеніл, якими подальшими реакціями або на будь-якому a R1 та R2 визначені вище, наприклад, при кімнатнаступному етапі синтезу сполук формули І. Доданій температурі або нижче у присутності придатноткові групи можна видалити звичайними способаго відновнику (наприклад, борогідриду натрію) та ми (наприклад, для естерів a-ОН-групи, гідролізом прийнятного органічного розчиннику (наприклад, в умовах, відомих фа хівцям (наприклад, при темметанолу, етанолу, ТГФ або їх суміші), а потім гідпературі між кімнатною та температурою кипіння ролізом утвореного естеру тропічного кислотного під зворотним холодильником у присутності приінтермедіату формули ІХА, датної основи (наприклад, NaOH) та прийнятного розчиннику (наприклад, МеОН, води або їх сумішей))). Енантіомерні форми сполуки формули II, в яких Ra представляє -СН2ОН, можуть бути розділеними способами хіральної хроматографії (наприклад, хіральною ВЕРХ). Сполуки формули III можна отримувати сполученням сполук формули X, де R, R1 та R2 визначені вище, в умовах, що добре відомі фахівцям, наприклад, як описано далі. Фахівцю зрозуміло, що етапи відновлення та гідролізу можна проводити як однорезервуарний процес, наприклад, як описано далі. Сполуки формули II, в яких Ra представляє ОН можна альтернативно отримувати окисненням сполуки формули ІХВ, або її похідного, що, як варіант, захищено при вторинній гідроксильній групі, де R1 та R2 визначені вище, у присутності придатного окиснику (наприклад, комбінації придатного вільно-радикального оксиданту (як-то TEMPO) та прийнятного гіпохлориту (як-то гіпохлориту натрію)) в умовах, відомих фа хівцям, наприклад, при температурі між -10°С та кімнатною температурою, у присутності придатного розчиннику (наприклад, води, ацетону або їх суміші), прийнятної солі (наприклад, галогеніду лужного металу, як-то броміду калію) та придатної основи (наприклад, карбонату або гідрокарбонату лужного металу, як-то гідрокарбонату натрію). Енантіомерні форми сполук формули II, в яких Ra представляє -ОН (тобто сполук, що мають відмінні конфігурації замісників у С-атома, aрозташованого стосовно групи СО2Н) можуть бути розділеними енантіоспецифічним етапом дериватизації. Цього можна досягти, наприклад, ферментним способом. Такі ферментні способи включають, наприклад, трансестерифікацію a-ОН групи при температурі між кімнатною та температурою кипіння під зворотним холодильником (наприклад, при температурі між 45 та 65°С) у присутності де Υ визначено вище, зі сполуками формули V, які визначено вище, наприклад, в умовах, подібним до описаних тут для отримання сполук формули І. Сполуки формули IV можна отримувати сполученням сполук формули II, які визначено вище зі сполуками формули X, які визначено вище, наприклад, в умовах, подібним до описаних тут для отримання сполук формули І. Сполуки формули VI отримують відомими та/або стандартними способами. Наприклад, їх можна отримувати: (і) металуванням (де метал може бути, наприклад, лужним металом, як-то Li або, переважно, двовалентни металом, як-то Мg) сполуки формули XI, де Hal представляє атом галогену, вибраний з групи, що складається з СІ, Вr та І, a R1 та R2 визначені вище, а потім реакцією з придатним джерелом формілгруп (як-то Ν,Ν-диметилформамід), наприклад, в умовах, описаних далі; (іі) відновленням сполуки формули XII, 11 78195 12 приклад, 2,6-ди-трет-бутил-4-метилфенолу). Сполуки формул V, VII, VIII, X, XI, XII та XIII комерційно доступні, відомі з літератури, або їх можна отримувати аналогічно способам, описаним тут, або звичайними способами синтезу, стандартними способами, з легко доступних вихідних матеріалів, використовуючи прийнятні реагенти та де R1 та R2 визначені вище у присутності приумови реакції. Сполуки формул Іа, XVIA та XVIВ датного відновнику (наприклад, ДІБАІ-Н); або можна отримувати способами, описаними далі. (ііі) окисненням сполуки формули XIII, Замісники на фенільному кільці у сполуках формул І, II, III, IV, V, VI, IX, ІХА, ІХВ, XI, XII, ХIIІ та ХІIIА можна увести та/або інтерконвертувати способами, добре відомими фахівцям, шляхом інтерконверсії стандартних функціональних груп, стандартними способами з легко доступних вихідних матеріалів використовуючи прийнятні реагенти та умови реакції. Наприклад, сполуки формул І, II, IV, VI, ІХА, XI, де R1 та R2 визначені вище у присутності приXII та XIII можна отримувати з відповідних сполук датного окиснику (наприклад, МnО2 хлор хромату формул XIVA, XIVB, (XIVC, XlVD, XIVE, XIVF, XIVG піридинію, комбінації ДМСО та оксалілхлориду, та XIVH, відповідно, або комплексу SO3 ·піридин у ДМСО). Сполуки формули IX можна отримувати з відповідного фенілацетату [(який можна, наприклад, отримувати з відповідного ацетофенону, як описано у J. Am. Chem. Soc. 98, 6750 (1976) або з відповідного бензилціаніду стандартними способами гідролізу) звичайними способами, наприклад, аналогічно способам, описаним у J. Org. Chem. 54, 3831 (1989) та/або як описано далі]. Сполуки формули ІХВ можна отримувати дигідроксилуванням відповідної сполуки формули ХІIIА де R1 та R2 визначені вище, у присутності придатного засобу дигідроксилування (наприклад, реагенту або суміші реагентів, що забезпечує OsO4, як-то AD-mix-a або, особливо, AD-mix-b), наприклад, в умовах, відомих фахі вцям, як-то при температурі між -10°С та кімнатною температурою у присутності of прийнятного розчиннику (наприклад, вод, трет-бутанол або їх суміші). Коли застосовують асиметричні окисники, як-то AD-mix-a або AD-mix-b, цей спосіб можна використовува ти для отримання сполук формули ІХВ, що мають специфічні конфігурації гр уп (тобто R або S) біля обох С-атомів, до яких приєднані первинні та вторинні гідроксильні групи. Сполуки формули ХІIIА можна отримувати реакцією відповідних сполуки формули XI, які визначено вище, з придатним джерелом вінільного аніону (наприклад, трибутил(вініл)станумом) в умовах, відомих фа хівцям, наприклад, при температурі між кімнатною та температурою кипіння під зворотним холодильником (наприклад, 50°С) у присутності прийнятного розчиннику (наприклад, толуол), придатного засобу сполучення (наприклад, координаційного комплексу паладію(О), як-то тетракіс(трифенілфосфін)паладію(0)) та, як варіант, у присутності прийнятного каталізатору (на де Ra, R, R1, R3, Υ та Hal (за прийнятністю) визначені вище, наприклад: (a) реакцією з відповідним флуорованим галогеналканом (наприклад, флуорованим хлоралканом), наприклад, при кімнатній температурі або вище (наприклад, при кипінні під зворотним холодильником) у присутності придатної основи (наприклад, трет-бутоксиду калію, KОН або NaOH, наприклад, у водному розчині) та прийнятного органічного розчиннику (наприклад, ТГФ, хлороформу або ізо-пропанолу); або (b) реакцією зі сполукою формули XIVJ, RxS(O)2 ORy XIVJ де Rx представляє С 1-4алкіл, С14перфлуоралкіл або феніл (як варіант, заміщений y метилом, нітрогрупою або галогеном), a R представляє CH2CF3, CH2CHF2, CH2CH2F або CH(CH2F)2, наприклад, у присутності придатної основи (наприклад, карбонату калію) та прийнятного розчиннику (наприклад, ДМФ), наприклад, у обох випадках, як описано далі. Фахівцю зрозуміло, що ці перетворення функ 13 78195 14 ціональних груп можна також проводити на попениками, вибраними з групи, що складається з гаредньому етапі у загальному синтезі сполук форлогену, фенілу, метилу або метоксилу, останні три мул II, IV, VI, ІХА, XI, XII та XIII (тобто на прийнятгрупи також, як варіант, заміщені одним або більних прекурсорах сполук формул XIVB, XIVC, XIVD, ше галоген-замісниками); XIVE, XIVF, XIVG та XIVH, відповідно). R7 представляє С 1-10алкіл (остання група, як Сполуки формул XIVA, XIVB, XIVC, XIVD, варіант, перервана одним або більше атомами XIVE, XIVF, XIVG, XIVH та XIVJ є комерційно дооксигену), або С1-3алкіларил або С1-3алкілоксіарил ступними, відомі у літературі, або їх можна отри(алкільні частини останніх дво х груп, як варіант, мувати аналогічно описаним тут способам, або перервані одним або більше атомами оксигену, а звичайними способами синтезу, згідно зі стандарарильні частини останніх двох груп, як варіант, тними способами з легко доступних вихідних мазаміщений одним або більше замісниками, вибратеріалів, використовуючи прийнятні реагенти та ними з групи, що складається з галогену, фенілу, умови реакції. Наприклад, сполуки формул XIVA, метилу або метоксилу, останні три групи також, як XIVB, XIVC, XIVD, XIVE, XIVF, XIVG та XIVH можна варіант, заміщені одним або більше галогенотримувати зняттям захисту відповідно захищених замісниками); фенолів (де захисною групою може бути, наприa Ra, R1, R 2, Y, R4, X1, Χ2, Х3 та Х4 визначені клад, метил, аліл, бензил або трет-бутил) у станвище, дартних умовах. Далі, сполуки формули XIVD, в та їх фармацевтично прийнятні похідні. яких R1 представляє одиничний хлор-замісник, Термін "фармацевтично прийнятні похідні" можна отримувати з ди- або тригалогенсполук формули Іа включає фармацевтично призаміщеного бензолу (наприклад, 1-Вr, 3-СІ, 5-Fйнятні солі (наприклад, кислотно-адитивні солі). бензолу, заміщенням атому флуору з метоксигруХвилясті лінії на зв'язках у фрагментах форпи (наприклад, реакцією з NaOMe у суміші 1мул І(ііі) та l(iv) позначають позиції зв'язків фрагметил-2-піролідинон/метанол при підвищеній темментів. пературі), заміщенням брому з формілгрупи (наАлкілоксіарил-групи, що R6 та R7 можуть предприклад, як описано вище для отримання сполук ставляти, включають алкіл- та арил-групи, приєдформули VI), а далі деметилуванням (наприклад, нані через атом оксигену. Алкіларил- та алкілоксівикористанням PhSH у 1-метил-2-піролідиноні у арил-групи приєднані до залишкової частини присутності K2СО3)). молекули через алкільну частину ци х гр уп, алкільні Також, сполуки формули І, в яких R1 відсутній частини можуть (якщо є достатнє число (тобто можна отримувати з відповідних сполук формули І три) атомів карбону) мати розгалужений ланцюг. (або через їх прийнятні прекурсори), в яких R1 Арильні частини алкіларил- та алкілоксіарил-груп, представляє атом галогену (як-то хлор), наприякі R1 та R2 можуть представляти, або бути заміклад, гідруванням в умовах, відомих фа хівцям. щеними ними, включають карбоциклічні та гетероСполуки формули І можуть бути виділеними з циклічні ароматичні групи, як-то феніл, нафтил, їх реакційних сумішей використанням звичайних піридиніл, оксазоліл, ізоксазоліл, тіадіазоліл, індоспособів. ліл та бензофураніл тощо. Згідно з представленим винаходом фармацеАлкіл-групи, які R6 та R7 можуть представляти, втично прийнятні похідні сполук формули І також можуть мати лінійний ланцюг або, коли існує довключають "захищені" похідні, та/або сполуки що статнє число (тобто мінімум три) атомів карбону, діють як проліки, сполук формули І. мати розгалужений ланцюг та/або бути циклічниСполуки що можуть діяти як проліки сполук ми. Далі, коли існує достатнє число (тобто мінімум формули І, які можуть бути згадані, включають чотири) атомів карбону, такі алкіл-групи можуть сполуки формули Іа, де R3a представляє структуртакож мати циклічну/ациклічну частину. Такі алкілний фрагмент формули І(ііі) або l(iv): групи можуть також бути насиченими або, коли існує достатнє число (тобто мінімум два) атомів карбону, бути ненасиченими. Галоген-групи, якими R6 та R7 можуть бути заміщеними, включають флуор, хлор, бром та йод. Коли R5 представляє C(O)OR7, переважні групи R7 включають: (а) лінійний, розгалужений або циклічний С 36алкіл, наприклад, С 4-6циклоалкіл; (b) С1-2алкіларил-групи, як-то бензил, як варіант, заміщені як показано вище. Переважні сполуки формули Іа включають сполуки, в яких R5 представляє OR6. Коли R5 представляє OR6, переважні групи R6 включають: (a) Н; (b) незаміщений, лінійний, розгалужений або де R5 представляє OR6 або C(O)OR 7; 6 циклічний С 1-8 (наприклад, С1-6) алкіл, як-то лінійR представляє Η, С1-10алкіл, С1-3алкіларил ний С1-3алкіл (наприклад, етил або, особливо, меабо С1-3алкілоксіарил (алкільні частини останніх тил), розгалужений С 3-8алкіл (наприклад, і-пропіл, двох гр уп, як варіант, перервані одним або більше і-бутил або 4-гептил) або циклічний С 4-7алкіл (тобатомами оксигену, а арильні частини останніх двох то С4.-7циклоалкіл, наприклад, циклобутил або груп, як варіант, заміщені одним або більше заміс 15 78195 16 циклогексил); С1-3алкілоксифеніл (наприклад, С2алкілоксифеніл), феніл-групу заміщено одним або більше замісниками як показано вище (наприклад, трифлуорметилом); (d) С1-2алкіларил (наприклад, метиларил), де арил-групою є феніл, піридиніл, оксазоліл або ізоксазоліл, останні три групи, як варіант, заміщені деR3b представляє структурний фрагмент фоодним або більше замісниками як показано вище рмули l(v) або l(vi): (наприклад, метоксилом, метилом, бромом та/або хлором). Переважні сполуки формули Іа включають сполуки, в яких R5 представляє OR6, a R6 представляє лінійний, розгалужений (за прийнятністю), або циклічний (за прийнятністю), С1-6 (наприклад, С4) алкіл, як-то метил, етил, н-пропіл, і-пропіл або циклобутил. Сполуки формули Іа можна отримувати одним або більше з наступних способів: (a) реакцією відповідної сполуки формули II, яку визначено вище, зі сполукою формули XV, де Υ та R3a визначені вище, наприклад, в умовах, подібним до умов, описаних вище для синтезу сполук формули І; (b) реакцією відповідної сполуки формули IV, яку визначено вище, зі сполукою формули XVI, R3aCH2NH2 XVI де R3a визначено вище, наприклад, в умовах, подібним до умов, описаних вищедля синтезу сполук формули І; (c) для сполук формули Іа, в яких R5 представляє ОН, реакцією відповідної сполуки формули XVIA чи XVIВ, де Ra, R1, R2, R4, Y, X1, X2, X3 та Х4 визначені вище, з гідроксиламіном, наприклад, в умовах, відомих фа хівцям; (d) для сполук формули Іа, в яких R5 представляє OR6, реакцією захищеного похідного відповідної сполуки формули І, якою є, наприклад, сполука формули XVII, де Rb представляє, наприклад, -CH2CH2Si(CH3)3 чи бензил, або його таутомер, а Ra, R1, R2, Y, R4, X, Χ2, Χ3 та X, визначено вище, зі сполукою формули XVIII, R6ONH2 XVIII де R6 визначено вище, або її кислотноадитивною сіллю, наприклад, при температурі між кімнатною та температурою кипіння під зворотним холодильником у присутності прийнятного органічного розчиннику (наприклад, ТГФ, CH3CN, ДМФ або ДМСО), а потім видаленням групи -C(O)ORb в умовах, відомих фа хівцям (наприклад, реакцією з ТВАФ чи ТФОК (наприклад, як описано далі)); (e) для сполук формули Іа, в яких R представляє ОН, реакцією сполук формули XVII, як визначено вище, в яких R представляє бензил, з гідроксиламіном, або його кислотно-адитивною сіллю, наприклад, в умовах, що добре відомі фахівцям, (f) для сполук формули Іа, в яких R5 представляє COOR7, реакцією відповідної сполуки формули І, яку визначено вище, зі сполукою формули XIX, L'COOR 7 XIX де L представляє придатну відщеплювану гр упу, як-то галоген або нітрофеніл (наприклад, 4нітрофеніл), a R7 визначено вище, наприклад, при кімнатній температурі чи біля неї у присутності придатної основи (наприклад, NaOH, наприклад, у водному розчині) та прийнятного органічного розчиннику (наприклад, дихлорметан), або (g) для сполук формули Іа, в яких R5 представляє ОСН3 або ОСН2СН3, реакцією відповідної сполуки формули Іа, в якій R5 представляє ОН, з диметилсульфатом або діетилсульфатом, відповідно, наприклад, у присутності придатної основи (наприклад, гідроксиду лужного металу, як-то КОН (наприклад, у водному розчині при, наприклад, 50мас/%)) та прийнятного каталізатору (наприклад, галогеніду четвертинного амонію, як-то хлориду бензилтриметиламонію (наприклад, у розчині у ди хлорметані або ТГФ при наприклад, 10мас.%)) Хвилясті лінії на зв'язках у фрагментах формул l(v) та Ι(νι) позначають позиції зв'язку фрагментів. Сполуки формул XVIA та XVIB можна отримувати реакцією відповідної сполуки формули II, яку визначено вище, зі сполукою формул ХІХА або ХІХВ 17 78195 18 клад, сполуки формул ХІХА та ХІХВ можна отримувати реакцією відповідної сполуки формули ХІХС або XIXD (за прийнятністю) зі сполукою формули X, наприклад, в умовах, подібним до умов, описаних вище. Сполуки формул І та Іа, які визначено вище, та похідні від них, позначають далі як "сполуки винаходу". Переважні сполуки винаходу включають сполуки з прикладів, описаних далі 3 огляду на це, сполуки винаходу, що можуть бути згаданими, включають: де R, Y, Х1, Х2, Х3 та Х4 визначені вище, наприPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб; клад, в умовах, подібним до умов, описаних ви ще Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeдля синтезу сполук формули І. Паб(OMe); Сполуки формул XVIA та XVIB можна альтерPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeнативно отримувати реакцією відповідної сполуки Паб(OEt); формули IV, яку визначено вище, зі сполукою фоPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeрмул ХІХС або XIXD, Паб(OHPr); Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OiPr); Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OцBu); Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OH); Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(COOцПентил); Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(Z); Ph(3-CI)(5-OCF3-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб; де R, Х1 , Х2 , Х3 та Х4 визначені вище, наприPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeклад, в умовах, подібним до умов, описаних ви ще Паб(OMe); для синтезу сполук формули І. Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeСполуки формули XVII можна отримувати реаПаб(OCH2-3-(5-Me-ізоксазол)); кцією відповідної сполуки формули II, яку визначеPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeно вище, зі сполукою формули XX, Паб(OCH2-3-піридин); Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OiBu); Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OEt); Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OBn); де Υ та R3b визначені вище, наприклад, в умоРh(3-СІ)(5-ОСР3)-(Р)СН(ОН)С(О)-Агевах, подібним до умов, описаних вище для синтезу Паб(ОцГексил); сполук формули І. Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeАльтернативно, сполуки формули XVII можна Паб(OцBu); отримувати реакцією відповідної сполуки формули Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeІ зі сполукою, відповідною до сполуки формули Паб(OCH2CH2OPh(3-CF3)); XIX, в якій замість групи R7, представлено групу Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeRb, де Rb визначено вище, наприклад, в умовах, Паб(OBn(4-CI)); описаних вище з огляду на отримання сполук фоPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeрмули Іа. Паб(OBn(3-MeO)); Сполуки формул XV та XX можна отримувати Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeреакцією відповідної сполуки формули X, яку виПаб(OBn(2-Br)); значено вище з, відповідно, сполукою формули Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeXVI, яку визначено вище, або сполукою формули Паб(OBn(4-Me)); XXI, РИ(3-СІ)(5-ОСР3)-(Р)СН(ОН)С(О)-Аze-Паб(ОR3bCH2NH2 XXI 4-гептил); де R3b визначено вище, наприклад, в умовах, Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(S)CH(CH2OH)C(O)-Azeподібним до умов, описаних вище для синтезу Паб; сполук формули І. Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Aze-Паб; Сполуки формул XVI, XVIII, XIX, ХІХА, ХІХВ, Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-AzeХІХС, XIXD та XXI є комерційно доступними, відомі Паб(OMe); у літературi, або їх можна отримувати аналогічно Ph(3-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб; способам, описаним тут, або звичайними спосоPh(3-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб; бами синтезу, згідно зі стандартними способами, з Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб; легко доступних ви хідних матеріалів, використоPh(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeвуючи прийнятні реагенти та умови реакції. Напри 19 78195 20 Паб(OMe); не викликатимуть рацемізацію або епімеризацію, Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeабо дериватизацією, наприклад, гомохіральною Паб; кислотою, а потім розділенням of діастереомерних Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeпохідних звичайними засобами (наприклад, ВЕРХ, Паб(OMe); хроматографією через оксид силіцію). Усі стереоPh(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб; ізомери включені у рамки винаходу. Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzeСполуки винаходу, в яких фрагмент Паб(OMe); Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб; Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OMe); Ph(3-CI)(5-OCH(CH 2F)2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб; має S-конфігурацію, є переважними. Ph(3-CI)(5-OCH(CH 2F)2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПереважні сполуки винаходу включають споПаб(OMe), луки, в яких структурний фрагмент Ph(3-F)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб, Ph(3-F)(5-OCHF2-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OMe), Ph(3-Br)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб Ph(3-Br)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб Ph(3-Br)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OMe), Ph(3-CI,5-OCH 2CHF2)-CK)CH(OH)C(O)-AzeПаб(OH), Ph(3-CI,5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Azeє у R-конфігурації коли Ra представляє -ОН, Паб(OH), або у S-конфігурації, коли Ra представляє -СН2ОН. Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Pro-Паб, Хвилясті лінії на зв'язках у ви щенаведених Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Proдвох фрагментах позначають позиції зв'язку фраПаб(OMe), гментів. Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH 2Сполуки винаходу, що можна згадати, вклю((2-амідино)-5-піридиніл), чають Ph(3-CI)(5-OCHF2)-CH(OH)C(O)-Aze-Паб Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH 2(де, у цьому випадку, Aze символізує азетидин-2((2-метоксиамідино)-5-піридиніл), карбоксилат (тобто у (R)-та/або S)-конформаціях), Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH 2а також еквівалентні сполуки, в яких замість атому ((5-амідино)-2-піримідиніл), гідрогену у амідиногрупах у Паб представлено Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(О)-Aze-NH-CH 2груп у -OR6 (яку визначено вище), в якій R6 пред((5-метоксиамідино)-2-піримідиніл), ставляє С 1-3алкіл (тобто Ph(3-CI)(5-OCHF2)Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)G(О)-Aze-Паб(3CH(OH)C(O)-Aze-Паб(OMe), Ph(3-CI)(5-OCHF2)F), CH(OH)C(O)-Aze-Паб(OEt), Ph(3-CI)(5-OCHF2)Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(2,6CH(OH)C(O)-Aze-Паб(OHPr) або Ph(3-CI)(5диF), OCHF2)-CH(OH)C(O)-Aze-Паб(OiPr)). Сполуки виPh(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(2,6находу, що можна далі згадати, включають сполудиF)(OMe), ки, що не є певними сполуками, ідентифікованими Ph(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(2,5у попередньому вислові. диF), та Фахівцям треба розуміти що у способах, опиPh(3-CI,5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(2,5саних вище та далі, функціональні групи інтермедиF)(OMe). діатних сполук можуть потребувати захисту за хисСполуки винаходу можуть виявляти таутоменими групами. рію Усі таутомерні форми та їх суміші включені у Функціональні групи, що потрібні для захисту, рамки винаходу. Певні таутомерні форми, що мовключають гідрокси-, аміно- та карбоксильні групи. жуть бути згаданими включають форми, зв'язані з Придатні захисні групи для гідроксигруп включапозицією подвійного зв'язку у амідиновій функціоють, як варіант, заміщені та/або ненасичені алкілнальній групі у сполуці формули Іа, та позицією групи (наприклад, метил, аліл, бензил або трет5 заміснику R . бутил), триалкілсиліл- або діарилалкілсиліл-групи Сполуки винаходу також містять два або біль(наприклад, трет-бутилдиметилсиліл, третше асиметричних атомів карбону та можуть тому бутилді фенілсиліл або триметилсиліл) та тетрагівиявляти оптичну ізомерію та/або діастереоізомедропіраніл. Придатні захисні групи для карбонових рію. Діастереоізомери можна розділяти викорискислот включають С 1-6алкілові або бензилові естетанням звичайних способів, наприклад, хроматогри. Придатні захисні групи для аміногруп та амідирафією. Різноманітні стереоізомери можна ногруп включають т-бутилоксикарбоніл, бензилоквиділяти розділенням рацемічних або інших сумісикарбоніл або 2-триметилсилілетоксикарбоніл шей сполук використанням звичайних способів, (Теос). Атоми нітрогену амідиногруп можна також наприклад, ВЕРХ. Альтернативно потрібні оптичні захищати гідроксигрупою або алкоксигрупою, та ізомери можна отримувати реакцією прийнятних можуть бути моно- або дизахищеними. оптично активних вихідних матеріалів в умовах, які Захист та зняття захисту з функціональних 21 78195 22 груп можуть мати місце перед сполученням або редньо визначеного часу (наприклад, приблизно 1 після нього, або перед будь-якою іншою реакцією години), після перорального або парентерального або після неї у ви щезгаданих схемах. застосування (дивися, наприклад, тест Ε нижче) Захисні групи можна видалити згідно з зі споабо, альтернативно, після інкубування у присутнособами, що добре відомі фахівцям та описані далі. сті мікросом печінки (дивися, наприклад, тест G Фахівцям зрозуміло, що у порядку отримання нижче). сполук винаходу у альтернативних, а у деяких виСполуки винаходу, можна тому чекати, корисні падках більш зручних виконаннях, індивідуальні при станах, де потрібне інгібування тромбіну, етапи способів згадай вище можна у відмінному та/або при станах, де показана антикоагуляційна порядку, та/або індивідуальні реакції можна протерапія, включаючи наступні: водити на відмінному етапі у загальному шляху Лікування та/або профілактика тромбозу та (тобто можна додавати замісники до та/або пропперкоагулятивності у крові та/або тканини тварин, водити хімічні перетворення відмінних від згадавключаючи людину. Відомо що пперкоагулянтивних вище інтермедіатів у сполученні з певною реаність може призводити до тромбо-емболічних хвокцією). Це може позбавляти або, за необхідністю, роб. Стани, асоційовані з гіперкоагулятивністю та потребувати захисних гр уп. тромбо-емболічні хвороби, які можна згадати, Тип залученої хімії диктуватиме необхідність включають спадкову або набуту резистентність до та тип захисних гр уп, а також послідовності для активованого білку С, як-то фактору V-мутаци (фазавершення синтезу. ктор V Лейдена), та спадкову або набуту нестачу Застосування захисних груп повністю описано антитромбіну III, білку С, білку S, кофактору гепау ["Protecti ve Groups in Organic Chemistry", видан. J рину II Інші стани, відомі як асоційовані з гіперкоаW F McOmie, Plenum Press (1973), та "Protective гулятивністю та тромбо-емболічною хворобою, Groups in Organic Synthesis", 3rd edition, T.W. включаючи циркуляцію антифосфоліпідних антитіл Greene & P.G.M. Wutz, Wiley-lnterscience (1999)]. (Lupus-антикоагулянт), гомоцистеїнемію, індуковаЗахи щені похідні сполук винаходу можна пену гепарином тромбоцитопенію та дефекти фібриретворити хімічно у сполуки винаходу використаннолізу, а також коагуляційні синдроми (наприклад, ням стандартних способів зняття захисту (наприрозсіяна внутрішньосудинна коагуляція (DIG)) та клад, гідрування). Фахівцю також слід розуміти що поранення судин взагалі (наприклад, внаслідок деяк сполуки формули Іа можна також позначати хірургії). як "захищені похідні" сполук формули І. Лікування станів, при яких існує небажаний Медичне та фармацевтичне застосування надлишок тромбіну без ознак пперкоагулятивності, Сполуки винаходу можуть виявляти фармаконаприклад, при нейродегенеративних хворобах, логічну активність як такі. Сполуки винаходу що як-то хворобі Альцгеймера. можуть виявляти таку активність включають, але Певні режими хвороб, які можна згадати, без обмеження, сполуки формули І. включають терапевтичне та/або профілактичне Однак, інші сполуки винаходу (включаючи лікування тромбозу вен (наприклад, ГТВ) та легесполуки формули Іа) можуть не виявляти таку акневої емболії, артеріального тромбозу (наприклад, тивність, але їх можна застосовувати парентерапри інфаркті міокарду, нестабільну стенокардію, льно або перорально, і вони можуть після цього приступ на основі тромбозу та периферійний арметаболізувати у тілі з утворенням сполук, що фатеріальний тромбоз), та системну емболію, звирмакологічно активні (включаючи, без обмеження, чайно від передсердя, при передсерцевій фібривідповідні сполуки формули І). Такі сполуки (що ляції (наприклад, не-клапанова передсерцева також включає сполуки, які можуть виявляти деяку фібриляція) або від лівого шлуночка після трансфармакологічну активність, але активність яких є мурального інфаркту міокарду, або викликану запомітно нижчою за "активність" сполук, до яких стійною серцевою нестачею, профілактику повтовони метаболізують), можуть тому бути описані як рної закупорки (тобто тромбозу) після тромболізу, "проліки" активних сполук. підшкірну транс-люмінальну анпопластику (РТА) Отже, сполуки винаходу є корисними, оскільки та операції коронарне шунтування, попередження вони виявляють фармакологічну активність, та/або ретромбозу після мікрохірургії та судинної хір урги метаболізують у тілі після перорального або паревзагалі. нтерального застосування з утворенням сполук, як Подальші показання включають терапевтичне виявляють фармакологічну активність. Сполуки та/або профілактичне лікування розсіяної внутрішвинаходу є тому визначені як фармацевтичні заньосудинної коагуляції, викликаної бактеріями, соби. багаточисельних травм, інтоксикації або будь-як Згідно з наступним аспектом винаходу запроінший механізм, антикоагулянте лікування, коли поновано тому сполуки винаходу для застосуванкров є у контакті з чужинною поверхнею у тілі, якня як фармацевтичні засоби. то судинні трансплантати, судинні стенти, судинні Зокрема, сполуки винаходу є потужними інгібікатетери, механічні та біологічні протезуючі клапаторами тромбіну як такі та/або (наприклад, у випани або будь-які інші медичні пристрої, та антикоадку проліків) метаболізують після застосування з гулянтне лікування, коли кров є у контакті з медичутворенням потужних інгібіторів тромбіну, наприними пристроями зовні тіла, як-то при серцевоклад, як можна продемонструвати у описаних нисудинній хірурги з використанням апарату серцежче тестах. легені або при гемодіалізі, терапевтичне та/або У "проліки інгібітору тромбіну", ми включаємо профілактичне лікування ідіопатичного та респірасполуки що утворюють інгібітор тромбіну, у експеторного дистрес-синдрому дорослих, фіброз легериментально виявленій кількості, та в межах попенів після лікування радіацією або хемотерапії, сеп 23 78195 24 тичного шоку, септицемію, запальних реакцій, які кованого вивільнення, або систем модифікованого включають, але без обмеження, набряк, гострий вивільнення "з желеутворюючою матрицею", в якій або хронічний атеросклероз, як-то коронарну арсполука винаходу знаходиться разом з полімером, теріальну хворобу та утворення атеросклеротичщо набрякає у водному середовищ (тобто "гідроних бляшок, церебральну артеріальну хворобу, фільний желеутворюючий компонент"). церебральний інфаркт, церебральний тромбоз, Зокрема ми вважаємо за краще, коли сполуки церебральну емболію, периферійну артеріальну винаходу сформовані разом у композицію з желехворобу, ішемію, стенокардію (включаючи нестаутворюючою матрицею, що містить йота-карапнан більну стенокардію), реперфузійне пошкодження, та один або більше нейтральних желеутворюючих рестеноз після підшкірної транс-люмінальної ангіполімерів. опластики (РТА) та хірургії шунтування коронарних Йота-карапнан переважно представлено у таартерій. кому переважному препараті на рівні більше 15% Сполуки винаходу що інгібують трипсин та/або за масою. Переважні гатунки йота-карапнану тромбін, можуть також бути корисними при лікувключають йота-карапнан фармацевтичного гатуванні панкреатиту. нку (доступний від FMC Biopolymer), який має в'язСполуки винаходу тому показані при терапевкість не менше 5 сантипуаз (сП), переважно у метичному та/або профілактичному лікуванні цих жах 5-10сП (при нагріванні 1,5% розчину до 82°С, станів. після чого в'язкість вимірюють при 75°С віскозимеЗгідно з наступним аспектом представленого тром Brookfield LV опорядженим штиром №1, що винаходу, запропоновано спосіб лікування стану, обертається зі швидкістю 30об/хвил), та йотаде потрібне інгібування тромбіну, спосіб включає карапнан технічного гатунку (доступний від Fluka застосування терапевтично ефективної кількості Biochemica), який переважно має в'язкість не месполуки винаходу до особи, що потерпає від таконше 14мПа, для 0,3% водн. розчин нагрітого до го стану або схильна до нього. 20°С, після чого в'язкість вимірюють з використанСполуки винаходу слід звичайно застосовуваням віскозиметру зі спадною кулькою, типу Haake, ти перорально, внутрішньовенно, підшкірно, букавикористовуваним разом з термостатом Lauda С3 льно, ректально, дермально, назально, трахеальта Hakke Mess-System HI, та з використанням поно, бронхіально, будь-яким іншим парентеральним критих золотом кульок з нержавіючої сталі густини шляхом або інгаляціями, у формі фармацевтичних 7,8г/см 3. препаратів, що містять сполуку винаходу як вільну Нейтральний желеутворюючий полімер може основу, або фармацевтично прийнятну нетоксичну бути одиничним, або сумішшю більш одного нейторганічну або неорганічну кислотно-адитивну сіль, ральних здатних до ерозії полімерів, що мають у фармацевтично прийнятній формі дозування. желеутворюючі властивості та мають по суті рНПереважними шляхами застосування сполук незалежну розчинність. Нейтральний желеутвовинаходу є пероральні. Переважні фармацевтичні рюючий полімер, переважно, представлено у компрепарати включають фармацевтичні композиції з позиції на рівні більше 10%, але переважно більше модифікованим вивільненням, що містять сполуки 20% за масою. винаходу. Термін "модифіковане вивільнення" Придатні нейтральні желеутворюючі полімери фармацевтичної композиції, як фахівцю треба довключають поліетиленоксид (PEG), похідні та члебре розуміти, включає будь-яку композицію, в якій ни родини РЕО (наприклад, поліетиленгліколь початок та/або швидкість вивільнення ліків (тобто (PEG), переважно наявний у твердому стані, присполук винаходу) є зміненою галеновими маніпудатної молекулярної маси або в'язкості). При виляціями, і включає визначення, надане в [United користанні як одиничного нейтрального желеутвоStates Pharmacopeia (USP XXII), стор. хііі та xiv рюючого полімеру РЕО переважно має передмови/преамбули], релевантне розкриття молекулярну масу більше 4 мільйонів (4М), що цього документу наведено як посилання. відповідає в'язкості у водному розчині у межах Придатні композиції з модифікованим вивіль1650-5500мПа (або 1650-5500сП, яку вимірюють у ненням фахівці можуть отримувати згідно зі стан1% водному розчині при 25°С, використанням вісдартними способами у фармацевтиці [дивися, накозиметру Brookfield RVF, з штиром No. 2 при приклад, Pharmacentisch Weekblad Scientific 2об/хвил). Інші приклади придатних РЕО включаEdition, 6, 57 (1984); Medical Applications of ють РЕО молекулярної маси приблизно 5 мільйоControlled Release, 6, 57 (1984); Medical нів (5М), що відповідає в'язкості у водному розчині Applications of Controlled Release, Vol II, вид. у межах 5500-7500мПа, або РЕО молекулярної Langer та Wise (1984) Bocaraton, Florida, стор.1 до маси приблизно 8 мільйонів (8М), що відповідає 34; Industrial Aspects of Pharmaceuticals, ed. в'язкості у водному розчині у межах 10000Sandel, Swedish Фармацевтичн Press (1993) 15000мПа. Ці межі охоплюють величини типової стор.93 до 104; та стор.191 до 211 "Pharmaceutics: в'язкості розчину (у сП), яку вимірюють при 25°С, The Science of Dosage Form Design", вид. Μ. Ε. встановлену для цього полімеру у [USP 24/NF 19, Aulton (1988) (Churchill Livingstone)]. 2000 видання, стор.2285-2286]. Якщо PEG викориПереважні композиції з модифікованим вивістовують як одиничний нейтральний желеутворюльненням тому включають композиції, в яких приючий полімер, він переважно має високу молекуйнятну сполуку винаходу уведено у полімерну малярну масу, наприклад, молекулярну масу трицю. З огляду на це, ми вважаємо за кращі приблизно 20000, що відповідна межам в'язкості композиції, що включають сполуки винаходу за2700-3,500мПа (або 2700-3500сП), яку вимірюють пропоновані для перорального застосування у з використанням 50% водного розчину (за масою) формі так званих "набрякальних" систем модифіпри 20°С, з використанням капілярного віскозиме 25 78195 26 тру (Ubbelohde або еквівалентого) [Ref: European 100мг/кг маси тіла при пероральному застосуванні Pharmacopoeia 3rd Ed., 2000, Supplement, pp.908та 0,001-50мг/кг маси тіла при парентеральному 909]. застосуванні. Інші придатні желеутворюючі полімери вклюДля запобігання невизначеності використовучають похідні целюлози, як-то гідроксипропілмеваний тут термін "лікування" включає терапевтичтилцелюлозу (НРМС) або гідроксіетилцелюлозу не та/або профілактичне лікування. (НЕС) з придатно високими в'язкостями (наприСполуки винаходу мають перевагу в тому, що клад, "НРМС 10000сП", "НРМС 15000сП", "НЕС вони можуть бути більш ефективними, бути менш типу НН" або "НЕС типу Н"). При використанні як токсичними, мати довшу дію, мати ширші межі одиничного нейтрального полімеру полімери гідактивності, бути більш потужними, дають меншу роксипроіллметилцелюлози типу "НРМС 10000сП" побічну дію, більш легко поглинаються та/або мата "НРМС 15000сП" мають, відповідно, непривеють кращий фармакокінетичний профіль (напридені в'язкості 7500-14000мПа (або 7500-14000сП), клад, вищу пероральну біозасвоюваність та/або та 11250-21000мПа (або 11250-21000сП), що винижчий кліренс), та/або мають інші корисні фармамірюють при 20°С у 2% (за масою) водному розчикологічні, фізичні, або хімічні властивості, ніж споні, розрахованого з посиланням на висушену релуки, відомі у попередньому рівні техніки. Сполуки човину, з використанням капілярного віскозиметру винаходу можуть мати подальшу перевагу в тому, (Ubbelohde або еквівалентного). Один тип полімещо їх можна застосовувати менш часто, ніж сполуру гідроксіетилцелюлози, наприклад, "Natrosol 250 ки, відомі у попередньому рівні техніки. Pharma, тип НН", від Hercules Incorporated Біологічні Тести (Aqualon), показує звичайно в'язкість за БрукфеМожна застосовувати наступні способи тестульдом приблизно 20000мПа з використанням привання ладу Brookfield Synchro-Lectnc Model LVF в умовах Тест А 1% концентрації розчину, штир №4, швидкість Визначення часу згортання тромбіну (ТЧ) штира 30об/хвил, фактор 200, 25°С [Дивися Розчин інгібітору (25мкл) інкубують з плазмою Natrosol Physical and Chemical Properties booklet, (25мкл) протягом трьох хвилин. Тромбін людини (Т 33,007-Е6 (1993), р.21). 6769, Sigma Chem. Co або Hematologic Певні композиції, що можна згадати, включаTechnologies) у буферному розчині, рН 7,4 (25мкл, ють композиції, в яких сполуку винаходу сформо4,0 NIH одиниць/мл), далі додають та час згортанваноразом з йота-карапнаном та НРМС (10000сП) ня вимірюють у автоматичному пристрої (KС 10, при співвідношенні 50:50 (мас.%), або разом з йоAmelung). та-карапнаном та РЕО 4М при співвідношенні Час згортання тромбіну (ТЧ) виражають як аб50:50 (мас.%). солютні величини (секунди), а також співвідноПереважні додаткові ексципієнти у такій комшення ТЧ без інгібітору (ТЧ0) до ТЧ з інгібітором позиції включають такі змащувальні засоби, як (ТЧi). Останні співвідношення (у межах 1-0) відстеарилфумарат натрію. кладають проти концентрації інгібітору (log-шкала) Залежно від розладу та пацієнта, якого лікута підганяють до сигмоідальної кривої дозають, та шляху застосування, композиції можна реакція згідно з рівнянням застосовувати у різних дозах. у=a/[l+(x/IK50)s] Сполуки винаходу можна також поєднувати де: a = максимум межі, тобто 1, s = нахил крита/або співзастосовувати з будь-яким антитромбової доза-реакція, а тичним засобом з відмінним механізмом дії, як-то IK50 = концентрація інгібітору що подвоює час одним або більше з наступних антитромбоцитні згортання. Розрахунки проводили на персональзасоби ацетилсаліцилових кислот, тиклопідин та ному комп'ютері з використанням програмного клопідогрел, рецептор тромбоксану та/або інгібітозабезпечення GraFit, Version 3, установка рівняння ри синтетази, антагоністи фібриногенового рецептака: початок при 0, визначений кінець = 1 тору, простациклінові міметики, інгібітори фосфо(Enthacus Software, Robin Leatherbarrow, Imperial діестерази, антагоністи ADP-рецептору (Р2Т), та College of Science, London, UK). інгібітори карбоксипептидази U(CPU). Тест В Сполуки винаходу можна далі поєднувати Визначення інгібування тромбіну хромогенним та/або співзастосовувати з тромболітичними засоавтоматизованим дослідженням бами, як-то одним або більше з активаторів ткаПотужність інгібітору тромбіну вимірюють авнинних плазміногенів (природних, рекомбінантних томатизованим способом з хромогенним субстраабо модифікованих), стрептокінази, урокінази, том на мікропланшеті Plato 3300 (Rpsys AG, CHпроурокінази, апізоілованої плазміноген8634 Hombrechtikon, Switzerland), з використанням стрептокіназного активаторного комплексy 96-коміркових, напів-об'ємних мікротитрувальних (APSAC), плазміногенних активаторів слинних запланшетів (Costar, Cambridge, MA, USA; Cat No лоз тварин, тощо, при лікуванні тромботичних хво3690). Вихідні розчини тест-речовини у ДМСО роб, зокрема, інфаркту міокарду. (72мкл), 0,1-1ммоль/л, розбавляють серійно 1:3 Згідно з наступним аспектом винаходу запро(24+48мкл) з ДМСО, отримавши 10 відмінних конпоновано тому фармацевтичні композиції, вклюцентрацій, які аналізують як зразки у дослідженні. чаючи сполуку вина ходу у суміші з фармацевтично 2мкл тест-зразку розбавляють 124мкл буфер у для прийнятним ад'ювантом, розріджувачем або нодослідження, додають 12мкл розчину хромогенносієм. го субстрату (S-2366, Chromogenix, Molndal, Придати добові дози сполук винаходу у тераSweden) у буфері для дослідження та в кінці 12мкл певтичному лікуванні людини є приблизно 0,001розчину a-тромбіну (a-тромбін людини, Sigma 27 78195 28 Chemical Co. Або Hematologic Technologies) у будоза-реакція, a IK50 = концентрація інгібітору що фері для дослідження, та зразки змішують. подвоює час згортання. Розрахунки проводили на Кінцеві концентрації дослідження: тестперсональному комп'ютері з використанням проречовина 0,00068 - 13,3мкмоль/л, S-2366 грамного забезпечення GraFit Version 3, установка рівняння така початок при 0, визначений кінець = 1 0,30ммоль/л, a-тромбін 0,020 NIН од/мл. Лінійний (Enthacus Software, Robin Leatherbarrow, Imperial інкремент поглинання протягом 40 хвилин інкубуCollege of Science, London, UK). вання при 37°С використовують для розрахунку проценту інгібування для тест-зразків у порівнянні Значення IK50 АЧТЧ визначено як концентрація інгібітору у плазмі людини що подвоює Активоз чистими зразками без інгібітору. IK 50ваний Частковий Тромбопластиновий Час автоматизовану величину, відповідну концентрації Тест Ε інгібітору, яка викликає 50% інгібування активності Визначення тромбінового часу ex vi vo тромбіну, розраховують за кривою log-концентраціі проти. % інгібування. Інпбуванн тромбіну після перорального або парентерального застосування сполуки винаходу Тест С в суміші етанол SolutolK вода (5:5:90), визначають Визначення константи інгібування Ki для трона притомних щурах, яких за одну або дві доби до мбіну людини експерименту опоряджують катетером для відбору Визначення Ki роблять використанням способу хромогенного субстрату, що проводять при 37°С крові з сонної артерії. На добу експерименту зразки крові відбирають у фіксований час після застона центрифужному аналізаторі Cobas Bio (Roche, сування сполуки у пластикові туби, що містять 1 Basel, Switzerland). Остаточну ферментну активчастину розчину цитрату натрію (0,13моль на л) та ність після інкубування a-тромбіну людини з різ9 частин крові. Туби центрифугують, отримавши номанітними концентраціями тест-сполуки визназбіднену тромбоцитами плазму. чають при трьох відмінних концентраціях 50мкл зразків плазми осаджують 100мкл хосубстрату та вимірюють як зміну у оптичному полодного ацетонітрилу. Зразки центрифугують проглинанні при 405нм. тягом 10 хвилин при 4000об/хвил 75мкл надосадРозчини тест-сполуки (100мкл; звичайно у букового шару розбавляють 75мкл 0,2% мурашиної ферному або сольовому розчині, що містить БСА кислоти. По 10мкл об'ємів утворених розчинів 1,0г/л) змішують з 200мкл a-тромбіну людини аналізують ЕІ(з електророзпилювальним інтер(Sigma Chemical Co) у буфері для дослідження фейсом)-МС/МС та концентрації інгібітору тромбі(0,05моль/л Трис-НСІ рН 7,4, іонна сила 0,15 ну визначають використанням стандартних кривих. adjusted з NaCI), що містить бичачий сироваточний Тест F альбумін (БСА) (10г/л), та аналізують як зразки у Визначення кліренсу плазми у щурів центрифужному аналізаторі Cobas Bio. 60мкл зраКліренс плазми оцінюють у самців Sprague зку разом з 20мкл води додають до 320мкл субDawley щурів Сполуку розчиняють у воді та увострату S-2238 (Chromogenix AB, Molndal, Sweden) дять як підшкірну болюсну ін'єкцію у дозі 4 у буфері для дослідження, та відстежують зміну (мкмоль/кг). Зразки крові збирають з інтервалами поглинання (АА/хвилин. Кінцева концентрація Sдо 5 годин після застосування ліків. Зразки крові 2238 - 16, 24 та 50мкмоль/л та тромбіну 0,125 центрифугують та плазму відділяють від клітин NIHод/мл. крові та переносять у склянки, що містять цитрат Стійкий стан швидкості реакції використовують (10% кінцев. концентрація). 50мкл зразків плазми для створення залежності Діксона, тобто діаграми осаджують 100мкл холодного ацетонітрилу. Зразконцентрації інгібітору проти. І/(АА/хвилин). Для ки центрифугують протягом 10 хвилин при оборотних, конкурентних інгібіторів точки для від4000об/хвил 75мкл надосадкового шару розбавмінних концентрацій субстрату звичайно утворюляють 75мкл of 0,2% мурашиної кислоти. По 10мкл ють прямі лінії, як відрізок на осі при x=-Ki. об'ємів утворених розчинів аналізують ЕІ-МС/МС Тест D та концентрації інгібітору тромбіну визначають Визначення Активованого Часткового Тромбовикористанням стандартних кривих. Площу (AUC) пластинового Часу (АЧТЧ) під кривою концентрація плазми - час оцінюють АЧТЧ визначають у поєднаній цитратоїній використанням log/лінійного трапецеїдального плазмі звичайної людини з реагентом РТЧ правила та екстраполюють на безкінечний час. Automated 5 виробленим Stago. Інгібітори додають Кліренс плазми (CL) сполуки далі визначають як до плазми (10мкл розчин інгібітору до 90мкл плазСL=Доз/АUС ми) та інкубують з реагентом АЧТЧ протягом 3 Величини описані у мл/хвилин/кг. хвилин, а потім додають 100мкл розчину хлориду Tecт G кальцію (0,025М) та визначають АЧТЧ викорисВизначення стабільності in vitro танням аналізатору коагуляції KG 10 (Amelung) Мікросоми печінки отримують від щурів згідно з інструкціями виробника реагенту. Sprague-Dawley та зразків печінки людини згідно з Час згортання виражають як абсолютні веливнутрішнім стандартним порядком дій. Сполуки чини (секунди), а також як співвідношення АЧТЧ інкубують при 37°С при загальній концентрації без інгібітору (АЧТЧ 0) до співвідношення АЧТЧ з мікросомального білку 3мг/мл у 0,05моль/л ТРИСінгібітором (АЧТЧі). Останні співвідношення (меж буфері при рН 7,4, у присутності кофакторів NADH 1-0) наносять проти концентрації інгібітору (log(2,5ммоль/л) та НАДФН (0,8ммоль/л). Початковою шкала) та підганяють до сигиоїдальної кривої доконцентрацією сполуки є 5 або 10мкмоль/л. Зразки за-реакція згідно з рівнянням відбирають для аналізу до 60 хвилин після початку у=a/[l+(x/IK5O)s ] інкубування. Ферментну активність у зібраному де = максимум меж, тобто 1, s = нахил кривої 29 78195 30 зразку негайно зупиняють додаванням 20% мірисСпектри 13С ЯМР реєстр ували з використанням тинової кислоти у об'ємі відповідному 3,3% заганаведених дейтерованих розчинників як внутрішльного об'єму зразку. Кінцеву концентрацію сполунього стандарту. ки (кінцев. конц.) на 60 хвилину у зразку Приклад 1 визначають ЕІ-МС з використанням як порівняльPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeного зразку зібраного у час нуль (початк. конц.) % Паб(OцBu) зруйнованого інгібітору тромбіну розраховують так (і) 3-Хлор-5-метоксибензальдегід 3,5-Дихлоранізол (74,0г, 419ммоль) у ТГФ 100%´[початк. конц.]-[кінцев. конц.]/[початк. (200мл) додавали краплями до металевого магнію конц.] (14,2г, 585ммоль, попередньо промитого 0,5Η НСІ) Тест Η у ТГФ (100мл) при 25°С. Після додавання додаваМодель артеріального тромбозу ли краплями 1,2-диброметан (3,9г, 20,8ммоль). Судинне пошкодження індукують топічним уведенням хлориду ферум у (FeCI3) у сонну артеутворену темно-коричневу суміш гріли при кипінні під зворотним холодильником протягом 3 годин. рію. Щурів анестезують інтраперитональними ін'єСуміш охолоджували до 0°С та додавали одною кціями пентобарбіталу натрію (80мг/кг, порцією Ν,Ν-диметилформамід (60мл). Суміш розApoteksbolaget, Umea, Sweden), а потім постійним вливанням (12мг/кг/год) протягом експерименту. поділяли між діетиловим етером (3´400мл) та 6Η Температуру тіла підтримують при 38°С протягом НСІ (500мл). Поєднані органічні екстракти промиексперименту зовнішнім нагріванням. Експеримент вали розсолом (300мл), сушили сульфатом напочинають з 5 хвилинного контрольного періоду. трію, фільтрували та концентрували у вакуумі для Через 5 хвилин 125І-фібриноген людини (80кБк, отримання масла. Флеш-хроматографія (2х) на ІМ53, Amersham International, Buckinghamshire, UK) силікагелі, елюючи сумішшю гексан:ЕtOАс (4:1) уводять вн утрішньовенно та використовують як дала потрібну сполуку (38,9г, 54%) як жовте мамаркер для наступного входження фібрину(огену) сло. 1 у тромб. Проксимальний кінець сегменту сонної Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 9,90 (s, 1 Η), 7,53 (s, артерії поміщають у пластикову тубу (6мм, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 3,87 (s, 3H) SilasticÒ, Dow Corning, Ml, USA) відкриту вздовж, (ii) 3-Хлор-5-гідроксибензальдегід що містить просочений FeCI3 фільтр увальний паРозчин 3-хлор-5-метоксибензальдегіду (22,8г, пір (2мкл, масова частка 5%, Merck, Darmstadt, 134ммоль; дивися етап (і) вище) у СН2СІ2 (250мл) Germany) (діаметр 3мм, IF, Munktell, Grycksbo, охолоджували до 0°С. Трибромід бору (15,8мл, Sweden). Ліву сонну артерію піддають дм FeCI3 167ммоль) додавали краплями протягом 15 хвипротягом 10 хвилин та далі видаляють з пластиколин. Після перемішування реакційної суміші протявої туби та просочують у сольовому розчині. Через гом 2 годин, повільно додавали Н 2О (50мл). Роз15 хвилин сонну артерію видаляють та промивачин далі екстрагували етером (2´100мл). Органічні ють у сольовому розчині. Порівняльні зразки крові шари поєднували, сушили сульфатом натрію, фітакож збирають для визначення 125І-активності у льтрували та концентрували у вакуумі. Флешкрові через 10 хвилин після ін'єкції 125 І-фібриногену хроматографія на силікагелі, елюючи сумішшю та у кінці експерименту. 125І-активність у порівнягексан:ЕtOАс (4:1) дала потрібну сполуку (5,2г, льних зразках крові та сегментів судин вимірюють 25%). 1 у гама-лічильнику (1282 Compugamma; LKB Wallac Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 9,85 (s, 1H), 7,35 (s, Oy, Turku, Finland) у добу проведення експеримен1H), 7,20 (s, 1H), 7,10 (s, 1H), 3,68 (s, 1H) ту. Розмір тромбу визначають як кількість 125І(iii) 3-Хлор-5-дифлуорметоксибензальдегід активності уведеної у сегмент судини стосовно І25ІРозчин 3-хлор-5-гідроксибензальдегіду (7,5г, активності у крові (імп/mg). 48ммоль; дивися етап (іі) вище) у 2-пропанолі Загальні деталі експерименту (250мл) та 30% KОН (100мл) гріли до кипіння під ТШХ проводили на силікагелі. Хіральну ВЕРХ зворотним холодильником. При перемішуванні проводили використанням колонки Chiralcel OD CHCIF2 продували у реакційну суміш протягом 2 46мм Χ 250мм з 5см захисною колонкою. Темпегодин. Реакційну суміш охолоджували, підкислюратур у колонки підтримували при 35°С. Швидкість вали 1Η НСІ та екстрагували ЕtOАс (2 ´100мл). потоку була 1,0мл/хвилин. Використовували УФОрганічні фази промивали розсолом (100мл), судетектор Gilson 115 при 228нм. Рухома фаза шили сульфатом натрію, фільтрували та концентскладалася з гексанів, етанолу та трифлуороцторували у вакуумі. Флеш-хроматографія на силікавої кислоти та прийнятні співвідношення наведені гелі, елюючи сумішшю гексан:ЕtOАс (4:1) дала для кожної сполуки. Звичайно, продукт розчиняли потрібну сполуку (4,6г, 46%). 1 у мінімальній кількості етанолу та розбавляли руН ЯМР (300МГц, CDCI3) d 9,95 (s, 1H), 7,72 (s, хомою фазою. 1H), 7,52 (s, 1H), 7,40 (s, 1Η), 6,60 (t, JH-F=71-1Гц, ЕІ-МС/МС проводили використанням приладу 1Н) НР-1100, опоряджного інжектором СТС-PAL та (iv) Ph(3-Cn(5-OCHF2)-(R,S)CH(OTMS)CN колонкою ThermoQuest, Hypersil BDS-C185мм, Розчин 3-хлор-54´100мм. Використовували детектор API-3000 дифлуорметоксибензальдегіду (4,6г, 22,3ммоль; (Sciex). Швидкість потоку була 1,2мл/хвилин та дивися етап (ііі) вище) у СН2СІ2 (200мл) охолоджурухома фаза (градієнт) складалася з 10-90% ацевали до 0°С. Znl2 (1,8г, 5,6ммоль) та триметилситонітрилу з 90-10% 4мМ водного ацетату амонію, лілціанід (2,8г, 27,9ммоль) додавали та реакційній що містив 0,2% мурашиної кислоти. суміші давали нагрітися до кімнатної температури 1 Спектри Н-ЯМР реєстрували з використанням та перемішували протягом 15 годин. Суміш часттетраметилсилану як внутрішнього стандарту. ково концентрували у вакуумі, отримуючи потрібну 31 78195 32 1 сполуку як рідину, як використовували безпосереН ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,38 (s, 1H), 7,22 дньо на етапі (ν) нижче без наступної очистки або (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 6,89 (t, JH-F=71,1Гц, 1H), 5,17 характеризації. (s, 1H) (v) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C(NH)OEt (ix) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzePh(3-Cl)(5-OCHF2)-(R,S)CH(OTMS)CN (6,82г, Паб(Teoc) 22,3ммоль; дивися етап (iv) ви ще) додавали крапДо розчину Ph(3-CI)(5-OCHF2)лями до суміші НСІ/ЕtOН (500мл). Реакційну суміш (R)CH(OH)C(O)OH (1,1г, 4,4ммоль, дивися етап перемішували 15 годин, далі частково концентру(νiii) вище) та Н-Аzе-Паб(Теос) (дивися міжнародну вали у вакуумі, отримуючи потрібну сполуку як патентну заявку WO 00/42059, 2,6г, 5,7ммоль) у рідину, яку використовували на етапі (vi) без подаДМФ (50мл) при 0°С додавали ПіБОФ (2,8г, льшої очистки або характеризації. 5,3ммоль) та колідин (1,3г, 10,6ммоль). Реакційну (vi) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C(O)QEt суміш перемішували при 0°С протягом 2 годин та Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C(NH)OEt далі при кімнатній температурі протягом додатко(6,24г, 22,3ммоль; дивися етап (ν) вище) розчинявих 15 годин. Реакційну суміш концентрували у ли у ТГФ (250мл), 0,5М додавали H2SO4 (400мл) та вакуумі та піддавали флеш-хроматографії на силіреакційну суміш перемішували при 40°С протягом кагелі (3х), елюючи спершу сумішшю СНСІ3:ЕtOН 65 годин, охолоджували та далі частково концент(9:1), далі сумішшю етилацетат:ЕtOН (20:1) та в рували у вакуумі для видалення більшої частини кінці, елюючи сумішшю СН 2СІ2:СН3ОН (95:5), ТГФ. Реакційну суміші далі екстрагували етером отримуючи потрібну сполуку (1,0г, 37%) як білий (3´100мл), сушили сульфатом натрію, фільтруватвердий продукт. 1 ли та концентрували у вакуумі, отримуючи потрібН ЯМР (300МГц, CD3OD, суміш ротамерів) d ну сполуку як твердий продукт, який використову7,79-7,85 (d, J=8,7Гц, 2Н), 7,15-7,48 (m, 5Н) 6,89 та вали на етапі (vii) без наступної очистки або 6,91 (t, JH-F=71,1Гц, 1Н), 5, 12, та 5,20 (s, 1Н), 4,75характеризації. 4,85 (m, 1Н), 3,97-4,55 (m, 6Н), 2,10-2,75 (m,2Н), (vii) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C(O)OH 1,05-1,15 (m, 2H), 0,09 (s, 9H) MC(m/z) 611 (М+1)+ Розчин Ph(3-CI)(5-OCHF2)(x)Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze(R,S)CH(OH)C(O)OEt (6,25г, 22,3ммоль, дивися Паб(OцBu,Teoc) етап (νι) вище) у 2-пропанолі (175мл) та 20% KОН Ph(3-CI)(5-OCHF2-(R)CH(OH)C(O)-Aze(350мл) перемішували при кімнатній температурі Паб(Teoc) (0,051г, 0,08ммоль; дивися етап (іх) ви15 годин. Реакційну суміш далі частково концентще), розчиняли у 3мл ацетонітрилу та додавали рували у вакуумі для видалення більшої частини 0,062г (0,5ммоль) гідрохлориду (92-пропанолу. Залишкову суміш підкислювали 1Μ циклобутилгідроксиламіну. Суміш гріли при 70°С H2SO4, екстрагували етером (3´100мл), сушили протягом 4,5 годин. Розчинник випарювали та засульфатом натрію та концентрували у вакуумі для лишок розподіляли між водою та етилацетатом. отримання твердого продукту. ФлешВодну фазу екстрагували більше двох разів етихроматографія на силікагелі, елюючи сумішшю лацетатом та об'єднану органічну фазу промивали СНСІ3:МеОН:концентрований ΝΗ4ΟΗ (6:3:1), дала водою, розсолом, сушили сульфатом натрію, фісіль амонію ι потрібної сполуки. Сіль амонію далі льтрували та випарювали. Вихід: 0 ,054г (95%). 1 розчиняли у суміші ЕtOАс (75мл) та Н2О (75мл) i Н ЯМР (400МГц; CD3OD): d 8,66-8,50 (m, 1H), підкислювали 2Η НСІ. Органічний шар відділяли та 7,45 (d, 2H), 7,29 (m, 3Н), 7,15 (m, 2H), 6,88 (t, 1H промивали розсолом (50мл), сушили сульфатом головний ротамер), 6,85 (t, 1H другорядний ротанатрію та концентрували у вакуумі отримуючи помер), 5,18 (s, 1H головний ротамер), 5,12 (s, 1H трібну сполуку (3,2 г, 57% від етапів (iν) до (νii)). другорядний ротамер), 5,16 (m, 1H другорядний 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,38 (s, 1H), 7,22 ротамер), 4,78 (m, 1H головний ротамер), 4,70 (m, (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 6,89 (t, JH-F=71,1Гц, 1H), 5,1-6 1Н), 4,50-4,30 (m, 3Н), 4,19-3,93 (m, 3Н), 2,71-2,44 (8, 1Η) (m, 1Н), 2,34-2,11 (m, 5Н), 1,78 (m, 1Н), 1,62 (m, (νiii) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH (а) 1Н), 0,96 (m, 2Н), 0,01 (s, 9H) та Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(6)CH(QAc)C(O)OH (b) (хі) Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeСуміш Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R,S)CH(OH)C(O)OH Паб(OцBu) (3,2г, 12,7ммоль, дивися етап (νii) вище) та Lipase Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(О)-AzePS "Amano" (-2,0г) у вінілацетаті (125мл) та МТВЕ Паб(OцBu,Teoc) (0,054г, 0,08ммоль; дивися етап (125мл) гріли при кипінні під зворотним холодиль(х) ви ще), розчиняли у 0,5мл дихлорметану та 3мл ником протягом 48 годин. Реакційну суміш охолоТФОК. Реакції давали перебігати протягом 60 хвиджували, фільтрували через броунмілерит лин. ТФОК випарювали та залишок очищали препаративною ВЕРХ, потрібні фракції поєднували та (CeliteÒ) та шар на фільтрі промивали етилацетасушили сублімацією (2х), отримуючи 23мг (54%) том. Фільтрат концентрували у вакуумі та піддавапотрібної сполуки. ли флеш-хроматографи на силікагелі, елюючи МС (m/z) 536 (Μ-1)-; 538 (Μ+1)+ сумішшю СНСІ3 :МеОН:концентрований NH4OH 1 (6:3:1), отримуючи солі амонію потрібних сполук Н ЯМР (400МГц; CD3OD): d 7,56 (d, 2H), 7,33 (а) та (b). Сполуку (а) як сіль розчиняли у Н2О, під(m, 3Н), 7,15 (m, 2H), 6,89 (t, 1H головний ротакислювали 2Η НСІ та екстрагували ЕtOАс. Органімер), 6,86 (t, 1H другорядний ротамер), 5,18 (s, 1H чний шар промивали розсолом, сушили сульфаголовний ротамер; та m,1H другорядний ротатом натрію, фільтрували та концентрували у мер), 5,11 (s, 1H другорядний ротамер), 4,77 (m, вакуумі, отримуючи потрібну сполуку (а) (1,2г, 1H головний ротамер), 4,58 (m, 1Н), 4,42 (m, 2Н), 37%). 4,34 (m, 1Н головний ротамер), 4,15 (m, 1H голоДля потрібної сполуки (а) вний ротамер), 4,06 (m, 1H другорядний ротамер), 33 78195 34 3,97 (m, 1H другорядний ротамер), 2,66 (m, 1Н 3,98 (m, 1Н, другорядний ротамер), 2,70 (m, 1Н, другорядний ротамер), 2,52 (m, 1Н головний ротадругорядний ротамер), 2,55 (m, 1Н, головний ромер), 2,33-2,25 (m, 3Н), 2,01-2,20 (m, 2Н), 1,75 (m, тамер), 2,29 (m, 1H, головний ротамер), 2,15 (m, 1Н), 1,59 (m, 1Н) 1ЗС-ЯМР (100МГц; CD3OD) (кар1H, другорядний ротамер) 13 бонільні та/або амідинові атоми карбону, ротамеС-ЯМР (100МГц; CD3OD); (карбонільні та/або ри) d 172,4, 172,3, 171,9, 171,4, 152,3 амідинові атоми карбону, ротамери) d 172,6, 172,5, Приклад 2 172,0, 171,7, 167,0 MC (m/z) 465 (M-1)-, 467 (M+1) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПриклад 4 Паб(OH) Рh(3-СІ)(5-ОСНР2)-(Р)СН(ОН)С(О)-Аzе(і) Ph(3-СІ)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб(СООцПентил) Паб(OH,Teoc) До розчину Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeAze-Паб x ТФОК (74мг, 0,13ммоль; дивися ПриПаб(Teoc) (0,148г, 0,24ммоль; дивися Приклад 1 клад 3 вище) та циклопентилхлорформіату (44мг, (іх) ви ще), розчиняли у 9мл ацетонітрилу та дода0,30ммоль) у дихлорметані (5мл) додавали водний вали 0,101г (1,45ммоль) гідрохлориду гідроксилаNaOH (0,5мл, 2М, 1ммоль). Суміш перемішували міну. Суміш гріли при 70°С протягом 2,5 годин, при кімнатній температурі та реакцію контролювали за допомогою ВЕРХ. Через 2,5 годин додавали фільтрували через броунмілерит (CeliteÒ) та виводу та рідкі фази розділяли. Водну фазу двічі парювали, сирий продукт (0,145г; 75% чистоти) екстрагували дихлорметаном. Поєднані органічні використовували безпосередньо на наступному фази сушили сульфатом магнію та очищали на етапі без наступної очистки. силікагелі (спершу ди хлорметаном, далі ЕtOАс). (іі) Ph(3-Cl)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПісля видалення розчинників у вакуумі, твердий Паб(OH) залишок розчиняли у суміші вода/ацетонітрил та Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeсушили сублімацією, отримуючи потрібну сполуку Паб(OH, Teoc) (0,145г, 0,23ммоль; дивися етап (і) як білий твердий продукт. Вихід: 33мг (44%) вище), розчиняли у 0,5мл СН 2СІ2 та 9мл ТФОК. MC (m/z) 579 (M+1)+ Реакції давали перебігати протягом 60 хвилин. 1 ТФОК випарювали та залишок очищали викорисH ЯМР (400МГц; CD3OD): d 7,79 (d, 2H), 7,43танням препаративної ВЕРХ, потрібні фракції по7,30 (m, 5H), 7,20-7,1 (m, 2H), 6,90 (t, 1H, головний єднували та сушили сублімацією (2х), отримуючи ротамер), 6,87 (t, 1H, другорядний ротамер), 5,19 72мг (вихід за два етапи 62%) потрібної сполуки. (dd, 1H, другорядний ротамер), 5,18 (s, 1H, голоМС (m/z) 482 (Μ-1)-; 484 (Μ+1)+ вний ротамер), 5,13 (m, 1H), 5,11 (s, 1H, другоряд1 ний ротамер), 4,78 (dd, 1Н, головний ротамер), Н ЯМР (400МГц; CD3OD): d 7,58 (d, 2H), 7,33 4,45 (m, 2Н), 4,35 (m, 1Н, головний ротамер), 4,16 (m, 3Н), 7,15 (m, 2H), 6,89 (t, 1H головний рота(s, 1H, головний ротамер), 4,06 (s, 1H, другорядмер), 6,86 (t, 1Η другорядний ротамер), 5,18 (s, 1H ний ротамер), 3,97 (s, 1H, другорядний ротамер), головний ротамер; та m, 1Н другорядний рота2,68 (m, 1H, другорядний ротамер), 2,52 (s, 1H, мер), 5,12 (s, 1H другорядний ротамер), 4,77 (m, 1H головний ротамер), 4,42 (m, 2Н), 4,34 (m, 1Н головний ротамер), 2,2S (s, 1H, головний ротамер), 2,16 (s, 1Н, другорядний ротамер), 1,90 (m, головний ротамер), 4,14 (m, 1H головний ротамер), 2Н), 1,77 (m, 4Н), 1,61 (m, 2Н) 4,06 (m, 1H другорядний ротамер), 3,95 (m, 1H 1З С ЯМР (карбонільні та/або амідинові протодругорядний ротамер), 2,66 (m, 1H другорядний ротамер), 2,50 (m, 1H головний ротамер), 2,27 (m, ни; 100МГц): d 173,6, 173,1, 172,6, 170,3, 165,6 1H головний ротамер), 2,14 (m, 1Η другорядний Приклад 5 ротамер) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(Z) 13 С-ЯМР (100МГц; CD3OD): (карбонільні та/або Потрібну сполуку отримували згідно зі способом, описаним у прикладі 4 вище, починаючи від амідинові атоми карбону, ротамери) d 172,4, 172,3, Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб х 172,0, 171,4 152,3, 152,1 ΤΦΟΚ (73мг, 0,13ммоль; дивися Приклад 3 вище) Приклад 3 та бензилхлорформіату (35мг, 0,21ммоль). ДодатPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб кова очистка обернено-фазовою ВЕРХ (0,1Μ ацеPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeтат амонію/MeCN 40/60) була необхідною. ПрийнПаб(Teoc) (0,045г, 0,074ммоль; дивися Приклад ятні фракції концентрували у вакуумі та 1(іх) вище), розчиняли у 3мл ТФОК та давали реаекстрагували ЕtOАс. Вихід: 24мг (32%). гувати протягом 1 години. ТФОК випарювали та МС (m/z) 602 (М+1)+ залишок сушили сублімацією від води та ацетоніт1 рилу з отриманням 0,043г (100%) потрібної сполуН ЯМР (400МГц; CD3OD): d 7,80(d, 2H), 7,43ки як її сіль з ТФОК. 7,25 (m, 8H), 7,20-7,10 (m, 2H), 6,90 (t, 1H, голо1 вний ротамер), 6,88 (t, 1H, другорядний ротамер), Н ЯМР (400МГц; CD3OD) ротамери: d 7,8-7,75 5,18 (dd, 1H, другорядний ротамер), 5,18 (s, 2H), (m, 2Н), 7,55-7,5 (m, 2Н), 7,35 (m, 1Н, головний 5,17 (s, 1H, ротамер), 5,11 (s, 1H, ротамер), 4,78 ротамер), 7,31 (m, 1H, другорядний ротамер), 7,19 (dd, 1H, головний ротамер), 4,45 (m, 2Н), 4,34 (m, (m, 1H, головний ротамер), 7,15 (m, 1Н), 7,12 (m, 1Н, головний ротамер), 4,15 (s, 1H, головний ро1Н, другорядний ротамер), 6,89 (t, 1H, головний ротамер), 6,87 (t, 1H, другорядний ротамер), 5,22 тамер), 4,06 (s, 1H, другорядний ротамер), 3,97 (s, 1H, другорядний ротамер), 2,66 (m, 1H, другоряд(m, 1H, другорядний ротамер), 5,20 (s, 1H, голоний ротамер), 2,51 (s, 1Η, головний ротамер), 2,27 вний ротамер), 5,13 (s, 1H, другорядний ротамер), (s, 1H, головний ротамер), 2,15(s, 1H, другорядний 4,80 (m, 1H, головний ротамер), 4,6-4,4 (m, 2H), ротамер) 1ЗС ЯМР (карбонільні та/або амідинові 4,37 (m, 1Н, головний ротамер), 4,19 (m, 1H, головний ротамер), 4,07 (m, 1H, другорядний ротамер), протони; 100МГц): d 173,6, 173,1, 172,6, 170,5, 35 78195 36 164,9 До розчину 2-аміно-3-хлор-5Приклад 6 трифлуорметоксибензойної кислоти (60,5г, Ph(3-CI)(5-ОCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб х 0,22моль; дивися етап (ііі) вище) у 1,4-діоксані ΤΦΟΚ (1000мл) додавали 6Η НСІ (750мл). Трохи органіч(і) 2-Нітро-5-трифлуорметоксибензойна кисної фази виділялося з розчину як масло. Діоксанолота вий розчин охолоджували до менше 0°С (баня лідДо розчину 3-трифлуорметоксибензойної кисМеОН). Розчин нітриту натрію (18,2г, 0,26моль) у лоти (49,0г, 0,24моль) у сульфатній кислоті воді (250мл) додавали протягом 15 хвилин через (500мл) при температурі менше 0°С (баня лідлійку. Утворений розчин перемішували протягом МеОН) додавали розчин нітрату калію (31,3г, 45 хвилин. Гіпофосфітну кислоту (221,5мл 0,31моль) у сульфатній кислоті (200мл), протягом 50мас.% у воді, 291,2г, 2,20моль) повільно дода20 хвилин. Утворений розчин перемішували при вали через лійку. Розчин перемішували при 0°С 0°С протягом 2 годин, далі гріли до кімнатної темпротягом 1,5 годин, далі гріли до кімнатної темпеператури та перемішували протягом 18 годин. Рератури (спостерігали утворення газу) та перемішуакційну суміш виливали на лід та утворений кисвали . протягом 18 годин. Сирий розчин переносилотний розчин екстрагували етилацетатом (5х). ли у ділильну лійку та екстрагували етером (4х). Поєднані органічні фази промивали водою (1х), Поєднані органічні фази екстрагували водним розрозсолом (2х), Н2О (1 х) та розсолом (1х), сушили чином гідрокарбонату натрію (3х). Основний водсульфатом натрію, фільтрували та концентрували ний шар обережно підкислювали 6Η НСІ та ексту вакуумі для отримання сирої потрібної сполуки рагували СН2СІ2 (3х). СН2СІ2-екстракти сушили (65,7г) як твердого продукту, забрудненого НОАс. сульфатом натрію, фільтрували та концентрували Сиру потрібну сполуку розчиняли у ЕtOАс та толуу вакуумі для отримання сирої потрібної сполуки олі і концентрували у вакуумі для отримання віль(26,5г, 46% від 3-трифлуорметоксибензойної кисного від НОАс твердого продукту (58,4г, 97%), що лоти) як твердого продукту, що використовували використовували на наступному етапі без наступна наступному етапі без наступної очистки. 1 ної очистки. Н ЯМР (300МГц, CD3OD): d 7,98 (s, 1H), 7,83 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3): d 10,10 (br s, 1H), (s, 1H), 7,58 (s, 1H) 8,02 (d, 1H, J=8Гц), 7,69 (d, 1H,J=2Гц), 7,54 (dd, 1H, (ν) 3-Хлор-5-трифлуорметоксибензиловий J=2Гц, J= 8Гц) спирт (ii) 2-Аміно-5-трифлуорметоксибензойна кисДо розчину 3-хлор-5лота трифлуорметоксибензойноі кислоти (22,5г, До розчину 2-нітро-593,5ммоль, дивися етап (іν) вище) у безводному трифлуорметоксибензойної кислоти (56,8г, ТГФ (1200мл) в атмосфері азоту при кімнатній те0,23моль; дивися етап (і) вище) у ЕtOН (1000мл) мпературі додавали розчин комплексу ВН 3·ТГФ додавали 10% Pd/C (5,7г). Утворений розчин про(140мл 1М у ТГФ, 140,3ммоль). Розчин кип'ятили дували воднем протягом 5 годин, фільтрували під зворотним холодильником протягом 2 годин, охолоджували до кімнатної температури та перечерез броунмілерит (CeliteÒ) та концентрували у мішували протягом 18 годин, гасили обережно вакуумі для отримання сирої потрібної сполуки водою та концентрували у вакуумі для видалення (49,7г, 98%) як твердого продукту, що використобільшої частини ТГФ. Залишок розбавляли етилавували на наступному етапі без наступної очистки. 1 цетатом та органічнії фази промивали розсолом Н ЯМР (300МГц, CD3 OD): d 7,66 (m, 1H), 7,17 (3х), сушили сульфа том натрію, фільтрували та (d, 1Η, J=8Гц), 6,77 (d, 1H, J=8Гц) концентрували у вакуумі для отримання сирої по(iii) 2-Аміно-3-хлор-5трібної сполуки (21,2г, 100%) як масла, що викоритрифлуорметоксибензойна кислота стовували без наступної очистки. До розчину 2-аміно-51 Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,33 (s, 1H), 7,17 трифлуорметоксибензойної кислоти (49,0г, 0,22моль; дивися етап (іі) вище) у НОАс (1200мл) (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 4,72 (s,2H), 2,05 (br s, 1H) (vi) 3-Хлор-5-трифлуорметоксибензальдегід повільно додавали сульфурилхлорид (41,8г, Розчин ДМСО (16,1г, 205,9ммоль) у безвод0,31моль). Спостерігали утворення газу. Утворену ному СН2СІ2 (300мл) охолоджували до -78°С. Окгетерогенну суміш перемішували при кімнатній салілхлорид (13,1г, 103,0ммоль) додавали повільтемпературі протягом 1 години. Додаткову НОАс (300мл) додавали для полегшення перемішуванно через шприц (спостерігали утворення газу). Утворений розчин перемішували при -78°С протяня, а потім сульфурилхлорид у порціях по 5мл, гом 15 хвилин. Розчин 3-хлор-5доки не було ви трачено вихідний матеріал, на острифлуорметоксибензилового спирту (21,2г, нові аналізу ТШХ. Реакційну суміш концентрували 93,6ммоль, дивися етап (ν) ви ще) у СН2СІ 2 (200мл) у вакуумі для отримання твердого продукту, що промивали на обертовому випарнику етилацетадодавали через лійку протягом періоду 15 хвилин. Каламутний розчин перемішували при -78°С протом (2х) а потім Et2O (1x) для видалення НОАс. тягом 40 хвилин та додавали через лійку протягом Утворені тверді продукти далі сушили для отри100 хвилин ДІПЕА (60,5г, 468,0ммоль). Утворений мання солі НСІ сирої потрібної сполуки (60,5г, гомогенний розчин перемішували при -78°С протя94%), яку використовували на наступному етапі без наступної очистки. гом 1,5 годин, далі гріли до кімнатної температури 1 та перемішували 18 годин. Сирий розчин концентН ЯМР (300МГц, CD3OD): d 7,72 (s, 1H), 7,44 рували у вакуумі, залишок розбавляли етилацета(s, 1H), 7,22 (s, обмінний) том та промивали Н 2О (1х), 2Η НСІ (1х), розсолом (iv) 3-Хлор-5-трифлуорметоксибензойна кис(1х), водним розчином гідрокарбонату натрію (1х) лота 37 78195 38 та розсолом (1х). Органічні фази сушили сульфапромивали етилацетатом. Поєднані органічні фази том натрію, фільтрували та концентрували у вакуконцентрували у вакуумі. Флеш-хроматографія на умі для отримання сирої потрібної сполуки (19,9г, силікагелі, елюючи сумішшю 95%), яку використовували на наступному етапі СНСІ3:МеОН:концентрований NH4OH (6:3:1) дала без наступної очистки. суміш солей амонію потрібної сполуки (а) та потрі1 бної сполуки (b) (6,7г) та чистий зразок солі амонію Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 10,00 (s, 1H), 7,83 потрібної сполуки (а) (1,2г) з меншою за 95% e.н. (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,51 (s, 1H) (νіі) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R,S)CH(OTMS)CN Відповідні фракції розчиняли у Et 2O та промивали 2Η НСІ (1х) та розсолом (1х), сушили сульфатом До розчину 3-хлор-5натрію, фільтрували та концентрували для отритрифлуорметоксибензальдегіду (19,9г, 88,6ммоль, мання відповідних карбонових кислот (6,7г та 1,1г дивися етап (νі) вище) у СН2СІ2 (600мл) при 0°С відповідно). Ці фракції далі окремо повторно піддодавали Znl2 (1,4г, 4,4ммоль) та триметилсилілціанід (9,7г, 97,5ммоль). Після перемішування при давали розділенню та знов очищали за необхідністю хроматографією на силікагелі, елюючи сумі0°С протягом 1,5 годин, та при кімнатній темперашшю СНСІ3:МеОН:концентрований ΝΗ 4ΟΗ (6:3:1 турі протягом 2 годин аналіз ТШХ показан тільки або 75:20:5 або 145:45:10), за необхідністю. Очивихідний матеріал Znl2 додавали порціями поки щену потрібну сполуку (а) підкислювали водною йшла реакція (загалом додавали 30,0г Znl2). Після перемішування при кімнатній температурі протяНСІ або водною лимонною кислотою перед подальшим використанням. Сіль амонію потрібної спогом 18 годин, реакційну суміш гасили водою та луки (b) використовували без характеризації. органічні фази розділяли. Органічні фази сушили Для потрібної сполуки (а) сульфатом натрію, фільтрували та концентрували 1 у вакуумі для отримання сирої потрібної сполуки Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,53 (s, 1H), 7,38 (27,7г, 96%) як рідини, що використовували без (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 5,23 (s, 1H) 13 наступної очистки. С Я МР (75МГц, CD3OD): d 174,9, 150,9, 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 7,43 (s, 1H), 7,28 (s, 145,4, 136,3, 126,8, 122,0, 120,6, 118,9, 72,9 1H), 7,25 (s, 1H), 5,49 (s, 1H), 0,38 (s, 9H) МС (m/z) 269 (М-1)(νііі) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R,S)CH(OH)C(q)OH (x) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeСуспензію Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R,S)CH(OTMS)CN Паб(Teoc) (27,7г, 85,6ммоль, дивися етап (νii) вище) у концеРозчин Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)OH нтрованій НСІ (300мл) кип'ятили під зворотним (0,73г, 2,70ммоль; дивися етап (іх) вище) у ДМФ холодильником протягом 3 годин. Утворену корич(40мл) в атмосфері азоту о холоджували до 0°С. неву гетерогенну суміш охолоджували до кімнатДо розчину додавали Н-Aze-Паб(Tеос) (1,46г, ної температури та екстрагували етером (2х). Спо324ммоль), колідин (0,82г, 6,75ммоль) та ПіБОФ чатку органічні фази екстрагували 2Η NaOH (2х), (1,83г, 3,51ммоль). Розчин перемішували при 0°С далі основний шар підкислювали 2Η НСІ та екстпротягом 2 годин, гріли до кімнатної температури рагували етером. Етер сушили (Na2SO4), фільтрута перемішували 18 годин, гасили водою та конвали та концентрували у вакуумі для отримання центрували у вакуумі. Залишок розбавляли етиласирої потрібної сполуки (4,9г, 21%). Аналіз ТШХ цетатом та промивали водою (1х), водним розчипоказав, що початкові органічні фази ще містили ном гідрокарбонату натрію (1х), водною лимонною потрібну сполуку, так що основну екстраккислотою (1х) та розсолом (1х), сушили сульфацію/підкислення повторювали використанням 6Η том натрію, фільтрували та концентрували у вакуNaOH, отримуючи додаткову сиру потрібну сполуумі для отримання сирої потрібної сполуки. ку (2,8г, 12%). Аналіз ТШХ of початкових органічФлеш-хроматографія на силікагелі (2х), елююних фаз показав, що вони ще містили потрібну чи етилацетатом:МеОН (30:1) далі СН2СІ2:МеOН сполуку, так що органічні фази сушили сульфатом (93:7) дала потрібну сполуку (0,73г, 43%) як ненатрію та концентрували у вакуумі для отримання стійку піну. 1 солі потрібної сполуки з натрієм (18,3г) як масла. Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміш роСіль далі знов розчиняли у Et2O та органічні фази тамерів): d 7,78-7,82 (d, 2H, J=8Гц), 7,25-7,54 (m, підкислювали 2Η НСІ та промивали розсолом. 5H), 5,25 та 5,16 (s, 1Н), 5,22 та 4,79 (m, 1Н), 3,92Утворені органічні фази сушили сульфатом на4,58 (m, 6Н), 2,20-2,76 (m, 2H), 1,04-1,13 (m, 2Н), трію, обробляли активованим вугіллям, фільтру0,08 (s, 9H), МС (m/z) 629 (Μ+1)+ (xi) Ph(3-Cl)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб вали через броунмілерит (CeliteÒ) та концентрували у вакуумі для отримання сирої потрібної Трифлуороцтову кислоту (1,0мл) додавали до сполуки (14,3г, 62%) як твердого продукту, що виперемішуваного охолодженого льодом з водою користовували на наступному етапі без наступної розчину Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeочистки. Паб(Teoc) (101мг; 160мкмоль; дивися етап (х) ви1 ще), у дихлорметані (10мл). охолоджувальну баню Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,53 (s, 1H), 7,38 видаляли через 1 годину. Через 1,5 години при (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 5,23 (s, 1H) кімнатній температурі, ацетонітрил (30мл) додава(iх) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)OH (а) та ли та розчинники обережно видаляли під знижеPh(3-CI)-(5-OCF3)-(S)CH(OAc)C(O)OH (b) ним тиском. Залишок розчиняли у воді та замороСуміш Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R,S)CH(OH)C(O)OH жували. Сушили, отримуючи 90мг (92%) потрібної (7,7г, 28,5ммоль, дивися етап (νιιι) вище) та Lipase сполуки як її сіль з ТФОК. PS "Amano" (3,8г) у МТВЕ (100мл) та вінілацетат МС (m/z) 483 (Μ-1)-; 485 (Μ+1)+ (50мл) перемішували при 60°С протягом 26 годин. 1 Н ЯМР (300МГц; CD3OD): (комплекс, обумовРеакційну суміш охолоджували та фільтр ували лений діастереомерами/ротамерами): d 7,70-7,80 через броунмілерит (CeliteÒ) та шар на фільтрі 39 78195 40 (m, 2Н), 7,45-7,58 (m, 3Н), 7,24-7,38 (m, 2H), 5,26 концентрації (дивися нижче) залишок розчиняли у (s, 1H), 5,17 (m, 1H, другорядний ротамер), 4,82 суміші ізопропанол/вода (7/3) (1мл). Приблизно 2% (m, 1Н, головний ротамер), 4,35-4,6 (m, 3Н), 4,22 цього розчину видаляли та розбавляли сумішшю (m, 1Н, головний ротамер), 3,92-4,12 (m, 2H, друізопропанол/вода (7/3) (1мл) для аналізу ЕІ-МС. горядний ротамер), 2,70 (m, 1H, другорядний роПісля видалення розчинників у вакуумі твердий тамер), 2,55 (m, 1H, головний ротамер), 2,30 (m, залишок переносили у 96-комірковий планшет з 1H, головний ротамер), 2,16 (m, 1H, другорядний використанням ацетонітрилу та етилацетату для ротамер) розчинення сполук. Розчинники випарювали у ва13 С ЯМР (100МГц; CD3OD): (карбонільні та/або куумній центрифузі, отримуючи наступні потрібні сполуки: амідинові атоми карбону, ротамери): d 173,7, Рh(3-СІ)(5-ОСF3)-(R)СН(ОН)С(О)-Аze173,4, 173,0, 172,8, 168,1 Паб(ОСН2-3-(5-Ме-ізоксазол)) Приклад 7 Ph(3-Cl)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze(з 3-[(аміноокси)метил]-5-метилізоксазолу x НСІ (18мг; 0,11ммоль)). Вихід: 3,64мг (35%) (МС Паб(OMe) (m/z) 596 (Μ+1)+); ГАТУ (71мг; 0,19ммоль) додавали до переміPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeшуваного охолодженого льодом з водою розчину Паб(OCH2-3-піридин) Ph(3-CI)(5-OCF3)-C/OCH(OH)C(O)OH (39мг; 0,14ммоль; дивися Приклад 6(іх) вище) у ДМФ (з 3-[(аміноокси)метил]піридину х 2НСІ (19мг; 96 (мкмоль). Вихід: 5,14мг (50%) (MC (m/z) 592 (3мл). Через 30 хвилин додавали розчин Н-Аzе(M+1)+); Паб(ОМе) x 2НСІ (69мг; 0,21ммоль; дивися міжнаPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeродну патентну заявку WO 00/42059) та 2,4,6Паб(OBu) колідину (0,080мл; 0,58ммоль) у ДМФ (1,5мл). Реакційну суміш залишали протягом ночі та темпера(з О-ізобутилгідроксиламіну х НСІ (17мг; 140 (мкмоль). Вихід: 4,4мг (45%). МС (m/z) 557 (Μ+1)+); турі давали повільно підвищитися до зовнішньої. Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(OEt) Розчинники видаляли у вакуумі та сирий продукт (з О-етил гідроксиламіну х НСІ (14мг; 140 очищали використанням обернено-фазової ВЕРХ (мкмоль). Вихід: 4,04мг (42%). МС (m/z) 529 (ацетонітрил: 0,1Μ водний ацетат амонію), отримуючи, після сушки сублімацією прийнятних фрак(М+1)+); Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeцій, потрібну сполук (61 у мг, 97%) як безбарвний Паб(OBn) твердий продукт. (з О-бензилгідроксиламіну х НСІ (17мг; 110 МС (m/z) 513 (Μ-1), 515 (Μ+1)+ 1 (мкмоль). Вихід: 3,22мг (29%). МС (m/z) 591 Н ЯМР (500МГц; CD3 OD): d 7,97 (bt, 1H), 7,53 (Μ+1)+); (d, 2H), 7,27 (t, 1H), 7,22 (d, 2H), 7,19 (t, 1H), 7,11 (t, Рh(3-СІ)(5-ОСF3)-(R)СН(ОН)С(О)-Аze2H), 6,77 (s, 1H), 4,92 (s, 1H), 4,9 (bs, ЗН), 4,81 (m, Паб(ОцГексил) 2H), 4,40 (m, 2H), 4,09 (m, 1H) 3,87 (s, 3Н), 2,58 (m, (з O-циклогексилгідроксиламіну x НСІ (15мг, 99 1H), 2,37(m, 1H) 13 (мкмоль). Вихід: 2,9мг (26%). МС (m/z) 583 (M+1)+); C ЯМР (125МГц; CD3OD): (карбонільні та/або Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeамідинові атоми карбону): d 171,8, 169,9, 156,8 Паб(OцBu) Приклад 8 (з О-циклобутилгідроксиламіну x НСІ (17мг, Паралельний синтез алкоксіамідинів 140мкмоль). Вихід: 3,3 другорядний ротамер Цей синтез проводили у 96-комірковому блоці (30%). МС (m/z) 555 (Μ+1)*); Robbins. До комірок, що містять прийнятну кільPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeкість О-заміщеного гідроксиламіну (визначено ниПаб(OCH2CH2OPh(3-CF3)) жче; усі які є комерційно доступними або їх отри(з О-[2-[3мують використанням добре відомих у літературі (трифлуорметил)фенокси]етил]гідроксиламіну x способів) додавали розчин Ph(3-CI)(5-OCF3)НСІ (24мг; 93мкмоль). Вихід: 6,52мг (46%). МС (R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб(Teoc) (10мг; 17мкмоль; (m/z) 689 (М+1)*); дивися Приклад 6(х) вище) у ацетонітрилі (1,0мл). Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeБлок закривали та реакційну суміш перемішували Паб(OBn(4-CI)) протягом ночі у ша фі при 60°С. Після охолодження (з О-(4-хлорбензил)гідроксиламіну х НСІ (16мг; та фільтрування, тверді продукти промивали аце82мкмоль). Вихід: 3,47мг (29%). MC (m/z) 625 тонітрилом (3´0,3мл). Поєднані рідкі фракції кон(M+1)+); центрували у вакуумній центрифузі. Залишок розPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeподіляли між водою (0,4мл) та етилацетатом Паб(OBn(3-MeO)) (0,4мл). Після завершення рідинно-рідинної екст(з О-(3-метоксибензил)гідроксиламін х НСІ ракції, все фільтрували через колонку (18мг; 94мкмоль). Вихід: 4,33мг (36%). МС (m/z) HydromatrixÔ . Після промивання тричі етилацета621 (М+1)+); том поєднані фільтрати концентрували у вакуумній Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeцентрифузі. Зняття захисту проводили додаванПаб(OBn(2-Br)) ням дихлорметану (0,1мл), та трифлуороцтової (з О-(2-бромбензил)гідроксиламіну х НСІ кислоти (0,3мл). Після перемішування при кімнат(23мг; 96мкмоль). Вихід: 3,87мг (30%). МС (m/z) ній температурі протягом 3 годин розчинники ви671 (М+1)+); даляли у вакуумі. Залишок розподіляли між водPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeним насиченим розчином гідрокарбонату натрію Паб(OBn(4-Me)) (0,5мл) та етилацетатом (0,5мл). Після екстракції (з О-(4-метилбензил)гідроксиламіну х НСІ та фільтрування через колонку HydromatrixÔ та 41 78195 42 (14мг, 81мкмоль). Вихід: 2,91мг (25%). МС (m/z) (1,8г, 8ммоль; дивися етап (ііі) вище) та оксалілх605 (М+1)+); та лорид (1,5г, 11,8ммоль) розчиняли у дихлорметані Ph(3-CI)(5-OCFз)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Пaб(O-4(50мл). ДМФ (2drops) додавали та реакційну суміш гeптил) перемішували при зовнішній температурі протягом (з О-(4-гептил)гідроксиламіну х НСІ (15мг, 30 хвилин. Далі додавали Ν,Ο89мкмоль). Вихід: 17мг (100%). МС (m/z) 599 диметилгідроксиламін (1г, 10,2ммоль) та триети(Μ+1)+). ламін (3г, 30ммоль) та після ще 10 хвилин переПриклад 9 мішування при зовнішній температурі реакційну Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(S)CH(CH2OH)C(O)-Aze-Паб суміш концентрували під зниженим тиском. Залиx HQAc шок обробляли у етері (100мл) та воді (50мл). Піс(і) 3-Хлор-5-метоксибензойна кислота ля розділення органічну фазу промивали розсоСтружки магнію (Fluka purum для реакції Грилом, сушили сульфатом натрію, фільтрували та ньяра) попередньо обробляли наступним шляхом: концентрували. Цей залишок піддавали хроматогстружки поміщали у лійку зі спеченого скла та вирафії на оксиді силіцію (гексан/етилацетат 2:1), що ливали на них 0,1Μ гідрохлоридну кислоту. Струждало 2г, 7,5ммоль (93%) потрібної сполуки. 1 ки перемішували скляною паличкою протягом кільН-ЯМР (400МГц; CDCI3): d 7,54 (m, 1H), 7,37 кох секунд та далі кислоту вимивали 3 порціями (m, 1H), 7,27 (m, 1H), 6,53 (t, 1H, JH-F=73Гц) води. В кінці стружки промивали 2 порціями аце(ν) 3-Хлор-5-дифлуорметоксіацетофенон тону та поміщали у склянку. Тетрагідрофуран 3-Хлор-5-дифлуорметокси-N-метокси-N(100мл, 99,95%) сушили додаванням RedAI (1г, метилбензамід (2г, 7,5ммоль; дивися етап (iv) ви70мас.% у толуолі). Попередньо оброблені стружще) розчиняли у етері (100мл) та охолоджували ки магнію (5г, 200ммоль) поміщали у круглодонну під азотом до -70°С. Метиллітій (7мл, 11ммоль, колбу, та продували азотом 3 рази. Дихлоранізол 1,6Μ у етер) додавали краплями з шприца до пе(26г, 146ммоль) розчиняли у ТГФ (100мл, RedAIремішуваної реакційної суміші протягом 10 хвилин. сушили) та додавали диброметан (1,8г, 10ммоль). Баню з сухим льодом видаляли та суміші давали Реакційну суміш продували азотом та далі кип'я досягти зовнішньої температури перед тим, як тили під зворотним холодильником протягом 2 реакційну суміш гасили розчином хлориду амонію годин. Нагрівання припиняли та додавали порція(50мл, 5% NH4CI у воді). Органічну фазу промивами сухий лід (10г) протягом 2 хвилин. Коли увесь ли розсолом, сушили сульфатом натрію, фільтрусухий лід розчиняли, реакційну суміш виливали на вали та концентрували під зниженим тиском. Залід, що містить гідрохлоридну кислоту (400мл, лишок піддавали хроматографії на оксиді силіцію 2М). Екстрактивна обробка (етер, 300мл) дала (гексан:етилацетат 2:1), яка дала 1,5г, 6,8ммоль 11,2г, 60,2ммоль (вихід: 41%) потрібної сполуки. (вихід: 90%) потрібної сполуки. 1 1 Н-ЯМР(500МГц; ацетон-d6): d 7,57 (m, 1H), Н-ЯМР (600МГц; CDCI3): d 7,77 (m, 1H), 7,59 7,49 (m, 1H), 7,23 (m, 1H), 3,91 (s, 3H) (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 6,56 (t, 1H, JH-F=73Гц), 2,60 (s, (іі) 3-Хлор-5-гідроксибензойна кислота 3Н) Алюміній (1,65г, 60ммоль) та йод (21г, (vi) Метиловий естер 3-хлор-582ммоль) кип'ятили під зворотним холодильником дифлуорметоксифенілоцтової кислоти у толуолі (200мл) протягом 2 годин. Далі додавали 3-Хлор-5-дифлуорметоксіацетофенон (1,5г, 3-хлор-5-метоксибензойну кислоту (11,2г, 6,8ммоль; дивися етап (ν) вище) розчиняли у дих60,2ммоль; дивися етап (і) вище), розчинену у толорметані (200мл). Нітрат талію(ІІІ) х 3МеОН на Клуолі (50мл), разом з йодидом тетрабутиламонію 10 montmorillonite (6г, 10ммоль (са 0,6ммоль/г); (1,5г, 4ммоль), та суміш кип'ятили під зворотним дивися J. Am. Chem. Soc., 98, 6750 (1976)) додахолодильником ще 2 години. Після охолодження вали та суміш перемішували при зовнішній темпедо зовнішньої температури, екстрактивна обробка ратурі протягом 20 годин. Суміш фільтрували та дала 8,7г, 50ммоль (вихід: 83%) потрібної сполуки. фільтрат промивали водним розчином гідрокарбо1 Н-ЯМР (300МГц; ацетон-d6): d 9,27 (s, 1H), нату натрію (100мл, 0,5М), сушили сульфа том на7,48 (m, 1H), 7,44 (m, 1H), 7,11 (m, 1Н) трію, фільтрували та концентрували під зниженим (ііі) 3-Хлор-5-дифлуорметоксибензойна кистиском. Залишок піддавали хроматографії на оклота сиді силіцію (гексан/етилацетат 2:1), що дало 1г, 3-Хлор-5-гідроксибензойну кислоту (6,4г, 4ммоль (вихід: 56%) потрібної сполуки. 1 37,2ммоль; дивися етап (іі) вище) розчинену у Н-ЯМР (500МГц, CDCI3): d 7,14 (m, 1H), 7,06 хлороформі (200мл), переносили у 500мл тригор(m, 1H), 6,96 (m, 1H), 6,50 (t, 1H, JH-F=73Гц), 3,72 (s, лу круглодонну колбу з конденсором сухого льоду 3Н), 3,60 (s, 1H) та трубкою уведення газу. Натрію гідроксид (vii) Метиловий естер a-форміл(3-хлор-5(100мл, 5М) додавали з енергійним перемішувандифлуорметоксифеніл)оцтової кислоти ня. Хлордифлуорметан (Freon 22; 25г, 290ммоль) Метиловий естер 3-Хлор-5додавали порціями через трубку уведення газу дифлуорметоксифенілоцтової кислоти (1г, при зовнішній температурі. Через 2 годин, the реа4ммоль; дивися етап (vi) вище) та метилформіат кції було завершено. Екстрактивна обробка дала (1г, 16ммоль) розчиняли у етері (100мл) та охоло6,2г, 28ммоль (вихід: 75%) потрібної сполуки. джували у льодяній бані (приблизно 2°С). Далі 1 Н-ЯМР (500МГц; ацетон-d6): d 7,87 (m, 1H), додавали дрібно нарізаний натрій (180мг, 7,74 (m, 1H), 7,54 (m, 1H), 7,19 (t, 1H, JH-F=73Гц) 7,8ммоль) та метанол (1мл) та суміш залишали у (iv) 3-Хлор-5-дифлуорметокси-N-метокси-Nльодяній бані з перемішуванням протягом ночі. метилбензамід Воду (100мл) додавали обережно та фази розді3-Хлор-5-дифлуорметоксибензойну кислоту ляли. Водовмісну фазу підкислювали гідрохлорид 43 78195 44 ною кислотою (2М) до рН 1 та екстрагували ете(3,4г, 29,6ммоль). Розчин перемішували при 0°С протягом 1,5 годин та гасили водою. Органічні фаром (2´100мл). Екстракт сушили сульфатом натрію, фільтрували та концентрували під зниженим зи розділяли та далі промивали водою (1x), 1Η HCI (1х), Н2O (1 х) та водним розчином гідрокарботиском. Залишок піддавали хроматографії на окнату натрію (1 х) та далі сушили сульфатом натрію, сиді силіцію (гексан:етилацетат (1:1)), що дало фільтрували та концентрували, отримуючи потріб400мг, 1,4ммоль (вихід: 36%) потрібної сполуки. 1 ну сполуку (8,2г, 99%) як масло. Н-ЯМР (400МГц): d 12,10 (d, 1H), 7,32 (d, 1H), 1 7,11 (m, 1H), 7,07 (m, 1H), 6,94 (m, 1Η), 6,51 (t, 1H, Н ЯМР (300МГц, CDCI3): d 7,37 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,18 (s, 1H) 5,23 (s, 2H), 3,07 (s, 3H) JH-F=73), 3,83 (s, 3H) (ii) 3-Хлор-5-трифлуорметоксибензилціанід (viii) 3-Хлор-5-дифлуорметокситропічна кисДо розчину мезилату 3-хлор-5лота трифлуорметоксибензилу (8,2г, 26,8ммоль; дивися Метиловий естер a-форміл(3-хлор-5етап (і) вище) у ДМСО (50мл) додавали ціанід надифлуорметоксифеніл)оцтової кислоти (400мг, трію (2,6г, 53,6ммоль). Утворений гетерогенний 1,4ммоль; дивися етап (vii) вище) розчиняли у сурозчин гріли до 50°С та обробляли звуком протяміші ТГФ:метанол (50мл, 9:1). Борогідрид натрію гом 1 години. Реакційну суміш о холоджували та додавали та суміш перемішували при зовнішній розподіляли між Et2O та водою. Органічні фази температурі протягом 30 хвилин. Воду додавали промивали водою (2х) та розсолом (2х). Поєднані та суміш концентрували до водної суспензії, яку водні фази екстрагували етером (1х). Поєднані обробляли у етилацетаті та воді. Фази розділяли органічні фази сушили сульфатом натрію, фільтта органічну фазу промивали хлорид натрію (15% рували та концентрували при слабкому нагріванні у воді), сушили сульфатом натрію, фільтрували та та частковому вакуумі, отримуючи потрібну сполуконцентрували під зниженим тиском. Залишок ку (6,3г, 100%) як червонувате летюче масло, яке розчиняли у метанолі (30мл) та гідролізували гідвикористовували на наступному етапі без наступроксидом натрію (1мл, 10М) при зовнішній темпеної очистки. ратурі протягом 10 хвилин. Екстрактивна обробка 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 7,32 (s, 1H), 7,24 (s, дала 180мг, 0,68ммоль (вихід: 48%) потрібної сполуки. 1H), 7,12 (s, 1H), 3,78 (s,2H) 1 (iii) 3-Хлор-5-трифлуорметоксифенілоцтова Н-ЯМР (500МГц; CDCI3): d 7,18 (m, 1H), 7,10 кислота (m, 1H), 7,00 (m, 1H), 6,50 (t, 1H, JH-F=73), 4,11 (m, До розчину 3-хлор-51Η), 3,90 (m, 1Η), 3,84 (m, 1Η) трифлуорметоксибензилціаніду (6,3г, 26,7ммоль; (ix) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeдивися етап (іі) вище) у 2-пропанолі (100мл) додаПаб·HOAcвали воду (200мл) та гідроксид калію (7,5г, 3-Хлор-5-дифлуорметокситропічну кислоту 133,5ммоль). Розчин кип'ятили під зворотним хо(180мг, 0,7ммоль; дивися етап (viii) вище), Н-Аzелодильником протягом 18 годин, охолоджували до Паб(Теос)·НСІ (450мг, 1ммоль) та ПіБОФ (530мг, кімнатної температури та видаляли 2-пропанол у 1ммоль) розчиняли у ДМФ (10мл), а потім додававакуумі. Водну фазу промивали СН 2СІ2 (2х) та ли ДІПЕА (550мг, 3,9ммоль). Суміш перемішували промивки викидали. Основну водну фазу підкиспри зовнішній температурі протягом 1 години пелювали 2Η HCI та екстрагували СН 2СІ2 (3х). ред тим, як розбавляли розсолом (20мл, 15% Nad) СН2СІ2-екстракти сушили сульфатом натрію, фільта екстрагували етилацетатом (40мл). Екстракт трували та концентрували у вакуумі, отримуючи сушили сульфатом натрію, фільтрували та випапотрібну сполуку (5,2г, 76%) як масло, яке викорирювали досуха. Залишок розчиняли у дихлорместовували на наступному етапі без наступної очитані (5мл) та додавали трифлуороцтову кислоту стки. (5мл). Через 1 годину при зовнішній температурі, 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3): d 7,25 (s, 1H), 7,19 (s, суміш діастереомерів випарювали досуха та за1H), 7,08 (s, 1H), 3,68 (s, 2H) лишок піддавали хроматографії на обернено(iv) Етил 3-хлор-5фазовій колонці (ацетонітрил:вода (30:70), буфер: трифлуорметоксифенілацетат ацетат амонію 0,1М). Сушка сублімацією дала До розчину 3-хлор-536мг, 0,067ммоль (вихід: 10,4%) потрібної сполуки. трифлуорметоксифенілоцтової кислоти (5,2г, МС (ES) 481 (М+Т)+ 1 20,4ммоль; дивися етап (ііі) вище) у ЕtOН (600мл) Н-ЯМР (400МГц; CDCI3): d 7,77 (d, 2H), 7,57 додавали сульфатну кислоту (кілька крапель). (d, 2H), 7,30 (m, 1H), 7,13 (m, 2H), 6,87 (t, 1H, JFРозчин кип'ятили під зворотним холодильником H=73Гц), 4,76 (m, 1H), 4,55 (s, 2H), 4,37 (m, 1H), протягом 18 годин, охолоджували до кімнатної 4,03 (m, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 2,53 (m, температури, нейтралізували твердим гідрокарбо1H), 2,28 (m, 1H), 1,92 (s, 1,5Н) 13 натом натрію та ЕtOН видаляли у вакуумі. ЗалиС-ЯМР (100МГц; CD3OD): (карбонільні та/або шок розбавляли етилацетатом, далі промивали амідинові атоми карбону) d 172,3, 171,9, 167,2 водою (1х), водним розчином гідрокарбонату наПриклад 10 трію (1х) та розсолом (1х). Органічні фази сушили Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeсульфатом натрію, фільтрували та концентрували Паб·ТФОК у вакуумі, отримуючи потрібну сполуку (5,5г, 96%) (і) Мезилат 3-хлор-5-трифлуорметоксибензилу як масло, яке використовували на наступному До розчину 3-хлор-5етапі без наступної очистки. трифлуорметоксибензилового спирту (6,1г, 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 7,24 (s, 1H), 7,16 (s, 26,9ммоль; дивися Приклад 6(v) ви ще) у СН2СІ2 1H), 7,07 (s, 1H), 4,13-4,22 (q, J=8Гц, 2H), 3,63 (s, (250мл) при 0°С в атмосфері азоту додавали ДІ2H), 1,24-1,32 (t, J=8Гц, 3Н) ПЕА (4,2г, 32,3ммоль) та метансульфонілхлорид 45 78195 46 (v) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R,S)CH(CHO)C(O)OEt умі, отримуючи потрібну сполуку (також відому як До розчину етил 3-хлор-53-хлор-5-трифлуорметокситропічна кислота) як трифлуорметоксифенілацетату (4,5г, 15,9ммоль; масло (1,1г, 62%). 1 дивися етап (iv) вище) у безводному ТГФ (400мл) в Н ЯМР (300МГц, CD3OD): d 7,41 (s, 1H), 7,27 атмосфері азоту при менше 0°С (баня лід-МеОН) (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,75-3,87 (m, 2H) додавали етоксид натрію (4,5г, 63,6ммоль). Холо(viii) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeдний розчин перемішували протягом 40 хвилин та Паб(Teoc) (а) та Рh(3-СІ)(5-OСF3)додавали етилформіат (8,1г, 111,3ммоль). Розчин (R)CH(CH 2H)C(O)-Aze-Паб(Teoc) (b) перемішували при 0°С протягом 30 хвилин, гріли До розчину Ph(3-CI)(5-OCF3)до кімнатної температури та перемішували протя(R,S)CH(CH2OH)C(O)OH (0,65г, 2,28ммоль; дивися гом 2 годин. етап (vii) вище) у ДМФ при менше 0°С (баня лідДалі ТГФ видаляли у вакуумі. Залишок розбаМеОН) додавали Н-Аzе-Паб(Теос) (0,90г, вляли етером та екстрагували Н 2О (1 х) та 0,5М 2,39ммоль), колідин (0,71г, 5,70ммоль) та ПіБОФ NaOH (3х). Водні екстракти підкислювали 2Η НСІ (1,31г, 2,51ммоль). Утворений розчин перемішувата екстрагували СН 2СІ2 (3х). Поєднані органічні ли при менше 0°С протягом 1 години, гріли до кімфази сушили сульфатом натрію, фільтрували та натної температури та перемішували протягом 1 концентрували у вакуумі, отримуючи сиру потрібну години. ДМФ далі видаляли у вакуумі. Залишок сполуку (3,9г). Флеш-хроматографія на силікагелі, розбавляли етилацетатом та промивали розбавелюючи сумішшю гексан:ЕtOАс (4:1) дала потрібну леним водним розчином НСІ (1х), розсолом (1х), сполуку (3,0г, 61%) як масло. водним розчином гідрокарбонату натрію (1х) та 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3, суміш ізомерів): d розсолом (1х). Органічні фази сушили сульфатом 12,30 та 12,25 (s, 1Н), 7,39 та 7,34 (s, 1Н), 7,21 (s, натрію, фільтрували та концентрували у вакуумі, 1Н), 7,17 (s, 1Н), 7,08 (s, 1Н), 4,27-4,37 (q, J=8Гц, отримуючи сиру потрібну сполуку (2,1г) як суміш 2Н), 1,28-1,38 (t, J=8Гц, 3Н) діастереомерів. Флеш-хроматографія (3х) на силі(vi) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R,S)CH(CH 2OH)C(O)OEt кагелі, елюючи спершу е тилацетатом:МеОН (95:5), До розчину Ph(3-CI)(5-OCF3)далі СН 2СІ2:МеOН (97:3) та під кінець (R,S)CH(CHO)C(O)OEt (3,0г, 9,66ммоль; дивися СН2СІ2:МеOН (95:5) дала потрібні сполуки як діасетап (ν) ви ще) у Ме ОН (200мл) при -10°С (баня тереомер (а) (0,51г, 35%) та діастереомер (b) лід-МеОН) додавали борогідрид натрію (0,7г, (0,45г, 31%) як нестійку піну. 19,32ммоль) порціями протягом 5 хвилин. Розчин Для діастереомеру (а) потрібної сполуки 1 перемішували при -10°С протягом 45 хвилин та Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші рододавали додатковий борогідрид натрію (0,4г). тамерів) d 7,79-7,85 (d, J=8Гц, 2Н), 7,22-7,49 (m, Через ще 15 хвилин реакційну суміш гасили вод5H), 5,17-4,77 (m, 1H), 4,53-4,18 (m, 4H), 3,58-4,11 ним хлоридом амонію, робили слабко кислотним (m, 5H), 2,47-2,73 (m, 1H), 2,11-2,34 (m, 1H), 1,082Η НСІ та МеОН видаляли у вакуумі. Залишок 1,12 (m, 2H), 0,07 (s, 9H) розбавляли етилацетатом та промивали водою MC (m/z) 643 (M+1)+ (1х), водним розчином гідрокарбонату натрію (1х) (ix) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeта розсолом (1х). Органічні фази сушили сульфаПаб x ΤΦΟΚ том натрію, фільтрували та концентрували у вакуPh(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeумі, отримуючи сиру потрібну сполуку. ФлешПаб(Teoc), (78мг, 0,121ммоль; дивися етап (viii) хроматографія на силікагелі, елюючи сумішшю вище - діастереомер (а)), розчиняли у 5мл трифгексан:ЕtOАс (5:1) дала потрібну сполуку (2,0г, луороцтової кислоти. Через 10 хвилин реакція 66%) як масло. закінчувалася та розчинник випарювали. Залишок 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3): d 7,26 (s, 1H), 7,19 (s, сушили сублімацією від води та ацетонітрилу для 1H), 7,07 (s, 1H), 4,16-4,28 (m, 2H), 4,04-4,15 (m, отримання потрібного продукту. Ви хід: 70мг (94%). 1H), 3,76-3,94 (m, 2H), 2,33 (t, J=6Гц, 1Н), 1,18-1,30 МС (m/z) 483 (Μ-1); 485 (М'+1)+ 1 (t, J=8Гц, 3Н) Н-ЯМР (400МГц; D2O) ротамери 1:1:d 8,83 (bt, (vii) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(R,S)CH(CH 2OH)C(O)OH 1H), 7,79 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,54 (d, 1Н), 7,43 (d, До розчину Ph(3-CI)(5-OCF3)2H), 7,35 (m, 1H, ротамер), 7,28 (m, 1H, ротамер), (R,S)CH(CH2OH)C(O)OEt (2,0г, 6,24ммоль; дивися 7,20 (m, 1H, ротамер), 7,05 (m, 1Н, ротамер), 5,22 етап (vi) вище) у ТГФ (50мл) та воді (25мл) дода(m, 1H, ротамер), 4,83 (m, 1H, ротамер), 4,57 (m, вали моногідрат гідроксиду літію (0,5г, 2H, ротамер), 4,38 (m, 2H, ротамер), 4,3-3,7 (m, 12,48ммоль). Розчин перемішували при кімнатній 5H), 2,77 (m, 1H, ротамер), 2,55 (m, 1H, ротамер), температурі протягом 1 години та ТГФ видаляли у 2,27 (m, 1H) 1З вакуумі. Залишок розбавляли водою далі промиС-ЯМР (100МГц; D2O): (карбонільні та/або вали СНСІ3 (2х) та промивки викидали. Основний амідинові атоми карбону, ротамери) d 172,9, 172,2, водний шар підкислювали 2Η НСІ та екстрагували 172,0, 171,8, 166,9 СНСІ3 (4х). СНСІ3-екстракти сушили сульфатом Приклад 11 натрію, фільтрували та концентрували у вакуумі, Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeотримуючи сиру потрібну сполуку (1,5г) як масло. Паб(OMe) Флеш-хроматографія на силікагелі, елюючи сумі(і) Ph(3-Cl)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeшшю СНСІ3:МеОН:концентрований ΝΗ 4ΟΗ (градіПаб(OMe,Teoc) єнт від 7,0:2,5:0,5 до 6:3:1) дала сіль амонію потріPh(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Azeбної сполуки (1,1г). Сіль амонію розподіляли між Паб(Teoc) (100мг, 0,155ммоль; дивися Приклад 1Η НСІ та СНСІ3. Органічні фази сушили сульфа10(viii) вище), розчиняли у 12мл тетрагідрофурану. том натрію, фільтрували та концентрували у вакуГідрохлорид О-метилгідроксиламіну (44мг, 47 78195 48 0,53ммоль), додавали та реакційну суміш гріли (m, 1H), 4,47 (m, 2H), 4,4-4,2 (b, 1Н), 4,1741 (m, при 50°С протягом ночі. Реакційну суміш випарю3Н), 3,95 (s, ЗН), 3,67 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,42 (m, вали та залишок очищали препаративною ВЕРХ 1H) 0,97 (m, 2H), 0,01 (s, 9H) (CH3CN/0,1Μ NH4OAc (70/30)). Потрібні фракції (ii) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeвипарювали та залишок розчиняли у невеликій Паб(OMe) кількості ацетонітрилу та воді і сушили сублімаціPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeєю. Сушк у сублімацією повторювали. Вихід: 80мг Паб(OMe, Teoc) (0,40г, 0,62ммоль; дивися етап (і) (76%) чистого матеріалу. вище), розчиняли у 5мл ТФОК та давали реагува1 ти протягом 30 хвилин. ТФОК випарювали та заН-ЯМР (400МГц; CD3OD) ротамери: d 7,5-7,4 лишок розподіляли між етилацетатом та водним (m, 3Н), 7,35-7,2 (m, 4H), 5,15 (m, 1H, другорядний розчином гідрокарбонату натрію. Водну фазу ексротамер), 4,74 (m, 1Н, головний ротамер), 4,5-4,25 трагували ще двічі етилацетатом та об'єднану (m, 3Н), 4,2-3,95 (m, 4Н), 3,91 (b, 3Н), 3,9-3,6 (m, 2Н), 2,63 (m, 1Н, другорядний ротамер), 2,50 (m, органічну фазу промивали водою, розсолом, сушили сульфа том натрію, фільтрували та випарю1H, головний ротамер), 2,3-2,1 (m, 1Н), 0,95 (m, вали. Продукт сушили сублімацією від води та 2Н), 0,02 (s, 9H, головний ротамер), 0,01 (s, 9H, ацетонітрилу. Жодної очистки не було необхідно. другорядний ротамер) Вихід: 0,28г (85%). (іі) Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Aze1 Паб(OMe) Н-ЯМР (600МГц; CDCI3): d 7,89 (bt, 1H), 7,57 Ph(3-CI)(5-OCF3)-(S)CH(CH 2OH)C(O)-Aze(d, 2H), 7,28 (d, 2H), 7,18 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 6,99 Паб(OMe, Teoc), (80мг, 0,12ммоль; дивися етап (і) (m, 1H), 6,51 (t, 1H), 4,88 (s, 1H), 4,87 (m, 1H), 4,80 вище), розчиняли у 1мл дихлорметану та охоло(bs, 2H), 4,48 (dd, 1H), 4,43 (dd, 1H), 4,10 (m, 1H), джували у льодяній бані. Трифлуороцтову кисло3,89 (s, 3Н), 3,68 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,40 (m, 1H) 1З ту, 3мл, додавали та реакційну колбу тримали у С-ЯМР (125МГц; CDCI3): (карбонільні та/або льодяній бані протягом 2 годин. Суміш випарюваамідинові атоми карбону, ротамери) d 172,9, 170,8, ли та розчиняли у етилацетаті та промивали тричі 152,7, 152,6 водним розчином гідрокарбонату натрію далі воМС (m/z) 495 (Μ-1)-, 497 (Μ+1)+ дою та розеол. Органічну фазу сушили сульфатом Приклад 13 натрію, фільтрували та випарювали. Залишок суPh(3-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб x HQAc шили сублімацією з невеликої кількості ацетонітPh(3-CI)(5-OCHF2-(R)CH(OH)C(O)-Azeрилу та води. Вихід: 60мг (95%) чистого потрібного Паб(OMe) (13мг, 0,026ммоль; дивися Приклад 12 продукту. вище) розчиняли у абсолютному етанолі (5мл) та MC (m/z) 528 (M-1)-; 531 (M+1)+ додавали 30мг 10% Pd/C. В кінці додавали оцтову 1 Н-ЯМР (500МГц; CD3OD) ротамери: d 7,65кислоту (5мкл) та суміш гідрували при атмосфер7,55 (m, 3Н, ротамери), 7,45 (m, 1H, головний роному тиску протягом 20 годин. Суміш фільтрували тамер), 7,4-7,2 (m, 4Н), 5,15 (m, 1Н, другорядний через броунмілерит (CeliteÒ), випарювали, та ротамер), 4,74 (m, 1H, головний ротамер), 4,5-4,3 очищали обернено-фазовою ВЕРХ (0,1Μ водний (m, 3Н), 4,05-3,95 (m, 2Н), 3,85 (m, 1Н, головний ацетат амонію/MeCN). Прийнятні фракції сушили ротамер), 3,82 (s, 3Н, головний ротамер), 3,81 (s, сублімацією, отримуючи потрібну сполуку як білий 3Н, другорядний ротамер), 3,73 (m, 1H, головний твердий продукт: 8,5мг (66%). 1 ротамер), 3,67 (m, 1H, другорядний ротамер), 3,62 Н-ЯМР (400МГц; CD3OD) ротамери: d 7,73(m, 1H, другорядний ротамер), 2,63 (m, 1H, друго7,78 (m, 2Н), 7,55 (d, 2Н), 7,19-7,43 (m, 3Н), 7,06рядний ротамер), 2,50 (m, 1H, головний ротамер), 7,13 (m, 1Н), 6,83 (t, 1Н, JH-F=74Гц, головний рота2,24 (m, 1H, головний ротамер), 2,16 (m, 1H, друмер), 6,81 (t, 1Н, головний ротамер), 5,20 (s, 1H, горядний ротамер) головний ротамер), 5,19 (m, 1H, другорядний ро1З С-ЯМР (125МГц; CD3OD): (карбонільні та/або тамер), 5,15 (s, 1H, другорядний ротамер), 4,78 (m, амідинові атоми карбону, ротамери) d 174,0, 173,2, 1Н, головний ротамер), 4,4-4,6 (кілька піків, 2Н), 172,7, 172,6, 155,1 4,35 (m, 1Н, головний ротамер), 4,08 (m, 1Н), 3,99 Приклад 12 (m, 1Н, другорядний ротамер), 2,70 (m, 1H, другоPh(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeрядний ротамер), 2,52 (m, 1H, головний ротамер), Паб(OMe) 2,30 (m, 1H, головний ротамер), 2,15 (m, 1H, дру(і) Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeгорядний ротамер), 1,89 (s, 3Н) 1З Паб(OMe, Teoc) С-ЯМР (100МГц; CD3OD): (карбонільні та/або Ph(3-CI)(5-OCHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeамідинові атоми карбону, ротамери) d 173,7, 172,9, Паб(Teoc) (0,40г, 0,65ммоль; дивися Приклад 1(іх) 168,3. МС (m/z) 433 (М+1)+; 431 (М-1)вище), розчиняли у 20мл ацетонітрилу та додаваПриклад 14 ли 0,50г (6,0ммоль) гідрохлориду ОPh(3-OCF3HR)CH(OH)C(O)-Aze-Паб x ТФОК метилгідроксиламіну. Суміш гріли при 70°С протяPh(3-CI)(5-OCF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб x гом 2 годин. Розчинник випарювали та залишок ТФОК (34мг, 0,057ммоль, з Прикладу 6) розчиняли розподіляли між водою та етилацетатом. Водну у 5мл етанолу та додавали 20мг 10% Pd/C. Суміш фазу екстрагували ще двічі етилацетатом та об'гідрували при атмосферному тиску протягом ночі. єднану органічну фазу промивали водою, розсоСуміш фільтрували через броунмілерит (CeliteÒ), лом, сушили сульфатом натрію, фільтрували та випарювали, та сушили сублімацією від води та випарювали. Вихід: 0,41г (91%). ацетонітрилу. 1 1 Н-ЯМР (400МГц; CDCI3): d 7,83 (bt, 1H), 7,57 Н-ЯМР (400МГц, CD3OD) ротамери: d 7,8-7,7 (bs, 1H), 7,47 (d, 2H), 7,30 (d, 2H), 7,20 (m, 1H), 7,14 (m, 2H), 7,55 (m, 2H), 7,5-7,2 (m, 4H), 5,24 (s, 1H, (m, 1H), 7,01 (m, 1H), 6,53 (t, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,87 головний ротамер), 5,23 (m, 1H, другорядний ро 49 78195 50 тамер), 5,18 (s, 1H, другорядний ротамер), 4,77 (m, наступної очистки. 1 1Н, головний ротамер), 4,6-4,45 (m, 2Н), 4,36 (m, Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,18 (s, 1H), 7,07 1Н, головний ротамер), 4,08 (m, 1Н), 3,99 (m, 1Н, (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 5,13 (S, 1H), 4,58 (q, J=8Гц, 2Н) другорядний ротамер), 2,70 (m, 1Н другорядний (іν) Ph(3-CD(5-OCH 2CF3)-(R)CH(OH)C(O)OH (а) ротамер), 2,52 (m, 1H, головний ротамер), 2 30 (m, та Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(S)CH(OAc)C(O)OH (b) 1H, головний ротамер), 2,15 (m, 1H, другорядний Розчин Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)ротамер) (R,S)CH(OH)C(O)OH (7,06г, 24,8ммоль, дивися 13 С-ЯМР (100МГц, CD3OD) (карбонільні та/або етап (iіі) вище) та Lipase PS "Amano" (4,30г) у вініамідинові атоми карбону, ротамери) d 174,1, 173,9, лацетаті (250мл) та МТВЕ (250мл) гріли при 70°С 173,5, 172,9, 168,2 під азотом протягом 40 годин. Реакційну суміш 19 -F Я МР (282МГц, CD3OD) -59,8 та -59,9 (3F, охолоджували до кімнатної температури, фермент другорядний та головний ротамер відповідно), видаляли фільтруванням, промивали етилацета77,4 (3F) свідчить про сіль ТФОК. MC (m/z) 451,3 том, та фільтрат концентрували у вакуумі. Хрома(M+1)+ тографія на силікагелі, елюючи сумішшю СНСІ3 Приклад 15 МеОН Et 3N (92:6:2) дала триетиламінову сіль поPh(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб трібної сполуки (а) (3,02г) як жовте масло. Сіль x ΤΦΟΚ потрібної сполуки (а) розчиняли у воді (150мл), (i) 3-Хлор-5-трифлуоретоксибензальдегід підкислювали 2Η НСІ та екстрагували ЕtOАс До перемішуваного на магнітній мішалці роз(2´75мл). Поєднані органічні екстракти сушили чину 3-хлор-5-гідроксибензальдегіду (2,0г, сульфатом натрію, фільтрували, та концентрували 12,8ммоль; дивися Приклад 1(іі) вище) та карбонау вакуумі з отриманням потрібної сполуки (а) ту калію (2,3г, 16,6ммоль) у ДМФ (35мл) під азотом (2,18г) як білуватого твердого продукту. додавали 2,2,2-трифлуоретил п-толуолсульфонат На додаток, триетиламінову сіль потрібної (4,2г, 16,6ммоль) при кімнатній температурі. Суміш сполуки (b) (4,73г) отримували згаданою вище гріли до 110°С протягом 7 годин та далі перемішухроматографією на колонці. вали протягом ночі при кімнатній температурі. РеДані для потрібної сполуки (а): акційну суміш охолоджували до 0°С, виливали на темп.плавл.: 98-103°С 1 лід з холодною 2Η НСІ (100мл) та екстрагували Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,18 (s, 1H) 7,07 (s, ЕtOАс (2´75мл). Поєднані органічні екстракти про1H), 7,02 (s, 1H), 5,13 (s, 1H), 4,58 (q, J=8Гц, 2Н) 13 мивали 0,5Η НСІ (2´50мл), сушили сульфатом C ЯМР (75МГц, CD3OD) d 175,4, 159,6, 144,6, натрію, фільтрували, та концентрували у вакуумі. 136,2, 125,0 (q, J=217Гц), 121,8, 115,9, 113,1, 73,3, Коричневе масло піддавали хроматографії на си67,0 (q, J=35Гц) лікагелі, елюючи сумішшю гексан:ЕtOАс (6:1), ВЕРХ Аналіз: 98,6%, більше 99% e.н., Колонка отримуючи потрібну сполуку (1,9г, 61%) як жовте Chiralcel OD (97:3:0,5 гексан:EtOH:TФOК рухома масло. фаза) 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 9,44 (s, 1H), 7,56 (s, [a]25D=-81,5° (c=1,0, МеОН) 1H), 7,33 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 4,42 (q, J=8Гц, 2Н) АРСІ-МС (M-1) = 283m/z (іі) Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(R,S)CH(OTMS)CN (v) Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(R)CH(OH)C(О)-AzeДо розчину 3-хлор-5Паб(Тeoc) трифлуоретоксибензальдегіду (5,2г, 21,7ммоль, До розчину Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3дивися етап (і) вище) та йодиду цинку (1,7г, (R)CH(OH)C(O)OH (0,50г, 1,8ммоль, дивися етап 5,4ммоль) у СН2СІ2 (200мл) під азотом додавали (іν) вище (сполука (а))) у ДМФ (20мл) під азотом краплями триметилсилілціанід (4,3г, 43,3ммоль) додавали Н-Аzе-Паб(Теос) x НСІ (1,03г, 2,3ммоль), через шприц при 0°С. Суміш перемішували при ПіБОФ (1,01г, 1,9ммоль), та ДІПЕА (0,57г, 0°С протягом 3 годин, далі розбавляли водою 4,4ммоль) при 0°С. Реакційну суміш перемішували (150мл). Органічний шар відділяли, сушили сульпри 0°С протягом 2 годин та далі при кімнатній фатом натрію, фільтрували, та концентрували у температурі протягом 20 годин. Суміш концентрувакуумі, отримуючи потрібну сполуку (6,9г, 95%) як вали у вакуумі та залишок двічі піддавали хромажовте масло, яке використовували без наступної тографії на силікагелі, елюючи спершу сумішшю очистки. СНСІ3:ЕtOН (10:1) та далі сумішшю етилацетат 1 ЕtOН (10:1), отримуючи потрібну сполуку (0,55г, Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 7,27 (s, 1Н), 6,98 (s, 48%) як нестійку білу піну темп.плавл.: 90-95°С. 2Н), 5,44 (s, 1Н), 4,38 (q, J=8Гц, 2Н), 0,30 (s, 9Η) Rf=0,42 (10:1 СНСІ3:ЕtOН) (iіі) Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(R,S)CH(OH)C(O)OH 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміш роКонцентровану гідрохлоридну кислоту (170мл) додавали до Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)тамерів) d 7,78-7,81 (m, 2H), 7,38-7,41 (m, 2H), (R,S)CH(OTMS)CN (6,9г, 20,4ммоль, дивися етап 7,12-7,16 (m, 1 Η), 7,00-7,06 (m, 2H), 5,09-5,22 та (іі) вище) та перемішували при 100°С протягом 1 4,75-4,79 (m, 2H), 3,94461 (m, 8H), 2,09-2,75 (m, години. Після охолодження до кімнатної темпера2H) 1,04-1,11 (m, 2H), 0,70 (s, 9H) тури, реакційну суміш далі охолоджували до 0°С АРСІ-МС: (Μ+1) = 643 m/z та повільно підлужували 3N NaOH (300мл). Цю (νi) Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)-(R)CH(OH)C(O)-AzeПаб x ΤΦΟΚ Ph(3-Cl)(5-OCH 2CF3)-(R)СН(ОН)С(O)суміш промивали Et2O (2´100мл) та водний шар Аzе-Паб(Теос) (0,066г, 0,103ммоль, дивися етап підкислювали 2Η НСІ (50мл). Водний шар далі (ν) ви ще), розчиняли у 3мл ТФОК та давали реагуекстрагували етилацетатом (2´100мл), сушили вати протягом 30 хвилин. ТФОК випарювали та сульфатом натрію, фільтрували, та концентрували залишок сушили сублімацією від води та ацетоніту вакуумі, отримуючи потрібну сполуку (5,3г, 92%) рилу з отриманням 0,060г (94%) потрібної сполуки як блідо-жовте масло, яке використовували без 51 78195 52 як its ТФОК сол. (10мл) при кімнатній температурі. Суміш гріли до 1 100°С протягом 6 годин та далі перемішували проН-ЯМР (400МГц, CD3OD) ротамери: d 7,8-7,7 (m, 2H), 7,6-7,5 (m, 2H), 7,2-7,0 (m, 3Н), 5,21 (m, тягом ночі при кімнатній температурі. Реакційну суміш охолоджували до 0°С, виливали на лід з 1H, другорядний ротамер), 5,17 (s, 1H, головний холодною 2Η НСІ (100мл), та екстрагували ЕtOАс ротамер), 5,11 (s, 1H, другорядний ротамер), 4,81 (m, 1Н, головний ротамер), 4,6-4,4 (m, 4Н), 4,37 (m, (2´75мл). Поєднані органічні екстракти промивали 1Н, головний ротамер), 4,16 (m, 1H, головний ро0,5Η НСІ (2´50мл), сушили сульфатом натрію, тамер), 4,06 (m, 1H, другорядний ротамер), 3,99 фільтрували, та концентрували у вакуумі. Корич(m, 1H, другорядний ротамер), 2,70 (m, 1H, другоневе масло піддавали хроматографії на силікагелі, рядний ротамер), 2,54 (m, 1H, головний ротамер), елюючи сумішшю гексан:ЕtOАс (5:1), отримуючи 2,29 (m, 1H, головний ротамер), 2,15 (m, 1H, друпотрібну сполуку (1,35г, 64%) як жовте масло. 1 горядний ротамер) Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 9,92 (s, 1H), 7,52 (s, 13 С-ЯМР (100МГц, CD3OD) (карбонільні та/або 1H), 7,31 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 6,12 (tt, J=3Гц, амідинові атоми карбону, ротамери) d 172,2, 171,8, J=55Гц, 1H), 4,26 (dt, J=3Гц, J=15Гц, 2Н) 171,7, 167,0 МС (m/z) 499,3 (М+1)+ iii) Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R,S)CH(OTMS)CN Приклад 16 До розчину 3-хлор-5Ph(3-Cl)(5-OCH 2CF3)-(R)CH(OH)C(O)-Azeдифлуоретоксибензальдегіду (1,35г, 6,1ммоль; Паб(OMe) дивися етап (іі) вище) та йодиду цинку (0,48г, До розчину Ph(3-CI)(5-OCH 2CF3)1,5ммоль) у СН 2СІ2 (50мл) додавали краплями (R)CH(OH)C(O)OH (0,48г, 1,7ммоль, дивися Притриметилсилілціанід (1,21г, 12,2ммоль) при 0°С під клад 15(ιν) вище (сполука (а)) у ДМФ (20мл) під азотом. Суміш перемішували при 0°С протягом 3 азотом додавали Н-Аzе-Паб(ОМе) x 2НСІ (0,74г, годин, далі розбавляли водою (50мл). Органічний 2,2ммоль), ПіБОФ (0,97г, 1,9ммоль), та ДІПЕА шар відділяли, сушили сульфатом натрію, фільт(0,55г, 4,2ммоль) при 0°С. Реакційну суміш перерували, та концентрували у вакуумі, отримуючи мішували при 0°С протягом 2 годин та далі при потрібну сполуку (1,85г, 95%) як коричневе масло, кімнатній температурі протягом 20 годин. Суміш яке використовували без наступної очистки. 1 концентрували у вакуумі та залишок двічі піддаваН ЯМР (300МГц, CDCI3) d 7,13 (s, 1H), 6,94 (s, ли хроматографії на силікагелі, елюючи спершу 2H), 6,10 (tt, J=3Гц, J=55Гц, 1Н), 5,43 (s, 1Н), 4,20 сумішшю СНСІ3:EtOH (10:1) та вдруге сумішшю (dt, J=3Гц, J=15Гц, 2Н), 0,28 (s, 9H). ЕtOАс:ЕtOН (10:1), отримуючи потрібну сполуку (iv) Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R,S)CH(OH)C(O)OH (0,62г, 69%) як нестійку білу піну, темп. плавл.: 75Концентровану гідрохлоридну кислоту (60мл) 80°С. додавали до Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)Rf=0,43 (10:1 СНСІ3:ЕtOН) (R,S)(OTMS)CN (1,85г, 5,8ммоль; дивися етап (ііі) 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші ровище) та перемішували при 100°С протягом 1 готамерів) d 7,57-7,60 (m, 2H), 7,32-7,36 (m, 2Н), дини. Після охолодження до кімнатної температу7,13-7,17 (m, 1Н), 7,00-7,06 (m, 2Н), 5,09-5,19 та ри, реакційну суміш далі охолоджували до 0°С, 4,74-4,80 (m, 2Н), 3,93462 (m, 6Н), 3,81 (s, 3Н), підлужували повільно 3Η NaOH (-180мл) та про2,10-2,73 (m, 2Н) мивали Et2O (2´75мл). Водн. шар підкислювали 2Η АРСІ-МС (M+1) = 529 m/z НСІ (20мл) та екстрагували EtOAc (2´75мл). ПоєдПриклад 17 нані органічні екстракти сушили сульфатом наPh(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeтрію, фільтрували, та концентрували у вакуумі, Паб x ТФОК отримуючи потрібну сполуку (1,50г, 97%) як блідо(i) 2,2-Дифлуоретиловий естер метансульфожовтий твердий продукт, який використовували нової кислоти без наступної очистки. 1 До перемішуваного на магнітній мішалці розН ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,15 (s, 1H), 7,05 чину 2,2-дифлуоретанолу (1,52г, 18,5ммоль) у ди(s, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,19 (tt, J=4Гц, J=55Гц, 1H), хлорметані (20мл) під азотом додавали триетила5,12 (s, 1H), 4,25 (dt, J=4Гц, J=17Гц, 2Н) мін (5,61г, 55,5ммоль) та метансульфонілхлорид (ν) Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(S)CH(OAc)C(O)OH, (2,54г, 22,2ммоль) при 0°С. Суміш перемішували (a) та Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)OH (b) при 0°С протягом 1,5 годин, розбавляли СН2СІ2 Розчин Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)(50мл), та промивали 2Η НСІ (50мл). Водний шар (R,S)CH(OH)C(O)OH (3,90г, 14,6ммоль; дивися екстрагували СН 2СІ2 (30мл) та поєднані органічні етап (iv) вище) та Lipase PS "Amano" (2,50г) у вініекстракти промивали розсолом (30мл), сушили лацетаті (140мл) та МТВЕ (140мл) гріли при 70°С сульфатом натрію, фільтрували, та концентрували під азотом протягом 40 годин. Реакційну суміш у вакуумі, отримуючи потрібну сполуку (2,52г, 85%) охолоджували до кімнатної температури, фермент як жовте масло, яке використовували без наступвидаляли фільтруванням та промиванням етиланої очистки. цетатом, та фільтрат концентрували у вакуумі. 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 6,02 (tt, J=3Гц, J=55 Хроматографія на силікагелі, елюючи сумішшю ц, 1Н), 4,39 (dt, J=3Гц, J=13Гц, 2Н), 3,13 (s, 3Н) CHCI3:MeOH:Et 3N (92:6:2), дала триетиламінову (іі) 3-Хлор-5-дифлуоретоксибензальдегід сіль потрібної сполуки (а) як жовте масло. На доДо розчину 3-хлор-5-гідроксибензальдегіду даток, триетиламінову сіль потрібної сполуки (b) (1,50г, 9,6ммоль; дивися Приклад 1(іі) вище) та (1,47г) отримували та сіль розчиняли у воді калію карбонат (1,72г, 12,5ммоль) у ДМФ (10мл) (100мл), підкислювали 2Η НСІ та екстрагували під азотом додавали краплями розчин 2,2ЕtOАс (2´75мл). Поєднані органічні екстракти судифлуоретилового естеру метансульфонової кисшили сульфатом натрію, фільтрували, та концентлоти (2,0г, 12,5ммоль; дивися етап (і) вище) у ДМФ 53 78195 54 рували у вакуумі з отриманням потрібної сполуки азотом додавали Н-Аzе-Паб(ОМе) x 2НСІ (0,49г, (b) (1,00г) як білуватого твердого продукту. 1,5ммоль), ПіБОФ, (0,65г, 1,2ммоль), та ДІПЕА Дані для потрібної сполуки (b): (0,36г, 2,8ммоль) при 0°С. Реакційну суміш перетемп.плавл.: 103-106°С мішували при 0°С протягом 2 годин та далі при Rf=0,39 (90:8:2 CHCI3:MeOH:Et3N) кімнатній температурі протягом 20 годин. Суміш 1 концентрували у вакуумі та залишок тричі піддаН ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,13 (s, 1H), 7,04 вали хроматографії на силікагелі, елюючи спершу (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,17 (tt, J=4Гц, J=55Гц, 1H), 5,12 (s, 1Н), 4,24 (dt, J=4Гц, J=8Гц, 2Н) сумішшю СНСІ3:ЕtOН (10:1), далі етилацета13 том:ЕtOН (10:1), та в кінці сумішшю СНСІ3:МеОН С ЯМР (75МГц, CD3OD) d 175,5, 160,3, 144,5, (20:1), отримуючи потрібну сполуку (0,47г, 81%) як 136,1, 121,3, 115,7, 115,3, (t, J=240Гц), 112,9, 73,4, нестійку білу піну, темп.плавл.: 65-75°С 68,6 (t, J=29Гц) Rf=0,37 (10:1 СНСІ3:ЕtOН) ВЕРХ Аналіз: 96,2%, >95,0% е.н., Колонка 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші роChiralPak AD (95:5:0,5 гексан:ЕtOН:ТФОК рухом тамерів) d 7,58-7,60 (m, 2H), 7,32-7,35 (m, 2Н), фаз) 7,09-7,12 (m, 1Н), 6,96-7,02 (m, 2Н), 6,16 (t, J=55Гц, [a]25D=-84,0° (с=0,85 МеОН). 1Н), 5,08-5,18 та 4,74-4,80 (m, 2Н), 3,96-4,50 (m, APCI-MC: (М-1) = 265 m/z 6Н), 3,80 (s, 3Н), 2,10-2,75 (m, 2Н) (vi) Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-AzeAPCI-MC: (M+1) = 511 m/z Паб(Teoc) Приклад 19 До розчину Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Паб x (R)CH(OH)C(O)OH (0,35г, 1,3ммоль; дивися етап ТФОК (ν) ви ще (сполука (b))) у ДМФ (18мл) під азотом (i) Ph(3-Cl)(5-TMSO)-(R,S)CH(OTMS)CN додавали Н-Аzе-Паб(Теос) x НСІ (0,76г, 1,7ммоль), До розчину 3-хлор-5-гідроксибензальдегіду ПіБОФ (0,75г, 1,4ммоль), та ДІПЕА (0,43г, (9,8г, 62,6ммоль; дивися Приклад 1 (іі) вище) та 3,3ммоль) при 0°С. Реакційну суміш перемішували Znl2 (5,0г, 15,7ммоль) у безводному дихлорметані при 0°С протягом 2 годин та далі при кімнатній (500мл) при 0°С додавали триметилсилілціанід температурі протягом 20 годин. Суміш концентру(13,7г, 138ммоль). Реакційній суміші давали нагрівали у вакуумі та залишок двічі піддавали хроматися до кімнатної температури та перемішували тографії на силікагелі, елюючи спершу сумішшю протягом ночі. Воду (250мл) додавали, та шари СНСІ3:ЕtOН (10:1), та далі сумішшю етилацерозділяли. Водний шар екстрагували СН 2СІ2 тат:ЕtOН (10:1), отримуючи потрібну сполуку (0,69г, 84%) як нестійку білу піну. (2´300мл). Поєднані органічні екстракти сушили темп.плавл.: 108-118°С сульфатом натрію, фільтрували, та концентрували Rf=0,48 (10:1 СНСІ3:ЕtOН) у вакуумі, отримуючи потрібну сполуку (16,9г, 83%) 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші рояк жовте масло, що використовували без наступної очистки. тамерів) d 7,78-7,81 (m, 2H), 7,40-7,43 (m, 2Н), Rf=0,42 (3:1 гексан:ЕtOАс) 7,09-7,12 (m, 1 Η), 6,96-7,02 (m, 2H), 6,16 (t, 1 J=57Гц, 1Н), 5,09-5,20 та 4,75-4,80 (m, 2Н), 3,95Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 7,06 (s, 1H), 6,86 (s, 4,55 (m, 8H), 2,10-2,75 (m, 2H), 1,04-1,11 (m, 2H), 2H), 5,40 (s, 1H), -0,30 (s, 9Η), 0,24 (s, 9Η). 0,07 (s, 9H) (ii) Ph(3-CI)(5-OH)-(R,S)CH(OH)C(O)OH APCI-MC: (M+1) = 625 m/z Розчин Ph(3-CI)(5-OTMS)-(R,S)CH(OTMS)CN (vii) Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)(22,6г, 68,8ммоль; дивися етап (і) вище) у конценAze-Паб x ΤΦΟΚ трованій НСІ (200мл) кип'я тили під зворотним хоPh(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeлодильником під азотом протягом 3 годин. РеакПаб(Teoc) (0,086г, 0,138ммоль; дивися етап (vi) ційну суміш охолоджували до 0°С та підлужували вище), розчиняли у 3мл ТФОК та давали реагуваповільно 2Η NaOH. Суміш промивали Et2O ти протягом 1 години. ТФОК випарювали та зали(3´100мл) для видалення органічного забрудненшок сушили сублімацією від води та ацетонітрилу ня. Водний шар підкислювали 2Η НСІ та екстрагуз отриманням 0,080г (98%) потрібної сполуки як її вали ЕtOАс (3 ´200мл). Поєднані органічні екстраксолі з ТФОК. ти сушили сульфатом натрію, фільтрували, та 1 Н-ЯМР (300МГц; CD3OD) ротамери: d 7,8-7,7 концентрували у вакуумі, отримуючи потрібну спо(m, 2Н), 7,6-7,5 (m, 2Н), 7,15-6,95 (m, 3Н), 6,35-5,95 луку (9,3г, 67%) як коричневе масло, що викорис(m, 1H), 5,20 (m, 1H, другорядний ротамер), 5,14 товували без наступної очистки. (s, 1H, головний ротамер), 5,10 (s, 1H, другорядRf=0,23 (6:3:1 СНСІ3:МеОН:концентрований ний ротамер), 4,80 (m, 1H, головний ротамер), 4,6NH4OH) 1 4,0 (m, 6H), 2,70 (m, 1Н, другорядний ротамер), Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,05 (s, 1H), 6,94 2,53 (m, 1H, головний ротамер), 2,29 (m, 1H, голо(s, 1H), 6,73 (s, 1H), 5,03 (s, 1Η) вний ротамер), 2,15 (m, 1H, другорядний ротамер) (iii) Ph(3-CI)(5-OH)-(R,S)CH(OH)C(O)OEt 1З С-ЯМР (100МГц; CD3OD): (карбонільні та/або До розчину Ph(3-CI)(5-OH)амідинові атоми карбону, ротамери) d 174,0, 173,8, (R,S)CH(OH)C(O)OH (9,3г, 46,0ммоль; дивися етап 173,4, 172,9, 168,2 MC(m/z) 481,2 (M+H)+ (іі) вище) у абсолютному ЕtOН (200мл) додавали Приклад 18 концентровану сульфатн у кислоту (0,25мл) та реаPh(3-CI)(5-OCH 2CHF2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeкційну суміш кип'ятили під зворотним холодильниПаб(OMe) ком під азотом протягом 4 годин. Реакційну суміш До розчину Ph(3-CI)(5-OCH 2CHF2)охолоджували до 0°С та додавали твердий гідро(R)CH(OH)C(O)OH (0,30г, 1,7ммоль; дивися Прикарбонат натрію (0,2г). Реакційну суміш концентклад 17(v) вище (сполука (b))) у ДМФ (15мл) під рували у вакуумі та розподіляли між насиченим 55 78195 56 розчином гідрокарбонату натрію (100мл) та Et2O гом 3 діб. Реакційну суміш охолоджували, фільт(3´50мл). Поєднані органічні екстракти сушили рували через броунмілерит (CeliteÒ) та шар на сульфатом натрію, фільтрували, та концентрували фільтрі промивали етилацетатом. Фільтрат концеу вакуумі для отримання потрібної сполуки (6,9г, нтрували у вакуумі та піддавали флеш65%) як жовте масло, яке використовували без хроматографії на силікагелі, елюючи сумішшю наступної очистки. CHCI3:MeOH:Et 3N (15:1:0,5), отримуючи триетилаRf=0,62 (6:3:1 СНСІ3:МеОН:концентрований мінову сіль потрібної сполуки (а) (0,50г, 21%), що NH4OH). використовували без нейтралізації. На додаток, 1 отримували триетиламінову сіль потрібної сполуки Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 6,99 (s, 1H), 6,81 (s, (b) (0,46г, 20%). 2H), 5,07 (s, 1H), 4,16432 (m, 2H), 1,23 (t, J=7Гц, Дані для потрібної сполуки (а): 3Н) Rf=0,19 (15:1:0,5 CHCI3:MeOH:Et3N) (iv) Ph(3-Cn(5-OCH 2F)-(R,S)CH(OH)C(O)OEt 1 До розчину Ph(3-CI)(5-OH)Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,26 (s, 1H), 7,18 (R,S)CH(OH)C(O)OEt (6,1г, 26,8ммоль; дивися (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,74 (d, JH-F=54Гц, 2H),4,81 (s, етап (ііі) вище) у ДМФ (100мл) у закритій колбі під 1Η), 3,17 (q, J=7Гц, 6H), 1,28 (t, J=7Гц, 9Н) азотом при 0°С додавали карбонат цезію (13,1г, Дані для потрібної сполуки (b) 40,2ммоль). Реакційну суміш перемішували при Rf=0,33 (15:1:0,5 CHCI3:MeOH:Et3N) 1 0°С протягом 15 хвилин followed додаванням йоH ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,28 (s, 1H), 7,19 диду калію (0,5г, 2,7ммоль). Реакційну суміш охо(s, 1H), 7,09 (s, 1H), 5,76 (d, J H-P=54Гц, 2H), 5,75 (s, лоджували до -78°С та продували у посудин у хло1H), 3,17 (q, J= 7Гц, 6H), 2,16 (s, 3H), 1,28 (t, J=7Гц, рфлуорметан (18,4г, 268ммоль). Закритій колбі 9Н) далі давали нагрітися до кімнатної температури та (vii) Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(Q)-Azeперемішували протягом 18 годин. Реакційну суміш Паб(Teoc) охолоджували до 0°С, обережно продували для До розчину триетиламінової солі Ph(3-CI)(5видалення будь-якого надлишку хлорфлуорметаOCH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH (0,50г, 1,50ммоль; дину, та розподіляли між водою (20мл) та Et2O вися етап (vi) вище) та HAze-Паб(Teoc)-HCI (0,87г, 1,90ммоль) у сухому ДМФ (15мл) під азотом при (3´50мл). Поєднані органічні фази промивали роз0°С додавали ПіБОФ (0,85г, 2,60ммоль) та ДІПЕА солом (2´50мл), сушили сульфатом натрію, фільт(0,48г, 3,70ммоль). Реакційній суміші давали нагрірували та концентрували у вакуумі. Флештися до кімнатної температури та перемішували хроматографія на силікагелі, елюючи сумішшю протягом ночі. Реакційну суміш концентрували у гексан:ЕtOАс (градієнт від 9 :1 до 3:1) дала потрібвакуумі та двічі піддавали фле ш-хроматографії на ну сполуку (2,4г, 35%) як світло-жовте масло. Засилікагелі, елюючи спершу сумішшю СНСІ3:ЕtOН уваження: сполук погано видно в УФ-світлі на (9:1) та вдруге сумішшю етилацетат:ЕtOН (20:1), ТШХ. Її можна візуалізувати фарбуванням ТШХ отримуючи потрібну сполуку (0,23г, 26%) як нестійбромкрезоловим зеленим. ку білу піну. Rf=0,46 (2:1 гексан:ЕtOАс) 1 Темп.плавл.: 88-92°С Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 7,21 (s, 1H), 7,08 (s, Rf=0,61 (9:1 СНСІ3:ЕtOН) 1H), 7,05 (s, 1H), 5,70 (d, JH-F=54Гц, 2H), 5,12 (d, 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші роJ=5Гц, 1Η), 3,80-4,35 (m, 2Н), 3,50 (d, J=5Гц, 1H), тамерів) d 7,81 (d, J=8Гц, 2Н), 7,40-7,42 (m, 2Н), 1,26 (t, J=7Гц, 3Н) (v) Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R,S)CH(OH)C(O)OH 7,06-7,23 (m, 3Н), 5,76 (d, JH-F=51Гц, 2H), 5,10-5,16 та 4,77-4,83 (m, 2H), 3,80-4,49 (m, 6Н), 2,30-2,53 До розчину Ph(3-CI)(5-OCH 2F)(m, 2Н), 1,08 (t, J=7Гц, 2Н), 0,08 (s, 9H). (R,S)CH(OH)C(O)OEt (1,8г, 6,8ммоль; дивися етап APCI-MC (M+1) = 593 m/z (iv) ви ще) у воді:ТГФ (30мл, 1:2) при 0°С під азо(viii) Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)-Azeтом, додавали моногідрат гідроксиду літію (0,40г, 10,3ммоль). Суміш перемішували при 0°С протяПаб х ТФОК Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)-Azeгом 2 годин. Реакційну суміш концентрували у ваПаб(Teoc) (0,051г, 0,086ммоль; дивися етап (vii) куумі та розподіляли між водою (5мл) та Εt2Ο вище), розчиняли у 3мл ТФОК та давали реагува(2´20мл). Водний шар підкислювали обережно ти протягом 20 хвилин. ТФОК випарювали та за0,2Η НСІ при 0°С та екстрагували EtOAc (3´30мл). лишок сушили сублімацією від води та ацетонітПоєднані органічні фази сушили суль фатом нарилу. Продукт мав чистоту 95% з 5% трію, фільтрували та концентрували у вакуумі, дефлуорметилованого матеріалу. Спроби очистиотримуючи потрібну сполуку (1,4г, 87%) як безбарти його препаративною обернен-фазовою РХ з вне масло, яке тверділо до білої твердої речовини CH3CN:0,1M NH4OAc були невдалими, та матеріпри стоянні. ал, частково як ацетат, розчиняли у 5мл ТФОК, Rf=0,43 (6:2:1 CHCI3:MeOH:Et 3N) 1 випарювали та сушили сублімацією з отриманням Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,24 (s, 1H), 7,17 26мг (51%) потрібної сполуки як її солі ТФОК Чис(s, 1Η), 7,07 (s, 1H), 5,78 (d, JH-F=54Гц, 2H), 5,13 (s, тота: 95%. 1H) 1 Н-ЯМР (600МГц, CD3OD) ротамери: d 7,8-7,7 (vi) Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)OH (а) та (m, 2H), 7,6-7,5 (m, 2H), 7,21 (s, 1H, головний роPhp-CIXS-OCHgF)-(S)CH(OAc)C(O)OH fb) тамер), 7,17 (s, 1H, другорядний ротамер), 7,13 (s, Суміш Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R,S)CH(OH)C(O)OH 1H, головний ротамер), 7,09 (s, 1H, другорядний (3,2г, 13,9ммоль; дивися етап (ν) вище) та Lipase ротамер), 7,07 (m, 1H, головний ротамер), 7,04 (m, PS "Amano" (1,9г) у вінілацетаті (150мл) та МТВЕ 1H, другорядний ротамер), 5,73 (d, 2H), 5,18 (m, (150мл) гріли при 70°С в атмосфері азоту протя1H, другорядний ротамер), 5,16 (s, 1H, головний 57 78195 58 ротамер), 5,09 (s, 1H, головний ротамер), 478 (m, монофлуоретил)метансульфонату (3,7г, 1H, другорядний ротамер), 4,56 (d, 1H, головний 68,2ммоль: дивися етап (і) вище) у ДМФ (120мл). ротамер), 4,50 (d, 1H, другорядний ротамер), 4,46 Суміш гріли до 100°С протягом 5 годин та далі (d, 1H, другорядний ротамер), 4,45 (d, 1Н, голоперемішували протягом ночі при кімнатній темпевний ротамер), 4,35 (m, 1H, головний ротамер), ратурі. Реакційну суміш охолоджували до 0°С, 4,14 (m, 1H, головний ротамер), 4,05 (m, 1Н, друвиливали в охолоджену льодом 2Η НСІ та екстрагорядний ротамер), 3,97 (m, 1Н, другорядний рогували EtOAc. Поєднані органічні екстракти протамер), 2,68 (m, 1Н, другорядний ротамер), 2,5 (m, мивали розсолом, сушили сульфатом натрію, фі1H, головний ротамер), 2,25 (m, 1H, головний рольтрували та концентрували у вакуумі. Коричневе тамер), 2,19 (m, 1Н, другорядний ротамер) масло хроматографували на силікагелі, елюючи 13 С-ЯМР (150МГц; CD3OD): (карбонільні та/або сумішшю гексан:EtOAc (4:1), отримуючи потрібну сполуку (7,6г, 71%) як жовте масло. амідинові атоми карбону, ротамери) d 173,9, 173,3, 1 172,9, 168,2. ESI-MC: (М+1) = 449 (m/z) Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 9,92 (s, 1H), 7,48 (s, Приклад 20 1H), 7,48 (s,1Η), 7,21 (s, 1H), 4,87 (t, J=4Гц, 1H), Ph(3-CI)(5-OCH 2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze4,71 (t, J=3Гц, 1H), 4,33 (t, J=3Гц, 1H), 4,24(t, J=3Гц, Паб(OMe) 10Н) До розчину триетиламінової солі Ph(3-CI)(5(iii) Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R,S)CH(OTMS)CN OCH2F)-(R)CH(OH)C(O)OH (0,60г, 1,80ммоль, диДо розчину 3-хлор-5вися Приклад 19 (vi) та Н Аzе-Паб(ОМе)·2НСІ монофлуоретоксибензальдегіду (7,6г, 37,5ммоль; (0,79г, 2,30ммоль) у ДМФ (15мл) під азотом при дивися етап (іі) вище) та йодиду цинку (3,0г, 0°С додавали ПіБОФ (1,04г, 1,90ммоль) та ДІПЕА 9,38ммоль) у дихлорметані (310мл) додавали кра(0,58г, 4,50ммоль). Реакційній суміші давали нагріплями триметилсилілціанід (7,4г, 75,0ммоль); 0сС тися до кімнатної температури та перемішували під азотом. Суміш перемішували при 0°С протягом протягом ночі. Реакційну суміш концентрували у 3 годин та при кімнатній температурі протягом вакуумі та тричі флеш-хроматографували на силіночі. Реакційну суміш розбавляли водою (300мл}, кагелі, елюючи сумішшю СНСІ3ЕtOН (9:1) та далі органічний шар відділяли, сушили сульфатом надвічі сумішшю EtOAc:ЕtOН (20:1), отримуючи потрію, фільтрували та концентрували у вакуумі, трібну сполуку (0,22г, 26%) як нестійку білу піну. отримуючи потрібну сполуку (10,6г, 94%) як коричТемп.плавл.: 66-70°С неве масло, що використовували без подальшої Rf=0,45 (9:1 СНСІ3:ЕtOН) очистки або характеризації. 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші ро(iν) Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2R-(R,S)CH(OH)C(O)OH Концентровану гідрохлоридну кислоту (100мл) тамерів) d 7,59 (d, J=8Гц, 2H), 7,32 (d, J=7Гц, 2H), додавали до Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)7,06-7,23 (m, 3H), 5,75 (s, JH-F=54Гц, 1Н), 5,10-5,16 (R)CH(OTMS)CN (10,6г, 5,8ммоль, дивися етап (iii) та 4,78-4,84 (m, 2H), 4,11-4,45 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), вище) та розчин перемішували при 100°С протя2,10-2,75 (m,2H) 13 гом 3 годин. Після охолодження до кімнатної темС-ЯМР (150МГц, CD3OD): (карбонільні та/або ператури реакційну суміш о холоджували до 0°С, амідинові атоми карбону, ротамери) d 173,0, повільно підлужували 3Η NaOH (300мл) та проми170,8,170,7, 152,5 вали Et2O (3´200мл), водний шар підкислювали 2Η APCI-MC: (M + 1) = 479 m/z Приклад 21 НСІ (80мл) та екстрагували EtOAc (3´300мл). ПоPh(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Azeєднані EtOAc-екстракти сушили сульфатом натрію, Паб x TФOК фільтрували та концентрували у вакуумі, отриму(і) 2-монофлуоретилметансульфонат ючи потрібну сполуку (8,6г 98%) як блідо-жовтий До перемішуваного на магнітній мішалці розтвердий продукт, який використовували без настучину 2-флуоретанолу (5,0г, 78,0ммоль) у ди хлорпної очистки. метані (90мл) під азотом при 0°С додавали триRf=0,28 (90:8:2 СНСІ3:МеОН:насичений етиламін (23,7г, 234ммоль) та ΝΗ4ΟΗ) 1 метансульфонілхлорид (10,7г, 93,7ммоль). Суміш Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,09 (s, 1H), 7,02 перемішували при 0°С протягом 1,5 годин, розба(s, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 4,77-4,81 (m, 1H), вляли дихпорметаном (100мл) та промивали 2Η 4,62-4,65 (m, 1H), 4,25428 (m, 1H), 4,15-4,18 (m, НСІ (100мл). Водний шар екстрагували дихлорме1H) таном (60мл) та поєднані органічні екстракти про(ν) Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(S)CH(OAc)C(O)OH мивали розсолом (75мл), сушили сульфатом на(а) та Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OAc)C(O)OH трію, фільтрували та концентрували у вакуумі, (b) отримуючи потрібну сполуку (0,7г; 88%) як жовте Розчин Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)масло, яке використовували без подальшої очис(R,S)CH(OH)C(O)OH (8,5г, 34,5ммоль, дивися етап тки. (iν) вище) та ліпази PS "Amano" (4,0г) у вінілацета1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) d 4,76 (t, J=4Гц, 1H), ті (250мл) та МТВЕ (250мл) гріли при 70°С під азо4,54 (t,J=4Гц, 1H), 4,52 (t, J=4Гц, 1Н), 4,43 (t, J=4Гц, том протягом 3 діб. Реакційну суміш охолоджували 1H), 3,09 (s, 3H). до кімнатної температури, фермент видаляли фі(іі) 3-Хлор-5-монофлуоретоксибензальдегід льтруванням, промивали етилацетатом, та фільтДо розчину 3-хлор-5-гідроксибензальдегіду рат концентрували у вакуумі. Хроматографія на (5,2г; 52,5ммоль; дивися Приклад 1 (іі) вище) та силікагелі, елюючи сумішшю СНСІ3:МеОН:Et 3N карбонату калію (9,4г, 68,2ммоль) у ДМФ (10мл) (90:8:2) дала триетиламінову сіль потрібної сполупід азотом додавали краплями при кімнатній темки (а) як жовте масло. На додаток, отримували пературі розчин (2триетиламінову сіль потрібної сполуки (b) (4,0г). 59 78195 60 Сіль потрібної сполуки (b) розчиняли у воді До розчину Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)(250мл), підкислювали 2Η та екстрагували етила(R)CH(OH)C(O)OH (818мг, 3,29ммоль, дивися Приклад 21 (ν) вище) у ДМФ (30мл) під азотом при 0°С цетатом (3´200мл). Поєднані органічні екстракти додавали НАzе-Паб(ОМе)·2НСІ (1,43г, 4,27ммоль), сушили сульфатом натрію, фільтрували та концеПіБОФ (1,89г, 3,68ммоль), та ДІПЕА (1,06г, нтрували у вакуумі з отриманням потрібної сполу8,23ммоль). Реакційну суміш перемішували при ки (b) (2,3г, 32%) як жовте масло. 0°С протягом 2 годин та далі при кімнатній темпеДані для потрібної сполуки (b): Rf=0,28 (90:8,2 СНСІ3:МеОН концентрований ратурі протягом ночі. Суміш концентрували у вакуумі та залишок двічі піддавали хроматографії на NH4OH) 1 силікагелі, елюючи спершу сумішшю СНСІ3:ЕtOН Н ЯМР (300МГц, CD3OD) d 7,09 (s, 1H), 7,02 (15:1) та вдруге етилацетатом:ЕtOН (20:1), отри(s, 1H), 6,93 (s,1H), 5,11(s, 1H), 4,77-4,81 (m, 1H), муючи потрібну сполуку (880мг, 54%) як нестійку 4,62-4,65 (m, 1H), 4,25-4,28 (m, 1H), 4 15-4,18 (m, білу піну. 1H) Темпплавл 65-72°С (vi) Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-AzeRf=0,60 (10:1 СНСІ3:ЕtOН) Паб(Teoc) 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші роДо розчину Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)тамерів) d 7,58-7,60 (d, J=8Гц, 2Н), 7,34 (d, J=7Гц, (R)CH(OH)C(O)OH (940мг, 3,78ммоль, дивися етап 2Н), 7,05-7,08 (m, 2H), 6,95-6,99 (m, 1H), 5,08-5,13 (ν) ви ще) у ДМФ (30мл) під азотом при 0°С дода(m, 1H), 4,77-4,82 (m, 1Н), 4,60-4,68 (гл, 1Н), 3,99вали НАzе-Паб(Теос)·НСІ (2,21г, 4,91ммоль), Пі4,51 (m, 7Н), 3,82 (s, 3Н), 2,10-2,75 (m, 2Н) БОФ (2,16г, 4,15ммоль), та ДІПЕА (1,22г, 13 С-ЯМР (150МГц, CD3OD) (карбонільні та/або 9,45ммоль). Реакційну суміш перемішували при 0°С протягом 2 годин та далі при кімнатній темпеамідинові атоми карбону) d 173,3, 170,8, 152,5 ратурі протягом 4 годин. Суміш концентрували у APCI-MC (M+1) = 493 m/z вакуумі та залишок двічі піддавали хроматографії Приклад 23 на силікагелі, елюючи спершу СНСІ3:ЕtOН (15:1) Ph(3-CI)(5-OCH(CH 2F)2)-(R)CH(OH)C(O)-Azeта вдруге етилацетатом:ЕtOН (20:1), отримуючи Паб·ТФОК потрібну сполуку (450мг, 20%) як нестійку білу піну. (і) 1,3-Дифлуорізопропіл метансульфонат Темп.плавл.: 80-88°С До перемішуваного на магнітній мішалці розRf=0,60 (10:1 СНСІ3:ЕtOН) чину 1,3-дифлуор-2-пропанолу (7,0г, 72,8ммоль) у 1 Н ЯМР (300МГц, CD3OD, комплекс суміші роСН2СІ2 (100мл) під азотом при 0°С додавали триетиламін (22,1г, 219ммоль) та метансульфонілхтамерів) d 7,79 (d, J=8Гц, 2Н), 7,42 (d, J=8Гц, 2H), 7,05-7,08 (m, 1H), 6,93-6,99 (m, 2H), 5,08-5,13 (m, лорид (10,0г, 87,4ммоль). Суміш перемішували при 0°С протягом 3 годин. Суміш промивали 2Η 1H), 4,75-4,80 (m, 2H), 4,60-4,68 (m, 1H), 3 95-4,55 НСІ (150мл) та шари розділяли. Водний шар екст(m, 8Н), 2,10-2,75 (m, 2H), 1,05-1,11 (m, 2H), 0,08 рагували СН2СІ2 (200мл) та поєднані органічні екс(s, 9H) тракти промивали розсолом (100мл), сушили суАРСІ-МС (M+1) = 607 m/z (νιι) Ph(3-Cl)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)льфатом натрію, фільтрували та концентрували у вакуумі, отримуючи потрібну сполуку (11,5г, 91%) Aze-Паб x ΤΦΟΚ як жовте масло, яке використовували без наступPh(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Azeної очистки. Паб(Teoc) (0,357г, 0,589ммоль, дивися етап (νi) 1 вище), розчиняли у 10мл ΤΦΟΚ та давали реагуН ЯМР (300МГц, CDCI3) d 4,97-5,08 (m, 1H), вати протягом 40 хвилин. ТФОК випарювали та 4,75-4,77 (m, 2H), 4,59-4,61(m,2H), 3,12 (s, 3Н) залишок сушили сублімацією від води та ацетоніт(ii) Ph(3-CI)(5-OCH(CH 2F)2)CHO рилу з отриманням 0,33г (93%) потрібної сполуки До розчину 3-хлор-5-гідроксибензальдегіду як її сіль ТФОК. (8,0г, 50,7ммоль; дивися Приклад 1 (іі) вище) та 1 карбонату калію (9,1г, 66,0ммоль) у ДМФ (75мл) Н ЯМР (600МГц, CD3OD) ротамери d 7,8-7,7 під азотом додавали краплями при кімнатній тем(m, 2Н), 7,54 (d, 2Н), 7,08 (s, 1H, головний ротапературі розчин 1,3мер), 7,04 (s, 1H, другорядний ротамер), 6,99 (s, дифлуорізопропілметансульфонату (11,5г, 1H, головний ротамер), 6,95 (s, 1H), 6,92 (s, 1H, 66,0ммоль; дивися етап (і) вище) у ДМФ (75мл). другорядний ротамер), 5,18 (m, 1H, другорядний Суміш гріли до 110°С протягом 18 годин. Реакційротамер), 5,14 (s, 1H, головний ротамер), 5,08 (s, ну суміш охолоджували до 0°С, виливали на лід1H, другорядний ротамер), 4,80 (m, 1H, головний холодну 2Η НСІ (200мл) та екстрагували EtOAc ротамер), 4,73 (m, 1Н), 4,65 (m, 1Н), 4,6-4,4 (m, 2Н), 4,35 (m, 1Н, головний ротамер), 4,21 (дублет (3´250мл). Поєднані органічні екстракти сушили мультиплетів, 2Н), 4,12 (m, 1H, головний ротамер), сульфатом натрію, фільтрували та концентрували 4,06 (m, 1H, другорядний ротамер), 3,99 (m, 1H, у вакуумі. Коричневе масло піддавали хроматогдругорядний ротамер), 2,69 (m, 1H, другорядний рафії на силікагелі, елюючи сумішшю гексан:EtOAc ротамер), 2,53 (m, 1H, головний ротамер), 2,29 (m, (4:1), отримуючи потрібну сполуку (4,4г, 37%) як 1H, головний ротамер), 2,14 (m, 1H, другорядний жовте масло. 1 ротамер) Н NMR (300МГц, CDCI3) d 9,92 (s, 1H), 7,51 (s, 13 С-ЯМР (150МГц, CD3OD) (карбонільні та/або 1H), 7,36 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 4,70-4,89 (m, 3Н), амідинові атоми карбону) d 172,8, 172,1, 167,4 4,63-4,68 (m, 2H) ESI-MC+ (M+1) = 463 (m/z) (iii) Ph(3-CI)(5-OCH(CH 2F)2)-(R,S)CH(OTMS)CN Приклад 22 До розчину Ph(3-CI)(5-OCH(CH 2F)2)CHO (4,4г, Ph(3-CI)(5-OCH 2CH2F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze18,7ммоль; див. шаг (ii) вище) йодиду цинку (1,5г, Паб(OMe) 4,67ммоль) у дихлорметані (200мл) при 0°С під