Спосіб ідентифікації сировини (коріння, листя, квіток) кульбаби лікарської

Спосіб ідентифікації сировини кульбаби лікарської (квітки, коріння, листя), що включає визначення наявності та вмісту біологічно активних речовин, який відрізняється тим, що визначають наявність та вміст цикорієвої кислоти за методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) в присутності інших оксикоричних кислот. (19) (21) a200611806 (22) 09.11.2006 (24) 10.10.2007 (46) 10.10.2007, Бюл. № 16, 2007 р. (72) Цуркан Олександр Олександрович, Ковальчук Тетяна Василівна, Гудзенко Андрій Вікторович (73) ІНСТИТУТ ФАРМАКОЛОГІЇ ТА ТОКСИКОЛОГІЇ АМН УКРАЇНИ 3 26668 хвилин. Після цього екстракт охолоджували до кімнатної температури та фільтрували через фільтр "червона стрічка". До 5мл отриманого розчину додавали таку кількість води, щоб концентрація метанолу становила 20%, та пропускали отриманий зразок через попередньо активований 5мл метанолу та промитий 10мл води патрон для твердо-фазної екстракції "Superclean lc-18 SPE Tubes 1ml" виробництва фірми Supeico (США). Патрон промивали 30мл 20% розчином метанолу. Отриманий розчин випаровували у вакуумі досуха та сухий залишок розчиняли в 5мл 70% метанолу, фільтрували через фільтр діаметром пор 0,45мкм. По 5мкл досліджуваного розчину та розчину стандарту цикорієвої кислоти поперемінне хроматографували в наступних умовах: колонка С18 ХТеrrа, розміром 250мм´4,6мм, розмір часток 5мкм; рухома фаза: ацетонітрил - вода - оцтова кислота (20:77:3); температура колонки 30°С, довжина хвилі детектування 330нм; швидкість потоку рухомої фази 1мл/хв. Вміст цикорієвої кислоти в досліджуваній сировині (в %) обчислюється за наступною формулою: Aпр * Сст100 * 100 * 100 X= Аст * mпр * (100 - W) де Апр - площина піку цикорієвої кислоти на хроматограмі досліджуваного розчину; Аст - площина піку цикорієвої кислоти на хроматограмі стандартного розчину цикорієвої кислоти; 4 Сст - концентрація цикорієвої кислоти в стандартному розчині цикорієвої кислоти, г/мл; mпр - наважка досліджуваної сировини, г; W - втрата в масі при висушуванні в досліджуваній сировині. Приготування стандартного розчину цикорієвої кислоти: 0,010г достовірного стандарту цикорієвої кислоти вміщують в мірну колбу місткістю 25мл, розчиняють в 30мл суміші метанол-вода (70:30), доводять тією ж сумішшю до мітки та перемішують. 1мл отриманого розчину вміщують в мірну колбу місткістю 50мл, доводять до позначки сумішшю метанол-вода (70:30) та перемішують. На хроматограмі досліджуваного розчину повинен бути присутній пік, час виходу якого відповідає часу виходу піку цикорієвої кислоти на хроматограмі стандартного розчину цикорієвої кислоти (рис.1-4). На підставі експериментальних даних для сировини кульбаби лікарської нами рекомендований наступний граничний вміст цикорієвої кислоти: для листя не менше 1%, для квіток не менше 0,5%, та для коріння не менше 0,2% в перерахунку на висушену сировину. Корисна модель обумовлює можливість ідентифікації та визначення кількісного вмісту сировини кульбаби лікарської (коріння, листя, квітки) за наявністю та вмістом цикорієвої кислоти як фізіологічне активним компонентом, що присутній в усіх частинах кульбаби лікарської. Корисна модель сприяє підвищенню якості перспективної сировини. Порівняння процесу ідентифікації кульбаби у прототипі та винаході наведено в таблиці. Таблиця. Характеристика процесу стандартизації кульбаби лікарської №п/п Процес Компонент Сировина кульбаби лікарської 1 Найближчій аналог Лютеолін Квітки 2 Винахід Цикорієва кислота Квітки, листя, коріння Посилання: 1) Лікарські рослини: Енциклопедичний довідник / Відп. ред. Гродзінський А. М. - Київ: Голов, ред. УРЕ, -1989.-544с.: іл. 2) Пат. №16657 UA, МПК G01N 30/02 / Цуркан O. O., Ковальчук Т.В., Шкляєв С. А., Гудзенко А. В. / №200602243; Заявл. 01.03.2006; Надрук. Метод визначення 1. Метод ТШХ - якісне специфічне визначення. 2. Можливість напівкількісної стантардизації сировини. 1.Метод ВЕРХ - якісне специфічне визначення. 2. Можливість кількісної стандартизації сировини 15.08.2006. Спосіб ідентифікації квіток кульбаби лікарської. 3) Williams С. A., Goldstone F., Greenham I. Flavonoids, cinnamic acid and coumarins from the different tissue and medicinal preparations of Taraxacum officinale. // Phytochemistry. - 1996. - 42 (1). - P.121127. 5 Комп’ютерна верстка І.Скворцова 26668 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601