Застосування інгібіторів tor-кінази для лікування пухлинних захворювань у пацієнта зі зниженим рівнем білка pampk та/або активності ampk

Реферат: Даний винахід стосується способів лікування і/або запобігання злоякісної пухлини або пухлинного синдрому у пацієнта, які включають введення ефективної кількості інгібітора TORкінази пацієнту зі злоякісною пухлиною або пухлинним синдромом, що характеризується UA 110697 C2 (12) UA 110697 C2 втратою або мутацією генів або білків LKB1 і/або АМРК, де вказаним інгібітором є 7-(6-(2гідроксипропан-2-іл)піридин-3-іл)-1-(транс-4-метоксициклогексил)-3,4-дигідропіразино[2,3b]піразин-2(1H)-он або 1-етил-7-(2-метил-6-(4H-1,2,4-триазол-3-іл)піридин-3-іл)-3,4дигідропіразино[2,3-b]піразин-2(1H)-он. UA 110697 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 1. ПЕРЕХРЕСНІ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ За даною заявкою вимагається пріоритет попередньої заявки США № 61/301150, поданої 3 лютого 2010 року, і вимагається пріоритет попередньої заявки США № 61/362982, поданої 9 липня 2010 року, зміст кожної з яких включений в цей документ як посилання в повному обсязі. 2. ГАЛУЗЬ Даний винахід стосується способів лікування і/або профілактики злоякісної пухлини або пухлинного синдрому у пацієнта, які включають введення ефективної кількості інгібітору TORкінази пацієнту зі злоякісною пухлиною або пухлинним синдромом, що характеризується втратою або мутацією генів або білків LKB1 і/або AMPK. 3. ПОПЕРЕДНІЙ РІВЕНЬ ТЕХНІКИ Зв'язок між аномальним фосфорилуванням білка і причиною або наслідком захворювань стала відома більше 20 років назад. Таким чином, протеїнкінази виявилися дуже важливою групою мішеней лікарських засобів. Див. Cohen, Nat. Rev. Drug Disc., 1:309-315 (2002), Grimmiger et al. Nat. Rev. Drug Disc. 9(12):956-970 (2010). Різні інгібітори протеїнкіназ клінічно застосовували при лікуванні широкого спектра захворювань, таких як злоякісні пухлини і хронічні запальні захворювання, включаючи діабет і інсульт. Див. Cohen, Eur. J. Biochem., 268:5001-5010 (2001), Protein Kinase Inhibitors for the Treatment of Disease: The Promise and the Problems, Handbook of Experimental Pharmacology, Springer Berlin Heidelberg, 167 (2005). Протеїнкінази належать до великого і різноманітного сімейства ферментів, каталізуючих фосфорилування білка, і відіграють вирішальну роль в клітинній сигналізації. Протеїнкінази залежно від їх білка-мішені можуть надавати позитивні або негативні регуляторні ефекти. Протеїнкінази залучені до конкретних шляхів передачі сигналів, які регулюють клітинні функції, як необмежувальні приклади, такі як метаболізм, проходження клітинного циклу, клітинна адгезія, судинна функція, апоптоз і ангіогенез. Порушення функціонування клітинної сигналізації пов'язане з багатьма захворюваннями, найбільш охарактеризовані з яких включають злоякісні пухлини і діабет. Регуляція передачі сигналу цитокінами і асоціація сигнальних молекул з протоонкогенами і генами пухлинних супресорів добре підтверджена документально. Подібним чином продемонстрований зв'язок між діабетом і пов'язаними станами і з порушеною регуляцією рівнів протеїнкіназ. Див. наприклад, Sridhar et al. Pharm. Res. 17(11): 1345-1353 (2000). З регуляцією протеїнкіназ також пов'язані вірусні інфекції і пов'язані з ними стани. Park et al. Cell 101(7): 777-787 (2000). Протеїнкінази можна розділити на великі групи залежно від виду амінокислот, що є їх мішенями (серин/треонін, тирозин, лізин і гістидин). Наприклад, тирозинкінази включають рецепторні тирозинкінази (RTK), такі як фактори росту, і нерецепторні тирозинкінази, такі як сімейство кіназ src. Також існують протеїнкінази з подвійною специфічністю, мішенню яких є і тирозин, і серин/треонін, такі як циклінзалежні кінази (CDK) і мітогенактивовані протеїнкінази (MAPK). Внаслідок того, що протеїнкінази регулюють майже кожний клітинний процес, включаючи метаболізм, клітинну проліферацію, клітинне диференціювання і виживання клітин, вони є привабливими мішенями для терапевтичного втручання при різних хворобливих станах. Наприклад, контроль клітинного циклу і ангіогенез, в яких протеїнкінази грають основну роль, є клітинними процесами, пов'язаними з численними хворобливими станами, як необмежувальні приклади, такими як, злоякісні пухлини, запальні захворювання, аномальний ангіогенез і захворювання, пов'язані з ним, атеросклероз, дегенерація жовтої плями, діабет, ожиріння і біль. Протеїнкінази виявилися привабливими мішенями для лікування злоякісних пухлин. Fabbro et al. Pharm. Ther. 93:79-98 (2002). Передбачено, що залучення протеїнкіназ до розвитку злоякісних новоутворень у людини може відбуватися внаслідок: (1) геномних перестановок (наприклад, BCR-ABL при хронічному мієлогенному лейкозі), (2) мутацій, що приводять до конститутивно активної кіназної активності, наприклад, при гострому мієлогенному лейкозі і пухлинах шлунково-кишкового тракту, (3) порушення регуляції кіназної активності внаслідок активації онкогенів або втрати функцій пухлинних супресорів, наприклад, при злоякісних пухлинах з онкогенним RAS, (4) порушення регуляції кіназної активності внаслідок надекспресії, як у випадку EGFR, і (5) ектопічної експресії факторів росту, які можуть додавати внесок в розвиток і підтримання неопластичного фенотипу. Fabbro et al., Pharm. Ther. 93:79-98 (2002). З'ясування заплутаності протеїнкіназних шляхів і складності зв'язку і взаємодії у різних протеїнкіназ і кіназних шляхів і між ними висуває на перший план важливість розробки фармацевтичних засобів, здатних діяти як модулятори, регулятори або інгібітори протеїнкіназ зі сприятливою активністю на декілька кіназ або декілька кіназних шляхів. Таким чином, залишається потреба в нових модуляторах кіназ. 1 UA 110697 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Білок, називаний mTOR (мішень рапаміцину ссавців), також називаний FRAP, RAFTI або RAPT1, являє собою Ser/Thr протеїнкіназу з 2549 амінокислот, яка, як показано, є одним з найбільш важливих білків в шляху mTOR/PI3K/Akt, який регулює ріст і проліферацію клітин. Georgakis and Younes Expert Rev. Anticancer Ther. 6(1): 131-140 (2006). mTOR існує в двох комплексах, mTORC1 і mTORC2. Тоді як mTORC1 чутливий до аналогів рапаміцину (таких як темсиролімус або еверолімус), mTORC2 переважно нечутливий до рапаміцину. Примітно, що рапаміцин не є інгібітором TOR-кінази. Декілька інгібіторів mTOR оцінювали або оцінюють в клінічних випробуваннях для лікування злоякісних пухлин. Темсиролімус схвалений для застосування при нирковоклітинній карциномі в 2007 році, а еверолімус в 2009 році схвалений для пацієнтів з нирковоклітинною карциномою, у яких спостерігали прогресування при застосуванні інгібіторів рецепторів фактора росту ендотелію судин. Крім того, сиролімус в 1999 році схвалений для профілактики відторгнення трансплантата нирки. Цікавий, але обмежений клінічний успіх цих інгібуючих mTORC1 сполук демонструє придатність інгібіторів mTOR при лікуванні злоякісної пухлини і відторгнення трансплантата і підвищений потенціал сполук з сукупною інгібуючою mTORC1 і mTORC2 активністю. Соматичні мутації впливають на ключові шляхи при раку легень. Таким чином, ідентифікація специфічних мутацій, пов'язаних з раком легень, може приводити до поліпшених терапевтичних протоколів. Нещодавні дослідження виявили велику кількість соматичних мутацій гена LKB1, який представлений при раку легень, шийки матки, молочної залози, кишечнику, сім'яників, підшлункової залоза і шкіри (Distribution of somatic mutations in STK11, Catalogue of Somatic Mutations in Cancer, Wellcome Trust Genome Campus, Hinxton, Cambridge). Цитування будь-якого посилання або указання на нього в розділі 2 даної заявки не треба розглядати як припущення, що посилання являє собою відомий рівень техніки для даної заявки. 4. СУТЬ Даний винахід стосується способів лікування або профілактики злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, або лікування пухлинного синдрому, наприклад синдрому Пейтца-Егерса, які включають введення ефективної кількості інгібітору TOR-кінази пацієнту зі злоякісною пухлиною або пухлинним синдромом, що характеризується втратою або мутацією гена або білка LKB1 відносно гена або білка LKB1 контрольного пацієнта або дикого типу. Також даний винахід стосується способів лікування або профілактики злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, які включають скринінг злоякісної пухлини пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 відносно гена або білка LKB1 контрольного пацієнта або дикого типу і введення ефективної кількості інгібітору TOR-кінази пацієнту зі злоякісною пухлиною, що характеризується втратою або мутацією гена або білка LKB1. Також даний винахід стосується способів детекції втрати або мутації гена або білка LKB1 в злоякісній пухлині пацієнта ("тестованого пацієнта"), наприклад недрібноклітинній карциномі легень або раку шийки матки, які включають: одержання біологічного зразка із злоякісної пухлини тестованого пацієнта; вимірювання одного або декількох з рівня експресії мРНК LKB1, рівня експресії білка LKB1, визначення статусу метилування гена LKB1 або іншу ідентифікацію втрати або наявності мутації гена або білка (наприклад, за допомогою прямого секвенування кДНК або ДНК екзонів або аналізу SNP, або множинної залежної від лігування ампліфікації зондів (MLPA) для ідентифікації втрати кількості копій або імуногістохімії (IHC), імунофлуоресценції (IF) або вестерну-блотингу для визначення втрати білка); і порівняння вказаного вимірювання з контрольним вимірюванням із злоякісної пухлини пацієнта ("контрольного пацієнта"), що не характеризується втратою або мутацією гена або білка LKB1 (дикого типу); де зміна експресії мРНК LKB1, експресії білка LKB1, структури мРНК LKB1, статусу метилування гена LKB1 і/або структури білка LKB1 в біологічному зразку, одержаному у тестованого пацієнта, відносно зразка, одержаного у контрольного пацієнта або дикого типу, вказує на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 в злоякісній пухлині тестованого пацієнта. Також даний винахід стосується способів прогнозу імовірності наявності у пацієнта злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, що піддається лікуванню інгібіторами TOR-кінази, які включають скринінг злоякісної пухлини вказаного пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 відносно гена або білка LKB1 контрольного пацієнта або дикого типу, де втрата або наявність мутації гена або білка LKB1 дозволяє передбачати підвищену імовірність того, що лікування інгібіторами TOR-кінази буде впливати на вказану злоякісну пухлину. 2 UA 110697 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Також даний винахід стосується способів прогнозу терапевтичної ефективності лікування пацієнта зі злоякісною пухлиною, наприклад недрібноклітинною карциномою легень або раком шийки матки, інгібітором TOR-кінази, які включають скринінг злоякісної пухлини вказаного пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 відносно гена або білка LKB1 контрольного пацієнта або дикого типу, де втрата або наявність мутації гена або білка LKB1 в злоякісній пухлині пацієнта є прогностичною для терапевтичної ефективності лікування інгібітором TOR-кінази. Також даний винахід стосується способів лікування пухлинного синдрому, наприклад синдрому Пейтца-Егерса, які включають скринінг пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 відносно гена або білка LKB1 контрольного пацієнта або дикого типу і введення ефективної кількості інгібітору TOR-кінази пацієнту з втратою або мутацією гена або білка LKB1. Також даний винахід стосується способів детекції втрати або мутації гена або білка LKB1 у пацієнта ("тестованого пацієнта") з пухлинним синдромом, наприклад синдромом ПейтцаЕгерса, які включають: одержання у тестованого пацієнта біологічного зразка; вимірювання одного або декількох з рівня експресії мРНК LKB1, рівня експресії білка LKB1, визначення статусу метилування гена LKB1 або іншу ідентифікацію втрати або наявності мутації гена або білка (наприклад, за допомогою прямого секвенування кДНК або ДНК екзонів або аналізу SNP, або множинної залежної від лігування ампліфікації зондів (MLPA) для ідентифікації втрати кількості копій або імуногістохімії (IHC), імунофлуоресценції (IF) або вестерну-блотингу для визначення втрати білка); і порівняння вказаного вимірювання з контрольним вимірюванням у пацієнта ("контрольного пацієнта") без втрати або мутації гена або білка LKB1 (дикого типу); де зміна експресії мРНК LKB1, експресії білка LKB1, структури мРНК LKB1, статусу метилування гена LKB1 і/або структури білка LKB1 в біологічному зразку, одержаному у тестованого пацієнта, відносно зразка, одержаного у контрольного пацієнта або дикого типу, вказує на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 у тестованого пацієнта. Також даний винахід стосується способів прогнозу імовірності наявності у пацієнта пухлинного синдрому, наприклад синдрому Пейтца-Егерса, що піддається лікуванню інгібіторами TOR-кінази, які включають скринінг вказаного пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 відносно гена або білка LKB1 контрольного пацієнта або дикого типу, де втрата або наявність мутації гена або білка LKB1 дозволяє передбачати підвищену імовірність того, що лікування інгібіторами TOR-кінази буде впливати на вказаний пухлинний синдром. Також даний винахід стосується способів прогнозу терапевтичної ефективності лікування пацієнта з пухлинним синдромом, наприклад синдромом Пейтца-Егерса, інгібітором TOR-кінази, які включають скринінг вказаного пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка LKB1 відносно гена або білка LKB1 контрольного пацієнта або дикого типу, де втрата або наявність мутації гена або білка LKB1 у пацієнта є прогностичною для терапевтичної ефективності лікування інгібітором TOR-кінази. Даний винахід стосується способів лікування або профілактики злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, або лікування пухлинного синдрому, наприклад синдрому Пейтца-Егерса, які включають введення ефективної кількості інгібітору TOR-кінази пацієнту зі злоякісною пухлиною або пухлинним синдромом, що характеризується втратою або мутацією гена або білка AMPK відносно гена або білка AMPK контрольного пацієнта або дикого типу. Даний винахід стосується способів лікування або профілактики злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, або лікування пухлинного синдрому, наприклад синдрому Пейтца-Егерса, які включають введення ефективної кількості інгібітору TOR-кінази пацієнту зі злоякісною пухлиною або пухлинним синдромом, що характеризується зниженим рівнем білка фосфо-AMPK (pAMPK) і/або активності AMPK відносно рівня білка фосфо-AMPK (pAMPK) і/або активності AMPK контрольного пацієнта або дикого типу. У одному з варіантів здійснення pAMPK являє собою pAMPK T172. Також даний винахід стосується способів лікування або профілактики злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, які включають скринінг злоякісної пухлини пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка AMPK відносно гена або білка AMPK контрольного пацієнта або дикого типу і введення ефективної кількості інгібітору TOR-кінази пацієнту зі злоякісною пухлиною, що характеризується втратою або мутацією гена або білка AMPK. Також даний винахід стосується способів лікування або профілактики злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, які включають скринінг злоякісної пухлини пацієнта на наявність зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK 3 UA 110697 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 відносно рівня білка pAMPK і/або активності AMPK контрольного пацієнта або дикого типу і введення ефективної кількості інгібітору TOR-кінази пацієнту зі злоякісною пухлиною, що характеризується зниженим рівнем білка pAMPK і/або активності AMPK. У одному з варіантів здійснення pAMPK являє собою pAMPK T172. Також даний винахід стосується способів детекції втрати або мутації гена або білка AMPK в злоякісній пухлині пацієнта ("тестованого пацієнта"), наприклад недрібноклітинній карциномі легень або раку шийки матки, які включають: одержання біологічного зразка із злоякісної пухлини тестованого пацієнта; вимірювання одного або декількох з рівня експресії мРНК AMPK, рівня експресії білка AMPK, визначення статусу метилування гена AMPK або іншу ідентифікацію втрати або наявності мутації гена або білка (наприклад, за допомогою прямого секвенування кДНК або ДНК екзонів або аналізу SNP, або множинної залежної від лігування ампліфікації зондів (MLPA) для ідентифікації втрати кількості копій або імуногістохімії (IHC), імунофлуоресценції (IF) або вестерну-блотингу для визначення втрати білка); і порівняння вказаного вимірювання з контрольним вимірюванням із злоякісної пухлини пацієнта ("контрольного пацієнта"), що не характеризується геном або білком AMPK або мутацією (дикого типу); де зміна експресії мРНК AMPK, експресії білка AMPK, структури мРНК AMPK, метилування гена AMPK і/або структури білка AMPK в біологічному зразку, одержаному у тестованого пацієнта, відносно експресії мРНК AMPK, експресії білка AMPK, структури мРНК AMPK, метилування гена AMPK і/або структури білка AMPK контрольного пацієнта або дикого типу вказує на втрату або наявність мутації гена або білка AMPK в злоякісній пухлині тестованого пацієнта. Також даний винахід стосується способів детекції зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK в злоякісній пухлині пацієнта ("тестованого пацієнта"), наприклад недрібноклітинній карциноми легень або раку шийки матки, які включають: одержання біологічного зразка із злоякісної пухлини тестованого пацієнта; вимірювання одного або декількох з рівня експресії білка pAMPK, рівня активності AMPK або інше вимірювання рівня білка pAMPK (наприклад, імуногістохімія (IHC), імунофлуоресценція (IF) або вестерн-блотинг з визначенням кількості білка pAMPK або рівня фосфорилування AMPK по конкретних ділянках, наприклад по ділянці T172) і/або рівня активності AMPK (наприклад, аналіз AMPK-кінази, див. Sanders et al. Biochem. J. 403:139-148 (2007)); і порівняння вказаного вимірювання з контрольним вимірюванням із злоякісної пухлини пацієнта ("контрольного пацієнта"), що не характеризується зниженим рівнем білка pAMPK і/або активності AMPK (дикого типу); де менший рівень білка pAMPK і/або активності AMPK в біологічному зразку, одержаному у тестованого пацієнта, відносно рівня білка pAMPK і/або активності AMPK контрольного пацієнта або дикого типу вказує на наявність зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK в злоякісній пухлині тестованого пацієнта. Також даний винахід стосується способів прогнозу імовірності наявності у пацієнта злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, що піддається лікуванню інгібіторами TOR-кінази, які включають скринінг злоякісної пухлини вказаного пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка AMPK відносно гена або білка AMPK контрольного пацієнта або дикого типу, де втрата або наявність мутації гена або білка AMPK дозволяє передбачати підвищену імовірність того, що лікування інгібіторами TOR-кінази буде впливати на вказану злоякісну пухлину. Також даний винахід стосується способів прогнозу імовірності наявності у пацієнта злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, що піддається лікуванню інгібіторами TOR-кінази, які включають скринінг злоякісної пухлини вказаного пацієнта на наявність зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK відносно рівня білка pAMPK і/або активності AMPK контрольного пацієнта або дикого типу, де наявність зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK дозволяє передбачати підвищену імовірність того, що лікування інгібіторами TOR-кінази буде впливати на вказану злоякісну пухлину. Також даний винахід стосується способів прогнозу терапевтичної ефективності лікування пацієнта зі злоякісною пухлиною, наприклад недрібноклітинною карциномою легень або раком шийки матки, інгібітором TOR-кінази, які включають скринінг злоякісної пухлини вказаного пацієнта на втрату або наявність мутації гена або білка AMPK відносно гена або білка AMPK контрольного пацієнта або дикого типу, де втрата гена або білка AMPK в злоякісній пухлині пацієнта є прогностичною для терапевтичної ефективності лікування інгібітором TOR-кінази. Також даний винахід стосується способів прогнозу терапевтичної ефективності лікування пацієнта зі злоякісною пухлиною, наприклад недрібноклітинною карциномою легень або раком шийки матки, інгібітором TOR-кінази, які включають скринінг злоякісної пухлини вказаного 4 UA 110697 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 пацієнта на наявність зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK відносно рівня білка pAMPK і/або активності AMPK контрольного пацієнта або дикого типу, де наявність зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK в злоякісній пухлині пацієнта є прогностичною для терапевтичної ефективності лікування інгібітором TOR-кінази. Також даний винахід стосується способів лікування або профілактики злоякісної пухлини, наприклад недрібноклітинної карциноми легень або раку шийки матки, або лікування пухлинного синдрому, наприклад синдрому Пейтца-Егерса, які включають введення пацієнту зі злоякісною пухлиною або пухлинним синдромом ефективної кількості інгібітору TOR-кінази і ефективної кількості одного або декількох засобів, що модулюють рівні АМФ, захоплення глюкози, метаболізм або відповідь на стрес. Також даний винахід стосується фармацевтичних композицій, які містять один або декілька інгібіторів TOR-кінази і один або декілька засобів, що модулюють рівні АМФ, захоплення глюкози, метаболізм або відповідь на стрес, і фармацевтично прийнятний носій, ексципієнт або розріджувач. Також даний винахід стосується наборів, які містять один або декілька контейнерів, заповнених інгібітором TOR-кінази або його фармацевтичною композицією, реагентами для детекції втрати або мутації гена або білка LKB1 або втрати або мутації гена або білка AMPK або обох в злоякісній пухлині пацієнта або у пацієнта з пухлинним синдромом, і інструкції для детекції втрати або мутації гена або білка LKB1 або втрати або мутації гена або білка AMPK або обох в злоякісній пухлині пацієнта або у пацієнта з пухлинним синдромом. Також даний винахід стосується наборів, які містять один або декілька контейнерів, заповнених інгібітором TOR-кінази або його фармацевтичною композицією, реагентами для детекції зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK в злоякісній пухлині пацієнта або у пацієнта з пухлинним синдромом, і інструкції для детекції зниженого рівня білка pAMPK і/або активності AMPK в злоякісній пухлині пацієнта або у пацієнта з пухлинним синдромом. У деяких варіантах здійснення інгібітор TOR-кінази являє собою сполуку, як описано в цьому документі. Варіанти здійснення даного винаходу можна більш повно зрозуміти на основі докладного опису і прикладів, які призначені для ілюстрації необмежувальних варіантів здійснення. 5. КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ На фігурі 1 перерахований мутантний статус LKB1 клітинних ліній недрібноклітинного раку легень (NSCLC) на основі описаних послідовностей ДНК, описаної мутації, присутності (позитивно) або відсутності (негативно) інтактного білка LKB1 (як визначали вестернімуноблотингом, як показано на фіг. 1B) і середніх значень IC 50 (мкМ) для інгібування росту сполукою 1 (n являє собою кількість повторень визначень IC50). На фігурі 1B проілюстрований вестерн-блотинг LI-COR, що демонструє рівні білка LKB1 в панелі клітинних ліній NSCLC з фіг. 1A. Експеримент підтверджує відсутність білка LKB1 для ліній, описаних як мутантні по гену LKB1. На фігурі 2A проілюстрована кореляція чутливості до лікування інгібітором TOR-кінази сполукою 1 (IC50) з описаним мутантним статусом гена LKB1, як визначено за допомогою критерію Круськала (р=0,0296). На фігурі 2B проілюстрована кореляція чутливості до лікування інгібітором TOR-кінази сполукою 1 (IC50) з наявністю (позитивно) або відсутністю (негативно) білка LKB1, як оцінювали за допомогою вестерн-імуноблотингу LI-COR, як визначено за допомогою критерію Вілкоксона (р=0,0128). На фігурі 2C проілюстроване застосування критерію Фішера і критерію Вілкоксона для аналізу кореляції між чутливістю до сполуки 1 (визначеної як IC 50