Спосіб визначення ароматичних альдегідів в коньяках та коньячних спиртах

Спосіб визначення ароматичних альдегідів в коньяках та коньячних спиртах, який включає підготовку проби, її дослідження та оцінку результатів, який відрізняється тим, що виявлені за допомогою лужного буферного розчину, який являє собою розчин тетраборату натрію з рН=9,09,6, альдегіди надходять до фотометричного детектора, та кількість виявленого альдегіду в пробі визначають шляхом вимірювання розміру площі піків кожного з компонентів та зіставляють їх з калібрувальним графіком. (19) (21) u200800453 (22) 14.01.2008 (24) 26.05.2008 (46) 26.05.2008, Бюл.№ 10, 2008 р. (72) МАРКІНА МАРИНА ВОЛОДИМИРІВНА, UA, КАЧАНОВ СЕРГІЙ ОЛЕКСАНДРОВИЧ, UA, ВЯТКІН ОЛЕКСАНДР КОСТЯНТИНОВИЧ, UA, ПРИХОДА НАТАЛЬЯ ІВАНІВНА, UA, БІЛОНОЖКО МАКСИМ ВАСИЛЬОВИЧ, UA (73) ДЕРЖАВНЕ ПІДПРИЄМСТВО "ДНІПРОПЕТРОВСЬКИЙ РЕГІОНАЛЬНИЙ ДЕРЖАВНИЙ НАУКОВО-ТЕХНІЧНИЙ ЦЕНТР СТАНДАРТИЗАЦІЇ, МЕТРОЛОГІЇ ТА СЕРТИФІКАЦІЇ", UA 3 центрифугування - зі швидкістю 2000-6000об/хв протягом 2-6хв., між поляризованими пробами та іншими буферними розчинами розміщують капілярну трубку, з можливістю підтримки тиску 30мБар на протязі 10сек. в її порожнині, та впритул до капілярної трубки встановлюють аналізатор, а сканування оптичних щільностей поляризованих проб здійснюють під час міграції останніх крізь капілярну трубку, що для ідентифікації термінів виходу та амплітуд сигналів евгенолу, фурфуролу, ароматичних альдегідів та маскуючих домішок перший буферний розчин формують з борної кислоти, тетраборату натрію та води дистильованої, взятих у співвідношенні 5,5:6,5:38,0 (см3). Сканування оптичної щільності поляризованих проб в режимі капілярного електрофорезу позбавляє необхідності використання зайвих домішок у вмісті проби, що майже на 100% піднімає ступінь екстракції присутніх фракцій і чутливість їхньої ідентифікації. Перетворення результатів сканування в аналогово - цифровий сигнал засвідчує детальну графологічну картину поточної проби, і дозволяє виявити не тільки присутність найбільш характерних ідентифікаторів, але й штучні домішки, які не передбачені в стандартному вмісті коньяку. Отримання електрофореграми, як своєрідного відбитку вмісту коньяку у вигляді зображення, надає змогу візуалізувати форми, послідовність, амплітуди сигналів і терміни виходів кожного з інгредієнтів вмісту, аналізувати їх за допомогою графологічних чи обчислювальних методик, без необхідності трансформування якості через показник витримки продукту. Додаткова ідентифікація амплітуд сигналів евгенолу, фурфуролу, ароматичних альдегідів, наприклад бузкового та коніферилового ванілінів, обов'язкових маскуючих і штучних домішок, що знаходяться та обізнаються по термінам виходу на електрофореграмі при більш високій чутливості аналізатора, відбиває стан автентичної якості чи підробки проби. Безпосереднє апелювання не тільки до цих критеріїв якості, але й до штучних домішок при візуалізації результатів ідентифікації інформує про ефективне використання показників. Виготовлення буферних розчинів дозволяє отримати та підготовити форетичне середовище для відтворення процесу, забезпечує поляризацію проби, виділення фракцій, їх міграцію та виявлення кількісного вмісту. Центрифугування проби переслідує ціль її дегазації для безперешкодного потрапляння її в порожнину капілярної трубки та подальшого переміщення. При швидкості центрифугування меншій за 2000об/хв дегазація аналізату неефективна, а при швидкості понад 6000об/хв - пробірка Еппендорфа часто не витримує зусилля центробіжних навантажень. Центрифугування протягом менше ніж 2 хвилини стає чинником малої дегазації, а використання більш тривалого часу, наприклад понад 6 хвилин - недоцільно технологічно та вважається межею досягнення ефекту. Змішування проб з першими буферами передбачає поляризацію фракцій коньяку для виділення на електричному рівні та подальшого 32681 4 розпізнання при скануванні. Розміщення капілярної трубки між поляризованими пробами та другими буферними розчинами відтворює капілярний електрофорез, сприяє переміщенню виділених фракцій для остаточної ідентифікації та розпізнання. Підтримка тиску в капілярній трубці на рівні 30мБар при експозиції 10 секунд дозволяє виділеним фракціям потрапити до порожнини капіляру. Відхилення від цього технологічного режиму недоцільно, бо при зменшенні експозиції підтримки тиску в капілярі можливі перешкоди потрапляння аналізату в порожнину крізь замалий перетин капіляру, а при збільшенні - відбувається спотворення результатів сканування, порушення швидкості руху в останній. Для аналізу термінів виходу та амплітуд сигналів нейтральних молекул евгенолу, фурфуролу та ароматичних альдегідів і маскуючих домішок перший буферний розчин містить борну кислоту, тетраборат натрію та воду дистильовану. Значущість складу буфера пов'язується з ефективністю поляризації вмісту проби, чутливістю ідентифікації вмісту, регуляцією зв'язків із зарядженими міцелами додецилсульфату натрію в електролітичному середовищі є критичним до активності його міцел, а завищення - до виснаження електролітичного носія при використанні.дозволяє визначити вище Описаний спосіб означені компоненти в коньяку тільки якісно, і не дає можливості їх чітко ідентифікувати (Фіг.1). В основу корисної моделі поставлена задача розробити спосіб кількісного одночасного визначення ароматичних альдегідів (ваніліну, бузкового, коніферилового та сінапового) як об'єктивних маркерів оцінки якості у коньяках та коньячних спиртах за короткий проміжок часу без додаткової обробки аналізуємих зразків з високою відтворюваністю аналізуємих сполук (Фіг.2). Означений вище технічний результат досягається тим, що в способі визначення ароматичних альдегідів в коньяках та коньячних спиртах за допомогою капілярного електрофорезу, при якому розділення та міграція елементів проби відбувається під впливом електричного поля, а реєстрація результатів дослідження відбувається на електрофореграмі. Визначення складається з наступних етапів: підготовки проби, центрифугування в технологічно прийнятому режимі, ідентифікації ароматичних альдегідів на заданій довжині хвилі аналізатора, якісно кількісний аналіз в режимі капілярного електрофорезу (сканують оптичну щільність поляризованих проб, перетворюють їх в аналогово - цифровий сигнал, отримують електрофореграми, по яких додатково ідентифікують концентрації ароматичних альдегідів (Фіг.3) при відповідній полярності потенціалів джерела живлення, а якісно - кількісне визначення проводили методом зовнішнього стандарту за допомогою градуювальних графіків, побудованих для кожного альдегіду окремо). Поляризацію проб здійснюють буферними розчинами, а центрифугування - зі швидкістю 5000об/хв протягом 5 хвилин, між поляризованими пробами та буферними розчинами розміщують капілярну трубку, з 5 можливістю підтримки тиску 30мБар протягом 10сек. в її порожнині, та впритул до капілярної трубки встановлюють аналізатор, а сканування оптичних щільностей поляризованих проб здійснюють під час міграції останніх крізь капілярну трубку. В заявленому способі описується метод кількісного визначення ароматичних альдегідів в коньяку та коньячному спирті за допомогою системи капілярного електрофорезу з УФ детектуванням при довжині хвилі 254нм без додаткової обробки зразків. Слід зазначити, що тривалість одного визначення не перевищує 20 хвилин. При кількісному визначенні використовували метод зовнішнього стандарту. Були використані система капілярного електрофорезу "Капель 103Р", м. Санкт Петербург фірми "Люмэкс" та система обробки даних "Мультихром для Windows". електрофорезу При проведенні використовували буфер - тетраборат натрію з рН =9,0-9,6. Концентрацію буферу слід вважати оптимальною, бо виключно при таких даних можливо максимізувати шукану поляризацію ідентифікаторів коньяку та електролітичний баланс, (Фіг.1, 2) капіляр промивали протягом 3 Для підготовки хвилин розчином гідроксиду натрію з молярною концентрацією 0,5моль/дм3; водою дистильованою 3 хвилини та буферним розчином також 3 хвилини. Пробу вводили під тиском 30мбар, час вводу - 10 секунд (ефективна довжина капіляру 50см). візуалізації електрофореграми (Фіг.1, 2, При 4), як таких, що відбивають стан органічного вмісту 32681 6 зразкової та поточної проб очевидна наявність підробки. Про це свідчать різниця загальних профілів, розбіг термінів виходу та амплітуд сигналів евгенолу, фурфуролу, ароматичних альдегідів і маскуючих домішок, наявність замаскованих речовин фальсифікаторів, використаних у замалих концентраціях. Отже, завдяки одночасному кількісному визначенню ароматичних альдегідів - поширенню кількості оціночних критеріїв, переважно за рахунок їх додаткової оцінки і покращенню інтерпретації результатів ідентифікації вмісту, доведена можливість покращення об'єктивності оцінки якості коньяку та вірогідності виявлення підробки. Заявлений спосіб визначення ароматичних альдегідів в коньяках та коньячних спиртах за допомогою капілярного електрофорезу виконай в умовах лабораторії випробувального та науково дослідного центру ДП "Дніпростандартметрологія". Спосіб може бути використаний в умовах звичайної лабораторії або іншого приміщення при кімнатній температурі, звичайному атмосферному тиску та вологості. Спосіб забезпечує високу точність дослідження, метод простий у використанні. Результати кількісного визначення ваніліну, коніферилового, сінапового та бузкового альдегідів у коньяку можна використовувати при стандартизації коньяку для кількісної оцінки його смакових якостей, а також для виявлення підробних коньяків, в яких, як правило, відсутні бузковий, сінаповий та коніфериловий альдегіди. 7 Комп’ютерна верстка І.Скворцова 32681 8 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 9 32681 10