Протигастритний та/або противиразковий засіб, штам молочнокислих бактерій lactobacillus johnsonii -продуцент протигастритного та/або противиразкового засобу, протигастритна та/або противиразкова композиція

1. Противогастритное и/или противоязвенное средство на основе штамма молочнокислых бактерий Lactobacillus, о тл и ч а ю щ е е с я тем, что оно содержит биомассу молочнокислых бактерий штамма Lactobacillus johnsonii CNCM 1-1225 и/или культуральную жид кость и/или супернатантную фазу, полученные при культивировании указанного штамма и способные вытеснять болезнетворные бактерии Helicobacter pylori из клеток кишечника и/или желудка. 2. Штамм молочнокислых бактерий Lactobacillus johnsonii CNCM 1-1225 - продуцент средства по п.1. 3. Противогастритная и/или противоязвенная композиция, содержащая противогастритное и/или противоязвенное средство на основе штамма молочнокислых бактерий Lactobacillus и фармацевтически приемлемый носитель и/или эксципйент, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что в качестве противогастритного и/или противоязвенного средства она содержит эффективное количество указанного в п.1 средства или штамм L johnsonii CNCM 1-1225. 4. Противогастритная и/или противоязвенная композиция по п.З, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что указанным носителем и/или эксципиентом является фармацевтически приемлемый носитель и/или пищевой продукт, такой как сквашенное молоко, в частности йогурт или порошок на основе молока. ON 00 О Изобретение относится к противогастритному и/или противоязвенному средству и к штамму молочнокислых бактерий, способному производить это средство. Известно, что некоторые штаммы молочнокислых бактерий показывают хоро шее сцепление с клетками кишечника, и за счет этого свойства пригодны для терапевтического применения. Европейский патент ЕР 199535 (Горбах и Гольдин), например, раскрывает штамм молочнокислых бактерий, назван 26487 ный GG по инициалам изобретателей, который зарегистрирован в АТСС (Американская типовая коллекция культур) под номером 53103, который предназначен для назначения людям или животным для т е : 5 рапевтического или профилактического лечения пищеварительного тракта. Данное изобретение предлагает противогастритное и/или противоязвенное средство и штамм молочнокислой бакте- 10 рии, способный производить это средство, которое можно было бы назначать людям или животным для терапевтического или профилактического лечения желудка, и в частности, привратника желуд- 15 ка (пилорус). Данное изобретение относится к противогастритному и/или противоязвенному средству, которое способно вытеснять болезнетворные бактерии из клеток ки- 20 шечника и/или желудка, к биологически чистой культуре штамма молочнокислой, бактерии, выбранной за способность производить это средство, и к композиции, содержащей с одной стороны эффек- 25 тивное количество средства, или упомянутой культуры, а с другой стороны съедобный носитель, конкретнее фармацевтически приемлемый носитель и/или пищевой продукт, такой, как кислое мо- 30 локо, конкретнее, йогурт или порошок на основе молока. Оказалось, что некоторые штаммы молочнокислых бактерий могут вытеснять болезнетворные бактерии, например, такие, 35 как Helicobacter(H.)pylori из клеток кишечника, к которым они прилипают. Также оказалось, что эти штаммы имеют способность производить средство, имеющее такую способность вытеснения и, прежде 40 всего, производить его в среде культуры штамма. Соответственно, средство, штамма и композиция по изобретению конкретнее предназначены для назначения людям или 45 животным для терапевтического или профилактического лечения желудка, в частности, для лечения гастритов или язв желудка или привратника желудка. Один из различных штаммов, выбранных по дан- 50 ному изобретению, был зарегистрирован по Будапештскому договору 30.6.92 в Национальной коллекции микроорганизмов (CNCM) в Пастеровском институте, 28 рю дю д-р Ру, 75724 Париж Седекс 15, Фран- 55 ция, где ему был присвоен номер CNCM 1-1225. Подробности морфологии и общие свойства этого штамма приведены ниже. Морфология. Грам-положительный микроорганизм, немотильный, необразующий спор; довольно короткие и толстые палочки. Метаболизм. - Микроаэрофильный микроорганизм с гомоферментативным метаболизмом, вызывающим производство молочной кислоты Ц + ) и D(-). - Другие характеристики: каталаза (-), производство СО 2 (-) гидролиз аргинина (-). Ферментация Сахаров. Амигдалин (+), арабиноза (-), целлобиоза (+), эскулин (+), фруктоза (+), галактоза (-), глюкоза (+), лактоза (+), мальтоза (+)-), маннитол (-), манноза (+), мелибиоза (-), раффиноза {+), рибоза (-), салицин (+), сахароза (+), трегалоза (+). Конкретные свойства, за которые данный штамм может быть выбран приводятся ниже. Прилипание. Прилипание к клеткам желудка может сравниваться с прилипанием к клеткам кишечника, при условии, что рецептары, узнаваемые микроорганизмом на двух типах клеток, подобны друг другу, и микроорганизмы показывают сильную способность прилипания к этим двум типам клеток. Некоторые болезнетворные микроорганизмы, такие, как Helicobater pylori обладают этим свойством. Известно, в частности, что Helicobater pylori способны приставать к клеткам кишечника человека, полученным из раковых опухолей, аденокарциномы, например, к клеткам НТ29 (Пинто и др. Биол. Цилл. 55, 1982, 193-196) в монослойной культуре in vitro. Для этого, клетки НТ29 культивируются при 37°С в минимальной необходимой среде Eagle, модифицированной Дульбекко (DMEM), содержащей 10% галактозы и диализованную телячью плазму в атмосфере 10% СО2 и 9 0 % воздуха, и используются до прохождения 20-того деления. Культивирование проводится на обезжиренных стеклышках, разложенных в 24 чашках. Н.pylori культивируется на пластинках Мюллера-Хинтона, на 10-процентной овечьей крови в течение 72 часов при 37°С в атмосфере 5% О2, 10% СО 2 и 8 5 % азота. С пластинок соскребают и собирают бактерии и затем промывают в физиологическом растворе. Н.pylori вводится в культуру клеток НТ29 в количестве 10 6 живых микроорганизмов или клеток (cfu) на кв.см. Все вместе подвергают инкубации в тече 26487 ниє 2 часов при 37°С и монослои промывают три раза. Количество клеток H.pylori прилипших к клеткам НТ29, определяют тестом на уреазу (тест Ятрокс-Эйч пи), принцип которого состоит в том, что водный раствор мочевины и фенола изменяет цвет от желтого до розового цвета фуксии в присутствии уреазы, которая катаболизирует производство основных продуктов метаболизма мочевины, аммиака и бикарбоната. Интенсивность реакции считывают со спектрофотометра по излучению с волной 550 нм. Этот тест линеен для величин Ю4-1& (сти)/мл. Вытеснение. Для определения способности штамма, культуры, средства или композиции по изобретению вытеснять болезнетворные бактерии, можно например, рассмотреть степень вытеснения бактерий H.pylori прилипших к клеткам НТ29. Для этого раствор или суспензию молочнокислой бактерии, подлежащей выбору, или средства, которое нужно испытать, можно добавить к клеткам НТ29, к которым прилипли клетки H.pylori после чего все вместе подвергают инкубации в течение 1 часа и несколько раз промывают, а затем проводят текст на уреазу. 5 10 15 20 25 30 Если, например, таким образом добавить культуру штамма Lacidophilus CNCM 1-1225 с его средой культивирования (MRS или молоко), разведенные на 5 0 % DMEM, в количестве 10 7 cfu на кв. см, то получается, что из 2 • 10 6 cfu приставших клеток H.pylori насчитывавшихся на кв.см при отсутствии конкурирующих бактерий, остается только 6* 10 3 си эф ю/кв.см после инкубации в течение 1 часа вместе с штаммом Lacidophilus CNCM 1-1225. Это показывает преимущество, которое такой штамм может иметь при лечении гастритов или язв желудка или пилорума. Подобным же образом, если добавить супернатантную фазу этой культуры Lacidophilus к клеткам НТ29, к которым прилипли клетки H.pylori, также наблюдается значительное вытеснение клеток H.pylori. Это показывает, что некоторые штаммы молочнокислых бактерий, в данном случае штамм L.acidophilus CNCM 1 1225, способны выделять секрет, являющийся противогастритным и/или противоязвенным средством в их среде культивирования. Соответственно, супернатантная фаза и средство, полученное из нее, могут сами быть весьма ценными при лечении гастритов или язв желудка или привратника желудка. Упорядник Техред М. Келемеш Коректор М. Куль Замовлення 512 Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, КиІв-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101