Спосіб одержання ліпосом

Спосіб одержання ліпосом шляхом додавання до води і/або біологічно-активних речовин, і/або вітамінів, і/або лікарських препаратів 1-5 % лецитину в промислових умовах в безперервному процесі, нагрівання при перемішуванні до температури 40±2 °С та пропускання через роторно 3 вають при перемішуванні до температури 40±2°С та пропускають через роторно-пульсаційний апарат зі швидкістю течії рідини через щілини апарату 0,009 м/сек., частотою перекриття щілин 3000 Гц і середньою витратою суміші 800 л/год. В результаті реалізації цього способу одержують ліпосоми розміром 150-500 нм. Запропонований спосіб є високотехнологічним, енергоощадним і дозволяє одержувати ліпосоми в безперервному потоці промисловим способом. Недоліком цього способу є те, що він не дозволяє одержувати ліпосоми з діаметром менше 100 нм, які є більш стійкими при зберіганні і в багатьох випадках більш застосовувані. Розмір ліпосом важливий з точки зору їх використання. У випадках, коли ліпосоми використовують для інкапсулювання мікроорганізмів, наприклад вакцин необхідні великі везикули. Однак, більш застосовуваними є дрібні ліпосоми. Це пов'язано з тим, що вони є більш стійкими і не так швидко видаляються ретикуло-ендотеліальною системою. Крім того, великі ліпосоми крім пасивного націлювання не мають властивості для ефективної доставки лікарських речовин. З цією метою запропонований спосіб одержання ліпосом з розміром до 100 нм. Апарати роторно-пульсаційного типу дозволяють отримати високу технологічну ефективність при їх низькій матеріало- і енергоємності. При використанні роторно-пульсаційних апаратів поєднуються процеси диспергування, змішування, емульгування і гомогенізації, а тому значно зменшується тривалість процесу та кількість технологічних циклів. При обробці в роторно-пульсаційному апараті рідке гетерогенне середовище піддається багатофакторному впливу, що полягає у пульсаціях тиску і швидкості потоку, мікрокапсуляціях кавітаційних пухирців з випромінюванням сферичних ударних хвиль, жорсткому кумулятивному впливі за рахунок схлопування кавітаційних пухирців і великих напруг у зазорі між статором і ротором. Локальне значення тиску в зонах входу і виходу змінюється від плюс 45 кПа до мінус 24 кПа. Подібні ефекти практично недосяжні при використанні традиційних методів обробки і гомогенізації гетерогенних середовищ в гомогенізаторах клапанного типу, навіть при суттєво більшому рівні питомих енерговитрат. Задачею корисної моделі є розробка промислового способу одержання ліпосом для фармацевтичної та харчової промисловості з діаметром до 100 нм з високим ступенем включення інкапсульованих речовин. Поставлена задача вирішується в такий спосіб: фосфоліпіди, а саме фосфатидилхолін, фосфатидилетаноламін, фосфатидилсерін і фосфатидилінозитол, лізофосфатидилхолін як у вигляді окремих компонентів, так і у вигляді сумішей в різних співвідношеннях тваринного походження або рослинного походження, виділених з фосфатидних концентратів одержаних при рафінації олій з загальним вмістом фосфоліпідів не менше 97% розчиняють в органічному розчиннику, наприклад хлороформі, у ваговому співвідношенні компонентів 1 : 1,5, висушують за допомогою вакуумного прямо 63694 4 точного випарника роторного типу при температурі 37°С. Одержаний продукт розчиняють у воді і додають необхідну кількість біологічно-активних речовин, і/або вітамінів, і/або лікарських препаратів для утворення 1-5% водного розчину фосфоліпідів з рН від 4 до 8 і перемішують. Одержану грубодисперсну систему в промислових умовах в безперервному процесі нагрівають при перемішуванні до температури 40±2°С та пропускають через роторно-пульсаційний апарат зі швидкістю течії рідини через щілини апарату 0,009 м/сек, частотою перекриття щілин 3000 Гц і середньою витратою суміші 800 л/год., при чому гомогенізацію проводять при 3 циклах обробки матеріалу. Використання попередньої обробки дозволяє значно знизити розмір утворених ліпосом. Результати досліджень залежності середнього діаметру часток з попередньою обробкою і без попередньої обробки фосфоліпідного матеріалу при різній його концентрації представлені на Фіг.1. 1 - без попередньої обробки; 2 - з проведенням попередньої обробки. Циклічність обробки забезпечує підсилений вплив на оброблюваний матеріал за рахунок подовження часу його перебування у зоні активного впливу. В результаті реалізації цього способу одержують ліпосоми розміром до 100 нм, причому принаймні 90% ліпосомного препарату залишаються інкапсульованим в ліпосомах через 6 місяців при температурі 2-8°С. Результати досліджень залежності середнього діаметру часток від різної кількості циклів обробки матеріалу з проведенням і без проведення попередньої обробки представлені на Фіг. 2. 1 - без попередньої обробки; 2 - з проведенням попередньої обробки. Одержаний ліпосомний препарат може бути в рідкому стані, або після висушування в сухому стані для тривалого зберігання. Для характеристики розміру ліпосом, утворених запропонованим способом, використовували метод лазерно-кореляційної спектроскопії з використанням лазерного спектрометра фірми «Malvern». Об'єм захвату води і/або водорозчинних біологічно-активних речовин і/або лікарських препаратів і/або вітамінів і т.д. визначали методом флуоресцентної спектроскопії на японському спектрофлуориметрі фірми «Hitachi». В якості маркера використовували флуоресцируючий комплекс тербійдіпіколінова кислота. В результаті було встановлено, що об'єм захвату речовин, що знаходяться всередині ліпосом, одержаних запропонованим способом, становить 11,25 мл на 1 г комплексу фосфоліпідів при концентрації до 5%. Суть корисної моделі пояснюється конкретними прикладами. Приклад 1. В ємність з мішалкою і підігрівом вносять 85 літрів води, 10 кг біологічно-активних речовин і/або вітамінів, і/або лікарських препаратів і 5 кг суміші фосфоліпідів тваринного або рослинного походження, виділених з фосфатидних концентратів. При швидкості мішалки 50 об/хв. суміш розчиняють і нагрівають до температури 40 ±2°С. При досягненні розчином заданої температури його пропускають через роторно-пульсаційний апарат зі 5 швидкості течії рідини через щілини апарату 0,009 м/сек, частота перекриття щілин 3000 Гц, середня витрата 800 л/год. В результаті одержували 100 кг продукту з біологічно-активними речовинами і/або вітамінами, і/або лікарськими препаратами в ліпосомній формі. При цьому середній діаметр ліпосом знаходиться в інтервалі від 300 нм до 700 нм. Приклад 2. Суміш фосфоліпідів тваринного або рослинного походження, виділених з фосфатидних концентратів розчиняють у хлороформі у ваговому співвідношенні 1 : 1,5, висушують за допомогою вакуумного прямоточного випарника роторного типу при температурі 37°С. Одержаний порошок переносять ємність з мішалкою і підігрівом, розчиняють у 85 літрах води і додають 10 кг біологічноактивних речовин і/або вітамінів, і/або лікарських препаратів. Далі, за способом, що описаний у прикладі 1. В результаті одержували 100 кг продукту з біологічно-активними речовинами і/або вітамінами, і/або лікарськими препаратами в ліпосомній формі, який висушували для тривалого зберігання. При цьому середній діаметр ліпосом становить 140 нм. Приклад 3. Ліпосоми одержували за способом, що описаний у прикладі 2, при чому гомогенізацію проводили при 3 циклах обробки матеріалу. В результаті одержували 100 кг продукту з біологічно-активними речовинами і/або вітамінами, і/або лікарськими препаратами в ліпосомній фор 63694 6 мі, який висушували для тривалого зберігання. При цьому середній діаметр ліпосом становить 70 нм. Такі ліпосоми є стійкими, мають високу інкапсулюючу властивість для ефективної доставки лікарських речовин, що знайде широке застосування у фармацевтичній промисловості. Приклад 4. Ліпосоми одержували за способом, що описаний у прикладі 2, при чому гомогенізацію проводили при 5 циклах обробки матеріалу. В результаті одержували 100 кг продукту з біологічно-активними речовинами і/або вітамінами, і/або лікарськими препаратами в ліпосомній формі, який висушували для тривалого зберігання. При цьому середній діаметр ліпосом становить 45 нм. Такі ліпосоми є стійкими, але їх інкапсулююча властивість знижується. Приклад 5. Ліпосоми одержували за способом, що описаний у прикладі 2, при чому гомогенізацію проводили при 7 циклах обробки матеріалу. В результаті одержували 100 кг продукту з біологічно-активними речовинами і/або вітамінами, і/або лікарськими препаратами в ліпосомній формі, який висушували для тривалого зберігання. При цьому середній діаметр ліпосом становить 25 нм. Такі ліпосоми є стійкими, але їх інкапсулююча властивість не значна, а тому використання такого препарату в якості ліпосомного є недоцільним. 7 Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко 63694 8 Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601