Сольвати n-гідрокси-4-(3-феніл-5-метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду

1. Сольвати N-гідрокси-4-(3-феніл-5метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду формули (І) HO-NH-SO 2 CH3 3 83499 4 і продукт реакції кристалізують із суміші води і CH3 етанолу, яка необов'язково містить аскорбінову кислоту. 10. Застосування сполук формули (І) за будь-яким O із пп. 1-5 для одержання фармацевтичної композиції для лікування остеоартриту і ревматоїдного N артриту і болів при операції і первинній дисменореї. III 11. Фармацевтична композиція, яка містить сполувводять у взаємодію з хлорсульфоновою кислоку формули (І) за будь-яким з пп. 1-5 і один або тою, і продукт реакції 3-феніл-4-(4декілька терапевтично прийнятних фармацевтичхлорсуль фонілфеніл)-5-метилізоксазол (II) них носіїв. Cl-SO 2 12. Фармацевтична композиція за п. 11, яка відріCH3 зняється тим, що одним з носіїв є аскорбінова кислота. 13. Спосіб лікування остеоартриту і ревматоїдного O артриту і болів при операції і первинній дисменореї, який включає введення пацієнту, що цього N потребує, терапевтично ефективної дози сполуки формули (І) за будь-яким з пп. 1-5. II 14. Спосіб лікування остеоартриту і ревматоїдного вводять у взаємодію з гідроксиламіном артриту і болів при операції і первинній дисменоa) у суміші води і розчинника, що змішується з вореї, який включає введення пацієнту, що цього дою, потребує, терапевтично ефективної дози фармаb) у суміші розчинника, що не змішується з водою, цевтичної композиції за будь-яким з пп. 11-12. і води у присутності міжфазного каталізатора, Галузь техніки, до якої належить винахід Цей винахід стосується нових сольватів Nгідрокси-4-(3-феніл-5-метилізоксазол-4іл)бензолсульфонаміду формули (І) де n дорівнює 0 або 1моль, [сольват] (приєднаний розчинник) являє собою воду, (С 1-С4)-спирт, (С1-С4)-алкілефір (С1-С3)карбонової кислоти або діоксан і суміші сольватованих (де n=1) і несольватованих форм (де n=0). Крім того, цей винахід відноситься до способу їх одержання та їх застосування для лікування остеоартриту і ревматоїдного артриту і болів при операції та первинній дисменореї, що базується на протизапальній та знеболювальній фармакологічній дії, виявленій в експериментах на моделях. Рівень техніки Відомо, що профілі побічної дії селективних інгібіторів циклооксигенази-2 є значно сприятливішими за профілі нестероїдних протизапальних лікарських засобів. Це стосується, перш за все, їхньої активності у шлунково-кишковому тракті. У цей час відомі два покоління селективних інгібіторів циклооксигенази-2. Одним з перших інгібіторів циклооксигенази-2 на ринку став целекоксиб. Целекоксиб має високу селективність і суттєво знижує побічну дію на шлунково-кишковий тракт, але не усуває її повністю. Вальдекоксиб, представник другого покоління інгібіторів ферменту СОХ-2, з'явився у 2002 році для лікування остеоартриту, ревматоїдного артриту і болів при первинній дисменореї. З літератури відомо, що побічна дія на шлунково-кишковий тракт також відмічається при введенні вальдекоксибу. Слід взяти до уваги, що селективні інгібітори циклооксигенази-2 також мають побічну дію на серцево-судинну систему. Вказані факти відзначені при дослідженні іншого інгібітору СОХ-2 першого покоління рофекоксибу. [Vigor-study, Bombardier С, Laine L, Reicin A. et al., for the VIGOR Study Group. Comparison of upper gastrointestinal toxicity of rofecoxib and naproxen in patients with rheumatoid arthritis. N. Engl. J. Med., 343(21):1520-1528, Nov. 2000]. Можливі причини докладно обговорювалися у дослідженні D. Mukherjee [Mukherjee D., Nissen S.E., Topol. EJ., Risk of cardiovascular events associated with selective COX-2 inhibitors. JAMA 2001; 286:954-959]. Для того, щоб розв'язати вищевказані проблеми, було досліджено сильніші селективні інгібітори циклооксигенази-2. Суть винаходу Несподівано автори винаходу виявили, що сольвати N-гідрокси-4-(3-феніл-5-метилізоксазол-4іл)бензолсульфонаміду формули (І) (де n=1) і несольватовані форми (де n=0) або їхні суміші мають більш сприятливий профіль дії, ніж вальдекоксиб. В одній зі статей [Josh J. Yuan, Dai-Chang Yang, Ji Υ. Zjang, Roy Bible Jr., Azi z Karim es John W.A. Findlay: Drug Metabolism and Disposition, Vol.30 (No.9), 1013-1021 (2002)] повідомляють, що несольватований N-гідрокси-4-(3-феніл-5метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонамід виво 5 83499 6 диться з організму із сечею як метаболіт вальдеводорозчинного розчинника і води. Час реакції коксибу. Сполуку ідентифіковано масстановить 15-45 хвилин, краще 30 хвилин. Темпеспектроскопією як другорядний метаболіт вальдература реакції 15-25°С. Реакційну суміш додають коксибу, але про одержання, біологічні та хімічні до води, продукт реакції відфільтровують і промивластивості сполуки не повідомляють. вають водою. Сирий продукт реакції кристалізують Сполуки загальної формули (І) слід віднести із суміші води та етанолу, і кінцевим продуктом є до групи селективних інгібіторів циклооксигеназимоногідрат (І, n:1, сольват Н2О) з ви ходом 70%, 2, оскільки вони мають значну селективність відчистота 99,8% (РХВД). носно ферменту циклооксигенази-2, як видно з За способом b) хлорсульфонільне похідне таблиці 1. Сполуки загальної формули (І) у смислі вводять у взаємодію з гідроксиламіном у суміші основної дії (протизапальної та знеболювальної) розчинника, нерозчинного у воді, краще етилацепоказують вигідніші властивості, ніж вальдекоксиб, тату, і води у присутності міжфазного каталізатооскільки вони дають значно кращі результати при ра, краще гідросульфату те трабутиламонію. Реаквипробуваннях in vivo, ніж вальдекоксиб. цію здійснюють при кімнатній температурі, час Сполуки загальної формули (І) відносно побічреакції 5-20 годин. Сирий продукт реакції, одержаної дії мають сприятливіші профілі, ніж вальдекокний після синтезу, є кристалічним, і його перекриссиб: вони підвищують швидкість кровопотоку, що є талізують із суміші води і спирту, краще із суміші сприятливим у практиці клінічного лікування. Болі води і етанолу. Вихід складає 60%. Сольват одерартритного характеру та переродження суглобів і жаного продукту є продуктом приєднання води. кісткові деформації з'являються частіше у похилоОдержання несольватованого N-гідрокси-4-(3му віці, коли також часто зустрічаються хвороби феніл-5-метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду судинної системи, які можуть сприяти порушенням здійснюють нагріванням сольватованих сполук судинного ложа серця. У такому разі лікування, загальної формули (І), краще нагріванням моногіяке застосовують у зв'язку з проблемами суглобів і драту N-гідрокси-4-(3-феніл-5-метилізоксазол-4кісток, може бути виключно сприятливим, якщо іл)бензолсульфонаміду. Час нагрівання складає воно також поліпшує, по суті, судинне ложе серця. 20-40 хвилин, краще 25 хвилин. У процесі одержання N-гідрокси-4-(3-феніл-5Біологічні випробування метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду виявлеДослідження in vitro но, що властивості сольватованих форм є більш Визначають активність людської рекомбінантсприятливими, ніж властивості аморфних сполук, ної СОХ-2 і овечої СОХ-1 спектрометричним анаоскільки такі форми є кристалічними і з ними легко лізом з TMPD [К. Glerse, D.D. Hauser, D.P. Creely, працювати. Сольвати формули (І) містять 1моль CM. Koboldt, S.H. Rangwala, P.C. Isakson and K. розчинника як сполуки включення (n=1). Сольвати Seibert; Expression and selective inhibition of the можуть містити один моль води, один моль (С1constitutive and inducible forms of human cycloС4)-спирту, один моль (С1-С4)-алкілефіру карбоноoxygenase, Biochem. J., 305:479-484 (1995)]. вої кислоти або один моль діоксану. СполукиПринцип вимірювання сольвати загальної формули (І), де n=1, можуть Активність людської рекомбінантної СОХ-2 і втратити деяку кількість їхніх розчинників в умовах овечої СОХ-1 вимірюють спектрофотометричним одержання або виділення. Несольватована форма аналізом, що базується на окисленні Ν,Ν,Ν',Ν'сполук загальної формули (І) може утворюватись у тетраметил-п-фенілендіаміну (TMPD). Під час відвакуумі при нагріванні. Співвідношення сольватоновлення простагландину G2 (PGG 2) до ендоперованої і несольватованої форм можна регулювати, ксиду простагландину (PGH2) TMDP окислюється змінюючи час нагрівання. до пофарбованого продукту, який можна визначиВихідною речовиною для сполук загальної ти спектрофотометрично при 610нм. формули (І) є 3-феніл-4-(4-хлорсульфонілфеніл)Спосіб 5-метилізоксазол (II). Його одержують з 3,4До 156мкл реакційної суміші (100мМ натрійдифеніл-5-метилізоксазолу (III) взаємодією із хлофосфа тний буфер, pH 6,5, 1мкм гематину, 1мг/мл рсульфоновою кислотою. Одержати сполуку форжелатину) додають 4мкл розчинів інгібіторів різної мули (III) можна згідно зі статтею [P. Bra vo, G. концентрації. Потім додають 20мкл розчину 50 Gaudiano, С. Ticozzi у Chim. Ital., 102,395(1972)]. одиниць ферменту людської рекомбінантної СОХСульфування здійснюють в інертному органіч2 або 20мкл 50 одиниць ферменту овечої СОХ-1 ному розчиннику, краще, у безводному дихлорме(Cayman Chemical, Ann Arbor, USA, кат. №60122 тані, а саме, 3,4-дифеніл-5-метилізоксазол вво/СОХ-2/, кат. №60100 /СОХ-1/). С уміш для інкубації дять у взаємодію з надлишком хлорсульфонової попередньо інкубують впродовж 15 хвилин при кислоти, краще, з п'ятикратним надлишком, при 25°С у спектрофотометрі для читання 96-лункових нагріванні, краще, при температурі кипіння реакпланшетів (Labsystem iEMS Reader MF). Після ційної суміші. цього додають суміш 20мкл 1мМ розчину арахідоСполуку формули (II) можна ввести у поєднової кислоти і 1мМ розчину TMPD. С уміш струнання з гідроксисульфонамідами двома різними шують впродовж 10 секунд, і вимірюють поглинанспособами. ня при 610нм. Результати підсумовано у таблиці 1. За способом а) хлорсульфонільне похідне вводять у взаємодію із гідроксиламіном у суміші 7 83499 8 Таблиця 1 Сполука Людська рекомбінантна СОХ-2 IC50(мкМ)±S.E.M. 1,1±0,3 Сполука прикладу 1 Дослідження in vivo 1. Аналіз набряку ступнів лап у пацюка, викликаного карагінаном Викликають набряк у самців пацюка Wistar (140-150г) підшкірною ін'єкцією карагінану (50мкл 1% суспензії) у праву задню лапу. Запалення, що утворилося, вимірюють плетизмометром (Ugo Basile, тип 7150). Оброблену лапу кладуть у плетизмометр (заповнений 0,5% фізіологічним розчином з 0,3% добавок), і визначають рівень запалення за об'ємом витісненого розчину. Одержаний об'єм порівнюють із початковим об'ємом лапи перед ін'єкцією. інгібуванн запалення(%) = я Овеча СОХ-1 IC50 (мкМ)±S.E.M. 101±12,5 Рівень запалення (мл) = (об'єм після обробки СА (мл)) - (об'єм до обробки СА (мл)). Запалення, викликане в обробленій групі, порівнюють зі станом контрольної групи (яка одержала тільки носій). Матеріали зразків і розчинник дозують перорально крізь шлунковий зонд за 1 годину до обробки СА. Об'єм обробленої кінцівки вимірюють через 3 години і 5 годин після обробки СА. Вимірювання рівня запалення обчислюють таким чином: контрольна група (мл) - обробленагрупа (мл) контрольна група (мл) Проводять перевірку у широкому інтервалі доз вальдекоксибу (0,1-0,3-1,3мг/кг) і сполуки прикладу 1 (n=6-12 тварин на групу). Інгібувальну дію сполук на рівень запалення визначають у % через 4 і 6 годин після обробки, і обчислюють ED50 інгібування запалення. Результати. Інгібувальна дія вальдекоксибу на набряк: через 4 години після обробки ED50=0,2мг/кг, через 6 годин після обробки ED50=0,3мг/кг. Інгібувальна дія сполуки прикладу 1 на набряк: через 4 години після обробки ED50=1,8мг/кг, через 6 годин після обробки ED5o=0,8мг/кг. Інгібувальна дія на набряк обох сполук є суттєвою, як показують результати. Інгібувальна дія вальдекоксибу через 4 години є сильнішою, ніж у сполуки прикладу 1. Однак, профіль дії сполуки прикладу 1 є сприятливішим, оскільки вона є більш ефективною через 6 годин, ніж через 4 години. Результати підсумовано у в таблиці 2. Таблиця 2 Інгібування механічної запальної алодинії у пацюків, викликаної каригінаном Сполуки Час після обробки (години) Вальдекоксиб Сполука прикладу 1 4 6 4 6 0,1 29,4 25,8 Поріг болю у тварин вимірюють приладом фон Фрея (ІІТС, тип 1601С). Поріг подразнення вимірюють за потужністю, яка безперервно зростає, на центральну ділянку підошви. Величини реєструють у моменти відсмикування або під'єму. При кожному вимірюванні поріг визначають принаймні тричі і обчислюють середнє з максимальних значень. Використовують самців пацюків SpragueDawley (масою 250-300г) (n=5-6/групу). У середину знеболювальна дія, % = де tx = 30, 60, 90, 120хв. Інгібувальна дія на набряк, % Дози (мг/кг, р.о.) 0,3 1,0 3,0 34,1 40,1 47,7 27,3 37,8 45,8 19,5 25,2 33,9 17,5 37,2 40,4 ED50, мг/кг 10,0 40,7 59,2 0,2 0,3 1,8 0,8 лапи вводять ін'єкцію 100мкл розчину карагінану (СА) у фізіологічному розчині. Після цього вимірюють поріг подразнення, і завершують обробку за допомогою шлункового зонду перорально. Дію речовин визначають через 30, 60, 90 і 120 хвилин після обробки. Порівнюють дію з картиною в контрольній групі, обробленій носієм (2% розчин твину 80). Дію обчислюють таким чином: поріг обробленої гр . (t x ) - поріг контр. гр. (t x ) поріг обробленої гр . після СА ( t 0 ) - поріг контр. гр . (t x ) На моделі гострого болю знеболювальна дія вальдекоксибу і сполуки прикладу 1 була значною при однократній дозі 30мг/кг, р.о. 9 83499 10 Інгібувальна дія вальдекоксибу є ненабагато різниця є статистично незначущою. Результати вищою (5-10%) за дію сполуки прикладу 1, однак, наведено у таблиці 3. Таблиця 3 Пацюкова модель моноартриту, викликаного карагінаном і каоліном (тест на зниження працездатності (incapacitance)) Сполуки Доза (мг/кг, р.о.) Вальдекоксиб Сполука прикладу 1 30 30 Прилад для визначення зниження працездатності являє собою прилад для вимірювання змін функціональних параметрів, викликаних болем, який може мати місце у задній кінцівці, кількості переміщень і зміни центру ваги. Колінний суглоб задньої правої кінцівки обробляють 100мкл 2% розчину карагінану і каоліном. Впродовж 3-4 годин після обробки в суглобній капсулі обробленої кінцівки розвивається артрит. Таке зниж. працездатності (ІС, %) = Знеболювальні-протизапальні сполуки можуть підвищити поріг подразнення колінного суглоба і, відповідно, поліпшити функціональні параметри реверсія % = 100 , Знеболювальна дія, в %, згодом після р.о. обробки 30хв. 1год. 1,5год. 2год. 69,2 60,0 57,7 47,8 61,6 57,1 44,6 41,5 запалення існує ще через 24 години після обробки. Оскільки через біль тварини доглядають за обробленими кінцівками, навантаження на них зменшується. Зміну маси навантаження можна виміряти приладом для визначення зниження працездатності у грамах. Зниження працездатності обчислюють таким чином: ліва кінцівка(г ) - права кінцівка(г ) ´ 100 ліва кінцівка(г ) + права кінцівка(г ) кінцівки. Міру цього можна розрахувати за зменшенням навантаження на ліву кінцівку, тобто у процентах реверсії. зниж. працездатн , %, лівої кінцівки ості після обробки ´ 100 зниж. працездатн , %, лівої кінцівкидо обробки ості Зниження працездатності, викликане введенням подразників у ліву лапу, вимірюють через 4 години після ін'єкції. Потім тваринам (n=2432/групу) дають перорально дозу, 10мг/кг, вальдекоксибу і випробовуваних сполук. Вимірювання проводять через 1 і 2 години після обробки. Зне болювальна дія обох сполук є суттєвою через 1 годину і підвищується за наступну годину. Дія сполуки прикладу 1 в обох точках є на 20% сильнішою, ніж дія вальдекоксибу. Результати підсумовано у таблиці 4. Таблиця 4 Сполуки Вальдекоксиб Сполука прикладу 1 Доза, мг/кг, р.о. 10 10 Пацюкова модель викликаної карагінаном запалювальної гіпералгезії (метод Randall-Selitto). Викликають набряк ін'єкцією карагінану (СА) у підошву правої задньої лапи. Використовують самців пацюків SPRD (масою 140-190г; n=6-8/групу). Потім алгезиметром (Ugo Basile, тип 37215) визначають механічний больовий поріг запаленої задньої лапи. За такого аналізу контролюють зниження больового порогу і залежність зміни больового відчуття від часу при механічному подразненні. Знеболювальні засоби можуть підвищити больовий поріг запалених кінцівок, і таку дію виражають у проценті реверсії. Необроблену праву задню лапу стискають при тиску, що поступово зростає. Реєструють тиск (у Знеболювальна дія (реверсія, %) після р.о. обробки 1 година 2 години 52,1 62,4 63,2 76,9 грамах), коли тварина вперше дає звуковий сигнал або робить енергійну спробу вийняти лапу. Одержану величину визначають як базову лінію порогу для необробленої лапи (у середньому 80-110г). Після цього тварину обробляють карагінаном. Після обробки перевіряють набряк і поріг у визначені моменти часу. Зменшення набряку, викликаного СА, спостерігають через 3 години після ін'єкції. (Середній больовий поріг, що з'являється при запаленні, становить 20-25г, це означає зниження відносно базової лінії на 65-80%). Модель гострого запалення Через 1 годину після ін'єкції СА (100мкл 2% розчину) тварин обробляють випробовуваними сполуками і вальдекоксибом (10-10мг/кг, р.о.). Змі 11 83499 12 ну порогу визначають через 2 години після ввесполуками і вальдекоксибом (30-30мг/кг, р.о.). Змідення. ну порогу визначають через 1 годину, 2 години і 3 Модель хронічного запалення години після введення лікарського засобу. У разі Хронічну фаз у запалення і зниження порогу обох моделей тваринам, які використовуються як викликають більш високою дозою СА. Зниження контрольні групи, у моменти обробки дають перопорогу, викликане запаленням, вимірюють через рально тільки розчинники. В обох протоколах дію 24 години після ін'єкції СА (150мкл 2% розчину). випробовуваних сполук обчислюють у процентах Після цього тварин обробляють випробовуваними реверсії механічної гіпералгезії. реверсія , % = сер . оброб. гр.ТХ час (г ) - сер . контр. гр .ТЗ час / Т 24 час ( г ) ´ 100 баз. лінія контр . гр .Т 0 час (г ) - сер . контр. гр .ТЗ час / Т 24 час (г ) Т3год: на моделі гострого запалення поріг у контрольній групі через 3 години після ін'єкції СА (у грамах); Т24г од: на моделі хронічного запалення поріг у контрольній групі через 24 години після ін'єкції СА (у грамах); Т0год: поріг до ін'єкції СА (у грамах); ТХгод: на моделі гострого запалення поріг через 3 години після ін'єкції СА; ТХчас : на моделі хронічного запалення поріг через 25год., 26год., 27год. після ін'єкції CA. Вальдекоксиб і випробовувані сполуки мають суттєву дію проти гіпералгезії на моделях гострого і хронічного запалення. На моделі хронічного запалення у всіх трьох точках вимірювання сполука прикладу 1 є ефективнішою, ніж вальдекоксиб. Результати, одержані на моделях гострого і хронічного запалення, підсумовано у таблицях 5 і 6, відповідно. Таблиця 5 Модель гострого запалення Вальдекоксиб Сполука Прикладу 1 Доза (мг/кг, р.о.) 10 10 Знеболювальна дія, у %, згодом після р.о. обробки 2 години 3 години 4 години 50,5 59,9 33,2 64,6 40,7 12,3 Таблиця 6 Модель хронічного запалення Вальдекоксиб Сполука Прикладу 1 Доза (мг/кг, р.о.) 30 30 Кардіотонічна дія на ізольоване серце кролика Використовують новозеландських білих кроликів масою 1,5-2кг. Тварин знекровлюють, і після торакотомії висікають серця і готують для апарату для штучного кровообігу типу апарату Лангендорфа. Серця перфуз ують крізь аорту оксигенованим термостатованим (37°С) розчином Кребса. Застосовують постійний тиск перфузії 80см Н2О (~7,85кПа). Випробовувані сполуки розчиняють у розчині для перфузії, і одержують потрібні концентрації. Визначають базову величину коронарного потоку. Потім у рідину для перфузії додають невелику кількість сполуки, і вимірюють перфузію впродовж 30 хвилин кожні 10 хвилин. Через 30 хвилин здійснюють перфузію без сполуки, і повторюють вимірювання із середовищем і з великою кількістю сполуки. Знеболювальна дія, у %, згодом після р.о. обробки 1 година 2 години 3 години 24,2 36,9 19,9 57,8 63,9 42,0 Дію одних і тих самих концентрацій вальдекоксибу і сполуки прикладу 1 досліджують на 4-4 серцях (1, 3 і 10мкМ). Вальдекоксиб не має дії за будь-якої концентрації. Сполука прикладу 1 має позитивну дію, і результати підсумовано у таблиці 7. Ясно видно, що коронарний потік зростає залежно від дози. Така дія є сприятливою у практиці при клінічному лікуванні, оскільки болі артритного характеру та переродження суглобів і кісткові деформації з'являються частіше у похилому віці, коли також часто зустрічаються хвороби судинної системи, які можуть сприяти порушенням судинного ложа серця. У такому випадку лікування, яке застосовують у зв'язку з проблемами суглобів і кісток, може бути виключно сприятливим, якщо воно також поліпшує, по суті, судинне ложе серця. 13 83499 14 Таблиця 7 Час обробки (хвилини) Базова 10% зміна 20% зміна 30% зміна 1 34,3±4,4 40,0±3,3 16,6 39,0±3,0 13,7 37,5±2,4 9,3 Результати біологічних досліджень показують таке: - сполуки загальної формули (І) мають істотну селективність відносно ферменту СОХ-2, на підставі досліджень in vitro, - дія сполук загальної формули (І) є сильнішою, ніж дія вальдекоксибу, як показують результати випробувань in vivo, - сполуки загальної формули (І) підвищують коронарний потік. Здійснення цього винаходу продемонстроване у прикладах, наведених далі, але воно ними не обмежується. Дослідження методом ЯМР здійснюють на спектрометрі Varian (300МГц). Дослідження методом РХВД здійснюють на обладнанні MerckHitachi-Lachrom. Приклад 1 Моногідрат N-гідрокси-4-(3-феніл-5метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду А. Суспендують 6,88г (0,099моль) гідрохлориду гідроксиламіну в 50мл діоксану, охолоджують до +10°С, і додають розчин 8,1г (0,099моль) ацетату натрію в 25мл води. Додають впродовж 30 хвилин розчин 11г (0,033моль) 3-феніл-4-(4хлорсуль фонілфеніл)-5-метилізоксазолу в 50мл діоксану. Суміш перемішують впродовж 30 хвилин, додають її до 500мл води, і суспензію струшують впродовж 2 годин. Сирий продукт реакції розчиняють в етилацетаті (200мл), і розчин екстрагують 5% водним розчином динатрієвої солі етилендіамінтетраоцтової кислоти (40мл), потім водою (40мл) і, на завершення, розсолом (20мл). Розчин випарюють у вакуумі. Залишок розчиняють в етанолі (90мл), розчин знебарвлюють активованим вугіллям (1г), фільтрують, і до розчину при 60°С додають воду (270мл), яка містить аскорбінову кислоту (3г). Розчин охолоджують (+5°С), продукт, що випав в осад, відфільтровують, промивають водою і сушать, і одержують названу в заголовку сполуку (7,8г; 68%; т.пл. 95-110°С). 1Н ЯМР (ДМСОd6 , 30°С, dтмс 0,00 м.д.): 2,49 с (3Н); 7,337,52м (7Н); 8,82-7,88м (2Н); 9,67 с (2Н). Чистота 99,9%, РХВД. В. У 65мл етилацетату розчиняють 5,4г (0,016моль) 3-феніл-4-(4-хлорсульфонілфеніл)-5метилізоксазолу. Додають 2,3мл (0,035моль) 50% водного розчину гідроксиламіну і 0,3г гідросульфату те трабутиламонію у воді (65мл). Реакційну суміш перемішують при кімнатній температурі впро Концентрація, мкМ 3 30,0±3,2 37,3±2,3 24,3 37,5±1,7 25,0 38,8±1,3 26,0 10 28,0±1,4 45,8±2,5 63,6 48,3±4,8 72,5 49,0±4,8 75,0 довж 8-20 годин. До реакційної суміші додають етилацетат (150мл) і воду (150мл). Органічну фазу відокремлюють і сушать над сульфатом натрію, і потім розчин випарюють при зниженому тиску. Залишок (4,9г) розчиняють у 70мл етанолу, і, після знебарвлювання активованим вугіллям, розчин фільтрують. До розчину додають воду (210мл), і кристалічний продукт відфільтровують, промивають водою і сушать. Ви хід 3,0г (54%). Приклад 2 Моносольват N-гідрокси-4-(3-феніл-5метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду з етилацетатом Суспендують 6,88г (0,099моль) гідрохлориду гідроксиламіну в 50мл діоксану, охолоджують до +10°С, і додають розчин 8,1г (0,099моль) ацетату натрію в 25мл води. Додають впродовж 30 хвилин розчин 11г (0,033моль) 3-феніл-4-(4хлорсуль фонілфеніл)-5-метилізоксазолу в 50мл діоксану. Суміш перемішують впродовж 30 хвилин, додають її до 600мл води, і суспензію струшують впродовж 2 годин. Суспензію фільтрують і промивають 2 рази 100мл води. Речовину, що випала в осад, розчиняють у 300мл етилацетату, і розчин екстрагують три рази 50мл води. Органічний розчин осушують 5г безводного сульфату магнію. Після відфільтровування сульфату магнію розчин випарюють при зниженому тиску (40мбар (100Па)) до 80мл, в той час як продукт кристалізується. Одержану суспензію перемішують впродовж 2 годин при -5°С і промивають 10мл холодного (10°С) етилацетату. Після сушіння одержують 8,5г (60%) названої в заголовку сполуки (т.пл. 96100°С, розклад при 108°С). Чистота 99,9%, РХВД. Приклад 3 Моносольват N-гідрокси-4-(3-феніл-5метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду з 2пропанолом Розчиняють 4г моносольвату N-гідрокси-4-(3феніл-5-метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду з етилацетатом у 20мл 2-пропанолу при 45°С. Нагрівання припиняють, і названа в заголовку сполука випадає в осад. Суспензію перемішують впродовж 2 годин при 0°С і фільтрують, і одержують названу в заголовку сполуку (3,6г; 96%; т.пл. 100118°С, розклад при 123°С). Приклад 4 Моносольват N-гідрокси-4-(3-феніл-5метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду з діоксаном Розчиняють 100мг сполуки, названої в заголовку прикладу 3, у 10мл діоксану, нагрівають до 15 83499 16 40°С, і додають краплями 10мл води. Продукт виКомпоненти гомогенізують, і наповнюють ними падає в осад у кристалічній формі при 20°С. Сукапсулу. спензію перемішують впродовж 2 годин, фільтруРентгенографічні дослідження ють, і сушать продукт при 25°С. Вихід складає Дослідження методом дифракції рентгенівсь100мг (83%); т.пл. 148-153°С. ких променів здійснюють на дифрактометрі EnrafПриклад 5 Nonius CAD4. Одержання 3-феніл-4-(4Здатністю N-гідрокси-4-(3-феніл-5хлорсуль фонілфеніл)-5-метилізоксазолу (II) метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду є те, що Розчиняють 6,65г (0,1моль) хлорсульфонової він може утворювати сте хіометричні твердофазні кислоти в 50мл безводного дихлорметану. Розчин асоціати з різними розчинниками. Краще за все охолоджують до 0°С, і додають розчин 4,7г про таку властивість говорять кристалографічні (0,02моль) 3,4-дифеніл-5-метилізоксазолу в 20мл дані. Іншою важливою характеристикою є те, що в безводного дихлорметану. Реакційну суміш переусі х випадках N-гідрокси-4-(3-феніл-5мішують впродовж 2 годин при кімнатній темпераметилізоксазол-4-іл)бензолсульфонамід як молетурі і ще 10 годин при температурі кипіння. Розкула-хазяїн зв'язується з дрібнішими (гостьовими) чинник випарюють, і залишок виливають на 50г молекулами розчинників водневими зв'язками. льоду. Одержану суспензію двічі екстрагують 40мл Наприклад, такі водневі зв'язки характеризуються етилацетату. Об'єднану органічну фазу екстрагукристалічною структурою комплексу з водою, де Ηють 50мл води і сушать над безводним сульфатом зв'язки відображаються переривчастими лініями. магнію. Залишок після фільтрації і випарювання N-гідрокси-4-(3-феніл-5-метилізоксазол-4розчиняють у гарячому циклогексані та охолоджуіл)бензолсульфонамід із включенням води утвоють до +15°С для кристалізації. Продукт, що випав рює безбарвні, призматичні моноклінічні кристали. в осад (4г), відфільтровують і перекристалізують з Просторова група Р2-1/с, параметри решітки при 50мл циклогексану, і одержують названу в заголотемпературі Т=295(2) К: а=7,659(1) Ǻ, b=23,510(1) вку сполуку (II) (3,7г; т.пл. 106-107°С). Ǻ, с=9,148(1) Ǻ, β=95,65(1)°, V=1639,2(3) Ǻ3. ОбчиПриклад 6 слена щільність Dx=1,412Мг/м 3. Атом сірки харакОдержання несольватованого N-гідрокси-4-(3теризується оригозалежними відносними атомнифеніл-5-метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду ми координатами 0,23117(9) 0,27700(2) 0,52759(6) Гріють 21,6мг моногідрату N-гідрокси-4-(3(x; y; z) з помилкою σ (в лапках) в межах статистифеніл-5-метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду, чної значимості 3σ. одержаного за прикладом 1, у вакуумі (20мбар Комплекс, утворений з ізопропанолом у спів(2кПа)) при 95°С до плавлення. Після охолодженвідношенні 2:2 (фігура 2), характеризується такими ня до 25°С утворюється склоподібний продукт, даними: безбарвні, призматичні моноклінічні крисінтервал температури плавлення 83-95°С, розклад тали. Просторова група Р1, параметри решітки при при 150°С. Чистота 99,8% (РХВД). температурі Т=295(2) К: а=8,753(1) Ǻ, b=10,858(1) Приклад 7 Ǻ, с=11,457(1) Ǻ, a=70,47(1)°, β=79,83(1)°, Таблетка, яка містить моногідрат N-гідрокси-4g=83,07(1)°, V=1007,9(2) Ǻ3 . Обчислена щільність (3-феніл-5-метилізоксазол-4Dx=1,287Мг/м 3. Атом сірки характеризується ориіл)бензолсульфонаміду гозалежними відносними атомними координатами Склад 0,27950(4) 0,38112(3) 0,90833(3) (x; y; z) з помил10мг моногідрату N-гідрокси-4-(3-феніл-5кою σ (в лапках) в межах статистичної значимості метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду, 3σ. 2мг стеарату магнію, Інклюзія діоксану (фігура 3) характеризується 4мг кросповідону, такими даними: безбарвні, призматичні монокліні184мг кристалічної мікроцелюлози, чні кристали. Просторова група Р21/с, параметри разом 200мг. решітки при температурі Т=295(2) К: а=11,732(4) Ǻ, Моногідрат N-гідрокси-4-(3-феніл-5b=10,171(7) Ǻ, с=15,383(13) Ǻ, β=95,98(5)°, метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду і решту V=1826(2) Ǻ3. Обчислена щільність Dx=1,362Мг/м 3. компонентів змішують і формують у таблетку преАтом сірки характеризується оригозалежними відсуванням. носними атомними координатами 0,60293(4) Приклад 8 0,31230(5) 0,78848(3) (x; y; z) з помилкою σ (в лапКапсула, яка містить моногідрат N-гідрокси-4ках) в межах статистичної значимості 3σ. (3-феніл-5-метилізоксазол-4Криві порошкової дифракції, обчислені з іл)бензолсульфонаміду параметрів решітки і відносних атомних координат Склад вищевказаних твердих кристалічних комплексів, 10мг моногідрату N-гідрокси-4-(3-феніл-5узгоджуються з одержаними за вимірюваннями. метилізоксазол-4-іл)бензолсульфонаміду, Це означає відповідність кристалів і макроскопіч10мг аскорбінової кислоти. них зразків. 17 83499 18 19 Комп’ютерна в ерстка Л.Литв иненко 83499 Підписне 20 Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601