Спосіб одержання масляної емульсії (варіанти), емульсія, препарат для годування риб

Даний винахід забезпечує нові емульсії, що містять олійні включення. Винахід також пропонує спосіб приготування таких емульсій і їх застосування в різних побутови х та промислових композиціях. Емульсії являють собою суміші, які одержують з двох взаємно нерозчинних компонентів. З цих компонентів можна одержати суміші макроскопічно однорідного зовнішнього вигляду шляхом вибору підхожих умов змішування і управління ними. Найбільш поширеним видом емульсій є ті, в яких застосовують водний компонент і ліпофільний компонент і які на практиці часто називають емульсіями типу масло-у-воді і вода-вмаслі. В емульсіях типу масло-у-воді ліпофільну фазу дисперговано у воді, тоді як в емульсіях типу вода-вмаслі водну фаз у дисперговано в ліпофільній фазі. Широко відомі побутові приклади основаних на емульсіях композицій включають майонез, маргарин, морозиво, косметичні композиції і фарби. Емульсійні системи також широко використовуються в таких галузях промисловості, як фармацевтична і агрохімічна промисловість, де часто бажано вводити активні інгредієнти у вигляді емульсії. Звичайно емульсії готують в присутності множини інших речовин для того, щоб досягнути бажаного балансу емульгування, в'язкості, стабільності і зовнішнього вигляду. Наприклад, одержання емульсії часто вимагає принаймні одного, а часто комбінації кількох емульгувальних агентів. Ці агенти забезпечують диспергування однієї фази, що не змішується, в іншій та допомагають стабілізувати емульсії. Емульгатори включають широку різноманітність синтетичних і природних компонентів. Наприклад, моногліцериди та їх хімічні похідні широко використовуються в якості емульгаторів в харчових продуктах, таких як маргарини і випічка. Прикладом природного емульгатора є лецитин, фосфоліпід, присутній в яєчному жовтку, який зазвичай використовують при приготуванні майонезу. Можна також включати до емульсії активні інгредієнти. Це особливо важливо в композиціях, що включають активні агенти, які тяжко розчиняти у водних розчинах, такі як деякі вітаміни та нуклеотиди. Активні інгредієнти також часто готують у вигляді емульсій для того, щоб покращити їх стабільність. Приклад емульсійної системи, що включає фармацевтичні агент, описаний в патенті США 5.602.183, що описує композицію для загоєння ран, що містить протизапальний агент. Вищезгадане наводить приклад лише кількох з багатьох відомих в практиці компонентів, що включені до емульсійних композицій. Вичерпний огляд емульгувальних агентів і їх застосувань можна знайти в книзі Becher, P Encyclopedia of Emulsion Technology, DekkerEd, 1983. В насінні олійних культур, до яких належать економічно важливі культури, такі як соєві боби, рапс, соняшник і пальми, нерозчинний у воді олійний компонент міститься в дискретних субклітинних структура х, які по-різному називаються в літературі як масляні тільця, олеосоми, ліпідні тільця або сферосоми (Huang 1992, Ann. Rev Plant Mol Biol. 43- 177-200). Окрім суміші масел (тригліцеридів), які хімічно визначаються як складні ефіри гліцерину і жирних кислот, масляні тільця включають фосфоліпіди і цілий ряд зв'язаних протеїнів, які загалом називаються протеїнами масляних тілець. З стр уктурної точки зору масляні тільця розглядаються як тригліцеридна матриця, оточена моношаром фосфоліпідів, в який включені протеїни масляних тілець (Huang 1992 Ann Rev Plant Mol Biol 43 177-200) Рослинні олії, присутні в фракції масляних тілець цих видів рослин, є сумішшю різних тригліцеридів, точний склад яких залежить від виду рослини, з якої одержане масло. Шляхом комбінації класичних методів схрещування і генної інженерії стало можливим управляти олійним складом насіння і поширити доступний набір складів рослинної олії. Огляд сучасних зусиль в цій галузі можна знайти в книзі Designer Oil Crops/Breeding, Processing and Biotechnology, D.J.Murphy Ed., 1994, VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany. Олії з насіння рослин використовуються з різними промисловими цілями, особливо у виробництві продуктів харчування, детергентів і косметики. Для того, щоб одержати рослинні олії, що використовуються з цією метою, насіння розмелюють або віджимають і потім рафінують, використовуючи такі способи, як органічну екстракцію, знесмолювання, нейтралізацію, освітлення і фільтрування. Описана також водна екстракція олійного насіння (наприклад, Embong and Jelen, 1977, Can. Inst. Food Sci. Technol. J. 10: 239-243). Оскільки метою цих способів згідно з попередньою практикою є одержання чистого масла, масляні тільця в ході цих виробничих процесів втрачають свою цілісність. Таким чином, раніше відомі емульсії, що їх одержують з рослинних олій, в загальному випадку не містять цілих масляних тілець. Хоча існує багато областей, де продукти на основі мінеральних масел панують на ринку, в інших областях застосування масла, одержані з рослинних джерел і копалин становлять їм пряму конкуренцію. Лаурилові масла, наприклад, одержують з мінерального масла, а також з кокосової олії і зовсім недавно з насіння рапсу, одержаного генною інженерією (Knauf, V. С, 1994, Fat Sci. Techn. 96: 408). Однак існує нагальна і все зростаюча потреба в біорозкладуваних джерелах сировини. Емульсії на основі масляних тілець рослин відповідно до цього винаходу мають ту перевагу порівняно з композиціями на основі мінеральних масел, що їх одержують з відновлюваного і дружнього до довкілля джерела. Патенти США 5.683.710 і 5.613.583 описують емульсії, які включають ліпідні пухирці з олійних рослин. Описані в цих патента х емульсії готують з відносно сирих екстрактів насіння і містять численні компоненти насіння, включаючи глікозиловані і неглікозиловані протеїни. Недоліком емульсій, яких стосуються ці патенти, є те, що вони включають компоненти, що забруднюють насіння, які надають емульсіям численні небажані властивості, які можуть включати алергенність і небажані запах, смак, колір і органолептичні характеристики. Через наявність таких забруднень препарати ліпідних пухирців, описані в цих патентах, мають обмежене застосування. Цей винахід стосується нових рецептур емульсій, що містять масляні тільця. Емульсійні рецептури, які є предметом винаходу, можуть бути одержані в нетоксичних і придатних для харчових продуктів формах. Крім того, емульсійні рецептури успішно готуються з препаратів масляних тілець, які кремоподібні за текстурою і тому можуть легко застосовуватись для численних побутови х і промислових цілей. Виявлено, що фракції масляних тілець живих клітин корисні для приготування численних нових основаних на емульсіях харчових, косметичних, фармацевтичних і промислових продуктів. В загальному вигляді, даний винахід пропонує емульсійну рецептуру, що включає промиті масляні тільця, одержані з клітини. Винахід також пропонує способи одержання емульсійних рецептур і застосування емульсійних рецептур в різних побутови х і промислових композиціях. Відповідно, даний винахід пропонує спосіб приготування емульсійних рецептур, який включає: 1) одержання масляних тілець з клітини; 2) промивання масляних тілець; і 3) перетворення промитих масляних тілець на емульсію. В більш прийнятному варіанті здійснення, препарат промитих масляних тілець одержують з насіння рослин, що включають рапс, соєві боби, кукурудзу і соняшник. Відповідно, винахід пропонує спосіб приготування емульсійних рецептур з насіння рослин, який передбачає (a) розмел насіння рослин; (b) вилучення твердих речовин з розмолотого насіння; (c) відділення фази масляних тілець від водної фази; (d) промивання фази масляних тілець для одержання препарату промитих масляних тілець; (e) перетворення препарату промитих масляних тілець на емульсію. У більш прийнятному втіленні винаходу рідку фазу додають до насіння перед або слідом за розмелом насіння. В ще одному більш прийнятному варіанті винаходу одержання емульсії (e) включає додання рідкої фази до препарату промитих масляних тілець. Емульсії відповідно до винаходу можуть використовуватися для різноманітних цілей, включаючи приготування їжі і харчових продуктів, фармацевтичних продуктів, засобів особистої гігієни і промислових продуктів. Емульсійна рецептура відповідно до винаходу особливо підходить для приготування харчових продуктів, оскільки вона нетоксична, кремоподібна за текстурою і біорозкладувана. Додаткові задачі, переваги і характеристики даного винаходу будуть зрозумілі після розгляду супровідних ілюстрацій і подальшого докладного опису винаходу. На фіг.1 зображено забарвлений діамантовим блакитним гель препарату промитих масляних тілець з насіння білої гірчиці, рапсу (Brassica napus), соєвих бобів, земляного горіха, гарбуза, льону, соняшника, сафлору і к укурудзи. Фігури 2А-2С зображують забарвлені діамантовим блакитним гелі, що показують профілі протеїнів з фракцій різного насіння, одержаного з Brassica napus (канола) (А), соняшника (В), і кукурудзи (С). Гелі показують такі фракції: (1) загальний протеїн зерна (ЗПЗ), (2) декантована рідка фаза (ДР), (3) непромиті масляні тільця (ЛФ1), (4) три промивання водою (ЛФ4), (5) чотири промивання водою і одне промивання 100мМ Nа2СО3 (Промитий). Як зазначено вище, даний винахід стосується емульсійних композицій, які включають масляні тільця (включення), одержані з клітин. Один з об'єктів винаходу пропонує емульсійну композицію, що містить промиті масляні тільця. Інший об'єкт винаходу пропонує спосіб одержання емульсійної рецептури, який передбачає: 1) одержання масляних тілець з клітини; 2) промивання масляних тілець; і 3) перетворення промитих масляних тілець на емульсію. Клітина може бути будь-якою клітиною, що містить масляні тільця (або подібні до масляних тілець структури), включаючи клітини рослин, тварин, грибів і бактерій. В більш прийнятному варіанті масляні тільця одержують з клітин рослин. Масляні тільця можна одержувати з клітин рослин шляхом руйнування мембран і стінок клітин, використовуючи будь-який спосіб, що вивільнює компоненти клітин без істотного порушення структурної цілісності масляних тілець. Більш прийнятно, масляні тільця одержують з насіння рослин. Відповідно даний винахід пропонує спосіб одержання емульсійної рецептури, що передбачає: (1) одержання масляних тілець з насіння рослин у спосіб, який включає: (a) розмел насіння рослин; (b) вилучення твердих речовин з розмеленого насіння; (c) відділення фази масляних тілець від водної фази; (2) промивання фази масляних тілець з одержанням препарату промитих масляних тілець, що містить цілі масляні тільця приблизно однакових розміру, форми і щільності; та (3) перетворення препарату промитих масляних тілець на емульсію. В більш прийнятному варіанті винаходу рідку фазу додають до насіння до або після розмелу. В ще одному більш прийнятному варіанті утворення емульсії (e) включає додання рідкої фази до препарату промитих масляних тілець. Термін "розмел", як він вживається тут, означає розмел жорнами, дробінням, роздавлюванням або розрізанням насіння і ці терміни можуть використовуватись взаємозамінно по всій заявці. Під час цього процесу клітини насіння розкриваються. Термін "тверді речовини", як він вживається тут, означає будь-який матеріал, нерозчинний у водній фазі або в фазі масляних тілець, такий як оболонки насіння. Термін "промивання масляних тілець", як він вживається тут, означає будь-який процес, який вилучає клітинні домішки з фази масляних тілець, зокрема будь-яку домішку, що надає небажані властивості емульсійній композиції, такі як алергенні властивості, небажаний колір, запах, смак чи органолептичні характеристики, або будь-яка інша небажана властивість. Приклади способів промивання включають методи, основані на гравітації, такі як центрифугування, і методи, що ґрунтуються на виключенні за розмірами, такі, як мембранна ультрафільтрація і мікрофільтрація в перехресному потоці. Способи та умови промивання вибирають згідно з бажаною чистотою препарату масляних тілець. Термін "препарат промитих масляних тілець", як він вживається тут, означає препарат масляних тілець, з якого вилучено значну кількість клітинного матеріалу, включаючи забруднення, які надають небажаних властивостей емульсійній композиції, таких як алергенні властивості небажаний колір, запах, смак чи органолептичні характеристики, або будь-якої іншої небажаної властивості. Більш прийнятний препарат промитих масляних тілець містить менше 10% інших протеїнів насіння. "Перетворення масляних тілець на емульсію" означатиме, що препарат промитих масляних тілець перемішують або гомогенізують, якщо необхідно, доки не утвориться емульсія. В більш прийнятному варіанті додають додатковий інгредієнт, такий як рідка фаза і препарат промитих масляних тілець та рідку фазу перемішують, аж доки не одержать гомогенну суміш. Препарати промитих масляних тілець особливо підходять для утворення емульсій завдяки їх сприятливим властивостям, які названо нижче. Властивості масляних тілець Емульсійні рецептури відповідно до винаходу включають цілі промиті масляні тільця приблизно однакових розміру, форми і щільності. При вивченні під мікроскопом видно, що масляні тільця є структурами більш-менш сферичної форми (див.: Murphy, D. J. and Cummins I, 1989, Phytochemistry, 28: 2063-2069: Jacks, T. J. et al., 1990, JAOCS, 67: 353-361). Типові розміри масляних тілець коливаються між 0,4мкм і 1,5мкм (Murphy, D. J. and Cummins I., 1989, Phytochemistry, 28: 2063-2069). При аналізі з використанням Malvern Size Analyzer було виявлено, що масляні тільця в препараті промитих масляних тілець, виділеному з рапсу, були симетрично і одноманітно розподілені навколо розміру 1мкм. Використовуючи Malvern Size Analyzer, можна чітко відрізнити препарат промитих масляних тілець від наявних в продажі емульсій масло-у-воді, включаючи соєве молоко, майонез (Kraft Real Mayonnaise) і двох рецептур кокосового молока (Tosca, Aroy-D). Точні розмір і щільність масляних тілець залежать, принаймні частково, від конкретного наявного співвідношення протеїн/фосфоліпід/тригліцерид. Приготування промитих масляних тілець відповідно до винаходу не призводить до істотної зміни форми масляних тілець порівняно з тільцями, що були наявні в цілому насінні, якщо розглядати їх під електронним мікроскопом. Після розкриття клітини, що містить масляні тільця, фракція масляних тілець може бути швидко і просто відділена від водних розчинів, оскільки у водних розчинах фракція масляних тілець спливає після прикладення відцентрової сили. У розчинах, де щільність фракції масляних тілець вища від щільності розчинника, такого як 95%-ний етанол, масляні тільця осядуть за тих самих умов. Фракція масляних тілець може бути також відділена від водної фракції способами розподілу, основаними на виключенні за розміром, такими як мембранне фільтрування, перевагою чого може бути можливість одержання більш однорідних розмірів масляних тілець. Масляні тільця, присутні в препаратах промитих масляних тілець відповідно до винаходу, є стійкими до впливу сильних кислот і основ включаючи тривале витримування в кислих умовах при рН, принаймні, настільки низькому як рН 2, і при лужних умовах при рН, принаймні настільки високому, як рН 10. При витримуванні при рН 12 спостерігається невелика втрата масла, що вказує на втрату цілісності структури масляних тілець. Крім того, екстракція різними органічними розчинниками, включаючи метанол, етанол, гексан, ізопропіловий спирт і етилацетат, не порушує або лише злегка порушує цілісність структури масляних тілець. Було також виявлено, що масляні тільця, присутні в препаратах промитих масляних тілець, витримують змішування з аніонним детергентом, додецилсульфатом натрію (SDS), з катіонним детергентом, гексадецилтриметилбромідом і з Твін-80, неіонним детергентом. Виявлено, що кип'ятіння препарату промитих масляних тілець в присутності SDS приводить, принаймні, частково, до дезинтеграції структури масляних тілець. Масляні тільця, присутні в препараті промитих масляних тілець, залишаються стабільними при витримуванні протягом 2 годин при принаймні 100°С. Повільне заморожування і плавлення препаратів промитих масляних тілець призводить до зміни їх фізичного зовнішнього виду, що характеризується утворенням грудок на протилежність гомогенній емульсії. Грудкування масляних тілець після заморожуванняплавлення може також значною мірою відвертатись або а) швидким заморожуванням в рідкому азоті замість повільного заморожування при -20°С, або b) доданням гліцерину в 5%-ному (об/об) надлишку до препарату масляних тілець перед заморожуванням. Стійкість до порівняно жорстких хімічних і фізичних умов є унікальною характеристикою масляних тілець, що містяться в препараті промитих масляних тілець відповідно до винаходу. Даний винахід пропонує емульсійні рецептури, які включають масляні тільця, з яких вилучено значну кількість зернових домішок. Такі домішки включають протеїни, леткі та інші сполуки, які можуть внести небажаний колір, запах, смак, органолептичні характеристики та інші, небажані властивості. Повідомлялося, що численні зернові протеїни викликають алергічні реакції. Наприклад, Ogawa et al. (1993, Biosci. Biotechnol. Biochem., 57: 1030-1033) повідомили про алергенність глікопротеїну сої Р34 (який інакше називається Gly m Bd 30K). Повідомлялося також про алергічні реакції на протеїни насіння рапсу, пшениці і ячменю (Armentia et al., 1993, Clin. Exp. Allergy, 23: 410-415, Monslave et al., 1993, Clin. Exp. Allergy, 27: 833-841). Тому вилучення забруднюючих препарат протеїнів є сприятливим. Умови промивання можуть вибиратись так, щоб одержати практично чистий препарат промитих масляних тілець. У цьому випадку в препараті наявні практично лише протеїни масляних тілець. Для багатьох застосувань вважається також, що чим чистіший одержаний препарат масляних тілець, тим він кращий, оскільки це дозволяє краще управляти процесом приготування кінцевої емульсії. Для того, щоб препарат промитих масляних тілець був включений в різний набір емульсій, бажано, щоб леткі речовини були зведені до мінімуму, і щоб колір був більш прийнятно світлим або білим. Промивання препарату промитих масляних тілець дає світліший препарат. Крім того, промиванням вилучаються сполуки, що прискорюють зростання мікроорганізмів, оскільки було встановлено, що препарат промитих масляних тілець має більш тривалий термін зберігання, ніж непромитий препарат. Інші сполуки, що вилучаються промиванням, включають неживильні глюкозинілати і/або продукти їх розпаду та волокнистий матеріал. Виявлено, що при термальній обробці при 60°С або 80°С більші кількості води залишаються поглиненими препаратом промитих масляних тілець порівняно з непромитим препаратом. Після охолоджування до кімнатної температури і центрифугування спостерігали, що препарат промитих масляних тілець залишається стабільним, тоді як в непромитому препараті відбувається поділ фаз. Завдяки покращеній стабільності промитих масляних тілець, вони більш прийнятні там, де процес приготування включає нагрівання. При нагріванні до 40°С препарат промитих масляних тілець здатний поглинути більшу кількість введеної ззовні води, не приводячи до поділу фаз. Таким чином, при утворенні водних емульсій більш прийнятними є промиті масляні тільця. Порівнювалася також здатність препарату промитих масляних тілець і непромитого препарату абсорбувати введене ззовні масло. До препарату промитих масляних тілець можна додати більшу кількість масла, перш, ніж утвориться нестабільна емульсія. Це є перевагою в тих рецептура х, де в процес вводяться ззовні масла або воски, як у випадку виробництва змащувальних речовин або косметики. При порівнянні в'язкості препарату промитих масляних тілець і непромитого препарату було виявлено, що препарат промитих масляних тілець є більш в'язким. Більш в'язкий препарат масляних тілець є бажаним, оскільки це усуває необхідність додання загусників у процес утворення. Таким чином, запропонований препарат промитих масляних тілець переважає непромитий препарат в багатьох відношеннях. Препарат промитих масляних тілець відповідно до винаходу є препаратом, що краще визначається, з більш тривалим терміном зберігання і більш прийнятним кольором, запахом і в'язкістю. Препарат промитих масляних тілець також має переважаючі властивості водної і масляної абсорбції. Нарешті, завдяки вилученню істотної кількості протеїнів зерна, малоймовірною є поява алергічних реакцій. Ці властивості дозволяють використовувати препарат промитих масляних тілець для багатьох побутови х і промислових емульсій. Наведені вище спостереження були зроблені при використанні промитого і непромитого препаратів масляних тілець, одержаних з рапсу і приготованих, як докладно описано в прикладі 2. Є підстави вважати, що стійкість за порівняно жорстких хімічних та фізичних умов буде характерною для масляних тілець, присутніх в препараті промитих масляних тілець відповідно до винаходу, незалежно від джерела масляних тілець. Однак, є імовірним, що одна чи кілька з описаних тут вище власти востей для масляних тілець рапсу буде якимось чином варіюватися залежно від клітин з яких одержаний препарат промитих масляних тілець. Проте, слід ясно розуміти, що предметом винаходу є препарат масляних тілець, який може бути одержаний з будь-яких клітин, що містять масляні тільця. У варіанті винаходу, масляні тільця одержують з насіння рослин. Присутність цілих масляних тілець в емульсії і описані характеристики цих масляних тілець чітко відрізняють емульсійну композицію, що є предметом винаходу, від інших матеріалів, які можуть бути одержані з насіння рослин. Джерела та одержання масляних тілець Препарат промитих масляних тілець відповідно до винаходу може бути одержаний з будь-яких клітин, що містять масляні тільця, або подібні до масляних тілець органел. Ці джерела включають клітини тварин, клітини рослин, клітини грибів, клітини дріжджів (Leber, R. et al., 1994, Yeast 10: 1421-1428), бактеріальні клітини (Pieper-Furst et al., 1994, J. Bacterol. 176: 4328-4337) і клітини водоростей (Rossler P. G., 1988, J. Physiol. (London) 24: 394-400). В більш прийнятному варіанті винаходу масляні тільця одержують з клітин рослин, включаючи клітини пилку, спор, насіння або вегетативних органів рослин (Huang, 1992, Ann. Rev, Plant Physiol. 43: 177-200). Ще більш прийнятно, препарат промитих масляних тілець відповідно до винаходу одержують з насіння рослин, і найбільш прийнятно з групи рослин, що включає рапс (Brassica spp.), сою (Glycine max.), соняшник (Helianthus annuus), олійну пальму (Elaesis quineeis), бавовну (Gossypium spp), земляний горіх (Arachis hypogaea) , кокосовий горіх (Cocus nucifera), касторку (Ricinus communis), сафлор (Carthamus tinctonus), гірчицю (Brassica spp і Sinapsis alba), коріандр (Coriandrum sativum), гарбуз (Cucurbita maxima), льон (Linum usitatissimum), бразильський горіх (Bertholletia excela), жожобу (Simmondsia chinensis) і кукурудз у (Zea mays). Рослини вирощують і у них збирають насіння, використовуючи методи ведення сільського господарства, добре відомі фахівцям. Після збирання врожаю зерна і, якщо бажано, вилучення такого матеріалу як камінці або оболонки насіння, наприклад, просіюванням або промиванням, і необов'язково, сушки насіння, насіння послідовно піддають механічному віджиманню, розмелу або здрібненню. В більш прийнятному здійсненні перед розмелом насіння додають рідку фазу. Це відомо як мокрий розмел. Більш прийнятною рідиною є вода, хоча можуть також використовуватися органічні розчинники, такі як етанол. Про використання вологого розмелу в процесах добування масла повідомлялося для багатьох видів рослин включаючи гірчицю (Aguilar et al., 1990, Journal of Texture Studies 22: 59-84), сою (патент США 3.971.856, Carter et al., 1974, J. Am. Oil Chem. Soc. 51: 137-141), земляний горіх (патент США 4.025.658; патент США 4.362.759), насіння бавовни (Lawhon et al, 1977, J. Am. Oil Chem. Soc. 63: 533-534) та кокосовий горіх (Kumar et al., 1995, INFORM 6 (11): 1217-1240). Може також бути вигідним просочувати насіння рідкою фазою протягом періоду від п'ятнадцяти хвилин до приблизно двох діб перед розмелом. Просочування може розм'якшити стінки клітин і полегшити процес розмелу. Просочування протягом більш тривалого періоду часу може імітувати процес пророщування і привести до деяких сприятливих змін вмісту компонентів зерна. В іншому варіанті рідку фазу додають після розмелу насіння. Це відомо як сухий розмел. Більш прийнятно рідкою фазою, що додається, є вода. Насіння більш прийнятно розмелюють на колоїдному млині, такому як MZ130 (Fryma Inc). Окрім колоїдних млинів у винаході, що описується тут, може застосовуватись інше обладнання для розмелу та подрібнення, придатне для переробки промислових кількостей зерна, включаючи плющильні вальці, дискові млини, колоїдні млини, стержневі млини, жорнові млини, млини ІКА та промислові гомогенізатори. Вибір млину може залежати від вимог до продуктивності по зерну, а також від джерела зерна, що використовується. Критично важливим є те, щоб масляні тільця зерна, залишалися непошкодженими під час розмелу. Тому будь-які робочі умови, які звичайно застосовуються при переробці олійного насіння, які ведуть до пошкодження масляних тілець, непридатні для використання в процесі відповідно до винаходу. Температура розмелу більш прийнятно становить 10°С-90°С і ще більш прийнятно 26°С-30°С, тоді як рН більш прийнятно підтримують між 2,0 і 10. Тверді домішки, такі як оболонки зерна, волокнистий матеріал, нерозчинені карбогідрати, протеїни та інші нерозчинні домішки вилучають з фракції розмеленого зерна. Відділення твердих домішок може виконуватись при використанні відстійних центрифуг, таких як двофазна відстійна центрифуга HASCO 200 або NX310B (Alpha Laval). Залежно від вимог до продуктивності по зерну продуктивність відстійної центрифуги може змінюватись при використанні інших моделей відстійних центрифуг, таких як трифазні декантатори. Робочі умови змінюються залежно від конкретної центрифуги, що застосовується, і мають підбиратися так, щоб нерозчинні забруднюючі матеріали осідали та залишалися в осаді після відстою. За цих умов може спостерігатися частковий поділ фази масляних тілець і водної фази. Після вилучення нерозчинних забруднень фаза масляних тілець відділяється від водної фази. У більш прийнятному варіанті винаходу використовують тр убчату барабанну центрифугу. В інши х варіантах можуть застосовуватись гідроциклони, пакетно-дискові центрифуги або поділ фаз під дією природної гравітації, або інший спосіб розподілу, оснований на гравітації. Можна також відділити фракцію масляних тілець від водної фази, застосовуючи методи виключення за розмірами, такі як мембранна ультрафільтрація і мікрофільтрація в перехресному потоці. В більш прийнятному варіанті трубчатою барабанною центрифугою є центрифуга Sharpies модель AS-16 (Alpha Laval) або AS-4 6 Sharpies (Alpha Laval). Критичним параметром є розмір запірного кільця, що використовується при роботі центрифуги. Запірні кільця є знімними кільцями з центральним круговим отвором, що змінюється у випадку AS-16 від 28 до 36мм та регулює відділення водної фази від фази масляних тілець, управляючи, таким чином, чистотою одержуваної фракції масляних тілець. В більш прийнятному варіанті при використанні AS-16 застосовують запірне кільце розміром 29 або 30мм. Точний розмір запірного кільця, що застосовується, залежить від типу олійного насіння, що використовуються, а також від бажаної кінцевої консистенції препарату масляних тілець. На ефективність поділу, крім того, впливає швидкість потоку. При використанні AS-16, швидкість потоку становить звичайно 750-1000мл/хвил (розмір запірного кільця 29) або 400-600мл/хвил (розмір запірного кільця 30), а температуру підтримують більш прийнятно між 26°С і 30°С. Залежно від моделі центрифуги, що використовується, швидкості потоку і розмір запірного кільця повинні регулюватися так, щоб досягнути оптимального відділення фази масляних тілець від водної фази. Це регулювання буде легко зрозумілим фахівцю. Відділення твердих речовин і відділення водної фази від фракції масляних тілець можна також вести одночасно, використовуючи спосіб поділу, оснований на гравітації, такий як 3-фазна трубчата барабанна центрифуга або декантатор, або гідроциклон, або спосіб розподілу, оснований на виключенні за розміром. Композиції, одержувані на цій стадії процесу, звичайно є відносно сирими і містять численні протеїни зерна, які включають глікозиловані і неглікозиловані протеїни та інші забруднення, такі як крохмаль або глюкозинілати або продукти їх розпаду. Даний винахід передбачає вилучення істотної кількості зернових забруднень. Для того, щоб здійснити вилучення забруднюючого матеріалу зерна, препарат масляних тілець, одержаний після відділення від водної фази, промивають, принаймні, один раз шляхом ресуспендування фракції масляних тілець і центрифугування ресуспендованоі фракції. Цей процес забезпечує продукт, що називається тут препаратом промитих масляних тілець. Число промивань в загальному випадку залежатиме від бажаної чистоти фракції масляних тілець. Залежно від умов промивання, що застосовуються, може бути одержана практично чиста фракція масляних тілець. В такому препараті єдиними присутніми протеїнами будуть протеїни масляних тілець. Для того, щоб промити фракцію масляних тілець, можуть використовуватись трубчаті барабанні центрифуги або інші центрифуги , такі як гідроциклони або пакетно-дискові центрифуги. Промивання масляних тілець можна здійснювати, використовуючи воду, буферні системи, наприклад, хлористий натрій в концентраціях від 0,01М і до принаймні 2М, 0,1М карбонат натрію і буфер з малим вмістом солі і високим рН, такий як 50мМ Трис-НСІ, рН 7,5, органічні розчинники, детергенти або будь-яку іншу рідку фазу. В більш прийнятному варіанті всі промивання проводять при високому рН (11-12). Рідка фаза, яка використовується для промивання, а також умови промивання, такі як рН і температура, можуть змінюватись залежно від типу насіння, що використовуються. Може бути більш прийнятним промивання при ряду різних рН між рН 2 і рН 11-12, оскільки це може дати змогу вести східчасте вилучення забруднення, особливо протеїнів. Умови промивання вибирають таким чином, щоб стадія промивання приводила до вилучення істотної кількості забруднення без порушення структурної цілісності масляних тілець. У тих втіленнях, де проводять більш однієї стадії промивання, умови промивання можуть бути різними для різних стадій. SDS гель-електрофорез або інші аналітичні методи можуть успішно використовуватися для контролю вилучення протеїнів зерна та інших забруднень після промивання масляних тілець. Не потрібно вилучати всю водну фаз у між стадіями промивання, і кінцевий препарат промитих масляних тілець може бути ресуспендовано у воді, в буферній системі, наприклад, 50мМ Трис-НСІ, рН 7,5, або в будь-якій іншій рідкій фазі, і, якщо вимагається, бажана величина рН може регулюватися до будь-якого значення рН між рН 2 і рН 10. Процес одержання препарату промитих масляних тілець може здійснюватися періодично або в безперервному процесі. Зокрема, при використанні зубчастої барабанної центрифуги система насосів, працюючих між стадіями (а), (b) і (с) , та стадіями (с) і (d) , створює безперервну те хнологічну систему. В більш прийнятному варіанті насосами є 1-дюймові подвійні діафрагмові насоси з пневмоприводом М2 Wilden. В інших варіантах можуть застосовуватися гідравлічні або перистальтичні насоси. Для того, щоб забезпечити гомогенну консистенцію живлення відстійної центрифуги і тр убчатої барабанної центрифуги між стадіями розподілу можуть бути встановлені гомогенізатори, такі як гомогенізатор ІКА. Гомогенізатори на потоці можуть бути також встановлені між різними центрифугами або обладнанням для поділу, основаним на виключенні за розмірами, які застосовуються для промивання препарату масляних тілець. Розміри запірних кілець, склади буферів, температура і рН на кожній стадії промивання можуть відрізнятися від тих, що використовувались на першій стадії розподілу. У тих втіленнях винаходу, коли масляні тільця виділяють з більш м'я ких тканин, наприклад з тканини мезокарпію оливок методи, що застосовуються для розкриття клітини, можуть у чомусь відрізнятися від методів, які використовуються для розкриття більш твердого насіння. Наприклад, способи, основані на пресуванні, можуть бути ще більш прийнятними, ніж способи розмелу. Методика виділення масляних тілець в малому масштабі була описана для виділення масляних тілець з тканин мезокарпію оливи (Оlea europeana) та авокадо (Persea americana) (Ross et al., Plant Science, 1993, 93: 203-210) і з одержаних з мікроспор зародків рапсу (Brassica napus) (Holbrook et al., Plant Physiol., 1991, 97: 1051-1058). У втіленнях винаходу, коли масляні тільця виділяють з нерослинних клітин, препарат промитих масляних тілець виділяють, слідуючи процедурам, що подібні до описаної вище. Методологію виділення масляних тілець з дріжджів описано в літературі (Ting et al., 1997, Journal Biol. Chem., 272: 3699-3706). Фізичні та хімічні властивості масляної фракції можуть варіюватися принаймні двома шляхами. По-перше, різні види рослин містять масляні тільця з різним складом олії. Наприклад, кокосовий горіх багатий на лаурилові масла (С12), тоді як масла еруконової кислоти (С22) У великій кількості наявні в деяких Brassica spp. По-друге, деяка кількість масел може бути модифікована в конкретних видах рослин шляхом застосування селекції і методів генної інженерії, відомих досвідченим фахівцям. Мета обох цих методів полягає в зміні відносної активності ферментів, що контролюють шляхи метаболізму, які беруть участь в синтезі масла. Шляхом застосування цих методів можна одержати насіння з ускладненим набором різних масел. Наприклад, зусилля з селекції призвели до одержання рапсу з низьким вмістом еруконової кислоти (Canola) (Bestor, Т. Н., 1994, Dev. Genet. 15: 458), і шляхом генної інженерії було одержано лінію рослин з маслами із змінами в положенні та кількості подвійних зв'язків, варіацією довжини ланцюга жирної кислоти та з введенням бажаних функціональних груп (Topfer et al., 1995, Science, 268: 681-685). Використовуючі подібні підходи, фахівець у цій галузі зможе додатково розширити вже доступні джерела масляних тілець. Таким чином, шляхом підбору олійного насіння або їх сумішей від різних видів або ліній рослин в якості джерела масляних тілець, можна одержати широку різноманітність емульсій з різними текстурою і в'язкістю. Утворення емульсії Препарат промитих масляних тілець може бути перетворений на емульсію при застосуванні методів, відомих з практики. Більш прийнятно, до препарату промитих масляних тілець додають принаймні один додатковий інгредієнт. Додатковий інгредієнт може додаватися у вигляді розчину, суспензії, гелю або твердої речовини, а кількість додаткового інгредієнта залежить від рецептури. Додатковий інгредієнт після утворення емульсії може стати зв'язаним з масляними тільцями, що залишаються суспендованими у розчині, або утворює суспензію, в якій дисперговані масляні тільця. Інгредієнт може також проникати у фосфоліпідний моношар, який оточує олійне тільце або тригліцеридну матрицю. Інгредієнти, що можуть проникати у масляне тільце, включають масла, воски і барвник нільський червоний. В більш прийнятному втіленні додатковим інгредієнтом є рідка фаза. В ще одному більш прийнятному варіанті рідкою фазою є вода. Вода може додаватись або безпосередньо, або у вигляді вологи, зв'язаної з іншим інгредієнтом. Кінцева кількість води не є критичним, аж доки після змішування інгредієнтів утворюється стійка емульсія. Як правило композиції містять, принаймні, 1% води і до 99% води. Зазвичай потрібне перемішування для одержання придатної емульсії, і може бути потрібним застосування тепла або тиск. В іншому більш прийнятному варіанті додатковим інгредієнтом є масло або віск. Масла або воски можуть розподілятися в тригліцеридній матриці масляних тілець, і таким чином розчинні в ліпідах інгредієнти, такі як ліпідорозчинні вітаміни, можуть бути введені в матрицю масляних тілець. Якщо додатковий інгредієнт включає масла або воски, масляні тільця можуть залишитися суспендованими в ліпофільній фазі або може утворюватись подвійна емульсія. Кінцева композиція може бути в твердій або рідкій формі або мати будь-яку іншу бажану в'язкість. Емульсію можна загустити, використовуючи гелеутворюючі агенти, такі як целюлоза і її похідні карбопол і його похідні, кароб, карегінани і їх похідні, ксантанову смолу, склеранову смолу, алканоламіди з довгим ланцюгом, і бентон та його похідні, звичайно присутні в концентраціях нижче 2% мас. Емульсія може додатково включати поверхнево-активні речовини для того, щоб зволожувати, спінити, пенетрувати, емульгувати, солюбілізувати або диспергувати вибраний матеріал. Якщо потрібно, можуть додаватись, наприклад, аніонні поверхнево-активні речовини, такі як натріймоногліцерид сульфонат кокоса, катіонні поверхнево-активні речовини, такі як лаурилтриметиламонійхлорид, цетилпіридинійхлорид і триметиламонійбромід, неіонні поверхнево-активні речовини, включаючи плюронієві і продукти конденсації поліетиленоксиду з алкілфенолами і цвітер-іонні поверхнево-активні речовини, такі як похідні сполук аліфатичного четвертинного амонію, фосмомію та сульфонію. Якщо потрібно, в емульсійну композицію можуть бути включені також хелатувальні агенти, здатні зв'язувати іони металів, такі як винна кислота, ЕДТК, лимонна кислота, цитрати лужних металів, пірофосфатні солі або аніонні полімерні полікарбоксилати. Звичайно емульсійні композиції повинні бути оброблені так, щоб запобігти забрудненню бактеріями грибками, мікоплазмою, вірусами і подібним або небажаним хімічним реакціям, таким як окислювальні реакції. В більш прийнятному варіанті це досягається доданням консервантів, наприклад, метабісульфіту натрію, або інших хімічних добавок, або опроміненням, наприклад, іонізуючою радіацією, такою як радіація - кобальту-60 або цезію-137, або ультрафіолетовим опроміненням. Крім того, до препарату промитих масляних тілець можуть додаватись активні речовини. Наприклад, косметичні композиції можуть готуватись у вигляді стабільних суспензій, використовуючи дану емульсійну рецептур у, і вітаміни та зволожувальні агенти можуть включатись у креми для шкіри. Особливо сприятливим способом, яким активний інгредієнт може бути включений в емульсії відповідно до винаходу, є створення лігандів гена олеозину, як описано у W0 96/21029. Коротко, WO 96/21029 описує спосіб одержання протеїнів і пептидів у вигляді лігандів олеозину. Ці протеїни створюють шляхом літування гена, який кодує олеозин, з геном, що кодує пептид або протеїн, що цікавить. Експресія лігованого в, наприклад, олійну рослину приводить до синтезу протеїну-ліганду, який потім кон'югується з масляним тільцем. Виділення фракції масляних тілець приводить до добування ліганду. В принципі, будь-який бажаний протеїн або пептид може бути одержаний при використанні цієї технології Наприклад, показано, що антифризні пептиди полярних риб (Davies P. L. et al., 1990, FASEB J. 4: 2460-2468) продукуються як протеїниліганди з олеозином. Препарат промитих масляних тілець може потім застосовуватись для одержання морозива, молочних коктейлів та інших заморожених харчових матеріалів з покращеними властивостями замерзання завдяки інгібуванню або запобіганню утворенню кристалів льоду. В іншому прикладі терапевтичний протеїн може бути одержаний у вигляді ліганду з олеозином. Масляні тільця можуть потім використовува тись для приготування бажаної суспензії, яка може призначатися для перорального введення або для місцевого накладення на шкіру. Цей варіант винаходу додатково пояснений у Прикладі 11 опису, де готують корм для риб, що включає масляні тільця, які містять ліганд олеозину з гормоном росту коропа. Може бути також приготована емульсія з плівкоутворюючими властивостями. Така емульсія, коли вона нанесена на поверхню і висихає, утворює покриття. Прикладом емульсії для нанесення плівки масляних тілець, що покриває, є корм для риб, на який наносять масляні тільця, щоб покращити його харчову цінність. Плівкоутворююча емульсія особливо корисна в тих варіантах винаходу, коли бажаним є регульоване вивільнення активного інгредієнта, таких як доставка ліків, або летких речовин, таких як запашності. Час вивільнення активного інгредієнта з плівки емульсії, яка утворюється при висиханні, залежить, серед інших факторів, від товщини плівки. Коли нанесена більш товста плівка, більш тривалий час висихання приводить до більш повільного вивільнення активного агента. У варіанті розглядуваних композицій вивільнення агента настає тільки коли плівка суха. Інші фактори, такі як склад емульсії та тип і концентрація активного інгредієнта, також визначають характеристики вивільнення. Наприклад, додаткові розчинники, такі як етанол, можуть включатись до рецептури і впливати на час вивільнення. Вивільнення активного інгредієнта також бажане для харчових продуктів, в яких смаковий агент, що міститься в емульсії, вивільнюється при споживанні. Вивільнення смакової домішки, залежно від точної рецептури емульсії, може викликати раптове сильне відчуття або більш тонку суміш смаку і ароматів. Емульсійна композиція може також використовуватися в розприскувачах і аерозолях. З цією метою більш прийнятно використовува ти масляні тільця малого розміру, наприклад 11мкм і менше в діаметрі такі, як виявлені в В. napus. У такі розприскуванні емульсії можуть бути включені леткі речовини, такі як алкоголь та запашності. Емульсії такого типу можуть також розпорошуватися на поверхню висушених харчових продуктів, таких як картопляні чіпси і сухі супи. Емульсії можуть включати смакову домішку і покращува ти зберігання або сприяти підтриманню необхідного рівня вологості харчового продукту. Застосування емульсійної рецептури Розглядуваний винахід спрямований на одержання емульсій, які використовуються в побутови х і промислових композиціях. Вказано, що емульсії можуть застосовуватись в композиціях, які широко варіюються за фізичними властивостями і застосуванням. Так, конкретні варіанти включають такі застосування, як їжа та харчові продукти, фармацевтичні продукти, продукти особистої гігієни та промислові продукти. Застосування в їжі і харчових продуктах включають немолочні замінники, немолочний сир, немолочний йогурт, маргарин, майонез, вінегрет (соус для заправки салату), глазур, морозиво, салатні заправки, штучну гірчицю, солодощі, жувальну гумку, пудинг, випічні вироби, приправи, соки, дитяче харчування, смакові носії, текстур увальні агенти, харч для свійських тварин і домашньої худоби. Застосування в якості продуктів особистої гігієни включають мила, косметику, креми для шкіри, креми для лиця, зубну пасту, губн у помаду, віддушки, макіяж, підкладки, рум'яна, туш для вій, тіні для очей, сонцезахисні лосьйони, кондиціонер для волосся та фарби для волосся. Фармацевтичні продукти, які можуть готува тись з використанням препарату промитих масляних тілець відповідно до винаходу включають терапевтичні агенти, діагностичні агенти і агенти, що доставляють. В якості терапевтичного або діагностичного агента емульсія повинна додатково містити активний інгредієнт. Активний інгредієнт може бути будь-якою речовиною, яку бажано доставити хазяїну. В одному варіанті активний інгредієнт може бути протеїном або пептидом, що має терапевтичну або діагностичну цінність. Такі пептиди включають антигени (для вакцинних форм), антитіла, цитокіни, фактори згортання крові і гормони росту. Промислові застосування емульсій відповідно до винаходу включають фарбу, покриття, змащувальні речовини, плівки, гелі, рідини для буріння, ґрунтовки паперу, латекс, будівельні матеріали або матеріали для дорожнього будівництва, чорнило, барвники воски, поліровки та хімікати для сільського господарства. В більш прийнятних варіантах розглядуваний винахід спрямований на композиції, які можуть бути їстівними для тварин і людей. Отже, для того, щоб композиції могли бути їстівними, вони повинні бути харчової якості. Конкретний продукт і конкретна форма, в якій застосовують емульсію, однак, не має великого значення і можуть бути будь-якими, за бажанням. Цілком ясно, що емульсія, приготована з препарату промитих масляних тілець, може використовуватися в будь-якому побутовому або промисловому продукті. Стабільність даної емульсійної композиції при низьких рН може використовуватись при приготуванні кислих емульсій. Наприклад, емульсійна композиція може використовува тись при приготуванні майонезоподібного харчового продукту, який, окрім препарату промитих масляних тілець, включає, якщо вимагається, рослинну олію, гірчицю, оцет і яєчний жовток. Текучі емульсії, такі як заправки для салатів, можуть готуватись шля хом збільшення відносної кількості оцту і/або додання води. Приклад застосування, коли може використовуватися нагрівання без явних шкідливих ефектів, є приготування смакових соусів, таких як соус бешамель, або солодких соусів, таких як шоколадні соуси. В цих застосуваннях препарат промитих масляних тілець використовують як замінник соусу для жарки. Для приготування соусу бешамель до 1 частини нагрітого препарату промитих масляних тілець додають 1 частину (за вагою) борошна і перемішують до утворення тонкої суспензії. Поступово додають помірно нагріте молоко, аж доки не одержать соус з бажаною в'язкістю. Емульсійна композиція може також використовуватись в якості замінника масла. В таких застосуваннях до препарату промитих масляних тілець додають невеликі кількості води, наприклад, менше 10%, до одержання бажаної в'язкості. Якщо потрібно, можуть додаватись смакові домішки натурального масла і загусники. Замінник масла можна використовувати з солодкою кукурудзою, хлібом, в сумішах для кексів або в хлібопеченні. Сіль, що надає смак і діє як консервант, може додаватись звичайно до кількості близько 2,5% (вага/об'єм). Якщо потрібно, для одержання більш сильного забарвлення можуть додаватися барвники, наприклад, екстракт насіння анато або каротин. Перевагою такого застосування є те, що масло на основі масляних тілець не містить гідрованих жирних кислот, які використовуються в рецептурах маргаринів і подібних продуктів для досягнення необхідної консистенції, але також пов'язані з серцево-судинними захворюваннями. Можна готува ти шортенінги з різним ступенем жорсткості - від піни до текучого шортенінгу. В цьому застосуванні повітря вбивається в емульсійну композицію, і емульсійну композицію можна розглядати диспергованою в безперервній фазі, повітрі. Шортенінги можуть застосовуватися для сумішей, в яких бажаними є пінявість та збитість. Ці суміші включають глазурі, штучні вершки, морозиво і збите тісто для тортів. Імітацію фруктового соку можна одержувати з штучних або натуральних смакових добавок і живильних речовин. Така імітація соків не має належного зовнішнього вигляду і через прозорість здається слабкою або розбавленою. При доданні невеликих кількостей, наприклад, від 0,1 до 1,0об.% препарату промитих масляних тілець або його емульсії, можна викликати помутніння, щоб надати соку гарного зовнішнього вигляду. Таким чином, препарат масляних тілець можна використовувати як агент, що закаламучує. В іншому застосуванні, що стосується соків, препарат промитих масляних тілець або його емульсія може додаватися до соків з твердими речовинами, що осідають, таким як томатний сік. Додаючи невеликі кількості препарату промитих масляних тілець, наприклад від 0,1 до 1,0об.%, можна знизити швидкість осадження твердих речовин в соку і сприяти збереженню гарного зовнішнього виду продукту. Передбачене також місцеве застосування препарату промитих масляних тілець відповідно до винаходу. В цьому варіанті емульсію готують як дерматологічно прийнятну емульсію, яка може використовуватися, наприклад, для зволоження шкіри лиця і/або тіла, включаючи нігті та губи, і може протидіяти старінню шкіри, прищам, пігментації, випаденню волос, або прискорювати видалення волосся або сприяти загоєнню ран і/або реструктуризації тканини шкіри. Препарат промитих масляних тілець складає більш прийнятно 1-99ваг.% кінцевої композиції. Косметичні композиції відповідно до винаходу можуть включати додатково вуглеводневі сполуки, такі як рослинні, тваринні, мінеральні або синтетичні масла чи воски або їх суміші. Вони включають парафін, вазелін, пергідросквален, масло арари, мигдалеву олію, масло кальфілума, масло авокадо, конопляну олію, касторове масло, масло жожоба, оливкову олію або масло зернових зародків. Можуть включатись складні ефіри, такі як ефіри ланолевої кислоти, олеїнової кислоти, лаурилової кислоти, стеаринової кислоти, міристинової кислоти. Можна також включати спирти, наприклад, олеоїловий спирт, лінолеїловий спирт або ліноленіловий спирт, ізостеариловий спирт або октилдодеканол, спирти або поліспирти. Іншими вуглеводневими сполуками, що можуть бути включені, є октаноати, деканоати, рицинолеати, каприлові/капронові тригліцериди або тригліцериди жирних кислот від С 10 до С22. Додання цих речовин може приводити до утворення подвійних емульсій. Гідровані масла, що є твердими при 25°С, такі як гідроване касторове масло пальмова олія або кокосова олія або гідрований топлений жир, моно-, ди-, три-, або сахарогліцериди, ланоліни і жирні кислоти, що є твердими при 25°С, також можуть включатись у косметичні композиції відповідно до винаходу. До числа восків, що можуть бути включені, входять тваринні воски, такі як бджолиний віск, рослинні воски, такі як віск карнауби, віск канделії, віск араукарії, японський віск або воски коркового дерева або цукрового очерету, мінеральні воски, наприклад, парафінистий віск, лігнітний віск, мікрокристалічні воски або озокерити та синтетичні воски. Можуть бути включені пігменти, які можуть бути білими або забарвленими, неорганічними або органічними і/або перлинними. Ці пігменти включають двоокис титану, окис цинку, двоокис цирконію, чорний, жовтий, червоний і бурий окис заліза, двоокис церію, окис хрому, берлінську лазур, сажу, барієві, стронцієві, кальцієві і алюмінієві лаки і слюду, покриту окисом титану або окисом вісмуту. До косметичних та/або дерматологічних композицій можуть включатись активні інгредієнти, які звичайно застосовуються в кремах для шкіри, такі як вітаміни, наприклад, вітамін А або С, і альфа-гідроксикислоти, такі як лимонна, гліколева, молочна і винна. Наприклад, в патенті США 5.602.83 вказується, що вітамін С або аскорбінова кислота прискорює зростання з'єднувальної тканини, особливо в шкірі, посилює опірність шкіри до зовнішніх впливів, таких як дим і УФ-радіація. Зволожуючими агентами, що можуть бути включені в креми для шкіри і косметику, є, наприклад, мінеральні масла та сечовина. Можуть також додаватися антиоксиданти, такі як токофероли і поліфеноли, що трапляються в природі, або бутилований гідрокситолуол і гідроксіанізол. Для приготування лосьйонів для сонячного загару можна застосовувати екрануючі сонячне світло речовини, такі як октилметоксицинамат (Parsol МСХ), 3-бензофенон (Uvinul M40) і бутилметоксидибензоїлметан (Parsol 1789). Фармацевтично активні інгредієнти, що можуть використовуватися при приготуванні косметичних композицій, включають, наприклад, антибіотики, фунгіциди і протизапальні агенти. Кінцевий косметичний продукт може бути у вигляді вільно текучого або ущільненого порошку (основи, рум'ян, тіней для очей), у вигляді відносно жирного продукту, такого як губна помада, туш для вій, або у вигляді масла або лосьйону для тіла або лиця. Препарат промитих масляних тілець може також використовуватися в якості орально прийнятного носія в зубній пасті, яка може додатково включати силікати, поверхнево-активні речовини, хелатувальні агенти, фторид, загусники, підсолоджувачі смакові домішки як, наприклад, масло перцевої м'яти, ферменти і біоциди. Прикладом промислового продукту, що може бути приготований, є фарба, в якій основна смола, така як смоли, основані на сполуках типу силіконів, акрилових сполук, поліефірів, фторидів, епоксидів, поліуретану, може бути частково або повністю замінена препаратом промитих масляних тілець відповідно до винаходу. У композицію, що фарбує, якщо вимагається, можуть бути введені додаткові домішки, такі як пігменти, барвники, скляні лусочки і алюмінієві лусочки, диспергатори пігменту, загусники, активатори, каталізатори затвердіння, затверджувачі такі як діізоціанати, каталізатори затвердіння, інгібітори гелеутворення, речовини, які поглинають ультрафіолет, агенти гасіння вільних радикалів, тощо. Препарат промитих масляних тілець може також утворювати змащувальні речовини. Наприклад, препарат промитих масляних тілець може використовуватися для часткової або повної заміни змащувальних масел, такі як тваринні масла, рослинні олії, нафтові змащувальні масла, синтетичні змащувальні масла, або мастила, такі як літієве мастило, сечовинне мастило і кальцієве мастило. Інші композиції, що застосовуються в змащувальній рецептурі, включають антиоксиданти, диспергатори детергента, агенти маслянистості, модифікатори тертя, присадки, що покращують індекс в'язкості, депресанти точки помутніння, твердий змащувальний матеріал, інгібітори іржавіння і антиспінювачі. Використовуючи препарат промитих масляних тілець відповідно до винаходу, можна також одержати воски. Вони включають воски типу восків для промивання, таких як воски, що забезпечують стабільно гідрофобну фінішну плівку на автомобілях, та інші захисні покриття. Інші композиції, які використовуються при одержанні воску включають поверхнево-активні речовини, мінеральні масла, такі як змішані парафінисті і ароматичні/нафтенові масла, віддушки, біоциди, забарвлюючі агенти, які за бажанням можуть додаватися в сумісних кількостях. Якщо готують промислові продукти, такі як фарби або змащувальні матеріали, чистота фази масляних тілець може бути менш критичною і може не бути необхідним піддавати масляні тільця промиванню. Промислову емульсію можна одержати шляхом (І) одержання масляних тілець з клітини, і (II) введенням масляних тілець в промислову емульсію. Масляні тільця можуть бути одержані шляхом (а) розмелу насіння рослин; (b) вилученням твердих речовин з розмеленого насіння; і (с) відділенням фази масляних тілець від водної фази. Винахід також включає промислову емульсію, що містить масляні тільця одержані відповідно до цього винаходу. Наведені далі необмежувальні приклади є пояснюючими для. даного винаходу. Приклади Приклад 1 Одержання препарату промитих масляних тілець з рапсу, сої, соняшника, білої гірчиці, земляного горіха, гарбуза, льону, сафлор у і кукур удзи - лабораторної масштаб Сухе достигле насіння, одержане від Brassica napus або Westar, сої, соняшника, земляного горіха, гарбуза, льону, сафлору і кукурудзи гомогенізують в п'яти об'ємах холодного буферу для розмелу (50мМ Трис-НСІ, рН 7,5, 0,4М са хароза і 0,5 NaCl), використовуючи політрон, працюючий з високою швидкістю. Гомогенізат центрифугують при 10G протягом 30 хвилин для того, щоб вилучити частинки речовини і відділити масляні тільця від водної фази, що містить основну кількість розчинного протеїну насіння. Фракцію масляних тілець знімають з поверхні супернатанту металевим шпателем і додають в один об'єм буферу для розмелу. Виявлено, що для того, щоб досягнути е фективного промивання на наступних стадіях, необхідно ретельно редиспергувати масляні тільця в буфері для розмелу. Цього досягають шляхом м'якої гомогенізації масляних тілець в буфері для розмелу при використанні політрону, що працює на низькій швидкості. Використовуючи шприц, редисперговані масляні тільця обережно наносять шаром на поверхню п'яти об'ємів холодного буферу 50мМ Трис-НСІ рН 7,5 і центрифугують, як описано вище. Після центрифугування масляні тільця вилучають і операцію промивання повторюють два рази. Кінцевий препарат промитих масляних тілець ресуспендують в одному об'ємі холодного Трис-НСІ рН 7,5, і редиспергованого політроном. Зразки масляних тілець розчиняють в буфері SDS (додецилсульфат натрію) для проб і аналізували методом SDS гель-електрофорезу. Результати показані на фіг.1. Одержаний таким чином матеріал готовий для використання в різних рецептурах. Приклад 2 Одержання препарату промитих масляних тілець з олійного рапсу, соняшника і кукурудзи у великому масштабі Цей приклад описує добування фракції масляних тілець з насіння каноли, соняшника і кукурудзи у великому масштабі. Одержаний препарат містить цілі масляні тільця і порівнянний за чистотою з препаратом, одержаним при використанні процедур лабораторного масштабу. Розмел насіння. Всього 10-15кг сухого насіння каноли (Brassica napus або Westar), соняшника (Helianthus annuus) або кукурудзи (Zea mays) завантажують через бункер в колоїдний млин (Colloid mill, MZ-130, (Fryma) продуктивністю 500кг/год), який обладнаний розмелювальним пристроєм типу ротор/статор з хрестоподібними зубцями і верхнім завантажувальним буфером. Перед розмелом через шланг, що ви ходить назовні, вводять приблизно 50-75л води. Млин працює при зазорі 1R, встановленому так, щоб досягнути розміру частинок менше 100 мікрон, при 18°С і 30°С. Після розмелу насіння додають водопровідну воду до одержання суспензії насіння з кінцевим об'ємом 90 літрів. Вилучення твердих частинок. Одержану суспензію подають насосом у відстійну центрифугу (дво фазна відстійна центрифуга Hasco 200 з максимальною робочою швидкістю 6000об/хвил) після розгону центрифуги до робочої швидкості 3500об/хвил. Передачу продукту з млину в центрифугу при витраті 360л/год здійснюють, використовуючи 1-дюймовий подвійний діафрагмовий насос з пневмоприводом М2 Wilden. За 15-20 хвилин декантують приблизно 15кг насіння. Відділення масляних тілець. Відділення фракції масляних тілець проводять, використовуючи центрифугу з трубчатим барабаном Sharpies, модель AS-16 (Alpha Laval), обладнану барабаном для розподілу трьох фаз і рядом знімних запірних кілець, продуктивністю 50л/год, запірне кільце 30мм. Робоча швидкість була 15000об/хвил (13200 G) Перистальтичний насос Watson-Marlow (Model 704) використовують для закачування декантованої рідкої фази (ДР) в трубчату центрифугу після розгону центрифуги до робочої швидкості. Це приводить до розподілу декантованої рідкої фази на важку фаз у (ВФ), що містить воду і розчинні протеїни насіння, та легку фазу (ЛФ), що включає масляні тільця. Фракцію масляних тілець, яку одержують після одного проходу через центрифугу, називають препаратом непромитих масляних тілець. Потім фракцію масляних тілець пропускають через центрифугу ще три рази. Між кожним проходом через центрифугу концентровані масляні тільця змішують з приблизно п'ятьма об'ємами свіжої води. Всю операцію проводять при кімнатній температурі. Всі препарати, одержані після другого розподілу, розглядають як препарат промитих масляних тілець. Після трьох промивань виводиться більша частина розчинного протеїну, що забруднює, і профілі протеїну масляних тілець, одержані шляхом SDS гель-електрофорезу, зовні подібні до профілів, одержаних при операції в лабораторному масштабі. Приклад 3 Вилучення протеїнів насіння шляхом промивання фази масляних тілець Цей приклад описує добування фракції промитих масляних тілець з насіння каноли, кукурудзи і соняшника. При використанні різних умов промивання було показано, що промивання приводять до вилучення істотної кількості протеїнів зерна з препарату масляних тілець. Ці протеїни включають протеїни, які можуть бути алергенами. Всього 10-15кг сухого насіння каноли (Brassica napus або Westar), соняшника (Helianthus annuus) або кукурудзи (Zea mays) завантажують через бункер в колоїдний млин (Colloid mill, MZ-130, (Fryma)), обладнаний розмелювальним пристроєм типу ротор/статор з хрестоподібними зубцями і верхнім завантажувальним буфером. Перед розмелом через шланг, що виходить назовні, вводять приблизно 50-75л води. Млин працює при зазорі 1R, встановленому так, щоб досягнути розміру частинок менше 100 мікрон, при 18°С і 30°С. Після розмелу насіння до суспензії насіння додають водопровідну воду до кінцевого об'єму 60-90 літрів і відбирають пробу суспензії насіння для SDS гель-електрофорезу. Потім суспензію подають насосом у відстійну центрифугу (двофазна відстійна центрифуга Hasco 200 з максимальною робочою швидкістю 6000об/хвил) після розгону центрифуги до робочої швидкості 3500об/хвил. Передачу продукту з млину в центрифугу при витраті 360л/год здійснюють, використовуючи 1 дюймовий подвійний діафрагмовий насос з пневмоприводом М2 Wilden. За 15-20 хвилин декантують приблизно 15кг насіння. Зразок декантованої рідкої фази відбирають для SDS гель-електрофорезу. Відділення фракції масляних тілець проводять використовуючи центрифугу з трубчатим барабаном Sharpies, модель AS-16 (Alpha Laval), обладнану барабаном для розподілу трьох фаз і рядом знімних запірних кілець, продуктивність 150л/год, запірне кільце 29мм. Робоча швидкість 15000об/хвил (13200 G) . Перистальтичний насос Watson-Marlow (Model 704) використовують для закачування декантованої рідкої фази в трубчату центрифугу після розгону центрифуги до робочої швидкості. Одержують фазу непромитих масляних тілець і змішують її з приблизно 5 об'ємами води. Цю операцію повторюють повністю ще три рази. Фазу масляних тілець, одержувану після першого обороту, називають препаратом непромитих масляних тілець. Всі інші препарати є препаратами промитих масляних тілець. Зразки для аналізу на SDS гель-електрофорезі відбирають після першого і четвертого поділу. По закінченні четвертого промивання 0,9 мл пробу препарату масляних тілець гомогенізують в 0,1мл 1М Nа2СО3 і залишають при перемішуванні при кімнатній температурі на 30 хвилин. Потім фракцію масляних тілець добувають подальшим центрифугуванням, промивають і готують для SDS гель-електрофорезу. Усі зразки розчиняють в буфері SDS для проб і проби аналізують методом SDS гель-електрофорезу. Результати показані на фіг.2. Приклад 4 Вплив промивання фази масляних тілець на характеристики утримування води Препарат промитих масляних тілець і фазу непромитих масляних тілець готують з рапсу, як в прикладі 2. Для того, щоб визначити різницю між непромитою фазою масляних тілець і препаратом промитих масляних тілець у здатності до утримування води, ретельно перемішують 30мл препаратів масляних тілець, використовуючи струшувальний пристрій. Потім препарати інкубують протягом 2 годин в водяній бані при 40, 60 або 80°С, і проби центрифугують при 1500 G протягом 20 хвилин (нерозбавлені зразки). Інший набір зразків готують шля хом змішування 15г препарату промитих або непромитих масляних тілець з 15мл води. Зразки перемішують на струшувальному пристрої, потім інкубують протягом 2 годин у водяній бані при 40, 60 або 80°С, і визначають кількість присутньої в пробах води подальшим центрифугуванням при 1500 G протягом 20 хвилин (розбавлені зразки). Втрату маси, що приписується випаровуванню, вимірюють при 80°С і 60°С. При 80 °С нерозбавлені препарати, що містять масляні тільця, втрачають значну кількість води шляхом випаровування. Препарат непромитих масляних тілець втратив 26% своєї маси, тоді як промитий препарат втратив 16%. При центрифугуванні непромитий препарат виділив приблизно 2,5мл водної фази, тоді як препарат промитих масляних тілець залишився в тій самій фазі. Обидва розбавлені препарати поглинали воду. Об'єм масляних тілець в обох випадках збільшився до 18,5±1мл. При 60°С нерозбавлені препарати втрачали приблизно 10% води шляхом випаровування. При подальшому центрифугуванні непромитий препарат виділив приблизно 0,5мл водної фази, тоді як препарат промитих масляних тілець залишився в тій самій фазі. Обидва розбавлені препарати поглинали воду. При 60°С об'єм масляних тілець в обох випадках збільшився до 18 і 1мл. При 40°С обидва нерозбавлені зразки виділили приблизно 2мл водної фази. При порівнянні розбавлених зразків непромитий препарат поглинав близько 3 мл води, як і у випадках 60 або 80°С. Промитий зразок, проте, поглинав 8мл води при 40°С. Ці експерименти показують, що в препараті промитих масляних тілець, нагрітому до 60°С або 80°С, вода залишається більш міцно зв'язаною з препаратом масляних тілець, ніж в непромитому препараті. Будучи охолодженим, препарат промитих масляних тілець здається більш стабільним, ніж непромита емульсія. Будучи нагрітим до 4 0 °С, препарат промитих масляних тілець був здатний абсорбувати більший об'єм екзогенно добавленої води, не призводячи до поділу фаз. Приклад 5 Вплив промивання масляних тілець на характеристику поглинання масла Препарат промитих масляних тілець і фазу непромитих масляних тілець готують з рапсу, як в прикладі 2. Для того, щоб визначити різницю між непромитою фазою масляних тілець і препаратом промитих масляних тілець в здатності до поглинання масла, 2г препаратів масляних тілець диспергують в 50мл пробірці в 12мл рафінованого освітленого дезодорованого масла каноли. Вміст пробірки перемішують 30 секунд кожні 5 хвилин протягом 30 хвилин. Потім пробірки центрифугують при 4400об/хвил протягом 25 хвилин. Вільне масло декантують і визначають процентний вміст масла, що абсорбувалося, за різницею маси. Випробовували три препарати промитих масляних тілець і три препарати непромитих масляних тілець. Виявлено, що здатність до поглинання масла у непромитих масляних тілець істотно розрізняється для трьох завантажень і варіюється від 18,7% до 28%. Промиті масляні тільця мали відтворюване поглинання масла 32+1%. Таким чином, було виявлено, що препарат промитих масляних тілець кращий, оскільки (1) забезпечує більшу кількість абсорбованого масла, і (2) абсорбція відбувається у більш відтворюваний спосіб. Приклад 6 Приготування майонезоподібної емульсії, що містить препарат промитих масляних тілець Препарат промитих масляних тілець готують з рапсу, як в прикладі 2, і готують майонезоподібну емульсію шляхом змішування таких компонентів у побутовому електричному змішувачі. Соняшникова олія 78г Яєчний жовток 8г Оцет 9г Сіль 0,5г Промиті масляні тільця 5г Одержано продукт майонезоподібної текстури. Майонезоподібний продукт залишається стабільним принаймні 1 добу при 4°С. Приклад 7 Приготування вільної від холестерину майонезоподібної емульсії Препарат промитих масляних тілець готують з рапсу, як в прикладі 2, і готують майонезоподібну емульсію шляхом змішування таких компонентів. Соняшникова олія 200г Промиті масляні тільця 100г Оцет 30г Одержано продукт майонезоподібної текстури. Оскільки майонез приготований без яєчного жовтка, інгредієнта, який звичайно застосовується в наявних у продажу майонезах, продукт, приготований з використанням промитих масляних тілець, не містить холестерину. Виявлене, що майонез є таким же стабільним, як звичайний майонез, якщо визначати стабільність, використовуючи центрифугування. Приклад 8 Приготування заправки для салату (вінегрету), що містить препарат промитих масляних тілець Препарат промитих масляних тілець готують з рапсу, як в прикладі 2, і одержують вінегретоподібну емульсію шляхом змішування вручн у таких компонентів. Соняшникова олія 17,5г Гірчиця 0,4г Оцет 0,5г Промиті масляні тільця 7,7г Одержано продукт вінегретоподібної текстури. Вінегретоподібний продукт залишається стабільним принаймні 1 добу при 4 С. Приклад 9 Приготування гірчицеподібного продукту, що розмазується Препарат промитих масляних тілець готують з рапсу, як описано в прикладі 2. Для одержання гірчицеподібного продукту змішують такі компоненти. Гірчиця 70г Промиті масляні тільця 30г Одержана емульсійна композиція є гірчицеподібним продуктом, що легко розмазується та має кремоподібні, менш гострі смакові характеристики, ніж гірчиця. Приклад 10 Приготування бешамелеподібного соусу Препарат промитих масляних тілець готують з рапсу, як описано в прикладі 2. Препарат промитих масляних тілець нагрівають в помірному теплі, додають рівну частину борошна і перемішують з препаратом промитих масляних тілець. Під час перемішування вручну до цієї суміші поступово додають молоко. Мука 50г Промиті масляні тільця 50г Молоко 100мл-1л Одержали бешамелеподібний соус. Консистенція соусу може бути будь-якою, як бажано, залежно від кількості доданого молока. Якщо вимагається, можуть також додаватись додаткові смакові домішки. Відсутність гідрованих жирних кислот в цьому продукті надає йому перевагу перед соусом, приготованим з звичайного побутового маргарину. Приклад 11 Приготування фармацевтичної емульсії для нанесення на корм для риб Препарат промитих масляних тілець з трансгенної рослини В. napus, який експресує гормон росту коропа (кГР), лігований з олеозином, де протеїн-ліганд кон'югований з олійними тільцями, одержують так. Фрагмент ДНК, що містить кодуючу кГР область без сигнальної 22-амінокислотноі послідовності, ампліфікували з плазміди, що містить інсерт ростового гормону коропа звичайного (Cyprinus carpio) кДНК (Koren et al., 1989, Gene 67: 309-315), використовуючи ланцюг реакцій полімерази в поєднанні з двома кГР-специфічними праймерами. Ампліфіковании фрагмент кГР був лігований в правильній рамці зчитування з 3' та олеозином Arabidopsis thaliana, використовуючи pOThromb (van Rooijen, 1993, PhD Thesis, University of Calgari) в якості батьківської плазміди, і застосовуючи стратегії клонування, відомі фахівцям. Сайт розщеплення тромбіну в pOThromb був приєднаний 3' до олеозин кодуючої послідовності лігований ген олеозин-кГР вводили в бінарний вектор pCGN1559 (McBnde and Summerfelt, 1990, Plant Мої. Biol. 14: 269-276) і одержану конструкцію використовували для трансформації А. tumefaciens. Для трансформації сіянців В. napus або Westar застосовували штам агробактерій. Одержували насіння трансгенної рослини і з трансгенного насіння виділяли масляні тільця, як описано в прикладі 1. Масляні тільця потім відбирали шприцом і розпорошували на корм для риб, використовуючи приблизно 2,5мкг протеїну масляних тілець на 1мг корму для риб. Потім корм для риб, покритий масляними тільцями, залишали сохнути до ранку. Потім 50мг корму для риб змішували з 10мл води та інкубували протягом 0, 30, 45 або 60 хвилин. Потім корм збирали, ресуспендували в 0,2мл 50мМ Трис-Сl (рН 7,5) і готували для аналізу методом SDS гель-електрофорезу після кип'ятіння в 2,5% SDS. Присутність масляних тілець на кормі для риб підтверджувалась при використанні вестерн-блотинга і моноклональних антитіл до кГР. Зважаючи на інтенсивність сигналу одиничної смуги, що спостерігалася в кожній доріжці вестерн-блоту, масляні тільця, які включають кГР, залишалися міцно зв'язаними з кормом для риб після інкубації масляних тілець у воді. Було показано, що корм для риб який інкубували протягом ЗО, 45 або 60 хвилин, містить приблизно такі самі кількості кГР, як контрольний корм, який не інкубували у воді. Цей приклад показує, що можна одержати багато трансгенних рослин, які надають емульсії бажані специфічні властивості. Цей приклад, крім того, показує, що з препарату промитих масляних тілець можна одержати емульсію, яка може використовуватись в якості покриття або плівки. Нарешті, цей приклад показує, що препарат промитих масляних тілець може використовуватись для одержання фармацевтичної композиції. Хоча для пояснення цього винаходу були описані певні більш прийнятні варіанти здійснення, фахівцю будуть очевидні і інші застосування, які входять до обсягу винаходу.