Спосіб отримання міцелію їстівних та лікарських грибів

Реферат: Спосіб отримання міцелію їстівних та лікарських грибів шляхом глибинного культивування на поживному середовищі, що містить глюкозу, воду дистильовану, азотвмісну добавку, дріжджовий екстракт, гідроортофосфат калію. В поживне середовище дотатково вводять цитрат цинку, цитрат селену, цитрат германію, які отримані за аквананотехнологією та дигідрофосфат калію, а як азотвмісну добавку вводять пептон. UA 82980 U (12) UA 82980 U UA 82980 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до сільського господарства, зокрема до грибництва, і може бути використана для інтенсифікації виробництва міцелію їстівних та лікарських грибів. Відомий спосіб виробництва міцелію грибів роду гливи (P.ostreatus), при якому посівний міцелій одержують шляхом культивування первинного міцелію на агаризованому поживному середовищі, приготовленому на основі відвару пшениці, причому в середовище додатково вводять тирсу листвяних порід в кількості 1,75-2,00 % і подрібнений фільтрувальний напір в кількості 0,5-1,0 %, пересівають міцелій для отримання проміжної культури на зволожені, стерилізовані дерев'яні палички, які поміщаються в культиваційну ємкість, а наступне культивування здійснюють на поживному середовищі, як таке використовують лузгу соняшника, що зволожують до 65 % і змішують з крейдою в кількості 50-100 г на 1 кг лузги (див. заявка РФ 93026475/13, "Способ производства мицелия грибов рода Вешенки и способ выращивания из него плодовых тел", опубл. 20.02.1997). Недоліком способу є багатостадійність і використання на кожній стадії різноманітних компонентів субстрату в різних пропорціях, що нераціонально при промисловому вирощуванні культури. Відомий спосіб стимуляції росту міцелію культивованих їстівних та лікарських грибів, в основі якого - пророщування міцелію на поживному середовищі, яке приготовлено із зерна пшениці, гіпсу і крейди з додаванням в неї як стимулятора росту діацетофенонілселеніду, розчиненого в органічному розчині диметилсульфоксиду (див. пат. РФ № 2263441. "Способ стимуляции роста мицелия культивируемых съедобных грибов", опубл. 10.11.2005). Недоліком цього способу є невисокий вміст мікроелементів і вітамінів в міцелії. Найбільш близьким до запропонованого за технічною суттю є спосіб отримання міцелію їстівних та лікарських грибів, що включає приготування посівного міцелію шляхом глибинного культивування на поживному середовищі наступного складу: глюкоза 40 г/л, кукурудзяне борошно 20 г/л, крейда хімічно осаджена 5 г/л, калій фосфорнокислий однозаміщений 2 г/л, хлористий калій 2 г/л, сульфат магнію 0,25 г/л, галун залізоамонійний 0,015 г/л., як піногасник рослинна олія 1 % від об'єму готового середовища, вода дистильована до 1 л і як добавка дріжджовий екстракт 10 г/л (див. пат. РФ № 2424648. "Способ выращивания грибов", опубл. 27.07.2011). Недоліком способу є недостатня ефективність та невисокий вміст мікроелементів і вітамінів в міцелії. При створенні способу була поставлена задача збільшення приросту біомаси і підвищення його харчової та біологічної цінності, а саме білка, жиру та вітамінів. Задача вирішена тим, що в способі одержання міцелію їстівних та лікарських грибів, який ґрунтується на глибинному культивуванні міцелію на поживному середовищі, що містить глюкозу, воду дистильовану, азотвмісну добавку, дріжджовий екстракт, гідроортофосфат калію, згідно із корисною моделлю, в поживне середовище додатково вводять цитрат цинку, цитрат селену, цитрат германію, які отримані за аквананотехнологією та дигідрофосфат калію, а як азотвмісну добавку вводять пептон та використовують поживне середовище такого складу (в г/л): глюкоза 15-30 пептон 1-5 дріжджовий екстракт 1-4 гідроортофосфат калію 0,5-3 дигідрофосфат калію 0,5-3 0,0025цитрат цинку 0,0125 0,00004цитрат селену 0,0001 0,000067цитрат германію 0,00050 вода дистильована до 1 л. Введення в поживне середовище додатково цитрату цинку, цитрату селену та цитрату германію підвищує ефективність способу за рахунок збільшення приросту біомаси і підвищення харчової і біологічної цінності міцелію. Оптимальний склад поживного середовища є таким (в г/л): глюкоза 25 г/л пептон 3 г/л дріжджовий екстракт 2 г/л гідроортофосфат калію 1 г/л 1 UA 82980 U 5 10 15 20 дигідрофосфат калію 1 г/л цитрат цинку 0,0025 г/л цитрат селену 0,000067 г/л цитрат германію 0,0001 г/л вода дистильована до 1 л. При вмісті компонентів менше нижньої межі знижується біологічна активність поживного середовища, а вміст компонентів вище верхніх меж призводить до перевищення кількості мікроелементів, що зменшує швидкість росту міцелію грибів. Спосіб здійснюють наступним чином: міцелій гриба Ganoderma lucidum вирощують глибинним методом в колбах Ерленмейєра ємкістю 1 л, на лабораторній качалці (120 об/хв.). при температурі (24-26 °C). Кількість грибного міцелію (інокулюму) для вирощування становить 5 % від об'єму поживного середовища. Строк вирощування складає 7-м діб. Поживні середовища мають такий склад: вода дистильована - 1 л, глюкоза - 25 г/л, пептон 3 г/л, дріжджовий екстракт - 2 г/л, К2НРО4-1 г/л, КН2РО-1 г/л та ZnCit-0,0025 г/л, SeCit2-0,000067 г/л і GeCit2-0,0001 г/л в кожне середовище окремо. Вихідний розчин цитратів цих металів 2.500 г/л Zn, 0.100 г/л Se, 0,100 г/л Ge. Контрольне середовище № 1 містить 1 л - води дистильованої, 25 г/л - глюкози, 3 г/л пептону, 2 г/л - дріжджового екстракту. 1 г/л гідроортофосфату калію, 1 г/л дигідрофосфату калію. В кожну колбу Ерленмейєра ємкістю 1 л додають 200 мл поживного середовища і вносять по 10 мл посівного матеріалу (грибного міцелію). Вирощену грибну біомасу фільтрують через капроновий фільтр, висушують до постійної маси при температурі 105 °C, зважуючи на аналітичних терезах з точністю до 4-го знаку. Приклад. Вводили в таке поживне середовище при культивуванні міцелію грибів G.lucidum і P.ostreatus цитрати цинку, отримані за нанотехнологією та спостерігали збільшення концентрації біомаси міцелію див. табл. 1. Таблиця 1 Накопичення біомаси міцелію грибів G.lucidum і P.ostreatus при їх культивуванні на рідкому поживному середовищі, збагаченому наноцитратом цинку Гриби G.lucidum P.ostreatus Розведення поживного середовища Концентрація цитрата Zn в поживному середовищі, мг/л контроль 1:100 1:150 1:200 1:500 1:1000 1:1500 контроль 1:100 1:200 1:500 1:1000 1:1500 1:2000 25,0 16,7 12,5 5,0 2,5 1,7 25,0 12,5 5,0 2,5 1,70 1,25 Концентрація біомаси в поживному середовищі, г/л (М±m), n=5 1,32±0,04 1,28±0,02 1,З0±0,05 1,76±0,05* 2,55±0,09* 3,40±0,02* 1,48±0,04* 4,8±0,11 5,0±0,09* 5,4±0,09* 5,6±0,13* 5,9±0,12* 5,1±0,12* 4,7±0,08 Приріст біомаси, % 33,0 89,4 157,0 5,0 4,2 12,5 16,0 22,0 6,25 * різниця з контролем достовірна, р