Спосіб визначення хлорамфеніколу в необроблених харчових продуктах тваринного походження за допомогою рх/мс/мс

Реферат: Спосіб визначення залишкових кількостей хлорамфеніколу у продукції тваринного походження, 3 3 в якому для дослідження беруть 2 г (2 см ) підготовленого зразка, додають 1 см деіонізованої води (окрім молока), екстрагують за допомогою етилацетату, центрифугують, очищують за допомогою методу рідина-рідина, центрифугують і відбирають нижню водну фазу у віалку для аналізу. UA 92149 U (54) СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ ХЛОРАМФЕНІКОЛУ В НЕОБРОБЛЕНИХ ХАРЧОВИХ ПРОДУКТАХ ТВАРИННОГО ПОХОДЖЕННЯ ЗА ДОПОМОГОЮ РХ/МС/МС UA 92149 U UA 92149 U 5 10 15 20 Корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема до біохімії та токсикології, і може бути використана в роботі науково-виробничих лабораторій. Спосіб не має зареєстрованих аналогів в Україні. В основу корисної моделі поставлена задача розробки універсального та швидкого способу виявлення залишкових кількостей хлорамфеніколу у продукції тваринного походження, суттєве скорочення часу на пробопідготовку, зменшення витрат реактивів, посуду, зниження собівартості способу. Процедурний підхід до ідентифікації хлорамфеніколу удосконаленим нами способом 3 включає наступні елементи: для аналізу беруть 2 г ± 0,05 (2 см ) підготовленого, 3 гомогенізованого зразка в центрифужну пробірку, додають 1 см деіонізованої води (окрім 3 молока), додають до нього 6 см етилацетату та екстрагують 10 хв. при 100 об/хв. на роторному 3 змішувачі, центрифугують 5 хв. при 14000g при температурі 4 °C, переносять 5 см екстракту 3 етилацетату в чисту центрифужну пробірку на 15 см та випарюють екстракт під потоком азоту 3 3 при 40 °C до сухого залишку, сухий залишок розчиняють в 1 см ізооктану, додають 1 см деіонізованої води та повільно перемішують, центрифугують 5 хв. при швидкості 3500 об/хв. при 4 °C, переносять нижню водну фазу у віалку для аналізу [1]. Конфігурація рідинного хроматографа з тандемним мас-детектором "VARIAN 1200": градієнтний насос або два ізократичних, автосамплер, термостат колонок, тандемний квадрупольний мас-спектрометр / ESI готують згідно з інструкцією з експлуатації приладу та задають робочі параметри. Конфігурація та режим роботи: Хроматограф: Колонка Температура термостата колонки Об'єм інжекції (петлі) Режим введення проби Витрата рухливої фази (елюенту) Градієнт (рухома фаза) м "VARIAN С18 , 020*020 мм 30 °С 3 100 мм автоматичний 3 0,3 см /хв деіонізована вода (А): метанол (В) Таблиця 1 Співвідношення градієнтів: Час 0,00 хв. 0,50 хв. 0,51 хв. 2,49 хв. 2,50 хв. 3,10 хв. Деіонізована вода, % 90 90 10 10 90 90 Тандемний квадрупольний мас-спектрометр: Drying gas temperature Drying gas pressure Ion Source Polarity CID gas pressure (argon) Precursors Ions Q1 Products Ions Q3 25 30 Метанол, % 10 10 90 90 10 10 + 400 °C 18 psi ESI negative 2 mTorr 321 (CAP) 152, 257 (CAP) Час виходу хлорамфеніколу залежить від швидкості потоку, витрати елюенту, типу аналітичної колонки. Умови виконання вимірювань підлягають перевірці і, при потребі, корегуванню: - при переході на інший хроматограф; - при заміні колонок; - після ремонту вузлів хроматографа, що впливають на чутливість детектора. Хроматограф градуюють по градуювальних розчинах хлорамфеніколу. З метою удосконалення способу виявлення залишкових кількостей хлорамфеніколу в продукції тваринного походження нами використано декілька чинних способів запозичених в 1 UA 92149 U 5 країнах Европейського Союзу, які мають ряд недоліків, пов'язаних з тривалістю досліджень, процедурами виконання. Отже, порівнюючи різні способи, розроблені в Державному науково-дослідному інституті з лабораторної діагностики і ветеринарно-санітарної експертизи (ДНДІЛДВСЕ), в Національному діагностичному центрі (м. Рига) та в Національній ветеринарній лабораторії (м. Вільнюс) [2, 3, 4] Таблиця 2 Результати порівняльного аналізу способів виявлення хлорамфеніколу № п/п Характеристики ДНДІ ЛДВСЕ Varian, Waters Литва, м. Вільнюс Латвія, м. Рига Кількість етапів пробопідготовки Витрати часу на пробопідготовку, год. Тривалість аналізу на приладі, хв. 10 7/16 17 1,5-2 1,5-4,5 3,5-4 3,1-5 12 15 4 Тип аналітичної колонки Polaris 3 С18-А 20×2.0 mm С18 Symmetry shield column 100 mm×2.1 mm, 3.5m particle size Phenomenex Luna С18(2) 2×100 mm, 3 т 5 Чутливість способу, мкг/кг