Застосування молочнокислих бактерій, вибраних з lactobacillus jonsonii cncm 1-1225, lactobacillus paracasei cncm 1-2116 або bifidobacterium cncm 1-2168, для запобігання розвитку перитоніту

1. Застосування молочнокислих бактерій, здатних до адгезії на слизовій кишечнику та до ефек C2 2 (19) 1 3 76104 4 ми ентеробактеріями, що звичайно локалізуються сному механізмі хворого. в кишечнику. Вважається, що причиною СБП, що Актуальною задачею є розробка ефективного розвивається в асцитній рідині, служить бактеріаспособу профілактики та/або лікування місцевих льна транслокація кишкових бактерій в очеревину. інфекцій, зокрема, зв'язаних з перитонітом. ПредГоловна небезпека при перитоніті - це бактеметом даного винаходу і є саме такий засіб. ріальна дисемінація, тобто поширення патогенів В процесі численних експериментальних досчерез кровоносну і лімфатичну системи, що проліджень, результатом яких є даний винахід, переявляється в інфікуванні різних тканин і призводить вірялася гіпотеза про можливий позитивний вплив до загрозливої для життя хворого ситуації. Як тільмолочнокислих бактерій, що локалізуються в кики бактерії попадають в очеревину, відразу ж пошечнику індивідуума, на клітини імунної системи в чинається їх дисемінація. У собак вже через 6 очеревині, переважно, на клітини імунної системи, хвилин після внутрішньочеревної інокуляції бактещо примикають до кишечнику. Встановлено, що ріями аналіз грудної лімфи дав позитивні резульвведення певних молочнокислих бактерій скоротати на присутність бактерій, а через 12 хвилин чує загальну кількість мікроорганізмів відповідно в підвищений рівень бактерій був виявлений у сисасциті й очеревині тварин, хворих перитонітом; це темі кровотоку. свідчить про здатність молочнокислих бактерій, Незважаючи на певні успіхи, досягнуті в діагзокрема, пробіотичних молочнокислих бактерій, ностиці і лікуванні перитоніту, приблизно одна треефективно пригнічувати надмірний бактеріальний тина госпіталізованих із вказаною інфекцією хворіст у кишечнику і поширення патогенів. рих вмирає від шлунково-кишкової кровотечі, Отже, вищевказана проблема може бути випечінкової недостатності чи печінково-ниркового рішена шляхом застосування молочнокислих баксиндрому. терій, здатних до адгезії на слизовій кишечнику і В даний час у медичній практиці для профіладо розмноження на ній, для приготування носія, ктики та/або лікування перитоніту застосовують що приймається усередину з метою профілактики антибіотики, головним чином до хірургічного втрута/або лікування розладів, зв'язаних з перитонічання. Однак цей підхід має той недолік, що мотом. жуть розмножуватися стійкі до антибіотиків бактеПеритоніт може бути спонтанним бактеріальрії - збудники перитоніту. Більш того, оскільки ним перитонітом (СБП), причиною якого є раптова перитоніт можуть викликати як грампозитивні, так і поява потенційних патогенів у черевній порожнині, грамнегативні мікроорганізми, застосування антищо дуже часто супроводжується функціональною біотиків у більшості випадків може бути не ефекпечінковою недостатністю, яка має місце при стативним. нах цирозу. Крім того, перитоніт може бути виклиЛікування антибіотиками не є специфічним і каний вірусом чи бути наслідком діалізу чи хірургіведе до знищення багатьох непатогенних мікроорчного втручання. ганізмів, у тому числі й тих, котрі здатні попереВідповідно до кращого варіанта даного винаджати бактеріальні інфекції, зокрема, у шлунковоходу, молочнокислі бактерії є пробіотичними мокишковому тракті, що основано на антагонізмі баклочнокислими бактеріями, краще, роду терій. Отже, при тривалому лікуванні широким Lactobacillus чи Bifidobacterium, ще краще, спектром антибіотиків ріст більшості бактерій, що Lactobacillus johnsonii CNCM 1-1225, Lactobacillus локалізуються в кишковому тракті, пригнічується, в paracasei CNCM 1-2116 чи Bifidobacterium CNCM результаті чого стійкі до антибіотиків штами пато1-2168. генних мікроорганізмів можуть вільно розмножуваВідповідно до даного винаходу, використовутися. Тобто, антибіотики в деяких випадках можуть вані молочнокислі бактерії вводяться в носій - харсприяти розвитку, а не лікуванню перитоніту. човий чи фармацевтичний продукт, наприклад, Інший підхід до лікування перитоніту описаний молоко, йогурт, сири, ферментовані молочні напої, у WO 97/00081, в якому пропонується використоферментовані продукти на молочній основі, моровувати антагоністи до CD14 (відомий поверхневий зиво, ферментовані продукти на зерновій основі, антиген, взаємодіючий з ліпополісахаридами баксухі порошки на молочній основі, дитячі суміші або теріального походження). Відомо, що вказані ліпопрепарати у формі таблеток, рідких бактеріальних полісахариди здатні стимулювати імунну систему суспензій, сухих чи рідких добавок для орального завдяки своїй здатності зв'язувати поверхневі резастосування, сухого чи рідкого харчування в туцептори тих клітин імунної системи, що починають бах і т.п. продукувати та виділяти цитокіни й інші медіатори, Носій може включати інші компоненти, які чищо стимулюють імунну систему. Однак, як було нять сприятливий вплив при захворюваннях кишевстановлено, вказані цитокіни чи медіатори мочнику, наприклад, антиоксиданти, такі як вітаміни жуть сприяти бактеріальному росту та інвазії бакС чи Е, селен чи цинк. У залежності від способу терій. Отже, суть запропонованого лікування склалікування (власне лікування чи превентивна терадається в перериванні на ранній стадії імунної пія) лікар сам може вибирати найбільш зручну відповідної реакції, на якій продукуються цитокіформу носія з урахуванням стану здоров'я паціни/медіатори. Передбачається, що при пригніченні єнта. продукування цитокінів шляхом блокування активНе посилаючись на теорію, ми вважаємо, що них центрів за допомогою CD14 ріст бактерій таактивність мікроорганізмів обумовлена такими кож пригнічується. Запропонований метод має той двома факторами. недолік, що при його використанні імунна відповіВідомо, що пробіотики мають позитивний дна реакція в більшості випадків також гальмуєтьвплив на імунну систему організму. У даному вися, що негативно позначається на власному захипадку передбачається, що молочнокислі бактерії 5 76104 6 здатні стимулювати імунну систему черевної по(вода плюс молочнокислі бактерії). Лікування пророжнини і, зокрема, неспецифічний імунний захист водилося крізь шлунковий зонд. Лапаротомію вив області кишечнику індивідуума, який протидіє конували під анестезією через 10 днів після відпомікроорганізмам, що проникнули в черевну порожвідного лікування чи без лікування; для нину крізь стінки кишечнику. Цей імунний бар'єр мікробіологічних аналізів брали зразки вмісту слізвичайно ослаблений у хворих цирозом печінки. пої кишки, клубової кишки, стінок клубової кишки, З іншого боку, здається, що молочнокислі бакбрижових лімфатичних вузлів, асцитної і плевратерії, які розмножуються в стінках кишечнику, бульної рідини. Кров на ендотоксемію брали з породуть фізично протидіяти чи, принаймні, знижувати жнистої вени. Для гістологічних досліджень відбизагальну кількість потенційних патогенних мікрооррали зразки стінок клубової кишки, стінок сліпої ганізмів, що інфікують очеревину через кишечник. кишки, селезінки і печінки; тиск у ворітній вені оціЗавдяки адгезії на слизовій кишечнику, молочнонювали як за пункцією ворітної вени, так і за відкислі бактерії, цілком ймовірно, входять у тісний ношенням маси селезінки до маси тварини. контакт із слизовою кишечнику, маскуючи поверхТварин експериментальної групи після розвиневі рецептори кишечнику для патогенів. нення в них асциту (приблизно через 20 тижнів від Активність мікроорганізмів залежить від дози: початку індукування цирозу) і проведення парацечим більше мікроорганізмів вводиться в організм нтезу під анестезією для підтвердження наявності разом із прийнятим усередину харчовим носієм чи асциту розподілили по двох групах: одна група фармацевтичною композицією, тим вище захисна (n=8) одержувала лікування А (вода), інша (n=11) та/або терапевтична активність. Тому використолікування Б (плюс молочнокислі бактерії). Лікуванвувані, згідно з даним винаходом, харчовий носій ня тварини одержували крізь шлунковий зонд. чи фармацевтична композиція можуть містити моПроцедури по закінченні експериментів (після 10 лочнокислі бактерії в кількості від 105 КУО/г до 1012 днів лікування) були ті ж самі, що й у випадку конКУО/г носія. Абревіатура КУО означає "колонієуттрольної групи. ворювальна одиниця", яка виражається в кількості Аналіз на кишкову прохідність шляхом визнабактеріальних клітин, виявлених при підрахунку чення лактулози і маніту в сечі тварин як контропід мікроскопом на агарових пластинках. льної, так і експериментальної (з цирозом) груп Оскільки використовувані мікроорганізми є проводився протягом 24 годин до початку та по безпечними для людини і тварин і були виділені з закінченні лікування. Крім цього, він проводився природного середовища, а саме з фекалій грудних кожні 4 тижня протягом всього періоду індукування дітей, їх можна вводити в носій у великій кількості, цирозу у тварин експериментальної групи, а також для того щоб забезпечити високий рівень засеу контрольній групі. лення ними кишечнику індивідуума. Приклад 2 Приклади, що підтверджують можливість здійНаявність асциту, бактеріальної транслокації і снення винаходу, але не призначені для обмеженбактеріального перитоніту ня винаходу (кращі варіанти втілення). На момент лапаротомії у 7 з 8 пацюків з цироПриклад 1. Експерименти з лікування тварин зом, що одержували лікування з водою (лікування (пацюків) А), та у 7 з 11 пацюків з цирозом, що одержували Експерименти проводили на пацюках-самцях лікування Б, була виявлена асцитна рідина. КульSprague-Dawley. Тваринам експериментальної тури брижових лімфатичних вузлів показали негагрупи (19) щотижня вводили в шлунок крізь шлунтивні результати у всіх 22 контрольних пацюків. ковий зонд чотирихлористий вуглець з метою індуКультури брижових лімфатичних вузлів, асцитної кування в них цирозу і воду з фенобарбіталом рідині і плевральної рідині були також негативними (1,5ммоль/л) ad libitum. Раціон годування був стай у всіх пацюків з цирозом, що одержували лікундартним від фірми В&К (Іспанія) і згодовувався вання Б. З пацюків з цирозом, що одержували вотваринам ad libitum. На протязі всіх експериментів ду, у 5/8 виявлена бактеріальна транслокація (потварини контрольної групи (12) одержували станзитивні культури) у брижові лімфатичні вузли або в дартний раціон (нижче) і воду з фенобарбіталом, у асцитну чи плевральну рідину (р